Polymorfism hos TGFB1 och VEGF gener och överlevnaden hos patienter med magsäcks cancer

polymorfism hos TGFB1 Mössor och VEGF
gener och överlevnad av patienter med magsäckscancer Bild Sammanfattning
Bakgrund
Några TGFB1 Mössor och VEGF
polymorfismer förmodas vara funktionella. Med tanke på att dessa gener är inblandade i tumörtillväxt och progression inklusive angiogenes, spridning och invasivitet hypotes vi att dessa polymorfismer skulle vara förenad med överlevnad hos patienter med magcancer.
Metoder
Vi genotypbestämts TGFB1
-509 C > T, 1869 T > C och 915 G > C och VEGF
-1498T > C, -634G > C och + 936C > T i 167 patienter med magcancer. Med Kaplan och Meier-metoden, log-rank test och Cox proportionella riskmodeller, vi utvärderade föreningar bland TGFB1
och VEGF
varianter med totalt sett ett år och två-årsöverlevnaden.
Resultat
Även om det fanns inga signifikanta skillnader i den totala överlevnaden bland alla polymorfismer testade patienter med TGFB1
+ 915CG och CC genotyper hade en sämre 2-års överlevnad (justerad hazard ratio (HR), 3,06; 95% konfidensintervall (CI), 1,09-8,62; P
= 0,034) jämfört med patienter med GG genotyp hade. Dessutom patienter heterozygota för VEGF
-634CG hade också en sämre 1-års överlevnad (justerat HR, 2,08; 95% CI, 1,03-4,22; P
= 0,042) jämfört med patienter med -634GG genotypen <. br> Slutsats
Vår studie antydde att TGFB1
+ 915CG /CC och VEGF
-634CG genotyper kan associeras med korttids överlevnad i mag cancerpatienter. Det krävs dock större studier för att verifiera dessa resultat.
Inledning
I gastric caner kan patienter med samma clinicopathologic egenskaper och samma behandlingsregimer har olika kliniska resultat. Även scenen är den bästa tillgängliga kliniska mått på tumör aggression och prognos, det är klart viktiga skillnader även inom samma tumörstadium [1, 2]. Därför skulle det vara till hjälp för att förbättra det prognostiska noggrannheten genom att identifiera lättillgängliga molekylära markörer som förutsäger en del av variationen i kliniska utfall. Under de senaste decennierna har många studier visat att genetiska förändringar spelar roll i utvecklingen och utvecklingen av magcancer [3]. Bland dessa molekylära markörer, single nucleotide polymorphisms (SNP) är den vanligaste undersökt genetisk variation som kan bidra till patienternas kliniska resultat [4] Epidemiologiska och kliniska undersökningar.
Har föreslagit att både TGF-β1 och VEGF kan spela en viktig roll i onkogenes av magen [5, 6]. Till exempel är TGFB1 Mössor och VEGF
varianter i samband med förändrade proteinprodukter, som kan bidra till variation i individuella känslighet för cancer och kliniska resultat [4]. Både TGFB1 och VEGF
gener
är mycket polymorfa, enligt uppgift har 168 och 140 varianter, respektive, men endast ett fåtal av dessa varianter ligger inom promotor eller kodande regioner som kan vara potentiellt funktionella http: //www. NCBI. NLM. NIH. gov /SNP /. Av dessa varianter har flera SNP beskrivits som viktiga i modulering av genfunktioner [7-9] och enligt uppgift är inblandade i etiologin av olika cancerformer [10-13].
TGF-β1 vägen är kritiskt involverade i tumörutveckling och progression. I tumörcellkulturer, har TGF-β1 antiproliferativa effekter och kan blockera tumörprogression i ett tidigt skede, medan det kan också accelererar invasion och metastas i de senare stadierna av tumörprogression [14, 15]. En experimentell studie rapporterade att TGF-β1-medierad aktivering av ALK5-Smad 3 vägen är avgörande för Shh protein för att främja rörlighet och invasiv i gastric cancerceller [16]. Mus experiment visade också att förändrade TGF-β1 var associerat med de latenta TGF-β1 bindande proteiner som kan orsaka inflammation och tumörer [17], och att den avbrutna TGF-β1-vägen kan leda till tumörtillväxt genom att öka tumörangiogenes inducerad av minskad expression av trombospondin-1 [18]. Hos människor, TGF-β1 hade en större känslighet än cancerogenitet-embryonala antigener i tumörceller från patienter med ventrikelcancer [16]. Vidare har både experimentella och klinisk-patologiska studier föreslagit en roll för VEGF-familjen av proteiner i metastas via det lymfatiska systemet och i kliniska utfall i flera humana solida tumörer, innefattande magcancer [19].
I denna studie vi valde att genotypa valda vanliga (dvs., mindre vanliga allelen frekvens > 0,05) TGFB1 och VEGF
SNPs
som antingen leda till icke-synonyma aminosyra~~POS=TRUNC [20] eller har förknippats med lägre expressionsnivåer av dessa gener [ ,,,0],8, 21], som innebär dessa SNP kan vara funktionella. Vi antar att potentiellt funktionella polymorfismer i TGFB1 och VEGF skulle vara förenad med kliniska utfall i patienter med magcancer. Specifikt
vi utvärderat sambandet mellan kliniska resultat i magcancer, inklusive total överlevnad, och vart och ett av följande SNP: tre TGFB1
SNP, inklusive en promotor SNP (-509 C > T) och två exon 1 SNP (869 T > C och 915 G > C) och tre VEGF
SNP, inklusive en promotor SNP (-1498T > C), en 5'-otranslaterad region SNP (-634G > C) och en 3'- otranslaterad region SNP (936 C > T) Metoder
Studiepopulation Review, är detta framtidsanalys bestod av 167 patienter med nydiagnostiserad och histologiskt bekräftade magcancer, som behandlades vid University of Texas MD Anderson cancer. Center, Houston, Texas mellan april 2003 och juli 2008. studie~~POS=TRUNC protokollet~~POS=HEADCOMP godkändes av vår Institutional Review Board (IRB) och alla patienter gav informerat samtycke använda IRK-godkända informerat samtycke formulär. Uteslutningskriterier ingår de inte nydiagnostiserade och de har behandlats på annat håll innan han kom till M. D. Anderson. Dessa patienter ingick i denna analys eftersom deras lagrade blodprover fanns tillgängliga för DNA-extraktion.
Genotypning
Genomiskt DNA extraherades från buffy coat-fraktionen av provet av varje patientblod genom att använda en Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) enligt tillverkarens instruktioner. DNA-renhet och koncentrationerna bestämdes genom spektrofotometrisk mätning av absorbans vid 260 och 280 nm genom UV-spektrofotometer. De tre utvalda TGFB1
SNP [en (-509 C > T /rs1800469) i promotor och två (869 T > C /rs1800470 och 915 G > C /rs1800471) i exon 1] och tre promotorn VEGF
SNP [en (-1498T > C /rs833061) i promotorn, en (-634G > C /rs2010963) i den 5'-otranslaterade regionen, och en (+ 936C > T /rs3025039) i 3'-oöversatta region] genotypanalyserades användning av polymeraskedjereaktion (PCR) - restriction fragment length polymorfism metod (RFLP). Genotyper av den TGFB1
SNPs bestämdes såsom beskrivits tidigare [22], och analyser på VEGF
SNPs ades också tidigare rapporterats [23]. För PCR-RFLP-baserad genotypning analys två forskarassistenter oberoende läsa gel bilder, och de upprepade analyser utfördes, om de inte överens om den testade genotyp. Dessutom har upprepade analyser utfördes på en slumpmässigt vald 10% av proverna slumpvis utvalda för att utföra de upprepade analyser med resultaten är 100% samstämmig.
Utfall datainsamling
Alla 167 gastric cancerpatienter hade tillgängliga föl- upp uppgifter om resultatet. Den totala överlevnadstiden beräknades från och med dagen för registrering på M.D. Anderson till tidpunkten för sista kontakten eller död. Patienter som fortfarande levde vid den sista kontakten betraktades som en censurerad händelse i analysen. Den ålder vid diagnos, kön och typ av behandlingar (dvs kirurgi och kemoterapi) användes som kovariater i analysen. Åldern vid diagnos kategoriserades i två grupper beroende på medelåldern (≤ 57 och > 57 år).
Statistisk analys
Dubbelsidig chi-kvadrat och t
tester utfördes för att bestämma någon statistiskt signifikanta skillnader i fördelningen av kategoriska variabler (t.ex. den TGFB1
och VEGF
alleler och genotyper) av demografiska variabler och kliniska funktioner och i form av kontinuerliga variabler (t.ex. ålder och överlevnad tid), respektive. Fördelningarna av de genotyper testades med avseende på avvikelse från Hardy-Weinberg-jämvikt (HWE), och de haplotyper för de varianter av samma gen rekonstruerades i enlighet med FAS-programmet [9], genom vilken varje individs sannolikhet att ha en särskild haplotyp par uppskattades och haplotypen paret med den högsta uppskattade sannolikheten tilldelades till den enskilde. Pearsons chi-square eller global test användes för att testa överlevnadsskillnader bland patienter med alla haplotyper. Generellt överlevande bland de tre genotyp-grupper för varje SNP analyserades med hjälp av Kaplan-Meier-metoden, och log-rank test användes för att testa för jämlikhet överlevnadsfördelningarna stratifierade av genotyper. Vi använde univariata och multivariata Cox proportional hazards modeller för att uppskatta effekten av varje genotyp på överlevnad i närvaro av andra variablerna. Både ålder vid diagnos och tidsintervallet mellan registrering och diagnos datum (patologisk bekräftelse av sjukdom) behandlades som numeriska kovariater i Cox modell. För att bekräfta antagandet av proportionella faror i en Cox regressionsmodell, har vi lagt till en tidsberoende variabel till modellen, och antagandet bekräftades. Hazard ratio (HRS) och deras motsvarande 95% konfidensintervall (CI) beräknades med justering för andra kovariater i samma modell. De gemensamma effekterna av TGFB1 Mössor och VEGF
SNP och deras interaktioner med röka och dricka på gastric cancerrisk utvärderades också. Alla statistiska test var två-sidig, med ett P
värde på 0,05 anses vara betydande och alla var beräknas med hjälp SAS (version 9.1, SAS Institute, Cary, NC).
Resultat
Kännetecken för studiepopulationen
Kliniska och patologiska egenskaperna hos de 167 patienter som ingick i denna studie visas i tabell 1. Det fanns 114 män (68,3%) och 53 kvinnor (31,7%), vars ålder varierade från 32 till 89 år. Använda regressionsanalys av förhållandet mellan total överlevnad och clinicopathologic egenskaper Cox, fann vi att varken ålder, kön, etnicitet, rökning eller alkohol status var statistiskt samband med total överlevnad (P
= 0,339, 0,988, 0,297, 0,475, 0,809, respektive) .table 1 Kännetecken för studiepopulationen av patienter med magcancer
Egenskaper
Nej patienter
Nej dödsfall
MST (månader)
P
*
Totalt ämnen
Ålder (medel) katalog 167
60
0,339
≤57 år
68
27
21,2 Hotel > 57 år
99
33
31,0
Kön
0,988
Man
114
41
23,3
Kvinna
53
19
28,9
ursprung
0,297
Vit
117
45
28,8
Icke-White †
50 15
19,1
rök
0,475
aldrig
34
14
20,6
någonsin
133
46
30,1
Alkohol
0,809
aldrig
62 23
23,2
Ever
105
37
29,3
plats
0,069
magen
118
36
24,3
matstrupen
25
13
27,2
GEJ
24
11
16,6
Histologi
0,356
Intestinal
118
45
28,1
Klackring ring~~POS=HEADCOMP
49
15
24,6
differentiering
0,694
Poor
96
37
21,8
Måttlig fattiga
28
10
29,8
Medel-Well
42
13
22,6
klinisk fas Hotel < 0,001
I + II
65
9
30,4
III + IV
101
51
22,7
Metastas Hotel < 0,001
ja
90
49
21,2
ingen
77
11
34,2
Kemoterapi
< 0,001
ja
121
54
26,3
ingen
46
6
10,4
Kirurgi
< 0,001
ja
63
11
39,2
ingen
104
49
18,4
Förkortningar: MST, medianöverlevnadstiden; GEJ, gastroesofageal korsning.
* Chi-square test.
† Ingår 13 asiater, 16 svarta, 19 latinamerikaner, och 2 indianer. Sälja The tumörer i 118 (70,7%) patienterna var belägna på mage och de av 49 (29,3%) patienter var belägna vid matstrupsövergången (GEJ). Oberoende av tumör plats, hade alla patienter adenokarcinom. Av dessa 118 (70,7%) patienter tarm och 49 (29,3%) signetring. Vi grupperade typerna av differentiering i följande tre kategorier: fattiga, moderat fattiga och måttliga brunnar, och antalet och andelen av dessa tre grupper var 96 (57,8%), 28 (16,9%) och 42 (25,3%), respektive. Hos alla patienter var klinisk-patologiska egenskaper, inklusive tumörplacering, histologi och differentieringsstatus inte signifikant associerad med total överlevnad i univariata analysen (P
= 0,069, 0,356, och 0,694 respektive). Kliniska tumörstadier enligt de internationella unionen mot cancer (UICC) kriterier var följande: 65 (38,9%) hade steg I + II och 101 (61,1) hade stadium III + IV (Tabell 1) Review Bland de 167 patienter. , 121 (72,4%) fick kemoterapi, och 63 (37,7%) fick kirurgi; I slutet av uppföljningsperioden hade 60 (35,9%) patienter dog. Den genomsnittliga uppföljningstiden var 18,0 ± 13,3 månader för patienter som fortfarande levde, och den genomsnittliga överlevnadstiden för alla patienter var 29,4 månader. Framskridet stadium, metastas, cellgifter och kirurgi var alla i samband med total överlevnad (P Hotel < 0,001 för alla) (tabell 1). Till exempel, den genomsnittliga överlevnadstiden var 34,2 månader för patienter utan metastaser och 21,2 månader för dem med metastaser. De som fick kemoterapi och kirurgi hade en längre genomsnittlig överlevnadstid än de som inte gjorde det (26,3 månader jämfört med 10,4 månader för kemoterapi och 39,2 månader jämfört med 18,4 månader för kirurgi).
HWE, koppling obalans och haplotyper TGFB1 och VEGF
för TGFB1
, en av de tre SNP (rs1800469C > T, rs1800470T > C och rs1800471G > C) inte var i HWE (P Hotel < 0,05 för rs1800469C > T), vilket tyder på en möjlig urval bias, men ingen av VEGF
SNP (rs833061T > C, rs2010963G > C och rs3025039C > T) avvek från HWE (P Hotel > 0,05 för alla). Ingen av paren av TGFB1
eller VEGF
SNP var i hög kopplingsojämvikt (dvs r 2 mellan 0,039 och 0,541, alla < 0,08). Endast fyra TGFB1
haplotyper och fem VEGF
haplotyper hade en allel frekvens av > 0,05 (CTG, 0.570, CCG, 0.190, TCG, 0,167 och CCC, 0,063 för TGFB1 Mössor och CGC, 0,344; TCC, 0,287, TGC, 0,192, CGT, 0,072 och TCT, 0,051 för VEGF
). På grund av den lilla provstorleken, har vi inte beräkna diplotypes.
TGFB1 och VEGF genotyp fördel och överlevnad
När alla patienter magcancer analyserades för total överlevnad, var ingen signifikant skillnad i fördelningen av medelöverlevnads tid genom genotyper för någon av de polymorfismer som studerats. Eftersom det fanns några deltagare i mindre homozygot variant grupper, vi kombinerat heterozygota och mindre variant homozygota genotyper tillsammans för ytterligare analys, med antagande av en dominerande genetisk modell, men det fanns fortfarande inget samband mellan upptäckta polymorphisms och överlevnad (se kompletterande fil 1) . Dessutom, när mag cancerpatienter stratifierades efter ålder, kön, etnicitet och metastaserande status, ingen skillnad i fördelningen enligt genomsnittlig överlevnadstid av sex SNP konstaterades bland undergrupperna (se ytterligare en fil 1).
TGFB1 och VEGF genotyp distributioner och en-och två-åriga överlevande
Eftersom prognosen är i allmänhet dålig i avancerade fall av magcancer, medianöverlevnad närmar sällan 1 eller 2 år [2]. I föreliggande studie, var de flesta av fallen steg IV (101/167) med en medianöverlevnadstid av endast 16,2 månader (95% CI, 12,8-24,9). Därför har vi beräknat också ett år och två-årsöverlevnaden för patienter med olika genotyper (se ytterligare en fil 2). De övergripande ett år och två år överlevande för alla patienter var 51,5% och 22,1%, respektive. Även om det fanns inga signifikanta skillnader i överlevnad mellan de flesta genotyper, patienter med TGFB1 +
915CG /CC genotyper hade bättre ett år och två år överlevnad än de med GG genotyp (justerade HR, 2,13; 95% CI , 0,76-6,01; P
= 0,122 och justerade HR, 3,06; 95% CI, 1,09-8,62; P
= 0,034 respektive) (Figur 1). Dessutom patienter heterozygota för VEGF
-634CG hade också en bättre en-års överlevnad (justerat HR, 2,08; 95% CI, 1,03-4,22; P
= 0,042) än de med VEGF Omdömen - 634 GG-genotyp. Figur 1 Ackumulerade överlevnads funktioner genotyperna TGFB1 915 G > C (rs1800471) och VEGF -634G >. C (rs2010963) katalog Ytterligare analyser kombinera alleler, genotyper och haplotyper av samma gen inte underbygga resultaten från det enda locus analys (data visas ej), är multifaktoriell, multigenetic delvis på grund av den låga LD bland SNP och liten studie storlek som inte tillåter ytterligare skiktning analys.
Diskussion
etiologi av magcancer och stegs [24, 25]. Det är känt att under karcinogenes, kan TGF-β växla från en tumörsuppressor till en tumör förstärkare i de senare stadierna av cancer [26]. Med dubbla roll i utvecklingen av cancer, det finns ett stort intresse för att analysera rollen av genetisk variation i TGFB1
i cancerutveckling och patientöverlevnad. Till exempel TGFB1
-509C > har T och rs1982073 (eller rs1800470) polymorfismer visat sig vara förknippade med bröstcancer överlevnad i en kinesiska befolkningen [27-30] och kemoradioterapi svar i 175 finländska patienter med huvud- och hals squamous cancer [31], respektive. Varken TGFB1
+ 869T > C eller + 915G > C polymorphisms visade någon association med tumörrecidiv och progression i blåstumörer utan muskel invasiv i en spanska befolkningen [32]. Medan en koreansk studie visade att variant T genotyper av TGFB1
-509C > T SNP var förknippade med en minskad risk för lungcancer [33], en kinesisk studie av 414 patienter och 414 kontroller [34] rapporterade att genotyper inte i samband med en total risk att utveckla magcancer men med en minskad risk för risk för steg i eller II magcancer. Men analyser ingen överlevnad presenterades i dessa studier.
Som nämnts, vi hittade inte några statistiska belägg för att stödja ett signifikant samband mellan TGFB1
polymorphisms och total överlevnad i magcancer. Men föreslår signifikant samband mellan TGFB1 +
915 CG /CC genotyper och 2-års överlevnad för alla patienter magcancer att TGFB1
variant kan ha försvagat rollen av TGF-β1 som en tumörsuppressor i tidigare skede för tumörprogression. Det är också känt att TGF-β1 kan växla från en tumörsuppressor till en tumör enhancer i sent stadium av cancer [26]. När tumörerna hade blivit större och bli metastaserande, kan den resulterande ökningen av somatiska mutationer eller vinster i kopior av onkogener har uppvägt roll suppressor varianter i sena stadier av tumören, vilket leder till någon skillnad i total överlevnad för patienter med olika genotyper av TGFB1 +
915 G > C SNP. Dock måste denna spekulation valideras i mer rigoröst utformade studier med mycket större provstorlek och mer information om mutationen spektrum i tumörerna.
VEGF, som en viktig förmedlare av angiogenes, spelar också en viktig roll i utvecklingen av cancrar. VEGF
polymorfismer har också visat sig vara associerade med överlevnad i både magcancer och kolorektal cancer [35, 36]. Men resultaten från publicerade studier fortfarande inkonsekvent snarare än avgörande. I en grekisk magcancer studie av fem VEGF
SNP (-2578C > A, -1154G > A, -634G > C, -460T > C och + 936C > T) i 312 patienter [36], VEGF
-2578 AA, -634 CC och + 936TT genotyper var associerade med en signifikant lägre HR (bättre överlevnad) för sex år överlevnad kolorektal cancer. Intressant, en annan tidig grekisk studie av 100 patienter med ventrikelcancer föreslog att endast VEGF
-634CC /CG genotyper var associerade med en minskad (sämre överlevnad) 10-års överlevnad, jämfört med GG genotyp [35]. Våra data på 167 patienter med ventrikelcancer indikerade att VEGF
-634CC /CG bärare verkligen haft en dålig 1-års överlevnad än de med VEGF
-634 GG genotyp. Amano et al. [37] rapporterade också att ingen signifikant association observerades mellan frekvenserna hos VEGF
-460T > C, + 405g > C och 936C > T genotyper och tre års sjukdomsfri överlevnad av endometrial carcinoma patienter i en japansk studie av 105 endometriala karcinom-patienter. Eftersom alla dessa studier, inklusive vårt, har varit relativt liten, det var begränsad förmåga att utföra mer kraftfulla haplotypen baserad analys att analysen av en enda allel eller locus effekt [34]. Review, är detta den första rapporten, till vår kunskap, involverar TGFB1 Mössor och VEGF
polymorfism och överlevnad i mag cancerpatienter som huvudsakligen består av en kaukasisk befolkning; Det fanns dock vissa begränsningar för denna studie. Även om vi försökte samla återfall uppgifter om dessa patienter, kunde vi inte undersöka denna effekt på grund av avsaknaden av en fördefinierad uppföljningsplan. En andra begränsning var det faktum att vi inkluderade endast tre gemensamma TGFB1
SNP och tre VEGF
SNPs. Det är möjligt att vissa andra viktiga SNP missades eller att de observerade föreningar kan bero på andra polymorfismer i LD med SNP vi studerat. Även inga uppgifter om serum /plasma proteinnivåer var tillgängliga för genotyp-fenotyp korrelation analys, eftersom endast DNA-prover fanns tillgängliga från dessa patienter. Det finns andra gener förutom att TGFB1
och VEGF
som också spelar en roll i celltillväxt och angiogenes, som representerar ett komplext samspel av många aktiverande och hämmande faktorer [38]. Dessutom är Helicobacter pylori
infektion, närvaron eller frånvaron av vilket inte rapporterats i den aktuella studien, som anses vara orsaken till en progressiv ansamling av genotypiska förändringar i magcancer, vilket kan leda till sporadisk magsäckscancer cancer [39 ]. Slutligen studien storlek var för liten för att ha en tillräcklig effekt för att detektera små HRs. Till exempel, vår post-effektberäknings föreslog att provstorleken för ett lika stort antal (n = 55) av patienterna i varje genotyp i varje SNP, befogenhet att upptäcka en HR 2 var < 0,4, men > 0,8 för en HR av 3,4 för en uppföljning på 5 år. Därför endast fastställandet av timmar för två år överlevnad TGFB1
+ 915G > C skulle ha en tillräcklig effekt, vilket tyder på en mycket större studie skulle behövas för att på ett effektivt sätt att testa vår hypotes för effekterna av den totala överlevnaden
. slutsats
Sammanfattningsvis fann vi att vissa polymorphisms TGFB1 Köpa och VEGF
kan förknippas med 1- eller 2-årsöverlevnaden av gastric cancerpatienter. Men den aktuella studien små och olika genetiska och epigenetiska händelser kan också ha lett till en association mellan TGFB1 Mössor och VEGF
polymorphisms och magcancer prognos och överlevnad. Därför är större och bättre utformade studier som krävs för att övervinna begränsningarna i den aktuella studien (särskilt information om Helicobacter pylori
infektion) och ytterligare bekräfta våra observationer.
Förkortningar
TGF-β1
:
Transformerande tillväxtfaktor beta 1
VEGF

Vascular endothelial Growth Factor
LD:
länkdisekvilibrium
PCR-RFLP:
polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorfism
OR:
odds ratio
HR:
hazard ratio
CI:
konfidensintervall
SNP:.
single nucleotide polymorphism
förklaringar
Tack
Denna studie stöddes delvis av National Institutes of Health bidrag R01 ES 11.740-07 och CA 131.274 till 01 (till QW) och CA 16672 (till MD Anderson Cancer Center). Vi tackar Margaret Lung och Kathryn Patterson för deras hjälp att rekrytera de ämnen; Li-E Wang, Zhensheng Liu, Yawei Qiao, Min Zhao, Jianzhong Han och Kejin Xu för deras laboratorium hjälp; och Diane Hackett och Maude Veechfor för vetenskaplig redigering
Elektronisk kompletterande material
13046_2009_181_MOESM1_ESM.doc Ytterligare fil 1. TGFB1 och VEGF genotyp fördelningar och total överlevnad. De uppgifter som lämnats representerar den statistiska analysen av TGFB1 och VEGF genotyp fördelningar och total överlevnad. (DOC 69 KB) 13046_2009_181_MOESM2_ESM.doc Ytterligare fil 2: TGFB1 och VEGF genotyp distributioner och en-och två-åriga överlevande. De uppgifter som lämnats representerar den statistiska analysen av TGFB1 och VEGF genotyp distributioner och en-och 2 år överlevande. (DOC 66 KB) Författarnas ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 13046_2009_181_MOESM3_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 1 konkurrerande intressen
Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande intressen.

• Validering av en ny metod som kombinerar både HER2 immunohistokemi och HER2 tvåfärgad silver in situ hybridisering på en bild för magcancer testning
• En bevisande resonemang baserad modell för diagnos av lymfkörteln metastasering i magcancer