Avvikende oppregulering av 14-3-3ơ uttrykk fungerer som en mindreverdig prognostisk biomarkør for mage cancer

avvikende oppregulering av 14-3-3ơ uttrykk fungerer som en mindreverdig prognostisk biomarkør for magekreft
Abstract
Bakgrunn
14-3 -3ơ er en intracellulær, fosfoserin bindende protein og foreslått å være involvert i tumordannelse. Men uttrykket dynamikken i 14-3-3ơ og dens clinicopathological /prognostisk betydning i humane tumorer er fortsatt kontroversielt.
Metoder
metode for immunhistokjemi (IHC) og Western blot ble benyttet for å undersøke protein uttrykk 14 -3-3ơ i magekreft og sammenkoblede normale tilstøtende mage slimhinnevevet. Motta arbeidskarakteristikken (ROC) kurve analyse ble anvendt for å bestemme en poengsum cutoff for 14-3-3ơ ekspresjon i et treningssett (n = 66). For validering ble ROC-avledet cutoff poengsum utsatt for analyse av foreningen av 14-3-3ơ uttrykk med pasientens utfall og kliniske karakteristika i en testsettet (n = 86) og overordnede pasienter (n = 152).
resultatene
Uttrykket frekvens og uttrykk nivåer av 14-3-3ơ var signifikant høyere i magekreft enn i normale mageslimhinnevevet. Korrelasjonsanalyse viste at høyt uttrykk for 14-3-3ơ i magekreft var signifikant korrelert med klinisk stadium og tumorinvasjon. Videre i testing sett og generelle pasienter, Kaplan-Meier analyse viste at forhøyet 14-3-3ơ uttrykk spådd dårligere total overlevelse (OS) og progresjonsfri overlevelse (PFS). Viktigere, høy 14-3-3ơ uttrykk var også assosiert med kortere overlevelse i fase III og scene IV magekreftpasienter. Multivariate analyser viste at 14-3-3ơ uttrykk var en selvstendig prognostisk parameter i magekreft.
Konklusjoner
Disse funnene gir bevis for at høyt uttrykk for 14-3-3ơ kan være viktig i tumorprogresjon og servere som en uavhengig molekylær markør for dårlig prognose av magekreft. Dermed overekspresjon av 14-3-3ơ identifiserer pasienter med høy risiko og er en roman terapeutisk molekylære mål for denne svulsten.
Bakgrunn
Magekreft er en av de vanligste årsakene til kreft-relaterte dødsfall på verdensbasis [1] , spesielt i Øst-asiatiske land som Kina, Japan [2]. I 2005 var det om lag 0,4 millioner nye tilfeller og 0,3 millioner dødsfall fra magekreft i Kina [3]. Til tross for nylige fremskritt innen kirurgiske teknikker og medisinsk behandling, forblir den samlede 5 års overlevelse av magekreft i Kina lav ved omtrent 40%. Mange studier har vist at flere genetiske forandringer, inkludert tumorsuppressorgener, onkogener, celleadhesjonsmolekyler, celle-syklus regulatorer, og vekstfaktorer, er ansvarlig for utvikling og progresjon av magekreft [4]. Studier har avslørt mange abnormt uttrykte gener i magekreft inkludert BMI1 product: [5], COX-2 product: [6], HER3 product: [7], RKIP Hotell og STAT3 product: [8], SPARC product: [9] og HER2 product: [10, 11], som gjør risikovurdering av magekreftpasienter mer nøyaktig. Men lovende molekyler som har clinicopathological /prognostisk betydning i magekreft er fortsatt betydelig begrenset. Det er nødvendig å ytterligere å forstå de molekylære mekanismene som er involvert i magekreft og for å identifisere mer verdifulle prognostiske markører, slik som å ikke bare forbedre dårligere prognose, men også tilveiebringe en ny lovende behandlings mål.
14-3-3 proteiner er en familie av ca. 30 kD dimerisk høyt konserverte proteiner og ubikvitært uttrykt i alle eukaryote organismer [12]. Det er sju nært beslektede gener (β, γ, ε, η, ζ, o, x) i 14-3-3 familie proteiner. Disse genene ofte danner heterodimerer eller homodimerer og binder seg til over 100 forskjellige protein ligander [13, 14]. Således er 14-3-3 proteiner involvert i mange forskjellige cellulære signaliseringsprosesser inkludert celleproliferasjon, cellesykluskontroll, apoptose og ondartet transformasjon [14, 15]. Blant de syv isotyper, 14-3-3ơ opprinnelig ble karakterisert som et humant brystepitel markør 1 (HME1) og identifisert som en svulst undertrykke gen [12, 16]. Økende bevis viste at 14-3-3ơ var betydelig redusert eller tapt på grunn stanse av genet via hypermethylation i flere solide tumorer [17-22]. Tidligere rapporter funnet at redusert uttrykk for 14-3-3ơ spådd en dårlig overlevelse i bryst og nasofaryngeal kreft [23, 24]. Men motstrid med tumor suppressor rollen 14-3-3σ, overekspresjon av 14-3-3ơ i bukspyttkjertelkreft celle ført til resistens, cellemigrasjon og invasjonen [25]. Videre høy uttrykk for 14-3-3σ var en uavhengig prognostisk faktor for dårlig overlevelse i bukspyttkjertelen og tykktarmskreft [26, 27]. Således varierer den biologiske rolle 14-3-3ơ i tumorigenese og progresjon av ulike typer av kreft hos mennesker avhengig av spesifikke tumortypen. Her valgte vi ventrikkelkreftstudien prøvene med strenge protokollen for å oppdage 14-3-3ơ uttrykk dynamikk og analysere sine clinicopathological /prognostisk betydninger
. Metoder
Pasienter, En totalt 216 primær mage kreftpasienter fra arkivet ved Institutt for patologi i den tredje og Second Affiliated Hospital of Sun Yat-Sen University (Guangzhou, Kina) ble opprinnelig rekruttert i vår studie. Alle pasientene gjennomgikk initial kirurgisk reseksjon fra mars 2001 til januar 2006. Vi ytterligere screenet pasienter ved hjelp av en streng kriteriene protokoll som følger: mikroskopisk bekreftet adenokarsinom i magen; uten metastatiske sykdommer; ingen tidligere kjemoterapi eller strålebehandling historie; mottar enhetlig regime som førstelinje kjemoterapi etter reseksjon av primærtumor (vi forent som FOLFOX diett: fluorouracil, folinsyre og oksaliplatin), og ingen stråling behandling blir gitt til noen av pasientene; har over 5 års oppfølgingsperioden. Til syvende og sist, ble 52 pasienter med tap av oppfølging og 12 pasienter med mangel på kliniske kjennetegn ekskludert fra denne studien, som fører til 152 mage kreftpasienter utsetter til ytterligere klinisk og overlevelsesanalyse. I detaljer, den totale kohorten besto av 105 mannlige og 47 kvinnelige med median alder på 58,0 år (range, 27-81 år). 103 pasienter ble censused som døden i løpet av 5 års oppfølgingstid, inkludert 5 tilfeller døde av postoperative komplikasjoner og 98 tilfeller døde av tumorprogresjon. Av de samlede pasienter, ble 66 pasienter randomisert ved datamaskin (SPSS 17.0 programvare) til treningssettet, og de resterende 86 pasienter ble randomisert til testing settet. Clinicopathological variable av de to kullene, slik som alder, kjønn, klinisk stadium, tumor invasjon, node scene, og histologi differensiering, ble inkludert i denne studien. Alle tumorer ble klassifisert og iscenesatt i henhold til de reviderte retningslinjene forfektet av International Union mot kreft. Vi fikk tidligere pasienters samtykke og godkjenning fra instituttet forskningsetiske komité for Sun Yat-Sen universitetet for bruk av kliniske materialer som er beskrevet i denne studien.
Tissue microarray konstruksjon Bedrifter Den microarray (TMA) ble konstruert som en metode som tidligere er beskrevet av Xie et al [28]. Kort fortalt ble parafininnstøpte vevsblokker og tilsvarende histologisk hematoxylin og eosin-farget lysbilder kledde for TMA prøvetaking. Interessert kjerne vevsbiopsier (0,6 mm i diameter) ble stanset ut av representative tumorområder og fra tilstøtende vev gastrisk mucosa fra blokker av individuell donorvevet ved hjelp av et trephine (triplikate sylindre fra karsinom vev og en sylinder fra normal tilstøtende mageslimhinne vev). Vevet sylindre ble deretter overført til en mottaker parafin blokk i definerte posisjoner ved hjelp av en vev-arraying instrument (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Immunhistokjemisk analyse og evaluering Bedrifter Den TMA lysbilder ble deparaffinized i xylen , rehydrert gjennom gradert alkohol, neddykket i 3% hydrogenperoksid i 10 minutter for å blokkere endogen peroksidase-aktivitet, og antigen gjenvinnes ved trykk koking i 3 minutter i Tris /EDTA (pH = 8,0). Da objektglassene ble inkubert med det primære antistoff av 14-3-3σ (monoklonalt mus, 01:50, Santa Cruz, SC-100 638) i 1 time ved romtemperatur. Etter å ha blitt inkubert med det sekundære antistoff i 30 minutter, ble prøvene farget med DAB (3, 3-diaminobenzidin). Til slutt ble seksjonene motfarget med hematoksylin, dehydratisert og montert. En negativ kontroll ble oppnådd ved å erstatte det primære antistoff med en normal muse-IgG. Kjente farging-positive tykktarmskreft lysbilder ble brukt som positive kontroller som tidligere rapportert [27].
Den brune granulat i cytoplasma 14-3-3σ ble betraktet som positiv farging. Vi scoret fargeintensitet som følger: 0, ingen farging; 1+, mild flekker; 2+, moderat farging; 3+, intens farging. Arealet av fargingen ble bedømt som følger: 0 = ingen farging av cellene i noen mikroskopiske felt; 1+, < 30% av vev farget positiv; 2+, mellom 30% og 60% farget positiv; 3+, > 60% farget positive. 14-3-3σ uttrykk ble evaluert ved kombinert vurdere av fargeintensitet og forlengelse. Den minimum score når summert (intensitet + forlengelse) var 0, og den maksimale var 6. Kriteriene som brukes i denne studien har blitt allment akseptert tidligere [24]. Uttrykk for 14-3-3σ ble vurdert og scoret av to uavhengige patologer (DRS. F Tang og ZY Feng) som ble blindet til clinicopathological data. Avtalen av disse to patologer på IHC poengsum nådde til 84% (128 identiske score i alt 152 tilfeller), noe som tyder på vår poengsystem var svært solid og reproduserbar. Hvis resultatene som rapporteres av de to patologer var konsistente, ble verdien valgt. Imidlertid ble interobserver uenigheter (ca 6% av totalt antall tilfeller) anmeldt for andre gang, etterfulgt av en avgjørende dom av begge patologer.
Western blot analyse
magekreft og sammenkoblede normale tilstøtende mage slimhinnevevet var bakken og lysert med RIPA-buffer på is før den ble underkastet Western blot-analyse. Proteinkonsentrasjonen ble påvist ved hjelp av Bradford-metoden med BSA (Sigma-Aldrich) som standard. Like mengder av celle og vev-ekstrakt (40 ug) ble underkastet SDS-PAGE og overført til nitrocellulosemembran (Bio-Rad) for antistoff blotting. Membranen ble deretter blokkert og inkubert med mus anti-glyseraldehyd 3-fosfat dehydrogenase (GAPDH) antistoff (Abmart, # M20006) og muse anti-14-3-3σ antistoff (Santa Cruz, SC-100 638).
Valg av poengsum cutoff for 14-3-3σ "positive" uttrykk
ROC-kurve analyse ble utsatt for valg av 14-3-3σ stillingen cutoff i treningssettet, som tidligere beskrevet [29]. I korthet, sensitivitet og spesifisitet for resultatet blir studert ved hver resultatet ble plottet for å generere en ROC-kurve. At resultatet lokalisert nærmest det punkt ved både maksimal følsomhet og spesifisitet, punktet (0.0, 1.0) på kurven, ble valgt som cutoff skår som fører til det største antall tumorer som ble korrekt klassifisert som å ha eller ikke ha utfallet. For å lette ROC kurven analyse, ble overlevelses funksjoner dikotomisert. Overlevelse (død VS. andre (sensurert, levende eller død av andre årsaker))
Oppfølging
Alle pasientene hadde oppfølgings poster for over 5 år. Etter fullførelse av behandlingen, ble pasientene observert ved 3 måneders intervaller i løpet av de første 3 år, og ved 6 måneders intervaller etterpå. Total overlevelse ble definert som tiden fra diagnose til dato for død eller når censused senest dato dersom pasientene var fortsatt i live. Progresjonsfri overlevelse ble definert som tiden fra diagnose til datoen for lokal svikt /fjernmetastaser eller dato for død eller når censused senest dato.
Statistisk analyse
For overlevelsesanalyse, optimal skjæringspunkt for 14- 3-3σ uttrykket ble oppnådd ved ROC-analyse i treningssettet (n = 66). For validering, ble forholdet mellom 14-3-3σ uttrykk, som ble klassifisert av ROC analyse generert cutoff point, og OS, PFS evaluert i testsettet (n = 86) og overordnede pasienter (n = 152). Chi-kvadrat test eller Fishers eksakte test ble benyttet for å vurdere forholdet mellom 14-3-3σ uttrykk og clinicopathological variabler. Den multivariate Cox modellen ble brukt til å beregne hazard ratio og 95% konfidensintervall for pasientenes prognose. Sammenhengene mellom 14-3-3σ uttrykk og OS, ble PFS bestemmes av Kaplan-Meier analyse. Den log-rank tester ble utført for å verdsette forskjellen i overlevelsessannsynlighet mellom pasient undergrupper. Alle p
verdier sitert var tosidig og p
< 0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Statistisk analyse ble utført ved hjelp av SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc, Chicago, IL).
Resultater
14-3-3σ uttrykk i magekreft og normal mage slimhinnevevet
14-3-3σ ble oppdaget i cytoplasmaet og overuttrykt i magekreft (figur 1A og 1 A '), mens normale sammenkoblede gastrisk slimhinnevevet viste nesten negativ uttrykket (figur 1B og 1B). I samsvar med dette resultatet, Western blot-analyse avslørte et lignende funn i magekreft og normale tilstøtende gastrisk mucosal vev (figur 1C). Figur 1 14-3-3σ-ekspresjon i humane primære magekreft og normal tilstøtende gastrisk mucosal vev. (A) 14-3-3σ ble påvist i cytoplasma og overuttrykt i magekreft vev (100 x). (B) Ved siden av ikke-neoplastisk gastrisk mucosal vev viste nesten negativ ekspresjon av 14-3-3σ (100 x). (A '), (B') demonstrerte høyere forstørrelse (400 x) fra området av boksen i (A) og (B) respektivt. (C) Western blot-analyse av 14-3-3σ ekspresjon i representative primær magekreft vev (T) og normalt tilstøtende mucosal vev (N). Lik belastning av protein ble bestemt ved GAPDH.
For å vurdere overlevelse analyse ytterligere og å unngå problemene med multiple skjæringspunkt seleksjon, ble ROC-kurve analyse, for å bestemme stillingen cutoff for 14-3-3σ ekspresjon. Som vist i figur 2A og 2B, er 14-3-3σ stillingen cutoff for OS og PFS i treningssettet var 3,25 (p
< 0,001) og 3,35 (p
= 0,003) respektivt. Vi har valgt således en 14-3-3σ uttrykk score på 3 (> 3 VS. ≤ 3) som uniform cutoff punktet for overlevelsesanalyse i testsettet. Figur 2 Receiver Operating Characteristic (ROC) kurver analyse av 14-3-3σ poengsum cutoff i treningssettet. (A) 14-3-3σ cutoff poeng for total overlevelse i treningssettet. (B) 14-3-3σ cutoff poeng for progresjonsfri overlevelse i treningssettet. Ved hver immunhistokjemisk score, sensitivitet og spesifisitet for utfallet blir studert ble plottet, og dermed generere en ROC kurve. 14-3-3σ poengsum cutoff for total overlevelse, progresjonsfri overlevelse var 3,25 og 3,35 kroner.
14-3-3σ uttrykk og kliniske funksjoner
Den kliniske trekk ved disse to kohorter av pasienter, inkludert alder, kjønn , klinisk stadium, tumor invasjon, node stadium, histologi differensiering, 14-3-3σ ekspresjon, ble sammenfattet i tabell 1. ROC-avledet 14-3-3σ score på 3 cutoff i treningssettet med hell separert testing satt til høy ( 44/86, 51,2%) og lav (42/86, 48,8%) 14-3-3σ uttrykk undergrupper. Høy uttrykk for 14-3-3σ ble i hovedsak funnet i mer avanserte kreft stadier (77/107 i stadium III + IV VS. 12/45 i stadium I + II, p
= 0,004). Videre korrelasjonsanalyse viste at høy 14-3-3σ uttrykk ble korrelert med klinisk stadium (p
< 0,001 for begge sett) og tumorinvasjon (p
< 0,001 for treningssett og p
= 0.005 for testing sett) i begge settene. 14-3-3σ forbundet til pasientens alder i testsettet (p
= 0,01), men ikke i treningssettet. Vi klarte ikke å påvise noen sammenheng mellom 14-3-3σ med andre pasientkarakteristika, blant annet kjønn, node scenen, og histologi differentiation.Table en Association of 14-3-3σ uttrykk med pasientens egenskaper i primærmagekreft
Variabel
Alle saker
Training sett (n = 66)
Testing sett (n = 86)


Høy
uttrykk
lav
uttrykk
p
en
Høy uttrykk
lav
uttrykk
p
en
Alder (år)
≥ 58,00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010
< 58.00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Kjønn
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
Klinisk stadium
I + II
45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0.000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0.000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
Tumor invasjon
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Node scenen
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
Histologi-differensiering
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
en x2 test
b median alder
14-3-3σ uttrykk og overlevelse analyse: univariate overlevelsesanalyse
Som vist i figur 3A og 3C, Kaplan-Meier analyse viste at forhøyet 14-3-3σ uttrykk sterkt spådd en mindreverdig OS i testsettet (p
< 0,001) og overordnede pasienter (p
< 0,001). Videre 14-3-3σ uttrykk var også en kraftig prognostisk faktor for PFS i testsettet (p
< 0,001, figur 3B) og overordnede pasienter (p
< 0,001, figur 3D). Tatt i betraktning den dårlige resultatet i sent stadium magekreft, ble ytterligere analyse utført med hensyn til 14-3-3σ uttrykk i undergrupper av magekreft pasienter med stadium III og IV. Resultatene viste at sammenlignet med 14-3-3σ lav ekspresjon, høy ekspresjon av 14-3-3σ viste en signifikant tendens mot dårligere OS og PFS i magekreftpasienter for fase III (p
= 0,001 i OS og p
= 0,017 for PFS, 4A og 4B) og stadium IV (p
< 0,001 for OS og p
= 0,001 for PFS, figur 4C og 4D). Resultater i den generelle pasienter var lik dem som finnes i testsettet (figur 4E-H). Figur 3 Kaplan-Meier overlevelsesanalyse av 14-3-3σ uttrykk i testsettet og generelle pasienter. (A) Høyere 14-3-3σ uttrykk var nært korrelert med dårlig total overlevelse og (B) progresjonsfri overlevelse i testsettet. (C) Pasienter med høyere 14-3-3σ uttrykk også fått en dårligere total overlevelse og (D) progresjonsfri overlevelse i totale pasienter. I testsett og generelle pasienter, var median varighet av total overlevelse for pasienter med lav og høy uttrykk for 14-3-3σ var 73,0 VS. 17,0 måneder (p
< 0,001) og 73,0 VS. 14.0 måneder (p
< 0,001). Henholdsvis
Figur 4 Kaplan-Meier overlevelsesanalyse av 14-3-3σ uttrykk i undergrupper av magekreft pasienter med stadium III og IV (log-rank test). (A) Sannsynlighet for total overlevelse og (B) progresjonsfri overlevelse av pasienter med stadium III magekreft i testsettet: lavt uttrykk, n = 17; høy ekspresjon, n = 26; (C) Sannsynlighet for total overlevelse og (D) progresjonsfri overlevelse for stadium IV pasienter med magekreft i testsettet: lavt uttrykk, n = 5; høy uttrykk, n = 11. (E) Sannsynlighet for total overlevelse og (F) progresjonsfri overlevelse av pasienter med stadium III magekreft i de overordnede pasienter: lav uttrykk, n = 22; høy ekspresjon, n = 55; (G) Sannsynlighet for total overlevelse og (H) progresjonsfri overlevelse for stadium IV pasienter med magekreft i de overordnede pasienter: lav uttrykk, n = 9; høy ekspresjon, n = 21.
Multivariabel Cox regresjonsanalyse
For å unngå påvirkning forårsaket av univariat analyse ekspresjonen av 14-3-3σ så vel som andre parametre ble undersøkt i multivariat Cox analyse (tabell 2 og tabell 3). I testsettet, 14-3-3σ ble faktisk funnet å være en betydelig uavhengig prognostisk faktor for dårlig OS (hazard ratio, 4,527; 95% CI, 2,274 til 9,012; p
< 0,001; tabell 2) og PFS (hazard ratio, 3,582; 95% CI, 1,717 til 7,475; p
= 0,001; tabell 2). Lignende resultater ble også observert i samlet pasienter (hazard ratio, 5,161; 95% CI, 2,990 til 8,909; p
< 0,001 for OS og risikoforhold, 4,416; 95% CI, 2,482 til 7,856; p
<0,001 til PFS; tabell 3). Av andre parametre, ble klinisk stadium funnet å være en uavhengig prognostisk faktor for pasientens overlevelse i testsettet, men ikke i generelle patients.Table 2 Resultater av multivariat Cox proporsjonal-farer analyse i testing sett
Variabel
For døden
For progresjonsfri overlevelse

Hazard Ratio

95%
konfidensintervall
p
Hazard Ratio
95%
konfidensintervall
p

Age < 58.00
år (VS. ≥ 58 år)
1,101
0,637 til 1,902
0,731
1,056
0,577 til 1,936
0,859
Kjønn Mann
(VS . Female)
0,772
0,408 til 1,461
0,427
1,049
0,525 til 2,094
0,892
klinisk stadium
IV + III (VS. II + I)
3,391
1,156 til 9,949
0,026
5,220
1,529 til 17,823
0,008
Tumor invasjon
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1,066
0,320 til 3,553
0,917
0.730
0,206 til 2,585
0,626
Nodal scenen N 3 + N 2 plakater (VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387 til 1,282
0,251
0,735
0,373 til 1,448
0,373
Differensiering
Low (VS. Høy)
0,862
0,437 til 1,701
0,668
0,936
0,442 til 1,982
0,863
14-3-3σ
Positiv (VS. Negativ)
4,527
2,274 til 9,012
0.000
3,582
1,717 til 7,475
0,001
Tabell 3 Resultater av multivariat Cox proporsjonal-farer analyse i samlede pasienter
Variabel
For døden
For progresjonsfri overlevelse

Hazard Ratio <.no> 95%
konfidensintervall
p
Hazard Ratio
95%
konfidensintervall
p
Age < 58.00
år (VS. ≥ 58 år)
1.046
0,701 til 1,562
0,825
1,036
0654 til 1,642
0,880
Kjønn Mann
(VS . Female)
0,713
0,474 to1.073
0,105
0,733
0,409 til 1,278
0,165
klinisk stadium
IV + III (VS. II + I)
0,988
0.500 to1.952
invasjon
0,972
1,355
0,558 til 3,121
0,476
Tumor T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2,175
0,896 til 5,278
0,086
1,432
0,547 til 3,747
0,465
Nodal scenen N 3 + N 2 plakater (VS. N 1 + N 0)
1,056
0,681 to1.638
0,808
1,243
0,751 til 2,059
0,397
Differensiering
Low (VS. Høy)
0,765
0,470 to1.243
0,279
0,810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
Positiv (VS. Negativ)
5,161
2,990 til 8,909
0.000
4,416
2,482 til 7,856
0.000
diskusjon
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP er en av de vanligste kreftformene i verden og det utgjør en av de mest alvorlige folkehelsen problemet [1]. Tilbakefall og metastasering er fortsatt store problemer for de fattige overlevelse av avansert mage kreftpasienter [30]. Selv om tidligere studier har funnet at mange avvikende uttrykte gener i mage tumor kan hjelpe klassifisere risikoen for pasienten utfallet [5-11], flere nye molekylære markører som kan identifisere tumorprogresjon og forutsi prognosen individuelt er fortsatt et presserende behov. De 14-3-3 familie proteiner har fått mye oppmerksomhet de siste årene på grunn av deres engasjement i kreft ved regulering av ulike cellulære prosesser [14, 15]. Blant de syv isoformene, er 14-3-3σ opp-regulert av p53 som respons på DNA-skade, og sequesters den essensielle mitotisk initieringskomplekset, cdc2-cyclin B1, fra å komme inn i kjernen, og dermed hindre initieringen av mitose [31]. Som et resultat, 14-3-3σ induserer G2 arrest og lar DNA-skade reparasjon. Således forskjellig fra andre medlemmer av familien, 14-3-3σ er definert som en negativ regulator av cellesykluskontrollpunkter og en potensiell tumor-suppressor protein [12]. Men den biologiske rolle 14-3-3ơ i tumorigenese og progresjon av ulike typer av humane tumorer fortsatt kontroversielt. Her, for ytterligere å vise den biologiske funksjon av 14-3-3ơ i magekreft, studerte vi 14-3-3ơ uttrykk dynamikk og analyserte deres clinicopathological /prognostiske betydninger i 152 tumorprøver.
I denne studien, for å utvikle et objektiv 14-3-3σ cutoff poeng for overlevelsesanalyse, brukte vi ROC kurven analyse for å generere en score cutoff i treningssettet. 14-3-3σ uttrykk, som ble klassifisert som høyt og lavt nivå ved ROC-avledet cutoff punkt, ble hovedsakelig funnet å være høyere i mer avanserte tumor trinn (trinn III og IV), noe som indikerer at 14-3-3σ kan bli involvert i magekreft progresjon. Korrelasjonsanalyse videre demonstrert at høy 14-3-3σ ekspresjon var assosiert med klinisk stadium og tumorinvasjon i mage kreft (Tabell 1). Videre i testing sett og generelle pasienter, spådde høy 14-3-3ơ uttrykk en betydelig OS og PFS ulempe over svak 14-3-3ơ uttrykk undergruppe (figur 3). Viktigere var verre prognostisk effekten av økt ekspresjon 14-3-3σ demonstrert i pasienter med stadium III og IV tumorer (figur 4), noe som indikerer at 14-3-3ơ kan være en ny faktor for risiko definisjon i magekreft. I tillegg analyserer multivariabel i testsettet og generelle pasienter viste at 14-3-3ơ uttrykk var en selvstendig prognostisk parameter. Tatt sammen, våre funn i denne studien gitt bevis for at forhøyet ekspresjon av 14-3-3σ i magekreft kan legge til rette for økt ondartet og dårligere prognostisk fenotype av denne tumor.
Med hensyn til den prognostiske virkningen av 14-3-3σ

• Forholdet mellom gut hormoner og glukose homeostase etter fedmekirurgi
• P27Kip1, regulert av glykogen syntase kinase-3β, resulterer i HMBA-indusert differensiering av humane magecancerceller