Ненормальная регуляция экспрессии 14-3-3ơ служит нижней прогностического биомаркера для желудка cancer

Aberrant повышающей регуляции экспрессии 14-3-3ơ служит нижней прогностического биомаркера для рака желудка
Аннотация
Справочная информация
14-3 -3ơ является внутриклеточным, фосфосерин связывающий белок и предложил участвовать в онкогенеза. Однако динамика экспрессии 14-3-3ơ и его клинико-патологическими /прогностическое значение в опухолях человека до сих пор противоречивы.
Методы
Метод иммуногистохимии (IHC) и Вестерн-блоттинга были использованы для изучения экспрессии белка 14 -3-3ơ при раке желудка и парными нормальных соседних тканей слизистой оболочки желудка. Прием операционной анализ характеристика (ROC) кривая была использована для определения счет среза для 14-3-3ơ выражения в обучающей выборке (n = 66). Для проверки, РПЦ, полученных счет отсечения была подвергнута анализу ассоциации 14-3-3ơ выражения с исходом пациента и клиническими характеристиками в наборе тестирования (п = 86) и общих пациентов (п = 152).
Результаты
частота и экспрессии уровни экспрессии 14-3-3ơ были при раке желудка значительно выше, чем в нормальных тканях слизистой оболочки желудка. Корреляционный анализ показал, что высокая экспрессия 14-3-3ơ при раке желудка была достоверно коррелирует с клинической стадией и опухолевой инвазии. Кроме того, в наборе тестирования и общих пациентов, анализ Каплана-Мейера показал, что повышенная экспрессия 14-3-3ơ предсказывали худшую общую выживаемость (ОС) и выживаемость без прогрессирования заболевания (PFS). Важно отметить, что высокая 14-3-3ơ выражение также было связано с укороченным временем выживания в стадии IV больных раком желудка III стадии и. Многофакторный анализ показал, что 14-3-3ơ выражение было независимым прогностическим параметром при раке желудка.
Выводы
Эти данные свидетельствуют о том, что высокая экспрессия 14-3-3ơ может иметь важное значение для прогрессии опухоли и серверов в виде не независимый молекулярный маркер для плохого прогноза рака желудка. Таким образом, повышенная экспрессия 14-3-3ơ идентифицирует пациентов с высоким риском и является новым терапевтическим молекулярной мишенью для этой опухоли.
Предпосылки
рака желудка является одним из наиболее распространенных причин рака, связанных смерти во всем мире [1] , особенно в странах Восточной Азии, таких как Китай, Япония [2]. В 2005 году насчитывалось около 0,4 млн новых случаев заболевания и 0,3 миллиона случаев смерти от рака желудка в Китае [3]. Несмотря на недавние достижения в области хирургических методов и способов лечения, общая 5-летняя выживаемость рака желудка в Китае остается на низком уровне около 40%. Многие исследования показали, что множественные генетические изменения, в том числе генов-супрессоров опухолей, онкогенов, молекул клеточной адгезии, регуляторы клеточного цикла и факторы роста, ответственны за развитие и прогрессирование рака желудка [4]. Исследования разгадали много аберрантно выраженных генов при раке желудка, включая Bmi1
[5], ЦОГ-2
[6], HER3
[7], RKIP
и STAT3
[8], SPARC
[9] и HER2
[10, 11], которые делают оценку риска у больных раком желудка более точно. Тем не менее, перспективные молекулы, которые имеют клинико-патологическими /прогностическое значение при раке желудка остаются существенно ограничены. Необходимо дополнительно понять молекулярные механизмы, вовлеченные в рак желудка и выявить более ценные прогностические маркеры, чтобы не только улучшить худший прогноз, но и создание новых перспективных целей терапии.
14-3-3 белки представляют собой семейство о 30 кД димерная высоко консервативных белков и экспрессируется во всех эукариотических организмов [12]. Есть семь тесно связанных генов (β, γ, ε, η, ζ, ö, т) в 14-3-3 белков семейства. Эти гены часто образуют гетеродимеры или гомодимеры и связываются с более чем 100 различных белковых лигандов [13, 14]. Таким образом, 14-3-3 белки участвуют во многих различных процессах передачи клеточных сигналов, включая пролиферацию клеток, контроль клеточного цикла, апоптоза и злокачественной трансформации [14, 15]. Среди семи изотипов, 14-3-3ơ первоначально был охарактеризован как человека эпителии молочных желез маркера 1 (HME1) и идентифицирован как ген, опухоль изымать [12, 16]. Растущие свидетельства показали, что 14-3-3ơ была значительно уменьшена или потеряны из-за глушителей гена с помощью гиперметилированием в нескольких солидных опухолей [17-22]. Предыдущие отчеты обнаружили, что снижение экспрессии 14-3-3ơ предсказывали плохую выживаемость при раке молочной железы и рака носоглотки [23, 24]. Тем не менее, противоречат друг другу с супрессоров роль опухоли 14-3-3σ, избыточная экспрессия 14-3-3ơ в панкреатических раковых клеток приводит к лекарственной устойчивости, миграции клеток и инвазии [25]. Кроме того, высокая экспрессия 14-3-3σ была независимым прогностическим фактором для выживания бедных в поджелудочной железы и колоректального рака [26, 27]. Таким образом, биологическая роль 14-3-3ơ в онкогенеза и прогрессировании различных типов рака человека, варьирует в зависимости от типа опухоли. Здесь мы выбрали желудочные образцов рака со строгим протоколом для определения динамики экспрессии 14-3-3ơ и анализировать их клинико /прогностическим значимостей.
Методов
Пациенты
В общей сложности 216 первичных больных раком желудка из архивов кафедры патологии в больнице третьего и второго Дочернее Сунь Ят-Сена университета (Гуанчжоу, Китай) были первоначально набраны в нашем исследовании. Все пациенты прошли первоначальную хирургическую резекцию с марта 2001 г. по январь 2006 г. Кроме того, мы экранированные пациентов с использованием строгого протокола критериев приемлемости следующим образом: микроскопически подтвердил аденокарциномы желудка; без каких-либо метастатических заболеваний; нет предшествующей химиотерапии или лучевой терапии история; получение единой схемы в качестве первой линии химиотерапии после резекции первичной опухоли (мы объединены в схеме FOLFOX: фторурацил, лейковорин и оксалиплатин), и никакое лечение излучение не администрируется ни одному из пациентов; имея более 5-летний период наблюдения. В конечном счете, у 52 больных с потерей наблюдения и 12 пациентов с недостаточностью клинических характеристик были исключены из этого исследования, что привело к 152 больных раком желудка Подвергая дальнейшего клинического и выживания анализа. В деталях, общая когорта состояла из 105 мужчин и 47 женщин с медианный возраст 58,0 года (диапазон 27 - 81 год). 103 пациента были учет численности, как смерть в течение 5 лет последующего времени, в том числе 5 случаев смерти от послеоперационных осложнений и 98 случаев смерти от прогрессирования опухоли. Из общего пациентов, 66 пациентов были случайным образом распределены с помощью компьютера (SPSS 17,0 программного обеспечения) на обучающей выборке, а остальные 86 пациентов были случайным образом распределены на множество испытаний. Клинико-патологическими переменные двух когорт, такие как возраст, пол, клинической стадии, опухолевой инвазии, стадии узла, а также гистологического дифференцировки, были включены в данное исследование. Все опухоли были классифицированы и поставлена ​​в соответствии с пересмотренными руководящими принципами, отстаиваемых Международным союзом против рака. Мы получили предварительное согласие пациентов и одобрение научно-исследовательского комитета по этике Института Сунь Ятсена университета для использования клинических материалов, описанных в данном исследовании.
Строительство ткани микрочипов
ткани микрочипов (TMAS) были построены в способ, описанный ранее Се и др [28]. Вкратце, парафином блоки ткани и соответствующие гистологическое гематоксилином и эозином окрашенных слайды были наложены для взятия проб ТМА. Заинтересованы основные биоптатов (0,6-мм в диаметре) штамповали из репрезентативных участков опухоли и от прилегающей слизистой оболочки желудка ткани из блоков индивидуальной донорской ткани с использованием трепана (по трехкратным цилиндры от карциномы ткани и один цилиндр от нормальной смежной ткани слизистой оболочки желудка). Цилиндры ткани были затем переносили в парафиновой получатель блока в определенных положениях с помощью платка-выстроив инструмент (Бичер Instruments, Silver Spring, MD, США).
Иммуногистохимического анализа и оценки
The TMAS слайдах были депарафинировали в ксилоле , регидратации через градуированного спирта, погружают в 3% перекиси водорода в течение 10 мин, чтобы блокировать эндогенную активность пероксидазы, и антиген извлекаться давлением приготовления пищи в течение 3 мин в Трис /ЭДТА (рН = 8,0). Затем предметные стекла инкубировали с первичным антителом 14-3-3σ (мышиное моноклональное; 1:50; Санта Круз, SC-100638) в течение 1 часа при комнатной температуре. После инкубации с вторичным антителом в течение 30 мин, образцы окрашивали ДАБ (3, 3-диаминобензидина). И, наконец, срезы контрастно гематоксилином, обезвожены и смонтированный. Отрицательный контроль был получен путем замены первичного антитела с нормальным мышиного IgG. Известные Иммуноокрашивание-положительные колоректального рака горок были использованы в качестве положительного контроля, как сообщалось ранее [27].
Коричневые гранулы в цитоплазме 14-3-3σ рассматривались в качестве положительного окрашивания. Мы забили интенсивность окрашивания следующим образом: 0, отсутствие окрашивания; 1+, легкое окрашивание; 2+, умеренное окрашивание; 3+, интенсивное окрашивание. Область окрашивания оценивали следующим образом: 0, отсутствие окрашивания клеток в любых микроскопических полей; 1+, &л; 30% ткани окрашивали положительный; 2+, от 30% до 60% окрашенного положительными; 3+, > 60% окрашена позитивно. 14-3-3σ выражение оценивали в сочетании оценки интенсивности окрашивания и расширения. Минимальное количество баллов при суммировании (интенсивность + удлинение) 0, а максимум был 6. Критерии, используемые в данном исследовании была широко принята ранее [24]. Выражение 14-3-3σ оценивали и забил два независимых патологоанатомов (DRS. F Тан и ZY Фэн), которые были слепы к данным клинико-патологическими. Согласие этих двух патологов на счете IHC достигла 84% (128 одинаковых баллов в общем объеме 152 случаев), предполагая, наша система подсчета очков была очень твердой и воспроизводимым. Если результаты, представленные двумя патологи были последовательными, было выбрано значение. Тем не менее, межнаблюдательная разногласия (около 6% от общего числа случаев) были рассмотрены во второй раз, после чего убедительного суждения обоими патологоанатомов.
Вестерн-блот-анализ
желудочных рака и спаренные нормальные прилегающие ткани слизистой оболочки желудка были измельчены и лизируют с буфером RIPA на льду перед тем, как подвергали Вестерн-блот-анализа. Концентрацию белка определяли по методу Брэдфорда с БСА (Sigma-Aldrich) в качестве стандарта. Равные количества клеток и экстракта ткани (40 мкг) подвергали SDS-PAGE и переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Bio-Rad) для блоттинга антител. Затем мембрану блокировали и инкубировали с мышиным анти-глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH) антител (Abmart, # M20006) и мышиное анти-14-3-3σ антитела (Santa Cruz, SC-100638).
Подборка отсечка оценка для 14-3-3σ "положительного" выражения
анализ кривой ROC подвергали селекции 14-3-3σ счет обрезания в обучающем наборе, как описано ранее [29]. В кратком изложении, чувствительность и специфичность по отношению к исход изучаемых на каждой счет наносили на график для построения кривой ROC. Счет локализован ближе к точке как максимальной чувствительности и специфичности, точка (0,0, 1,0) на кривой, была выбрана в качестве обрезания Балл приводит к наибольшему числу опухолей, которые были правильно классифицированы как имеющие или не имеющие результата. Для облегчения анализа кривой ROC, были дихотомии особенности выживания:. Выживаемости (смерть сравнению с другими типами (цензурой, живой или смерти от других причин))
Последующие
Все пациенты имели последующие записи в течение 5 лет. После завершения терапии, наблюдались у пациентов с интервалами в 3 месяца в течение первых 3-х лет и через 6 месяцев эксплуатации в дальнейшем. Общая выживаемость определялась как время от постановки диагноза до даты смерти или когда учет численности на последнюю дату, если пациенты были еще живы. Выживаемость без прогрессирования определяли как время от постановки диагноза до даты локального разрушения /отдаленными метастазами или даты смерти или когда учет численности на последнюю дату.
Статистический анализ для
анализа выживаемости, оптимальной для CutPoint 14- 3-3σ выражение было получено с помощью анализа ROC в обучающей выборке (n = 66). Для проверки, отношения между 14-3-3σ выражением, которое было классифицировано ROC анализа сгенерированных точки отсечки, и ОС, ВБП были оценены в множестве испытаний (n = 86) и общих пациентов (n = 152). Тест хи-квадрат или точный критерий Фишера использовали для оценки взаимосвязи между 14-3-3σ выражения и клинико-патологическими переменных. Многомерный Кокс модели пропорциональных рисков была использована для оценки соотношения рисков и 95% доверительных интервалов для исхода пациента. Отношения между 14-3-3σ выражения и ОС, PFS определяли с помощью анализа Каплана-Мейера. Тесты журнала ранга были выполнены, чтобы оценить разницу в вероятности выживания между подмножествами пациентов. Все значения р
цитируемые были двусторонними и р
&л; 0,05 рассматривалось как статистически значимое. Статистический анализ проводился с использованием SPSS ст. 17.0 (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс).
Результаты
14-3-3σ выражение в развитии рака желудка и нормальных тканей слизистой оболочки желудка
14-3-3σ была обнаружена в цитоплазме и избыточно экспрессируется в рак желудка (рис 1А и 1А '), в то время как нормальные спаренные слизистой оболочки желудка тканей показали почти отрицательное выражение (Фигура 1В и 1В'). В соответствии с этим результатом, Вестерн-блот анализ показал подобный вывод при раке желудка и нормальных соседних тканей слизистой оболочки желудка (рис 1C). Рисунок 1 14-3-3σ выражение первичного рака желудка человека и нормальной прилегающей слизистой желудка ткани. (А) 14-3-3σ был обнаружен в цитоплазме и избыточно экспрессируется в желудочной ткани рака (100-кратное увеличение). (B) по соседнему неопухолевых слизистой желудка ткани показали почти отрицательное выражение 14-3-3σ (100 ×). (А '), (В'), продемонстрировал более высокое увеличение (400-кратное увеличение) из области коробки в (А) и (В), соответственно. (C), Вестерн-блот-анализ экспрессии 14-3-3σ в представительном первичной желудочной ткани рака (Т) и нормальной смежно слизистой ткани (N). Равное загрузка белка определяли с помощью GAPDH.
Для дальнейшей оценки анализа выживаемости и избежать проблем множественного выбора CutPoint, анализ кривой ROC была использована для определения среза оценки 14-3-3σ выражения. Как показано на рисунке 2А и 2В, то 14-3-3σ счет отсечки для OS и PFS в обучающем наборе 3,25 (р
&л; 0,001) и 3,35 (р = 0,003
) соответственно. Таким образом, мы выбрали 14-3-3σ выражение счетом 3 (&GТ; 3 VS. ≤ 3) в качестве единой точки отсечки для анализа выживаемости в наборе тестирования. Рисунок 2 Приемник работает анализ характеристика (ROC) кривых 14-3-3σ балла обрезания в обучающем наборе. (A) 14-3-3σ точка отсечки для общей выживаемости в обучающем наборе. (B) 14-3-3σ точка отсечки для выживаемости без прогрессирования в обучающем наборе. На каждом иммуногистохимического балла, чувствительность и специфичность по отношению к исход исследуемой наносили на график, таким образом, генерируя кривую ROC. 14-3-3σ оценка среза общей выживаемости, выживаемости без прогрессирования была 3,25 и 3,35 соответственно.
14-3-3σ выражение и клинические признаки
клинические признаки этих двух когорт пациентов, включая возраст, пол , клиническая стадия, инвазия опухоли, стадия узел, гистология дифференциация, 14-3-3σ выражение, были обобщены в таблице 1. ROC полученные 14-3-3σ среза оценку 3 в подготовке набора успешно отделены тестирование установлено в высокой ( 44/86, 51,2%) и низкий (42/86, 48,8%) 14-3-3σ экспрессии подгруппы. Высокая экспрессия 14-3-3σ была в основном в более поздних стадиях опухоли (77/107 в стадии III + IV VS. 12/45 в стадии I + II, р = 0,004
). Кроме того, корреляционный анализ показал, что высокая 14-3-3σ экспрессия коррелирует с клинической стадией (р
< 0,001 для обоих набора) и опухолевой инвазии (р
&л; 0,001 для обучающего набора и р =
0,005 для тестирования набора) в обоих наборах. 14-3-3σ связано с возрастом пациентов в наборе тестирования (р = 0,01
), но не в тренировочном наборе. Нам не удалось обнаружить каких-либо отношений между 14-3-3σ с другими характеристиками пациента, включая пол, стадия узла, и гистология differentiation.Table 1 Ассоциация 14-3-3σ выражения с характеристиками пациента в первичном раке желудка
Переменная

всех случаях

Обучающий набор (п = 66)

Тестирование множество (п = 86)

<й>
<й>
Наивсевышнего
выражение

Low
выражение

р
управлением


Высокое
выражение

Low
выражение

р
управлением


Возраст (лет)
≥ 58,00 б
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010
&л; 58.00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Пол
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
клинической стадии
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0,000 <бр> 6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
опухолевой инвазии
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Node этап
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
гистологии-дифференцировки
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
тест x2
б медианный возраст
14-3-3σ выражения и анализа выживаемости: Одномерный анализ выживаемости
Как показано на рисунке 3A и 3C, анализ Каплан-Майера показал, что повышенная экспрессия 14-3-3σ сильно предсказывал подчиненную ОС в наборе тестирования (р
&л; 0,001) и в целом пациентов (р
≪ 0,001). Кроме того, 14-3-3σ выражение также является мощным прогностическим фактором выживаемости без прогрессирования заболевания в тестировании набора (р
&л; 0,001, рис 3B) и в целом пациентов (р
< 0,001, рис 3D). С учетом неблагоприятного исхода при раке желудка на поздней стадии, дальнейший анализ был проведен в отношении 14-3-3σ выражение в подмножествах больных раком желудка с этапа III и IV. Результаты исследования показали, что по сравнению с 14-3-3σ низким уровнем экспрессии, высокая экспрессия 14-3-3σ показал значительную тенденцию к худшему ОС и выживаемости без прогрессирования заболевания в больных раком желудка III стадии с (р = 0,001
для ОС и р <бр> = 0,017 для PFS, рис 4А и 4Б) и стадии IV (р
&л; 0,001 для OS и р = 0,001
для PFS, рис 4C и 4D). Результаты в общем пациентов были аналогичны тем, которые содержатся в наборе тестирования (Рисунок 4E-H). Рисунок 3 Каплана-Мейера анализ выживаемости 14-3-3σ экспрессии в наборе тестирования и общих пациентов. Высшее 14-3-3σ выражение (А) была тесно связана с плохой общей выживаемости и (В) выживаемости без прогрессирования в наборе тестирования. (C) Пациенты с более высоким уровнем экспрессии 14-3-3σ также приобрели подчиненное общую выживаемость и (D) выживаемость без прогрессирования заболевания в целом пациентов. В наборе тестирования и общих пациентов, средняя продолжительность общей выживаемости у пациентов с низкой и высокой экспрессии 14-3-3σ был 73,0 VS. 17,0 месяцев (р
≪ 0,001) и 73,0 VS. 14,0 месяцев (р
&л; 0,001). Соответственно Рисунок 4
Kaplan-Meier анализ выживаемости 14-3-3σ экспрессии в подмножествах больных раком желудка со стадией III и IV (лог-ранговый тест). (A) Вероятность общей выживаемости и (В) выживаемости без прогрессирования пациентов со стадией III рака желудка в наборе тестирования: низкое выражение, п = 17; высокий уровень экспрессии, п = 26; (C) Вероятность общей выживаемости и (D) выживаемости без прогрессирования стадии IV пациенты с раком желудка в наборе тестирования: низкое выражение, N = 5; высокий уровень экспрессии, п = 11. (Е) Вероятность общей выживаемости и (F) выживаемости без прогрессирования заболевания у пациентов с III стадией рака желудка в целом пациентов: низкой экспрессией, п = 22; высокий уровень экспрессии, п = 55; (G) Вероятность общей выживаемости и (H) выживаемости без прогрессирования стадии IV пациенты с раком желудка в целом пациентов: низкой экспрессией, п = 9; высокий уровень экспрессии, п = 21.
Мультивариантный Cox регрессионного анализа
Для того, чтобы избежать влияния, вызванного однофакторного анализа, выражение 14-3-3σ, а также других параметров, был рассмотрен в многомерном анализе Кокса (таблица 2 и таблица 3). В наборе тестирования 14-3-3σ действительно оказывается значимым независимым прогностическим фактором для бедных ОС (отношение рисков, 4.527; 95% ДИ 2.274-9.012; р
&л; 0,001; таблица 2) и PFS (отношение рисков 3,582; 95% ДИ 1.717-7.475; р = 0,001
; Таблица 2). Аналогичные результаты наблюдались также в целом пациентов (отношение рисков 5,161; 95% ДИ 2.990-8.909; р
&л; 0,001 для OS и отношение рисков, 4.416; 95% ДИ 2.482-7.856; р
&л; 0,001 ВБП; Таблица 3). Из других параметров, клиническая стадия была найдена, чтобы быть независимым прогностическим фактором для выживания пациента в наборе тестирования, но не в целом patients.Table 2 Результаты многомерного анализа пропорциональных рисков Кокса в тестировании набор
Переменная

Для смерти от Китай для выживаемости без прогрессирования

<й>
Коэффициент опасности <бр>
95% доверительный интервал


р


соотношение риска

95% доверительный интервал


р


Возраст &л; 58.00
лет (VS. ≥ 58 лет)
1,101
0,637 до 1,902
0,731
1,056
0,577 до 1,936
0,859
Пол Мужской
(В.С. . Женский)
0,772
0,408 до 1.461
0,427
1,049
0.525 до 2.094
0,892
Клиническая стадия
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156 до 9,949
0,026
5,220
1,529 до 17,823
0,008
Опухоль вторжения
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1.066
0,320 до 3.553
0,917
0,730
0,206 до 2,585
0,626
Узловой этап N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387 до 1,282
0,251
0,735
0,373 до 1,448
0,373
дифференциацию
Low (VS. Высокий)
0,862
0,437 до 1.701
0,668
0,936
0,442 до 1.982
0,863
14-3-3σ
Положительный (VS. Негативный)
4,527
2,274 до 9,012
0,000
3,582
1,717 до 7,475
0,001
Таблица 3 Результаты многофакторного анализа Кокса пропорционального риска в целом больных
Переменная

Для смерти от Китай для выживаемости без прогрессирования

<й>
Коэффициент опасности

95% доверительный интервал


р


Коэффициент опасности

95% доверительный интервал


р


Возраст &л; 58.00
лет (VS. ≥ 58 лет)
1,046
0,701 до 1,562
0,825
1,036
0654 до 1,642
0,880
Пол Мужской
(В.С. . Женский)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0,409 до 1,278
0,165
Клиническая стадия
IV + III (VS. II + I)
0,988
0,500 to1.952
0,972
1,355
0,558 до 3,121
0,476
опухолевой инвазии
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2.175
0,896 до 5.278
0,086
1,432
0,547 до 3,747
0,465
Узловой этап N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
1.056
0,681 to1.638
0,808
1,243
0,751 до 2,059
0,397
дифференциацию
Low (VS. высокий) <бр> 0,765
0,470 to1.243
0,279
0,810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
Положительный (VS. Negative)
5,161
2,990 до 8,909
0,000
4,416
2,482 до 7,856
0,000
Обсуждение
рак желудка является одним из наиболее распространенных видов рака во всем мире, и это представляет собой одну из самых серьезных общественного здравоохранения задача [1]. Рецидив и метастазирование по-прежнему главные проблемы для бедных выживания передовых больных раком желудка [30]. Хотя предыдущие исследования показали, что многие гены аномальным, выраженные в желудочном опухоли могут помочь классифицировать риск исхода пациента [5-11], более новых молекулярных маркеров, которые могут идентифицировать прогрессирование опухоли и предсказать прогноз по отдельности все еще крайне необходимы. 14-3-3 белки семейства получили большое внимание за последние годы в связи с их участием в раковых заболеваний путем регуляции различных клеточных процессов [14, 15]. Среди семи изоформ, 14-3-3σ является повышающей регуляции р53 в ответ на повреждение ДНК, и изолирует с необходимым митотического комплекса инициации, Cdc2-циклин В1, от входа в ядро, таким образом, предотвращая инициацию митоза [31]. В результате, 14-3-3σ вызывает G2 арест и позволяет восстановить повреждение ДНК. Таким образом, отличается от других членов семьи, 14-3-3σ определяется как негативный регулятор клеточного цикла контрольно-пропускных пунктов и потенциального белка опухоль-супрессоров [12]. Тем не менее, биологическая роль 14-3-3ơ в онкогенеза и прогрессировании различных типов опухолей человека, остается спорным. Здесь, в дальнейшем выявить биологическую функцию 14-3-3ơ при раке желудка, мы изучали динамику 14-3-3ơ экспрессии и анализировали их клинико /прогностических значений в 152 образцах опухолей.
В этом исследовании, разработать цели 14-3-3σ точка отсечки для анализа выживаемости, мы использовали анализ кривой ROC для генерации счет среза в обучающем наборе. 14-3-3σ выражение, которое было классифицировано как высокого и низкого уровня РПЦ-производной точки отсечки, в основном, оказались выше, в более поздних стадиях опухоли (стадия III и IV), что свидетельствует о том, что может быть 14-3-3σ участвует в прогрессии рака желудка. Корреляционный анализ показал, что в дальнейшем высокая 14-3-3σ экспрессия была связана с клинической стадией и инвазии опухоли при раке желудка (таблица 1). Кроме того, в наборе тестирования и общих пациентов, высокая 14-3-3ơ выражение предсказывали значительную ОС и PFS недостаток по низкой экспрессии подгруппы 14-3-3ơ (рисунок 3). Важно отметить, что еще хуже прогностическое влияние повышенной экспрессии 14-3-3σ была продемонстрирована у пациентов со стадией III и IV опухолей (рис 4), указывая, что 14-3-3ơ может быть новым фактором для определения риска при раке желудка. Кроме того, многомерный анализ в наборе тестирования и в целом пациентов показали, что экспрессия 14-3-3ơ была независимым прогностическим параметром. Взятые вместе, наши результаты в данном исследовании, при условии доказательства того, что повышенная экспрессия 14-3-3σ при раке желудка могли бы облегчить повышенную злокачественную и хуже прогностическую фенотип этой опухоли.
Что касается прогнозного воздействия 14-3-3σ

• Взаимосвязь между кишечными гормонами и гомеостазом глюкозы после бариатрической хирургии
• P27Kip1, регулируется гликоген-синтазы-киназы-3 &beta приводит к ГММК-индуцированной дифференцировки клеток рака ж…