Aberrant Povecanje od 14-3-3ơ izraza služi kot slabše prognostičnega biomarker za rakom želodca

Aberrant Povecanje od 14-3-3ơ izraza služi kot je slabše prognostični biomarkerjev za raka želodca
Abstract
Ozadje
14-3-3ơ intracelularni, phosphoserine vezavni protein, in predlagala, da se vključijo v tumorigeneze. Vendar pa izraz dinamika 14-3-3ơ in njegovo clinicopathological /napovedni pomen v človeških tumorjih so še vedno sporen.
Metode
metodo imunohistokemiji (IHC) in Western blot so bili uporabljeni za preučitev izražanje beljakovin 14 -3-3ơ z rakom želodca in seznanjenih normalnih sosednjih želodčne sluznice tkiv. Prejemanje deluje analiza lastnost (ROC) krivulja je bila uporabljena za določitev rezultat cutoff za 14-3-3ơ izražanja v nizu usposabljanja (n = 66). Za potrditev smo ROC-izpeljana ocena mejna podvrženi analizi združenja 14-3-3ơ izražanja z izidom bolnikov in kliničnih značilnosti v nizu testiranja (n = 86) in vseh bolnikov (n = 152).
Rezultati
frekvenčni in izražanje stopnje izraženosti v 14-3-3ơ bili v raka želodca bistveno višja kot v normalnih želodčnega tkiva sluznice. Korelacijska analiza je pokazala, da je bila visoka izraz 14-3-3ơ raka želodca pomembno povezana s kliničnim fazi in tumorske invazije. Poleg tega je v kompletu testiranje in vsa bolnikih, Kaplan-Meier analiza je pokazala, da je povišana 14-3-3ơ izraz napovedujejo slabšo celotno preživetje (OS) in preživetje brez napredovanja bolezni (PFS). Pomembno je, da je visoka 14-3-3ơ izraz povezana tudi s skrajšanjem časa preživetja v fazi IV bolnikih z rakom želodca fazi III in II. Multivariantne analiz so pokazali, da je bila 14-3-3ơ izraz neodvisen napovedni parameter pri raku želodca.
Sklepe
Te ugotovitve dokazujejo, da so lahko visoke izraz 14-3-3ơ pomembno pri napredovanja tumorja in strežnikov kot neodvisen molekularni marker za slabo prognozo raka želodca. Tako čezmernim 14-3-3ơ opredeljuje bolnike z velikim tveganjem in je nov terapevtski molekularno cilj tega tumorja.
Ozadje
raka želodca, je eden od najpogostejših vzrokov smrti, povezanih z rakom po celem svetu [1] zlasti v vzhodnoazijskih državah, kot so Kitajska, Japonska [2]. V letu 2005 je bilo približno 0,4 milijona novih primerov in 0,3 milijona smrti zaradi raka želodca iz Kitajske [3]. Kljub nedavnim napredkom na področju kirurških tehnik in zdravljenje, na splošno 5-letno preživetje raka želodca na Kitajskem še vedno nizek, približno 40%. Številne študije so pokazale, da več genskih sprememb, vključno zaviralnih genov, onkogeni, celičnih adhezijskih molekul, regulatorji celičnega cikla, in rastnih faktorjev, so odgovorni za razvoj in napredovanje raka želodca [4]. Študije so razkrili veliko odklonsko izraženih genov v raka želodca, vključno BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP
in stat3
[8], SPARC
[9] in HER2
[10, 11], ki bi oceno tveganja bolnikov z rakom želodca bolj natančno. Vendar pa je obetaven molekule, ki imajo clinicopathological /napovedni pomen pri raku želodca ostajajo precej omejeni. Treba je nadalje razumeti molekularne mehanizme, ki sodelujejo pri raku želodca in opredeliti bolj dragocene prognostičnih označevalcev, tako da ne samo izboljšati slabšo prognozo, ampak tudi zagotoviti nove obetavne ciljev terapije.
14-3-3 proteini so družina približno 30 kD dimerni visoko ohranjen beljakovine in povsod izražena v vseh evkariontskih organizmov [12]. Obstaja sedem tesno povezani geni (β, γ, ε, η, ζ, O, τ) v 14-3-3 družine proteinov. Ti geni so pogosto oblikujejo heterodimerov ali homodimers in se veže na več kot 100 različnih proteinskih ligandov [13, 14]. Tako so 14-3-3 proteine, vpletene v različnih procesih celični signalizaciji, vključno s celično proliferacijo, kontrolo celičnega cikla, apoptoze in maligno transformacijo [14, 15]. Med sedmimi izotipov, 14-3-3ơ je bila prvotno označena kot človeško mlečna epitelijskega marker 1 (HME1) in opredeljena kot tumor wrap gen [12, 16]. Rastoči dokazi pokazali, da je signifikantno 14-3-3ơ zmanjšana ali izgubljena zaradi utišanje gena preko hypermethylation v nekaj solidnih tumorjev [17-22]. Število najdenih rezultatov v prejšnjih poročilih, da je zmanjšala izražanje 14-3-3ơ napovedano slabo preživetje v raka dojke in nazofaringealnega [23, 24]. Vendar pa je protislovno z supresor vlogo tumorja 14-3-3σ, prekomerno 14-3-3ơ v trebušne slinavke rakave celice privedla do odpornosti na zdravilo, celični migraciji in invazije [25]. Poleg tega je bila visoka izraz 14-3-3σ neodvisen napovedni dejavnik za slabo preživetje v trebušne slinavke in debelega črevesja [26, 27]. Tako je biološka vloga 14-3-3ơ v tumorigeneze in napredovanje različnih vrst človeških rakov je odvisno od posebnega tipa tumorja. Tukaj smo izbrali želodca raka osebki s strogim protokolom za odkrivanje 14-3-3ơ dinamike izražanja in analizirati njihove clinicopathological /prognostična pomene.
Metod
Bolniki
A skupaj 216 osnovnih bolnikov z rakom želodca iz arhiva oddelka za patologijo v bolnišnici tretjem in drugem odvisnimi Sun Yat-Sen University (Guangzhou, Kitajska), so bile sprva zaposlila v naši raziskavi. Vsi bolniki so opravili začetno kirurško resekcijo od marca 2001 do januarja 2006. Mi se še naprej pregledujejo bolnike uporabo strogega merila za upravičenost protokol, kot sledi: mikroskopsko potrjena adenokarcinom želodca; brez metastaznih bolezni; no pred kemoterapijo in obsevanje zgodovini; prejemali enotno režim kot prvi liniji kemoterapije po resekciji primarnih tumorjev (smo enoten kot FOLFOX režimu: fluorouracila, levkovorina in oksaliplatina), in brez zdravljenja sevanja dajemo kateremkoli izmed bolnikov; ki imajo več kot 5-letno spremljanje obdobje. Na koncu je bilo 52 bolnikov z izgubo spremljanja in 12 bolnikov s pomanjkanjem v kliničnih značilnosti izključena iz te študije, ki vodi do 152 bolnikov želodca z rakom podvržejo nadaljnje klinične in preživetje analize. V podrobnosti, celotna kohorta sestavljena iz 105 moških in 47 ženskih s srednjo starostjo 58,0 let (razpon 27-81 let). 103 bolnikov je bilo censused kot smrt v 5 letih časa sledenja, vključno s 5 primerov umrla zaradi pooperacijskih zapletov in 98 primerov je umrl zaradi napredovanja tumorja. Od vseh bolnikov je bilo 66 bolnikov, naključno s pomočjo računalnika (SPSS 17,0 programa), da seriji za učenje, in preostalih 86 bolnikov so naključno razporedili v nizu testiranja. Clinicopathological spremenljivke v dve skupini, kot so starost, spol, klinični fazi, tumorske invazije, stopnjo vozlišča in diferenciacijo histologijo, so bili vključeni v to študijo. Vsi tumorji, so bile razvrščene in zastavljeni po revidiranih smernic Mednarodne zveze zagovarja proti raku. Pridobili smo soglasje in odobritev pred bolnikov z etiko odbora Inštituta za raziskave Sun Yat-Sen Univerzi za uporabo kliničnih materialov, opisanih v tej študiji. gradnjo
tkiva mikromrež
mikromrež tkiva (TMAs) so bile zgrajene kot metoda, ki jo Xie et al [28] prej opisano. Na kratko, so bloki tkiva, parafinske vgrajeni in ustrezni histološki Hematoxylin in eozinom obarvajo tobogani prevlekel za vzorčenje TMA. biopsije tkiva zanima core (0,6-mm v premeru) so narejene iz reprezentativnih tumorskih območij in iz sosednjih želodčne sluznice tkiva iz blokov posameznega darovalca tkiva z uporabo trephine (treh izvodih jeklenke karcinoma tkiva in en cilinder od normalne sosednje želodčne sluznice tkiva). Jeklenke tkiva smo nato prenesli v prejemnik parafinski blok v določenih položajih z uporabo instrumenta tkiv arraying (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Imunohistokemičnim analizo in oceno
TMAs tobogani so deparaffinized v ksilena , hidracijo s stopenjsko alkohola, potopljena v 3% vodikovega peroksida za 10 minut, da blokira endogenega peroksidaze dejavnost, in antigen Vzpostavljeno s pritiskom kuhanje 3 min pri Tris /EDTA (pH = 8,0). Nato so drsi inkubirali s primarno protitelesa 14-3-3σ (monoklonskih miško, 01:50, Santa Cruz, SC-100.638) 1 uro pri sobni temperaturi. Potem ko so inkubirani z sekundarnih protiteles za 30 minut, smo osebke obarvali z DAB (3, 3-diaminobenzidine). Na koncu so bili odseki jih nasprotno s hematoksilinom, dehidrirani in nameščen. Negativna kontrola je bila pridobljena z zamenjavo primarnega protitelesa z normalnim murinega IgG. Znane imunskim barvanjem pozitivni kolorektalnega karcinoma diapozitivi so bili uporabljeni kot pozitivne kontrole, kot smo že poročali [27].
Rjavih zrnc v citoplazmi 14-3-3σ so bili upoštevani kot pozitivna barvanjem. dosegel smo intenzivnost obarvanja takole: 0, ne pušča madežev; 1+, blago madeži; 2+, zmerno obarvanje; 3+, intenzivno obarvanje. Območje obarvanja je bil ocenjen kot sledi: 0, ne pušča madežev celic v kateremkoli mikroskopskih poljih; 1+, < 30% tkiva obarvajo pozitivna; 2+, med 30% in 60% obarvanih pozitivna; 3+, > 60% obarvajo pozitivna. 14-3-3σ izraz je ocenil kombinirano oceno intenzivnosti in razširitev barvanja. Minimalna ocena, če povzamemo (intenzivnost + podaljšek) je 0, največja je bila 6. Merila, ki se uporabljajo v tej študiji je bil široko prej sprejeta [24]. Izražanje 14-3-3σ je bila ocenjena in dosegel z dvema neodvisnima patologi (Drs. F Tang in ZY Feng), ki so bili zaslepljeni z clinicopathological podatkov. Dogovor o teh dveh patologov na rezultat IHC dosegel 84% (128 enake rezultate v vseh 152 primerih), kar kaže na naš sistem točkovanja je bila zelo trdna in ponovljiv. Če so rezultati, ki sta jih patologi poročali v skladu, je bila izbrana vrednost. Vendar pa so bile interobserver nesoglasja (približno 6% vseh primerov) pregledati drugič, sledi trdnih sodbi obeh patologi.
Western blot analizo
raka želodca in v parih normalne sosednje želodca tkiva sluznice so na tleh in lizirali s pufrom RIPA na ledu, nato pa so podvrženi Western blot analizo. Koncentracijo proteina smo zaznali z metodo Bradfordu z BSA (Sigma-Aldrich) kot standarda. Enaka količina celic in ekstrakta tkiva (40 ug) so bili izpostavljeni SDS-PAGE in prenesli na nitrocelulozno membrano (Bio-Rad) za blot protiteles. Membrana je bila nato blokirana in inkubirali z miško anti-gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) protiteles (Abmart, # M20006) in miške anti-14-3-3σ protitelesa (Santa Cruz, SC-100638).
Izbira Kritična ocena za 14-3-3σ "pozitivno" izražanja
analiza ROC krivulje bil predmet izbire 14-3-3σ mejno rezultat v seriji za učenje, kot je bilo prej [29] opisano. Na kratko, pri čemer je občutljivost in specifičnost za izid študiral je vsak rezultat narisane za ustvarjanje ROC krivuljo. Rezultat je lokalizirana najbližje točke na ravni največje občutljivosti in specifičnosti, točka (0.0, 1.0) na krivulji, je bil izbran kot cutoff dosežen rezultat vodi k večjemu številu tumorjev, ki so bile pravilno razvrščene, da imajo ali nimajo izid. Za lažje ROC analizo krivulje, so dichotomized funkcije preživetja. Preživetje (smrt VS. drugi (cenzurirani, živ ali smrt zaradi drugih vzrokov))
Spremljanje
Vsi bolniki so imeli nadaljnje evidence za več kot 5 let. Po končani terapiji, so vsake 3 mesece v prvih 3 letih in po 6 mesečnih časovnih presledkih opazovati. Celokupno preživetje je bil opredeljen kot čas od diagnoze do dneva smrti ali ko censused na zadnji datum, če so bili bolniki še vedno živ. Preživetje brez napredovanja bolezni je bil opredeljen kot čas od diagnoze do datuma lokalne okvare /oddaljene metastaze ali datum smrti ali ko censused na zadnji dan.
statistični
analiza za analizo preživetja, optimalno cutpoint za 14- 3-3σ izraz je bil pridobljen z analizo ROC v seriji za učenje (n = 66). Za potrditev, so se odnosi med 14-3-3σ izražanja, ki so razvrščeni po ROC-analize ustvari mejno točko, in OS, PFS ocenili v nizu testiranja (n = 86) in vseh bolnikov (n = 152). Hi-kvadrat test in Fisherjev natančni test ni bil zaposlen, da ovrednoti razmerje med 14-3-3σ izražanja in clinicopathological spremenljivk. Multivariatna Cox sorazmernih tveganj model smo uporabili za oceno razmerje ogroženosti in 95% intervali zaupanja za izid bolnikov. Razmerja med 14-3-3σ izražanja in OS, so PFS določi z analizo Kaplan-Meier. Preskusi log-rang smo izvedli ceniti razlike v verjetnosti preživetja med podskupinah bolnikov. Vse vrednosti p
kotirajo bili dvostranski in p
< 0.05 smo imeli za statistično značilne. Statistična analiza je bila opravljena s pomočjo SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).
Rezultati
14-3-3σ izraz v raka želodca in normalnih želodčne sluznice tkiv
zaznal 14-3-3σ v citoplazmi in prekomerno na raka želodca (Slika 1A in 1A), medtem ko običajni paru želodca tkiva sluznice je pokazala skoraj negativen pomen (slika 1B in 1B). V skladu s tem rezultatom, Western blot analiza je pokazala podobne ugotovitve v raka želodca in normalnih sosednjih želodčnega tkiva sluznice (slika 1C). Slika 1 14-3-3σ izraz primarnega človeškega raka želodca in normalno sosednje želodčne sluznice tkiva. (A) 14-3-3σ bila odkrita v citoplazmi in prekomerno v želodčni raka tkiva (100 x). (B) Sosednje non-neoplastična želodčni sluznicami pokazala skoraj negativno ekspresijo 14-3-3σ (100 x). (A), (B), pokazale večjo povečavo (400 x) iz območja prostora v (A) in (B) oz. (C) Western analiza blot za 14-3-3σ izražanja v reprezentativnem primarni želodčnega tkiva raka (T) in normalno v bližini sluznice tkiva (N). Enako nakladanje beljakovin je bila določena z GAPDH.
Nadalje oceniti analizo preživetja in se izognili težavam multiple izbire cutpoint smo uporabili ROC analiza krivulja za določitev cutoff rezultat za 14-3-3σ izražanja. Kot je prikazano na sliki 2A in 2B, je 14-3-3σ Kritična ocena za OS in PFS v nizu usposabljanja 3,25 (p
< 0,001) in 3,35 (p
= 0,003) oz. Tako smo izbrali 14-3-3σ izraz rezultat 3 (> 3 vs ≤ 3) kot enotno mejno točko za analizo preživetja v nizu testiranja. Slika 2 sprejemnik deluje značilne (ROC) krivulje analiza 14-3-3σ mejno število točk v nizu usposabljanja. (A) 14-3-3σ Kritična točka za celotno preživetje v nizu usposabljanja. (B) 14-3-3σ Kritična točka za preživetje brez napredovanja bolezni v nizu usposabljanja. Na vsaki imunohistokemičnim točk, pri čemer je občutljivost in specifičnost za izid študiral je narisan, s čimer ustvarjajo ROC krivuljo. 14-3-3σ Kritična ocena za splošno preživetje, brez napredovanja preživetje je bil 3,25 in 3,35 oz.
14-3-3σ izražanja in klinične značilnosti
klinične značilnosti teh dve skupini bolnikov, vključno s starostjo, spolom klinična faza, tumorska invazija, stopnja vozlišča, histologijo diferenciacija, 14-3-3σ izraz, so povzeti v tabeli 1. ROC-izpeljana 14-3-3σ cutoff rezultat 3 v usposabljanje uspešno določil ločene testiranje nastavljena na visoko ( 44/86, 51,2%) in nizko (42/86, 48,8%) 14-3-3σ izraz podskupine. Visoka izraz 14-3-3σ je v glavnem najdemo v naprednejših stopnjah tumorskih (77/107 v fazi III + IV VS. 12/45 v fazi I + II, str
= 0,004). Poleg tega analiza korelacije je pokazala, da je bila visoka 14-3-3σ izraz korelaciji s kliničnimi fazi (p
< 0,001 za oba sklopa) in tumorske invazije (p
< 0,001 za sklop usposabljanja in p
= 0,005 za testiranje niz) v obeh nizih. 14-3-3σ povezana s starostjo bolnikov v nizu testiranje (p
= 0,01), vendar ne v učni množici. Nam ni uspelo odkriti kakršne koli povezave med 14-3-3σ z drugimi značilnostmi bolnikov, vključno s spolom, stopnjo vozlišča in histologija differentiation.Table 1 Zveza 14-3-3σ izražanja z lastnostmi bolnika na primarni rak želodca
Spremenljivi
vseh primerih
sklopa usposabljanje (n = 66)
Testiranje set (n = 86)


visoko
izražanja
nizka
izraz
str
neke

visoko
izraz
nizka
izraz
p

Starost (leta)
≥ 58.00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0.627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010
< 58.00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Spol
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
Klinični stopnjo
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0,000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
tumorska invazija
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Node fazi
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
Histologija-diferenciacije
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
test x2
b srednjo starostjo
14-3-3σ izražanja in analize preživetja: univariantne analizo preživetja
Kot je prikazano na sliki 3A in 3C, Kaplan-Meier analiza je pokazala, da je povišana 14-3-3σ izraz odločno napovedal slabše OS v nizu testiranje (p
< 0,001) in splošne bolnikov (p
< 0,001). Poleg tega je bila 14-3-3σ izraz tudi močan napovedni dejavnik za preživetje brez napredovanja v testiranje niza (p
< 0,001, slika 3B) in splošne bolnikov (p
< 0,001, slika 3D). Glede na slabe izid v pozni fazi raka želodca, je bila nadaljnja analiza opravljena v zvezi z 14-3-3σ izraz v podskupinah bolnikov z rakom želodca s III in IV. Rezultati so pokazali, da je v primerjavi z 14-3-3σ nizko izražanja, visoka izraz 14-3-3σ pokazala velik trend v smeri slabše OS in preživetja brez napredovanja bolezni pri bolnikih želodca z rakom v stadiju III (p
= 0,001 za OS in p
= 0.017 za preživetje brez napredovanja, sliki 4A in 4B) in faza IV (p
< 0,001 za OS in p
= 0,001 za PFS, slika 4C in 4D). Rezultati v skupnem bolnikih so bili podobni tistim, ki so v testiranje nizu (slika 4E-H). Slika 3 Kaplan-Meier analizo preživetja 14-3-3σ izražanja v nizu testiranja in splošne bolnikov. (A) Višja 14-3-3σ izraz je tesno povezana s slabim celokupno preživetje in (B), preživetje brez napredovanja bolezni v nizu testiranja. (C) Bolniki z višjo 14-3-3σ izražanja pridobila tudi slabše skupno preživetje in (D), preživetje brez napredovanja bolezni v skupni bolnikih. V kompletu testiranje in vsa bolnikov, je bila mediana trajanja celokupnega preživetja pri bolnikih z nizko in visoko ekspresijo 14-3-3σ 73,0 VS. 17,0 mesecev (p
< 0,001) in 73,0 VS. 14,0 mesecev (p
< 0,001). Oziroma
Slika 4 Kaplan-Meier analizo preživetja 14-3-3σ izražanja v podskupinah bolnikov z rakom želodca s III in IV (log-rank test). (A) Verjetnost celokupno preživetje in (B), preživetje brez napredovanja bolezni pri bolnikih z rakom stadija III želodca v nizu testiranja: nizka izražanja, n = 17; visoka ekspresija, n = 26; (C) Verjetnost celokupno preživetje in (D), preživetje brez napredovanja bolezni faze IV bolniki z rakom želodca v nizu testiranja: nizka izražanja, n = 5; visoka izraz, n = 11. (E) Verjetnost celokupno preživetje in (F), preživetje brez napredovanja bolezni pri bolnikih z rakom stadija III želodca v splošnih bolnikih: nizka izražanja, n = 22; visoka ekspresija, n = 55; (G) Verjetnost celokupno preživetje in (H), preživetje brez napredovanja bolezni faze IV bolnikov z rakom želodca v splošnih bolnikih: nizka izražanja, n = 9; visoka izraz, n = 21.
Z modelom Cox regresijsko analizo
, da bi preprečili vpliv, ki ga univariantne analizo povzročile, izraz 14-3-3σ kot tudi drugih parametrov, je preučiti multivariatne analize Cox (Tabela 2 in Tabela 3). V kompletu testiranja, 14-3-3σ dejansko je bilo ugotovljeno, da je pomemben neodvisen napovedni dejavnik za slabo OS (razmerje tveganj, 4.527, 95% CI, 2,274-9,012; p
< 0,001; tabela 2) in PFS (razmerje ogroženosti 3,582; 95-% interval zaupanja 1,717-7,475; p
= 0,001; tabela 2). Podobne rezultate smo opazili tudi pri skupnih bolnikov (razmerje ogroženosti 5,161; 95-% interval zaupanja 2,990-8,909; p
< 0,001 za OS in razmerje nevarnosti, 4.416; 95% CI, 2.482-7.856; p
<0,001 za PFS, tabela 3). Drugih parametrov, so klinični fazi ugotovljeno, da je neodvisen napovedni dejavnik za preživetje bolnikov v nizu testiranja, vendar ne v splošnih patients.Table 2 Rezultati multivariatne Cox analizi sorazmernih-nevarnosti v nizu testiranja
Spremenljivi
za smrt
Za preživetje brez napredovanja bolezni

Razmerje ogroženosti

95%
interval zaupanja
p
razmerje ogroženosti
95%
interval zaupanja
p

Age < 58.00
let (VS. ≥ 58 let)
1,101
0,637 do 1,902
0,731
1,056
0,577 do 1,936
0,859
Spol Moški
(VS . Moški)
0.772
0.408 do 1.461
0,427
1.049
0,525 do 2.094
0,892
Klinična faza
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156-9,949
0,026
5,220
1,529 do 17,823
0.008
Tumor invazijo
T 4 + T 3 (VS. T 2 + 1 T)
1.066
0.320 do 3.553
0,917
0,730
0.206 do 2.585
0,626
vozliščna faza N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251
0,735
0,373 do 1,448
0,373
diferenciacije
Low (VS. Visoka)
0.862
0.437 do 1.701
0,668
0,936
0.442 do 1.982
0,863
14-3-3σ
Positive (VS. Negative)
4,527
2,274-9,012
0.000
3,582
1,717 do 7,475
0,001
Tabela 3 Rezultati multivariatne Cox analizi sorazmernih-nevarnosti v celotnem bolnikih
Spremenljivi
za smrt
Za preživetje brez napredovanja bolezni

Razmerje ogroženosti

95%
interval zaupanja
p
Razmerje ogroženosti
95%
interval zaupanja
p
Age < 58.00
let (VS. ≥ 58 let)
1,046
0,701 do 1,562
0.825
1,036
0654 na 1,642
0,880
Spol Moški
(VS . Moški)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0.409 do 1,278
0,165
Klinična faza
IV + III (VS. II + I)
0,988
0.500 to1.952
0,972
1,355
0,558-3,121
0,476
tumorska invazija
T 4 + T 3 (VS. T 2 + 1 T )
2.175
0.896 do 5.278
0,086
1,432
0.547 do 3.747
0,465
vozliščna faza N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0,808
1.243
0.751 do 2.059
0.397
diferenciacije
Low (VS. Visoka)
0,765
0,470 to1.243
0,279
0,810
0,478 to1.375
0.463
14-3-3σ
Positive (VS. Negative)
5,161
2,990-8,909
0.000
4,416
2,482 do 7,856
0.000
Pogovor
raka želodca, je ena izmed najpogostejših rakov po vsem svetu in predstavlja eno izmed najbolj resnih javnega zdravja problem [1]. Ponavljanje in metastaze so še vedno glavna vprašanja za slabo preživetje naprednih bolnikov želodca z rakom [30]. Čeprav so prejšnje študije pokazale, da lahko veliko neobičajne izraženi geni v tumorja želodca pomagajo razvrstiti tveganje izida bolnikov [5-11], več novih molekularnih markerjev, ki se lahko identificirajo napredovanje tumorja in napovedati prognozo posamično še vedno nujno potrebna. V 14-3-3 družinske beljakovine so pridobili veliko pozornosti v zadnjih letih zaradi njihove vpletenosti v raka z uredbo o različnih celičnih procesov [14, 15]. Med sedmimi izooblik, 14-3-3σ je p53 up-urejena v odziv na poškodbe DNA, in sekvestrira je bistvenega pomena mitotska začetek zapleten, cdc2-ciklin B1, vstop jedro, s čimer bi preprečili začetek mitoze [31]. Kot rezultat, 14-3-3σ povzroča G2 aretacijo in omogoča popravilo poškodb DNA. Tako se razlikuje od drugih članov družine, 14-3-3σ je definiran kot negativni regulator kontrolnih točk celičnega ciklusa in morebitni tumor zaviralcih beljakovin [12]. Vendar pa je biološka vloga 14-3-3ơ v tumorigeneze in napredovanje različnih vrst človeških tumorjev še vedno sporna. Tu se še naprej kažejo na biološko delovanje 14-3-3ơ na raka želodca, smo proučevali 14-3-3ơ izražanje dinamike in analizirajo svoje clinicopathological /prognostičnih pomene v 152 tumorskih vzorcev.
V tej študiji so razviti cilj 14-3-3σ Kritična točka za analizo preživetja, smo uporabili analizo ROC krivuljo za ustvarjanje rezultat cutoff v učni množici. 14-3-3σ izraz, ki so bile označene kot visoko in nizko stopnjo s strani ROC-izpeljane mejno točko, je bil predvsem ugotovljeno, da je višja pri višjih stopnjah tumor (stadij III in IV), kar kaže, da 14-3-3σ lahko vpleten v želodčnem napredovanje raka. Korelacijska analiza nadalje dokazali, da je bil visok 14-3-3σ izraz povezana s klinično fazo in tumorske invazije raka želodca (tabela 1). Poleg tega je v kompletu testiranje in vsa bolnikov, visoko 14-3-3ơ izraz napovedal znatno OS in PFS pomanjkljivost nad nizko 14-3-3ơ izražanja podskupini (slika 3). Pomembno je, da je bil slabši napovedni vpliv večjega 14-3-3σ izražanja dokazali pri bolnikih s stadijem III in IV tumorjev (slika 4), kar kaže, da bi 14-3-3ơ je nov dejavnik za opredelitev tveganja raka želodca. Poleg tega, multivariatna analiza v nizu testiranja in splošne bolnikih je pokazala, da je bil 14-3-3ơ izraz neodvisni napovedni parameter. Skupaj, naše ugotovitve v tej študiji dokazali, da je povišan izražanje 14-3-3σ na raka želodca lahko lažje povečano maligni in slabše napovedni fenotip tega tumorja.
Glede prognostično vpliva 14-3-3σ

• Razmerje med črevesnih hormonov in homeostaze glukoze po bariatric surgery
• P27Kip1, ureja glikogen sintazo kinazo-3p, rezultati v HMBA-inducirane diferenciacijo človeške želodčne raka cells