importanza clinicopatologica di claudina-4 in gastrica carcinoma

importanza clinicopatologica di claudina-4 nel carcinoma gastrico
Abstract
sfondo
espressione aberrante di proteine ​​Claudin è stata riportata in una varietà di tumori. Studi precedenti hanno dimostrato che l'iperespressione di Claudin può promuovere la tumorigenesi e delle metastasi attraverso una maggiore invasione e la sopravvivenza delle cellule tumorali. Tuttavia, il significato prognostico della claudina-4 nel carcinoma gastrico rimane poco chiaro.
Metodi
immunoistochimica è stata utilizzata per analizzare l'espressione di Claudin-4 in 329 cliniche campioni di cancro gastrico e 44 normali campioni di stomaco, 21 campioni di metaplasia intestinale, e 21 precursore adiacente lesioni campioni displasia. metodi di analisi statistica sono stati usati per valutare la relazione tra espressione claudina-4 e vari parametri clinico-patologici. analisi univariata e multivariata sono stati eseguiti rispettivamente, di individuare i predittori indipendenti di sopravvivenza.
Risultati
Claudin-4 espressione era presente in solo il 7 (15,9%) campioni gastrici normali, ma espressione di claudina-4 nel intestinale lesioni metaplasia e lesioni displasia era 90,5% e 95,2%, rispettivamente. L'espressione di claudina-4 era significativamente associata con la differenziazione istologica (P
< 0,001) e modelli di crescita del tumore (P
< 0,001), ma non associata a sopravvivenza del paziente. Tuttavia, il tipo di colorazione intermedia di claudina-4 mostrato un trend di correlazione con la sopravvivenza dei pazienti (P ​​= 0,023
). Il tasso di sopravvivenza a cinque anni con una bassa espressione di claudina-4 nel tipo intermedio (76,4%) era simile al tipo (64,5%) in espansione, mentre il gruppo di alta espressione (46,6%) era più vicino al tipo di infiltrante (50,7%).
conclusioni
I risultati di questo studio dimostrano claudina-4 espressione aberrante nelle lesioni tumorali e precursori gastrici. L'espressione di claudina-4 potrebbe servire come base per identificare il cancro gastrico di tipo intermedio.
Parole
gastrica carcinoma Claudin-4 giunzioni strette Sfondo
cancro gastrico è una delle neoplasie più comuni, e di circa 738.000 decessi si sono verificati a causa di cancro gastrico nel 2008 in tutto il mondo. Oltre il 70% dei nuovi casi e di decessi si verificano in paesi in via di sviluppo, in particolare in Asia orientale [1]. cancro gastrico è generalmente inteso a sviluppare come una progressione più fasi da gastrite cronica, gastrite atrofica, metaplasia intestinale, displasia, e, infine, il cancro [2]. Durante questo processo, la perdita di polarità delle cellule e la rottura delle giunzioni cellula-cellula, è frequente, e questo gioca un ruolo importante nella progressione del cancro.
Giunzioni strette (TJS) sono fondamentali per il mantenimento della normale struttura e funzione fisiologica dell'epitelio e endotelio [3, 4]. TJs non solo serve come barriera fisica per prevenire soluti e all'acqua di passare liberamente attraverso lo spazio tra il paracellular epiteliale e fogli cellule endoteliali, ma anche giocare un ruolo critico nel mantenimento della polarità cellulare e trasduzione del segnale [3, 5, 6]. Tuttavia, le cellule tumorali presentano frequentemente funzione TJ anormale [7].
Claudine sono membri di una grande famiglia di proteine ​​transmembrana che sono tra le componenti essenziali di TJs, e claudina-aberrante espressione porta potenzialmente a danno strutturale e funzionale di TJs [ ,,,0],8]. Attualmente, un totale di 24 geni Claudin sono stati identificati nei mammiferi, e mostrano spesso modelli di tessuto-specifici di espressione [9]. Recentemente, numerosi studi hanno dimostrato l'espressione aberrante di claudine in diversi tumori umani [10, 11]. A nostra conoscenza, l'espressione di Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 e 23 sono stati riportati nei tumori gastrici [12-23]. Tra le varie proteine ​​Claudin legate al cancro gastrico, la funzione di claudina-4 non era coerente. Ad esempio, Jung et al
. [15] e Ohtani et al
. [19] hanno trovato che l'espressione di Claudin-4 significativamente correlata con la sopravvivenza favorevole per i pazienti con cancro gastrico in 72 e 124 casi rispettivamente. Tuttavia, Resnick et al
. [13] ha riferito che da moderata a forte claudina-4 colorazione nel carcinoma gastrico era significativamente associato con scarsa sopravvivenza in 146 casi. Soiniet al
. [14] hanno trovato alcuna chiara associazione tra claudina-4 espressione e la prognosi dei pazienti in 118 casi. È interessante notare che anche l'espressione di claudina-4 ha dimostrato di giocare un ruolo nella determinazione metalloproteinasi della matrice (MMP) L'attività, indicando che claudina-4 potrebbe essere mediata invasione attraverso l'attivazione delle MMPs [24, 25]. Inoltre, studi precedenti riportato che claudina-4 può avere un potenziale come trattamento per il cancro [26-28]. Così, ulteriori indagini sono necessarie per chiarire questi controversi risultati e le reali funzioni di Claudin-4. In questo studio, abbiamo cercato di individuare le associazioni clinico-patologici e valore prognostico di espressione claudina-4 nel carcinoma gastrico.
Metodi
Pazienti e campioni di tessuto
in questo studio, campioni di tessuto da un totale di 329 pazienti con cancro gastrico sono stati ottenuti tra il 1998 e il 2004 presso il Dipartimento di Oncologia chirurgica, il primo ospedale della Cina Medical University. Tutti i pazienti sono stati sottoposti a gastrectomia radicale curativa con standard di dissezione dei linfonodi. La diagnosi istopatologica del 21 metaplasia intestinale, displasia 21, 44 microscopicamente normale mucosa dello stomaco, e 329 campioni di adenocarcinoma gastrico dei 329 pazienti è stata effettuata da due patologi indipendenti. Abbiamo ottenuto il consenso informato scritto da tutti i pazienti, e lo studio è stato approvato dal comitato etico della China Medical University. Nessuno dei pazienti aveva ricevuto chemioterapia o radioterapia prima dell'intervento chirurgico. I dettagliati rapporti di diagnosi di patologia post-operatorio sono stati ottenuti e inclusi sesso, età, localizzazione del tumore, le dimensioni, lo stato di differenziazione, modello di crescita, e lo stadio del tumore-node-metastasi (TNM). I criteri di classificazione TNM per carcinoma gastrico erano in conformità con il 7 ° Joint Committee 2010 sul manuale di stadiazione del cancro (AJCC) [29]. Il criterio per la classificazione istopatologica di differenziazione era conforme 2000 mondo classificazione organizzazione sanitaria del carcinoma gastrico [30]. Il criterio per il modello di crescita tumorale era in conformità con la classificazione giapponese di carcinoma gastrico, 3a edizione inglese. Caratteristiche Tutti i pazienti sono riassunti nella tabella 1. Il campione del paziente comprendeva 238 91 pazienti di sesso femminile con un'età media di 57 anni (range da 26 a 81 anni) maschile e femminile. Tutti i pazienti sono stati seguiti tramite richiesta telefonica o un questionario, e il tempo di follow-up variava da 1 a 136 mesi (mediana di 56 mesi) .table 1 caratteristiche clinico-patologiche di 329 pazienti con carcinoma gastrico
variabile
Valore
Età a un intervento chirurgico, y
Mean
57,0
Gamma
26-81
genere, numero
Maschio
238
femminile
91
dimensioni del tumore, cm
Significa
5,0
Gamma
1.0, 15.0 posizione
tumore, il numero
Alto
31
Medio
53
Bassa
245 stato
differenziazione, il numero
ben differenziato
47
differenziati moderatamente
54
scarsamente differenziato
218
indifferenziato
10
modello di crescita, il numero
espansione
76
Intermedio
81
infiltrativa
172
tumore (T) fase, il numero
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
nodo (N) fase, il numero
N0
100 | N1
39
N2
76
N3
114
linfatico invasione, numero
negative 248
positivo
stadio 81
tumore, il numero
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180 statistiche
vitali, numero
Alive
152
morti, tutte le cause
177
Morto, cancro gastrico
143
Morto,
estranei 22
informazioni disponibili
12
immunoistochimica
Il fissati in formalina e incluso in paraffina (FFPE) blocchi di tessuto sono stati tagliati in sezioni di 5 micron di spessore, poi deparaffinate con xilene e reidratate usando una serie graduata di etanolo. Le sezioni sono state incubate in tampone di acido citrico (pH 6,0) per il recupero dell'antigene bollente in una pentola a pressione di vapore. Le sezioni sono state incubate overnight a 4 ° C con i seguenti anticorpi primari: anti-claudina-4 anticorpo monoclonale, diluizione 1: 100, clone 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, Stati Uniti d'America. La colorazione immunoistochimica è stata condotta utilizzando il kit di MaxVision IHC TMHRP-Polymer anti-topo /coniglio (Fuzhou Maixin, Cina) con carbazolo 3 ammino-9-etil (AEC) come substrato enzimatico. Le sezioni sono state poi leggermente di contrasto con ematossilina. I controlli positivi sono stati mucosa del colon e gli esemplari in cui l'anticorpo primario è stato sostituito con anticorpi non reattivi servito come controlli negativi.
risultati immunostaining sono stati interpretati in modo indipendente da due patologi utilizzando un sistema di punteggio semi-quantitativa [31]. Le reazioni immunostaining sono state valutate mediante colorazione intensità (0, nessuna macchia; 1, debole, 2, moderata; 3, forte) e la percentuale di cellule epiteliali macchiati (0, < 5%; 1, da 5 a 25%; 2, 26 a 50%; 3, il 51 al 75% e 4, > 75%). La positività percentuale di cellule epiteliali e intensità di colorazione sono stati poi moltiplicato per generare il punteggio immunoreattività (IS) per ciascun caso. I campioni sono stati rescored se ci fossero discrepanze si trova tra i due patologi, fino a quando è stato raggiunto un consenso. Abbiamo diviso i campioni in due gruppi in base ai risultati della immunocolorazione nei tessuti: bassa espressione (IS < 4) e alta espressione (IS ≥ 4). Questo sistema di valutazione per claudina-4 è stato utilizzato in studi precedenti [32] Analisi statistica
Una meta-analisi
. È stata effettuata per confermare il ruolo di Claudin-4 nel cancro gastrico. Abbiamo cercato la letteratura inglese per studi pubblicati prima del 1 ° giugno 2013, utilizzando la banca dati PubMed con i seguenti termini: 'neoplasia dello stomaco' e 'claudina-4' in intestazioni di soggetto medici (mesh). Rinvii degli articoli recuperati sono stati ulteriormente sottoposti a screening per precedenti studi originali. I criteri di inclusione erano i pazienti con cancro gastrico, compreso un confronto prognostica tra alta e bassa espressione di claudina-4. Gli autori corrispondenti sono stati contattati per ottenere le informazioni mancanti, e alcuni studi sono stati esclusi se le informazioni critiche è stato ancora mancante dopo ripetute richieste.
Per l'aggregazione quantitativa dei risultati di sopravvivenza, l'osservato previsto (OE) e varianza statistica sono stati combinati per dare il valore effettivo. I valori di O-E e le varianze sono stati stimati a partire dai dati disponibili utilizzando i metodi riportati da Tierney et al
. [33]. Se lo studio ha fornito un hazard ratio (HR), i valori e le varianze O-E sono stati stimati sulla base di questo. Se lo studio non ha fornito un HR ma riportati i dati sotto forma di una curva di sopravvivenza, tassi di sopravvivenza sono stati estratti in certi momenti specifici per ricostruire un HR stimata e la sua varianza.
Abbiamo utilizzato il test chi-quadro per valutare la rapporto tra l'espressione claudina-4 e vari parametri clinico-patologici. L'analisi di sopravvivenza è stata effettuata utilizzando il metodo di Kaplan-Meier, e le differenze tra i gruppi sono stati analizzati utilizzando il log-rank test. Il modello di regressione multivariata di Cox è stato utilizzato in maniera graduale in avanti per rilevare i predittori indipendenti di sopravvivenza. P
-Valori inferiori a 0,05 sono stati considerati per indicare un risultato statisticamente significativo a due code. Tutte le analisi statistiche sono state effettuate utilizzando il software SPSS (versione 17.0; SPSS per Windows, Chicago, IL, USA). E RevMan 5.2 software di analisi (The Cochrane Collaboration)
Risultati
Claudin-4 immunostaining si è verificato in un modello prevalentemente membranosa , con alcuni campioni visualizzazione di un basso livello di colorazione citoplasmatica. Solo il 15,9% (7/44) di normale mucosa gastrica esposto alti livelli di espressione di Claudin-4. Al contrario, il 90,5% (19/21) delle lesioni metaplasia intestinale e 95,2% (20/21) delle lesioni gastriche displasia epiteliale esposti elevati livelli di espressione di claudina-4. Dei campioni di carcinoma gastrico esaminati, 53,2% (175/329) dei casi dimostrato elevata espressione claudina-4 (Figura 1). Figura 1 Claudin-4 immunocolorazione. (A) Normal muscoma gastrica, senza colorazione; (B) metaplasia intestinale, elevata espressione; (C) moderatamente differenziato per cancro gastrico ben differenziato, alta espressione; (D) il cancro gastrico scarsamente differenziato, senza colorazione. Ingrandimento × 200.
Il livello di espressione di claudina-4 è risultata significativamente correlata con tumore differenziazione (P
< 0,001), genere (P = 0.003
), età (P = 0.025
) e localizzazione del tumore (P = 0,033
). Secondo l'ispezione microscopica del modello di crescita del tumore, 76 casi sono stati classificati come tipo di espansione e 172 casi come il tipo infiltrante, mentre 81 casi sono stati determinati per essere il tipo intermedio. Il livello di espressione di claudina-4 è stato anche significativamente correlata con il modello di crescita del tumore (P
< 0,001). Alta espressione di claudina-4 è stata osservata nel 69,7% di tipo espansione e il 72,8% di tipo intermedio di cancro gastrico, mentre solo il 36,6% di tipo infiltrante mostra un'elevata espressione. Tuttavia, i nostri risultati hanno rivelato alcuna correlazione significativa tra l'espressione di Claudin-4 e del tumore dimensioni, profondità di invasione, metastasi linfonodali, invasione linfatica, e lo stadio del tumore (Figura 2, tabella 2). Figura 2 L'espressione di claudina-4 in normale mucosa dello stomaco, metaplasia intestinale, displasia e cancro (tra cui espansione tipi, intermedi e infiltrative).
Tabella 2 I risultati statistici delle relazioni tra Claudin-4 espressione e varie caratteristiche clinico-patologiche
variabile
pazienti totali (%)
pazienti con claudina-4 espressione basso (%)
I pazienti con alta claudina-4expression (%)
P- valore
329
154 (46,8)
175 (53,2)
Età alla chirurgia , y
0.025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9)
> 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
genere
0.003
Maschio
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Donna
91
55 (60,4)
36 (39,6)
caratteristiche fisiopatologici
Le dimensioni del tumore (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7)
> 5
130
52 (40,0)
78 (60,0)
localizzazione del tumore
0,033
Alto
31
9 (29,0)
22 (71,0)
Medio
53
31 (58,5)
22 (41,5)
inferiore
245
114 (46,5)
131 (53,5)
tipo istologico
< 0,001
differenziata (WD, MD): 101
24 (23,8)
77 (76,2)
indifferenziato (PD, UD)
228
130 (57.0)
98 (43,0)
modello di crescita
< 0,001
espansione
76
23 (30.3 )
53 (69,7)
Intermedio
81
22 (27,2)
59 (72,8)
infiltrativa
172
109 (63,4)
63 ( 36.6)
T fase
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44.2)
130 (55,8)
metastasi linfonodali
0,905
negativo
101
48 (47,5)
53 (52,5)
positivo 228
106 (46,5)
122 (53,5)
linfatico invasione
0.898
negativo
248
117 (47,2)
131 (52,8)
positivo
81
37 (45,7)
44 (54,3)
stadio del tumore
0,589
IA, IB
63
33 (52,4)
30 (47.6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, ben differenziato; MD
, moderatamente differenziato; PD
, scarsamente differenziato, UD
, indifferenziata.
In totale 19 studi sono stati inizialmente identificato. Quattordici studi sono stati esclusi perché non hanno incluso un confronto prognostica tra alta e bassa espressione di claudina-4. Un altro studio è stato escluso perché le informazioni critiche mancava [14]. Solo uno studio eseguito il confronto prognostico sulla base di specifiche cause di sopravvivenza (CSS) [13], così è stato escluso e abbiamo fatto la sopravvivenza globale (OS) l'endpoint primario della nostra meta-analisi. Tre studi hanno soddisfatto i criteri di inclusione e sono stati inclusi nell'analisi finale [15, 19, 34]. pool di analisi ha indicato che il sistema operativo di pazienti con alta claudina-4 era migliore rispetto a quelli con bassa claudina-4 (figura 3). Figura 3 plot Foresta dell'associazione tra sopravvivenza globale e l'espressione di Claudin-4. O-E, ha osservato previsto.
Secondo l'analisi di sopravvivenza univariata, l'espressione della proteina Claudin non è stato associato con i CSS dei pazienti (P ​​= 0,637
) o OS (P = 0,469
). sopravvivenza sottoclasse stratificato analisi sono state effettuate per T e lo stato N, invasione linfatica, e stadio del tumore, e nessuna differenza è stata trovata prognostico (sui file 1: Figura S1). Nel confronto dei CSS, unica tappa TNM (P
< 0,001) e linfatica invasione (P
< 0,001) sono stati significativi fattori prognostici. Dopo Cox analisi multivariata, solo stadio TNM è stato un significativo fattore prognostico (P
< 0,001). è stata osservata alcuna differenza di sopravvivenza tra i tre tipi di modello di crescita del tumore (P = 0.069
, figura 4A). Ulteriori analisi stratificata ha dimostrato alcuna differenza prognostico significativo tra i pazienti che presentavano alta rispetto a bassa espressione di claudina-4 in espansione e di tipo infiltrante cancro gastrico. Tuttavia, nel tipo di crescita del modello di cancro gastrico intermedia, la prognosi per i pazienti che presentano bassi livelli di espressione di Claudin-4 era significativamente migliore rispetto a quelli con elevati livelli di espressione (P = 0,023
, Figura 4B). Questo risultato è stato confermato anche dalla analisi multivariata di Cox (P = 0.037
). Il tasso di sopravvivenza cancro-specifica di cinque anni per i pazienti con bassi claudina-4 livelli di espressione in intermedio di tipo carcinoma gastrico è stato 76,4%, che era simile a tutti i tumori gastrici espansione di tipo (64,5%). I nostri risultati indicano che il tasso di CSS di cinque anni per i pazienti che presentano livelli elevati di espressione di Claudin-4 in intermedio di tipo carcinoma gastrico è stata del 46,6%, che era simile a infiltrante di tipo tumori gastrici (50,7%) (Figura 4C). Attraverso la colorazione di Claudin-4 nel tipo intermedio, abbiamo riclassificato la bassa espressione di claudina-4 in tipo e l'alta espressione di claudina-4 in espansione in tipo infiltrante e composto di due nuovi sottogruppi. C'è stata una differenza significativa nella prognosi tra questi due sottogruppi romanzo (p = 0.003
, Figura 4D). Dopo l'analisi sottoclasse di sopravvivenza stratificata in base allo stato T, lo stato N, invasione linfatica e stadio del tumore, abbiamo scoperto che le differenze prognostiche di due sottogruppi nuovi sono stati significativi nel pT3 /4, LN (+), fase III, la linfa invasione (-) ( file aggiuntivo 2: Figura S2). All'analisi multivariata, il romanzo di classificazione è stato un fattore prognostico significativo (P = 0.007
). Figura 4 curve di sopravvivenza di Kaplan-Meier. (A) Confronto di sopravvivenza per tre tipi di modello di crescita tumorale; (B) confronto di sopravvivenza nei pazienti con livelli bassi e alti di espressione di Claudin-4 a medio-tipo modello di crescita del cancro gastrico; curve di sopravvivenza (C) di Kaplan-Meier per l'espansione di tipo, bassi livelli di espressione di Claudin-4 a medio-tipo, alti livelli di espressione di Claudin-4 a medio-tipo, e infiltrante tipo di cancro gastrico. (D) Confronto di sopravvivenza in due sottogruppi nuovi.
Discussione
La famiglia claudina di proteine ​​svolge un ruolo importante nel mantenimento della funzione TJ, ed i livelli di espressione spesso mostrano un pattern tessuto-specifica. Di recente, un numero accumulando studi hanno dimostrato l'espressione ectopica o aberrante di claudine in molti tipi di tumore [25, 32, 35-37]. Tra i sottotipi Claudin, l'espressione di claudina-4 è frequentemente alterata in vari tessuti tumorali. Claudin-4 è una proteina integrale di membrana che appartiene alla famiglia Claudin. Questa proteina è un componente di TJs, ed è fondamentale per sigillare fogli cellulari e di controllo del flusso di ioni paracellular [10].
Relativamente pochi studi hanno esaminato i livelli di espressione di claudina-4 nelle lesioni precursori. Cunningham et al
. [38] hanno riportato un livello di espressione del 15% di claudina-4 nel normale stomaco, mentre in entrambi metaplasia intestinale e displasia l'espressione di Claudin-4 raggiunto il 100%. Matsuda et al
. [36] hanno riportato anche che claudina-4 è stato rilevato a livello dell'epitelio di metaplasia intestinale, ma non nell'epitelio normale. I nostri risultati colorazione dei campioni delle lesioni precursori erano in accordo con questi studi. L'alto tasso espressione di claudina-4 nella mucosa gastrica era molto bassa (solo il 15,9%), mentre le lesioni metaplasia intestinale e lesioni gastriche displasia epiteliale esibito un alto livello di espressione vicino al 100%. Perché CLDN-4
è espressa ad alti livelli nel normale dell'intestino tenue e del colon [11], la sua maggiore espressione nella metaplasia intestinale è facilmente comprensibile. Tuttavia, l'espressione differenziale delle claudina-4 nella mucosa e cellule normali esibendo displasia rimane poco chiaro. Le caratteristiche morfologiche principali di displasia epiteliale sono atipie cellulari, la differenziazione anormale, e l'architettura della mucosa disorganizzato; questi cambiamenti sono potenzialmente associati ad elevata claudina-4 espressione. I meccanismi alla base specifici devono essere ulteriormente chiariti. Nel loro insieme, i nostri risultati indicano che claudina-4 potrebbe potenzialmente servire come marcatore molecolare di metaplasia intestinale e displasia nella mucosa gastrica.
Nel presente studio, abbiamo scoperto che è diminuita espressione di claudina-4 era significativamente associato con la differenziazione istologica in tumore gastrico. Il gruppo differenziato mostrato un tasso più elevato di espressione claudina-4 rispetto al gruppo indifferenziata. Lee ed altri
. [18] hanno riportato che la ridotta espressione di claudina-4 correlato con rottura della struttura ghiandolare e la perdita di differenziazione, che era in accordo con i nostri risultati.
Il ruolo del claudina-4 per la prognosi rimane controverso. Resnicket al
. [13] hanno riportato che l'aumento claudina-4 espressione era un fattore prognostico negativo per i CSS in 146 pazienti, e Soini et al
. [14] ha proposto che claudina-4 non associare con OS. Tuttavia, i risultati della meta-analisi di questo studio suggeriscono che OS di pazienti con alta claudina-4 era migliore di quella dei pazienti con bassa claudina-4. L'analisi dei risultati di sopravvivenza sulla base di pazienti nel nostro istituto ha indicato che claudina-4 non è stato associato con i CSS o OS, che era simile ai risultati di Soini et al
., Ma diverso da altri studi.
Alcuni studi precedenti hanno suggerito che sovraregolazione di alcuni claudine contribuisce potenzialmente al neoplasia modificando direttamente la funzione TJ [39]. Sovraespressione di Claudin-3 e 4 può portare ad un aumento di invasione, la motilità e la sopravvivenza delle cellule tumorali [25]. Al contrario, nel carcinoma pancreatico, sovraespressione di Claudin-4 è stata associata significativamente ridotta invasività sia in vitro che in vivo

[40]. Anche se il nostro studio comprende quasi il maggior numero di casi al momento, il ruolo prognostico della claudina-4 nel carcinoma gastrico resta ambiguo (P = 0,637
). E 'possibile che diverse popolazioni e ambienti diversi contribuiscono a questi risultati diversi. Ulteriori studi tra cui un maggior numero di campioni è garantito. Modelli di crescita
istologici sono parametri importanti per la valutazione del comportamento biologico del cancro gastrico. Sulla base di modelli di crescita e invasività, Ming [41] hanno riportato due tipi di cancro gastrico, l'espansione e la infiltrativa type.The giapponese cancro gastrico Associazione divisi cancro gastrico in tre tipi base (INF) la crescita del tumore infiltrante in tessuto circostante: a Infa, i display tumorali espansione crescita con un bordo distinto dal tessuto circostante; in INFB, il tumore mostra un modello intermedio tra INFA e INFC; in INFC, il tumore infiltrante mostra una crescita senza bordo distinto con il tessuto circostante [42]. Questo ultimo tipo è più vicino alla nostra pratica clinica, in cui esiste il tipo intermedio ed è difficile classificare (Figura 5). Nei nostri risultati, ci sono state differenze nella sopravvivenza tra i tre tipi, ma non significativa (P = 0,069
). I tassi di sopravvivenza nei pazienti con il tipo intermedio erano tra l'espansione e le tipologie infiltrative. È interessante notare che, in analisi stratificata abbiamo scoperto che un'alta espressione claudina-4 è stata associata a prognosi infausta nel modello di crescita intermedia (P = 0,023
). Il tasso di sopravvivenza a cinque anni con bassa espressione di claudina-4 nel tipo intermedio (76,4%) era simile al tipo espansione (64,5%), mentre il gruppo con elevata espressione di claudina-4 (46,6%) era più vicino al tipo infiltrativa (50,7%). Così, potremmo potenzialmente classificare intermedio di tipo pazienti in base alla colorazione del Claudin-4. Abbiamo provveduto a riclassificare i pazienti con bassa espressione di claudina-4 nel gruppo intermedio ad avere il tipo di espansione, e pazienti con elevata espressione di claudina-4 come avere il tipo infiltrante del tumore. Entrambe le analisi univariata e multivariata ha confermato che non vi erano differenze significative nella sopravvivenza tra questi due sottogruppi. Dopo l'analisi sottoclassi stratificate di sopravvivenza, abbiamo scoperto che le differenze prognostiche nei due sottogruppi romanzo sono stati significativi nel pT3 /4, LN (+), fase III, la linfa invasione (-). Anche se nessuna differenza significativa è stata trovata in altre sottoclassi, una certa tendenza esisteva ancora e abbiamo ritenuto che i risultati negativi delle analisi statistiche sono state a causa delle dimensioni relativamente piccolo campione. Pertanto, l'espressione di claudina-4 potrebbe potenzialmente essere utilizzato come base per identificare ulteriormente tumori gastrici di tipo intermedio. Figura 5 ematossilina-eosina. I tre diversi modelli di crescita del cancro gastrico: (A) Tipo di espansione; (B) di tipo intermedio; (C) Tipo di infiltrante. Ingrandimento × 100.
Il ruolo biologico di claudina-4 nel carcinoma gastrico rimane poco chiaro. E 'stato precedentemente riportato che CLDN18
è specificamente indicato nella normale mucosa gastrica, ma non CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 è upregulated in adenocarcinomi gastrici, e ha aumentato l'espressione claudina-4 è più comunemente visto in intestinale-tipo in contrapposizione a diffondere tipo tumori [13, 17]. Tuttavia, Claudin-18 è downregulated in intestinale-tipo di cancro gastrico [22]. Questi risultati suggeriscono che i livelli di distribuzione e di espressione di proteine ​​Claudin possono variare in diverse cellule e tessuti del corpo [43]. espressione ectopica di Claudin è potenzialmente associato con la progressione del tumore. Sono necessari ulteriori studi per chiarire la funzione di Claudin-4 nella progressione del cancro gastrico.
Conclusioni
Abbiamo dimostrato sovraregolazione di claudina-4 in metaplasia intestinale e displasia epiteliale gastrica, il che suggerisce la sua potenziale utilità come biomarker in gastrici lesioni adenocarcinoma precursori. L'espressione di Claudin-4 non è stata associata con la sopravvivenza, ma è stato associato con scarsa differenziazione istologica e modelli infiltrative di crescita del tumore. Inoltre, questo studio ha dimostrato che l'espressione di claudina-4 potrebbe potenzialmente essere utilizzato come base per identificare ulteriormente i tumori gastrici di tipo intermedio.
Note
Jin-Liang Zhu, Peng Gao contribuito in maniera uguale a questo lavoro.
Abbreviazioni
AEC: Pagina 3 amino-9-etil carbazolo
AJCC:
Joint Committee on Cancer

CLDN:
Claudin gene
CSS:
causa-specifica sopravvivenza
FFPE:
formalina -fixed e inclusi in paraffina
HR: hazard ratio

INF:
tumore infiltrante

è:
punteggio immunoreattività
Mesh:
intestazioni per soggetto medici
MMP:
metalloproteinasi della matrice
OS:
sopravvivenza globale
TJ: giunzione
stretto
TNM:.
tumore-node-metastasi
Dichiarazioni
Ringraziamenti
ringraziamo il Dipartimento di Oncologia chirurgica del primo ospedale della Cina Medical University per la fornitura di tessuto gastrico umano campioni. Ringraziamo anche il Collegio di China Medical University per l'assistenza tecnica negli esperimenti. Questo lavoro è stato sostenuto dal National Science Foundation della Cina (n ° 30.972.879 n ° 81.201.888 e n 81.172.370) e il programma di educazione Dipartimento della Provincia di Liaoning (L2011137).
Materiale supplementare elettronica
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff sui file 1: Figura S1: analisi di sopravvivenza di sottoclasse stratificata in base allo stato T, lo stato N, invasione linfatica e lo stadio del tumore in base alla colorazione del Claudin-4. Il confronto della sopravvivenza tra i pazienti con bassi livelli di espressione dei livelli Claudin-4 e alta espressione in PT1 pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), fase I (e), stadio II (F), stadio III (G), invasione linfatica (-) (H), e l'invasione linfatica (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff sui file 2: Figura S2: analisi di sopravvivenza di sottoclasse stratificata in base allo stato T, lo stato N, invasione linfatica e lo stadio del tumore secondo i due sottogruppi romanzo. A-B. Il confronto della sopravvivenza tra infiltrativa + intermedia (H) vs. espansione + intermedio (L) in pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), la fase I (E), stadio II (F), stadio Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

• Meccanismo (s) dell'azione sottostante l'effetto gastroprotettivo della frazione acetato di etile ottenuto dalla metanolica greggio foglie estratto di Muntingia calabura
• Laparoscopia assistita rispetto aperto D2 gastrectomia radicale per carcinoma gastrico avanzato senza sierosa invasione: uno studio caso-controllo