l'expression génique différentielle dans le fundus gastrique murine manque cellules interstitielles de l'expression du gène Cajal

différentiel dans le fundus gastrique murine manque cellules interstitielles de Résumé
Contexte Cajal
Les couches musculaires de fundus gastrique murine ont pas de cellules interstitielles de Cajal au niveau du plexus myentérique et ne possèdent que des cellules interstitielles par voie intramusculaire et ce tissu ne génère pas des ondes lentes électriques. L'absence de cellules interstitielles intramusculaires en W /W
mutants V de fournit une occasion unique d'étudier les changements moléculaires qui sont associés à la perte de ces cellules intercalation. Méthode de
Le gène profil d'expression du fundus gastrique de type sauvage et W /W
la souris V a été testée par l'analyse des microréseaux murin affichant un total de 8734 éléments. gènes requêtés de l'analyse des microréseaux ont été confirmées par une réaction semi-quantitative inverse chaîne transcription-polymerase.: Résultats
Vingt et un des gènes ont été exprimés de manière différentielle dans le type sauvage et W W
V
/les souris. Onze transcriptions ont 2,0-2,5 fois supérieure à l'expression de l'ARNm dans
W V
fundus W /gastrique par rapport aux tissus de type sauvage. Dix transcriptions avaient 2/1 à 3/9 fois plus faible expression en W /W
mutants V en comparaison avec des animaux de type sauvage. Aucun de ces gènes ont déjà été impliqués dans une fonction intestinale de la motilité. Conclusions de
Ces données fournissent des preuves que plusieurs gènes importants ont changé de manière significative dans le fundus murin de W W
V
/mutants qui manquent cellules interstitielles intramusculaires de Cajal et ont réduit entérique neurotransmission du moteur.
fond de cellules interstitielles de Cajal (ICC) sont gastro-intestinaux (GI) cellules pacemaker et intermédiaires dans entérique neurotransmission moteur dans le tractus gastro-intestinal [1, 2 ]. ICC express KIT
/c-kit
et dépendent de la signalisation via la protéine produit du gène, KIT, une tyrosine kinase du récepteur qui est essentiel pour le développement et le maintien du phénotype de la CPI [3]. Des mutations dans le locus
blanc-spotting (à savoir W /W
V
) conduisent à une réduction KIT expression. Ces animaux mutants développent quelques ICC au niveau du plexus myentérique (IC-MY) dans le petit intestin et les chiffres de la CPI réduction est associée à une perte d'activité à ondes lentes. ICC intramusculaires (IC-IM) situé dans l'estomac, de l'œsophage inférieur et sphincters pylorique sont absents dans W
V
animaux mutants W /[4]. Réduction du nombre ICC ont également été signalés dans plusieurs troubles de la motilité gastro-intestinal, tels que la pseudo-obstruction intestinale chronique [5, 6], infantile sténose hypertrophique du pylore [7-9], la maladie de Hirschsprung [10-12], lent transit constipation et certaines formes de gastroparésie [13, 14].
l'association entre les troubles de la motilité et la perte de populations spécifiques de la CCI suggère qu'une compréhension plus complète de la biologie moléculaire et cellulaire des réseaux de la CPI dans le tractus gastro-intestinal peut aider à comprendre l'étiologie de certaines pathologies motrices gastro-intestinal. Le but de la présente étude était de caractériser les séquences génétiques qui sont exprimées dans la CCI de l'estomac qui peut coder pour des éléments fonctionnels importants du système de neurotransmission GI stimulateur /moteur. Nous avons poursuivi l'hypothèse que ces gènes pourraient montrer l'expression différentielle dans les petits intestins des souris de type sauvage et W /W
Les souris V de [15, 16]. Nous avons déjà identifié quinze gènes connus et nouveaux qui ont été exprimés de manière différentielle dans les petits intestins de type sauvage et W /W
V de les souris qui développent quelques IC-MY en utilisant une méthode d'expression différentielle des gènes [17, 18].
dans la présente étude, nous avons émis l'hypothèse qu'il peut aussi être l'expression différentielle des gènes dans le fundus de
V
souris W /W, où IC-IM sont perdus. Notre analyse des microréseaux de gènes a réussi à identifier 21 gènes qui ont été exprimés de manière différentielle dans le fond de
souris W /W V
. L'expression différentielle de ces souris a été confirmée par semi-quantitative réaction inverse de la chaîne de transcription de la polymérase (RT-PCR)
Méthodes
Animaux et préparation des tissus
L'utilisation et le traitement des animaux de laboratoire. A été approuvé par la ligne directrice régissant Comité d'expérimentation animale à l'Université de Yamanashi School of Medicine et à l'Université du Nevada School of Medicine. Six mâle adulte WBB6F1 - + /+ de souris (type sauvage) et l'âge appariés six mâle adulte WBB6F1-W /W
V de les souris, pesant 20 à 30 g, ont été achetés chez Japan SLC Inc (Shizuoka , Japon). Ils ont été anesthésiés avec de l'éther ou du dioxyde de carbone par inhalation et sacrifiés par dislocation cervicale. Pour les analyses gène, les estomacs ont été retirés de l'animal et la muqueuse avec la sous-muqueuse attachée rapidement disséqués forte de la
de la tunique. Les tissus ont ensuite été congelés dans de l'azote liquide (-196 ° C). Les tissus ont été stockés à -80 ° C jusqu'à l'isolement de l'ARN a été préformées [18] Préparation de l'ARN. L'analyse des données et microréseau
pour l'analyse de puces à ADN de gène, le poly (A) + ARN a été isolé à partir de chaque échantillon de tissu par TRIZOL ( Life Technologies, Inc., Gaithersburg, MD, USA) et poly (A) + kit d'isolation de l'ARN total (ISOGEN, Nippon Gene, Tokyo, Japon). 18 Avant de commencer l'analyse des microréseaux, l'expression différentielle des gènes du KIT
entre les tissus fundique de souris de type sauvage et ceux de W /W
souris mutantes de V ont été confirmées par des semi-quantitative par RT-PCR (voir la section semi-quantitative par RT-PCR
) (Fig. 1A). Les puces ont été hybridées et analysés, et l'analyse d'image a été réalisée comme décrit précédemment [19, 20]. En bref, des altérations de l'expression génique ont été évalués par transcription inverse de poly (A) + ARN en présence d'Cy3 ou Cy5 fluorochromes suivi par hybridation souris puces GEM 1 microarray (Incyte Genomics, Inc., Porter lecteur Palo Alto, CA, ETATS-UNIS). Afin de confirmer la validité de l'essai, les expériences ont été réalisées en double. Les 8734 cDNA que nous avons utilisées représentent 7854 uniques gènes /clusters UniGene: 3205 sont annotées et 4649 sont des séquences annotées. Nous avons attribué une valeur de coupure, en utilisant une analyse de variance, à la diapositive de microréseau. Les gènes dont Cy3 et Cy5 intensités de signal sont inférieures aux valeurs seuils ont été exclus de la suite l'enquête. l'expression différentielle équilibrée a été déterminée pour les souris de contrôle de type sauvage par rapport W /W souris mutantes
V. Les valeurs qui ont été < -2.0 Ou > 2.0 dans les deux deux expériences indépendantes ont été considérées comme significatives et les valeurs moyennes du rapport de fluorescence relative pour chaque gène ont été calculées. Figure 1 A. Expression du KIT
gène en utilisant semi-RT-PCR quantitative, dans les tissus fundiques gastriques de type sauvage et W /W
V
souris mutantes maintenues sous les conditions de jeûne de. Les niveaux GAPDH ont été mesurés de témoin. l'image B. Représentant de puces à ADN hybridation. Des altérations dans l'expression des gènes qui ont été représentés par le rapport de l'intensité de la fluorescence mesurée avec Cy3 et Cy5 fluorochromes. Les profils d'expression ont été évalués par transcription inverse de l'ARN poly (A) + ARN provenant des muscles du fundus gastrique de type sauvage et W
V
souris /W en présence d'Cy3 ou Cy5 colorants de marquage par fluorescence suivie d'une hybridation GEM 1 de la souris microarrays. L'image présentée a été produit en superposant l'image de fluorescence Cy5 (pseudo de couleur verte qui représente le niveau d'ARN de la tunica muscularis
W W
V
fundus /d'expression) et l'image de fluorescence Cy3 (pseudo- de couleur rouge qui représente l'expression de l'ARN à partir de tissus de type sauvage). Les tableaux ont été DAPI (bleu). C. Confirmation de la fiabilité des données de puces à ADN en semi-quantitative par RT-PCR. Des exemples représentatifs de l'analyse par RT-PCR, dans les tissus fundiques de six de type sauvage et six W /W
V
souris mutantes maintenues dans des conditions affamés. L'expression du CPO
gène a été considérablement réduite dans le fond de W
V
souris /W par rapport à l'âge appariés souris de type sauvage, alors que le gène de la MCM7 a montré une augmentation de l'expression en W /W les souris de
V. D. niveau de CPO
(CPO
/GAPDH
) et (MCM7
/GAPDH de
) de MCM7 dans les tissus fundiques expression relative de six type sauvage et six W /W
V
souris mutantes. Les données représentent la moyenne (± écart-type) de six expériences de RT-PCR en utilisant différentes six de type sauvage ou W W
V ARN
/rétinienne comme modèles.
Semi-quantitative RT-PCR
Les niveaux d'expression de l'ARNm qui ont été diminué ou augmenté de > 2.0 fois ou plus, ont été confirmés par semi-quantitative RT-PCR à partir de 6 fundus de chaque souris de type sauvage et
souris W /W V
. La RT-PCR a été effectuée comme décrit précédemment [18]. En bref, 2 pg aliquotes de ARNs totaux traités avec de la DNase I (Roche Diagnostics, Bâle, Suisse) à partir des souris tissus fundiques ont été utilisés pour synthétiser des ADNc simple brin. Ces ADNc ont été utilisés comme modèles pour la PCR dans un cycleur thermique (PerkinElmer, Shelton, CT, USA), en utilisant des amorces énumérées dans le tableau 1 ou KIT
(5'-ATG ACG TCA TGA AGA CTT GCT-3 'et 5' 'GAPDH de jeux d'amorces spécifiques (5'-GACAACAGCCTCAAGATCATCA-3), et' et -CTA CCC TGG AAT AGG ATG CA-3 5'-GGTCCACCACTGACACTGTG-3 '). L'expression de GAPDH
servi comme témoin interne. Les amorces ont été dérivées de différents exons dans le même gène, lorsque la séquence génomique de souris correspondant était disponible à ce moment. Les réactions de PCR ont été optimisés pour le nombre de cycles pour assurer l'intensité du produit dans la phase linéaire de amplification.Table 1 jeux d'amorces utilisé pour semi-quantitative RT-PCR.
Nom Gene
adhésion No.
Forward Primer de
inverse TAG Primer
EST
AA185701
CGA AAG CCT TGA GGT TGA AG CAA GAG GCA AAG AGC AAT CC de GAA AAC AGG CGT CAC TG
EST
AA166336
GAA GAA AAG GCT GCA GAT CG
EST
AA021806
CAC GAA TTG CAG GAC ACC TGC ACT GTA GGC TGA GT TAC CT
MCM7
Q61881
GCC CAC TGG ATT GTG AAG AT
AGG AGA CTG GTC CAC ACC AC
p160 ROCK2

U58513
AAG AAC CTG TCA AGC GTG GT
TCC AGG GTC ATC TGG AGT TC
EST
W18585
AGA CTT GGT GGC AGA GGA GA
GCA GCT CAT GAC AGA ACA CC
EST
AA403748
CCT AAA GCA ACC CAA CCT GA
TAG CCT TAT GGG ACC TGG TG
BST1 /BP3
Q64277
GAT TTC TTG AGC TGG TGT CG
AAA ACC CTC TCG TGG GAT AG
EST
AA024250
CAG ATA GAG CAA GGG ATG GA
CTG AGC CCA AAC CAG TAG AA
RBP2

Q08652
GAC GAA GGA CCA AAA TGG AA
ACC TTC TGT TTG GTG CTG de CGG TGA AAT CCA GGT CGT AG
EST
W46016
AGC AAC AAC AGC TGG ACT TC AG
BP1 /6C3
S30398
TAT CGG CCT CAT CTA ACC AG
ATC TTC AAG CAG CAC CTG AC
EST
AI552444
CAT GCG ATA CTG GAA CAT GA
TGA CTC CAA ATA GCC CTC AG
EST
AA108876
TGG AGC AAG AGA GGA AAG TG CTA GAC CTG AGC TTG CCT TG de
EST
AA049294
ACG TGG AGA AAG TTC TCG TG
GCA ATA GTG TCA GCC AAT CC
TGA CAA GCT GCA CAG TAA CC
EST
AA254777
GCC CTG GAG TTG AGA CTG TA
RHAMM
AF031932 GCA GAA GGA GGA GCA GAG TG
GCA GTG ACG TCC CTC AGA CT
EST
AA002293
AAG TCT TTG TGT GGG CTG AG
AGG AAG CTT CGT CTC TCC AT
EST GCC AGA TCA TGT TCT TCA le CC
AI595081
CAC CAG GAT GTC TGC CTA CT
CPO
D16333
GAA GAC CAA GAT GGA GCT GA
CAG AAA GAT TCC CAT GAA CG
EST
AA000304
TTC ATC TGC TGC TCC TTC TC
Résultats de TTA TAG ACC TTC GCC CAC AG
Microarray analyse et semi -quantitative RT-PCR
Pour identifier les gènes qui peuvent être associés de manière sélective avec IC-IM, nous avons comparé les profils d'expression des gènes dans les tissus gastriques fundiques dérivés de type sauvage et
V
souris W /W utilisant une méthode de microréseaux de gènes [19, 20]. fundus murin sans tissus épithéliaux dérivés de type sauvage et W /W
Les souris V de maintenues sous les conditions de jeûne de ont été utilisés pour générer des poly (A) + ARNm pour l'analyse des microréseaux utilisant le GEM de la souris 1 microarray . Les résultats de cette expérience, mettant en évidence les gènes qui ont été reproductible diminué ou augmenté de > 2,0 fois ou plus, sont indiqués dans le tableau 2 et la Fig. 1B. Plusieurs gènes connus et nouveaux ont été exprimés de manière différentielle dans le fond de W /W
les souris (> 2.0 expression différentielle équilibrée) de V. Pour confirmer les profils d'expression différentielle, nous avons encore examiné les niveaux d'expression de l'ARNm en fundique murin dérivées de types et sauvages W /W
Les souris V de maintenues sous les conditions de jeûne de modèles, en utilisant comme semi-quantitative analyse par RT-PCR (données représentatives sont montrées sur la Fig. 1C, 1D. Tous les jeux d'amorces utilisés pour la confirmation ont été répertoriés dans le tableau 1). Expression de dix gènes a été considérablement réduite dans le fundus de W /W
Les souris V de rapport à des souris de type sauvage d'âge correspondant. Onze gènes ont montré une augmentation de l'expression dans jeûné W /W
mice.Table 2 Analyse de V de l'expression génique dans le fond de type sauvage et W
souris W /
V

W rapport W /
V
/de type sauvage
Nom du gène (a)
adhésion No.
localisation subcellulaire (b)
Cytoband (c)
EST
2.5
AA185701
EST
2.5
AA166336
EST
2.4
AA021806
MCM7
: Replication Factor
Licensing d'ADN 2.4
Q61881
noyau
7q21.3-Q22.1
p160 ROCK2
: Protein Rho-Associated 2.3
U58513
cytosquelette
2p24
EST de Kinase
2.3
W18585
EST
2.3
AA403748
BST1 /BP3
: 2.0
Q64277 ADP-ribosyl cyclase 2 Precursor
membrane
4p15
EST
2.0
AA024250
RBP2
: liaison rétinol protein 2, cellulaire
2.0
Q08652
cytoplasme
3q23
EST
2.0
W46016
BP1 /6C3
: glutamyl Aminopeptitase
- 2.1
16
la membrane S30398 de EST
-2.2
AI552444
EST
-2.3
AA108876
EST
-2.4
AA049294
EST
-2.4
AA254777
RHAMM
: hyaluronane-Mediated motilité Receptor
-2.5
AF031932
membrane
5q33.2-qter
EST
-2.5
AA002293
EST
-3.4
AI595081
CPO
: coproporphyrinogène Oxidase
-3.6
D16333
mitochondries
3q12
EST
-3.9
AA000304
(a) l'expression différentielle équilibrée pour le contrôle de type sauvage souris vs W /W
V
souris mutantes. Les valeurs qui ont été diminué ou augmenté de > Deux fois ou plus dans les deux deux expériences indépendantes ont été considérées comme significatives et les valeurs moyennes ont été calculées. Tous les résultats ont été confirmés avec semi-quantitative RT-PCR en utilisant des tissus fundiques de six de type sauvage et six W /W
V
des souris mutantes. (B) l'emplacement subcellulaire déterminé par le http programme SOURCE:. //Source de stanford edu.. (C) la localisation chromosomique humaine du gène. Rapport de
Une comparaison des gènes exprimés de manière différentielle à partir du fond de W /W
Les souris V en utilisant une analyse de puces à ADN ont révélé que l'expression de onze gènes transcrits étaient significativement régulés à la hausse en W /W
les souris V de, alors que dix gènes transcrits ont été considérablement supprimés chez ces animaux. Nous avons confirmé ces résultats avec semi-RT-PCR quantitative des tissus de six chacun de type sauvage et
souris W /W V
. Les données obtenues à partir de ces expériences suggèrent que l'expression des gènes ont été spécifiquement réglementée dans W /W
Les souris V de.
Les onze gènes qui étaient régulés à la hausse dans le fundus de W /W
les souris V ont été identifiés comme des MCM7
, p160 ROCK2
, BST1 /BP3
, RBP2
, et sept autres transcriptions annotées. MCM7 est un homologue de mammifère de la protéine de levure nucléaire MCM2 /CDC47, dont on pense qu'elle joue un rôle important dans les deux étapes essentielles du cycle cellulaire, à savoir le début de la replication de l'ADN et la division cellulaire [21, 22]. ROCK2 P160, qui est une isoenzyme de ROCK1 est une cible pour la petite GTPase Rho [23]. ROCK2 est une sérine /thréonine kinase qui régule la cytokinèse, la contraction musculaire lisse, la formation de fibres de stress d'actine et des adhérences focales, et l'activation de l'élément de réponse sérique FOS [24]. La régulation à la hausse des p160 ROCK2 peut avoir un effet de compensation pour la perte des mécanismes de la CPI-dépendante du fundus gastrique. Le BST1 /BP3, un antigène de surface des cellules stromales de la moelle osseuse, est une glycosyl-phosphatidylinositol variablement glycosylée (IPS) molécule lié en qui est sélectivement exprimée par B précoce et de cellules de la lignée T et une sous-population distincte de cellules réticulaires dans les organes lymphoïdes périphériques. Il est également exprimé sur la bordure en brosse des cellules épithéliales intestinales, la surface luminale des tubules collecteurs rénaux et des cellules myéloïdes matures [25]. Cette protéine est censé appartenir à cyclase ADP-ribosyl famille [26]. RBP2 cellulaire est une protéine abondante 134 résidus présents dans l'épithélium intestinal [27]. On pense à participer à l'absorption et /ou le métabolisme intracellulaire de la vitamine A et appartiennent à une famille de protéines qui contient des protéines de liaison aux acides gras hépatiques. La vitamine A est une vitamine nécessaire à la croissance, la reproduction, la différenciation des tissus épithéliaux et la vision liposoluble. Les mammifères dépendent de l'absorption intestinale de cette vitamine pour leur survie. RBP2, qui est limitée en grande partie à la faible entérocytes intestinaux, joue probablement un rôle important dans l'absorption et /ou le métabolisme intestinal de la vitamine A [27].
Nous avons également confirmé la régulation négative de dix gènes en W /W
V de souris: les BP1 /6C3
, RHAMM
, CPO
, et sept autres ESTs annotés. L'antigène de différenciation des lymphocytes β murin, BP1 /6C3 a été caractérisée comme glutamyl aminopeptidase, ce qui est rapporté pour servir de marqueur de la différenciation des cellules des lignées lymphomyelocytic et peut être impliqué dans l'activation cellulaire, de transduction de signal, et cellule-matrice adhérence. Il est également exprimé par les cellules endotheliales capillaires, le placenta et les cellules épithéliales de l'intestin et les tubules rénaux proximaux [28]. RHAMM
code pour une protéine de récepteur de l'acide hyaluronique [29]. Quand l'acide hyaluronique se lie à RHAMM, la phosphorylation d'un certain nombre de protéines incluant la kinase d'adhésion focale pp125-FAK se produit [30]. Ceci est une étape nécessaire pour le démontage des contacts focaux et la motilité ultérieure. CPO est la sixième enzyme de la voie de biosynthèse de l'hème. Cette protéine soluble est localisée dans l'espace intermembranaire des mitochondries et catalyse la conversion de deux groupes de propionate dans des positions de deux et quatre coproporphyrinogène III de deux groupes vinyle de la protoporphyrinogène IX [31]. Il a été signalé que Coproporphyrie (carence en CPO) patients ont montré la constipation et les coliques anormale qui sont les principaux symptômes de cette maladie [32]. élévation marquée de la coproporphyrie dans les fèces différencié l'état de type suédois dans lequel les porphyrines de selles sont habituellement normaux et de porphyrie variegata dans lequel les deux coproporphyrin et les fractions de protoporphyrinogène sont augmentés dans les selles [33].
Dans les 21 gènes identifiés, nous avons déterminé la localisation subcellulaire et la cartographie chromosomique humain des 7 gènes connus en utilisant le programme SOURCE: http:.. //source de Stanford edu (tableau 2). Ces gènes ont montré une variété de localisation cellulaire, y compris la membrane 3, 2 cytoplasmique, 1 et 1 mitochondriale des protéines nucléaires. D'autres analyses de ces gènes pourraient nous permettre d'élucider non seulement leur relation avec le KIT, un récepteur tyrosine kinase, mais aussi les aspects moléculaires du système gastro-intestinal de pacemaker.
Nous avons déjà identifié quinze gènes qui ont été exprimés de manière différentielle dans les petits intestins de type sauvage et W /W
les souris V de qui se développent quelques IC-MY en utilisant une méthode d'expression différentielle des gènes [17, 18]. ™ @ Aucun de ces 15 gènes ont été trouvés dans la liste des 21 gènes qui ont été exprimés différemment dans le fundus gastrique de type sauvage et
V
souris W /W qui se développent quelques IC-IM en utilisant un microréseau d'ADNc. Comme nous avons confirmé l'expression différentielle des gènes du KIT
entre les petits intestins /tissus fundiques gastriques de type sauvage et ceux de
souris mutantes
V W /W par semi-RT-PCR quantitative, notre expérimentale système pourrait détecter une aberration génétique
souris W /W V
. Par conséquent, nos résultats pourraient refléter la différence de l'entité cellulaire de deux types de CIEC, IC-MY et IC-IM, ou la différence de la composition cellulaire entre l'intestin grêle et fundus. Pour fournir des preuves concluantes qui soutiennent ces spéculations, le profil d'expression en utilisant l'ARNm purifié à partir de cellules interstitielles uniques isolées pourrait être très utile dans la prochaine étude.
À l'heure actuelle, nous ne savons pas si ces gènes sont importants pour la fonction de la pacemaker gastrique /appareil de neurotransmission ou étaient ou aval régulés à la hausse à la suite de la perte de la CPI. Ces données, cependant, fournissent des preuves génétiques systémique clair que plusieurs protéines importantes qui ont des rôles dans le cycle cellulaire, la cytocinèse et la formation de cytosquelette, le métabolisme cellulaire, le métabolisme de l'oxygène, l'adhésion cellulaire, et le développement et la différenciation des cellules de l'intestin sont considérablement modifiés dans le fundus gastrique de W /W de souris
V. La génération d'animaux transgéniques qui présentent une surexpression spécifique du tissu des gènes candidats, ainsi que les animaux knock-out du gène peut être utile pour élucider le rôle de chaque gène dans motilité gastro-intestinale.
La découverte d'un des gènes humains et de souris entières à travers le projet du génome est censé révolutionner la médecine biologique, y compris le diagnostic moléculaire de diverses maladies et développement de nouveaux traitements. L'information combinée à la technologie à haut débit tels que puces à ADN et SNP analyse de frappe permettra d'accélérer la découverte de gènes sensibles ou causant diverses maladies et contribuer au dépistage de nouveaux médicaments qui ciblent ces produits maladies génétiques. En ce sens, l'effort du projet de profilage moléculaire dans lequel nous essayons de découvrir l'aberration génétique dans des modèles de maladies animales telles que W /W
V de les souris vont générer des ressources très variables pour plus d'élucidation des troubles de la motilité . Comme nombre réduit de la CPI ont également été signalés dans plusieurs troubles GI de la motilité, tels que la pseudo-obstruction intestinale chronique [5, 6], lent transit constipation et certaines formes de gastroparésie [13, 14], ces informations de gène devrait favoriser le développement des thérapies moléculaires ciblées nouvelles pour ces troubles, et peut également identifier des marqueurs moléculaires de diagnostic de ces troubles.
Conclusion
Nous avons identifié vingt-et-un des gènes qui codent pour des protéines fonctionnelles qui sont nettement en amont ou régulé à la baisse dans le Tunica la
du fundus gastrique W souris /W
V
. Considérant qu'aucun de ces gènes a été impliqué dans tous les aspects de la motilité gastro-intestinale, nous suggérons que de nombreux gènes inconnus pourraient être impliqués dans les changements cellulaires qui conduisent à des troubles de la motilité associés à la perte de la CCI. Analyse génétique des puces à ADN est un procédé efficace pour le criblage des changements qui se produisent dans les modèles d'expression des gènes en réponse à des mutations spontanées ou génétiques qui conduisent à la perte d'un type cellulaire spécifique. L'application de cette technique peut permettre la reconnaissance des profils d'expression des gènes qui sont communs à plusieurs troubles de la motilité dans laquelle la CPI sont perdus, offrant ainsi de nouvelles connaissances sur les mécanismes moléculaires responsables de la perte sélective des populations de la CPI.
Remarques
Yataro Daigo, Ichiro Takayama a contribué également à ce travail
Liste des abréviations
BP1 /6C3.
glutamyl aminopeptidase
BST1 /BP3:
antigène stromal de moelle osseuse 1 (alias ADP-ribosylcyclase 2 précurseur)
CPO:
coproporphyrinogène oxydase
DMP:
plexus musculaire profond
écotechnologies:
expressed sequence tags
FISH:
hybridation fluorescente de
in situ
GI:
gastro
ICC: cellules interstitielles de Cajal

IC- DMP:
ICC au niveau du plexus musculaire profond
IC-IM:
intramusculaire ICC
IC-MY :
ICC au niveau du plexus myentérique
MCM7:
entretien minichromosome 7
MY:
myentérique plexus
p160 ROCK2:
p160 Rho-associé, superhélice formant la protéine kinase 2
RBP2: liaison
rétinol protein 2, cellulaire
RHAMM:
récepteur de la motilité hyaluronane-médiée
RT-PCR:
inverser la chaîne de transcription-polymerase réaction
SNP:
polymorphisme nucléotidique simple
Déclarations Remerciements
pris en charge par 08457165 (MF) du ministère japonais de la Education, sciences, sports et Culture, le JAPON et DK 57236 (SW) et PO1 DK41315 (SW et KS) des National Institutes of Health, USA.
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