upregulation aberrante di espressione 14-3-3ơ serve come un marcatore prognostico inferiore per cancro gastrico

upregulation aberrante di espressione 14-3-3ơ serve come un marcatore prognostico inferiore per il cancro gastrico
Abstract
sfondo
14-3-3ơ è un intracellulare, fosfoserina legame con le proteine ​​e ha proposto di essere coinvolti nella tumorigenesi. Tuttavia, le dinamiche di espressione di 14-3-3ơ e la sua clinicopatologica /significato prognostico nei tumori umani sono ancora controversi.
Metodi
Il metodo di immunoistochimica (IHC) e Western Blot sono stati utilizzati per esaminare l'espressione della proteina di 14 -3-3ơ nel cancro gastrico e tessuti adiacenti normali appaiati mucosa gastrica. Ricevere operativo analisi caratteristica (ROC) curva è stata utilizzata per determinare un punteggio cut-off per l'espressione 14-3-3ơ in un training set (n = 66). Per la convalida, il punteggio cutoff ROC-derivato è stato sottoposto ad analisi dell'associazione di espressione 14-3-3ơ con outcome del paziente e le caratteristiche cliniche in una serie di test (n = 86) e pazienti complessivi (n = 152).
risultati
I livelli di frequenza e di espressione di espressione di 14-3-3ơ erano significativamente più alti nel carcinoma gastrico che nei normali tessuti della mucosa gastrica. L'analisi di correlazione ha dimostrato che l'alta espressione di 14-3-3ơ nel carcinoma gastrico è risultata significativamente correlata con stadio clinico e l'invasione tumorale. Inoltre, nel set di test e pazienti complessivi, analisi di Kaplan-Meier ha mostrato che elevati espressione 14-3-3ơ predetto più poveri la sopravvivenza globale (OS) e la sopravvivenza libera da progressione (PFS). È importante sottolineare che, elevata espressione 14-3-3ơ era anche associato con il tempo di sopravvivenza ridotto in stadio III e stadio IV pazienti affetti da cancro gastrico. Analisi multivariata ha rivelato che l'espressione 14-3-3ơ era un parametro prognostico indipendente nel carcinoma gastrico.
Conclusioni
Questi risultati forniscono la prova che l'alta espressione di 14-3-3ơ può essere importante nella progressione tumorale e server come marcatore molecolare indipendente per la prognosi infausta di cancro gastrico. Così, l'iperespressione di 14-3-3ơ identifica i pazienti ad alto rischio ed è un bersaglio molecolare terapeutico per questo tumore.
Sfondo
cancro gastrico è una delle più comuni cause di morte per cancro in tutto il mondo [1] , soprattutto nei paesi dell'Asia orientale come la Cina, il Giappone [2]. Nel 2005, ci sono stati circa 0,4 milioni di nuovi casi e 0,3 milioni di morti per cancro gastrico in [3] la Cina. Nonostante i recenti progressi delle tecniche chirurgiche e cure mediche, il tasso di sopravvivenza a 5 anni complessiva di cancro gastrico in Cina rimane bassa a circa il 40%. Molti studi hanno dimostrato che più alterazioni genetiche, compresi i geni oncosoppressori, oncogeni, molecole di adesione cellulare, regolatori del ciclo cellulare, e fattori di crescita, sono responsabile per lo sviluppo e la progressione del cancro gastrico [4]. Gli studi hanno svelato molti geni espressi in modo aberrante cancro gastrico tra cui BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP
e STAT3
[8], SPARC
[9] e HER2
[10, 11], che rendono la valutazione del rischio dei pazienti con cancro gastrico in modo più accurato. Tuttavia, molecole promettenti che hanno un significato clinicopatologica /prognostico nel carcinoma gastrico rimangono sostanzialmente limitata. E 'necessario capire meglio i meccanismi molecolari coinvolti nel cancro gastrico e di individuare più preziosi marcatori prognostici in modo da migliorare non solo più povera prognosi, ma anche fornire nuovi bersagli terapeutici promettenti.
14-3-3 proteine ​​sono una famiglia di circa proteine ​​30 kD dimerica altamente conservata e ubiquitariamente espressa in tutti gli organismi eucarioti [12]. Ci sono sette geni strettamente correlati (β, γ, ε, η, ζ, O, t) a 14-3-3 proteine ​​della famiglia. Questi geni spesso formano eterodimeri o omodimeri e legarsi a più di 100 differenti ligandi di proteine ​​[13, 14]. Così, 14-3-3 proteine ​​sono coinvolte in diversi processi di segnalazione cellulare, tra cui la proliferazione delle cellule, controllo del ciclo cellulare, apoptosi e la trasformazione maligna [14, 15]. Tra i sette isotipi, 14-3-3ơ era originariamente caratterizzato come marcatore mammaria epitelio umano 1 (HME1) e identificato come un gene del tumore sopprimere [12, 16]. evidenze crescenti hanno mostrato che 14-3-3ơ era significativamente diminuito o perso a causa di silenziamento del gene tramite ipermetilazione in diversi tumori solidi [17-22]. Studi precedenti scoperto che diminuita espressione di 14-3-3ơ previsto un povero sopravvivenza in seno e il cancro nasofaringeo [23, 24]. Tuttavia, in contraddizione con il tumore ruolo soppressore di 14-3-3σ, sovraespressione di 14-3-3ơ in cellule di cancro al pancreas ha portato alla resistenza ai farmaci, la migrazione cellulare e l'invasione [25]. Inoltre, l'alta espressione di 14-3-3σ era un fattore prognostico indipendente per la scarsa sopravvivenza in pancreas e cancro colorettale [26, 27]. Così, il ruolo biologico della 14-3-3ơ nella tumorigenesi e nella progressione di vari tipi di tumori umani varia a seconda del tipo specifico di tumore. Qui, abbiamo selezionato i campioni di cancro gastrico con protocollo rigoroso di rilevare le dinamiche di espressione 14-3-3ơ e analizzare i loro significati clinico-patologici /prognostico
. Metodi
pazienti
Un totale di 216 pazienti affetti da cancro gastrico primarie dagli archivi del Dipartimento di Patologia nella Terza e la seconda Ospedale Affiliato di Sun Yat-Sen University (Guangzhou, Cina) sono stati inizialmente reclutati nel nostro studio. Tutti i pazienti sono stati sottoposti a resezione chirurgica iniziale dal marzo 2001 al gennaio 2006. Abbiamo ulteriormente i pazienti a screening mediante un rigido protocollo di criteri di ammissibilità come segue: microscopicamente confermato adenocarcinoma dello stomaco; senza malattie metastatiche; nessuna chemioterapia o radioterapia precedente storia; la ricezione di regime unificato come chemioterapia di prima linea dopo la resezione di tumori primari (come abbiamo unificato regime FOLFOX: fluorouracile, leucovorina e oxaliplatino), e nessun trattamento di radiazioni essere somministrato a nessuno dei pazienti; avendo oltre 5 anni di follow-up periodo. In ultima analisi, 52 pazienti con perdita di follow-up e 12 pazienti con deficit di caratteristiche cliniche sono stati esclusi da questo studio, che porta a 152 pazienti affetti da cancro gastrico sottoponendo ad ulteriori analisi cliniche e la sopravvivenza. Nel dettaglio, la coorte consisteva di 105 uomini e 47 donne con l'età media di 58,0 anni (range, 27 - 81 anni). 103 pazienti sono stati censiti come la morte durante i 5 anni di follow-up, tra cui 5 casi sono morti per complicazioni post-operatorie e 98 casi sono morti per la progressione del tumore. Dei pazienti complessivi, 66 pazienti sono stati assegnati in modo casuale dal computer (software SPSS 17.0) per il training set, e restanti 86 pazienti sono stati assegnati in modo casuale al set di test. variabili clinico-patologiche dei due coorti, come l'età, il sesso, stadio clinico, l'invasione del tumore, stadio nodo, e la differenziazione istologico, sono stati inclusi in questo studio. Tutti i tumori sono stati classificati e messo in scena in base ai nuovi orientamenti, sostenuto dall'Unione internazionale contro il cancro. Abbiamo ottenuto il consenso e l'approvazione dei pazienti precedenti dalla ricerca Comitato Etico dell'Istituto di Sun Yat-Sen Università per l'utilizzo di materiali clinici descritti nel presente studio. Costruzione
Tissue microarray
I microarray di tessuti (TMAs) sono stati costruiti come un metodo descritto in precedenza da Xie et al [28]. In breve, i blocchi di tessuto inclusi in paraffina e le corrispondenti diapositive istologico ematossilina eosina macchiato sono stati sovrapposti per il campionamento TMA. biopsie dei tessuti di base interessati (0,6 mm di diametro) sono stati perforati dalle aree rappresentative del tumore e dalla adiacente tessuti mucosa gastrica da blocchi di tessuto donatore individuale utilizzando un trapano (cilindri in triplicato dal tessuto carcinoma e una bombola normale adiacente tessuto mucosa gastrica). I cilindri di tessuto sono stati poi trasferiti in un blocco di paraffina destinatario in posizioni definite utilizzando uno strumento di tessuto-arraying (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Analisi immunoistochimica e valutazione
I vetrini sono stati TMAs deparaffinizzati in xilene , reidratato con alcool classificato, immerso in acqua ossigenata al 3% per 10 minuti per bloccare l'attività della perossidasi endogena, e l'antigene recuperate dalla pressione la cottura per 3 minuti in Tris /EDTA (pH = 8,0). I vetrini sono state incubate con l'anticorpo primario di 14-3-3σ (monoclonale; 1:50 Santa Cruz, SC-100638) per 1 ora a temperatura ambiente. Dopo essere incubate con l'anticorpo secondario per 30 minuti, i campioni sono state colorate con DAB (3, 3-diaminobenzidina). Infine, le sezioni sono state contrastate con ematossilina, disidratate e montate. Un controllo negativo è stato ottenuto sostituendo l'anticorpo primario con un normale IgG murine. Noti diapositive carcinoma colorettale immunoistochimica-positivi sono stati utilizzati come controlli positivi come riportato in precedenza [27].
I granuli marroni nel citoplasma delle 14-3-3σ sono state considerate come colorazione positiva. Abbiamo segnato l'intensità di colorazione come segue: 0, nessuna colorazione; 1+, colorazione lieve; 2+, colorazione moderata; 3+, colorazione intensa. L'area di colorazione è stata valutata come segue: 0, nessuna colorazione di cellule in qualsiasi campo microscopici; 1+, < 30% di tessuto tinto positivo; 2+, tra il 30% e il 60% colorato positivo; 3+, > 60% macchiato positivo. espressione 14-3-3σ è stata valutata mediante la valutazione combinata di intensità di colorazione e l'estensione. Il punteggio minimo quando sommati (intensità + estensione) è stata dello 0, e il massimo è 6. I criteri utilizzati in questo studio è stato ampiamente accettato in precedenza [24]. L'espressione di 14-3-3σ è stato valutato e ha segnato da due patologi indipendenti (Dott. F Tang e ZY Feng) che sono stati accecati ai dati clinico-patologici. L'accordo di questi due patologi sul punteggio IHC ha raggiunto al 84% (128 punteggi identici in totale 152 casi), suggerendo il nostro sistema di punteggio è stato molto solido e riproducibile. Se i risultati riportati dai due patologi sono stati coerenti, è stato selezionato il valore. Tuttavia, i disaccordi tra osservatori (circa il 6% dei casi totali) sono stati esaminati per la seconda volta, seguita da un giudizio conclusivo da entrambi i patologi.
Analisi Western Blot
Il cancro gastrico e associato normali tessuti della mucosa gastrica adiacenti erano a terra e lisate con tampone RIPA sul ghiaccio prima di essere sottoposto ad analisi Western blot. La concentrazione proteica è stata rilevata con il metodo di Bradford con BSA (Sigma-Aldrich) come standard. Uguali quantità di cellule ed estratto tissutale (40 mg) sono stati sottoposti a SDS-PAGE e trasferite su membrane di nitrocellulosa (Bio-Rad) per l'anticorpo blotting. La membrana è stata quindi bloccata e incubato con il mouse anti-gliceraldeide 3-fosfato deidrogenasi (GAPDH) anticorpo (Abmart, # M20006) e mouse anticorpo anti-14-3-3σ (Santa Cruz, SC-100638).
Selezione di punteggio cutoff per 14-3-3σ espressione "positivo"
l'analisi della curva ROC è stato sottoposto alla selezione del punteggio cutoff 14-3-3σ nel set di training, come descritto in precedenza [29]. In breve, la sensibilità e la specificità per il risultato in fase di studio ad ogni punteggio è stato tracciato per generare una curva ROC. Il punteggio localizzata più vicina al punto sia massima sensibilità e specificità, il punto (0.0, 1.0) sulla curva, è stato scelto come il cutoff punteggio conduce al maggior numero di tumori che sono state correttamente classificate come avente o non avere il risultato. Per facilitare l'analisi della curva ROC, sono stati dicotomizzate le caratteristiche di sopravvivenza:. Sopravvivenza (morte CONTRO altri (censurato, in vita o di morte per altre cause))
Follow up
Tutti i pazienti avevano record di follow-up per oltre 5 anni. Dopo il completamento della terapia, i pazienti sono stati osservati a intervalli di 3 mesi durante i primi 3 anni e ad intervalli di 6 mesi dopo. La sopravvivenza globale è stata definita come il tempo dalla diagnosi alla data del decesso o quando a ricognizione al termine ultimo se i pazienti erano ancora in vita. La sopravvivenza libera da progressione è stata definita come il tempo dalla diagnosi alla data di fallimento locale /metastasi a distanza o la data del decesso o quando censite alla data più recente.
statistica L'analisi
Per l'analisi di sopravvivenza, punto di divisione ottimale per 14- espressione 3-3σ è stata ottenuta dall'analisi ROC nel training set (n = 66). Per la convalida, i rapporti tra espressione 14-3-3σ, che è stato classificato da ROC punto di taglio analisi generati, e OS, PFS sono stati valutati nel set di test (n = 86) e pazienti complessivi (n = 152). Il test del chi-quadro o il test esatto di Fisher è stato impiegato per valutare la relazione tra espressione 14-3-3σ e variabili clinico-patologiche. Il multivariata di Cox rischi proporzionali di modello è stato utilizzato per stimare i hazard ratio e gli intervalli di confidenza al 95% per l'esito del paziente. Le relazioni tra l'espressione 14-3-3σ e OS, PFS sono state determinate mediante analisi di Kaplan-Meier. I test log-rank sono state eseguite per valutare la differenza di probabilità di sopravvivenza tra i sottogruppi di pazienti. Tutti i valori p
citati erano a due code e p
< 0.05 è stato considerato statisticamente significativo. L'analisi statistica è stata effettuata utilizzando SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc, Chicago, IL).
Risultati
espressione 14-3-3σ nel cancro gastrico e normali tessuti della mucosa gastrica
14-3-3σ è stato rilevato nel citoplasma e sovraespresso nel cancro gastrico (Figura 1A e 1A '), considerando che normali mucose gastriche accoppiati mostrato espressione quasi negativo (Figura 1B e 1B'). Coerentemente con questo risultato, analisi Western Blot ha rivelato una scoperta simile a cancro gastrico e normali tessuti della mucosa gastrica adiacenti (Figura 1C). Figura 1 14-3-3σ espressione nel tumore gastrico primario umano e normale adiacente tessuto della mucosa gastrica. (A) 14-3-3σ è stata rilevata nel citoplasma e sovraespresso nel tessuto del cancro gastrico (100 ×). (B) non neoplastica dei tessuti della mucosa gastrica Adiacente ha mostrato espressione quasi negativo di 14-3-3σ (100 ×). (A '), (B') dimostrarono l'alto ingrandimento (400x) dalla zona della scatola in (A) e (B), rispettivamente. (C) Analisi Western Blot di espressione 14-3-3σ in rappresentanza primaria tessuto gastrico cancro (T) e normale tessuti adiacenti della mucosa (N). carico uguale di proteine ​​è stata determinata da GAPDH.
per valutare ulteriormente l'analisi di sopravvivenza e di evitare i problemi di selezione multipla punto di divisione, analisi della curva ROC è stata utilizzata per determinare il punteggio di taglio per l'espressione 14-3-3σ. Come mostrato nella Figura 2A e 2B, il punteggio cutoff 14-3-3σ per OS e PFS nel set di formazione è stato 3.25 (p
< 0,001) e 3,35, rispettivamente (p = 0,003
). Abbiamo quindi scelto un punteggio 14-3-3σ espressione di 3 (> 3 VS. ≤ 3) come il punto di taglio uniforme per l'analisi di sopravvivenza nel set di test. Figura 2 Ricevitore operativo analisi caratteristici (ROC) le curve di 14-3-3σ punteggio cutoff nel training set. (A) il punto di taglio 14-3-3σ per la sopravvivenza globale nel training set. (B) punto di cutoff 14-3-3σ per la sopravvivenza libera da progressione nel training set. Ad ogni punteggio immunoistochimica, la sensibilità e la specificità per il risultato in fase di studio è stata tracciata, generando così una curva ROC. punteggio cutoff 14-3-3σ per la sopravvivenza globale, la sopravvivenza libera da progressione è stato 3,25 e 3,35, rispettivamente.
14-3-3σ espressione e caratteristiche cliniche
Le caratteristiche cliniche di questi due gruppi di pazienti, tra cui l'età, il sesso , stadio clinico, l'invasione del tumore, stadio nodo, differenziazione istologia, espressione 14-3-3σ, sono stati riassunti nella Tabella 1. ROC-derivato 14-3-3σ punteggio di taglio del 3 nella formazione impostata correttamente segregato il test impostato in alto ( 44/86, 51,2%) e bassa (42/86, 48,8%) sottogruppi di espressione 14-3-3σ. Alta espressione di 14-3-3σ è stato trovato soprattutto nelle fasi più avanzate del tumore (77/107 in stadio III + IV VS. 12/45 in stadio I + II, p
= 0.004). Inoltre, l'analisi di correlazione ha dimostrato che un'alta espressione 14-3-3σ è stata correlata con stadio clinico (p
< 0,001 per entrambi set) e l'invasione tumorale (p
< 0,001 per il training set e p =
0,005 per il set di test) in entrambi i gruppi. 14-3-3σ associato all'età dei pazienti nel set di test (p
= 0.01), ma non nel training set. Non siamo riusciti a rilevare una relazione tra 14-3-3σ con altre caratteristiche del paziente, tra cui sesso, stadio nodo e istologia differentiation.Table 1 Associazione di espressione 14-3-3σ con le caratteristiche del paziente nel cancro gastrico primaria
variabile
Tutti i casi
training set (n = 66)
Testing set (n = 86)


alta
espressione
Low
espressione
p
un
alta
espressione
Low
espressione
p
un
Età (anni)
≥ 58.00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010
< 58.00
69
20 (29,0%) Pagina 8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
genere
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
fase clinica
I + II
45 Pagina 6 (13,3%)
12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35.5 %)
21 (19,6%)
invasione tumorale
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Nodo fase
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
Istologia-differenziazione
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
un test x2
b età mediana
espressione 14-3-3σ e analisi di sopravvivenza: analisi di sopravvivenza univariata
Come mostrato in figura 3A e 3C, analisi di Kaplan-Meier ha mostrato che elevati espressione 14-3-3σ previsto fortemente un sistema operativo inferiore nel set di test (p
< 0,001) e pazienti complessivi (p
< 0,001). Inoltre, l'espressione 14-3-3σ era anche un potente fattore prognostico per PFS nei test set (p
< 0,001, figura 3B) e pazienti complessivi (p
< 0,001, Figura 3D). Considerando l'esito sfavorevole nel carcinoma gastrico in fase avanzata, un'ulteriore analisi è stata effettuata per quanto riguarda 14-3-3σ espressione in sottogruppi di pazienti affetti da cancro gastrico in stadio III e IV. I risultati hanno dimostrato che, rispetto alle basse espressione 14-3-3σ, alta espressione di 14-3-3σ ha mostrato una tendenza significativa verso peggio OS e PFS nei pazienti con cancro gastrico di stadio III (p = 0,001
per OS e p
= 0.017 per la sopravvivenza libera da progressione, la Figura 4A e 4B) e stadio IV (p
< 0,001 per OS e p = 0.001 per
PFS, Figura 4C e 4D). Risultati in pazienti complessivi erano simili a quelle che si trovano nel set di test (Figura 4E-H). Figura 3 Kaplan-Meier analisi di sopravvivenza di espressione 14-3-3σ nel set di test e pazienti complessivi. (A) è superiore espressione 14-3-3σ era strettamente correlata con scarsa sopravvivenza globale e (B) la sopravvivenza libera da progressione nel set di test. (C) I pazienti con più alta espressione 14-3-3σ anche acquisito una sopravvivenza globale inferiore e (D) la sopravvivenza libera da progressione nei pazienti complessivi. Nel set di test e pazienti complessivi, la durata mediana della sopravvivenza globale per i pazienti con bassa e alta espressione di 14-3-3σ era 73,0 VS. 17.0 mesi (p
< 0,001) e 73,0 VS. 14.0 mesi (p
< 0,001) (log-rank test), rispettivamente,
figura 4 Kaplan-Meier analisi di sopravvivenza di espressione 14-3-3σ in sottogruppi di pazienti affetti da cancro gastrico in stadio III e IV.. (A) Probabilità di sopravvivenza globale e (B) la sopravvivenza libera da progressione di pazienti con stadio III cancro gastrico nel set di test: bassa espressione, n = 17; elevata espressione, n = 26; (C) Probabilità di sopravvivenza globale e (D) la sopravvivenza libera da progressione di stadio IV pazienti con cancro gastrico nel set di test: bassa espressione, n = 5; alta espressione, n = 11. (E) Probabilità di sopravvivenza globale e (F) sopravvivenza libera da progressione di pazienti con stadio III cancro gastrico nei pazienti complessivi: bassa espressione, n = 22; elevata espressione, n = 55; (G) Probabilità di sopravvivenza globale e (H) sopravvivenza libera da progressione di stadio IV pazienti con cancro gastrico nei pazienti complessivi: bassa espressione, n = 9; alta espressione, n = 21.
multivariata di Cox analisi di regressione
Per evitare l'influenza causata da analisi univariata, l'espressione di 14-3-3σ così come altri parametri è stata esaminata in analisi multivariata di Cox (Tabella 2 e Tabella 3). Nel set di test, 14-3-3σ è stato infatti trovato ad essere un significativo fattore indipendente di prognosi per il povero OS (hazard ratio, 4.527; 95% CI, 2,274-9,012; p
< 0,001; tabella 2) e PFS (hazard ratio, 3.582; 95% CI, 1,717-7,475; p = 0,001
; Tabella 2). Risultati simili sono stati osservati anche in pazienti complessivi (hazard ratio, 5.161; 95% CI, 2,990-8,909; p
< 0,001 per OS e hazard ratio, 4.416; 95% CI, 2,482-7,856; p <
; 0.001 per PFS; Tabella 3). Di altri parametri, stadio clinico è risultato essere un fattore prognostico indipendente per la sopravvivenza del paziente nel set di test, ma non in generale patients.Table 2 Risultati su multivariata di Cox analisi proporzionale di pericoli in set di testing
variabile
Per la morte
per la sopravvivenza libera da progressione

Hazard ratio

95% intervallo di confidenza

p
hazard ratio
95% intervallo di confidenza

p

Age < 58.00
anni (contro ≥ 58 anni)
1.101
0,637 a 1.902
0.731
1.056
0,577-1,936
0,859
Sesso Maschio
(VS . femmina)
0,772
0,408-1,461
0,427
1.049
0,525-2,094
0,892
clinica fase
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156-9,949
0.026
5.220
1,529-17,823
0,008
invasione tumorale
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1.066
0,320-3,553
0,917
0.730
0,206-2,585
0,626
nodale fase N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251 0,735

0,373-1,448
0,373
Differenziazione
basso (VS. Alta)
0.862
0,437-1,701
0,668 0,936

0,442-1,982
0,863
14-3-3σ
Positivo (VS. Negative)
4.527
2,274-9,012
0.000
3.582
1.717 a 7.475
0,001
Tabella 3 Risultati del multivariata di Cox analisi proporzionali-rischi nei pazienti complessivi
variabile
Per la morte
per la sopravvivenza libera da progressione

Hazard ratio
95% intervallo di confidenza

p
hazard ratio
95% intervallo di confidenza

p
Age < 58.00
anni (contro ≥ 58 anni)
1.046
0,701 a 1.562
0,825
1.036
0654-1,642
0.880
Sesso Maschio
(VS . femmina)
0,713
0.474 to1.073
0,105 0,733

0,409-1,278
0,165
clinica fase
IV + III (VS. II + I)
0,988
0.500 to1.952
0.972
1.355
0,558-3,121
0,476
invasione tumorale
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2.175
0,896-5,278
0,086
1.432
0,547-3,747
0,465
nodale fase N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0.808
1.243
0,751-2,059
0,397
Differenziazione
Basso (VS. alto)
0,765
0.470 to1.243
0,279 0,810

0.478 to1.375
0,463
14-3-3σ
positivo (VS. negative)
5.161
2,990-8,909
0.000
4.416
2,482-7,856
0.000
Discussione
cancro gastrico è uno dei tumori più comuni in tutto il mondo e pone una delle salute pubblica più grave problema [1]. Ricorrenza e le metastasi sono ancora i principali problemi per la scarsa sopravvivenza dei pazienti con carcinoma gastrico avanzato [30]. Anche se gli studi precedenti hanno trovato che molti geni espressi aberranti nel tumore gastrico può aiutare a classificare il rischio di outcome del paziente [5-11], marcatori molecolari più innovative in grado di identificare la progressione del tumore e prevedere la prognosi sono individualmente ancora urgente bisogno. Le 14-3-3 famiglia hanno guadagnato molta attenzione negli ultimi anni a causa del loro coinvolgimento nei tumori con il regolamento di diversi processi cellulari [14, 15]. Tra i sette isoforme, 14-3-3σ è up-regolato da p53 in risposta al danno al DNA, e sequestra l'essenziale mitotico complesso di inizio, cdc2-ciclina B1, di entrare nel nucleo, impedendo così l'avvio di mitosi [31]. Di conseguenza, 14-3-3σ induce arresto G2 e permette la riparazione danni al DNA. Così, diverso da altri membri della famiglia, 14-3-3σ è definito come un regolatore negativo di punti di controllo del ciclo cellulare e un potenziale proteina oncosoppressore [12]. Tuttavia, il ruolo biologico della 14-3-3ơ nella tumorigenesi e nella progressione di vari tipi di tumori umani rimane controverso. Qui, per rivelare ulteriormente la funzione biologica di 14-3-3ơ nel carcinoma gastrico, abbiamo studiato le dinamiche di espressione 14-3-3ơ e analizzato i loro significati clinicopatologici /prognostici in 152 campioni tumorali.
In questo studio, di sviluppare un obiettivo punto di taglio 14-3-3σ per l'analisi di sopravvivenza, abbiamo usato l'analisi della curva ROC per generare un punteggio cutoff nel training set. espressione 14-3-3σ, che è stato classificato come alto e basso livello dal punto di taglio ROC-derivato, è stato principalmente risultato essere più elevato nelle fasi tumorali più avanzato (stadio III e IV), indicando che potrebbe essere 14-3-3σ coinvolti nella progressione del cancro gastrico. L'analisi di correlazione ulteriormente dimostrato che un'alta espressione 14-3-3σ è stata associata con stadio clinico e l'invasione tumorale nel carcinoma gastrico (Tabella 1). Inoltre, nel set di test e pazienti complessivi, alta espressione 14-3-3ơ previsto un sistema operativo significativo e PFS svantaggio su basso sottogruppo espressione 14-3-3ơ (Figura 3). È importante sottolineare che, peggio impatto prognostico di maggiore espressione 14-3-3σ è stata dimostrata in pazienti con stadio III e IV tumori (Figura 4), indicando che 14-3-3ơ potrebbe essere un fattore di romanzo per la definizione del rischio nel cancro gastrico. Inoltre, analisi multivariate nel set di test e pazienti complessivi rivelato che l'espressione 14-3-3ơ era un parametro prognostico indipendente. Nel loro insieme, i nostri risultati di questo studio hanno fornito la prova che ha elevato espressione di 14-3-3σ nel carcinoma gastrico potrebbe facilitare una maggiore fenotipo maligno e peggio di prognosi di questo tumore.
Per quanto riguarda l'impatto prognostico di 14-3-3σ

• Relazione tra ormoni intestinali e l'omeostasi del glucosio dopo bariatrica rapporto surgery
• P27Kip1, regolato da glicogeno sintasi chinasi-3β, si traduce in differenziazione HMBA-indotta delle cellule di cancro gastrico umano