Clinicopathological betydningen av claudin-4 i magekreft

Clinicopathological betydningen av claudin-4 i magekreft
Abstract
Bakgrunn
Aberrant uttrykk for claudin proteiner har blitt rapportert i en rekke kreftformer. Tidligere studier har vist at overekspresjon av claudin kan fremme tumordannelse og metastase gjennom økt invasjon og overlevelse av tumorceller. Imidlertid er det fortsatt uklart den prognostiske betydningen av claudin-4 i magekreft.
Metoder
Immunohistochemistry ble brukt til å analysere uttrykk for claudin-4 i 329 kliniske magekreftprøver og 44 normale mageprøver, 21 intestinal metaplasi prøver, og 21 ved forstadier dysplasi prøver. Statistiske analysemetoder ble anvendt for å evaluere forholdet mellom claudin-4-ekspresjon og forskjellige clinicopathological parametere. Univariable og multivariate analyser ble utført henholdsvis å detektere de uavhengige prediktorene for overlevelse.
Resultater
claudin-4-ekspresjon var til stede i bare 7 (15,9%) normale gastriske prøver, men ekspresjon av claudin-4 i tarm metaplasi lesjoner og dysplasi lesjoner var 90,5% og 95,2%, henholdsvis. Ekspresjonen av claudin-4 var signifikant assosiert med histologisk differensiering (P
< 0,001) og tumor vekst mønstre (P
< 0,001), men ikke i forbindelse med pasientens overlevelse. Men middels type farging av claudin-4 viste en trend av korrelasjon med pasientenes overlevelse (P
= 0,023). De fem-års overlevelse med lav uttrykk for claudin-4 i mellomtype (76,4%) var lik utvide type (64,5%), mens den høye uttrykket gruppen (46,6%) var nærmere infiltrerende type (50,7%).
Konklusjoner
funnene i denne studien viser claudin-fire avvikende uttrykk i magekreft og forstadier. Uttrykket av claudin-4 kan tjene som et grunnlag for å identifisere magekreft av mellomtype.
Nøkkelord
magekarsinom claudin-4 tett veikryss Bakgrunn
Magekreft er en av de vanligste kreftformer, og ca. 738,000 dødsfall oppstått på grunn av magekreft i 2008 på verdensbasis. Over 70% av nye tilfeller og dødsfall forekommer i utviklingsland, spesielt i Øst-Asia [1]. Magekreft er vanligvis forstått å utvikle seg som en flertrinns progresjon av kronisk gastritt, atrofisk gastritt, intestinal metaplasi, dysplasi, og til slutt kreft [2]. Under denne prosess blir tap av celle polaritet og avbrudd av celle-celle kryss hyppig observert, og dette spiller en viktig rolle i progresjon av kreft.
Tett veikryss (TJs) er kritisk for å opprettholde normal struktur og fysiologisk funksjon av epitelet og endotel [3, 4]. TJs ikke bare tjene som en fysisk barriere for å hindre oppløsninger og vann fra å passere fritt gjennom paracellulære plass mellom epitel og endotelcelle ark, men også spille viktige roller i å opprettholde celle polaritet og signaltransduksjon [3, 5, 6]. Men kreftceller ofte har unormal TJ funksjon [7].
Claudins er medlemmer av en stor familie av transmembrane proteiner som er blant de viktigste komponentene i TJs, og claudin-avvikende uttrykk fører potensielt til strukturell og funksjonell skade av TJs [ ,,,0],8]. Dag, totalt 24 claudin-gener har blitt identifisert i pattedyr, og de viser ofte vevsspesifikke mønstre av uttrykk [9]. Nylig har mange studier demonstrert den avvikende ekspresjon av Claudins i flere humane krefttyper [10, 11]. Så vidt vi vet, har ekspresjonen av claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 og 23 er rapportert i gastriske cancere [12-23]. Blant de forskjellige claudin proteiner knyttet til magekreft, hvis funksjon claudin-4 var ikke konsekvent. For eksempel, Jung et al
. [15] og Ohtani et al
. [19] funnet at ekspresjonen av claudin-4 signifikant korrelert med gunstig overlevelsen hos pasienter med magekreft i 72 og 124 tilfeller, respektivt. Men Resnick et al
. [13] rapporterte at moderat til sterk claudin-fire flekker i magekreft var signifikant assosiert med dårlig overlevelse i 146 tilfeller. Soiniet al
. [14] fant ingen klar sammenheng mellom claudin-fire uttrykk og pasient prognose i 118 tilfeller. Interessant også har ekspresjonen av claudin-4 blitt vist å spille en rolle i å bestemme matriks-metalloproteinase (MMP) aktivitet, noe som indikerer at claudin-4 kan ha mediert invasjon gjennom aktivering av MMP'er [24, 25]. Videre har tidligere studier har rapportert at claudin-4 kan ha potensial som en behandling for kreft [26-28]. Dermed er ytterligere undersøkelser er nødvendig for å avklare disse kontroversielle resultatene og de reelle funksjoner av claudin-4. I denne studien ønsket vi å identifisere de clinicopathological foreninger og prognostisk verdi av claudin-fire uttrykk i magekreft.
Metoder
Pasienter og vevsprøver
I denne studien, prøver vev fra en total av 329 pasienter med magekreft ble oppnådd mellom 1998 og 2004 ved Institutt for kirurgisk onkologi, det første sykehuset i Kina Medical University. Alle pasientene gjennomgikk kurativ radikal gastrektomi med standard lymfeknute disseksjon. Den histopatologiske diagnosen 21 intestinal metaplasi, 21 dysplasi, 44 mikroskopisk normal mageslimhinnene, og 329 pasienter med adenokarsinom prøver fra 329 pasienter ble utført av to uavhengige patologer. Vi innhentet skriftlig informert samtykke fra alle pasienter, og studien ble godkjent av etisk komité i Kina Medical University. Ingen av pasientene hadde fått kjemoterapi eller strålebehandling før den kirurgiske prosedyren. De detaljerte postoperative patologi diagnoserapporter ble innhentet og tatt med kjønn, alder, tumor plassering, størrelse, differensiering status, vekstmønster, og tumor-node-metastaser (TNM) scenen. Kriteriene for TNM klassifikasjon for magekreft var i samsvar med den syvende 2010 amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) staging anvisningen [29]. Kriteriet for histopatologisk gradering av differensiering var i overensstemmelse med 2000-Verdens helseorganisasjon klassifisering av gastrisk karsinom [30]. Kriteriet for mønsteret av tumorveksten var i overensstemmelse med japansk klassifisering av gastrisk karsinom, tredje engelsk utgave. Alle pasientenes egenskaper er oppsummert i tabell 1. pasientprøve omfattet 238 mannlige og 91 kvinnelige pasienter med en gjennomsnittsalder på 57 år (26 til 81 år). Alle pasientene ble fulgt opp via telefon henvendelse eller spørreskjema, og oppfølging tiden varierte fra 1 til 136 måneder (median 56 måneder) .table 1 Clinicopathologic karakteristikker av 329 pasienter med magekreft
Variabel
verdi <.no> Alder ved kirurgi, y
Mean
57,0
Range
26-81
Kjønn, antall
Mann fra 238
Kvinne
91
Tumor størrelse, cm
Mean
5.0
Range
1,0, 15,0
Tumor beliggenhet, antall
Øvre
31
Middle
53
Nedre
245
Differensiering status, antall
godt differensiert
47
Moderat differensiert
54
Dårlig differensiert
218
Undifferentiated
10
Vekst mønster, antall
Utvide
76
Intermediate
81
infiltrerende
172
Tumor (T) scenen, antall
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
Node (N) scenen, antall
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
lymphatic invasjon, antall
Negativ
248
Positive
81
Tumor scenen, antall
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180
Vital statistikk,
antall Alive
152
døde, alle årsaker
177
Dead, magekreft
143
Dead, urelatert
22
Informasjon utilgjengelig
12
Immunohistochemistry
formalinfiksert og parafininnebygd (FFPE) vevsblokker ble skiver i 5-mikrometer tykke seksjoner, deretter deparaffinized med xylen og rehydrert ved hjelp av en gradert serie av etanol. Seksjonene ble inkubert i kokende sitronsyrebuffer (pH 6,0) for antigen gjenfinning i en damptrykkoker. Seksjonene ble inkubert over natten ved 4 ° C med følgende primære antistoffer: anti-claudin-4 monoklonalt antistoff, 1: 100 fortynning, klone 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, USA. Immunhistokjemisk farging ble gjennomført ved hjelp av MaxVision TMHRP-Polymer anti-mus /Rabbit IHC Kit (Fuzhou Maixin, Kina) med tre amino-9-etyl carbazole (AEC) som enzymet underlaget. Seksjonene ble deretter lett kontra med hematoksylin. Positive kontroller var i kolon mukosa og prøvene i hvilket det primære antistoff ble erstattet med ikke-reaktive antistoff tjente som negative kontroller.
Immunofarging resultater ble tolket uavhengig ved hjelp av to patologer hjelp av en semi-kvantitativ scoring system [31]. De immunofarging Reaksjonene ble evaluert ved å farge intensitet (0, ingen flekker, 1 = svak, 2 = moderat 3 = sterk) og prosentandelen av fargede epitelceller (0, mindre enn 5%, 1, 5 til 25%, 2, 26-50%, 3, er 51 til 75%, og 4, > 75%). Den prosentvise positivitet av epitelceller og fargeintensitet ble deretter multiplisert for å generere immunoreaktivitets score (IS) for hvert enkelt tilfelle. Prøvene ble rescores hvis det var avvik i IS mellom de to patologer, inntil en konsensus ble nådd. Vi delte prøvene inn i to grupper basert på resultatene fra farging i vev: lav uttrykk (IS < 4) og høy uttrykk (IS ≥ 4). Denne evalueringen system for claudin-4 har vært brukt i tidligere studier [32].
Statistisk analyse
En meta-analyse ble utført for å bekrefte rollen claudin-4 i magekreft. Vi søkte på engelsk litteratur etter relevante studier publisert før 1. juni 2013 ved hjelp av PubMed database med følgende vilkår: 'mage svulst' og 'claudin-4 "i medisinske emneord (MeSH). Referanser i de hentede artiklene ble videre undersøkt for tidligere originale studier. Inklusjonskriteriene var pasienter med magekreft, inkludert en prognostisk sammenligning mellom høy og lav ekspresjon av claudin-4. De tilsvarende Forfatterne ble kontaktet for å oppnå manglende informasjon, og noen studier ble ekskludert hvis kritisk informasjon var fremdeles mangler etter gjentatte forespørsler.
For den kvantitative aggregering av overlevelses resultater, den observerte-forventet (OE) statistikk og varians ble kombinert til oppnåelse den effektive verdien. De O-E verdier og avvikene ble estimert fra tilgjengelige data ved hjelp av metodene som er rapportert av Tierney et al
. [33]. Dersom studien ga en hazard ratio (HR), ble O-E verdier og avvik beregnet basert på det. Dersom studien ikke gir en HR men rapporterte dataene i form av en overlevelseskurve, ble overlevelse hentet til nærmere definerte tider for å rekonstruere en estimert HR og dens varians.
Vi brukte chi-squared test for å evaluere forholdet mellom claudin-fire uttrykk og ulike clinicopathological parametere. Survival analyse ble utført ved hjelp av Kaplan-Meier-metoden, og forskjeller mellom gruppene ble analysert ved bruk av log-rank test. Cox regresjon multivariate modellen ble anvendt på en trinnvis fremover måte å detektere de uavhengige prediktorene for å overleve. Tosidig p-
-verdier mindre enn 0,05 ble ansett for å indikere et statistisk signifikant resultat. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS (versjon 17.0, SPSS for Windows, Chicago, IL, USA). Og RevMan 5,2 analyseprogramvare (The Cochrane Collaboration)
Resultater
claudin-fire farging skjedde i en overveiende membran mønster , med noen eksempler som viser et lavt nivå av cytoplasmatisk farging. Kun 15,9% (7/44) av normal mageslimhinnen viste høye uttrykk nivåer av claudin-4. I motsetning til 90,5% (19/21) av intestinal metaplasi lesjoner og 95,2% (20/21) av de gastriske epitel-lesjoner dysplasi oppviste høye ekspresjonsnivåer av claudin-4. Av de magekarsinom prøver undersøkt, 53,2% (175/329) av tilfellene viste høy claudin-fire uttrykk (figur 1). Figur 1 claudin-fire farging. (A) Normal mage muscoma ingen farging; (B) intestinal metaplasi, høy uttrykk; (C) moderat differensiert til godt differensiert magekreft, høy uttrykk; (D) dårlig differensiert magekreft, ingen flekker. Forstørrelse x 200.
uttrykk nivå claudin-4 var signifikant korrelert med tumor differensiering (P
< 0,001), kjønn (P
= 0,003), alder (P
= 0,025) og svulst plassering (P
= 0,033). Ifølge mikroskopisk inspeksjon av tumorvekstmønsteret, ble 76 tilfeller klassifisert som ekspansjons typen og 172 tilfeller som den infiltrerende typen, mens 81 tilfeller ble bestemt til å være mellomproduktet type. Ekspresjonsnivået av claudin-4 ble også signifikant korrelert med tumorvekstmønster (P
< 0,001). Høy ekspresjon av claudin-4 ble observert hos 69,7% av den ekspanderende type og 72,8% av den mellomliggende type magekreft, mens bare 36,6% av det infiltrerende typen viste høy ekspresjon. Imidlertid våre funn viste ingen signifikant korrelasjon mellom ekspresjonen av claudin-4 og tumorstørrelse, dybden av invasjon, lymfeknutemetastase, lymfatisk invasjon, og tumorstadium (figur 2, tabell 2). Figur 2 Uttrykk for claudin-4 i normal mageslimhinnene, intestinal metaplasi, dysplasi og kreft (inkludert voksende, middels og infiltrerende typer).
Tabell 2 statistiske resultatene av relasjoner mellom claudin-fire uttrykk og ulike clinicopathologic egenskaper
Variabel
Totalt antall pasienter (%)
Pasienter med lav claudin-fire uttrykk (%) <.no> Pasienter med høy claudin-4expression (%)
P- verdi
329
154 (46,8)
175 (53,2)
Alder ved kirurgi , y
0,025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9)
> 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
Kjønn
0.003
Mann fra 238
99 (41,6)
139 (58,4)
Kvinne
91
55 (60,4)
36 (39,6)
pathophysiologic funksjoner
Tumor størrelse (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7)
> 5
130
52 (40,0)
78 (60,0)
Tumor plassering
0,033
Øvre
31
9 (29,0)
22 (71,0)
Middle
53
31 (58,5)
22 (41,5)
Nedre
245
114 (46,5)
131 (53,5)
Histologisk typen
< 0,001
Differensiert (WD, MD)
101
24 (23,8)
77 (76,2)
Udifferensiert (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0)
Vekst mønster
< 0,001
Utvide
76
23 (30,3 )
53 (69,7)
Intermediate
81
22 (27,2)
59 (72,8)
infiltrerende
172
109 (63,4)
63 ( 36,6)
T scenen
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44.2)
130 (55,8)
lymfeknutemetastaser
0,905
Negativ
101
48 (47,5)
53 (52,5)
Positive
228
106 (46,5)
122 (53,5)
lymfatisk invasjon
0,898
Negativ
248
117 (47,2)
131 (52,8)
Positiv
81
37 (45,7)
44 (54,3)
Tumor scenen
0,589
IA, IB
63
33 (52,4)
30 (47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, godt differensiert; MD
, moderat differensiert; PD
, dårlig differensiert, UD
, udifferensiert.
Totalt 19 studier ble først identifisert. Fjorten studier ble ekskludert fordi de ikke har prognostisk sammenligning mellom høyt og lavt uttrykk for claudin-4. En videre studier ble ekskludert fordi viktig informasjon mangler [14]. Bare én studie utført den prognostiske sammenligning basert på årsaksspesifikk overlevelse (CSS) [13], så det var utelukket, og vi har gjort total overlevelse (OS) det primære endepunktet av vår meta-analyse. Tre studier oppfylte inklusjonskriteriene og ble inkludert i den endelige analysen [15, 19, 34]. Samlet analyse indikerte at operativsystemet til pasienter med høyt claudin-4 var bedre enn de med lav claudin-4 (figur 3). Figur 3 Forest tomt på sammenhengen mellom total overlevelse og uttrykk for claudin-4. O-E, observerte forventet.
Ifølge univariat overlevelse analyse, ble claudin protein uttrykk ikke assosiert med pasientenes CSS (P
= 0,637) eller OS (P
= 0,469). Stratifisert underklasse overlevelse analyser ble utført for T og N-status, lymfatisk invasjon, og tumorstadium, og ingen prognostisk forskjell ble funnet (tilleggsfiler 1: Figur S1). I sammenligningen av CSS, bare TNM stadium (P
< 0,001) og lymfatiske invasjon (P
< 0,001) var signifikante prognostiske faktorer. Etter Cox multivariat analyse, bare TNM stadium var en signifikant prognostisk faktor (P
< 0,001). ble ikke observert noen overlevelse forskjell mellom de tre typer av tumorvekst mønster (P
= 0,069, figur 4A). Videre stratifisert analyse viste ingen signifikant prognostisk forskjell mellom pasienter som viste høy versus lav uttrykk for claudin-4 i å utvide og infiltrerende typen magekreft. Men i mellom typen vekstmønster magekreft, prognosen for pasienter som viser lave nivåer av claudin-4 ble betydelig bedre enn de med høy uttrykk nivåer (P
= 0,023, figur 4B). Dette resultatet ble også bekreftet av Cox multivariat analyse (P
= 0,037). Den femårige kreft-spesifikke overlevelse for pasienter med lave claudin-4 uttrykk nivåer i middels-type magekreft var 76,4%, som var lik alle ekspanderende-type mage kreft (64,5%). Våre funn indikerer at femårs CSS sats for pasienter som viser høye uttrykk nivåer av claudin-4 i mellom-type magekreft var 46,6%, som var lik infiltrerende-type mage kreft (50,7%) (Figur 4C). Ved farging av claudin-4 i den mellomliggende typen, reklassifisert vi den lave ekspresjon av claudin-4 inn ekspanderende type og høy ekspresjon av claudin-4 inn infiltrerende type og sammensatt to nye undergrupper. Det var en signifikant forskjell i prognose mellom disse to nye undergrupper (P
= 0,003, figur 4D). Etter underklasse overlevelse analyse stratifisert etter T status, N-status, lymfatisk invasjon og tumorstadium, fant vi at prognostiske forskjeller i to nye undergrupper var betydelig i pT3 /4, LN (+), fase III, lymfe invasjon (-) ( Tilleggs fil 2: Figur S2). I multivariat analyse, romanen klassifiseringen var en signifikant prognostisk faktor (P
= 0,007). Figur 4 Kaplan-Meier overlevelseskurver. (A) Sammenligning av overlevelse for tre typer av tumorvekst mønster; (B) sammenligning av overlevelse hos pasienter med lave og høye ekspresjonsnivåer av claudin-4 i middels-typen vekstmønster magekreft; (C) Kaplan-Meier overlevelseskurver for å utvide-type, lave nivåer av claudin-4 i middels-type, høye uttrykk nivåer av claudin-4 i middels-type, og infiltrerende-type mage kreft. (D) Sammenligning av overlevelse i to nye undergrupper.
Diskusjon
claudin familien av proteiner som spiller en viktig rolle i opprettholdelsen av TJ funksjon, og uttrykket nivåer ofte oppviser en vev-spesifikk mønster. Nylig har et akkumulerende antall studier demonstrert ektopisk eller avvikende ekspresjon av Claudins i mange tumortyper [25, 32, 35-37]. Blant de claudin subtyper, er ekspresjonen av claudin-4 hyppig forandres i forskjellige tumorvev. Claudin-4 er et integrert membranprotein som tilhører claudin familien. Dette proteinet er en komponent av TJs, og er kritisk for tetting cellulære ark og kontroll av paracellulære ionefluks [10].
Relativt få studier har undersøkt uttrykket nivåer av claudin-4 i forstadier. Cunningham et al
. [38] rapporterte en 15% ekspresjonsnivå av claudin-4 i normal magen, mens det i begge intestinal metaplasi og dysplasi ekspresjon av claudin-4 nådde 100%. Matsuda et al
. [36] også rapportert at claudin-4 ble påvist i epitelet av intestinal metaplasi, men ikke i normalt epitel. Våre flekker resultatene av forløperen lesjon prøvene var i samsvar med disse studiene. Den høye frekvensen av ekspresjon claudin-4 i normal gastrisk mucosa var svært lavt (bare 15,9%), mens intestinal metaplasi lesjoner og gastriske epitel-lesjoner dysplasi oppviste en høy ekspresjon nivå nær 100%. Fordi CLDN-4
uttrykkes ved høye nivåer i normal tynntarm og tykktarm [11], er dens økte ekspresjon i intestinal metaplasi lett forstått. Men differensial uttrykk for claudin-4 i normal slimhinne og celler som viser dysplasi er fortsatt uklart. Den primære morfologiske trekk ved epitelial dysplasi er cellulær atypi, unormal differensiering, og uorganisert slimhinne arkitektur; disse endringene er potensielt assosiert med forhøyet claudin-fire uttrykk. De spesifikke underliggende mekanismene må bli ytterligere belyst. Til sammen våre funn tyder på at claudin-4 kan potensielt tjene som en molekylær markør av intestinal metaplasi og dysplasi i mageslimhinnen.
I denne studien fant vi at redusert uttrykk for claudin-4 var signifikant assosiert med histologisk differensiering i magekreft. Den differensierte gruppe utviste en høyere ekspresjon hastighet på claudin-4 sammenlignet med udifferensierte gruppen. Lee et al
. [18] rapporterte at redusert uttrykk for claudin-4 korrelert med forstyrrelser i kjertel struktur og tap av differensiering, som var i samsvar med våre resultater.
Rolle claudin-4 for prognosen er fortsatt kontroversielt. Resnicket al
. [13] rapporterte at økt claudin-fire uttrykk var en dårlig prognostisk faktor for CSS i 146 pasienter, og Soini et al
. [14] foreslått at claudin-fire ikke forbinder med OS. Men resultatene av meta-analyse av denne studien viser at operativsystemet til pasienter med høyt claudin-4 var bedre enn den til pasienter med lav claudin-4. Resultatene overlevelsesanalyse basert på pasienter i vår institusjon indikerte at claudin-fire ikke var assosiert med CSS eller OS, som var lik resultatene av Soini et al
., Men forskjellig fra andre studier.
Noen tidligere studier har foreslått at oppregulering av visse Claudins potensielt bidrar til neoplasi ved direkte å endre TJ funksjon [39]. Overekspresjon av claudin-3 og 4, kan føre til en økning i invasjon, motilitet og tumorcelleoverlevelse [25]. Tvert imot, i pankreatisk karsinom, overekspresjon av claudin-4 er blitt forbundet med vesentlig redusert invasivitet både in vitro og in vivo
product: [40]. Selv om vår studie omfatter nesten det største antall tilfeller i dag, den prognostiske rollen claudin-4 i magekreft er fortsatt uklart (P
= 0,637). Det er mulig at forskjellige populasjoner og ulike miljøer bidra til disse forskjellige resultater. Videre studier inkludert et større antall prøver er berettiget.
Histologiske vekst mønstre er viktige parametre for vurdering av biologiske oppførsel av magekreft. Basert på mønstre av vekst og invasivitet, Ming [41] rapporterte to typer magekreft, den ekspanderende og infiltrerende type.The japanske Gastric Cancer Association delt magekreft i tre typer basert på tumor-infiltrerende (INF) vekst inn i omkringliggende vev: i Infa, tumor viser voksende vekst med en tydelig grensen fra omkringliggende vev; i INFb viser tumor en mellomliggende mønster mellom INFA og INFc; i INFc, viser tumor infiltrerende vekst med ingen tydelig grense mot omkringliggende vev [42]. Denne siste typen er nærmere vår klinisk praksis, i hvilken den mellomliggende typen eksisterer og er vanskelig å klassifisere (figur 5). I våre resultater, var der forskjeller i overlevelse mellom de tre typene, men ikke signifikant (P
= 0,069). Overlevelse hos pasienter med middels type var mellom ekspanderende og infiltrerende typer. Interessant, i stratifisert analyse fant vi at høy claudin-fire uttrykk var assosiert med dårlig prognose i mellomvekstmønster (P
= 0,023). De fem-års overlevelse med lav uttrykk for claudin-4 i mellomtype (76,4%) var lik den ekspanderende type (64,5%), mens gruppen med høy ekspresjon av claudin-4 (46,6%) var nærmere infiltrerende type (50,7%). Således, kunne potensielt klassifisere mellomprodukt-type pasienter i henhold til farging av claudin-4. Vi omklassifisert pasienter med lav ekspresjon av claudin-4 i den mellomliggende gruppe som har den ekspanderende typen, og pasienter med høy ekspresjon av claudin-4 som har den infiltrerende type av tumor. Både univariate og multivariate analyser bekreftet at det var store forskjeller i overlevelse mellom disse to undergrupper. Etter stratifisert klasser overlevelsesanalyse, fant vi at prognostiske forskjeller i de to nye undergrupper var betydelig i pT3 /4, LN (+), fase III, lymfe invasjon (-). Selv om ingen signifikant forskjell ble funnet i andre underklasser, en viss tendens fortsatt eksisterte, og vi betraktet at de negative resultatene av den statistiske analysen var på grunn av den relativt lille prøvestørrelsen. Således, ekspresjon av claudin-4 kan potensielt benyttes som et grunnlag for å ytterligere identifisere gastrisk kreft i mellomliggende type. Figur 5 Hematoxylin-eosin farging. De tre ulike vekstmønstre magekreft: (A) utvider typen; (B) middels type; (C) infiltrerende type. Forstørrelse x 100.
biologiske rolle claudin-4 i magekreft er fortsatt uklart. Det har tidligere blitt rapportert at CLDN18
er spesielt uttrykt i normal gastrisk mucosa, men ikke CLDN4 product: [11, 22]. Claudin-4 er oppregulert i mage adenokarsinomer, og økt claudin-fire uttrykk er mer vanlig hos intestinal-type i motsetning til diffuse-type svulster [13, 17]. Imidlertid er claudin-18 nedregulert i intestinal-type magekreft [22]. Disse resultater antyder at fordelings og uttrykk nivåer av claudin proteiner kan variere i forskjellige celler og vev i kroppen [43]. Ektopisk uttrykk for claudin kan assosieres med tumorprogresjon. Videre studier er garantert å belyse funksjonen av claudin-4 i progresjonen av magekreft.
Konklusjoner
Vi demonstrerte oppregulering av claudin-4 i intestinal metaplasi og gastrisk epitelial dysplasi, noe som antyder dets potensiell anvendelse som en biomarkør i mage adenokarsinom forstadier. Uttrykk for claudin-4 ble ikke assosiert med overlevelse, men det var forbundet med dårlig histologisk differensiering og infiltrerende mønstre av tumorvekst. Dessuten, denne studien viste at uttrykk for claudin-4 kan potensielt bli brukt som grunnlag for å ytterligere identifisere mage kreft i mellomtype.
Merknader Jin-Liang Zhu, Peng Gao bidratt likt til dette arbeidet.
Forkortelser
AEC:
3 amino-9-etyl carbazole
AJCC:
amerikanske Joint Committee on Cancer

CLDN:
claudin genet
CSS:
årsaksspesifikk overlevelse
FFPE:
formalin -Fast og parafin-embedded
HR:
hasardratio
INF:
tumor infiltrerer

IS:
immunoreaktivitets poengsum
MeSH:
medisinske emneord
MMP:
matriksmetalloproteinase
OS:
total overlevelse
TJ:
tight junction
TNM.
tumor-node-metastaser
Erklæringer
Takk
Vi takker institutt for kirurgisk onkologi av det første sykehuset i Kina Medical University for å gi human mage vev prøver. Vi takker også College of China Medical University for teknisk assistanse i eksperimenter. Dette arbeidet ble støttet av Science Foundation of China (No. 30972879 nr 81201888 og nr 81172370) og Program for lærerutdanning Institutt for Liaoning-provinsen (L2011137).
Elektronisk supplerende materiale
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff tilleggsfiler National 1: Figur S1: Underklasse overlevelse analyse stratifisert etter T status, N-status, lymfatisk invasjon og tumorstadium i henhold til farging av claudin-4. Sammenligning av overlevelse mellom pasienter med lave nivåer av claudin-4 og høy ekspresjon nivåer i PT1-pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), trinn I (E), trinn II (F), fase III (G), lymfatisk invasjon (-) (H), og lymfatiske invasjon (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff tilleggsfiler 2: Figur S2: Underklasse overlevelse analyse stratifisert etter T status, N-status, lymfatisk invasjon og tumorstadium i henhold til de to nye undergrupper. A-B. Sammenligning av overlevelse mellom infiltrerende + mellomprodukt (H) vs. ekspanderende + intermediat (L) i pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), trinn I (E), trinn II (F), trinn III (G), lymfatisk invasjon (-) (H), og lymfatiske invasjon (+) (I). Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Mekanisme (e) for underliggende den magesekkbeskyttende virkning av etylacetat fraksjonen erholdt fra det rå metanol forlater ekstrakt av Muntingia calabura
• Laparoskopi-assistert versus åpen D2 radikal gastrektomi for avansert magekreft uten serøse invasjon: en case-kontroll study