Клинико-патологическими значение Claudin-4 при раке желудка

Клинико-патологическими значение Claudin-4 при раке желудка
Аннотация
Справочная информация
Aberrant экспрессии белков Claudin сообщалось в различных видов рака. Предыдущие исследования показали, что избыточная экспрессия клаудин может способствовать онкогенеза и метастазирования за счет увеличения инвазии и выживание опухолевых клеток. Тем не менее, прогностическое значение Claudin-4 при раке желудка, остается неясным.
Методы
Immunohistochemistry использовали для анализа экспрессии Claudin-4 в 329 клинических образцов рака желудка и 44 образцов нормального желудка, кишечника 21 образцов метаплазии, и 21 смежно предшественника поражениях образцов дисплазии. Статистические методы анализа использовались для определения взаимосвязи между экспрессией клаудин-4 и различных клинико-патологическими параметрами. Одномерных и многомерных анализы были выполнены, соответственно, для выявления независимых предикторов выживания.

Результаты экспрессии Claudin-4 присутствовал только в 7 (15,9%) нормальные образцы желудка, но экспрессия клаудин-4 в кишечном метаплазии поражений и дисплазией поражения составляет 90,5% и 95,2%, соответственно. Выражение Claudin-4 была в значительной степени связано с гистологической дифференцировки (P &
л; 0,001) и характер роста опухоли (P &
л; 0,001), но не связаны с выживаемостью пациентов. Тем не менее, промежуточный тип окрашивания Claudin-4 демонстрировали тенденцию к корреляции с выживаемостью пациентов (P = 0,023
). Скорость пятилетняя выживаемость с низкой экспрессией клаудин-4 в промежуточном типа (76,4%) был похож на расширение типа (64,5%), в то время как высокий уровень экспрессии группа (46,6%) был ближе к инфильтративного типа (50,7%). <бр> Выводы
выводы, содержащиеся в данном исследовании демонстрируют клаудин-4 аномальным выражение в рака желудка и предшественников поражений. Выражение клаудин-4 может служить в качестве основы для выявления рака желудка промежуточного типа.
Ключевые слова
Желудочный карцинома клаудин-4 Плотные соединения фона
рака желудка является одним из наиболее распространенных злокачественных новообразований, и приблизительно 738,000 смертей произошло из-за рака желудка в 2008 году во всем мире. Более 70% новых случаев заболевания и смерти происходят в развивающихся странах, особенно в Восточной Азии [1]. Рак желудка обычно понимается развиваться как многоступенчатой ​​прогрессии от хронического гастрита, атрофический гастрит, кишечная метаплазия, дисплазия, и, наконец, рака [2]. В ходе этого процесса, потеря клеточной полярности и нарушение межклеточных соединений часто наблюдается, и это играет важную роль в прогрессировании рака.
Плотные соединения (TJS) имеют решающее значение для поддержания нормальной структуры и физиологической функции эпителия и эндотелий [3, 4]. TJs служат не только в качестве физического барьера, предотвращающего растворенные вещества и воду из свободно проходя через парацеллюлярной пространство между эпителиальными и клеточных листов эндотелиальных, но также играют важную роль в поддержании полярности клеток и передачу сигнала [3, 5, 6]. Тем не менее, раковые клетки часто обнаруживают нарушение функции TJ [7].
Claudins являются членами большого семейства трансмембранных белков, которые являются одними из основных компонентов TJs и клаудин-аберрантное выражение потенциально приводит к структурным и функциональным повреждением TJs [ ,,,0],8]. В настоящее время, в общей сложности 24 генов клаудин были идентифицированы у млекопитающих, и они часто показывают модели Тканеспецифическая выражения [9]. В последнее время многочисленные исследования продемонстрировали аберрантную экспрессию claudins в нескольких человеческих раковых клеток [10, 11]. Насколько нам известно, выражение Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 и 23 было зарегистрировано в рака желудка [12-23]. Среди различных клаудин белков, связанных с раком желудка, функция клаудин-4 не была последовательной. Например, Юнг и др
. [15] и Отани и др
. [19] обнаружили, что экспрессия клаудин-4 достоверно коррелирует с благоприятным выживаемости пациентов с раком желудка в течение 72 и 124 случаев соответственно. Тем не менее, Резник и др
. [13] сообщили, что от умеренной до сильной клаудин-4 окрашивания при раке желудка было в значительной степени связано с плохой выживаемости в 146 случаях. Soiniet аль
. [14] не обнаружили четкую связь между клаудин-4 экспрессии и прогноз пациентов в 118 случаях. Интересно также, что экспрессия клаудин-4 было показано, играют важную роль в определении матричных металлопротеиназ (ММР) активностью, что указывает, что клаудин-4, возможно, опосредованное вторжение посредством активации ММР [24, 25]. Кроме того, предыдущие исследования сообщили, что клаудин-4 может иметь потенциал в качестве средства для лечения рака [26-28]. Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, чтобы прояснить эти противоречивые результаты и реальные функции Claudin-4. В данном исследовании мы стремились выявить ассоциации и клинико-прогностическое значение Claudin-4 экспрессии при раке желудка.
Методы
Пациенты и образцы ткани
В этом исследовании образцов тканей из в общей сложности 329 пациентов с рак желудка были получены в период с 1998 по 2004 год на кафедре хирургической онкологии, первая больница Китайского медицинского университета. Всем пациентам была выполнена радикальная гастрэктомия целебное со стандартной лимфодиссекции. Гистопатологические диагноз 21 кишечной метаплазии, дисплазии 21, 44 микроскопически нормальной слизистой оболочки желудка, и 329 образцов желудочного аденокарциномы из 329 пациентов была выполнена двумя независимыми патологоанатомов. Мы получили письменное информированное согласие от всех пациентов, и исследование было одобрено этическим комитетом Китайского медицинского университета. Ни один из пациентов не получал химиотерапию или лучевую терапию до хирургической процедуры. Детальные отчеты диагностики послеоперационного патологии были получены и включали пол, возраст, место опухоли, размер, состояние дифференциации, характер роста, и опухоль-узлов метастазы (TNM) стадии. Критерии классификации TNM для рака желудка были в соответствии с 7-2010 американского Объединенного комитета по вопросам рака (AJCC) постановка руководства [29]. Критерий для гистологической классификации дифференциации была в соответствии с 2000 Всемирной организации здравоохранения классификации карциномы желудка [30]. Критерий картины роста опухоли в соответствии с японской классификации карциномы желудка, 3-й английского издания. Все характеристики пациентов приведены в таблице 1. Образец пациента составили 238 мужчин и 91 пациентов женского пола со средним возрастом 57 лет (от 26 до 81 лет). Все пациенты находились под наблюдением по телефону запрос или вопросник, а время период наблюдения колебалась от 1 до 136 месяцев (в среднем 56 месяцев) .table 1 клиникопатологическими характеристики 329 больных с карциномы желудка
переменной

Значение <бр>
возраст на момент операции, у
Mean
57,0
Диапазон
26-81
род, число
Male
238
Женский
91
размер опухоли, см
Среднее
5,0
Диапазон
1,0, 15,0
Опухоль расположение, номер
верхней
31
Средний
53 <бр> Нижняя
245 состояния
Дифференциация, номер
хорошо дифференцированной
47
Умеренно дифференцированные
54
малодифференцированных
218
недифференцированных
10
модель роста, число
Расширение
76
промежуточное соединение
81
инфильтративный
172
Опухоль (T) этап, номер
T1
44 <бр> T2
52
T3
164
T4
69
Узел (N) стадии, число
N0
100
N1
39 <бр> N2
76
N3
114
лимфатической инвазии, количество
отрицательный результат
248
позитиве
этапе 81
опухоли, номер
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180
статистики естественного движения населения, номер
жив
152
мертвых, все причины <бр> 177
мертвых, рак желудка
143
мертвых, не связанные
22
информация недоступна
12
Immunohistochemistry
формалин фиксированной и парафин (FFPE) блоки ткани нарезали на 5-мкм срезы толщиной, затем депарафинировали с ксилолом и регидратации, используя градуированную серию этанола. Срезы инкубировали в кипящую буфер лимонной кислоты (рН 6,0) для извлечения антигена в скороварке пар. Срезы инкубировали в течение ночи при 4 ° С со следующими первичными антителами: анти-клаудин-4 моноклональное антитело, разведение 1: 100, клон 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, США. Иммуногистохимическое окрашивание проводили с использованием MaxVision TMHRP-Полимер анти-мышь /Кролик IHC Kit (Фучжоу Maixin, Китай) с 3-амино-9-этил карбазол (АЕС) в качестве субстрата фермента. Срезы затем слегка контрастному окрашиванию гематоксилином. Положительный контроль были слизистой оболочки толстой кишки и образцы, в которых первичное антитело было заменено не реагирующих антител служили в качестве отрицательного контроля.
Иммуноокрашивание результаты были интерпретированы независимо двумя патологоанатомов с использованием полуколичественный балльной системы [31]. Иммунным реакции оценивали по интенсивности окрашивания (0, отсутствие пятен; 1, слабый; 2, умеренное, 3, сильный), и процент окрашенных клеток эпителия (0, ≪ 5%; 1, 5 до 25%; 2, 26 до 50%; 3, 51 до 75%, и 4, > 75%). Процент позитивности эпителиальных клеток и интенсивности окрашивания были затем умножаются генерировать счет иммунореактивности (IS) для каждого конкретного случая. Образцы были rescored, если имели место расхождения в IS между двумя патологоанатомами, пока не был достигнут консенсус. Мы разделили образцы на две группы, основанные на результатах иммунным в тканях: низкое выражение (IS ≪ 4) и высокий уровень экспрессии (IS ≥ 4). Эта система оценки для Claudin-4 использовалась в предыдущих исследованиях [32].
Статистический анализ
мета-анализ был проведен для подтверждения роли Claudin-4 при раке желудка. Мы искали английскую литературу для соответствующих исследований, опубликованных до 1 июня 2013 года, используя PubMed базу данных со следующими условиями: «Желудок новообразования» и «клаудин-4 'в медицинских предметных рубрик (MeSH). Ссылки в статьях, извлекаемых были дополнительно обследованы на ранних оригинальных исследований. Критерии включения были пациенты с раком желудка, в том числе прогностического сравнения между высокой и низкой экспрессии Claudin-4. Соответствующие авторы связывались для получения недостающей информации, а некоторые исследования были исключены, если критическая информация по-прежнему не хватает после повторных запросов.
Для количественной агрегации результатов выживаемости, наблюдаемая ожидалось (OE) и дисперсия статистики были объединены, чтобы дать эффективное значение. Значения O-Е и дисперсии были оценены на основе имеющихся данных с использованием методов, сообщенные Тирни и др
. [33]. Если исследование дало отношение рисков (HR), были оценены значения O-Е и дисперсии на его основе. Если исследование не представила HR, но сообщает данные в виде кривой выживаемости, показатели выживаемости были извлечены в определенные заданные моменты времени для восстановления, по оценкам, HR и его дисперсию.
Мы использовали критерий хи-квадрат для оценки взаимосвязь между экспрессией клаудин-4 и различных клинико-патологическими параметрами. Анализ выживаемости проводили с использованием метода Каплана-Мейера, и различия между группами анализировали с помощью лог-ранговый критерий. Модель регрессии многомерный Кокс использовалась ступенчато вперед таким образом, чтобы обнаружить независимых предикторов выживания. Два хвостами P
-значения менее 0,05 считались указывают статистически значимый результат. Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения SPSS (версия 17.0, SPSS для Windows, Чикаго, Иллинойс, США). И RevMan 5.2 программного обеспечения для анализа (The Cochrane Collaboration)
Результаты
Claudin-4 иммунным окрашиванием произошел в основном мембранозной рисунком , при этом некоторые образцы показывая низкий уровень цитоплазматической окрашивания. Только 15,9% (7/44) нормальной слизистой оболочки желудка показали высокие уровни экспрессии клаудин-4. В противоположность этому, 90,5% (19/21) из кишечной метаплазией поражений и 95,2% (20/21) из желудка эпителиальную дисплазию поражений показали высокие уровни экспрессии клаудин-4. Из образцов желудочного рака исследованных, 53,2% (175/329) случаев показал высокую клаудин-4 выражение (рисунок 1). Рисунок 1 Claudin-4 иммунное окрашивание. (A) Нормальная желудка muscoma, отсутствие окрашивания; (B), кишечная метаплазия, высокий уровень экспрессии; (C) умеренно дифференцированы с хорошо дифференцированной рака желудка, высокая экспрессия; (D) слабо дифференцированы рак желудка, отсутствие окрашивания. Увеличение × 200.
Уровень экспрессии клаудин-4 достоверно коррелирует с дифференцировки опухоли (Р &
л; 0,001), пол (P
= 0,003), возраст (P
= 0.025) и местоположение опухоли (P = 0,033
). Согласно микроскопическим осмотром образца роста опухолей, 76 случаев были классифицированы как тип расширения и 172 случаев, как инфильтративно типа, в то время как 81 случаев были определены как промежуточного типа. Уровень экспрессии клаудин-4 также значительно коррелирует с характером роста опухоли (Р &
л; 0,001). Высокая экспрессия клаудин-4 наблюдалось в 69,7% от типа Разворачивание и 72,8% от промежуточного типа рака желудка, в то время как только 36,6% от инфильтративно типа обладали высокой экспрессии. Тем не менее, наши результаты не выявили существенной корреляции между выражением клаудин-4 и опухоли размером, глубиной инвазии, метастазирования лимфатических узлов, лимфатической инвазии и стадии опухоли (рисунок 2, таблица 2). Рисунок 2. Экспрессия Claudin-4 в нормальной слизистой оболочке желудка, кишечной метаплазии, дисплазии и рака (включая расширение, промежуточных и инфильтративных типов).
Таблица 2 Статистические результаты взаимоотношений между клаудин-4 и выражения различных клиникопатологическими характеристик изображения с переменной

Всего пациентов (%)

Пациенты с низким уровнем экспрессии клаудин-4 (%)

Пациенты с высоким Claudin-4expression (%)

P- значение

329
154 (46,8)
175 (53,2)
возраст на момент операции , у
0.025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9)
> 60
137
54 (39,4) 83
(60,6)
Пол
0,003
Мужской
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Женский
91
55 (60,4) 36
(39,6)
Патофизиологические особенности
размер опухоли (см)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7)
>
78 (60,0)
опухолевого место
0,033
Верхняя <5
130
52 (40,0) ш> 31
9 (29,0)
22 (71,0)
Средний
53
31 (58,5) 22
(41,5)
Нижняя
245
114 (46,5)
131 (53,5)
гистологического типа
&л; 0,001
Дифференцированный (WD, MD)
101
24 (23,8) 77
(76,2) <бр> Недифференцированный (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0)
модель роста
&л; 0,001
Расширение
76
23 (30,3 )
53 (69,7)
Промежуточное
81
22 (27,2)
59 (72,8)
Инфильтративная
172
109 (63,4) 63
( 36.6)
T этап
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44,2)
130 (55,8)
узел метастаз лимфа
0,905
Негативный
101
48 (47,5) 53
(52,5) Положительный

228
106 (46,5)
122 (53,5)
лимфатической инвазии
0,898
Негативный
248
117 (47,2)
131 (52,8)
Положительный <бр> 81
37 (45,7)
44 (54,3)
стадии опухолевого
0.589
IA, IB
63
33 (52,4) 30
(47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2) 48 (
55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1) 97 (
53,9)
WD
, хорошо дифференцированной; MD
, умеренно дифференцированные; PD
, слабо дифференцированы, UD
, недифференцированные.
В общей сложности 19 исследований были первоначально определены. Четырнадцать исследований были исключены, поскольку они не включают в себя прогностическую сравнение между высокой и низкой экспрессии Claudin-4. Еще одно исследование было исключено, так как важная информация отсутствовала [14]. Только одно исследование, проведенное прогностическое сравнение на основе конкретных причин выживаемости (CSS) [13], поэтому он был исключен, и мы сделали общую выживаемость (OS) первичной конечной точки нашего мета-анализа. Три исследования соответствовали критериям включения и были включены в окончательный анализ [15, 19, 34]. Объединенную анализ показал, что ОС пациентов с высокой Claudin-4 был лучше, чем у пациентов с низким клаудин-4 (рисунок 3). Рисунок 3 Лесной участок ассоциации между общей выживаемости и экспрессии Claudin-4. O-E, наблюдается ожидалось.
Согласно однофакторного анализа выживаемости, клаудин экспрессия белка не было связано с CSS пациентов (P = 0,637
) или OS (P = 0,469
). Стратифицированная выживания подкласса анализы были выполнены для T и N статус, лимфатической инвазии и стадии опухоли, а не прогностический различий не было найдено (дополнительный файл 1: Рисунок S1). В сравнении CSS, только TNM стадия (P &
л; 0,001) и лимфатической инвазии (P &
л; 0,001) были значительными прогностическими факторами. После Кокса многофакторного анализа, только TNM стадия является важным прогностическим фактором (P &
л; 0,001). Никаких различий в выживаемости не наблюдалось между тремя типами модели роста опухоли (P = 0,069
, Рисунок 4A). Далее расслаиваются анализ не выявили значительного прогностическую различия между пациентами, которые показали высокие по сравнению с низкой экспрессией Claudin-4 в расширении и инфильтративный типа рака желудка. Тем не менее, в промежуточном роста типа рисунка рака желудка, прогноз для пациентов, демонстрирующих низкие уровни экспрессии Claudin-4 значительно лучше по сравнению с теми, с высокими уровнями экспрессии (P = 0,023
, 4Б). Этот результат был также подтвержден многофакторного анализа Кокса (P = 0,037
). Скорость пятилетняя выживаемость рака специфических для пациентов с низким уровнем экспрессии клаудин-4 при раке желудка промежуточного типа был 76,4%, что было похоже на все рака желудка расширения типа (64,5%). Наши результаты показали, что пятилетняя CSS для пациентов, демонстрирующих высокие уровни экспрессии Claudin-4 при раке желудка промежуточного типа составила 46,6%, что было похоже на рака желудка инфильтративный типа (50,7%) (рис 4в). Через окрашивания Claudin-4 в промежуточном типе, мы отнесла низкую экспрессию Claudin-4 в расширение типа и высокий уровень экспрессии Claudin-4 в инфильтративного типа и состоит две новые подгруппы. Был существенная разница в прогнозе между этими двумя новыми подгруппами (P
= 0,003, рис 4D). После анализа выживаемости подкласса стратифицированного по T статуса, N статус, лимфатической инвазии и стадии опухоли, мы обнаружили, что прогностические различия двух новых подгрупп были значительными в pT3 /4, LN (+), стадия III, лимфа инвазия (-) ( Дополнительный файл 2: Рисунок S2). В многомерном анализе, новая классификация является важным прогностическим фактором (P
= 0,007). На рисунке 4 кривые выживаемости Каплана-Мейера. (А) Сравнение выживаемости для трех типов модели роста опухоли; (B) Сравнение выживаемости у пациентов с низким и высоким уровнем экспрессии Claudin-4 в промежуточный тип модели роста рака желудка; Кривые выживаемости (C) Каплана-Мейера для расширения типа, низкие уровни экспрессии клаудин-4 промежуточного типа, высокие уровни экспрессии клаудин-4 в промежуточном типа и инфильтративно-типа рак желудка. (D) Сравнение выживаемости в двух новых подгрупп.
Обсуждение
The Claudin семейство белков играет важную роль в поддержании функции TJ, и уровни экспрессии часто демонстрируют образец тканеспецифичную. В последнее время, аккумулирующий количество исследований продемонстрировали внематочной или аномальным экспрессию claudins во многих типах опухолей [25, 32, 35-37]. Среди клаудин подтипов, экспрессия клаудин-4 часто изменяются в различных опухолевых тканях. Claudin-4 представляет собой интегральный мембранный белок, который принадлежит к семейству Claudin. Этот белок является составной частью TJs, и имеет решающее значение для герметизации клеточных листов и управления парацеллюлярного поток ионов [10].
Относительно небольшое число исследований исследовали уровни экспрессии Claudin-4 в предраковых. Каннингем и др
. [38] сообщили уровень экспрессии 15% от клаудин-4 в нормальном желудке, в то время как в обоих кишечной метаплазией и дисплазией экспрессия клаудин-4 достигает 100%. Мацуда и др
. [36] также сообщили, что клаудин-4 была обнаружена в эпителии кишечной метаплазией, но не в нормальном эпителии. Наши результаты окрашивания предшественников образцов поражения были в соответствии с этими исследованиями. Высокая скорость экспрессии клаудин-4 в нормальной слизистой оболочке желудка была очень низкой (только 15,9%), в то время как кишечной метаплазией поражений желудка и эпителиальную дисплазию поражения проявляли высокий уровень экспрессии, близкий к 100%. Поскольку CLDN-4
экспрессируется на высоком уровне в нормальной тонкой кишки и толстой кишки [11], его повышенная экспрессия в кишечной метаплазией Легко понять. Тем не менее, дифференциальное выражение Claudin-4 в нормальной слизистой оболочке и клеток, проявляющих дисплазию остается неясным. Основные морфологические признаки эпителиальной дисплазии являются клеточной атипии, аномальной дифференциацией и неорганизованного архитектуры слизистых оболочек; эти изменения потенциально связаны с повышенным уровнем экспрессии клаудин-4. Конкретные механизмы, лежащие в основе должны быть дополнительно выяснены. Взятые вместе, наши результаты показывают, что клаудин-4 потенциально может служить в качестве молекулярного маркера кишечной метаплазии и дисплазии в слизистой оболочке желудка.
В настоящем исследовании мы обнаружили, что снижение экспрессии Claudin-4 была в значительной степени связано с гистологической дифференцировки рак желудка. Дифференцированный группы демонстрировали более высокий уровень экспрессии Claudin-4 по сравнению с недифференцированной группы. Lee и др
. [18] сообщили, что пониженную экспрессию Claudin-4 коррелировало с нарушением железистой структуры и потеря дифференцировки, которая была в соответствии с нашими результатами.
Роль Claudin-4 для прогноза остается спорным. Resnicket аль
. [13] сообщили, что повышенная экспрессия клаудин-4 был плохим прогностическим фактором для CSS в 146 пациентов, и Сойни др
. [14] предположил, что клаудин-4 не ассоциируется с ОС. Тем не менее, результаты мета-анализа этого исследования свидетельствуют о том, что операционная система пациентов с высокой Claudin-4 был лучше, чем у пациентов с низким Claudin-4. Анализ выживаемости результаты, основанные на пациентах в нашем институте показали, что клаудин-4 не был связан с CSS или ОС, которая была похожа на результаты Сойни и др
., Но отличается от других исследований.
Некоторые предыдущие исследования предположили, что усиление активности некоторых claudins потенциально способствует неоплазии путем прямого изменения функции TJ [39]. Избыточная экспрессия клаудин-3 и 4, может привести к увеличению инвазии, моторики и выживаемости опухолевых клеток [25]. Напротив, при раке поджелудочной железы, избыточная экспрессия клаудин-4 было связано со значительно сниженной инвазивности как в лабораторных условиях
и в естественных условиях
[40]. Хотя наше исследование включает в себя почти наибольшее число случаев в настоящее время, прогностическую роль Claudin-4 при раке желудка остается неоднозначным (P = 0,637
). Вполне возможно, что различные группы населения и различные среды способствуют этим различным результатам. Дальнейшее исследование, включая большее количество образцов является оправданным.
Гистологические модели роста являются важными параметрами для оценки биологического поведения рака желудка. На основе закономерностей роста и инвазии, Мин [41] сообщили два типа рака желудка, расширяющей и Ассоциация рака инфильтративный type.The Японский Желудочный рак желудка делится на три типа, основанные на опухолевой-инфильтрации (INF) роста в окружающие ткани: в инфа, опухолевые отображает рост расширяющиеся с ярко выраженной границей от окружающей ткани; в INFb, опухоль показывает промежуточную картину между инфа и INFC; в INFC, опухоль отображает инфильтративный рост без каких-либо четкой границы с окружающей тканью [42]. Этот последний тип ближе к нашей клинической практике, в которой промежуточный тип существует и трудно классифицировать (рисунок 5). В наших результатах, существуют различия в выживаемости между этими тремя типами, но не имеет существенного значения (P = 0,069
). Уровень выживаемости у больных с промежуточным типом были между расширяющей и инфильтративных типов. Интересно, что в стратифицированной анализа мы обнаружили, что высокий уровень экспрессии клаудин-4 был связан с плохим прогнозом в промежуточном модели роста (P
= 0,023). Скорость пятилетняя выживаемость с низкой экспрессией клаудин-4 в промежуточном типа (76,4%) был похож на тип расширяющегося (64,5%), в то время как группа с высокой экспрессией клаудин-4 (46,6%) был ближе к инфильтративный тип (50,7%). Таким образом, мы могли бы потенциально классифицировать пациентов промежуточного типа в соответствии с окрашиванием клаудин-4. Мы реклассифицировала пациентов с низкой экспрессией Claudin-4 в промежуточной группе, как имеющие тип расширяясь, и пациентов с высокой экспрессии Claudin-4, как имеющий инфильтративный тип опухоли. Оба одномерного и многомерного анализа подтвердили, что существуют значительные различия в выживаемости между этими двумя подгруппами. После анализа пластовых подклассы выживания, мы обнаружили, что прогностические различия в двух новых подгрупп были значительными в pT3 /4, LN (+), стадия III, лимфа инвазия (-). Хотя никаких существенных различий не было найдено в других подклассов, определенная тенденция по-прежнему существует, и мы считали, что отрицательные результаты статистического анализа были из-за относительно небольшого размера выборки. Таким образом, выражение клаудин-4 потенциально могут быть использованы в качестве основы для дальнейшей идентификации рак желудка промежуточного продукта типа. Рисунок 5 окрашивание гематоксилином-эозином. Три различные модели роста рака желудка: (А) расширение типа; (B) промежуточный тип; (C) инфильтративный тип. Увеличение × 100.
Биологическая роль Claudin-4 при раке желудка, остается неясным. Ранее было сообщено, что CLDN18
специфически экспрессируется в нормальной слизистой оболочке желудка, но не CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 усиливает свою активность в желудочном аденокарциномы, а также повышенная экспрессия клаудин-4 чаще наблюдаются в кишечном типа, в отличие от диффузного типа опухоли [13, 17]. Тем не менее, клаудин-18 подавляется при раке кишечного типа желудка [22]. Эти результаты свидетельствуют о том, что уровни распределения и экспрессии белков Claudin могут различаться в различных клетках и тканях организма [43]. Эктопическая экспрессия Claudin потенциально связана с опухолевой прогрессии. Необходимы дальнейшие исследования для выяснения функции Claudin-4 в прогрессии рака желудка.
Выводы
Мы продемонстрировали положительную регуляцию Claudin-4 в кишечной метаплазии и дисплазии эпителия желудка, что свидетельствует о его потенциальной полезности в качестве биомаркера желудочные предраковых аденокарциномы. Выражение Claudin-4 не было связано с выживанием, но это было связано с плохим гистологической дифференцировки и инфильтративных форм роста опухоли. Кроме того, это исследование показало, что экспрессия Claudin-4 потенциально могут быть использованы в качестве основы для дальнейшей идентификации желудка рак промежуточного типа.
Notes
Jin-Лян Чжу, Пэн Гао также внесли вклад в эту работу.
Сокращения
AEC:
3-амино-9-этил карбазол


AJCC:
Американский Объединенный комитет по вопросам рака

<бр> CLDN:
гена Claudin


CSS:
причинно-специфическая выживаемость


FFPE:
формалина -fixed и парафин


HR:
отношение рисков


INF:
опухоли инфильтрации


IS:
иммунореактивности оценка


MeSH:
медицинских предметных рубрик


ММР:
матрица металлопротеиназы


ОС:
общей выживаемости


TJ:
плотные контакты


TNM:.
опухолевого узла-метастаз


декларациях
Выражение признательности
Мы благодарим отделение хирургической онкологии Первой больницы Китайского медицинского университета для обеспечения ткани желудка человека образцы. Мы также благодарим Колледж Китайского медицинского университета за техническую помощь в экспериментах. Эта работа была поддержана Национальным научным фондом Китая (№ 30972879 No. 81201888 и № 81172370) и Программа Департамента образования провинции Ляонин (L2011137).
Электронный дополнительный материал
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff Дополнительный файл 1: Рисунок S1: Подкласс анализ выживаемости стратифицированы T статуса, N статус, лимфатической инвазии и стадии опухоли в соответствии с окрашиванием Claudin-4. Сравнение выживаемости между пациентами с низким уровнем экспрессии клаудин-4 и высокий уровни экспрессии в pT1-рТ2 (A), PT3-pT4 (В), LN (-) (C), LN (+), (D), этап I (Е), этап II (F), III этап (G), лимфатической инвазии (-) (Н), и лимфатической инвазии (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff Дополнительный файл 2: Рисунок S2: анализ выживаемости Подкласс стратифицированных по статусу T, N статус, лимфатической инвазии и стадии опухоли в соответствии с двумя новыми подгруппами. A-B. Сравнение выживаемости между инфильтративно + промежуточное соединение (H) против. расширение + промежуточное соединение (L) в pT1- рТ2 (А), PT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), этап I (E), этап II (F), этап III (G), лимфатической инвазии (-) (Н), и лимфатической инвазии (+) (I). Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Механизм (ы) действия, лежащей в основе гастропротекторный эффект этиловом фракции ацетата, полученного из сы…
• Лапароскопия при содействии по сравнению с открытой радикальной гастрэктомии D2 для поздних стадий рака желу…