Afwijkende opregulatie van 14-3-3ơ uitdrukking dient als een inferieur prognostische biomarker voor de maag cancer

afwijkende opregulatie van 14-3-3ơ uitdrukking dient als een inferieur prognostische biomarker voor maagkanker
Abstracte achtergrond
14-3 -3ơ is een intracellulaire, fosfoserine bindend eiwit en voorgesteld worden betrokken bij het ontstaan ​​van tumoren. De uitdrukking dynamiek van 14-3-3ơ en clinicopathologische /prognostische betekenis in humane tumoren nog steeds omstreden.
Methods
Werkwijze van immunohistochemie (IHC) en Western blot werden gebruikt om de eiwitexpressie van 14 onderzoekt -3-3ơ bij maagkanker en gepaarde normale aangrenzende maagslijmvlies weefsels. Ontvang operating characteristic (ROC) curve analyse werd gebruikt om te bepalen van een cutoff score voor 14-3-3ơ expressie in een training set (n = 66). Voor de validatie werd de ROC-afgeleide cutoff score onderworpen aan de analyse van de associatie van 14-3-3ơ expressie met patiëntresultaten en klinische kenmerken in een test set (n = 86) en de algehele patiënten (n = 152).
resultaten Ondernemingen De expressiefrequentie en expressieniveaus van 14-3-3ơ waren bij maagkanker significant hoger dan in normale weefsels maagslijmvlies. Correlatie analyse toonde aan dat hoge expressie van 14-3-3ơ bij maagkanker was significant gecorreleerd met de klinische fase en tumor invasie. Verder is in het testen set en de algehele patiënten, Kaplan-Meier analyse toonde aan dat een verhoogde expressie 14-3-3ơ voorspeld slechtere algemene overleving (OS) en progressievrije overleving (PFS). Belangrijk is dat hoge 14-3-3ơ expressie ook in verband gebracht met een verkort overlevingstijd in fase III en stadium IV maagkanker patiënten. Multivariate analyses bleek dat 14-3-3ơ expressie was een onafhankelijke prognostische parameter bij maagkanker.
Conclusies
Deze bevindingen bewijzen dat hoge expressie van 14-3-3ơ belangrijk in de progressie van de tumor en servers als een kan zijn onafhankelijke moleculaire marker voor een slechte prognose van maagkanker. Aldus overexpressie van 14-3-3ơ identificeert patiënten met een hoog risico en is een nieuw therapeutisch doelwit voor deze tumor. Achtergrond
Maagkanker is een van de meest voorkomende oorzaak van kanker-gerelateerde sterfgevallen wereldwijd [1] , vooral in de Oost-Aziatische landen zoals China, Japan [2]. In 2005 waren er ongeveer 0,4 miljoen nieuwe gevallen en 0,3 miljoen sterfgevallen door maagkanker in China [3]. Ondanks de recente vooruitgang in chirurgische technieken en medische behandeling, de totale 5-jaarsoverleving van maagkanker in China blijft laag op ongeveer 40%. Veel studies hebben aangetoond dat meerdere genetische veranderingen, waaronder tumorsuppressorgenen, oncogenen, celadhesiemoleculen, celcyclus regulatoren en groeifactoren, zijn verantwoordelijk voor de ontwikkeling en progressie van maagkanker [4]. Studies hebben veel aberrantly uitgedrukte genen in maagkanker waaronder ontrafeld BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP Kopen en STAT3
[8], SPARC
[9] en HER2
[10, 11], die risicobeoordeling van maagkanker patiënten beter te maken. Echter, veelbelovende moleculen die clinicopathologische /prognostische betekenis hebben bij maagkanker blijven aanzienlijk beperkt. Er moet verder begrijpen van de moleculaire mechanismen maagkanker en meer waardevolle prognostische markers om niet alleen het verbeteren slechtere prognose maar ook nieuwe veelbelovende therapie targets.
14-3-3-eiwitten zijn een familie van ongeveer 30 kD dimeer sterk geconserveerde eiwitten en alomtegenwoordig tot expressie gebracht in alle eukaryote organismen [12]. Er zijn zeven nauw verwante genen (β, γ, ε, η, ζ, O, τ) in 14-3-3 familie eiwitten. Deze genen vormen vaak heterodimeren of homodimeren en binden aan meer dan 100 verschillende eiwitliganden [13, 14]. Aldus worden 14-3-3 eiwitten betrokken bij vele cellulaire signaleringsprocessen waaronder celproliferatie, celcyclus, apoptose en maligne transformatie [14, 15]. Onder de zeven isotypen, 14-3-3ơ werd oorspronkelijk gekenmerkt als een menselijke borstklier epitheel marker 1 (HME1) en geïdentificeerd als een tumor onderdrukken gen [12, 16]. Groeiende bewijzen toonden aan dat 14-3-3ơ sterk was verminderd of verloren als gevolg van silencing van het gen via Hypermethylering in verschillende solide tumoren [17-22]. Eerdere rapporten bleek dat de expressie daalde van 14-3-3ơ voorspelde een slechte overleving in de borst en nasopharyngeal kanker [23, 24]. Echter tegenstrijdig met de tumor suppressor functie van 14-3-3σ overexpressie van 14-3-3ơ in pancreaskankercellijnen leidde tot geneesmiddelresistentie, celmigratie en invasie [25]. Bovendien hoge expressie van 14-3-3σ was een onafhankelijke prognostische factor voor de slechte overleving in de alvleesklier en colorectale kanker [26, 27]. Zo is de biologische rol van 14-3-3ơ in tumorigenese en progressie van verschillende typen menselijke kankers afhankelijk van specifieke tumortype. Hier hebben we gekozen voor de maagkanker exemplaren met strenge protocol om 14-3-3ơ dynamiek meningsuiting op te sporen en hun clinicopathologische /prognostische betekenissen te analyseren.
Methods
Patiënten
Een totaal van 216 primaire maagkanker patiënten uit het archief van de afdeling Pathologie in de Derde en Tweede Affiliated Hospital van Sun Yat-Sen University (Guangzhou, China) werden aanvankelijk geworven in onze studie. Alle patiënten ondergingen aanvankelijk chirurgische resectie van maart 2001 tot januari 2006. We verder onderzocht patiënten met behulp van een strikte criteria protocol als volgt: microscopisch bevestigd adenocarcinoom van de maag; zonder metastatische ziekte; geen eerdere chemotherapie of radiotherapie geschiedenis; het ontvangen van unified regime als eerstelijns chemotherapie na resectie van primaire tumoren (we verenigd als FOLFOX schema: fluorouracil, leucovorin en oxaliplatin), en geen straling behandeling wordt toegediend aan elk van de patiënten; met meer dan 5 jaar follow-up periode. Uiteindelijk 52 patiënten met verlies van follow-up en 12 patiënten met deficiëntie in klinische kenmerken werden van deze studie uitgesloten, waardoor 152 maagkankerpatienten onderwerpen aan verdere klinische en overlevingsanalyse. In de details, de totale cohort bestond uit 105 mannen en 47 vrouwen met een mediane leeftijd van 58,0 jaar (range, 27-81 jaar). 103 patiënten werden censused als de dood tijdens de 5 jaar follow-up tijd, waaronder 5 gevallen overleden aan postoperatieve complicaties en 98 gevallen overleed aan progressie van de tumor. Van de totale patiënten werden 66 patiënten willekeurig toegewezen door de computer (SPSS 17.0 software) om de training set, en de resterende 86 patiënten werden willekeurig toegewezen aan het testen set. Clinicopathologische variabelen van de twee cohorten, zoals leeftijd, geslacht, klinisch stadium, tumorinvasie, knooppunt fase en histologie differentiatie, werden in dit onderzoek. Alle tumoren werden geclassificeerd en gefaseerde volgens de herziene richtlijnen bepleit door de Internationale Unie tegen kanker. We verkregen voorafgaande toestemming van de patiënt en de goedkeuring van het Instituut voor Onderzoek ethische commissie van Sun Yat-Sen University voor het gebruik van klinische materialen in deze studie beschreven.
Tissue microarray bouw
Het weefsel microarrays (TMA) werden geconstrueerd als een methode eerder beschreven door Xie et al [28]. Kort samengevat, de in paraffine ingebedde weefselblokken en de overeenkomstige histologische hematoxyline en eosine gekleurde coupes werden bedekt voor TMA bemonstering. Geïnteresseerde kern tissue biopten (0.6-mm diameter) werden geponst uit representatief tumor gebieden en van de aangrenzende maagslijmvlies weefsel van blokken van de individuele donor weefsel met behulp van een trephine (drievoud cilinders van carcinoma weefsel en één cilinder van normale aangrenzende maagslijmvlies weefsel). Het weefsel cylinders werden hierna overgebracht naar een ontvangend paraffineblok op welbepaalde plaatsen met een tissue rangschikken instrument (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Immunohistochemische analyse en evaluatie
TMA objectglaasjes werden van paraffine ontdaan in xyleen , gerehydrateerd met gegradeerde alcohol, ondergedompeld in 3% waterstofperoxide gedurende 10 minuten om endogene peroxidase activiteit te blokkeren, en antigen opgehaald door druk koken gedurende 3 minuten in Tris /EDTA (pH = 8,0). Vervolgens werden de objectglaasjes geïncubeerd met het primaire antilichaam 14-3-3σ (monoklonaal muis, 01:50, Santa Cruz, SC-100.638) gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na geïncubeerd met secundair antilichaam gedurende 30 minuten werden monsters gekleurd met DAB (3, 3-diaminobenzidine). Tenslotte werden de secties tegengekleurd met hematoxyline, gedehydrateerd en gemonteerd. Een negatieve controle werd verkregen door het vervangen van het primaire antilichaam met een normale muis IgG. Bekende immunokleuring-positieve colorectaal carcinoom objectglaasjes werden als positieve controles zoals eerder beschreven [27]. Ondernemingen De bruine granules cytoplasma van 14-3-3σ werden als positieve kleuring. We scoorden de kleuring intensiteit als volgt: 0, geen vlekken; 1+, mild kleuring; 2+, matige kleuring; 3+, intense kleuring. Het gebied van kleuring werd als volgt beoordeeld: 0 geen kleuring van cellen in een microscopische velden; 1+, < 30% van het weefsel gekleurd positief; 2+, tussen de 30% en 60% gekleurd positief; 3+, > 60% gekleurd positief. 14-3-3σ expressie werd geëvalueerd door gecombineerde evaluatie van kleurintensiteit en uitbreiding. De minimale score bij opgeteld (intensiteit + extensie) was 0, en het maximum was 6. De criteria die in deze studie is algemeen eerder aanvaard [24]. Expressie van 14-3-3σ werd beoordeeld en gescoord door twee onafhankelijke pathologen (Drs. F Tang en ZY Feng) die waren geblindeerd aan de klinisch-pathologische gegevens. De overeenkomst van deze twee pathologen op de IHC score bereikt 84% (128 identieke scores in totaal 152 gevallen), wat suggereert ons scoresysteem was zeer solide en reproduceerbaar. Als de resultaten van de twee pathologen gerapporteerde overeenstemming waren, werd de waarde gekozen. Echter, de interobserver meningsverschillen (ongeveer 6% van de totale gevallen) werden beoordeeld voor de tweede keer, gevolgd door een sluitende uitspraak van beide pathologen.
Western blotanalyse
maagkanker en gepaarde normale aangrenzende maagslijmvlies weefsels werden gemalen en gelyseerd met RIPA buffer op ijs alvorens te worden onderworpen aan Western-blot-analyse. De eiwitconcentratie werd gedetecteerd door de werkwijze van Bradford met BSA (Sigma-Aldrich) gebruikt als standaard. Gelijke hoeveelheden van cel en weefsel extract (40 ug) werden onderworpen aan SDS-PAGE en overgebracht naar nitrocellulose membraan (Bio-Rad) voor antilichamen blotting. Het membraan werd vervolgens geblokkeerd en geïncubeerd met muizen anti-glyceraldehyde 3-fosfaat dehydrogenase (GAPDH) antilichaam (Abmart, # M20006) en muis anti-14-3-3σ antilichaam (Santa Cruz, SC-100.638). Selectie van
cutoff score voor 14-3-3σ "positieve" expressie
de ROC-curve analyse werd onderworpen aan de selectie van 14-3-3σ cutoff score in de training set, zoals eerder [29] beschreven. In het kort, de gevoeligheid en specificiteit voor de uitkomst bestudeerd bij elke score werd uitgezet naar een ROC-curve te genereren. De score gelokaliseerde die het dichtst bij het punt onder maximale gevoeligheid en specificiteit, het punt (0.0, 1.0) op de curve, werd geselecteerd als de cutoff score leidt tot het grootste aantal tumoren die juist als het hebben of niet hebben van de uitkomst werden geclassificeerd. Om ROC-curve analyse te vergemakkelijken, werden de survival functies gedichotomiseerde:. Overleving (dood VERSUS anderen (gecensureerd, levend of dood door andere oorzaken))
Follow-up Leer Alle patiënten hadden een follow-up records voor meer dan 5 jaar. Na voltooiing van de behandeling werden de patiënten waargenomen na 3 maanden intervallen gedurende de eerste 3 jaar en 6 maanden tussenpozen. Algehele overleving werd gedefinieerd als de tijd van diagnose tot de datum van overlijden of wanneer censused op de uiterste datum als de patiënten nog in leven waren. Progressievrije overleving werd gedefinieerd als de tijd van diagnose tot de datum van de plaatselijke storing /metastasen op afstand of de datum van overlijden of wanneer censused op de uiterste datum.
Statistische analyse
Voor survival analyse, optimale cutpoint voor 14- 3-3σ expressie werd verkregen door ROC-analyse in de training set (n = 66). Validatie werden de verhoudingen tussen 14-3-3σ expressie, dat werd ondergebracht ROC-analyse gegenereerd scheidingspunt en OS, PFS geëvalueerd in de testset (n = 86) en de totale patiënten (n = 152). De chi-kwadraat test of Fisher's exact test werd gebruikt om de relatie tussen 14-3-3σ expressie en clinicopathologische variabelen te evalueren. De multivariate Cox proportionele hazards model werd gebruikt om de hazard ratio's en 95% betrouwbaarheidsintervallen te schatten voor de patiënt uitkomst. De relaties tussen 14-3-3σ expressie en OS, PFS werden bepaald door Kaplan-Meier-analyse. De log-rank tests werden uitgevoerd om het verschil in overlevingskansen tussen patiënt subsets waarderen. Alle p
waarden geciteerd waren tweezijdig en p
< 0,05 werd beschouwd als statistisch significant. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS v. 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL).
Resultaten
14-3-3σ expressie bij maagkanker en normale maagslijmvlies weefsels
14-3-3σ werd ontdekt in het cytoplasma en overexpressie in de maagkanker (Figuur 1A en 1A '), terwijl normaal gepaard maagslijmvlies weefsels vertoonden bijna negatieve expressie (Figuur 1B en 1B). Consistent met dit resultaat, Western blot analyse onthulde een soortgelijke vaststelling bij maagkanker en aangrenzende normale gastrische mucosale weefsels (figuur 1C). Figuur 1 14-3-3σ expressie in primaire maagkanker en aangrenzende normale gastrische slijmvlies. (A) 14-3-3σ werd gedetecteerd in het cytoplasma en overexpressie in de maag kankerweefsel (100 x). (B) Aangrenzend niet-neoplastisch maagslijmvlies weefsel toonde bijna negatieve uitdrukking van 14-3-3σ (100 x). (A), (B) toonde de grotere vergroting (400 x) vanaf het gebied van de box aan (A) en (B) respectievelijk. (C) Western blot analyse van expressie in representatieve 14-3-3σ primaire maagkanker weefsel (T) en normaal aangrenzend mucosale weefsel (N). Gelijke belading van eiwit werd bepaald door GAPDH. Belgique Om overlevingsanalyse verder te onderzoeken en het probleem van meervoudige cutpoint selectieprocedures geen werd ROC curve analysemethode te bepalen cutoff score 14-3-3σ expressie. Zoals weergegeven in figuur 2A en 2B, de 14-3-3σ cutoff score voor OS en PFS in de training set was 3,25 (p Restaurant < 0,001) en 3,35 (p
= 0,003). We hebben dus gekozen voor een 14-3-3σ uitdrukking score van 3 (> 3 VS. ≤ 3) als uniforme afkappunt voor survival analyse in het testen set. Figuur 2 Receiver operating characteristic (ROC) curves analyse van 14-3-3σ cutoff score in de training set. (A) 14-3-3σ afkappunt voor de algehele overleving in de training set. (B) 14-3-3σ afkappunt voor progressievrije overleving in de training set. Bij elke immunohistochemische score, de gevoeligheid en specificiteit voor de uitkomst wordt bestudeerd werd uitgezet, waardoor het genereren van een ROC-curve. 14-3-3σ cutoff score voor de totale overleving, progressievrije overleving was 3,25 en 3,35 respectievelijk.
14-3-3σ expressie en klinische kenmerken
De klinische kenmerken van deze twee cohorten van patiënten, met inbegrip van leeftijd, geslacht , klinisch stadium, tumor invasie, knooppunt podium, histologie differentiatie, 14-3-3σ uitdrukking, zijn samengevat in tabel 1. ROC-afgeleide 14-3-3σ cutoff score van 3 in het succesvol ingesteld training gescheiden van de set in hoge testen ( 44/86, 51,2%) en lage (42/86, 48,8%) 14-3-3σ expressie subgroepen. Hoge expressie van 14-3-3σ werd vooral in de meer geavanceerde tumorstadia (77/107 in fase III + IV VS. 12/45 in fase I + II, p
= 0,004). Bovendien correlatie analyse toonde aan dat een hoge 14-3-3σ expressie werd gecorreleerd met de klinische fase (p Restaurant < 0,001 voor beide set) en tumor invasie (p Restaurant < 0,001 voor training set en p =
0.005 voor het testen set) in beide sets. 14-3-3σ geassocieerd met de leeftijd van patiënten bij de testen set (p
= 0,01), maar niet in de training set. We hebben geen enkel verband tussen 14-3-3σ met andere kenmerken van de patiënt, met inbegrip van geslacht, knooppunt stadium op te sporen, en histologie differentiation.Table 1 Vereniging van 14-3-3σ expressie met kenmerken patiënt in het primair maagkanker
Variable
Alle gevallen
Training set (n = 66)
Testen set (n = 86)


High
uitdrukking
Low
uitdrukking
p
een
hoge
uitdrukking
Low
uitdrukking
p

Leeftijd (jaar)
≥ 58.00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0.010 Restaurant < 58.00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Geslacht
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
klinische fase
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35.5 %)
21 (19,6%)
Tumor invasie
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Node stadium
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
histologie-differentiatie
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
x2-test
b mediane leeftijd
14-3-3σ expressie en survival analyse: univariate survival analyse
Zoals weergegeven in figuur 3A en 3C, Kaplan-Meier analyse toonde aan dat een verhoogde expressie 14-3-3σ sterk voorspelde een inferieure OS bij het testen set (p Restaurant < 0,001) en de algehele patiënten (p Restaurant < 0,001). Bovendien was 14-3-3σ uitdrukking ook een krachtige voorspellende factor voor PFS in de test set (p Restaurant < 0,001, figuur 3B) en de algehele patiënten (p Restaurant < 0,001, Figuur 3D). Gezien de slechte uitkomst laat stadium maagkanker, werd een verdere analyse uitgevoerd met betrekking tot expressie in subsets van maagkankerpatienten 14-3-3σ met stadium III en IV. De resultaten toonden aan dat in vergelijking met 14-3-3σ lage expressie, hoge expressie van 14-3-3σ toonde een significante trend naar erger OS en PFS bij maagkanker patiënten stadium III (p = 0,001
voor OS en p
= 0,017 voor PFS, figuur 4A en 4B) en stadium IV (p Restaurant < 0,001 voor OS en p = 0,001 voor
PFS, figuur 4C en 4D). Resulteert in de totale patiënten waren vergelijkbaar met die in de testset (Figuur 4E-H). Figuur 3 Kaplan-Meier survival analyse van 14-3-3σ meningsuiting in de testopstelling en de algehele patiënten. (A) Instellingen voor hoger 14-3-3σ expressie was nauw gecorreleerd met een slechte algehele overleving en (B) progressievrije overleving in de test set. (C) Patiënten met hogere expressie 14-3-3σ ook een lagere totale overleving en (D) progressievrije overleving in het algemeen patiënten verworven. In de test set en de algehele patiënten was de mediane duur van de totale overleving van patiënten met een lage en hoge expressie van 14-3-3σ was 73,0 VS. 17,0 maanden (p Restaurant < 0,001) en 73,0 VS. 14,0 maanden (p Restaurant < 0,001)., Respectievelijk
Figuur 4 Kaplan-Meier survival analyse van 14-3-3σ expressie in subsets van maagkanker patiënten met stadium III en IV (log-rank test). (A) Kans op totale overleving en (B) progressievrije overleving van patiënten met stadium III maagkanker in het testen set: lage expressie, n = 17; hoge expressie, n = 26; (C) Waarschijnlijkheid van de totale overleving en (D) progressievrije overleving van stadium IV patiënten met maagkanker in het testen set: lage expressie, n = 5; hoge expressie, n = 11. (E) Kans op overleving en (F) progressievrije overleving van patiënten met stadium III maagkanker in het algemeen patiënten: lage expressie, n = 22; hoge expressie, n = 55; (G) Kans op overleving en (H) progressievrije overleving van stadium IV patiënten met maagkanker in de totale patiënten: lage expressie, n = 9; hoge expressie, n = 21.
Multivariate Cox regressie Belgique Om de invloed door univariate analyse vermijden, de expressie van 14-3-3σ en andere parameters is in het multivariate Cox-analyse (Tabel 2 en Tabel onderzocht 3). In de test set, 14-3-3σ bleek inderdaad een significante onafhankelijke prognostische factor voor arme OS zijn (hazard ratio 4,527; 95% CI, 2,274-9,012; p Restaurant < 0,001; tabel 2) en PFS (hazard ratio 3,582; 95% CI, 1,717-7,475; p
= 0,001; tabel 2). Vergelijkbare resultaten werden ook waargenomen in de totale patiënten (hazard ratio 5,161; 95% CI, 2,990-8,909; p Restaurant < 0,001 voor OS en hazard ratio, 4,416; 95% CI, 2,482-7,856; p
<0,001 voor PFS; tabel 3). Van andere parameters, werd klinische fase bleek een onafhankelijke prognostische factor voor de overleving van de patiënten in de test set, maar niet in de algemene patients.Table 2 Resultaten van multivariate Cox proportionele-gevarenanalyse in het testen set
Variable
Want de dood
Voor progressievrije overleving

Hazard Ratio

95%
betrouwbaarheidsinterval
p
Risicoverhouding
95%
betrouwbaarheidsinterval
p

Age < 58.00
jaar (VS. ≥ 58 jaar)
1.101
0,637-1,902
0,731
1.056
0,577-1,936
0,859
Geslacht
(VS . Vrouw)
0,772
0,408-1,461
0,427
1.049
0,525-2,094
0,892
klinische fase
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156-9,949
0,026
5,220
1,529-17,823
0,008
Tumor invasie
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1.066
0,320-3,553
0,917
0.730
0,206-2,585
0,626
Nodal fase N 3 + N2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251
0,735
0,373-1,448
0,373
Differentiatie
Low (VS. Hoog)
0,862
0,437-1,701
0,668
0,936
0,442-1,982
0,863
14-3-3σ
Positief (VS. Negative)
4,527
2,274-9,012
0.000
3,582
1,717-7,475
0,001
Tabel 3 Resultaten van multivariate Cox proportionele-gevarenanalyse in de totale patiënten
Variable
Want de dood
Voor progressievrije overleving

Hazard Ratio

95%
betrouwbaarheidsinterval
p
Risicoverhouding
95%
betrouwbaarheidsinterval
p
Age < 58.00
jaar (VS. ≥ 58 jaar)
1.046
0,701-1,562
0,825
1.036
0.654-1,642
0,880
Geslacht
(VS . Vrouw)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0,409-1,278
0,165
klinische fase
IV + III (VS. II + I)
0,988
0.500 to1.952
0,972
1,355
0,558-3,121
0,476
Tumor invasie
T 4 + T 3 (VERSUS T 2 + T 1 )
2.175
0,896-5,278
0,086
1,432
0,547-3,747
0,465
Nodal fase N 3 + N2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0,808
1.243
0,751-2,059
0,397
Differentiatie
Low (VS. Hoog)
0,765
0.470 to1.243
0,279
0.810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
Positief (VS. Negative)
5,161
2,990-8,909
0.000
4,416
2,482-7,856
0.000
Discussie
Maagkanker is een van de meest voorkomende vormen van kanker wereldwijd en het vormt een van de meest ernstige volksgezondheid probleem [1]. Herhaling en metastase zijn nog steeds de belangrijkste kwesties voor de slechte overleving van gevorderde maagkanker patiënten [30]. Hoewel eerdere studies hebben aangetoond dat een groot aantal afwijkende uitgedrukte genen in de maag tumor kan helpen classificeren van het risico van de patiënt uitkomst [5-11], meer nieuwe moleculaire markers die progressie van de tumor kunnen identificeren en de prognose voorspellen individueel zijn nog steeds dringend nodig. Het 14-3-3 familie eiwitten hebben veel aandacht in de afgelopen jaren is opgedaan als gevolg van hun betrokkenheid bij kanker door regelgeving van diverse cellulaire processen [14, 15]. Van de zeven isovormen, 14-3-3σ up-gereguleerd door p53 in reactie op DNA-schade en sequesters superieure mitotische initiatiecomplex, cdc2-cycline B1, het invoeren van de kern, waardoor de opening van mitose [31] voorkomen. Hierdoor 14-3-3σ induceert G2 arrestatie en maakt DNA schade herstel. Dus anders dan andere leden van de familie, 14-3-3σ gedefinieerd als een negatieve regulator van de celcyclus en een potentiële tumor-suppressor-eiwit [12]. De biologische rol van 14-3-3ơ in tumorigenese progressie van diverse soorten menselijke tumoren blijft controversieel. Hier verder de biologische functie van 14-3-3ơ bij maagkanker onthullen, bestudeerden we expressie en dynamiek 14-3-3ơ hun clinicopathologische /prognostische betekenissen in 152 tumormonsters geanalyseerd.
In deze studie, om een ​​objectieve ontwikkeling 14-3-3σ cutoff punt om te overleven analyse gebruikten we de ROC-curve analyse om een ​​cutoff score in de training set te genereren. 14-3-3σ expressie, die werd geclassificeerd als hoog en laag niveau door de ROC-afgeleide afkapwaarde werd voornamelijk hoger in meer gevorderde tumor stadia (stadium III en IV), hetgeen aangeeft dat 14-3-3σ misschien betrokken bij maagkanker progressie. Correlatieanalyse verder aangetoond dat hoge 14-3-3σ expressie werd geassocieerd met klinische en tumorinvasie bij maagkanker (tabel 1). Verder is in het testen set en de algehele patiënten, hoge 14-3-3ơ expressie voorspelde een belangrijke OS en PFS nadeel over lage 14-3-3ơ expressie subgroep (figuur 3). Belangrijker slechter prognostische impact van verhoogde 14-3-3σ expressie werd aangetoond in patiënten met stadium III en IV tumoren (figuur 4), wat aangeeft dat 14-3-3ơ een nieuwe factor risico definitie van maagkanker kan zijn. Bovendien, multivariate analyses in het testen set en de algemene patiënten bleek dat 14-3-3ơ expressie was een onafhankelijke prognostische parameter. Samengevat, onze bevindingen in deze studie aangetoond dat verhoogde expressie van 14-3-3σ bij maagkanker kan een verhoogde maligne fenotype en slechtere prognose van deze tumor bevorderen.
Wat de prognostische impact van 14-3-3σ

• Relatie tussen darm hormonen en glucose homeostase na bariatrische chirurgie
• P27kip1, gereguleerd door glycogeen synthase kinase-3β resulteert in HMBA-geïnduceerde differentiatie van menselijke maagkanker cellen