significado clínico-patológico de claudin-4 em carcinoma

significado clínico-patológico gástrica de claudin-4 em carcinoma gástrico da arte abstracta
Fundo
expressão aberrante de proteínas claudina tem sido relatada em uma variedade de cânceres. Estudos anteriores demonstraram que a sobre-expressão da claudina pode promover a tumorigénese e metástases através do aumento da invasão e sobrevivência das células tumorais. No entanto, o significado prognóstico da claudina-4 no câncer gástrico permanece obscuro.
Métodos
imuno-histoquímica foi utilizada para analisar a expressão da claudina-4 em 329 amostras de cancro gástrico clínicos e 44 amostras do estômago normais, 21 amostras de metaplasia intestinal, e 21 precursor adjacente lesões amostras displasia. métodos de análise estatística foram utilizados para avaliar a relação entre a expressão da claudina-4 e vários parâmetros clínico. Análises univariada e multivariada foram realizadas, respectivamente, para detectar os preditores independentes de sobrevivência.
Resultados
Claudina-4 expressão estava presente em apenas 7 (15,9%) amostras gástricas normais, mas expressão da claudina-4 no intestinal lesões metaplasia e displasia lesões foi de 90,5% e 95,2%, respectivamente. A expressão da claudina-4 foi significativamente associada com diferenciação histológica (P Art < 0,001), e os padrões de crescimento tumoral (P Art < 0,001), mas não associado com a sobrevida do paciente. No entanto, o tipo de coloração intermediária de claudin-4 exibiu uma tendência de correlação com a sobrevida dos pacientes (P
= 0,023). A taxa de sobrevivência de cinco anos com baixa expressão da claudina-4 no tipo intermediário (76,4%) foi semelhante à expansão tipo (64,5%), enquanto o grupo de expressão elevada (46,6%) estava mais perto de tipo infiltrativa (50,7%).
conclusões
Os resultados deste estudo demonstram claudin-4 expressão aberrante em lesões cancerosas e precursoras gástricas. A expressão da claudina-4 poderia servir de base para a identificação de câncer gástrico do tipo intermediário.
Palavras-chave
gástrica carcinoma claudina-4 junções apertadas fundo
O câncer gástrico é um dos tumores malignos mais comuns, e aproximadamente 738,000 mortes ocorreram devido a câncer gástrico em 2008 em todo o mundo. Mais de 70% dos novos casos e mortes ocorrem em países em desenvolvimento, particularmente na Ásia Oriental [1]. O cancro gástrico é geralmente entendido para desenvolver-se como uma progressão de passos múltiplos a partir de gastrite crónica, gastrite atrófica, metaplasia intestinal, displasia, e, finalmente, o cancro [2]. Durante este processo, é frequentemente observada perda da polaridade celular e ruptura das junções célula-célula, e esta desempenha um papel importante na progressão do cancro.
Junções apertadas (TJS) são essenciais para manter a estrutura normal e função fisiológica do epitélio e endotélio [3, 4]. TJs não só servem como uma barreira física para impedir que os solutos e a água de passar livremente através do espaço entre paracelular epitelial e folhas de células endoteliais, mas também desempenham um papel crítico na manutenção da polaridade celular e de transdução de sinal [3, 5, 6]. No entanto, as células de cancro frequentemente apresentam função anormal TJ [7].
Claudinas são membros de uma grande família de proteínas transmembranares que estão entre os componentes essenciais de TJs, e claudina-expressão aberrante potencialmente leva a danos estruturais e funcionais de TJs [ ,,,0],8]. Presentemente, um total de 24 genes claudina foram identificados em mamíferos, e que muitas vezes mostram padrões específicos de tecido de expressão [9]. Recentemente, vários estudos têm demonstrado a expressão aberrante de claudinas em vários cancros humanos [10, 11]. Para o nosso conhecimento, a expressão de Claudina-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 e 23 foram relatados em cancros gástricos [12-23]. Entre as várias proteínas claudina relacionadas com o cancro gástrico, a função de claudina-4 não foi consistente. Por exemplo, Jung et ai
. [15] e Ohtani et al
. [19] verificaram que a expressão da claudina-4 significativamente correlacionado com a sobrevivência favorável para os doentes com cancro gástrico em 72 e 124 casos, respectivamente. No entanto, Resnick et ai
. [13] relatou que moderada a forte claudin-4 coloração em câncer gástrico foi significativamente associada com a sobrevivência pobre em 146 casos. Soiniet al
. [14] não encontraram nenhuma associação clara entre claudin-4 expressão e prognóstico do paciente em 118 casos. Curiosamente, também, a expressão da claudina-4 tem demonstrado desempenhar um papel na determinação da actividade de metaloproteinase de matriz (MMP), indicando que claudina-4 pode ter mediada invasão através da activação das MMPs [24, 25]. Além disso, estudos prévios relataram que claudina-4 pode ter potencial como um tratamento para o cancro [26-28]. Assim, novos estudos são necessários para esclarecer estes resultados controversos e as funções reais de claudin-4. Neste estudo, buscou-se identificar as associações clínicas e valor prognóstico da expressão claudin-4 no câncer gástrico.
Métodos
Pacientes e amostras de tecido
Neste estudo, amostras de tecido de um total de 329 pacientes com câncer gástrico foram obtidos entre 1998 e 2004 no Departamento de Oncologia cirúrgica, o primeiro hospital da China Medical University. Todos os pacientes foram submetidos a gastrectomia radical curativa com dissecção de linfonodos padrão. O diagnóstico histopatológico de 21 de metaplasia intestinal, displasia 21, 44 mucosa do estômago ao microscópio normal, e 329 amostras de adenocarcinoma gástrico dos 329 pacientes foi realizada por dois patologistas independentes. Obtivemos consentimento informado por escrito de todos os pacientes, eo estudo foi aprovado pelo comitê de ética da Universidade de Medicina China. Nenhum dos pacientes tinham recebido quimioterapia ou radioterapia antes do procedimento cirúrgico. Os relatórios detalhados de diagnóstico de patologia pós-operatório foram obtidos e incluíram sexo, idade, localização do tumor, o tamanho, estado de diferenciação, padrão de crescimento, e estágio do tumor-nódulo-metástase (TNM). Os critérios de classificação TNM do carcinoma gástrico estavam de acordo com 7ª Comissão Mista americana de 2010 no manual do estadiamento do Câncer (AJCC) [29]. O critério para a classificação histopatológica de diferenciação estava de acordo com o mundial de 2000 classificação de organização de saúde do carcinoma gástrico [30]. O critério para o padrão de crescimento de tumor foi de acordo com a classificação japonesa de carcinoma gástrico, 3a edição Inglês. Todas as características dos doentes estão resumidos na Tabela 1. A amostra do doente composto 238 do sexo masculino e 91 doentes do sexo feminino, com uma idade média de 57 anos (intervalo de 26 a 81 anos). Todos os pacientes foram acompanhados através de consulta telefônica ou questionário, eo tempo de acompanhamento variou de 1 a 136 meses (mediana de 56 meses) .table 1 características clínico-patológicas de 329 pacientes com carcinoma gástrico
Variável
Valor
Idade no momento da cirurgia, y
média
57,0
Faixa
26-81
gênero, número
Masculino
238
Feminino
91 tamanho
Tumor, cm
média
5.0
Faixa
1.0, 15.0 localização
tumor, número de
superior
31
meio
53
Baixa
245 estatuto
Diferenciação, número
bem diferenciado
47
moderadamente diferenciado
54
pouco diferenciado
218
indiferenciado
10
padrão de crescimento, número de
Expansão
76
Intermediário
81
infiltrativa
172
tumor (T) estágio, número de
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
Node (N) estágio, número de
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
linfática invasão, número
negativo
248
positiva
estágio 81
tumor, número de
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180 estatísticas
Vital, número
vivo
152
mortos, todas as causas
177
Morto câncer, gástrica
143
Morto, não relacionada
22
Não existe informação
12
imunohistoquímica
O fixados em formalina e embebidos em parafina (FFPE) blocos de tecido foram cortados em secções de 5 mm de espessura, em seguida, desparafinados com xilol e reidratados usando uma série graduada de etanol. As secções foram incubadas em tampão de ácido cítrico (pH 6,0) para a recuperação de antigénio de ebulição em uma panela de pressão de vapor. As secções foram incubadas durante a noite a 4 ° C com os anticorpos primários seguintes: anticorpo monoclonal anti-claudina-4, diluição 1: 100, clone 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, EUA. coloração imuno-histoquímica foi realizada utilizando o kit de IHC MaxVision TMHRP-polímero anti-murganho /coelho (Fuzhou Maixin, China) com carbazol 3 amino-9-etil (AEC) como substrato da enzima. As secções foram então ligeiramente contrastadas com hematoxilina. Os controlos positivos foram mucosa do cólon e as amostras em que o anticorpo primário foi substituído com anticorpos não-reactivos serviram como controlos negativos.
imunocoloração resultados foram interpretados de forma independente por dois patologistas utilizando um sistema de pontuação semi-quantitativa [31]. As reacções imunocoloração foram avaliados por intensidade de coloração (0, nenhuma mancha; 1, fraco; 2, moderada; 3, forte) e a percentagem de células epiteliais coradas (0, < 5%; 1, 5 a 25%; 2, 26 a 50%; 3, 51 a 75%; e 4, > 75%). A positividade percentagem de células epiteliais e intensidade de coloração foram então multiplicado para gerar a pontuação imunorreactividade (SI) para cada caso. Os espécimes foram recodificados se houvesse discrepâncias no está entre os dois patologistas, até se obter um consenso. Nós dividido as amostras em dois grupos com base nos resultados da imunocoloração os tecidos em: baixa expressão (IS < 4) e elevada expressão (IS ≥ 4). Este sistema de avaliação de claudina-4 tem sido utilizado em estudos anteriores [32]. Análise estatística

Uma meta-análise foi realizada para confirmar o papel de claudina-4 no cancro gástrico. Buscamos a literatura Inglês para estudos relevantes publicados antes de 01 de junho de 2013, utilizando o banco de dados PubMed com os seguintes termos: "neoplasia de estômago 'e' claudin-4 'em títulos de assuntos médicos (mesh). As referências nos artigos recuperados foram ainda selecionados para estudos originais anteriores. Os critérios de inclusão foram pacientes com câncer gástrico, incluindo uma comparação prognóstico entre a expressão alta e baixa de claudin-4. Os autores correspondentes foram contatados para obter informações em falta, e alguns estudos foram excluídos se a informação crítica ainda faltava pedidos após repetidas.
Para a agregação quantitativa dos resultados de sobrevivência, o observado o esperado (OE) estatística e variância foram combinadas para dar o valor efetivo. Os valores de O-E e as variâncias foram estimados a partir dos dados disponíveis, utilizando os métodos reportados por Tierney et al
. [33]. Se o estudo forneceu uma taxa de risco (HR), os valores e as variações O-E foram estimados com base nisso. Se o estudo não forneceu uma HR, mas relatou os dados na forma de uma curva de sobrevivência, as taxas de sobrevivência foram extraídos em determinados momentos específicos para reconstruir uma HR estimado e sua variância.
Foi utilizado o teste do qui-quadrado para avaliar a relação entre a expressão claudin-4 e vários parâmetros clínico. A análise de sobrevida foi realizada utilizando o método de Kaplan-Meier e as diferenças entre os grupos foram analisadas pelo teste de log-rank. O modelo multivariado de regressão de Cox foi utilizado de uma forma gradual para a frente para detectar os preditores independentes de sobrevivência. P
-Valores inferior a 0,05 foram considerados para indicar um resultado estatisticamente significativo bicaudais. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o software SPSS (versão 17.0; SPSS para Windows, Chicago, IL, EUA). E RevMan 5.2 software de análise (The Cochrane Collaboration)
Resultados
Claudina-4 imunocoloração ocorreu em um padrão predominantemente membranoso , com algumas amostras exibindo um baixo nível de coloração citoplasmática. Apenas 15,9% (7/44) da mucosa gástrica normal, exibiram altos níveis de expressão de claudin-4. Em contraste, 90,5% (19/21) das lesões metaplasia intestinal e 95,2% (20/21) das lesões gástricas displasia epitelial exibiram níveis de expressão elevados de claudina-4. Das amostras de carcinoma gástrico investigados, 53,2% (175/329) dos casos demonstrou elevada expressão claudina-4 (Figura 1). Figura 1 Claudina-4 imunocoloração. (A) muscoma gástrica normal, sem manchas; (B) a metaplasia intestinal, de expressão elevada; (C) moderadamente diferenciado para câncer gástrico bem diferenciado, de alta expressão; (D) câncer gástrico pouco diferenciado, sem coloração. Ampliação × 200.
O nível de claudin-4 expressão foi significativamente correlacionada com a diferenciação do tumor (P Art < 0,001), sexo (P
= 0,003), idade (P
= 0,025) e localização do tumor (P
= 0,033). De acordo com a inspeção microscópica do padrão de crescimento tumoral, 76 casos foram classificados como tipo de expansão e 172 casos como o tipo infiltrativa, enquanto que 81 casos foram determinados como sendo do tipo intermediário. O nível de expressão claudina-4 também foi significativamente correlacionado com o padrão de crescimento do tumor (P
< 0,001). Alta expressão de claudina-4 foi observada em 69,7% do tipo expansivo e 72,8% do tipo intermédio de cancro gástrico, enquanto que apenas 36,6% do tipo infiltrante exibiu uma expressão elevada. No entanto, os nossos resultados não revelaram qualquer correlação significativa entre a expressão da claudina-4 eo tamanho do tumor, profundidade de invasão, metástase linfonodal, invasão linfática e estágio do tumor (Figura 2, Tabela 2). Figura 2 Expressão da claudina-4 na mucosa do estômago normal, metaplasia intestinal, displasia e câncer (incluindo expansão tipos, intermediário e infiltrativas).
Tabela 2 Os resultados estatísticos de relações entre claudin-4 expressão e várias características clinicopatológicas
Variável
Total de pacientes (%)
Pacientes com baixa expressão claudin-4 (%)
Os pacientes com alta claudin-4expression (%)
P- valor
329
154 (46,8)
175 (53,2)
idade na cirurgia , y
0,025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9) Art > 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
Sexo
0,003
Masculino
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Female
91
55 (60,4)
36 (39,6)
características fisiopatológicas
tamanho do tumor (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7) Art > 5
130
52 (40,0)
78 (60,0)
localização do tumor
0,033
superior
31
9 (29,0)
22 (71,0)
meio
53
31 (58,5)
22 (41,5)
Lower
245
114 (46,5)
131 (53,5)
tipo histológico Art < 0,001
Diferenciada (WD, MD): 101
24 (23,8)
77 (76,2)
indiferenciado (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0) padrão de crescimento
< 0,001
Expansão
76
23 (30,3 )
53 (69,7)
Intermediário
81
22 (27,2)
59 (72,8)
infiltrativa
172
109 (63,4)
63 ( 36,6)
T estágio
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44,2)
130 (55,8)
metástases linfonodais
0,905
negativo
101
48 (47,5)
53 (52,5)
228 positivo
106 (46,5)
122 (53,5)
linfática invasão
0,898
negativo
248
117 (47,2)
131 (52,8)
positivo
81
37 (45,7)
44 (54,3)
estágio do tumor
0,589
IA, IB
63
33 (52,4)
30 (47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, bem diferenciado; MD
, moderadamente diferenciado; PD
, pouco diferenciado, UD
, indiferenciada.
No total, 19 estudos foram inicialmente identificados. Quatorze estudos foram excluídos porque não incluiu uma comparação de prognóstico entre a expressão alta e baixa de claudin-4. Um estudo mais aprofundado foi excluído porque a informação crítica estava faltando [14]. Apenas um estudo realizado a comparação prognóstico baseado na causa específica sobrevivência (CSS) [13], de modo que foi excluído e nós fizemos a sobrevida global (OS) o ponto final primário de nossa meta-análise. Três estudos preencheram os critérios de inclusão e foram incluídos na análise final [15, 19, 34]. Análise dos resultados agrupados indicaram que o sistema operacional de pacientes com alta claudina-4 foi melhor do que naqueles com o baixo claudina-4 (Figura 3). Figura 3 Forest plot da associação entre a sobrevida global ea expressão da claudina-4. O-E, observado o esperado.
De acordo com a análise de sobrevida univariada, a expressão da proteína claudina não foi associada com CSS dos pacientes (P
= 0,637) ou OS (P
= 0,469). sobrevivência subclasse estratificada foram realizadas análises para T e estado N, invasão linfática e estágio do tumor, e não houve diferença de prognóstico foi encontrado (arquivo adicionais 1: Figura S1). Na comparação de CSS, único estágio TNM (P Art < 0,001) e linfática invasão (P Art < 0,001) foram fatores prognósticos significativos. Após análise multivariada Cox, único estágio TNM foi um fator prognóstico significativo (P Art < 0,001). Não foi observada nenhuma diferença de sobrevivência entre os três tipos de padrão de crescimento do tumor (P = 0,069
, Figura 4A). Além disso análise estratificada demonstrou nenhuma diferença prognóstica significativa entre os pacientes que apresentaram alta versus baixa expressão da claudina-4 na expansão e câncer gástrico tipo infiltrativa. No entanto, no cancro do intermediário padrão de crescimento tipo gástrico, o prognóstico para pacientes que exibem baixos níveis de expressão de claudina-4 foi significativamente melhor em comparação com aqueles com níveis elevados de expressão (P = 0,023
, Figura 4B). Este resultado também foi confirmada pela análise multivariada de Cox (P
= 0,037). A taxa de sobrevida específica para o câncer de cinco anos para pacientes com baixos claudin-4 níveis de expressão em câncer gástrico de tipo intermediário foi de 76,4%, o que foi semelhante a todos os cânceres gástricos do tipo expansão (64,5%). Os resultados obtidos indicam que a taxa de CSS de cinco anos para os pacientes que apresentam elevados níveis de expressão de claudin-4 no câncer gástrico de tipo intermediário foi de 46,6%, o que foi semelhante ao câncer do tipo infiltrativa gástricas (50,7%) (Figura 4C). Através da coloração de claudina-4 no tipo intermediário, que reclassificados a baixa expressão da claudina-4 em expansão tipo e elevada expressão de claudina-4 em tipo infiltrativas e composto de dois novos subgrupos. Houve uma diferença significativa no prognóstico entre estes dois novos subgrupos (P = 0,003
, Figura 4D). Após análise de sobrevivência subclasse estratificada por estado T, estado N, invasão linfática e estágio do tumor, descobrimos que as diferenças de prognóstico de dois novos subgrupos foram significativas na pT3 /4, LN (+), fase III, invasão linfática (-) ( arquivo adicional 2: Figura S2). Na análise multivariada, a classificação novela foi um fator prognóstico significativo (P
= 0,007). Figura 4 as curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier. (A) Comparação de sobrevivência para os três tipos de padrão de crescimento de tumor; (B) comparação de sobrevida em pacientes com níveis baixos e alta expressão de claudin-4 em câncer gástrico padrão de crescimento do tipo intermediário; curvas de sobrevida (C) de Kaplan-Meier para a do tipo expansão, baixos níveis de expressão de claudin-4 em-tipo intermediário, níveis elevados de expressão de claudin-4 em-tipo intermediário, e cancros gástricos do tipo infiltrativa. (D) Comparação de sobrevivência em dois novos subgrupos.

Discussão A família claudina de proteínas desempenha um papel importante na manutenção da função TJ, e os níveis de expressão exibem frequentemente um padrão específico de tecido. Recentemente, um número acumulado de estudos têm demonstrado a expressão ectópica ou aberrante de claudinas em muitos tipos de tumores [25, 32, 35-37]. Entre os subtipos claudina, a expressão da claudina-4 é frequentemente alterados em vários tecidos tumorais. Claudina-4 é uma proteína da membrana integral, que pertence à família claudina. Esta proteína é um componente de TJs, e é crítica para a selagem de folhas celulares e controlar o fluxo de iões paracelular [10].
Relativamente poucos estudos examinaram os níveis de claudina-4 Expressão em lesões percursoras. Cunningham et al
. [38] relataram um nível de expressão 15% de claudina-4 no estômago normal, ao passo que em ambos metaplasia intestinal e displasia a expressão da claudina-4 atingiu os 100%. Matsuda et al
. [36] também relatado que claudina-4 foi detectado no epitélio de metaplasia intestinal, mas não no epitélio normal. Nossos resultados de coloração de amostras das lesões precursoras estavam em concordância com esses estudos. A taxa de expressão elevada de claudina-4 na mucosa gástrica normal, foi muito baixo (apenas 15,9%), ao passo que as lesões metaplasia intestinal e displasia epitelial lesões gástricas exibiu um nível de expressão elevado está perto de 100%. Porque CLDN-4
é expresso em níveis elevados no intestino delgado e cólon [11] normal, o aumento da sua expressão em metaplasia intestinal é facilmente compreendido. No entanto, a expressão diferencial de claudina-4 na mucosa e células normais exibem displasia permanece obscura. As características morfológicas primárias de displasia epitelial são atipia celular, diferenciação anormal e arquitetura da mucosa desorganizado; essas mudanças estão potencialmente associadas com elevada expressão claudin-4. Os mecanismos subjacentes específicos precisam ser mais bem investigado. Tomados em conjunto, os nossos resultados indicam que claudin-4 pode potencialmente servir como um marcador molecular de metaplasia intestinal e displasia na mucosa gástrica.
No presente estudo, verificou-se que a diminuição da expressão da claudina-4 foi significativamente associada com diferenciação histológica em câncer de intestino. O grupo diferenciadas exibiram uma taxa de expressão mais elevada de claudina-4 em comparação com o grupo indiferenciada. Lee et al
. [18] relataram que a expressão reduzida de claudin-4 correlacionada com a interrupção da estrutura glandular e perda da diferenciação, que estava em concordância com os nossos resultados.
O papel da claudina-4 para o prognóstico permanece controverso. Resnicket al
. [13] relatou que o aumento claudin-4 expressão foi um fator prognóstico pobre para CSS em 146 pacientes, e Soini et al
. [14] propôs que claudin-4 não se associou com o OS. No entanto, os resultados da meta-análise deste estudo sugerem que pacientes com OS de alta claudina-4 foi melhor do que os pacientes com baixo claudina-4. A análise dos resultados de sobrevivência em pacientes com base na nossa instituição indicou que claudina-4 não foi associada com CSS ou SO, o que foi semelhante para os resultados de Soini et ai
., Mas diferente de outros estudos. Alguns estudos anteriores
sugeriram que a sobre-regulação de certos claudinas contribui potencialmente para neoplasia, alterando directamente função TJ [39]. A sobre-expressão da claudina-3 e 4 pode levar a um aumento da invasão, motilidade e sobrevivência de células de tumor [25]. Pelo contrário, no carcinoma do pâncreas, a sobre-expressão da claudina-4 tem sido relacionado com a invasividade reduzida significativamente tanto in vitro e in vivo

[40]. Embora nosso estudo compreende quase o maior número de casos no momento, o papel prognóstico do claudin-4 no câncer gástrico permanece ambígua (P
= 0,637). É possível que diferentes populações e ambientes diferentes contribuem para esses diferentes resultados. Um estudo mais aprofundado, incluindo um maior número de amostras é justificada. Padrões de crescimento
histológicos são parâmetros importantes para a avaliação do comportamento biológico do câncer gástrico. Baseado em padrões de crescimento e capacidade de invasão, Ming [41] relatou dois tipos de câncer gástrico, a expansão ea infiltrativa type.The japonesa gástrico Cancer Association dividida câncer gástrico em três tipos com base na (INF) de crescimento que se infiltram no tumor em tecido circundante: em infa, o tumor exibe crescimento em expansão com uma fronteira distinta do tecido circundante; em INFb, o tumor mostra um padrão intermediário entre INFA e INFC; em INFC, o tumor apresenta crescimento infiltrativa com nenhuma borda distinta com o tecido circundante [42]. Este último tipo está mais perto de nossa prática clínica, na qual o tipo intermediário existe e é difícil de classificar (Figura 5). Em nossos resultados, não houve diferenças na sobrevivência entre os três tipos, mas não significativa (P
= 0,069). As taxas de sobrevivência em pacientes com o tipo intermediário foram entre a expansão e os tipos infiltrativas. Curiosamente, na análise estratificada, descobrimos que a alta expressão claudin-4 foi associada com mau prognóstico no padrão de crescimento intermediário (P
= 0,023). A taxa de sobrevivência de cinco anos com baixa expressão da claudina-4 no tipo intermediário (76,4%) foi semelhante à do tipo de expansão (64,5%), enquanto que o grupo com a expressão elevada de claudina-4 (46,6%) foi mais perto do tipo infiltrativa (50,7%). Assim, poderia potencialmente classificar os pacientes-tipo intermediário de acordo com a coloração de claudina-4. Reclassificamos pacientes com baixa expressão da claudina-4 no grupo intermediário como tendo o tipo de expansão, e os pacientes com elevada expressão de claudina-4 como tendo o tipo de tumor infiltrante. Ambas as análises uni e multivariada confirmou que houve diferença significativa na sobrevida entre estes dois subgrupos. Após análise subclasses estratificadas sobrevivência, descobriu-se que as diferenças de prognóstico nos dois novos subgrupos foram significativas na pT3 /4, LN (+), fase III, invasão linfática (-). Embora nenhuma diferença significativa foi encontrada em outras subclasses, uma certa tendência ainda existia e consideramos que os resultados negativos da análise estatística foram por causa do tamanho relativamente pequeno da amostra. Assim, a expressão da claudina-4 poderia potencialmente ser utilizada como uma base para continuar a identificar cancros gástricos do tipo intermédio. Figura 5 hematoxilina-eosina. Os três padrões de crescimento diferentes de câncer gástrico: (A) a expansão tipo; (B) tipo intermediário; (C) Tipo de infiltrativa. Ampliação × 100.
O papel biológico de claudin-4 no câncer gástrico permanece obscuro. Foi relatado anteriormente que CLDN18
é especificamente expressa na mucosa gástrica normal, mas não CLDN4
[11, 22]. Claudina-4 é regulada em adenocarcinomas gástricos, e aumento da expressão claudin-4 é mais comumente visto em intestinal-tipo em oposição a difundir-tipo tumores [13, 17]. No entanto, claudina-18 é regulada negativamente em cancro gástrico do tipo intestinal [22]. Estes resultados sugerem que os níveis de distribuição e expressão de proteínas claudina pode variar em diferentes células e tecidos do corpo [43]. A expressão ectópica de claudin é potencialmente associados com a progressão do tumor. São necessários mais estudos para elucidar a função de claudina-4 na progressão do cancro gástrico.
Conclusões
Demonstramos regulação positiva de claudina-4 em metaplasia intestinal e displasia epitelial gástrica, o que sugere a sua utilidade potencial como um biomarcador em lesões precursoras adenocarcinoma gástrico. Expressão de claudina-4 não foi associada com a sobrevivência, mas foi associado com pobre diferenciação histológica e infiltrativas padrões de crescimento do tumor. Além disso, este estudo demonstrou que a expressão da claudina-4 poderia potencialmente ser utilizada como uma base para continuar a identificar cancros gástricos do tipo intermédio.
Notas
Jin-Liang Zhu, Peng Gao contribuiu igualmente para este trabalho.
abreviações
AEC: Sims 3 amino-9-etil carbazole
AJCC:
Comité Misto americana do Cancro

CLDN:
gene Claudin
CSS:-específica causar
sobrevivência
FFPE:
formalina -Fixed e
HR embebido em parafina: taxa de risco
INF:
tumor infiltrando

IS:
pontuação imunorreatividade
Mesh:
títulos de assuntos médicos
MMP:
metaloproteinases da matriz
OS:
sobrevida global
TJ: junção
apertado
TNM:.
tumor-nódulo-metástase
Declarações
Agradecimentos
Agradecemos ao Departamento de Oncologia cirúrgica do primeiro Hospital da China Medical University para fornecer tecido gástrico humano amostras. Agradecemos também o Colégio da China Medical University para obter assistência técnica em experiências. Este trabalho foi financiado pela National Science Foundation da China (No. 30972879 No. 81201888 e No. 81.172.370) e do Programa de Departamento de Educação da Província de Liaoning (L2011137).
Material suplementar Electrónicas | 12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff arquivo adicionais 1: Figura S1: análise de sobrevivência subclasse estratificada por estado T, estado N, invasão linfática e estágio do tumor de acordo com a coloração de claudin-4. A comparação da sobrevivência entre os pacientes com baixos níveis de expressão dos níveis da claudina-4 e expressão elevada em pT1-pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), fase I (e), a fase II (F), a fase III (G), invasão linfático (-) (H), e invasão linfático (+) (I). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff arquivo adicionais 2: Figura S2: análise de sobrevivência subclasse estratificada por estado T, estado N, invasão linfática e estágio do tumor de acordo com os dois novos subgrupos. A-B. A comparação da sobrevivência entre infiltrante + intermediário (H) vs. + expansão intermédia (G) em pT1- pT2 (A), pT3-pT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), a fase I (E), a fase II (F), fase Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

• Mecanismo (s) de acção subjacentes ao efeito gastroprotector da fracção de acetato de etilo obtida a partir do extracto metanólico bruto folhas de Muntingia calabura
• Laparoscopia assistida contra gastrectomia radical D2 aberto para câncer gástrico avançado sem invasão serosa: um estudo de caso-controle