Klinisch-pathologische betekenis van claudin-4 in maagcarcinoom

Klinisch-pathologische betekenis van claudin-4 in maagcarcinoom
Abstracte achtergrond
Afwijkende expressie van claudin eiwitten is gemeld in een verscheidenheid van kanker. Eerdere studies hebben aangetoond dat overexpressie van claudin tumorvorming en metastase kunnen bevorderen door meer invasie en overleving van tumorcellen. De prognostische waarde van claudin-4 bij maagkanker blijft onduidelijk.
Werkwijzen
Immunohistochemie werd gebruikt om de expressie van claudin-4 329 analyseren klinische maagkanker monsters en 44 normale monsters maag, intestinale metaplasie 21 monsters, en 21 aangrenzende voorloper laesies dysplasie monsters. Statistische methoden analyse werden gebruikt om de relatie tussen claudin-4 expressie en diverse clinicopathologische parameters te evalueren. Univariate en multivariate analysen uitgevoerd, respectievelijk de onafhankelijke voorspellers van overleving detecteren.
Resultaten
Claudin-4 expressie was aanwezig in slechts 7 (15,9%) monsters normale maag, maar expressie van claudin-4 in de intestinale metaplasie en dysplasie lesies lesies was 90,5% en 95,2%, respectievelijk. De expressie van claudin-4 was significant geassocieerd met histologische differentiatie (P Restaurant < 0,001) en tumorgroei patronen (P Restaurant < 0,001), maar niet in verband met de patiënt te overleven. Echter, tussentype kleuring van claudin-4 vertoonde een trend van correlatie met de overleving van patiënten (P
= 0,023). De vijf-jaarsoverleving met lage expressie van claudin-4 in intermediaire type (76,4%) was vergelijkbaar met het uitbreiden van het type (64,5%), terwijl de hoge expressie groep (46,6%) was dichter bij infiltratieve type (50,7%).
Conclusies
De bevindingen in deze studie tonen claudin-4 afwijkende expressie bij maagkanker en voorloper laesies. De expressie van claudin-4 kan dienen als basis voor het identificeren van maagkanker van de tussenvorm.
Sleutelwoorden
Maagcarcinoom Claudin-4 Tight junctions Achtergrond
Maagkanker is een van de meest voorkomende kwaadaardige tumoren en ongeveer 738.000 sterfgevallen voorgedaan als gevolg van maagkanker in 2008 wereldwijd. Meer dan 70% van de nieuwe gevallen en sterfgevallen in ontwikkelingslanden, met name in Oost-Azië [1]. Maagkanker wordt over het algemeen ontwikkelen als een meerstaps progressie van chronische gastritis, atrofische gastritis, intestinale metaplasie, dysplasie en tenslotte kanker [2]. Tijdens dit proces wordt verlies van cel polariteit en verstoring van cel-cel contacten frequent waargenomen en deze speelt een belangrijke rol in de progressie van kanker.
Tight junctions (TJS) zijn essentieel voor het handhaven van normale structuur en fysiologische functie van het epitheel en endotheel [3, 4]. TJS niet alleen dienen als een fysieke barrière voor opgeloste stoffen en wateren vrijelijk door het paracellulaire ruimte tussen epitheel- en endotheelcellen platen, maar ook belangrijke rollen spelen bij het handhaven celpolariteit en signaaltransductie [3, 5, 6]. Echter, kankercellen vertonen vaak abnormale TJ functie [7].
Claudins lid van een grote familie van transmembraan eiwitten die behoren tot de essentiële componenten van TJs en claudine-afwijkende expressie mogelijk leidt tot structurele en functionele beschadiging van TJs [ ,,,0],8]. Momenteel hebben in totaal 24 claudin genen zijn geïdentificeerd in zoogdieren, en ze vertonen vaak weefselspecifieke expressiepatronen [9]. Onlangs hebben talrijke studies de afwijkende expressie van Claudins aangetoond in verschillende menselijke kankers [10, 11]. Voor zover wij weten, zijn de expressie van Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 en 23 zijn gerapporteerd bij maagkanker [12-23]. Onder de verschillende claudin eiwitten gerelateerd aan maagkanker, de functie van claudin-4 was niet consistent. Bijvoorbeeld, Jung et al
. [15] en Ohtani et al
. [19] vonden dat de expressie van claudin-4 significant gecorreleerd met gunstige overleving van patiënten met maagkanker in 72 en 124 de gevallen. Echter, Resnick et al
. [13] gemeld dat matige tot sterke claudine-4 kleuring bij maagkanker geassocieerd is met een slechte overleving in 146 gevallen. Soiniet al
. [14] vond geen duidelijk verband tussen claudin-4 expressie en patiënt prognose in 118 gevallen. Interessant ook is de expressie van claudin-4 aangetoond dat het een rol spelen bij het bepalen matrix metalloproteïnase (MMP) activiteit, wat aangeeft dat claudine-4 invasie wellicht gemedieerd door de activering van MMPs [24, 25]. Bovendien eerdere studies dat claudine-4 potentieel als een behandeling voor kanker [26-28] kan hebben. Aldus zijn verdere onderzoeken nodig om deze controversiële resultaten en de reële functies van claudin-4 verduidelijken. In deze studie, die gericht zijn we naar de clinicopathologische verenigingen en prognostische waarde van claudin-4 expressie bij maagkanker te identificeren.
Methoden
Patiënten en weefselmonsters
in deze studie, weefselmonsters uit een totaal van 329 patiënten met maagkanker werden verkregen tussen 1998 en 2004 bij de afdeling Chirurgische Oncologie, The First Hospital van de China Medical University. Alle patiënten ondergingen curatieve radicale gastrectomy met standaard lymfeklierdissectie. De histopathologische diagnose van 21 intestinale metaplasie, dysplasie 21, 44 microscopisch normaal maagslijmvlies, en 329 maagdarmkanker monsters van de 329 patiënten werd uitgevoerd door twee onafhankelijke pathologen. We verkregen schriftelijke geïnformeerde toestemming van alle patiënten, en de studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van de China Medical University. Geen van de patiënten had chemotherapie of radiotherapie voor de operatie kregen. De gedetailleerde postoperatieve pathologische diagnose rapporten werden verkregen en opgenomen geslacht, leeftijd, tumor locatie, omvang, differentiatie status, groeipatroon en tumor-node-metastase (TNM) fase. De criteria van de TNM classificatie voor maagcarcinoom in overeenstemming waren met de 7de 2010 Gemengd Comité American on Cancer (AJCC) staging manual [29]. Het criterium voor histopathologische indeling van differentiatie volgens de 2000 wereldgezondheidsorganisatie indeling van maagcarcinoom [30]. Het criterium voor het patroon van tumorgroei was volgens de Japanse indeling van maagcarcinoom, 3e editie Engels. kenmerken alle patiënten zijn samengevat in Tabel 1. Patiënt monster omvatte 238 mannelijke en 91 vrouwelijke patiënten met een gemiddelde leeftijd van 57 jaar (spreiding 26-81 jaar). Alle patiënten werden gevolgd via de telefoon onderzoek of enquête, en de follow-up periode varieerde 1-136 maanden (mediaan van 56 maanden) .table 1 Clinicopathologische kenmerken van 329 patiënten met een maagcarcinoom
Variabele
Waarde

Leeftijd bij chirurgie, y
Mean
57,0
Range
26-81
Gender, aantal
Man
238
Female
91
tumorgrootte cm
Mean
5.0
Range
1,0, 15,0
Tumor locatie, aantal
Upper
31
Midden
53
Lagere
245
differentiatie status, aantal
goed gedifferentieerde
47
Matig gedifferentieerd
54
slecht gedifferentieerde
218
Onzichtbare
10
De groei patroon, aantal
Expanding
76
Intermediate
81
Infiltratieve
172
Tumor (T) podium, nummer
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
Node (N) het podium, nummer
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
lymfatische invasie, aantal
Negative
248
Positieve
81
Tumor stadium, aantal
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180
Vital statistieken, aantal
Alive
152
Dead, alle oorzaken
177
Dead, maagkanker
143
Dead, ongerelateerde
22
Info niet beschikbaar
12
Immunohistochemie Ondernemingen De formaline gefixeerde en in paraffine ingebedde (FFPE) weefsel blokken werden gesneden in 5 urn dikke secties, dan paraffine ontdaan met xyleen en gehydrateerd met behulp van een afgestudeerd reeks van ethanol. De secties werden geïncubeerd in kokend citroenzuur (pH 6,0) voor antigen herstel in kokend snelkookpan. De secties werden overnacht geïncubeerd bij 4 ° C met de volgende primaire antilichamen: anti-claudine-4 monoklonale antilichaam, 1: 100 verdunning kloon 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, USA. Immunohistochemische kleuring werd uitgevoerd met behulp van de MaxVision TMHRP-Polymer anti-muis /Konijn IHC Kit (Fuzhou Maixin, China) met 3 amino-9-ethyl-carbazool (AEC) als het enzym substraat. De coupes werden daarna licht tegengekleurd met hematoxyline. Positieve controles waren colonmucosa en de modellen waarin de primaire antilichaam werd vervangen door niet-reactieve antilichamen dienden als negatieve controles.
Immunokleuring resultaten werden onafhankelijk van elkaar met behulp van een semi-kwantitatieve scoring systeem [31] uitgelegd door twee pathologen. De immunokleuring reacties werden beoordeeld door kleuring intensiteit (0, geen vlekken, 1, zwak, 2, matig, 3, sterk) en het percentage gekleurde epitheelcellen (0, < 5%, 1, 5 tot 25%; 2, 26 tot 50%, 3, 51-75% en 4, > 75%). Het percentage positiviteit van epitheelcellen en vlekken intensiteit werden vervolgens vermenigvuldigd om de immunoreactiviteit score (IS) voor elk geval te genereren. Monsters werden rescored als er discrepanties in IS tussen de twee pathologen, tot er een consensus werd bereikt. Wij verdeelden de monsters in twee groepen op basis van de resultaten van immunokleuring van het weefsel: lage expressie (IS < 4) en hoge expressie (IS ≥ 4). Dit evaluatiesysteem voor claudine-4 werd gebruikt in eerdere studies [32] Statistische analyse
Een meta-analyse.
Werd uitgevoerd om de rol van claudin-4 bij maagkanker bevestigen. We zochten het Engels literatuur voor relevante studies gepubliceerd vóór 1 juni 2013, met behulp van de PubMed-database met de volgende voorwaarden: "maag gezwellen 'en' claudin-4 'in de medische trefwoorden (MeSH). Verwijzingen in de opgehaalde voorwerpen werden verder gescreend op eerdere oorspronkelijke studies. De inclusiecriteria waren patiënten met maagkanker, waaronder een prognostische vergelijking tussen hoge en lage expressie van claudin-4. De bijbehorende auteurs werden gecontacteerd om het verkrijgen van ontbrekende informatie, en sommige studies werden uitgesloten indien kritieke informatie nog steeds vermist werd na herhaalde verzoeken.
Voor de kwantitatieve aggregatie van de overleving resultaten, de waargenomen verwacht (OE) statistiek en variantie werden gecombineerd om te geven de effectieve waarde. De O-E-waarden en de verschillen werden geschat uit beschikbare gegevens met behulp van de methoden Tierney et al
gerapporteerd. [33]. Als de studie gaf een hazard ratio (HR) werden de O-E waarden en varianties geschat gebaseerd. Als het onderzoek geen HR voorzag maar gerapporteerde gegevens in de vorm van een overlevingscurve werd geëxtraheerd overlevingskansen op bepaalde gespecificeerde tijden schatting HR en de variantie reconstrueren.
We gebruikten de chi-kwadraat test om de evaluatie relatie tussen claudin-4 expressie en diverse clinicopathologische parameters. Overlevingsanalyse werd uitgevoerd met behulp van de Kaplan-Meier-methode, en verschillen tussen de groepen werden geanalyseerd met de log-rank test. De Cox regressie multivariate model werd toegepast op een stapsgewijze voorwaartse wijze de onafhankelijke voorspellers van overleving te detecteren. Tweezijdige P
-waarden kleiner dan 0,05 werden beschouwd als een statistisch significant resultaat te geven. Alle statistische analyses werden uitgevoerd met SPSS software (versie 17.0, SPSS voor Windows, Chicago, IL, USA). RevMan 5,2 en analysesoftware (The Cochrane Collaboration)
Resultaten
Claudin-4 immunokleuring zich in een overwegend vliezige patroon met enkele monsters tonen een lage cytoplasmatische kleuring. Slechts 15,9% (7/44) van de normale maagslijmvlies vertoonden hoge expressie niveaus van claudin-4. Daarentegen 90,5% (19/21) van de intestinale metaplasie laesies en 95,2% (20/21) van de gastrische dysplasie epitheliale laesies vertoonden hoge expressieniveaus van claudin-4. Van maagcarcinoom monsters onderzocht, 53,2% (175/329) van de gevallen toonden hoge claudine-4 expressie (Figuur 1). Figuur 1 Claudin-4 immunokleuring. (A) Normaal maag muscoma, geen vlekken; (B) intestinale metaplasie, hoge expressie; (C) matig gedifferentieerd om goed gedifferentieerde maagkanker, hoge expressie; (D) slecht gedifferentieerde maagkanker, geen kleuring. Vergroting x 200.
De expressie niveau van claudin-4 was significant gecorreleerd met tumor differentiatie (P Restaurant < 0,001), geslacht (P
= 0,003), leeftijd (P
= 0,025) en tumor locatie (P
= 0,033). Volgens microscopische inspectie van de tumorgroei patroon, werden 76 gevallen geclassificeerd als het type groeiende en 172 gevallen van de infiltratieve soort, terwijl 81 gevallen waren vastbesloten om de tussenliggende type zijn. Het expressieniveau van claudin-4 was ook significant gecorreleerd met de tumor groeipatroon (P
< 0,001). Hoge expressie van claudin-4 werd waargenomen bij 69,7% van de groeiende type en 72,8% van de intermediaire vormen van maagkanker, terwijl slechts 36,6% van de infiltrative soort vertoonden hoge expressie. Echter, onze bevindingen bleek geen significante correlatie tussen de expressie van claudin-4 en tumorgrootte, invasiediepte, lymfeknoop metastase, lymfatische invasie en tumor stadium (figuur 2, tabel 2). Figuur 2 Expressie van claudin-4 in de normale maagslijmvlies, intestinale metaplasie, dysplasie en kanker (met inbegrip van de uitbreiding, tussen- en infiltratieve types).
Tabel 2 Statistische resultaten van de relaties tussen claudin-4 expressie en diverse clinicopathologic kenmerken
Variable
Totaal aantal patiënten (%)
Patiënten met lage claudin-4 expressie (%)

Patiënten met hoge claudin-4expression (%)
P- waarde
329
154 (46,8)
175 (53,2)
Leeftijd bij chirurgie , y
0,025
≤ 60
192
100 (52.1)
92 (47,9) Restaurant > 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
Gender
0.003
Man
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Female
91
55 (60,4)
36 (39,6)
Pathofysiolochische functies
Tumor grootte (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7) Restaurant > 5
130
52 (40,0)
78 (60,0)
Tumor locatie
0,033
Upper
31
9 (29,0)
22 (71,0)
Midden
53
31 (58,5)
22 (41,5)
Lower
245
114 (46.5)
131 (53,5)
Histologisch soort Restaurant < 0,001
Gedifferentieerde (WD, MD)
101
24 (23,8)
77 (76,2)
Niet-gedifferentieerde (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0)
groeipatroon Restaurant < 0,001
Uitbreiding
76
23 (30.3 )
53 (69,7)
Intermediate
81
22 (27,2)
59 (72,8)
Infiltratieve
172
109 (63,4)
63 ( 36.6)
T-stadium
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44.2)
130 (55,8)
lymfekliermetastasen
0,905
Negatief
101
48 (47,5)
53 (52,5)
Positieve
228
106 (46,5)
122 (53,5)
lymfatische invasie
0,898
Negatief
248
117 (47,2)
131 (52,8)
Positieve
81
37 (45,7)
44 (54,3)
Tumor stadium
0,589
IA, IB
63
33 (52,4)
30 (47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, goed gedifferentieerd; MD
, matig gedifferentieerd; PD
, slecht gedifferentieerde, UD
, ongedifferentieerde.
In totaal zijn 19 studies werden aanvankelijk geïdentificeerd. Veertien studies werden uitgesloten omdat ze een prognostische vergelijking tussen hoge en lage expressie van claudin-4 niet heeft opgenomen. Een verdere studie werd uitgesloten omdat essentiële informatie ontbrak [14]. Slechts één onderzoek verricht de prognostische vergelijking op basis van de oorzaak-specifieke overleving (CSS) [13], dus het was uitgesloten en we maakten de totale overleving (OS) het primaire eindpunt van onze meta-analyse. Drie studies voldeden aan de inclusiecriteria en werden opgenomen in de uiteindelijke analyse [15, 19, 34]. Gepoolde analyse gaf aan dat het OS van patiënten met hoge claudine-4 was beter dan die met de lage claudin-4 (figuur 3). Figuur 3 Forest plot van de associatie tussen de totale overleving en de expressie van claudin-4. O-E, waargenomen verwacht.
Volgens univariate survival analyse werd claudin eiwitexpressie niet geassocieerd met CSS patiënten (P
= 0,637) of OS (P
= 0,469). Gelaagde subklasse survival analyses werden uitgevoerd voor T en N-status, lymfatische invasie, en tumor stadium, en er geen prognostische verschil werd gevonden (Extra file 1: figuur S1). In de vergelijking van CSS, maar TNM stadium (P Restaurant < 0,001) en lymfatische invasie (P Restaurant < 0,001) waren significant prognostische factoren. Na Cox multivariate analyse, alleen TNM etappe was een belangrijke prognostische factor (P Restaurant < 0,001). Geen overleving verschil waargenomen tussen de drie soorten tumorgroei patroon (P = 0,069
figuur 4A). Verdere gelaagde analyse toonde geen significant prognostische verschil tussen patiënten die een hoge versus lage expressie van claudin-4 in het uitbreiden en infiltratieve soort maagkanker tentoongesteld. Echter, in tussentype groeipatroon maagkanker, de prognose voor patiënten vertonen lage expressie van claudin-4 was significant beter in vergelijking met mensen met een hoge expressie niveaus (P = 0,023
, Figuur 4B). Dit resultaat werd ook bevestigd door de Cox multivariate analyse (P
= 0,037). De vijf-jaar kankerspecifieke overleving voor patiënten met lage claudine-4 expressieniveaus in intermediaire type maagkanker was 76,4%, wat vergelijkbaar alle groeiende type maagkanker (64,5%) was. Onze resultaten gaven aan dat de vijf jaar CSS tarief voor patiënten vertonen hoge expressieniveaus van claudin-4 in tussenproduct type maagkanker was 46,6%, wat vergelijkbaar infiltratieve type maagkanker (50,7%) (Figuur 4C) was. Door kleuring van claudin-4 in de tussenvorm, geherkwalificeerd we de lage expressie van claudin-4 in de uitbreiding exterieur en hoge expressie van claudin-4 in infiltratieve type en bestaat twee nieuwe subgroepen. Er was een significant verschil in prognose tussen deze twee nieuwe subgroepen (P = 0,003
, Figuur 4D). Na subklasse overlevingsanalyse gestratificeerd T-status, N staat, lymfatische invasie en tumor stadium, vonden we dat de prognostische verschillen van twee nieuwe subgroepen significant in de pT3 /4, LN (+), fase III, lymfe invasie (-) ( extra file 2: Figuur S2). In multivariate analyse, de roman kwalificatie was een significante prognostische factor (P
= 0,007). Figuur 4 Kaplan-Meier curves. (A) Vergelijking van overleving voor drie soorten tumorgroei patroon; (B) vergelijking van overleving bij patiënten met lage en hoge expressieniveaus van claudin-4 in tussenproduct type groeipatroon maagkanker; (C) Kaplan-Meier survival curves voor het uitbreiden van het type, lage expressie niveaus van claudin-4 in intermediaire-type, hoge expressie niveaus van claudin-4 in intermediaire-type, en infiltratieve-type maagkanker. (D) Vergelijking van overleving in twee nieuwe subgroepen.
Discussie
claudin familie van eiwitten speelt een belangrijke rol bij het handhaven van TJ functie en de expressieniveaus vertonen vaak een weefsel-specifiek patroon. Onlangs heeft een accumulerende aantal studies hebben aangetoond dat ectopische of afwijkende expressie van Claudins in vele tumortypen [25, 32, 35-37]. Onder de claudin subtypen, is de expressie van claudin-4 vaak veranderd in verschillende tumorweefsels. Claudin-4 is een integraal membraaneiwit dat behoort tot de familie claudin. Dit eiwit is een component van TJs, en is cruciaal voor het afdichten cellulaire platen en besturen paracellulair ionenflux [10].
Relatief weinig studies de expressieniveaus van claudin-4 in precursor lesies onderzocht. Cunningham et al
. [38] rapporteerden een 15% expressieniveau van claudin-4 in de normale maag, terwijl zowel in intestinale metaplasie en dysplasie de expressie van claudin-4 bereikte 100%. Matsuda et al
. [36] ook gemeld dat claudine-4 gedetecteerd in het epitheel van intestinale metaplasie maar niet in normaal epitheel. Onze kleuring resultaten van voorloper laesie monsters werden in overeenstemming met deze studies. De hoge expressie percentage claudin-4 in normale maagslijmvlies was zeer laag (slechts 15,9%), terwijl intestinale metaplasie laesies en gastrische dysplasie epitheliale laesies vertoonde een hoog expressieniveau dicht bij 100%. Omdat CLDN-4
wordt uitgedrukt op hoge niveaus in de normale dunne darm en dikke darm [11], is de verhoogde expressie in intestinale metaplasie gemakkelijk begrepen. De differentiële expressie van claudin-4 in normale mucosa en cellen vertonen dysplasie blijft onduidelijk. De belangrijkste morfologische kenmerken van epitheliale dysplasie zijn cellulaire atypia, abnormale differentiatie, en ongeorganiseerd mucosale architectuur; deze veranderingen mogelijk samenhangen met verhoogde claudine-4 expressie. De specifieke onderliggende mechanismen moeten verder worden opgehelderd. Samengevat, onze bevindingen blijkt dat claudine-4 zou kunnen dienen als een moleculaire marker van intestinale metaplasie en dysplasie in maagslijmvlies.
In de onderhavige studie hebben we gevonden dat expressie van claudin-4 verlaagd was significant geassocieerd met histologische differentiatie maagkanker. Het gedifferentieerde groep vertoonden een hogere expressie percentage van claudin-4 in vergelijking met de ongedifferentieerde groep. Lee et al
. [18] gemeld dat verminderde expressie van claudin-4 gecorreleerd met verstoring van glandulaire structuur en verlies van differentiatie, die in overeenstemming met onze resultaten. Ondernemingen De rol van claudin-4 prognostische blijft controversieel. Resnicket al
. [13] gemeld dat verhoogde claudin-4 expressie was een slechte prognostische factor voor CSS in 146 patiënten en Soini et al
. [14] voorgesteld dat claudin-4 niet associëren met OS. De resultaten van de meta-analyse van deze studie suggereren dat OS van patiënten met hoge claudine-4 was beter dan die van patiënten met lage claudine-4. De resultaten overlevingsanalyse basis van patiënten in ons instituut gaven aan dat claudine-4 niet werd geassocieerd met CSS of OS, die vergelijkbaar zijn met de resultaten van Soini et al
., Maar anders dan andere onderzoeken was.
Sommige eerdere studies hebben gesuggereerd dat opregulatie van bepaalde Claudins potentieel bijdraagt ​​aan neoplasia door direct te veranderen TJ-functie [39]. Overexpressie van claudin-3 en 4 kan leiden tot een toename van invasie, motiliteit en overleving van tumorcellen [25]. Integendeel, in pancreascarcinoom, overexpressie van claudin-4 wordt geassocieerd met significant verminderd invasiviteit zowel in vitro als in vivo

[40]. Hoewel onze studie bijna het grootste aantal zaken op dit moment, de prognostische rol van claudin-4 bij maagkanker omvat blijft dubbelzinnig (P
= 0,637). Het is mogelijk dat verschillende populaties en verschillende omgevingen bijdragen aan deze verschillende resultaten. Verdere studie met een groter aantal monsters gerechtvaardigd.
Histologische groeipatronen belangrijke parameters voor de beoordeling van de biologische gedrag van maagkanker. Op basis van patronen van groei en invasiviteit, Ming [41] meldde twee types van maagkanker, de uitbreidende en de infiltrative type.The Japanse Gastric Cancer Association verdeeld maagkanker in drie typen op basis van tumor-infiltrerende (INF) groei in het omringende weefsel: in Infa, de tumor displays uitbreidende groei met een duidelijke grens van het omringende weefsel; in INFb, de tumor toont een tussenliggende patroon tussen Infa en INFc; INFc in de tumor wordt infiltratieve groei zonder duidelijke rand met het omringende weefsel [42]. Dit laatste type is dichter bij de klinische praktijk, waarbij de tussenvorm bestaat en is moeilijk te classificeren (Figuur 5). In onze resultaten waren er verschillen in overleving tussen de drie types, maar niet significant (p = 0,069
). Overleving bij patiënten met de tussenvorm waren tussen de uitbreidende en de infiltrative types. Interessant is dat in gelaagde analyse vonden we dat een hoge claudin-4 expressie werd geassocieerd met een slechte prognose in de tussenliggende groeipatroon (P
= 0,023). De vijf jaar overlevingspercentage met lage expressie van claudin-4 in de tussenvorm (76,4%) was vergelijkbaar met de soort uitdijende (64,5%), terwijl de groep met een hoge expressie van claudin-4 (46,6%) dichter bij de infiltratieve type (50,7%). Zo kunnen we eventueel classificeren tussenproduct type patiënten volgens de kleuring van claudin-4. We heringedeeld patiënten met lage expressie van claudin-4 in de tussenliggende groep met de uitzettende type en patiënten met hoge expressie van claudin-4 als zijnde de infiltratieve type tumor. Zowel de univariate en multivariate analyse bevestigde dat er significante verschillen in overleving tussen deze twee subgroepen. Na gestratificeerde subklassen survival analyse vonden we dat de prognostische verschillen de twee nieuwe subgroepen significant in de pT3 /4, LN (+), fase III, lymfe invasie (-). Hoewel er geen significant verschil werd gevonden in andere subklassen, een bepaalde trend nog bestond en wij van mening dat de negatieve resultaten van de statistische analyse waren als gevolg van de relatief kleine steekproef. Dus de expressie van claudin-4 zou kunnen worden gebruikt als basis voor gastrische kanker van de tussenvorm nadere specificatie. Figuur 5 hematoxyline-eosine kleuring. De drie verschillende groeipatronen van maagkanker: (A) de uitbreiding van het type; (B) tussentype; (C) infiltratieve type. Vergroting x 100.
De biologische rol van claudin-4 bij maagkanker blijft onduidelijk. Er is eerder gerapporteerd dat CLDN18
specifiek uitgedrukt in normale maagslijmvlies, maar niet CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 opgereguleerd gastrische adenocarcinomen en verhoogde claudine-4 expressie wordt vaker gezien bij intestinale-type in tegenstelling tot diffuse type tumoren [13, 17]. Echter, claudine-18 wordt neerwaarts gereguleerd in intestinale type maagkanker [22]. Deze resultaten suggereren dat de verdeling en expressie van claudin eiwitten variëren in verschillende cellen en weefsels van het lichaam [43]. Ectopische expressie van claudin is mogelijk geassocieerd met progressie van de tumor. Verdere studies zijn gerechtvaardigd om de functie van claudin-4 opheldering in de progressie van maagkanker.
Conclusies
Wij toonden opregulatie van claudin 4-intestinale metaplasie en epitheliale dysplasie maag, die de potentiële bruikbaarheid suggereert als biomarker adenocarcinoom van de maag voorloper laesies. Expressie van claudin-4 werd niet geassocieerd met overleving, maar was geassocieerd met een slechte histologische differentiatie en infiltratieve patronen van tumorgroei. Bovendien, deze studie toonden dat expressie van claudin-4 zouden kunnen worden gebruikt als basis voor verdere maagkanker van de tussenvorm identificeren.
Merkt
Jin-Liang Zhu, Peng Gao eveneens bijgedragen aan dit werk.
Afkortingen
AEC:
3 amino-9-ethyl-carbazool
AJCC: of American Paritair Comité voor de Cancer

CLDN:
Claudin gen
CSS:
oorzaak-specifieke overleving
FFPE:
formaline gefixeerde en in paraffine ingebedde
HR:
hazard ratio
INF:
tumor-infiltrerende

IS:
immunoreactiviteit score
MeSH:
medische trefwoorden
MMP:
matrixmetalloproteïnase
OS:
totale overleving
TJ:
tight junction
TNM:.
tumor-node-metastase
verklaringen
Dankwoord
Wij danken de afdeling Chirurgische Oncologie van de eerste Hospital van de China Medical University voor het verstrekken van de menselijke maag weefsel samples. We danken ook het College van de China Medical University voor technische bijstand in experimenten. Dit werk werd ondersteund door de National Science Foundation of China (nr 30972879 No. 81201888 en nr 81172370) en het Programma van het Departement Onderwijs van de provincie Liaoning (L2011137).
Electronic aanvullend materiaal
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff Aanvullende bestandsinformatie 1: Figuur S1: Onderklasse survival analyse gestratificeerd door T-status, N-status, lymfatische invasie en tumorstadium volgens de kleuring van claudin-4. Vergelijking van de overleving tussen patiënten met lage expressieniveaus van claudin-4 en hoge expressieniveaus in pT1 Pt2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), stage I (E), fase II (F), stadium III (G), lymfatische invasie (-) (H) en lymfatische invasie (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff Extra file 2: Afbeelding S2: Onderklasse survival analyse gestratificeerd door T-status, N-status, lymfatische invasie en tumorstadium volgens de twee nieuwe subgroepen. A-B. Vergelijking van de overleving tussen infiltrative + tussenproduct (H) vs. uitbreiding + tussenproduct (L) in pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), fase I (E), fase II (F), stage III (G), lymfatische invasie (-) (H) en lymfatische invasie (+) (I). Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Werkingsmechanisme (n) van actie onderliggende gastrobeschermende effect ethylacetaat wordt verkregen door het ruwe methanol bladeren extract van Muntingia calabura
• -Laparoscopie bijgestaan ​​versus geopend D2 radicale gastrectomie voor gevorderde maagkanker zonder serosal invasie: een case-control studie