Poikkeava voimistumista 14-3-3ơ ilmaisun toimii huonompi ennustetekijöitä biomarkkereiden mahasyövän

Poikkeava voimistumista 14-3-3ơ ilmaisun toimii huonompi ennustetekijöitä biomarkkereiden mahasyövän
tiivistelmä
tausta
14-3-3ơ on solunsisäinen, fosfoseriini sitova proteiini ja ehdotetaan kasvaimien syntyyn liittyvien. Ilmaisulla dynamiikkaa 14-3-3ơ ja sen kliinispatologiset /prognostista merkitystä ihmisen kasvaimissa ovat edelleen kiistanalaisia. Tool Menetelmät
menetelmä immunohistokemiallinen (IHC) ja Western blot käytettiin tutkimaan proteiinin ilmentymistä 14 -3-3ơ mahasyövän ja pariksi viereisistä normaaleista mahalaukun limakalvon kudoksissa. Vastaanottaa toimivat (ROC) käyrä analyysi käytettiin määrittämään sulku pisteet 14-3-3ơ ilmentämiseen koulutus asettaa (n = 66). Validointiin, ROC johdettu sulku pisteet alistettiin analyysi yhdistyksen 14-3-3ơ ilmaisutapoja potilaiden hoitotuloksiin ja kliinisiä piirteitä on testaus joukko (n = 86) ja yleistä potilailla (n = 152).
tulokset
ilmaisu taajuus ja ekspressiotasot 14-3-3ơ olivat merkitsevästi korkeammat mahasyövän kuin normaalissa mahalaukun limakalvon kudoksissa. Korrelaatio analyysi osoitti, että korkea ilmentyminen 14-3-3ơ mahasyövän korreloi merkitsevästi kliinisen vaiheen ja kasvaimen invaasio. Lisäksi testaus joukko ja yleistä potilailla, Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että kohonnut 14-3-3ơ ilmaisu ennustaa huonompi yleistä (OS) ja ilman taudin etenemistä (PFS). Tärkeää on, korkea 14-3-3ơ ilmentyminen liittyi myös lyhentää eloonjäämisaika vaiheessa III ja vaihe IV mahasyövän potilaille. Monimuuttuja-analyysit paljastivat, että 14-3-3ơ ilmentyminen oli itsenäinen ennustetekijöiden parametri mahasyövän.
Johtopäätökset
että tulokset osoittivat, että korkea ilmentyminen 14-3-3ơ voi olla tärkeä kasvaimen etenemiseen ja palvelimia kuin itsenäinen molekyyli merkkiaine huonon ennusteen mahasyövän. Niinpä yli-ilmentyminen 14-3-3ơ tunnistaa potilaita suuri riski ja on uusi terapeuttinen molekyylikohteena tämän kasvain.
Tausta
Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä syistä syöpään liittyvät kuolemat maailmanlaajuisesti [1] etenkin Itä-Aasian maissa, kuten Kiinassa, Japanissa [2]. Vuonna 2005 oli noin 0,4 miljoonaa uutta tapausta ja 0,3 miljoonaa kuolemantapausta alkaen mahasyöpä Kiinassa [3]. Huolimatta viimeaikaisista edistysaskeleet kirurgisten tekniikoiden ja sairaanhoidon, yleinen 5 vuoden pysyvyys mahasyövän Kiinassa edelleen alhainen eli noin 40%. Monet tutkimukset ovat osoittaneet, että useita geneettisiä muutoksia, mukaan lukien kasvaimen synnyssä, onkogeenit, soluadheesiomolekyylit, solusyklin säätölaitteet, ja kasvutekijät, ovat vastuussa kehittymistä ja etenemistä mahasyövän [4]. Tutkimukset ovat purkautui monta poikkeuksellisesti ilmaistu geenien mahasyövässä lukien BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP
ja STAT3
[8], SPARC
[9] ja HER2
[10, 11], jotka tekevät riskinarviointia mahasyöpäpotilaista tarkemmin. Kuitenkin lupaavia molekyylejä, joilla on kliinis /prognostista merkitystä mahasyövän pysyvät olennaisesti rajoitettu. On tarpeen edelleen ymmärtää molekyylitason mekanismeja mahasyövän ja tunnistaa arvokkaita ennustetekijöitä markkereita jotta paitsi parantaa huonompi ennuste mutta myös tarjota uusia lupaavia hoidon tavoitteet.
14-3-3 proteiinit ovat perheen noin 30 kD: n dimeerinen erittäin konservoituneita proteiineja ja ekspressoituvat kaikissa eukaryoottisissa organismien [12]. On seitsemän läheisesti geenejä (β, γ, ε, η, ζ, O, τ) on 14-3-3 proteiinit. Nämä geenit muodostavat usein heterodimeerejä tai homodimeerejä ja sitoutuvat yli 100 erilaista proteiiniligandeja [13, 14]. Näin ollen, 14-3-3-proteiinit ovat osallisena monissa eri solun signaloinnin prosessien, mukaan lukien solujen proliferaatio, solusyklin kontrolli, apoptoosin ja pahanlaatuisiksi [14, 15]. Niistä seitsemästä isotyyppien, 14-3-3ơ alunperin luonnehdittu ihmisen rintarauhasen epiteelin merkki 1 (HME1) ja tunnistettiin kasvaimen tukahduttaa geenin [12, 16]. Kasvava todisteita osoitti 14-3-3ơ oli merkittävästi vähentynyt tai kadota hiljentäminen geenin kautta hypermetylaation useisiin kiinteiden kasvainten [17-22]. Aiemmat raportit todettiin, että vähentynyt ilmentyminen 14-3-3ơ ennusti huono selviytymisen rintasyövän ja nenänielun syöpä [23, 24]. Kuitenkin ristiriitaisia ​​tuumorisuppressorigeenin rooli 14-3-3σ, yliekspressio 14-3-3ơ haimasyövän solussa johti lääkeresistenssi, solujen vaeltamiseen ja invaasiota [25]. Lisäksi korkea ilmentyminen 14-3-3σ oli itsenäinen ennustetekijä köyhien selviytymisen haiman ja peräsuolen syövän [26, 27]. Näin ollen, biologisen roolin 14-3-3ơ kasvainten synnyssä ja etenemisessä erilaisten ihmisen syöpien vaihtelee riippuen tietyn kasvaimen tyypistä. Täällä, valitsimme mahasyövän yksilöt tiukkaa protokollaa havaitsemiseksi 14-3-3ơ ilmaisun dynamiikka ja analysoimaan niiden kliinis /ennustetekijöiden merkitykset. Tool Menetelmät
Potilaat
yhteensä 216 ensisijaista mahasyöpäpotilaista arkistoista Department of Pathology kolmannen ja toinen Affiliated sairaala Sun Yat-Senin yliopistossa (Guangzhou, Kiina) alun perin palvelukseen tutkimuksessamme. Kaikki potilaat saivat aluksi kirurginen resektio maaliskuusta 2001 tammikuuhun 2006. Olemme edelleen seuloa potilaita käyttäen tiukat kelpoisuusvaatimukset protokolla seuraavasti: mikroskoopilla vahvisti adenokarsinooma vatsan; ilman metastaattinen sairaudet; ole aiempaa kemoterapiaa tai sädehoitoa historia; vastaanottava yhtenäinen hoito ensilinjan kemoterapian jälkeen resektio ensisijainen kasvain (yhtenäistimme kuin FOLFOX hoito: fluorourasiili, leukovoriinin ja oksaliplatiinin), eikä sädehoitoa annostellaan jollekin potilaiden; ottaa yli 5 vuoden seuranta-ajan aikana. Lopulta 52 potilasta menetys seurannan ja 12 potilasta, joilla puutos kliinisiä tekijöitä jätettiin pois tästä tutkimuksesta, joka johtaa 152 mahasyöpäpotilaista alistamalla edelleen kliinisen ja eloonjääminen analyysi. Tarkemmin, yleisen kohortti koostui 105 mies- ja 47 naisen kanssa keski-ikä 58,0 vuotta (vaihteluväli 27-81 vuotta). 103 potilasta censused kuolema aikana 5 vuoden seuranta-ajan, kuten 5 tapauksessa kuoli leikkauksen jälkeisiä komplikaatioita ja 98 tapausta kuoli syövän etenemiseen. Yleistä potilailla, 66 potilasta arvottiin tietokoneella (SPSS 17.0 ohjelmistot) koulutukseen asettaa, ja loput 86 potilasta satunnaistettiin testauksen asetettu. Kliinis muuttujat kahden kohorteissa, kuten ikä, sukupuoli, kliininen vaihe, kasvaimen invaasio, solmu vaiheessa ja histologia erilaistuminen, olivat mukana tässä tutkimuksessa. Kaikki kasvaimet luokiteltiin ja lavastettuja mukaan tarkistetut ohjeet ajama International Union syöpää vastaan. Saimme etukäteen potilaan suostumusta ja hyväksyntää Institute Research Ethics komitean Sun Yat-Senin yliopistossa käyttöön kliinisen aineesta tässä tutkimuksessa.
Tissue mikrosirujen rakentamiseen
kudossiruina (TMA) konstruoitiin menetelmä on kuvattu aiemmin Xie et ai [28]. Lyhyesti, parafinoidut kudosblokeista ja vastaavat histologiset hematoksyliinillä ja eosiinilla värjättyjen diat peitettiin varten TMA näytteenottoa. Kiinnostunut ydin kudosbiopsioista (0,6 mm halkaisijaltaan) lävistettiin edustavien kasvain alueilla ja viereisten mahalaukun limakalvon kudoksen korttelin luovuttajalle kudosta käyttäen trephine (kolmena kappaleena sylinterit karsinoomapotilaista kudoksesta ja yksi sylinteri normaalista viereisen mahan limakalvon kudos). Kudos sylinterit siirrettiin sitten vastaanottajan parafiiniblokkiin tietyissä kohdissa käyttämällä kudos-ryhmittelyn väline (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Immunohistokemiallinen analyysi ja arviointi
TMA dioja poistettiin parafiini ksyleenillä Rehydratoituja kautta porrastettu alkoholia, upotettiin 3% vetyperoksidia 10 minuuttia estää endogeenisen peroksidaasin, ja antigeeni noutaa paine Keitetään 3 min Tris /EDTA (pH = 8,0). Sitten laseja inkuboitiin ensisijaisen vasta-aineen 14-3-3σ (hiiren monoklonaalinen, 01:50, Santa Cruz, SC-100638) 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen, kun niitä inkuboitiin sekundaarisen vasta-aineen kanssa 30 minuutin ajan, näytteet värjättiin DAB (3, 3-diaminobentsidiiniä). Lopuksi leikkeet vastavärjättiin hematoksyliinillä, kuivattu ja kiinnitetty. Negatiivinen kontrolli saatiin korvaamalla ensisijainen vasta-aine, jossa on normaali hiiren IgG. Tunnetut Immunovärjäyksen-positiiviset kolorektaalisyöpää dioja käytettiin positiivisina kontrolleina kuin aiemmin raportoitu [27].
Ruskea rakeina sytoplasmassa 14-3-3σ pidettiin positiivista värjäytymistä. Me teki värjäytymisintensiteettiä seuraavasti: 0, ei värjäystä; 1+, lievä värjäys; 2+, kohtalainen värjäytyminen; 3+, voimakas värjäytyminen. Alue värjäytyminen arvioitiin seuraavasti: 0, ei solujen värjäys tahansa mikroskooppikentäs-; 1+, < 30% kudosten värjätään positiivisia; 2+, välillä 30% ja 60% värjätään positiivinen; 3+, > 60% värjättyä positiivinen. 14-3-3σ ilmentyminen arvioitiin yhdistettiin arvioimalla värjäytymisen intensiteettiä ja laajennus. Pisterajat kun lasketaan yhteen (voimakkuus + extension) on 0, ja suurin oli 6. kriteerit Tässä tutkimuksessa on laajalti hyväksytty aiemmin [24]. Expression of 14-3-3σ arvioitiin ja tekee kaksi riippumatonta patologia (DRS. F Tang ja ZY Feng), jotka olivat sokaissut kliinis tiedot. Sopimus Näiden kahden patologian annetun IHC pisteet saavutti 84% (128 identtinen tulokset yhteensä 152 tapausta), mikä viittaa meidän pisteytysjärjestelmä oli erittäin vankka ja toistettavissa. Jos tulokset ilmoitetaan kahden patologit olivat yhdenmukaisia, arvo valittiin. Kuitenkin interobserver erimielisyydet (noin 6% kaikista tapauksista) tarkistettiin toisen kerran, jonka jälkeen ratkaiseva tuomiota molemmat patologia.
Western blot-analyysi
mahasyöpä ja pariksi viereisistä normaaleista mahalaukun limakalvon kudokset jauhettiin ja lyysattiin RIPA-puskurilla jäillä ennen kuin se altistetaan Western blot-analyysi. Proteiinipitoisuus havaittiin Bradfordin menetelmällä, jossa BSA: ta (Sigma-Aldrich), kuten standardin. Yhtä suuret määrät solujen ja kudosten uutetta (40 ug) altistettiin SDS-PAGE: lla ja siirrettiin nitroselluloosamembraanille (Bio-Rad) vasta-blottauksella. Membraani blokattiin sitten ja inkuboitiin hiiren anti-glyseraldehydi 3-fosfaattidehydrogenaasi (GAPDH) vasta-aine (Abmart, # M20006) ja hiiren anti-14-3-3σ-vasta-ainetta (Santa Cruz, SC-100638).
Valinta sulku pisteet 14-3-3σ "positiivinen" ilmaisun
ROC-käyrä analyysi tehtiin valinta 14-3-3σ sulku pisteet koulutukseen asetettu, kuten aiemmin on kuvattu [29]. Lyhyesti, herkkyys ja spesifisyys tuloksista tutkitaan kussakin pisteet piirrettiin synnyttämiseksi ROC käyrä. Lukemat lokalisoitu lähinnä pisteeseen sekä maksimi herkkyys ja spesifisyys, piste (0.0, 1.0) käyrällä, valittiin cutoff pisteet johtaa eniten kasvaimia, jotka luokitellaan oikein tai ei katsota olevan tuloksen. Helpottaakseen ROC käyrä analyysi, eloonjäämisen ominaisuudet olivat kahtia: selviytyminen (kuolema VS. muut (censored, elossa tai muista syistä johtuvat kuolemat)).
Seuranta
Kaikilla potilailla oli seuranta kirjaa yli 5 vuotta. Valmistumisen jälkeen hoidon, potilaita seurattiin 3 kuukauden välein ensimmäisen 3 vuotta ja 6 kuukauden välein sen jälkeen. Kokonaiselossaoloaika määriteltiin diagnoosista kuolinpäivästä tai censused viimeistään ajankohtana, jos potilasta oli elossa. Ilman taudin etenemistä määriteltiin diagnoosista, jona paikallisen vika /kaukainen etäpesäke tai kuolinpäivästä tai censused viimeistään päivämäärä.
Tilastollinen analyysi
Eloonjäämisanalyysiä varten optimaalinen cutpoint varten 14- 3-3σ ilmentyminen saatiin ROC analyysi harjoitussarjassa (n = 66). Validointiin, välisiä suhteita 14-3-3σ ilmaisua, joka luokiteltiin ROC analyysi syntyvän cutoff pisteen, ja OS, PFS arvioitiin testausta joukko (n = 86) ja yleistä potilailla (n = 152). Chi-neliö testi tai Fisherin testiä käytettiin arvioimaan suhdetta 14-3-3σ ilmaisun ja kliinis muuttujia. Monimuuttujakalibrointi Coxin suhteellisten riskien mallia käytettiin arvioimaan riskisuhteita ja 95%: n luottamusväli potilaiden hoitotuloksiin. Väliset suhteet 14-3-3σ ilmaisun ja OS, PFS määritettiin Kaplan-Meier-analyysi. Log-rank suoritettiin arvostamaan ero selviytymisen todennäköisyyksien välillä potilaiden alaryhmissä. Kaikki p
arvot olivat kaksipuolisia ja p
< 0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävänä. Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS-v. 17,0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).
Tulokset
14-3-3σ ilmentymistä mahasyövän ja normaalin mahan limakalvon kudoksissa
14-3-3σ havaittiin sytoplasmassa ja yli-ilmentyy mahasyövän (kuva 1A ja 1A), kun taas normaali pariksi mahalaukun limakalvon kudoksissa osoitti lähes negatiivinen ilmaus (kuvio 1 B ja 1 B). Yhdenmukainen tämän seurauksena, Western blot-analyysi paljasti samanlaisen löydös mahasyövän ja viereisistä normaaleista mahalaukun limakalvon kudoksissa (kuvio 1C). Kuva 1 14-3-3σ ilmentymistä ihmisen ensisijainen mahasyövän ja normaalin viereisen mahalaukun limakalvon kudos. (A) 14-3-3σ havaittiin sytoplasmassa ja yli-ilmentyy mahalaukun syövän kudoksen (100 x). (B) Viereisen epäneoplastisis- mahalaukun limakalvon osoitti lähes negatiivinen ilmaus 14-3-3σ (100 x). (A '), (B'), osoitti, että suuremmalla suurennuksella (400 x) alueelta laatikon (A) ja (B), vastaavasti. (C) Western blot-analyysi 14-3-3σ ilmentymisen tyypillinen ensisijainen mahasyövän kudoksen (T) ja normaalin viereisen limakalvon (N). Equal lastaus proteiinia määritettiin GAPDH.
Lisäarvioimiseksi selviytyminen analyysin ja välttää ongelmat useiden cutpoint valinta, ROC-käyrä analyysi, jonka avulla määritetään sulku pisteet 14-3-3σ ilme. Kuten kuviossa 2A ja 2B 14-3-3σ sulku pisteet OS ja PFS koulutukseen setti oli 3,25 (s
< 0,001) ja 3,35 (p
= 0,003) vastaavasti. Meillä on siis valinnut 14-3-3σ ilmaus pisteet 3 (> 3 VS. ≤ 3), sillä yhtenäinen cutoff pisteen hengissä analyysiä testauksessa asetettu. Kuvio 2 Receiver operating (ROC) käyriä analyysi 14-3-3σ sulku pisteet koulutuksessa asetettu. (A) 14-3-3σ sulku pisteen eloonjäämiseen koulutuksessa asetettu. (B) 14-3-3σ sulku pisteen ilman taudin etenemistä koulutuksessa asetettu. Jokaisessa immunohistokemiallista pisteet, herkkyys ja spesifisyys tuloksista tutkitaan piirrettiin muodostaen täten ROC käyrä. 14-3-3σ sulku pisteet kokonaiselossaoloaika, ilman taudin etenemistä oli 3,25 ja 3,35 vastaavasti.
14-3-3σ ilmaisun ja kliiniset piirteet
kliinisiä piirteitä näiden kahden ikäryhmät potilaita, kuten ikä, sukupuoli , kliininen vaihe, kasvaimen invaasio, solmu vaiheessa histologia erilaistuminen, 14-3-3σ ilme, tiivistetysti taulukossa 1. ROC-johdettu 14-3-3σ sulku pistemäärä 3 koulutukseen asetettu onnistuneesti erillisiä testaus- asetettu osaksi korkea ( 44/86, 51,2%) ja alhainen (42/86, 48,8%) 14-3-3σ ilme alaryhmiä. Korkea ilmentyminen 14-3-3σ pääasiassa löydetty kehittyneempien kasvain vaiheessa (77/107 vaiheessa III + IV VS. 12/45 vaiheessa I + II, p
= 0,004). Lisäksi korrelaatio analyysi osoitti, että korkea 14-3-3σ ilmentyminen korreloi kliiniseen vaiheeseen (p
< 0,001 molemmille set) ja kasvaimen invaasio (p
< 0,001 opetusjoukolla ja p
= 0,005 testaukseen set) kummassakin. 14-3-3σ liittyvät potilaiden ikä testauksessa asettaa (p
= 0,01), mutta ei koulutusta asetettu. Emme onnistuneet havaitsemaan mitään suhdetta 14-3-3σ muihin potilasryhmät, kuten sukupuoli, solmu vaiheessa ja histologia differentiation.Table 1 yhdistys 14-3-3σ ilmaisun kanssa potilaan ominaisuudet ensisijainen mahasyövässä
Muuttuva
Kaikki tapaukset
Training joukko (n = 66)
Testing setti (n = 86)


korkea
ilmaisu
Low
ilmaisu
p

korkea
ilmaisu
Low
ilmaisu
p

Ikä (vuotta)
≥ 58,00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%) b 0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%) b 0,010
< 58.00
69
20 (29,0%) B 8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Sukupuoli
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%) B Kliininen vaihe
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%) B 0,000
6 (13,3%)
21 (46,7%) B 0,000
III + IV
107
39 (36,4%) B 9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%) B kasvain invaasio
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%) B Node vaihe
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%) B Histology-eriyttäminen
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
x2 testi
b mediaani-ikä
14-3-3σ ilmaisun ja eloonjääminen analyysi: univariate selviytyminen analyysi
Kuten kuviossa 3A ja 3C, Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että kohonnut 14-3-3σ ilmaisua voimakkaasti ennusti huonompi OS testauksessa asettaa (p
< 0,001) ja yleistä potilailla (p
< 0,001). Lisäksi 14-3-3σ ilme oli myös voimakas ennustetekijä PFS testauksessa asettaa (p
< 0,001, kuvio 3B) ja yleistä potilailla (p
< 0,001, kuvio 3D). Kun otetaan huomioon heikko tulos myöhäisvaiheen mahasyövän, lisäanalyysi suoritettiin osalta 14-3-3σ ilmaisun osajoukkoja mahasyövän sairastavien potilaiden vaiheen III ja IV. Tulokset osoittivat, että verrattuna 14-3-3σ heikkoa ilmentymistä, korkea ilmentyminen 14-3-3σ osoittivat merkittävää suuntaus huonompi OS ja PFS mahasyövän potilaiden vaiheen III (p
= 0,001 OS ja p
= 0,017 PFS, kuvio 4A ja 4B) ja vaihe IV (p
< 0,001 OS ja p
= 0,001 PFS, kuvio 4C ja 4D). Tulokset yleisessä potilaat olivat samankaltaisia ​​kuin testauksessa set (kuvio 4E-H). Kuva 3 Kaplan-Meier selviytymisen analyysin 14-3-3σ ilmaisun testaus joukko ja yleistä potilailla. (A) korkeampi 14-3-3σ ilmentyminen korreloi läheisesti huono kokonaiselinaikaa ja (B) ilman taudin etenemistä testauksessa asetettu. (C) Potilaat, joilla on korkeampi 14-3-3σ ilme hankki myös huonompi kokonaiselinaikaa ja (D) ilman taudin etenemistä yleisessä potilailla. Testaukseen asettaa ja yleistä potilailla, mediaani kokonaiselinaika potilailla, joilla on matala ja korkea ekspressio 14-3-3σ oli 73,0 VS. 17,0 kuukautta (p
< 0,001) ja 73,0 VS. 14,0 kuukautta (p
< 0,001), tässä järjestyksessä.
Kuva 4 Kaplan-Meier selviytymisen analyysin 14-3-3σ ilmaisun osajoukkoja mahasyövän sairastavien potilaiden vaiheen III ja IV (log-rank-testi). (A) todennäköisyys kokonaiseloonjääminen ja (B) ilman taudin etenemistä potilailla, joilla on vaiheen III mahasyövän testauksessa set: alhainen lauseke, n = 17; korkea ilme, n = 26; (C) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (D) ilman taudin etenemistä vaiheen IV potilaiden mahalaukun syövän testaus sarja: alhainen lauseke, n = 5; korkea ilme, n = 11 (E) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (F) ilman taudin etenemistä potilailla, joilla on vaiheen III mahasyövän yleisessä potilaat: alhainen lauseke, n = 22; korkea ilme, n = 55; (G) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (H) ilman taudin etenemistä vaiheen IV potilaiden mahalaukun syövän yleinen potilailla: alhainen lauseke, n = 9; korkea ilmentyminen, n = 21.
monimuuttuja Coxin regressioanalyysiä
välttämiseksi vaikutuksen aiheuttama univariate analyysin ilmaus 14-3-3σ sekä muita parametrejä tutkittiin Coxin monimuuttuja-analyysi (taulukko 2 ja taulukko 3). Testauksessa asetettu, 14-3-3σ todellakin havaittiin olevan merkittävä itsenäinen ennustetekijä huonoon OS (riskisuhde 4,527; 95% CI, 2,274-9,012; p
< 0,001; taulukko 2) ja PFS (riskisuhde 3,582; 95% CI, 1,717-7,475; p
= 0,001; taulukko 2). Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin myös yleistä potilailla (riskisuhde 5,161; 95% CI, 2,990-8,909; p
< 0,001 OS ja riskisuhde 4,416; 95% CI, 2,482-7,856; p
<0,001 PFS; taulukko 3). Muiden parametrien, kliinisessä vaiheessa havaittiin olevan riippumaton ennustetekijä potilaan selviytymistä testaus asetettu, mutta ei yleistä patients.Table 2 tulokset monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat analyysi testaus set
Variable
kuolema
For ilman taudin etenemistä

riskisuhde

95%
luottamusväli
s
riskisuhde
95%
luottamusväli
p

Age < 58.00
vuotta (VS. ≥ 58 vuotta) B 1.101
0,637-1,902
0,731
1.056
0,577-1,936
0,859
Sukupuoli
(VS . Nainen)
0,772
+0,408-+1,461
0,427
1,049
0,525-2,094
0,892
Kliininen vaihe
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156-9,949
0,026
5.220
+1,529-+17,823
0,008
Kasvaimen invaasio
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1,066
0,320-3,553
0,917
0,730
0,206-2,585
0,626
solmukohtien vaiheessa N3 + N2
(VS. N 1 + N 0) B 0,705
+0,387-+1,282
0,251
0,735
0,373-1,448
0,373
Differentiation
Low (VS. Korkea)
0,862
0,437-1,701
0,668
0,936
+0,442-+1,982
0,863
14-3-3σ
Positiivinen (VS. Negative)
4,527
2,274-9,012
0.000
3,582
1,717-7,475
0,001
Taulukko 3 tulokset monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat analyysi yleistä potilailla
Variable
kuolema
For ilman taudin etenemistä

riskisuhde

95%
luottamusväli
s
riskisuhde
95%
luottamusväli
p
Age < 58.00
vuotta (VS. ≥ 58 vuotta) B 1,046
0,701-1,562
0,825
1.036
0654-+1,642
0,880
Sukupuoli
(VS . Nainen)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0,409-1,278
0,165
Kliininen vaihe
IV + III (VS. II + I)
0,988
0,500 to1.952
0,972
1,355
0,558-3,121
0,476
Kasvaimen invaasio
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2,175
0,896-5,278
0,086
1.432
0,547-3,747
0,465
solmukohtien vaiheessa N3 + N2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0,808
1,243
0,751-2,059
0,397
Differentiation
Low (VS. Korkea)
0,765
0,470 to1.243
0,279
0,810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
Positiivinen (VS. Negative) B 5.161
2,990-8,909
0,000
4,416
2,482-7,856
0,000
keskustelu
Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä syövistä maailmanlaajuisesti ja se muodostaa yksi vakava kansanterveydellinen ongelma [1]. Toistuminen ja etäpesäke ovat edelleen keskeisiä kysymyksiä köyhien selviytymisen edennyt mahasyöpä potilaita [30]. Vaikka aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että monet poikkeava ilmaistu geenien mahakasvaimen voi auttaa luokitella riskin potilaiden hoitotuloksiin [5-11], lisää uusia molekyylimarkkerit joka tunnistaa kasvaimen etenemistä ja ennustaa ennustetta yksittäin vielä pikaisesti. 14-3-3 proteiinit ovat saaneet paljon huomiota viime vuosina, koska niiden osallistumista syöpiä asetuksella erilaisten solun prosessien [14, 15]. Niistä seitsemän isoformien 14-3-3σ on ajan säätelee p53 vastauksena DNA-vaurioita, ja sitoo olennaiset mitoosi initiaatiokompleksin, cdc2-sykliini B1, pääsemästä tumaan, mikä estää aloittamista mitoosin [31]. Tämän seurauksena 14-3-3σ indusoi G2 pidätyksen ja mahdollistaa DNA-vaurion korjaamiseen. Näin ollen erilainen kuin muut perheenjäsenet, 14-3-3σ on määritelty negatiivisena säätelijänä solusyklin tarkastuspisteiden ja mahdollisen kasvaimen soriproteiini [12]. Kuitenkin biologisen roolin 14-3-3ơ kasvainten synnyssä ja etenemisessä erilaisten ihmisen kasvainten edelleen kiistanalainen. Täällä edelleen paljastaa biologisen toiminnan 14-3-3ơ mahasyövän, tutkimme 14-3-3ơ ilmaisun dynamiikka ja analysoidaan niiden kliinis /prognostista merkitykset 152 Tuumorinäytteet.
Tässä tutkimuksessa kehittää objektiivisia 14-3-3σ sulku kohta olemassaolostaan ​​analyysiä, käytimme ROC käyräanalyysi tuottamaan sulku pisteet koulutuksessa asetettu. 14-3-3σ ilmaisua, joka on luokiteltu korkean ja matalan tason, jonka ROC-johdettu cutoff pisteen, pääasiassa havaittiin olevan suurempi kehittyneempää kasvain vaiheessa (vaihe III ja IV), mikä osoittaa, että 14-3-3σ ehkä mukana mahalaukun syövän etenemisessä. Korrelaatio analyysi osoitti lisäksi, että korkea 14-3-3σ ilmentyminen liittyi kliinisessä vaiheessa ja kasvaimen invaasio mahasyövän (taulukko 1). Lisäksi testaus joukko ja yleistä potilaiden, korkea 14-3-3ơ ilmaisu ennustettu merkittävä käyttöjärjestelmä ja PFS haitta miedolla 14-3-3ơ ilmaisu alaryhmä (kuva 3). Tärkeää on, pahempaa prognostisia lisääntymisen vaikutus 14-3-3σ ilmentyminen oli osoitettu potilailla, joilla on vaiheen III ja IV kasvaimia (kuvio 4), mikä osoittaa, että 14-3-3ơ saattaa olla uusi tekijä riskin määritelmä mahasyövän. Lisäksi monimuuttuja analyysit testaus joukko ja yleistä potilailla ilmeni, että 14-3-3ơ ilme oli itsenäinen ennustetekijöiden parametri. Yhdessä meidän havainnot tässä tutkimuksessa esittänyt todisteita siitä, että kohonnut ilmentyminen 14-3-3σ mahasyövän saattaisi helpottaa lisääntynyt pahanlaatuisten ja huonompi prognostiset fenotyypin tämän kasvain.
Osalta ennustetekijöiden vaikutuksen 14-3-3σ

• Suhde gut hormoneja ja glukoosihomeostaasiin jälkeen bariatric surgery
• P27Kip1, säätelee glykogeenisyntaasikinaasi-3β, tulokset HMBA aiheuttama erilaistumista ihmisen mahasyövän cells