importance clinicopathologique de claudine-4 dans le carcinome gastrique

importance clinicopathologique de claudine-4 dans le carcinome gastrique
Résumé de l'arrière-plan
expression Aberrant de protéines Claudin a été rapporté dans une variété de cancers. Des études antérieures ont démontré que la surexpression de la claudine peut favoriser la tumorigenèse et la métastase en augmentant l'invasion et la survie des cellules tumorales. Cependant, la signification pronostique de la claudine-4 dans le cancer gastrique reste incertaine.
Méthodes
immunohistochimie a été utilisé pour analyser l'expression de claudine-4 329 spécimens de cancer gastrique cliniques et 44 échantillons d'estomac normaux, 21 échantillons de métaplasie intestinale, et 21 précurseur adjacentes lésions échantillons de dysplasie. Les méthodes d'analyse statistique ont été utilisés pour évaluer la relation entre l'expression claudine-4 et divers paramètres clinicopathologiques. Résultats des analyses univariée et multivariée ont été réalisées, respectivement, pour détecter les facteurs prédictifs indépendants de la survie.
Claudin-4 expression était présente dans seulement 7 (15,9%) des échantillons gastriques normaux, mais l'expression de claudine-4 dans l'intestin lésions métaplasie et des lésions de dysplasie était de 90,5% et 95,2%, respectivement. L'expression de claudine-4 était significativement associée à la différenciation histologique (P
< 0,001) et les modèles de croissance de la tumeur (P
< 0,001), mais pas associé à la survie des patients. Cependant, le type intermédiaire coloration de claudine-4 a montré une tendance de corrélation avec la survie des patients (P = 0,023
). Le taux de survie à cinq ans avec une faible expression de claudine-4 type intermédiaire (76,4%) était similaire à l'expansion de type (64,5%), tandis que le groupe d'expression élevé (46,6%) était plus proche du type infiltrant (50,7%).
conclusions
Les résultats de cette étude démontrent claudine-4 expression aberrante dans les lésions cancéreuses et précurseurs gastriques. L'expression de claudine-4 pourrait servir de base pour identifier le cancer gastrique de type intermédiaire.
Mots-clés
Gastric cancer Claudin-4 jonctions serrées Contexte
Le cancer gastrique est l'une des tumeurs malignes les plus courantes, et environ 738.000 décès sont survenus en raison de cancer gastrique en 2008 dans le monde entier. Plus de 70% des nouveaux cas et des décès surviennent dans les pays en développement, en particulier en Asie orientale [1]. Le cancer gastrique est généralement compris de se développer comme une progression de plusieurs étapes gastrite chronique, gastrite atrophique, la métaplasie intestinale, la dysplasie, et enfin le cancer [2]. Au cours de ce processus, la perte de la polarité cellulaire et la perturbation des jonctions cellule-cellule est fréquemment observée, ce qui joue un rôle important dans la progression du cancer.
Jonctions serrées (TJS) sont essentiels pour maintenir la structure normale et la fonction physiologique de l'épithélium et endothélium [3, 4]. TJ non seulement servir de barrière physique pour empêcher solutés et de l'eau de passer librement à travers l'espace paracellulaire entre l'épithélium et les feuilles de cellules endothéliales, mais jouent également un rôle crucial dans le maintien de la polarité cellulaire et la transduction du signal [3, 5, 6]. Cependant, les cellules cancéreuses présentent souvent fonction de TJ anormale [7].
Claudins sont membres d'une grande famille de protéines transmembranaires qui sont parmi les composantes essentielles de TJs et claudine-expression aberrante conduit potentiellement à des dommages structurels et fonctionnels des TJs [ ,,,0],8]. À l'heure actuelle, un total de 24 gènes Claudin ont été identifiés chez les mammifères, et ils présentent souvent des modèles d'expression [9] spécifiques aux tissus. Récemment, de nombreuses études ont démontré l'expression aberrante de claudines dans plusieurs cancers humains [10, 11]. À notre connaissance, l'expression de Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 et 23 ont été rapportés dans les cancers gastriques [12-23]. Parmi les diverses protéines Claudin liées au cancer gastrique, la fonction de claudine-4 n'a pas été conforme. Par exemple, Jung et al
. [15] et Ohtani et al
. [19] ont montré que l'expression de la claudine-4 significativement corrélée avec la survie favorable chez les patients atteints d'un cancer gastrique 72 et 124 cas, respectivement. Cependant, Resnick et al
. [13] ont rapporté que modérée à forte claudine-4 coloration dans le cancer gastrique était significativement associée à une faible survie dans 146 cas. Soiniet al
. [14] ont trouvé aucune association claire entre la claudine-4 expression et le pronostic des patients dans 118 cas. Il est intéressant aussi, l'expression de claudine-4 a été montré à jouer un rôle dans la détermination de la matrice métalloprotéinase (MMP) l'activité, ce qui indique que la claudine-4 aurait pu médiée invasion par l'activation de MMP [24, 25]. En outre, des études antérieures rapporté que claudine-4 pourrait avoir un potentiel en tant que traitement pour le cancer [26-28]. Ainsi, d'autres recherches sont nécessaires pour clarifier ces résultats controversés et les fonctions réelles de claudine-4. Dans cette étude, nous avons cherché à identifier les associations clinicopathologiques et valeur pronostique de l'expression de claudine-4 dans le cancer gastrique.
Méthodes
Patients et échantillons de tissus
à cette étude, des échantillons de tissus sur un total de 329 patients avec le cancer gastrique ont été obtenus entre 1998 et 2004 au département d'oncologie chirurgicale, le premier hôpital de l'Université médicale de Chine. Tous les patients ont subi une gastrectomie radicale curative à la norme dissection des ganglions lymphatiques. Le diagnostic histopathologique de 21 métaplasie intestinale, la dysplasie 21, 44 muqueuse gastrique normale au microscope, et 329 échantillons d'adénocarcinome gastrique de 329 patients a été réalisée par deux pathologistes indépendants. Nous avons obtenu le consentement éclairé de tous les patients, et l'étude a été approuvé par le comité d'éthique de l'Université médicale de Chine. Aucun des patients avaient reçu une chimiothérapie ou une radiothérapie avant l'intervention chirurgicale. Les rapports détaillés de diagnostic de pathologie post-opératoire ont été obtenus et comprenaient le sexe, l'âge, l'emplacement de la tumeur, la taille, le statut de différenciation, modèle de croissance, et la tumeur-node-métastases (TNM) stade. Les critères de classification TNM pour le carcinome gastrique étaient conformes à la 7ème American Joint Committee 2010 sur le cancer (AJCC) Manuel de mise en scène [29]. Le critère de classement histopathologique de différenciation était conforme à la directive 2000 organisation mondiale de la santé classification du cancer gastrique [30]. Le critère pour le modèle de croissance de la tumeur était conforme à la classification japonaise de carcinome gastrique, 3e édition anglaise. Les caractéristiques de tous les patients sont résumées dans le tableau 1. L'échantillon de patient comprend 238 91 patientes avec un âge moyen de 57 ans (intervalle de 26 à 81 ans) et masculins. Tous les patients ont été suivis par enquête téléphonique ou d'un questionnaire, et le temps de suivi allaient de 1 à 136 mois (médiane de 56 mois) .Table 1 caractéristiques clinicopathologiques de 329 patients atteints d'un carcinome gastrique de variable
Valeur
L'âge à la chirurgie, y
Mean
57,0
Range
26-81
Sexe, numéro Masculin 238
Femme
91
taille de la tumeur, cm
moyenne
5.0
Range
1.0, 15.0 emplacement
Tumor, numéro
31
Moyen Upper
53
Lower
245 statut
Différenciation, numéro
bien différencié
47
différenciés Modérément
54
mal différencié
218
indifférencié
10
modèle de croissance, le nombre
expansion
76
intermédiaire de 81
Infiltrative de 172
tumeur (T) du stade, le nombre
T1
44
52
T3 T2
164
69
Node (N) stade de T4, le nombre
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
invasion lymphatique, le nombre

négatif 248
étape 81
tumorale de positif, le nombre
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180 statistiques
état civil, numéro
Vivant
152
morts, toutes causes confondues
177
Morte cancer gastrique,
143
Morte,
sans rapport avec 22
information non disponible
12
immunohistochimie
Le fixés au formol et inclus en paraffine (FFPE) blocs de tissus ont été découpés en sections de 5 um d'épaisseur, puis déparaffinées avec du xylène et réhydratées en utilisant une série graduée d'éthanol. Les sections ont été incubées dans un tampon d'ébullition de l'acide citrique (pH 6,0) pour la récupération de l'antigène dans un cuiseur à pression de vapeur. Les sections ont été incubées pendant une nuit à 4 ° C avec les anticorps primaires suivants: anticorps monoclonal anti-Claudin-4, 1: 100 dilution, clone 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, USA. La coloration immunohistochimique a été réalisée en utilisant le Maxvision TMHRP-Polymer anti-souris /lapin Kit IHC (Fuzhou Maixin, Chine) avec carbazole 3 amino-9-éthyl (AEC) comme substrat de l'enzyme. Les sections ont ensuite été légèrement de contraste avec l'hématoxyline. Des témoins positifs étaient la muqueuse du côlon et des échantillons dans lesquels l'anticorps primaire a été remplacée par des anticorps non réactifs ont servi de contrôles négatifs.
immunocoloration résultats ont été interprétés indépendamment par deux pathologistes en utilisant un système de notation semi-quantitative [31]. Les réactions d'immunocoloration ont été évaluées par une intensité de coloration (0, aucune tache; 1, faible, 2, modéré, 3, fort) et le pourcentage de cellules épithéliales colorées (0, < 5%, 1, 5 à 25%; 2, 26-50%; 3, 51 à 75%; et 4 > 75%). La positivité pour cent des cellules épithéliales et intensité de coloration ont ensuite été multiplié pour générer le score de immunoréactivité (IS) pour chaque cas. Des échantillons ont été réévaluées s'il y avait des anomalies dans IS entre les deux pathologistes, jusqu'à ce qu'un consensus a été atteint. Nous avons divisé les échantillons en deux groupes sur la base des résultats de l'immunocoloration dans les tissus: une faible expression (IS < 4) et une expression élevée (IS ≥ 4). Ce système d'évaluation pour claudine-4 a été utilisé dans des études précédentes [32] L'analyse statistique de.
Une méta-analyse a été effectuée pour confirmer le rôle de claudine-4 dans le cancer gastrique. Nous avons cherché la littérature anglaise pour les études pertinentes publiées avant le 1er Juin 2013, en utilisant la base de données PubMed avec les termes suivants: «Tumeur de l'estomac» et «claudine-4 'dans l'objet rubriques médicales (MeSH). Références dans les articles extraits ont ensuite été sélectionnés pour des études antérieures originales. Les critères d'inclusion étaient des patients atteints de cancer gastrique, y compris une comparaison entre l'expression pronostique haute et basse de la claudine-4. Les auteurs correspondants ont été contactés pour obtenir les informations manquantes, et certaines études ont été exclues si l'information critique manquait toujours après des demandes répétées.
Pour l'agrégation quantitative des résultats de la survie, l'observé prévu (OE) statistique et de la variance ont été combinés pour donner la valeur effective. Les valeurs O-E et les variances ont été estimées à partir des données disponibles en utilisant les méthodes déclarées par Tierney et al
. [33]. Si l'étude a fourni un rapport de risque (HR), on estime que les valeurs et les écarts O-E sur cette base. Si l'étude n'a pas fourni de ressources humaines, mais a rapporté les données sous la forme d'une courbe de survie, les taux de survie ont été extraits à certains moments précis pour reconstruire une HR estimée et sa variance.
Nous avons utilisé le test du chi carré pour évaluer la relation entre l'expression claudine-4 et divers paramètres clinicopathologiques. L'analyse de survie a été réalisée en utilisant la méthode de Kaplan-Meier, et les différences entre les groupes ont été analysés en utilisant le test du log-rank. Le modèle multivarié de régression de Cox a été utilisé d'une manière progressive vers l'avant afin de détecter les prédicteurs indépendants de la survie. P
-values ​​moins de 0,05 ont été considérés pour indiquer un résultat statistiquement significatif à deux queues. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l'aide du logiciel SPSS (version 17.0, SPSS pour Windows, Chicago, IL, USA). Les résultats de et RevMan 5.2 logiciel d'analyse (La Collaboration Cochrane)
Claudin-4 immunocoloration se sont produits dans un modèle principalement membraneuse , avec quelques échantillons affichant un niveau de coloration cytoplasmique faible. Seulement 15,9% (7/44) de la muqueuse gastrique normale présentait des niveaux d'expression élevés de claudine-4. En revanche, 90,5% (19/21) des lésions et une métaplasie intestinale 95,2% (20/21) des lésions de l'épithélium gastrique présentaient une dysplasie des niveaux d'expression élevés de la claudine-4. Parmi les échantillons de carcinome gastrique étudiés, 53,2% (175/329) des cas démontré haute claudine-4 expression (Figure 1). Figure 1 Claudin-4 immunocoloration. (A) muscoma gastrique normal, pas de coloration; (B) de la métaplasie intestinale, une expression élevée; (C) modérément différencié au cancer de l'estomac bien différencié, une expression élevée; (D) de cancer gastrique peu différencié, aucune coloration. Grossissement × 200.
Le niveau de claudine-4 expression était significativement corrélée avec la différenciation de la tumeur (P
< 0,001), le sexe (P
= 0,003), l'âge (P = 0,025
) et localisation de la tumeur (P = 0,033
). Selon l'inspection microscopique du modèle de croissance de la tumeur, 76 cas ont été classés comme le type d'expansion et de 172 cas que le type infiltrant, alors que 81 cas ont été déterminés à être le type intermédiaire. Le niveau de claudine-4 expression a également été significativement corrélée avec le modèle de croissance de la tumeur (P
< 0,001). Une expression élevée de la claudine-4 a été observée chez 69,7% du type à expansion et 72,8% du type intermédiaire d'un cancer gastrique, tandis que seulement 36,6% du type exposé infiltrant une expression élevée. Cependant, nos résultats ont révélé aucune corrélation significative entre l'expression de claudine-4 et taille de la tumeur, la profondeur de l'invasion, métastase ganglionnaire, invasion lymphatique, et le stade de la tumeur (figure 2, tableau 2). Figure 2 Expression de claudine-4 dans la muqueuse de l'estomac normal, la métaplasie intestinale, la dysplasie et le cancer (y compris l'expansion, les types intermédiaires et infiltrants).
Tableau 2 Résultats statistiques de relations entre claudine-4 expression et diverses caractéristiques clinicopathologiques
variable
Total patients (%)
patients à faible claudine-4 expression (%)
Les patients atteints de haute claudine-4expression (%)
P- valeur
329
154 (46,8)
175 (53,2)
Age à la chirurgie , y
0,025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9)
> 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
Sexe
0,003
Homme
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Femme
91
55 (60,4)
36 (39,6)
caractéristiques physiopathologiques
taille de la tumeur (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7)
> 5
130
52 (40,0)
78 (60,0)
emplacement de la tumeur
0,033
Upper
31
9 (29,0)
22 (71,0)
Moyen
53
31 (58,5)
22 (41,5)
Lower
245
114 (46,5)
131 (53,5)
Le type histologique
< 0,001
Différenciation (WD, MD): 101
24 (23,8)
77 (76,2)
indifférencié (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0)
modèle de croissance
< 0,001
expansion
76
23 (30,3 )
53 (69,7)
Intermediate
81
22 (27,2)
59 (72,8)
Infiltrative
172
109 (63,4)
63 ( 36.6)
T stade
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44.2)
130 (55,8)
ganglionnaire métastase
0,905
négatif
101
48 (47,5)
53 (52,5)
positif
228
106 (46,5)
122 (53,5)
invasion lymphatique
0,898
négatif
248
117 (47,2)
131 (52,8)
positif
81
37 (45,7)
44 (54,3)
stade de la tumeur
0,589
IA, IB
63
33 (52,4)
30 (47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, bien différencié; MD
, modérément différencié; PD
, mal différencié, UD
, indifférencié.
Au total, 19 études ont été initialement identifiés. Quatorze études ont été exclues parce qu'elles ne comprennent pas une comparaison entre l'expression pronostique haute et basse de la claudine-4. Une autre étude a été exclue parce que l'information critique avait disparu [14]. Une seule étude effectuée la comparaison pronostique basée sur une cause spécifique de survie (CSS) [13], il a été exclu et nous avons fait la survie globale (OS) le point final primaire de notre méta-analyse. Trois études ont répondu aux critères d'inclusion et ont été inclus dans l'analyse finale [15, 19, 34]. L'analyse combinée a indiqué que le système d'exploitation des patients souffrant d'hypertension claudine-4 était mieux que dans ceux avec le faible claudine-4 (Figure 3). Figure 3 parcelle de l'association entre la survie globale et l'expression de claudine-4 Forest. O-E, observé attendu.
Selon l'analyse de survie univariée, l'expression de la protéine claudine n'a pas été associée à la CSS de patients (P = 0,637
) ou OS (P = 0,469
). sous-classe de survie stratifiées a réalisé des analyses T et de l'état N, invasion lymphatique, et le stade de la tumeur, et aucune différence pronostique a été trouvé (fichier supplémentaire 1: Figure S1). Dans la comparaison des CSS, seul stade TNM (P
< 0,001) et lymphatique invasion (P
< 0,001) étaient des facteurs pronostiques significatifs. Après analyse multivariée de Cox, que le stade TNM était un facteur pronostique significatif (P
< 0,001). Aucune différence de survie a été observée entre les trois types de motif de la croissance tumorale (p = 0,069
, figure 4A). Une analyse plus poussée a montré stratifié aucune différence pronostique significative entre les patients qui présentaient élevée ou faible expression de claudine-4 dans l'expansion et le cancer gastrique de type infiltrant. Cependant, dans le modèle de cancer gastrique intermédiaire de croissance de type, le pronostic des patients présentant de faibles niveaux d'expression de claudine-4 a été nettement meilleure par rapport à ceux qui ont des niveaux élevés d'expression (P = 0,023
, figure 4B). Ce résultat a été confirmé par l'analyse multivariée de Cox (P = 0,037
). Le taux de survie à cinq ans spécifique au cancer pour les patients ayant un faible claudine-4 niveaux d'expression dans le cancer gastrique de type intermédiaire était de 76,4%, ce qui est similaire à tous les cancers gastriques de type expansion (64,5%). Nos résultats indiquent que le taux de CSS de cinq ans pour les patients présentant des niveaux d'expression élevés de claudine-4 dans le cancer gastrique de type intermédiaire était de 46,6%, ce qui était similaire à des cancers de type infiltrant gastriques (50,7%) (figure 4C). Grâce à la coloration de claudine-4 dans le type intermédiaire, nous avons reclassé la faible expression de claudine-4 en élargissant le type et une expression élevée de claudine-4 dans le type infiltrant et composé de deux nouveaux sous-groupes. Il y avait une différence significative dans le pronostic de ces deux nouveaux sous-groupes (P = 0,003
, la figure 4D). Après une analyse sous-classe de survie stratifiées selon le statut T, l'état N, envahissement ganglionnaire et le stade de la tumeur, nous avons constaté que les différences pronostiques de deux nouveaux sous-groupes étaient significatives dans le pT3 /4, LN (+), stade III, invasion lymphatique (-) ( fichier supplémentaire 2: Figure S2). En analyse multivariée, la nouvelle classification a été un facteur pronostique significatif (P
= 0,007). La figure 4 les courbes de survie de Kaplan-Meier. (A) Comparaison de la survie pour les trois types de motif de la croissance tumorale; (B) comparaison de la survie chez les patients ayant des niveaux d'expression basse et haute de claudine-4 dans le cancer gastrique modèle de croissance de type intermédiaire; Les courbes de survie (C) de Kaplan-Meier pour type expansion, de faibles niveaux d'expression de claudine-4 en-type intermédiaire, les niveaux d'expression élevés de claudine-4 en-type intermédiaire, et les cancers gastriques de type infiltrant. Rapport de (D) Comparaison de la survie dans deux nouveaux sous-groupes.
La famille claudine de protéines joue un rôle important dans le maintien de la fonction TJ, et les niveaux d'expression présentent souvent un motif spécifique d'un tissu. Récemment, un nombre accumulation d'études ont démontré l'expression ectopique ou aberrante de claudines dans nombreux types de tumeurs [25, 32, 35-37]. Parmi les sous-types de Claudin, l'expression de claudine-4 est fréquemment modifiée dans divers tissus tumoraux. Claudine-4 est une protéine membranaire intégrale qui appartient à la famille de la claudine. Cette protéine est un composant de TJs, et il est essentiel pour assurer l'étanchéité des feuilles cellulaires et le contrôle de flux d'ions paracellulaire [10].
Relativement peu d'études ont examiné les niveaux de claudine-4 expression dans les lésions précurseurs. Cunningham et al
. [38] ont rapporté un niveau d'expression de 15% de claudine-4 dans l'estomac normal, alors que dans les deux métaplasie intestinale et la dysplasie l'expression de claudine-4 atteint 100%. Matsuda et al
. [36] ont également signalé que a été détectée claudine-4 dans l'épithélium de la métaplasie intestinale, mais pas dans l'épithélium normal. Nos résultats de la coloration des échantillons de lésions précurseurs étaient en concordance avec ces études. Le taux d'expression élevé de claudine-4 dans la muqueuse gastrique normale a été très faible (15,9% seulement), alors que les lésions de métaplasie intestinale et les lésions de dysplasie épithéliales gastriques présentaient un niveau d'expression élevé proche de 100%. Parce que CLDN-4
est exprimée à des niveaux élevés dans l'intestin grêle et du côlon [11] normal, son expression accrue dans la métaplasie intestinale est facilement comprise. Toutefois, l'expression différentielle de claudine-4 dans la muqueuse et les cellules normales présentant une dysplasie reste incertaine. Les caractéristiques morphologiques primaires de la dysplasie épithéliale sont atypie cellulaire, la différenciation anormale, et de l'architecture désorganisée de la muqueuse; ces changements sont potentiellement associés à une élévation de la claudine-4 expression. Les mécanismes sous-jacents spécifiques doivent encore être élucidés. Pris ensemble, nos résultats indiquent que la claudine-4 pourrait servir de marqueur moléculaire de la métaplasie intestinale et la dysplasie de la muqueuse gastrique.
Dans la présente étude, nous avons constaté que la diminution de l'expression de claudine-4 était significativement associée à la différenciation histologique cancer de l'estomac. Le groupe différencié présentait un taux d'expression plus élevé de la claudine-4 par rapport au groupe non différencié. Lee et al
. [18] ont rapporté que l'expression réduite de claudine-4 en corrélation avec la perturbation de la structure glandulaire et la perte de la différenciation, qui était en concordance avec nos résultats.
Le rôle de claudine-4 pour le pronostic reste controversée. Resnicket al
. [13] ont rapporté que l'augmentation de la claudine-4 expression était un facteur de mauvais pronostic pour le CSS dans 146 patients, et Soini et al
. [14] a proposé que la claudine-4 ne pas associer avec OS. Cependant, les résultats de la méta-analyse de cette étude suggèrent que l'OS de patients avec une forte claudine-4 était meilleure que celle des patients ayant un faible claudine-4. L'analyse des résultats de survie en fonction des patients dans notre institution a indiqué que la claudine-4 n'a pas été associé à CSS ou OS, qui était semblable aux résultats de Soini et al.
, Mais différent des autres études.
Quelques études antérieures ont suggéré que surexpression de certains claudines contribue potentiellement à la néoplasie en modifiant directement la fonction TJ [39]. La surexpression de la claudine-3 et 4 peut conduire à une augmentation de l'invasion, la motilité et à la survie des cellules tumorales [25]. Au contraire, dans le cancer du pancréas, la surexpression de la claudine-4 a été associée à invasivité significativement réduite à la fois in vitro et in vivo

[40]. Bien que notre étude comprend à peu près le plus grand nombre de cas à l'heure actuelle, le rôle pronostique de claudine-4 dans le cancer gastrique reste ambiguë (P = 0,637
). Il est possible que différentes populations et différents environnements contribuent à ces différents résultats. D'autres études, y compris un plus grand nombre d'échantillons est justifiée. Modèles de croissance
histologiques sont des paramètres importants pour l'évaluation du comportement biologique du cancer gastrique. Sur la base de modèles de croissance et l'invasivité, Ming [41] ont rapporté deux types de cancer de l'estomac, l'expansion et l'Association du cancer infiltrant type à japonais gastrique divisés cancer gastrique en trois types basés sur la croissance tumorale infiltrant (INF) dans les tissus environnants: en INFA, les écrans de la tumeur en expansion la croissance avec une bordure distincte du tissu environnant; en INFB, la tumeur montre un modèle intermédiaire entre INFA et INFC; en INFC, la tumeur affiche une croissance infiltrant sans frontière distincte avec le tissu environnant [42]. Ce dernier type est plus proche de notre pratique clinique, dans lequel le type intermédiaire existe et est difficile à classer (Figure 5). Dans nos résultats, il y avait des différences de survie entre les trois types, mais non significative (P = 0,069
). Les taux de survie chez les patients atteints du type intermédiaire se situaient entre l'expansion et les types infiltrants. Fait intéressant, dans une analyse stratifiée nous avons constaté que haute claudine-4 expression était associée à un mauvais pronostic dans le modèle de croissance intermédiaire (P = 0,023
). Le taux de survie à cinq ans avec une faible expression de claudine-4 dans le type intermédiaire (76,4%) était similaire au type d'expansion (64,5%), tandis que le groupe avec une forte expression de claudine-4 (46,6%) était plus proche de la Type infiltrant (50,7%). Ainsi, nous pourrions potentiellement classer les patients de type intermédiaire selon la coloration de claudine-4. Nous avons reclassé les patients avec une faible expression de claudine-4 dans le groupe intermédiaire comme ayant le type d'expansion, et les patients avec une forte expression de claudine-4 comme ayant le type infiltrant de la tumeur. Les deux analyses univariée et multivariée a confirmé qu'il y avait des différences significatives dans la survie entre ces deux sous-groupes. Après l'analyse des sous-classes stratifiées de survie, nous avons constaté que les différences de pronostic dans les deux nouveaux sous-groupes étaient significatives dans le pT3 /4, LN (+), stade III, invasion lymphatique (-). Bien qu'aucune différence significative n'a été observée dans d'autres sous-classes, une certaine tendance existait encore et nous a considéré que les résultats négatifs de l'analyse statistique ont été en raison de la taille relativement petite de l'échantillon. Ainsi, l'expression de claudine-4 pourrait être utilisé comme base pour identifier d'autres cancers gastriques de type intermédiaire. Figure 5 hématoxyline-éosine. Les trois modèles de croissance différents de cancer de l'estomac: (A) de type expansion; (B) de type intermédiaire; (C) de type infiltrant. Grossissement × 100.
Le rôle biologique de claudine-4 dans le cancer gastrique reste incertaine. Il a été précédemment rapporté que CLDN18
est spécifiquement exprimée dans la muqueuse gastrique normale, mais pas CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 est régulée positivement dans les adénocarcinomes gastriques, et a augmenté la claudine-4 expression est plus souvent observée chez de type intestinal plutôt que de diffuser de type tumeurs [13, 17]. Cependant, la claudine-18 est downregulated dans le cancer gastrique de type intestinal [22]. Ces résultats suggèrent que les niveaux de protéines CLAUDIN distribution et l'expression peuvent varier selon les cellules et les tissus du corps [43]. L'expression ectopique de claudine est potentiellement associée à la progression tumorale. Conclusions de D'autres études sont nécessaires pour élucider la fonction de claudine-4 dans la progression du cancer de l'estomac.
Nous avons démontré une régulation positive de claudine-4 dans la métaplasie intestinale et la dysplasie épithéliale gastrique, ce qui suggère son utilité potentielle en tant que biomarqueur dans lésions précurseurs d'adénocarcinome gastrique. L'expression de claudine-4 n'a pas été associé à la survie, mais elle a été associée à une mauvaise différenciation histologique et les modèles infiltrants de la croissance tumorale. De plus, cette étude a démontré que l'expression de claudine-4 pourrait être utilisé comme base pour identifier d'autres cancers gastriques de type intermédiaire.
Remarques
Jin-Liang Zhu, Peng Gao a contribué également à ce travail.
Les abréviations
AEC:
3 amino-9-éthyl carbazole
AJCC:
American Joint Committee on Cancer

CLDN:
gène Claudin
CSS:
faire spécifique survie
FFPE:
formaline -fixed et paraffine
HR:
hazard ratio
INF:
tumeur infiltrant

IS:
score immunoréactivité
MeSH:
vedettes matières médicales
MMP:
métalloprotéinase matricielle
OS:
survie globale
TJ: jonction
serré
TNM:.
tumeur-node-métastase
Déclarations de les Remerciements
Nous remercions le département d'oncologie chirurgicale du premier hôpital de l'Université médicale de Chine pour fournir le tissu gastrique humaine échantillons. Nous remercions également le Collège de l'Université médicale de Chine pour l'assistance technique dans les expériences. Ce travail a été soutenu par la National Science Foundation de Chine (n ° 30972879 n ° 81201888 et n ° 81172370) et le Programme du Département de l'éducation de la province du Liaoning (L2011137).
Matériel supplémentaire électronique
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff fichiers supplémentaires 1: Figure S1: analyse de survie Sous-stratifié selon le statut T, l'état N, envahissement ganglionnaire et le stade de la tumeur en fonction de la coloration de la claudine-4. Comparaison de la survie entre les patients avec des niveaux d'expression faibles niveaux de Claudin-4 et de haute expression dans pT1-pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), le stade I (E), le stade II (F), stade III (G), invasion lymphatique (-) (H), et l'invasion lymphatique (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff fichier supplémentaire 2: Figure S2: analyse de la survie de la sous-classe stratifié selon le statut T, l'état N, envahissement ganglionnaire et le stade de la tumeur selon les deux nouveaux sous-groupes. UN B. Comparaison de la survie entre infiltrant + intermédiaire (H) vs. expansion + intermédiaire (L) dans pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), le stade I (E), le stade II (F), le stade III (G), l'invasion lymphatique (-) (H), et l'invasion lymphatique (+) (I). Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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