regulación al alza la expresión aberrante de 14-3-3o sirve como un biomarcador pronóstico inferior para el cáncer gástrico

upregulation aberrante de expresión 14-3-3o sirve como un biomarcador pronóstico inferior para el cáncer gástrico
Abstract
Antecedentes
14-3-3o es una intracelular, proteína de unión a fosfoserina y propuesto estar involucrado en la tumorigénesis. Sin embargo, la dinámica de expresión de 14-3-3o y su significado clínico-patológica /pronóstico en tumores humanos son objeto de controversia.
Métodos Francia El método de inmunohistoquímica (IHC) y Western blot se utilizaron para examinar la expresión de la proteína de 14 -3-3ơ en el cáncer gástrico y los tejidos adyacentes normales emparejados mucosa gástrica. Recibir el análisis característico (ROC) curva de funcionamiento se empleó para determinar un punto de corte para la expresión 14-3-3o en un conjunto de entrenamiento (n = 66). Para la validación, la puntuación de corte derivado de la República de China se sometió a análisis de la asociación de la expresión 14-3-3o con el resultado del paciente y las características clínicas de un conjunto de pruebas (n = 86) y pacientes en general (n = 152).
resultados
la frecuencia y la expresión de los niveles de expresión de 14-3-3o fueron significativamente más altas en el cáncer gástrico que en los tejidos de la mucosa gástrica normal. El análisis de correlación demostró que la alta expresión de 14-3-3o en el cáncer gástrico fue significativamente correlacionado con el estadio clínico y la invasión tumoral. Por otra parte, en el conjunto de las pruebas y los pacientes en general, el análisis de Kaplan-Meier mostró que la expresión 14-3-3o elevada predice una peor supervivencia global (SG) y la supervivencia libre de progresión (SLP). Es importante destacar que la alta expresión 14-3-3o también se asoció con el tiempo de supervivencia acortada en estadio III y estadio IV pacientes con cáncer gástrico. El análisis multifactorial reveló que la expresión 14-3-3o era un parámetro pronóstico independiente en el cáncer gástrico.
Conclusiones
Estos resultados proporcionan evidencia de que la alta expresión de 14-3-3o puede ser importante en la progresión tumoral y servidores como una marcador molecular independiente de mal pronóstico del cáncer gástrico. De este modo, la sobreexpresión de 14-3-3o identifica a los pacientes con alto riesgo y es una diana molecular terapéutica para este tumor.
Antecedentes
El cáncer gástrico es una de las causas más comunes de muerte relacionada con el cáncer en todo el mundo [1] , especialmente en los países del Este de Asia, como china, Japón [2]. En 2005, había aproximadamente 0,4 millones de casos nuevos y 0,3 millones de muertes por cáncer gástrico en China [3]. A pesar de los recientes avances en las técnicas quirúrgicas y tratamientos médicos, la tasa de supervivencia global a 5 años de cáncer gástrico en China sigue siendo baja a alrededor de 40%. Muchos estudios han demostrado que múltiples alteraciones genéticas, incluyendo los genes supresores de tumor, oncogenes, moléculas de adhesión celular, los reguladores del ciclo celular, y factores de crecimiento, son responsables de el desarrollo y progresión del cáncer gástrico [4]. Los estudios han desentrañado muchos genes que se expresan de forma aberrante en el cáncer gástrico incluyendo IMC1
[5], la COX-2
[6], HER3
[7], RKIP
y STAT3
[8], SPARC
[9] y HER2
[10, 11], que hacen la evaluación del riesgo de los pacientes con cáncer gástrico con mayor precisión. Sin embargo, las moléculas prometedoras que tienen un significado clínico-patológica /pronóstico en el cáncer gástrico permanecen sustancialmente limitada. Es necesario comprender mejor los mecanismos moleculares implicados en el cáncer gástrico y para identificar marcadores de pronóstico más valiosos con el fin de no sólo mejorar el pronóstico más pobre, sino también proporcionar nuevas dianas terapéuticas prometedoras.
14-3-3 proteínas son una familia de alrededor 30 kD dimérica altamente conservada-proteínas y ubicuamente expresado en todos los organismos eucariotas [12]. Hay siete genes estrechamente relacionados (β, γ, ε, η, ζ, O, t) en 14-3-3 proteínas de la familia. Estos genes a menudo se forman heterodímeros u homodímeros y se unen a más de 100 diferentes ligandos de proteínas [13, 14]. Por lo tanto, 14-3-3 proteínas están implicadas en muchos procesos diferentes de señalización celular que incluyen la proliferación celular, el control del ciclo celular, la apoptosis y transformación maligna [14, 15]. Entre los siete isotipos, 14-3-3o se caracterizó inicialmente como un marcador de epitelio mamario humano 1 (hme1) e identificó como un gen de supresión tumoral [12, 16]. evidencias crecientes mostraron que 14-3-3o se redujo significativamente o perderse debido a silenciamiento del gen a través de hipermetilación en varios tumores sólidos [17-22]. Los informes anteriores han encontrado que la disminución de la expresión de 14-3-3o predijeron una pobre supervivencia en cáncer de mama y el cáncer nasofaríngeo [23, 24]. Sin embargo, contradictorio con el papel tumor supresor de 14-3-3σ, la sobreexpresión de 14-3-3o en células de cáncer pancreático condujeron a la resistencia a fármacos, la migración celular y la invasión [25]. Por otra parte, la alta expresión de 14-3-3σ fue un factor pronóstico independiente de supervivencia de los pobres en el páncreas y cáncer colorrectal [26, 27]. Por lo tanto, el papel biológico de 14-3-3o en la tumorigénesis y la progresión de diversos tipos de cánceres humanos varía dependiendo del tipo de tumor específico. A continuación, se seleccionaron las muestras de cáncer gástrico con un estricto protocolo para la detección dinámica de la expresión 14-3-3o y analizar sus significados clinicopatológicas /pronóstico.
Métodos Los pacientes

Un total de 216 pacientes con cáncer gástrico primario de los archivos del Departamento de Patología en la Tercera y Segunda Afiliado del hospital de Sun Yat-Sen Universidad (Guangzhou, china) fueron reclutados inicialmente en nuestro estudio. Todos los pacientes fueron sometidos a resección quirúrgica inicial a partir de marzo de 2001 a enero de 2006. Nosotros, los pacientes examinados aún más el uso de un estricto protocolo de criterios de elegibilidad de la siguiente manera: al microscopio confirmó adenocarcinoma del estómago; sin ningún tipo de enfermedades metastásicas; sin quimioterapia o radioterapia historia previa; recibir régimen unificado como quimioterapia de primera línea después de la resección de tumores primarios (unificamos como régimen FOLFOX: fluorouracilo, leucovorina y oxaliplatino), y la ausencia de tratamiento con radiación que se administró a ninguno de los pacientes; que tiene más de 5 años de seguimiento. En última instancia, 52 pacientes con pérdida de seguimiento y 12 pacientes con deficiencia en las características clínicas fueron excluidos de este estudio, lo que lleva a 152 pacientes con cáncer gástrico someter a un mayor análisis clínicos y la supervivencia. En detalle, la cohorte constaba de 105 hombres y 47 mujeres con edad media de 58,0 años (rango 27 - 81 años). 103 pacientes fueron censados ​​como la muerte durante los 5 años de tiempo de seguimiento, incluyendo 5 casos murieron a causa de complicaciones postoperatorias y 98 casos murieron a causa de la progresión del tumor. De los pacientes en general, 66 pacientes fueron asignados al azar por ordenador (software SPSS 17.0) para el conjunto de entrenamiento, y restantes 86 pacientes fueron asignados al azar para el conjunto de pruebas. clinicopathological variables de las dos cohortes, como la edad, sexo, estadio clínico, invasión tumoral, etapa de nodos, y la diferenciación de la histología, se incluyeron en este estudio. Todos los tumores se clasificaron y organizaron de acuerdo a las directrices revisadas que preconiza la Unión Internacional contra el Cáncer. Se obtuvo el consentimiento de los pacientes anteriores y la aprobación del Comité de Ética de Investigación Instituto de la Universidad Sun Yat-Sen por el uso de materiales clínicos descritos en el presente estudio.
Construcción de tejido microarrays
Los microarrays de tejidos (TMA) fueron construidos como un método descrito previamente por Xie et al [28]. En pocas palabras, los bloques de tejido incluido en parafina y las correspondientes diapositivas hematoxilina histológico y eosina se cubrieron para el muestreo de TMA. biopsias de tejido de núcleo interesadas (0,6 mm de diámetro) se perforaron a partir de las áreas representativas del tumor y de tejido de mucosa gástrica adyacente a partir de bloques de tejido donante individual utilizando un trépano (cilindros por triplicado a partir de tejido de carcinoma y un cilindro de tejido de la mucosa gástrica adyacente normal). Los cilindros de tejido se transfirieron a continuación en un bloque de parafina receptor en las posiciones definidas mediante el uso de un instrumento de poner en orden tejidos (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, EE.UU.).
Análisis inmunohistoquímico y evaluación
las diapositivas TMA se deparaffinized en xileno , rehidrata a través de alcohol graduado, sumergido en peróxido de hidrógeno al 3% durante 10 min para bloquear la actividad peroxidasa endógena, y el antígeno recuperado por presión para cocinar 3 min en Tris /EDTA (pH = 8,0). A continuación, los portaobjetos se incubaron con el anticuerpo primario de 14-3-3σ (monoclonal de ratón; 1:50; Santa Cruz, SC-100638) durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de haber sido incubadas con el anticuerpo secundario durante 30 min, las muestras se tiñeron con DAB (3, 3-diaminobencidina). Por último, las secciones se contratiñeron con hematoxilina, se deshidrataron y se montaron. Un control negativo se obtuvo mediante la sustitución del anticuerpo primario con un IgG murino normal. Conocidos diapositivas de carcinoma colorrectal inmunotinción positiva se utilizaron como controles positivos como se informó anteriormente [27]. México La gránulos de color marrón en el citoplasma de 14-3-3σ fueron considerados como una tinción positiva. Marcamos la intensidad de la tinción de la siguiente manera: 0, sin manchas; 1+, tinción leve; 2 +, tinción moderada; 3+, tinción intensa. El área de la tinción se evaluó de la siguiente manera: 0, sin tinción de las células en los campos microscópicos; 1+, < 30% del tejido manchado positivo; 2+, entre 30% y 60% teñido positivo; 3+, > 60% teñido positivo. expresión 14-3-3σ se evaluó mediante la evaluación combinada de intensidad de la tinción y la extensión. La puntuación mínima cuando se suman (intensidad + extensión) fue de 0, y la máxima de 6. Los criterios utilizados en este estudio ha sido ampliamente aceptado anteriormente [24]. La expresión de 14-3-3σ fue evaluada y calificada por dos patólogos independientes (Dres. F Tang y ZY Feng) que fueron cegados a los datos clínico-patológicos. El acuerdo de estos dos patólogos en la puntuación de IHC alcanzó al 84% (128 puntuaciones idénticas en el total de 152 casos), lo que sugiere nuestro sistema de puntuación era muy sólida y reproducible. Si los resultados reportados por los dos patólogos fueron consistentes, se seleccionó el valor. Sin embargo, los desacuerdos interobservador (aproximadamente el 6% del total de casos) fueron revisados ​​por segunda vez, seguido por una sentencia definitiva por las dos patólogos.
Western blot Francia El cáncer gástrico y emparejaron los tejidos adyacentes normales de la mucosa gástrica se molieron y se lisaron con el tampón RIPA en hielo antes de ser sometido a análisis de transferencia Western. La concentración de proteína se detectó por el método de Bradford con BSA (Sigma-Aldrich) como el estándar. Cantidades iguales de células y extracto de tejido (40 g) se sometieron a SDS-PAGE y se transfirieron a membrana de nitrocelulosa (Bio-Rad) para la transferencia de anticuerpos. A continuación, la membrana se bloqueó y se incubaron con anti-ratón de gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) de anticuerpos (Abmart, # M20006) y el anticuerpo anti-14-3-3σ ratón (Santa Cruz, SC-100 638). La selección de
puntuación de corte para 14-3-3σ expresión "positivo" Francia el análisis de la curva ROC fue sometido a la selección del punto de corte 14-3-3σ en el conjunto de entrenamiento, como se describe anteriormente [29]. En pocas palabras, la sensibilidad y especificidad para el resultado que se estudian en cada puntuación se trazó para generar una curva ROC. La puntuación localizada más próxima al punto en tanto la máxima sensibilidad y especificidad, el punto (0.0, 1.0) en la curva, fue seleccionada como la puntuación de corte que lleva a un mayor número de tumores que fueron clasificados correctamente como tener o no tener el resultado. Para facilitar el análisis de la curva ROC, se clasificó según las características de supervivencia:. Supervivencia (frente a la muerte a otros (censurado, vivo o muerte por otras causas))
Seguimiento
Todos los pacientes tenían registros de seguimiento de más de 5 años. Después de la finalización del tratamiento, los pacientes fueron observados a intervalos de 3 meses durante los primeros 3 años y cada 6 meses a partir de entonces. La supervivencia global se define como el tiempo desde el diagnóstico hasta la fecha de la muerte o cuando se censaron en la fecha límite si los pacientes seguían con vida. La supervivencia libre de progresión se definió como el tiempo desde el diagnóstico hasta la fecha de fallo local /metástasis a distancia o la fecha de la muerte o cuando se censaron en la fecha más reciente.
Análisis estadístico Para el análisis de supervivencia
, punto de corte óptimo para el 14- 3-3σ expresión se obtuvo mediante análisis ROC en el conjunto de entrenamiento (n = 66). Para la validación, se evaluaron las relaciones entre la expresión 14-3-3σ, la cual fue clasificada por el análisis ROC-generada punto de corte, y la SG, SLP en el conjunto de pruebas (n = 86) y pacientes en general (n = 152). Se utilizó la prueba de chi-cuadrado o la prueba exacta de Fisher para evaluar la relación entre la expresión 14-3-3σ y variables clínico. La Cox de riesgos proporcionales multivariado se utilizó para estimar las razones de riesgo y los intervalos de confianza del 95% para los resultados del paciente. Las relaciones entre la expresión 14-3-3σ y SG, SLP se determinaron mediante análisis de Kaplan-Meier. Los log-rank pruebas se llevaron a cabo para valorar la diferencia en las probabilidades de supervivencia entre los subgrupos de pacientes. Todos los valores de p
citados fueron de dos caras y p Hotel < 0,05 fue considerado estadísticamente significativo. El análisis estadístico se realizó con el programa SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).
: Resultados de la expresión 14-3-3σ en el cáncer gástrico y tejidos de las mucosas gástricas normales
se detectó 14-3-3σ en el citoplasma y se sobreexpresa en el cáncer gástrico (Figura 1A y 1A '), mientras que los tejidos de la mucosa gástrica pareados normales mostraron una expresión casi negativo (Figura 1B y 1B'). De acuerdo con este resultado, el análisis de transferencia Western reveló un hallazgo similar en el cáncer gástrico y los tejidos normales adyacentes de la mucosa gástrica (Figura 1C). Figura 1 14-3-3σ expresión en el cáncer gástrico primario humano y el tejido de la mucosa gástrica normal adyacente. (A) 14-3-3σ se detectó en el citoplasma y sobreexpresa en el tejido de cáncer gástrico (100 ×). (B) tejido de la mucosa gástrica no neoplásica Adyacente mostró expresión casi negativo de 14-3-3σ (100 ×). (A '), (B') demostraron el aumento mayor (400 veces) de la zona de la caja en (A) y (B), respectivamente. (C) Análisis de transferencia Western de la expresión en el tejido 14-3-3σ representante principal cáncer gástrico (T) y normal tejido de la mucosa adyacente (N). La igualdad de carga de proteínas fue determinada por GAPDH.
A fin de evaluar el análisis de supervivencia y evitar los problemas de selección múltiple punto de corte, se empleó el análisis de la curva ROC para determinar la puntuación de corte para la expresión 14-3-3σ. Como se muestra en la figura 2A y 2B, la puntuación de corte 14-3-3σ para el sistema operativo y la SSP en el conjunto de entrenamiento fue de 3,25 (p Hotel < 0,001) y 3,35 (p = 0,003
), respectivamente. por lo tanto seleccionamos una puntuación 14-3-3σ expresión de 3 (> 3 vs ≤ 3) como el punto de corte uniforme para el análisis de supervivencia en el conjunto de pruebas. Figura 2 Análisis de funcionamiento del receptor (ROC) característicos de las curvas 14-3-3σ punto de corte en el conjunto de entrenamiento. (A) punto de corte 14-3-3σ para la supervivencia global en el conjunto de entrenamiento. (B) punto de corte 14-3-3σ para la supervivencia libre de progresión en el conjunto de entrenamiento. En cada puntuación de inmunohistoquímica, la sensibilidad y especificidad para el resultado que se estudian se representó, generando así una curva ROC. 14-3-3σ puntuación de corte para la supervivencia global, la supervivencia libre de progresión fue de 3,25 y 3,35, respectivamente.
14-3-3σ expresión y las características clínicas
Las características clínicas de estos dos grupos de pacientes, incluyendo la edad, el género , estadio clínico, invasión tumoral, etapa de nodos, la diferenciación histología, expresión 14-3-3σ, se resume en la Tabla 1. ROC-deriva puntuación de corte 14-3-3σ de 3 en el conjunto de entrenamiento con éxito segregado las pruebas detalladas en alto ( 44/86, 51,2%) y baja (42/86, 48,8%) 14-3-3σ subgrupos de expresión. Alta expresión de 14-3-3σ se encuentra principalmente en las etapas más avanzadas del tumor (77/107 en la etapa III + IV VS. 12/45 en la etapa I + II, p = 0,004
). Por otra parte, el análisis de correlación demostró que la alta expresión 14-3-3σ se correlacionó con el estadio clínico (p Hotel < 0,001 para ambos conjuntos) y la invasión tumoral (p Hotel < 0,001 para conjunto de entrenamiento y p =
0,005 para el conjunto de prueba) en ambos conjuntos. 14-3-3σ asociada con la edad de los pacientes en el conjunto de pruebas (p = 0,01
) pero no en el conjunto de entrenamiento. No fue posible detectar ninguna relación entre 14-3-3σ con otras características del paciente, incluyendo el género, etapa de nodos, y la histología differentiation.Table Asociación 1 de expresión 14-3-3σ con las características del paciente en el cáncer gástrico primario
variable
Todos los casos
conjunto de entrenamiento (n = 66) guía empresas Testing conjunto (n = 86) guía empresas

alto
expresión
bajo
expresión
p
un
alto
expresión
bajo
expresión
p
un
Edad (años)
≥ 58.00 b
83
25 (30,1%) página 13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%): perfil 16 (19,3%) 0,010
Hotel < 58.00
69
20 (29,0%) página 8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Género
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%) página 13 (27,7%)
estadio clínico I + II

45 página 6 (13,3%) página 12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%) página 9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
invasión tumoral
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Nodo etapa
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%) página 12 (23,5%)
Histología-diferenciación
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
una prueba x2
b edad mediana
expresión 14-3-3σ y análisis de supervivencia: el análisis de supervivencia univariante
Como se muestra en la Figura 3A y 3C, el análisis de Kaplan-Meier mostró que la expresión elevada 14-3-3σ predijo firmemente un sistema operativo inferior en el conjunto de pruebas (p Hotel < 0,001) y los pacientes global (p Restaurant < 0,001). Por otra parte, la expresión 14-3-3σ también fue un factor pronóstico de gran alcance para la SSP en el conjunto de pruebas (p Hotel < 0,001, Figura 3B) y los pacientes global (p Hotel < 0,001, Figura 3D). Teniendo en cuenta el peor pronóstico en el cáncer gástrico en etapa tardía, posterior análisis se realizó con respecto a 14-3-3σ expresión en subconjuntos de pacientes con cáncer gástrico en estadio III y IV. Los resultados demostraron que, en comparación con una baja expresión 14-3-3σ, la alta expresión de 14-3-3σ mostró una tendencia significativa hacia peor SG y SLP en pacientes con cáncer gástrico de fase III (p = 0,001
para OS y p
= 0,017 para la SSP, la Figura 4A y 4B) y la etapa IV (p Hotel < 0,001 para el sistema operativo y p = 0,001 para
PFS, Figura 4C y 4D). Los resultados en los pacientes en general fueron similares a los encontrados en el conjunto de pruebas (Figura 4E-H). Figura 3 el análisis de supervivencia de Kaplan-Meier de expresión 14-3-3σ en el conjunto de las pruebas y los pacientes en general. (A) De la expresión 14-3-3σ estaba estrechamente correlacionado con una pobre supervivencia global y (B) la supervivencia libre de progresión en el conjunto de pruebas. (C) Los pacientes con mayor expresión 14-3-3σ también adquirieron una supervivencia global inferior y (D) la supervivencia libre de progresión en pacientes en general. En el conjunto de pruebas y los pacientes en general, la duración mediana de la supervivencia global de los pacientes con baja y alta expresión de 14-3-3σ fue 73,0 VS. 17,0 meses (p Restaurant < 0,001) y 73,0 VS. 14,0 meses (p Hotel < 0,001) (log-rank test), respectivamente
la figura 4 el análisis de supervivencia de Kaplan-Meier de expresión 14-3-3σ en subgrupos de pacientes con cáncer gástrico en estadio III y IV.. (A) Probabilidad de supervivencia global y (B) supervivencia libre de progresión de los pacientes con cáncer de estómago en estadio III en el conjunto de pruebas: una baja expresión, n = 17; alta expresión, n = 26; (C) La probabilidad de supervivencia global y (D) supervivencia libre de progresión de los pacientes en estadio IV con cáncer gástrico en el conjunto de pruebas: una baja expresión, n = 5; alta expresión, n = 11. (E) Probabilidad de supervivencia global y (F) la supervivencia libre de progresión de pacientes con cáncer de estómago en estadio III en los pacientes en general: una baja expresión, n = 22; alta expresión, n = 55; (G) Probabilidad de supervivencia global y (H) supervivencia libre de progresión de los pacientes en estadio IV con cáncer gástrico en los pacientes en general: una baja expresión, n = 9; alta expresión, n = 21.
multivariante de Cox análisis de regresión
Para evitar la influencia causada por el análisis univariado, la expresión de 14-3-3σ, así como otros parámetros se examinó en el análisis multivariante de Cox (tabla 2 y la tabla 3). En el conjunto de pruebas, 14-3-3σ se constató efectivamente ser un factor significativo independiente de pronóstico para pobres OS (cociente de riesgos instantáneos, 4.527; IC del 95%, 2,274-9,012; p Hotel < 0,001; Tabla 2) y la SSP (razón de riesgo, 3,582; IC del 95%, 1,717-7,475; p = 0,001
; Tabla 2). Resultados similares se observaron también en los pacientes en general (cociente de riesgos instantáneos, 5.161; IC del 95%, 2,990-8,909; p Hotel < 0,001 para el sistema operativo y el cociente de riesgos instantáneos, 4.416; IC del 95%, 2,482-7,856; p <
; 0,001 para PFS; Tabla 3). De otros parámetros, se encontró que el estadio clínico como un factor pronóstico independiente de supervivencia de los pacientes en el conjunto de las pruebas, pero no en general patients.Table 2 Resultados del análisis multivariable de Cox de riesgos proporcionales en el conjunto de pruebas
variable
Por la muerte
Para la supervivencia libre de progresión

cociente de riesgos instantáneos

95% intervalo de confianza

p
cociente de riesgos instantáneos
95% intervalo de confianza

p

Edad < 58.00
años (frente a ≥ 58 años)
1.101
0.637 a 1.902
0.731 1.056

0,577-1,936 0,859
Género Hombre
(VS . Mujer)
0.772
0,408-1,461 0,427

1.049
0,525-2,094 0,892

clínico fase III + IV
(VS. II + I)
3.391
1,156-9,949 0,026

5.220
1,529 a 17,823 0,008

invasión tumoral
T 4 T + 3 (VS. T2 + T1)
1.066
0,320-3,553
0,917 0,730

0,206-2,585 0,626

etapa nodal N + 3 N 2 gratis (VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251 0,735

0.373 a la 1.448 0.373

Diferenciación
baja (VS. Alta)
0,862
0,437-1,701
0,668 0,936

0,442-1,982 0,863

14-3-3σ
Positivo (frente a negativo)
4.527
2,274-9,012
0.000 3.582

1.717 a 7.475
0,001
Tabla 3 resultados del análisis multivariable de Cox de riesgos proporcionales de los pacientes en general
variable
Por la muerte
Para la supervivencia libre de progresión

cociente de riesgos instantáneos
95% intervalo de confianza

p
cociente de riesgos instantáneos
95% intervalo de confianza

p
Edad < 58.00
años (frente a ≥ 58 años)
1.046
0,701 a 1,562 0,825

1.036
0654 a 1,642 0,880
Género Hombre
(VS . Mujer)
0,713 0,474
to1.073
0,105 0,733

0,409-1,278 0,165

clínico fase III + IV
(VS. II + I)
0,988 0,500
to1.952
0,972 1,355

0,558-3,121 0,476

invasión tumoral
T 4 T + 3 (frente a T2 + T1 ): perfil del 2.175
0,896-5,278 0,086

1.432
0,547-3,747 0,465

etapa nodal N + 3 N 2 gratis (VS. N 1 + N 0)
1.056 0.681
to1.638
0.808 1.243

0,751-2,059 0,397

Diferenciación
baja (frente alta)
0,765 0,470
to1.243
0,279 0,810

0,478 0,463 to1.375

14-3-3σ
positivo (frente a negativo)
5.161
2,990-8,909
0.000 4.416

2,482-7,856
0.000
Discusión
el cáncer gástrico es uno de los cánceres más comunes en todo el mundo y representa uno de los más graves de salud pública problema [1]. Recurrencia y metástasis siguen siendo los principales problemas para los pobres supervivencia de pacientes con cáncer gástrico avanzado [30]. Aunque estudios previos han encontrado que muchos genes expresados ​​aberrantes en tumor gástrico puede ayudar a clasificar el riesgo de los resultados del paciente [5-11], los marcadores moleculares más novedosos que pueden identificar la progresión del tumor y predecir el pronóstico individual son todavía se necesita con urgencia. Las proteínas de la familia 14-3-3 han ganado mucha atención en los últimos años debido a su participación en los cánceres de regulación de diversos procesos celulares [14, 15]. Entre los siete isoformas, 14-3-3σ está regulado por p53 en respuesta al daño del ADN, y secuestra el mitótico complejo esencial iniciación, B1 cdc2-ciclina, entre en el núcleo, evitando de este modo la iniciación de la mitosis [31]. Como resultado, 14-3-3σ induce la detención G2 y permite la reparación de daño del ADN. Por lo tanto, a diferencia de otros miembros de la familia, 14-3-3σ se define como un regulador negativo de los puntos de control del ciclo celular y un potencial de la proteína supresora de tumores [12]. Sin embargo, el papel biológico de 14-3-3o en la tumorigénesis y la progresión de diversos tipos de tumores humanos sigue siendo controvertido. Aquí, para revelar aún más la función biológica de 14-3-3o en el cáncer gástrico, se estudió la dinámica de expresión 14-3-3o y analizamos sus significados clinicopatológicas /pronósticas en 152 muestras de tumor.
En este estudio, el desarrollo de un objetivo 14-3-3σ punto de corte para el análisis de supervivencia, se utilizó el análisis de la curva ROC para generar una puntuación de corte en el conjunto de entrenamiento. 14-3-3σ expresión, que fue clasificado como de alto y bajo nivel por el punto de corte derivado de la República de China, se encontró principalmente a ser mayor en las fases del tumor más avanzado (estadio III y IV), lo que indica que puede haber 14-3-3σ involucrados en la progresión del cáncer gástrico. El análisis de correlación demostró además que la alta expresión 14-3-3σ se asoció con el estadio clínico y la invasión tumoral en el cáncer gástrico (Tabla 1). Por otra parte, en el conjunto de las pruebas y los pacientes en general, alta expresión 14-3-3o predijo un sistema operativo y significativa desventaja PFS más baja subgrupo expresión 14-3-3o (Figura 3). Es importante destacar que, peor impacto pronóstico de aumento de la expresión 14-3-3σ se demostró en pacientes con estadio III y IV de tumores (Figura 4), lo que indica que 14-3-3o podría ser un factor novedoso para la definición de riesgo en el cáncer gástrico. Además, los análisis multivariante en el conjunto de las pruebas y los pacientes en general reveló que la expresión 14-3-3o era un parámetro pronóstico independiente. Tomados en conjunto, nuestros resultados de este estudio proporcionan evidencia de que la elevada expresión de 14-3-3σ en el cáncer gástrico podría facilitar un mayor fenotipo maligno y peor pronóstico de este tumor.
Con respecto al impacto pronóstico de 14-3-3σ

• Relación entre las hormonas intestinales y homeostasis de la glucosa después de la relación entre surgery
• P27KIP1, regulado por la glucógeno sintasa quinasa-3β, da como resultado la diferenciación inducida por HMBA de P27 cells