Klinisk-patologisk betydelse claudin-4 i gastrisk carcinoma

klinisk-patologisk betydelse claudin-4 i magkarcinom Bild Sammanfattning
Bakgrund
Aberrant expression av claudin proteiner har rapporterats i en mängd olika cancerformer. Tidigare studier har visat att överuttryck av claudin kan främja tumörbildning och metastas genom ökad invasion och överlevnad av tumörceller. Förblir emellertid oklar den prognostiska signifikansen av claudin-4 i magcancer.
Metoder
Immunohistokemi användes för att analysera uttrycket av claudin-4 i 329 kliniska gastric cancerprover och 44 normala magen prover, 21 intestinal metaplasi prover, och 21 intilliggande föregångare lesioner dysplasi prover. Statistiska analysmetoder användes för att utvärdera förhållandet mellan claudin-4-expression och olika kliniskt patologiska parametrar. Univariata och multivariata analyser genomfördes, respektive, för att upptäcka de oberoende prediktorer för överlevnad.
Resultat
Claudin-4 uttryck var närvarande i endast 7 (15,9%) normala gastric prover, men uttryck av claudin-4 i tarm metaplasi skador och dysplasi lesioner var 90,5% och 95,2%, respektive. Uttrycket av claudin-4 var signifikant associerad med histologiska differentiering (P Hotel < 0,001) och tumörtillväxtmönster (P Hotel < 0,001) men inte i samband med patientens överlevnad. Men mellanliggande typ färgning av claudin-4 uppvisade en trend av korrelation med patienternas överlevnad (P
= 0,023). Den femåriga överlevnaden med lågt uttryck av claudin-4 i mellan typ (76,4%) liknade expanderande typ (64,5%), medan den höga uttrycksgruppen (46,6%) var närmare infiltrativ typ (50,7%).
slutsatser
resultaten i denna studie visar claudin-4 avvikande uttryck i magcancer och föregångare lesioner. Uttrycket av claudin-4 skulle kunna tjäna som en grund för att identifiera magcancer hos det mellanliggande typ.
Nyckelord
Gastric carcinoma claudin-4 Tight junctions Bakgrund
Gastric cancer är en av de vanligaste maligniteter, och ungefär 738,000 dödsfall inträffade på grund av magcancer i 2008 världen över. Över 70% av nya fall och dödsfall inträffar i utvecklingsländerna, särskilt i östra Asien [1]. Gastric cancer är i allmänhet förstås utvecklas som en flerstegs progression av kronisk gastrit, atrofisk gastrit, intestinal metaplasi, dysplasi, och slutligen cancer [2]. Under denna process, är förlust av cellens polaritet och störningar i cell-cell junctions ofta observerats, och detta spelar en viktig roll i cancerutveckling.
Tight junctions (TJs) är kritiska för att upprätthålla normala struktur och fysiologisk funktion av epitelet och endotel [3, 4]. TJs inte bara fungera som en fysisk barriär för att förhindra lösta ämnen och vatten från att passera fritt genom den para utrymmet mellan epitel och endotelceller ark, men även spela avgörande roller för att upprätthålla cell polaritet och signaltransduktion [3, 5, 6]. Men cancerceller uppvisar ofta onormal TJ funktion [7].
Claudins är medlemmar av en stor familj av transmembranproteiner som är bland de viktigaste komponenterna i TJs, och claudin-avvikande uttryck leder potentiellt till strukturell och funktionell skada på TJs [ ,,,0],8]. För närvarande har totalt 24 Claudin gener identifierats hos däggdjur, och de visar ofta vävnadsspecifika uttrycksmönster [9]. Nyligen har flera studier visat den onormalt uttryck av claudins i flera humana cancrar [10, 11]. Såvitt vi vet har uttrycket av Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 och 23 har rapporterats i magcancer [12-23]. Bland de olika Claudin proteiner besläktade med magcancer, var funktionen av claudin-4 inte konsekvent. Exempelvis Jung et al
. [15] och Ohtani et al
. [19] fann att uttrycket av claudin-4 signifikant korrelerad till gynnsam överlevnad för patienter med magcancer i 72 och 124 fall, respektive. Men Resnick et al
. [13] rapporterade att måttlig till stark claudin-4 färgning i magcancer var signifikant associerad med dålig överlevnad i 146 fall. Soiniet al
. [14] fann inga tydliga samband mellan claudin-4 uttryck och patienten prognos i 118 fall. Intressant också, har uttrycket av claudin-4 visat sig spela en roll vid bestämning av matrix-metalloproteinas (MMP) aktivitet, vilket indikerar att claudin-4 kan ha medierad invasion genom aktivering av MMP [24, 25]. Vidare rapporterade tidigare studier som claudin-4 kan ha potential som behandling för cancer [26-28]. Således är ytterligare undersökningar krävs för att klarlägga dessa kontroversiella resultat och de verkliga funktioner claudin-4. I denna studie, som syftar vi identifiera de kliniskt patologiska föreningar och prognostiska värde claudin-4 uttryck i magcancer.
Metoder
Patienter och vävnadsprover sälja i denna studie, vävnadsprover från totalt 329 patienter med magcancer erhölls mellan 1998 och 2004 vid Institutionen för kirurgiska onkologi, det första sjukhuset i Kina Medical University. Samtliga patienter genomgick kurativ radikal gastrektomi med standard lymfkörtel dissekering. Den histopatologiska diagnosen av 21 intestinal metaplasi, 21 dysplasi, 44 mikroskopiskt normala magslemhinnan och 329 magsäcksprover från 329 patienter genomfördes av två oberoende patologer. Vi fick skriftlig informerat samtycke från alla patienter, och studien godkändes av den etiska kommittén av Medical University Kina. Ingen av patienterna hade fått kemoterapi eller radioterapi före den kirurgiska proceduren. De detaljerade postoperativ patologi diagnosrapporter erhölls och ingår kön, ålder, tumör läge, storlek, differentieringsstatus, tillväxtmönster, och tumör nod-metastas (TNM) stadium. Kriterierna för TNM klassificering för magcancer var i enlighet med den 7: e 2010 amerikanska kommittén för cancer (AJCC) staging handbok [29]. Kriteriet för histopatologisk gradering av differentiering var i enlighet med 2000 Världshälsoorganisationen klassificering av magcancer [30]. Kriteriet för mönstret av tumörtillväxt var i enlighet med den japanska klassificering av magcancer, 3rd Svensk utgåva. Alla patienters egenskaper sammanfattas i tabell 1. patientprovet bestod 238 manliga och 91 kvinnliga patienter med en medelålder av 57 år (intervall 26 till 81 år). Alla patienter följdes upp via telefon förfrågan eller frågeformulär, och uppföljningstiden varierade från ett till 136 månader (median 56 månader) .table 1 clinicopathologic egenskaper 329 patienter med magsäckscancer
Variabel
värde

Ålder vid kirurgi, y
Mean
57,0
Range
26-81
Kön, antal
Man
238
Kvinna
91
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP, cm
Mean
5,0
Range
1,0, 15,0
Tumör läge, antal
Övre
31
USA
53
Lägre
245
Differentiering status, antal
Väl differentierade
47
Måttligt differentierade
54
Dåligt differentierade
218
odifferentierad
10
tillväxtmönster, antal
Expanderande
76
Mellan
81
infiltrativ
172
Tumör (T) skede antal
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
Node (N) skede antal
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
lymfatiska invasion, antal
Negativ
248
Positiv
81
tumörstadium, antal
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180
Vital statistik, antalet
Alive
152
döda, alla orsaker
177
Dead, magcancer
143
Dead, orelaterade
22
Information tillgänglig
12
Immunohistokemi
formalinfixerade och paraffininbäddade (FFPE) vävnadsblock skars i 5-um tjocka sektioner avparaffineras sedan med xylen och rehydreras med hjälp av en graderad serie av etanol. Sektionerna inkuberades i kokande citronsyrabuffert (pH 6,0) för antigenåtervinning i en tryck ångkokaren. Sektionerna inkuberades över natt vid 4 ° C med följande primära antikroppar: anti-claudin-4 monoklonal antikropp, 1: 100 utspädning, klon 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, USA. Immunhistokemisk färgning utfördes med hjälp av MaxVision TMHRP-Polymer anti-mus /kanin IHC Kit (Fuzhou Maixin, Kina) med tre amino-9-etyl karbazol (AEC) som enzymsubstratet. Sektionerna sedan lätt motfärgades med hematoxylin. Positiva kontroller var kolonslemhinnan och proverna där den primära antikroppen ersattes med icke-reaktiva antikroppar tjänade som negativa kontroller.
Immunofärgning resultat tolkades oberoende av två patologer hjälp av en semi-kvantitativ poängsystem [31]. Immunfärgning reaktioner utvärderades genom färgning intensitet (0, inga fläckar; 1, svag; 2, måttlig; 3, stark) och procentandelen färgade epitelceller (0, < 5%; 1, 5 till 25%; 2, 26-50%, 3, 51-75%; och 4, > 75%). Den procentuella positivitet av epitelceller och färgningsintensitet multiplicerades sedan för att generera immunoreaktiviteten score (IS) för varje fall. Proverna rescored om det fanns skillnader i mellan de två patologer, tills konsensus nåddes. Vi delade proven i två grupper baserat på resultaten av immunofärgning i vävnaderna: låg uttryck (IS < 4) och hög uttryck (IS ≥ 4). Detta utvärderingssystem för claudin-4 har använts i tidigare studier [32].
Statistisk analys Review, en meta-analys utfördes för att bekräfta den roll som claudin-4 i magcancer. Vi sökte på engelsk litteratur för relevanta studier som publicerats före den 1 juni 2013 med hjälp av PubMed databas med följande lydelse: "mage tumör" och "claudin-4" i medicinska ämnesord (MeSH). Hänvisningar i de hämtade artiklar screenades ytterligare för tidigare originalstudier. Inklusionskriterierna var patienter med magcancer, inklusive en prognostisk jämförelse mellan hög och låg expression av claudin-4. Motsvarande författare kontaktades för att erhålla information som saknas, och vissa studier uteslöts om viktig information fortfarande saknas efter upprepade förfrågningar.
För kvantitativ sammanställning av överlevnadsresultat, den observerade väntat (OE) statistik och varians kombinerades för att ge det effektiva värdet. De O-E-värden och avvikelser uppskattades från tillgängliga data med hjälp av de metoder som rapporterats av Tierney et al
. [33]. Om studien gav en hazard ratio (HR), de O-E-värden och avvikelser beräknas baserat på det. Om studien inte ger en HR men rapporterade data i form av en överlevnadskurva, var överlevnaden extraherades vid vissa bestämda tidpunkter för att rekonstruera en uppskattad HR och dess varians.
Vi använde chi-två-test för att utvärdera förhållandet mellan claudin-4 uttryck och olika kliniskt patologiska parametrar. Överlevnadsanalys utfördes med användning av Kaplan-Meier-metoden, och skillnader mellan grupperna analyserades med användning av log-rank test. Cox regressions multivariat modell användes på ett stegvis framåt sätt för att detektera de oberoende prediktorer för överlevnad. Tvåsidiga P
-värden mindre än 0,05 ansågs indikera ett statistiskt signifikant resultat. Alla statistiska analyser genomfördes med hjälp av SPSS (version 17.0, SPSS för Windows, Chicago, IL, USA). Och RevMan 5,2 analysprogram (The Cochrane Collaboration) katalog Resultat
Claudin-4 immunofärgning inträffade i en övervägande membran mönster , med vissa prover uppvisar en låg nivå av cytoplasmisk färgning. Endast 15,9% (7/44) av normal magslemhinna uppvisade höga uttrycksnivåer av claudin-4. Däremot 90,5% (19/21) av tarm metaplasi lesioner och 95,2% (20/21) av de gastriska epitelceller dysplasi lesioner uppvisade höga uttrycksnivåer av claudin-4. Av magcancer prover undersökta 53,2% (175/329) av fallen visade hög claudin-4 uttryck (Figur 1). Figur 1 Claudin-4 immunfärgning. (A) Normal gastric muscoma, ingen färgning; (B) intestinal metaplasi, högt uttryck; (C) måttligt differentierade till väl differentierade magcancer, högt uttryck; (D) dåligt differentierad gastric cancer, ingen färgning. Förstoring x 200.
expressionsnivån av claudin-4 var signifikant korrelerad med tumördifferentiering (P Hotel < 0,001), kön (P
= 0,003), ålder (P
= 0,025) och tumör läge (P
= 0,033). Enligt mikroskopisk undersökning av tumören tillväxtmönstret, var 76 fall klassificeras som den expanderande typen och 172 fall som infiltrativ typ, medan 81 fall bestämdes att vara den mellanliggande typ. Uttrycksnivån för claudin-4 var också signifikant korrelerade med tumörtillväxtmönstret (P
< 0,001). Hög expression av claudin-4 observerades hos 69,7% av det slag expanderande och 72,8% av den mellanliggande typ av magcancer, medan endast 36,6% av den infiltrativt typ uppvisade hög expression. Emellertid avslöjade våra resultat ingen signifikant korrelation mellan expressionen av claudin-4 och tumörstorleken, djup av invasion, lymfkörtel metastas, lymfatiska invasion och tumörstadium (Figur 2, Tabell 2). Figur 2 Uttryck av claudin-4 i normal magslemhinnan, intestinal metaplasi, dysplasi och cancer (inklusive expanderande, mellanliggande och infiltrativa typer).
Tabell 2 Statistiska resultat av relationer mellan claudin-4-expression och olika clinicopathologic egenskaper
Variabel
Totala patienter (%)
Patienter med låg claudin-4-uttryck (%)

Patienter med högt claudin-4expression (%)
P- värde
329
154 (46,8) Review 175 (53,2) Review Ålder vid kirurgi , y
0,025
≤ 60
192
100 (52,1) Review 92 (47,9) Hotel > 60
137
54 (39,4) Review 83 (60,6) Review Kön
0,003
Man
238
99 (41,6) Review 139 (58,4)
Female
91
55 (60,4) Review 36 (39,6) Review Patofysiologiska funktioner
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP (cm) Review 0,055
≤ 5
199
102 (51,3) Review 97 (48,7) Hotel > 5
130
52 (40,0) Review 78 (60,0) Review tumörlokalisation
0,033
Övre
31
9 (29,0) Review 22 (71,0) katalog USA
53
31 (58,5) Review 22 (41,5) Review Lower
245
114 (46,5) Review 131 (53,5) Review Histologisk typ Hotel < 0,001
Differentierad (WD, MD) katalog 101
24 (23,8) Review 77 (76,2)
odifferentierad (PD, UD) katalog 228
130 (57,0) Review 98 (43,0) Review tillväxtmönster Hotel < 0,001
Expanderande
76
23 (30,3 ) Review 53 (69,7) Review Mellan
81
22 (27,2) Review 59 (72,8) Review infiltrativt
172
109 (63,4) Review 63 ( 36,6) Review T skede
0,147
T1 /2 Review 96
51 (53,1) Review 45 (46,9) Review T3 /4
233
103 ( 44,2) Review 130 (55,8) Review Lymfkörtel metastaser
0,905
Negativ
101
48 (47,5) Review 53 (52,5) Review Positiv
228
106 (46,5) Review 122 (53,5) Review lymfatiska invasion
0,898
Negativ
248
117 (47,2) Review 131 (52,8) Review Positiv
81
37 (45,7) Review 44 (54,3) Review tumörstadium
0,589
IA, IB
63
33 (52,4) Review 30 (47,6)
IIA,
IIB 86
38 (44,2) Review 48 (55,8) Review IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1) Review 97 (53,9)
WD
, väl differentierade; MD
, måttligt differentierade; PD
, dåligt differentierade, UD
, odifferentierad.
Totalt 19 studier identifierades initialt. Fjorton studier uteslöts eftersom de inte inkluderar en prognostisk jämförelse mellan högt och lågt uttryck av claudin-4. En ytterligare studie uteslöts eftersom viktig information saknades [14]. Endast en studie utförd av prognostiska jämförelse baserad på orsaksspecifik överlevnad (CSS) [13], så det var uteslutet och vi gjorde total överlevnad (OS) den primära slutpunkten för vår metaanalys. Tre studier uppfyllde inklusionskriterierna och inkluderades i den slutliga analysen [15, 19, 34]. Poolade analysen visade att OS patienter med hög claudin-4 var bättre än i de med låg claudin-4 (Figur 3). Figur 3 Skogs tomt på sambandet mellan överlevnad och uttryck av claudin-4. O-E, observerade väntat.
Enligt univariat överlevnadsanalys, var claudin proteinuttryck inte förknippas med patienternas CSS (P
= 0,637) eller OS (P
= 0,469). Stratifierat underklass överlevnad analyser utfördes för T och N status, lymfatiska invasion, och tumörstadium, och ingen prognostisk skillnad konstaterades (Ytterligare fil 1: Figur S1). I jämförelsen av CSS, endast TNM stadium (P Hotel < 0,001) och lymfatiska invasion (P Hotel < 0,001) var betydande prognostiska faktorer. Efter Cox multivariat analys, endast TNM etapp var en signifikant prognostisk faktor (P Hotel < 0,001). Ingen överlevnads skillnad observerades mellan de tre typerna av tumörtillväxtmönster (P
= 0,069, Figur 4A). Ytterligare skiktad analys visade ingen signifikant prognostisk skillnad mellan patienter som uppvisade hög kontra lågt uttryck av claudin-4 i expanderande och infiltrativ typ magcancer. Men i mellan typ tillväxtmönster magcancer, prognosen för patienter som uppvisar låga nivåer av claudin-4 var signifikant bättre jämfört med dem med höga expressionsnivåer (P
= 0,023, Figur 4B). Detta resultat bekräftades också av Cox multivariat analys (P
= 0,037). Den femåriga cancerspecifik överlevnad för patienter med låga claudin-4 expressionsnivåer i medel typ magsäckscancer var 76,4%, vilket var liknande för alla expanderande typ gastric cancer (64,5%). Våra resultat indikerade att den femåriga CSS för patienter som uppvisar höga uttrycksnivåer av claudin-4 i mellan typ magsäckscancer var 46,6%, vilket var liknande infiltrativ typ gastric cancer (50,7%) (Figur 4C). Genom färgning av claudin-4 i det mellanliggande typ, omklassificeras vi det låga uttrycket av claudin-4 in i expanderande typ och hög expression av claudin-4 in infiltrativ typ och sammansatt två nya undergrupper. Det fanns en signifikant skillnad i prognosen mellan dessa två nya undergrupper (P
= 0,003, Figur 4D). Efter underklass överlevnadsanalys stratifierat av T status, N status, lymfatisk invasion och tumörstadium, fann vi att de prognostiska skillnader i två nya undergrupper var betydande i pT3 /4, LN (+), steg III, lymfa invasion (-) ( ytterligare fil 2: Figur S2). I multivariat analys, den nya klassificeringen var en signifikant prognostisk faktor (P
= 0,007). Figur 4 Kaplan-Meier överlevnadskurvor. (A) Jämförelse av överlevnad för tre typer av tumörtillväxt mönster; (B) jämförelse av överlevnaden hos patienter med låga och höga uttrycksnivåer av claudin-4 i mellan typ tillväxtmönster magcancer; (C) Kaplan-Meier överlevnadskurvor för expansions-typ, låga nivåer av claudin-4 i mellan typ, höga uttrycksnivåer av claudin-4 i mellan typ, och infiltrativ typ gastric cancer. (D) Jämförelse av överlevnad i två nya undergrupper.
Diskussion
claudin familjen av proteiner spelar en viktig roll i upprätthållandet av TJ funktion och uttrycksnivåerna ofta uppvisar en vävnadsspecifik mönster. På senare tid har ett ackumulerande antal studier visat ektopisk eller avvikande uttryck av claudins i många tumörtyper [25, 32, 35-37]. Bland Claudin subtyper, är ett uttryck för claudin-4 ofta förändras i olika tumörvävnader. Claudin-4 är ett integralt membranprotein som tillhör claudin familjen. Detta protein är en del av TJs, och är avgörande för att täta cellulära blad och styra paracellulär jonflödet [10].
Relativt få studier har undersökt expressionsnivåer claudin-4 i prekursor-lesioner. Cunningham et al
. [38] rapporterade en 15% expressionsnivån av claudin-4 i det normala magen, medan det i både intestinal metaplasi och dysplasi uttrycket av claudin-4 nådde 100%. Matsuda et al
. [36] har också rapporterat att claudin-4 detekterades i epitel av intestinal metaplasi men inte i normalt epitel. Våra färgningsresultat av prekursor skade prover var i överensstämmelse med dessa studier. Den höga expressionshastigheten claudin-4 under normal magslemhinna var mycket låg (endast 15,9%), medan intestinal metaplasi lesioner och gastriska epitel-dysplasi lesioner uppvisade en hög expressionsnivå nära 100%. Eftersom CLDN-4
uttrycks på höga nivåer i normala tunntarmen och tjocktarmen [11], är dess ökade uttryck i intestinal metaplasi överskådlig. Förblir emellertid det differentiella uttrycket av claudin-4 i normal slemhinna och celler som uppvisar dysplasi oklar. De primära morfologiska egenskaperna hos epitelial dysplasi är cellulära atypia, onormal differentiering och oorganiserade mucosal arkitektur; dessa förändringar potentiellt förknippade med förhöjd claudin-4 uttryck. De specifika underliggande mekanismerna behöver belysas ytterligare. Sammantaget våra resultat tyder på att claudin-4 skulle kunna tjäna som en molekylär markör för intestinal metaplasi och dysplasi i magslemhinnan.
I den aktuella studien fann vi att minskad expression av claudin-4 var signifikant associerad med histologiska differentiering i magcancer. Den differentierade gruppen uppvisade en högre uttryck hastighet claudin-4 jämfört med odifferentierade gruppen. Lee et al
. [18] rapporterade att reducerat uttryck av claudin-4 korrelerade med störningar av körtelstruktur och förlust av differentiering, vilket var i överensstämmelse med våra resultat.
Roll claudin-4 för prognos förblir kontroversiell. Resnicket al
. [13] rapporterade att ökad claudin-4 uttryck var en dålig prognostisk faktor för CSS i 146 patienter, och Soini et al
. [14] föreslås att claudin-4 inte associera med OS. Men resultaten av metaanalysen av denna studie tyder på att OS av patienter med hög claudin-4 var bättre än patienter med låg claudin-4. Resultaten överlevnadsanalys baserad på patienter i vår institution indikerade att claudin-4 inte var associerat med CSS eller OS, som liknade resultaten från Soini et al
., Men skiljer sig från andra studier.
Vissa tidigare studier har föreslagit att uppreglering av vissa claudins potentiellt bidrar till neoplasi genom att direkt ändra TJ funktion [39]. Överexpression av claudin-3 och 4 kan leda till en ökning i invasionen, motilitet och tumörcellöverlevnad [25]. Tvärtom i pankreatisk karcinom, överexpression av claudin-4 har associerats med signifikant reducerad invasivitet både in vitro
och in vivo
[40]. Även om vår studie omfattar nästan det största antalet fall i dag, den prognostiska roll claudin-4 i magcancer fortfarande oklar (P
= 0,637). Det är möjligt att olika populationer och olika miljöer bidrar till dessa olika resultat. Ytterligare studier, inklusive ett större antal prover är motiverat.
Histologiska tillväxtmönster är viktiga parametrar för bedömning av biologiska beteende magcancer. Baserat på tillväxtmönster och invasivitet Ming [41] rapporterade två typer av magcancer, den expanderande och infiltrativ type.The japanska Gastric Cancer Association delas magsäckscancer i tre typer baserat på tumörinfiltrerande (INF) tillväxt i omgivande vävnad: i Infa, tumör visar expanderande tillväxt med en tydlig gräns från den omgivande vävnaden; i INFb visar tumören en mellanliggande mönster mellan Infa och INFc; i INFc visar tumören infiltrativ tillväxt utan tydlig gräns med den omgivande vävnaden [42]. Denna sista typen är närmare vår klinisk praxis, i vilken föreligger den mellanliggande typ och är svåra att klassificera (Figur 5). I våra resultat, det fanns skillnader i överlevnad mellan de tre typerna, men inte signifikant (P
= 0,069). Överlevnaden hos patienter med mellanliggande typ var mellan expanderande och infiltrativa typerna. Intressant i skiktad analys fann vi att hög claudin-4 uttryck i samband med dålig prognos i mellantillväxtmönstret (P
= 0,023). Den femåriga överlevnaden med lågt uttryck av claudin-4 i mellan typ (76,4%) var liknande den typ expanderande (64,5%), medan gruppen med hög expression av claudin-4 (46,6%) var närmare infiltrativ typ (50,7%). Således kan vi eventuellt klassificera medel typ patienter enligt färgning av claudin-4. Vi omklassificeras patienter med låg expression av claudin-4 i den mellanliggande gruppen såsom att ha den typ som expanderar, och patienter med hög expression av claudin-4 som har den infiltrativ typ av tumör. Både univariata och multivariata analyser bekräftade att det fanns signifikanta skillnader i överlevnad mellan dessa två undergrupper. Efter skiktade klasser överlevnadsanalys, fann vi att de prognostiska skillnader i de två nya undergrupper var betydande i pT3 /4, LN (+), steg III, lymfa invasion (-). Även om ingen signifikant skillnad återfanns i andra underklasser, en viss trend fortfarande existerade och vi ansåg att de negativa resultaten av den statistiska analysen var på grund av den relativt lilla provstorleken. Sålunda kunde expressionen av claudin-4 potentiellt utnyttjas som en grund för att ytterligare identifiera gastric cancer i mellanliggande typ. Figur 5 Hematoxylin-eosin-färgning. De tre olika tillväxtmönster magcancer: (A) expanderande typ; (B) mellan typ; (C) infiltrativ typ. Förstoring x 100.
biologiska roll claudin-4 i magcancer är fortfarande oklart. Det har tidigare rapporterats att CLDN18
specifikt uttrycks i normal magslemhinna, men inte CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 uppregleras i mag adenokarcinom och ökad claudin-4 uttryck mer vanliga i intestinal-typ i motsats till diffusa-typ tumörer [13, 17]. Emellertid är claudin-18 nedreglerade i intestinal-type gastric cancer [22]. Dessa resultat tyder på att de distribution och expressionsnivåer av claudin proteiner kan variera i olika celler och vävnader i kroppen [43]. Ektopiskt uttryck av claudin vara associerad med tumörprogression. Ytterligare studier är motiverade att belysa funktionen av claudin-4 i utvecklingen av magcancer.
Slutsatser
Vi visade uppreglering av claudin-4 i intestinal metaplasi och gastrisk epitelial dysplasi, vilket tyder på dess potential användbarhet som en biomarkör i gastriska adenokarcinom prekursor skador. Uttryck av claudin-4 inte i samband med överlevnads, men det var förenat med dålig histologiska differentiering och infiltrativa mönster tumörtillväxt. Dessutom visade studien att uttryck av claudin-4 skulle kunna användas som grund för att ytterligare identifiera gastric cancer i mellan typ.
Notes
Jin-Liang Zhu, Peng Gao bidragit lika för detta arbete.
Förkortningar
AEC:
tre amino-9-etyl-karbazol
AJCC
amerikanska kommittén för cancer

CLDN
Claudin gen
CSS:
orsaka specifika överlevnad
FFPE:
formalin -Fast och paraffininbäddade
HR:
hazard ratio
INF:
tumörinfiltrerande

IS:
immunreaktivitet poäng
MeSH
medicinska ämnesord
MMP:
matrismetalloproteinas
OS:
överlevnad
TJ:
tight junction
TNM.
tumör nod-metastas
förklaringar
Tack
Vi tackar avdelningen för Surgical Oncology i första sjukhuset i Kina Medical University för att ge human gastrisk vävnad prover. Vi tackar också College of China Medical University för teknisk assistans i experiment. Detta arbete stöddes av National Science Foundation i Kina (nr 30.972.879 nr 81.201.888 och nr 81.172.370) och program för utbildning Institutionen för Liaoningprovinsen (L2011137).
Elektronisk kompletterande material
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff Ytterligare fil 1: Figur S1: Subklass överlevnadsanalys stratifierades av T-status, N-status, lymfatiska invasion och tumörstadium enligt färgning av claudin-4. Jämförelse av överlevnad mellan patienter med låga nivåer av claudin-4 och höga uttrycksnivåer i PT1-pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), scen I (E), etapp II (F), stadium III (G), lymfatiska invasion (-) (H), och lymfatiska invasion (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff Ytterligare fil 2: Bild S2: Subklass överlevnadsanalys stratifierat av T status, N status, lymfatisk invasion och tumörstadium enligt de två nya undergrupper. A-B. Jämförelse av överlevnaden mellan infiltrativ + intermediär (H) vs. expanderar + mellan (L) i pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), steg I (E), etapp II (F), scen Alla författare läst och godkänt den slutliga manuskriptet.

• Mekanism (er) av åtgärd ligger till grund för magskyddande effekten av etylacetat fraktionen erhållen från den råa metanolhaltiga lämnar extrakt av muntingia calabura calabura
• Laparoskopi-assisted kontra öppet D2 radikal gastrektomi för avancerad magsäckscancer utan serosala invasion: en fallkontrollstudie