upregulation aberrante de expressão 14-3-3ơ serve como um biomarcador de prognóstico inferior para câncer gástrico

upregulation aberrante de expressão 14-3-3ơ serve como um biomarcador de prognóstico inferior para câncer gástrico da arte abstracta
Fundo
14-3-3ơ é uma intracelular, proteína de ligação fosfo e propôs a ser envolvidos na tumorigênese. No entanto, a dinâmica de expressão de 14-3-3ơ e sua correlação clínica significado /prognóstico em tumores humanos ainda são controversos.
Methods of the método de imuno-histoquímica (IHQ) e Western blot foram utilizados para examinar a expressão da proteína de 14 -3-3ơ no câncer gástrico e os tecidos normais adjacentes emparelhados gástricas mucosas. Receba análise característica (ROC) a operar foi empregado para determinar a nota de corte para a expressão 14-3-3ơ em um conjunto de treinamento (n = 66). Para a validação, a nota de corte ROC derivado foi submetido a análise da associação de expressão 14-3-3ơ com o resultado do paciente e as características clínicas em um conjunto de teste (n = 86) e pacientes em geral (n = 152).
resultados Tours a freqüência e níveis de expressão de expressão de 14-3-3ơ foram significativamente mais elevados no câncer gástrico do que em tecidos normais da mucosa gástrica. análise de correlação demonstrou que a alta expressão de 14-3-3ơ no câncer gástrico foi significativamente correlacionada com o estágio clínico e invasão tumoral. Além disso, no conjunto de testes e pacientes em geral, a análise de Kaplan-Meier mostraram que a expressão 14-3-3ơ elevada previu mais pobre sobrevida global (SG) e sobrevida livre de progressão (PFS). É importante ressaltar que a alta expressão 14-3-3ơ também foi associado com o tempo de sobrevida encurtada em estágio III e pacientes com câncer gástrico estágio IV. A análise multivariada revelou que a expressão 14-3-3ơ foi um parâmetro independente de prognóstico no câncer gástrico.
Conclusões
Estes resultados fornecem evidências de que a alta expressão de 14-3-3ơ pode ser importante na progressão do tumor e servidores como um marcador molecular independente de mau prognóstico do câncer gástrico. Assim, superexpressão de 14-3-3ơ identifica pacientes de alto risco e é um novo alvo molecular terapêutica para este tumor.
Fundo
O câncer gástrico é uma das causas mais comuns de morte relacionada ao câncer em todo o mundo [1] , especialmente nos países do leste da Ásia, como a China, Japão [2]. Em 2005, havia cerca de 0,4 milhões de novos casos e 0,3 milhões de mortes por câncer gástrico na China [3]. Apesar dos recentes avanços nas técnicas cirúrgicas e tratamento médico, a taxa de sobrevida global em 5 anos de câncer gástrico na China continua a ser baixa em cerca de 40%. Muitos estudos têm demonstrado que várias alterações genéticas, incluindo os genes supressores de tumores, oncogenes, moléculas de adesão celular, reguladores do ciclo celular, e factores de crescimento, é responsável para o desenvolvimento e progressão do cancro gástrico [4]. Estudos têm desvendado muitos genes expressos de maneira aberrante em câncer gástrico incluindo BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP Comprar e STAT3
[8], SPARC
[9] e HER2
[10, 11], o que torna a avaliação de risco de pacientes com câncer gástrico com mais precisão. No entanto, as moléculas promissoras que têm significado clínico-patológico /prognóstico no câncer gástrico permanecem substancialmente limitada. É necessário compreender os mecanismos moleculares envolvidos no cancro gástrico e para identificar os indicadores de prognóstico mais importantes, a fim de não só melhorar o prognóstico pior, mas também fornecem novos alvos terapia promissora.
14-3-3 proteínas são uma família de cerca de proteínas de 30 kD dimérica altamente conservada e ubiquamente expresso em todos os organismos eucariotas [12]. Há sete genes estreitamente relacionados (β, γ, ε, η, ζ, o, t) em proteínas 14-3-3 família. Estes genes muitas vezes formam heterodímeros ou homodímeros e se ligam a mais de 100 ligantes de proteínas diferentes [13, 14]. Assim, 14-3-3 proteínas estão envolvidas em muitos processos de sinalização celular diferentes, incluindo a proliferação de células, do controlo do ciclo celular, apoptose e transformação maligna [14, 15]. Entre os sete isotipos, 14-3-3ơ foi originalmente caracterizada como um marcador de epitélio mamário humano 1 (HME1) e identificado como um gene de suprimir tumores [12, 16]. evidências crescentes mostrou que 14-3-3ơ foi significativamente diminuído ou perdido devido ao silenciamento do gene através de hipermetilação em vários tumores sólidos [17-22]. Os relatórios anteriores descobriram que a diminuição da expressão de 14-3-3ơ previu uma pior sobrevida na mama e câncer de nasofaringe [23, 24]. No entanto, contraditória com o papel de supressor de tumor 14-3-3σ, a sobre-expressão de 14-3-3ơ em células de cancro pancreático levou a resistência às drogas, a migração celular e invasão [25]. Além disso, a alta expressão de 14-3-3σ foi um fator prognóstico independente para pior sobrevida no pâncreas e cancro colorectal [26, 27]. Assim, o papel biológico de 14-3-3ơ na tumorigénese e na progressão de vários tipos de cancros humanos varia dependendo do tipo específico de tumor. Aqui, foram selecionadas as amostras com câncer gástrico com protocolo rigoroso para detectar a dinâmica de expressão 14-3-3ơ e analisar os seus significados clinicopatológicas /prognóstico.
Métodos
Pacientes
Um total de 216 pacientes com câncer gástrico primários dos arquivos do Departamento de Patologia do Hospital terceiro e segundo Affiliated de Sun Yat-Sen University (Guangzhou, China) foram inicialmente recrutados em nosso estudo. Todos os pacientes foram submetidos à ressecção cirúrgica inicial de março de 2001 a janeiro de 2006. Nós, os pacientes ainda rastreados usando um rigoroso protocolo de critérios de elegibilidade da seguinte forma: microscopicamente confirmou adenocarcinoma do estômago; sem quaisquer doenças metastáticas; sem quimioterapia ou radioterapia história prévia; receber um regime unificado como quimioterapia de primeira linha após ressecção de tumores primários (que unificada como regime FOLFOX: fluorouracilo, leucovorina e oxaliplatina), e sem tratamento de radiação a ser administrado a qualquer dos pacientes; ter mais de 5 anos de seguimento. Em última análise, 52 pacientes com perda de follow-up e 12 pacientes com deficiência em características clínicas foram excluídos deste estudo, levando a 152 pacientes com câncer gástrico sujeitando a uma maior análise clínica e sobrevivência. Em detalhes, a coorte geral consistiu em 105 do sexo masculino e 47 do sexo feminino com a idade média de 58,0 anos (variando de 27-81 ano). 103 pacientes foram recenseadas como a morte durante os 5 anos de tempo de seguimento, incluindo 5 casos morreu de complicações pós-operatórias e 98 casos morreram de progressão tumoral. Dos pacientes em geral, 66 pacientes foram distribuídos aleatoriamente por computador (SPSS 17.0 software) para o conjunto de treinamento, e restantes 86 pacientes foram aleatoriamente designados para o conjunto de teste. variáveis ​​clínico-patológicas dos dois grupos, tais como idade, sexo, estágio clínico, invasão tumoral, estágio nó e diferenciação histológica, foram incluídos neste estudo. Todos os tumores foram classificados e encenado de acordo com as orientações revistas defendida pela União Internacional contra o Câncer. Nós obteve o consentimento dos pacientes anteriores e aprovação do Comitê do Instituto de Pesquisa Ética da Sun Yat-Sen University para o uso de materiais clínicos descritos no presente estudo. Construção
Tissue microarray
Os microarrays de tecido (TMAs) foram construídos como um método anteriormente descrito por Xie et al [28]. Resumidamente, os blocos de tecido embebidos em parafina e as correspondentes hematoxilínicos histológica e corados-eosina lâminas foram sobrepostas para TMA amostragem. biópsias de tecidos do núcleo interessadas (0,6 mm de diâmetro) foram perfuradas a partir de áreas representativas do tumor e do tecido adjacente mucosa gástrica a partir de blocos de tecido do dador individual, utilizando um trépano (cilindros em triplicado a partir de tecido de carcinoma e um cilindro de tecido de mucosa gástrica normal adjacente). Os cilindros de tecido foram então transferidas para um bloco de parafina receptor em posições definidas por meio de um instrumento-arraying tecido (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, EUA).
Análise imuno-histoquímica e avaliação
TMAs As lâminas foram desparafinizadas em xileno , re-hidratadas através de álcool graduado, imerso em peróxido de hidrogénio a 3% durante 10 minutos para bloquear a actividade da peroxidase endógena, e antigénio recuperado por pressão cozinhar durante 3 minutos em Tris /EDTA (pH = 8,0). Em seguida, as lâminas foram incubadas com o anticorpo primário de 14-3-3σ (monoclonal de ratinho; 1:50; Santa Cruz, SC-100638) durante 1 hora à temperatura ambiente. Após ser incubada com o anticorpo secundário durante 30 min, as amostras foram coradas com DAB (3, 3-diaminobenzidina). Finalmente, as secções foram contrastadas com hematoxilina, desidratadas e montadas. Um controlo negativo foi obtido por substituição do anticorpo primário com uma IgG de murino normal. Conhecidos lâminas de carcinoma colorrectal imunocoloração positiva foram utilizados como controlos positivos como relatado anteriormente [27]. Os grânulos
castanhos em citoplasma de 14-3-3σ foram considerados como coloração positiva. Nós teve a intensidade de coloração como se segue: 0, sem coloração; 1+, coloração leve; 2+, coloração moderada; 3+, coloração intensa. A área de coloração foi avaliado como se segue: 0, sem coloração de células em todos os campos microscópicos; 1+, < 30% de tecido corado positivo; 2+, entre 30% e 60% corado positivo; 3+, > 60% corado positivo. 14-3-3σ expressão foi avaliado por meio da avaliação combinada de intensidade de coloração e extensão. A pontuação mínima quando somados (intensidade + extensão) foi de 0, ea máxima foi de 6. Os critérios utilizados neste estudo tem sido amplamente aceito anteriormente [24]. Expressão de 14-3-3σ foi avaliado e marcado por dois patologistas independentes (Drs. F Tang e ZY Feng) que estavam cegos aos dados clínico-patológicos. O acordo dos dois patologistas sobre a pontuação IHC chegou a 84% (128 pontuações idênticas no total 152 casos), sugerindo o nosso sistema de pontuação foi altamente reproduzível e consistente. Se os resultados apresentados pelos dois patologistas foram consistentes, o valor foi selecionado. No entanto, as divergências interobservador (aproximadamente 6% do total de casos) foram revistos por uma segunda vez, seguido por um julgamento conclusivo por ambos os patologistas.
Análise de Western blot
O câncer gástrico e emparelhados tecidos da mucosa gástrica adjacentes normais foram moídas e lisadas com o tampão RIPA em gelo antes de ser submetido a análise de transferência de Western. A concentração de proteína foi detectada pelo método de Bradford com BSA (Sigma-Aldrich) como padrão. Quantidades iguais de extracto de células e tecido (40 ug) foram submetidas a SDS-PAGE e transferidos para membrana de nitrocelulose (Bio-Rad) para blotting anticorpo. A membrana foi então bloqueada e incubadas com desidrogenase de ratinho anti-gliceraldeído 3-fosfato de anticorpo (GAPDH) (Abmart, # M20006) e anticorpo anti-14-3-3σ rato (Santa Cruz, SC-100638). Selecção de
nota de corte para 14-3-3σ expressão "positivo"
a análise da curva ROC foi submetido à seleção de nota de corte 14-3-3σ no conjunto de treinamento, como descrito anteriormente [29]. Resumidamente, a sensibilidade e especificidade para o desfecho em estudo em cada pontuação foi traçada para gerar uma curva ROC. A pontuação localizada mais próximo do ponto, tanto a máxima sensibilidade e especificidade, o ponto (0.0, 1.0) na curva, foi seleccionado como o ponto de corte registos que conduz ao maior número de tumores que foram correctamente classificados como tendo ou não o resultado. Para facilitar a análise da curva ROC, as características de sobrevivência foram dicotomizados:. Sobrevivência (comparada morte outros (censurado, vivo ou morte por outras causas))
Acompanhamento
Todos os pacientes tiveram registros de acompanhamento para mais de 5 anos. Após a conclusão da terapia, os pacientes foram observados em intervalos de 3 meses, durante os primeiros 3 anos e a intervalos de 6 meses depois disso. A sobrevida global foi definido como o tempo desde o diagnóstico até a data da morte ou quando recenseadas na última data se os pacientes ainda estavam vivos. sobrevida livre de progressão foi definida como o tempo desde o diagnóstico até a data de falha local /metástases à distância ou a data da morte ou quando recenseadas na última data.
análise estatística
Para análise de sobrevivência, ponto de corte ideal para 14- expressão 3-3σ foi obtida por análise ROC no conjunto de treinamento (n = 66). Para a validação, as relações entre a expressão 14-3-3σ, que foi classificada pelo ROC ponto de corte gerados por análise e OS, PFS foram avaliadas no conjunto de teste (n = 86) e pacientes em geral (n = 152). O teste do qui-quadrado ou teste exato de Fisher foi utilizado para avaliar a relação entre a expressão 14-3-3σ e variáveis ​​clínico-patológicas. A Cox modelo de risco proporcional multivariada foi utilizada para estimar as taxas de risco e intervalos de confiança de 95% para o resultado paciente. As relações entre a expressão 14-3-3σ e OS, PFS foram determinados por análise de Kaplan-Meier. Os testes de log-rank foram realizados para avaliar a diferença de probabilidades de sobrevivência entre os subgrupos de pacientes. Todos os valores p
citados foram em frente e verso e p Art < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. A análise estatística foi realizada usando SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc, Chicago, IL).
Resultados
expressão 14-3-3σ no câncer gástrico e tecidos da mucosa gástrica normais
14-3-3σ foi detectada no citoplasma e sobre-expresso no cancro gástrico (Figura 1A e 1A '), enquanto que os tecidos da mucosa gástrica emparelhados normais mostraram expressão quase negativa (Figura 1B e 1B'). Consistente com este resultado, a análise de mancha de Western revelou uma conclusão semelhante no cancro gástrico e tecidos normais adjacentes da mucosa gástrica (Figura 1C). A Figura 1 14-3-3σ expressão em cancro gástrico humano primário e no tecido da mucosa gástrica normal adjacente. (A) 14-3-3σ foi detectada no citoplasma e sobre-expressa no tecido do cancro gástrico (100 ×). (B) do tecido da mucosa gástrica não neoplásico adjacente mostraram expressão de quase negativo 14-3-3σ (100 ×). (A '), (B') demonstrou a maior ampliação (400 ×) a partir da zona da caixa, em (A) e (B), respectivamente. (C) análise de transferência de Western de expressão em tecido representativo 14-3-3σ primária do cancro gástrico (T) e tecido normal adjacente da mucosa (N). Carga igual de proteína foi determinada por GAPDH.
Para avaliar ainda mais a análise de sobrevivência e evitar os problemas de seleção ponto de corte múltipla, análise da curva ROC foi utilizada para determinar a pontuação de corte para a expressão 14-3-3σ. Como mostrado na Figura 2A e 2B, a nota de corte 14-3-3σ para OS e PFS no conjunto de treinamento foi de 3,25 (p Art < 0,001) e 3,35 (p
= 0,003), respectivamente. Foram selecionados, assim, uma pontuação 14-3-3σ expressão de 3 (> 3 VS. ≤ 3) como ponto de corte uniforme para a análise de sobrevivência no conjunto de testes. Figura 2 Receiver operando análise characteristic (ROC) curvas de 14-3-3σ nota de corte no conjunto de treinamento. (A) ponto de corte 14-3-3σ para a sobrevida global no conjunto de treinamento. (B) ponto de corte 14-3-3σ para a sobrevivência livre de progressão no conjunto de treinamento. Em cada pontuação imuno-histoquímica, a sensibilidade e especificidade para o desfecho em estudo foi representada graficamente, gerando uma curva ROC. nota de corte 14-3-3σ para a sobrevivência global, sobrevivência livre de progressão foi de 3,25 e 3,35, respectivamente.
14-3-3σ expressão e características clínicas
As características clínicas desses dois grupos de pacientes, incluindo idade, sexo , estágio clínico, invasão tumoral, estágio nó, diferenciação histologia, expressão 14-3-3σ, foram resumidos na tabela 1. ROC derivado nota de corte 14-3-3σ de 3 no conjunto de treinamento com sucesso segregados o teste definido em alta ( 44/86, 51,2%) e baixa (42/86, 48,8%) subgrupos de expressão 14-3-3σ. Alta expressão de 14-3-3σ foi encontrado principalmente em estádios mais avançados (77/107 no estágio III + IV VS. 12/45 na fase I + II, p
= 0,004). Além disso, a análise de correlação demonstrou que elevada expressão 14-3-3σ foi correlacionada com o estágio clínico (p Art < 0,001 para ambos set) e invasão tumoral (p Art < 0,001 para conjunto de treino e p =
0.005 para o conjunto de testes) em ambos os conjuntos. 14-3-3σ associada à idade dos pacientes no conjunto de testes (p
= 0,01), mas não no conjunto de treinamento. Nós não conseguiram detectar qualquer relação entre 14-3-3σ com outras características do paciente, incluindo o género, a fase de nó, e histologia differentiation.Table 1 Associação de expressão 14-3-3σ com características do paciente no cancro gástrico primário
variável
Todos os casos
conjunto de treinamento (n = 66)
Testing set (n = 86)


alta
expressão
Baixa
expressão
p
um
alta
expressão
Baixa
expressão
p
um
Idade (anos)
≥ 58.00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010 Art < 58.00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Sexo
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
estágio clínico
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
A invasão tumoral
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Nó estágio
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
Histologia diferenciação
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
um teste x2
idade média b
expressão 14-3-3σ e análise de sobrevivência: análise de sobrevida univariada
Como mostrado na Figura 3A e 3C, análise de Kaplan-Meier mostraram que a expressão 14-3-3σ elevada previu fortemente um sistema operacional inferior no conjunto de testes (p Art < 0,001) e os pacientes globais (p Restaurant < 0,001). Além disso, a expressão 14-3-3σ também foi um fator prognóstico poderoso para PFS no conjunto de testes (p Art < 0,001, Figura 3B) e os pacientes globais (p Art < 0,001, Figura 3D). Considerando o mau resultado no câncer gástrico em estágio final, uma análise mais aprofundada foi realizada em relação a 14-3-3σ expressão em subconjuntos de pacientes com câncer gástrico em estágio III e IV. Os resultados demonstraram que, em comparação com baixa expressão 14-3-3σ, alta expressão de 14-3-3σ mostrou uma tendência significativa de pior OS e PFS em pacientes com câncer gástrico de fase III (p = 0,001
para OS e p
= 0,017 para PFS, Figura 4A e 4B) e estágio IV (p Art < 0,001 para OS e p
= 0,001 para PFS, Figura 4C e 4D). Resultados em pacientes globais foram semelhantes aos encontrados no conjunto de testes (Figura 4E-H). Figura 3 análise de sobrevivência de Kaplan-Meier de expressão 14-3-3σ no conjunto de testes e pacientes em geral. (A) a expressão 14-3-3σ Superior foi estreitamente relacionado com pior sobrevida global e (B) sobrevida livre de progressão no conjunto de testes. (C) Os pacientes com maior expressão 14-3-3σ também adquiriu uma sobrevida global inferior e (D) sobrevida livre de progressão em pacientes em geral. No conjunto de teste e os pacientes em geral, a duração mediana de sobrevida global para pacientes com baixa e alta expressão de 14-3-3σ foi 73,0 VS. 17,0 meses (p Restaurant < 0,001) e 73,0 VS. 14,0 meses (p Art < 0,001)., Respectivamente
Figura 4 Kaplan-Meier análise de sobrevivência de expressão 14-3-3σ em subgrupos de pacientes com câncer gástrico em estágio III e IV (teste log-rank). (A) A probabilidade de sobrevida global e (B) sobrevida livre de progressão de pacientes com câncer gástrico fase III no conjunto de testes: baixa expressão, n = 17; elevada expressão, n = 26; (C) Probabilidade de sobrevida global e (D) a sobrevida livre de progressão da fase IV pacientes com câncer gástrico no conjunto de testes: baixa expressão, n = 5; alta expressão, n = 11. (E) Probabilidade de sobrevida global e (F) a sobrevida livre de progressão dos pacientes com câncer gástrico fase III nos pacientes gerais: baixa expressão, n = 22; elevada expressão, n = 55; (G) Probabilidade de sobrevida global e (H) sobrevida livre de progressão da fase IV pacientes com câncer gástrico nos pacientes gerais: baixa expressão, n = 9; elevada expressão, n = 21.
análise de regressão multivariada de Cox
Para evitar a influência causada por análise univariada, a expressão de 14-3-3σ, bem como outros parâmetros foi examinada na análise multivariada de Cox (Tabela 2 e Tabela 3). No conjunto de testes, 14-3-3σ foi realmente encontrado para ser um fator significativo independente prognóstico para pobres OS (hazard ratio, 4,527; 95% CI, 2,274-9,012; p Art < 0,001; Tabela 2) e PFS (hazard ratio, 3,582; 95% CI, 1,717-7,475; p
= 0,001; Tabela 2). Resultados semelhantes também foram observados em pacientes gerais (hazard ratio, 5,161; 95% CI, 2,990-8,909; p Art < 0,001 para OS e taxa de risco, 4,416; 95% CI, 2,482-7,856; p <
; 0,001 para PFS; Tabela 3). De outros parâmetros, estágio clínico foi encontrado para ser um fator prognóstico independente para a sobrevida do paciente no conjunto de testes, mas não em geral patients.Table 2 Resultados de multivariada Cox análise de riscos proporcionais de testes em conjunto

variável
Para a morte
Para a sobrevivência livre de progressão

Hazard Ratio

95%
intervalo de confiança
p
Hazard Ratio
95%
intervalo de confiança
p

Age < 58.00
anos (comparada ≥ 58 anos)
1.101
0,637 para 1,902
0,731
1.056
0,577-1,936
0,859
Sexo Masculino
(VS . Feminino)
0,772
0,408-1,461
0,427
1.049
0,525-2,094
0,892
Clínica fase
IV + III (VS. II + I)
3.391
1,156-9,949
0,026
5.220
1,529-17,823
0,008
A invasão tumoral
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1.066
0,320-3,553
0,917
0.730
0,206-2,585
0,626
estágio Nodal N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251
0,735
0,373-1,448
0,373
Diferenciação
Low (VS. Alta)
0.862
0,437-1,701
0,668
0,936
0,442-1,982
0,863
14-3-3σ
Positivo (VS. Negative)
4.527
2,274-9,012
0.000
3.582
1,717 para 7,475
0,001
Tabela 3 resultados dos multivariada Cox análise de riscos proporcionais de em pacientes globais

variável
Para a morte
Para a sobrevivência livre de progressão

Hazard Ratio
95%
intervalo de confiança
p
Hazard Ratio
95%
intervalo de confiança
p
Age < 58.00
anos (comparada ≥ 58 anos)
1.046
0,701 para 1,562
0,825
1.036
0654-1,642
0,880
Sexo Masculino
(VS . Feminino)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0,409-1,278
0,165
Clínica fase
IV + III (VS. II + I)
0,988
0,500 to1.952
0,972
1.355
0,558-3,121
0,476
A invasão tumoral
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2.175
0,896-5,278
0,086
1.432
0,547-3,747
0,465
estágio Nodal N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0,808
1.243
0,751-2,059
0,397
Diferenciação
Low (VS. alta)
0,765
0.470 to1.243
0,279
0.810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
positivo (VS. Negative)
5.161
2,990-8,909
0.000
4,416
2,482-7,856
0.000
Discussão
o câncer gástrico é um dos cancros mais comuns em todo o mundo e representa um dos saúde pública mais grave problema [1]. Recorrência e metástase ainda são os principais problemas para os pobres sobrevivência de doentes com cancro gástrico avançado [30]. Embora estudos anteriores já haviam mostrado que muitos genes expressos aberrantes em tumor gástrico pode ajudar a classificar o risco de o resultado do paciente [5-11], novos marcadores moleculares mais que podem identificar a progressão do tumor e prever o prognóstico individualmente ainda são urgentemente necessários. As proteínas da família 14-3-3 ganharam muita atenção nos últimos anos devido ao seu envolvimento em cancros pela regulamentação de diversos processos celulares [14, 15]. Entre as sete isoformas, 14-3-3σ é sobre-regulada por p53 em resposta a danos no ADN, e sequestra o essencial mitótico complexo de iniciação, cdc2-ciclina B1, de entrar no núcleo, impedindo assim o início da mitose [31]. Como resultado, 14-3-3σ induz a paragem G2 e permite a reparação de danos ao DNA. Assim, diferente de outros membros da família, 14-3-3σ é definido como um regulador negativo de pontos de verificação do ciclo celular e um potencial de proteína supressora de tumor [12]. No entanto, o papel biológico de 14-3-3ơ na tumorigénese e na progressão de vários tipos de tumores humanos permanece controverso. Aqui, a revelar ainda mais a função biológica de 14-3-3ơ no cancro gástrico, estudamos a dinâmica de expressão 14-3-3ơ e analisados ​​os seus significados clinicopatológicas /prognóstico em 152 amostras de tumor.
Neste estudo, para desenvolver um objectivo ponto de corte 14-3-3σ para análise de sobrevida, utilizou-se a análise da curva ROC para gerar uma nota de corte no conjunto de treinamento. expressão 14-3-3σ, que foi classificado como alto e baixo nível, o ponto de corte ROC-derivada, foi encontrada principalmente a ser maior em estádios mais avançados (fase III e IV), indicando que 14-3-3σ pode ser envolvidos na progressão do cancro gástrico. análise de correlação demonstrou ainda que a alta expressão 14-3-3σ foi associada com o estágio clínico e invasão tumoral no câncer gástrico (Tabela 1). Além disso, no conjunto de testes e pacientes em geral, elevada expressão 14-3-3ơ previu um sistema operacional significativa e PFS desvantagem sobre o baixo subgrupo expressão 14-3-3ơ (Figura 3). Importante, pior impacto prognóstico da expressão aumentada 14-3-3σ foi demonstrada em doentes com estádio III e IV tumores (Figura 4), indicando que 14-3-3ơ pode ser um factor de novo para a definição de risco em cancro gástrico. Além disso, análises multivariadas no conjunto de testes e pacientes globais revelou que a expressão 14-3-3ơ foi um parâmetro de prognóstico independente. Tomados em conjunto, os nossos resultados neste estudo forneceu evidências de que a elevada expressão de 14-3-3σ no câncer gástrico pode facilitar uma maior fenótipo maligno e pior prognóstico deste tumor.
No que diz respeito ao impacto prognóstico da 14-3-3σ

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