Aberrant upregulace 14-3-3ơ výrazu slúži ako podradné prognostický biomarker žalúdočné cancer

Aberrant up reguláciu 14-3-3ơ výrazu slúži ako nižší prognostický biomarker pre rakovinu žalúdka
abstraktné
pozadia
14-3 -3ơ je intracelulárny, fosfoserin proteín viažuci a navrhla, aby sa zapojili do vzniku nádorov. Avšak výraz dynamika 14-3-3ơ a jeho klinicko /prognostický význam v ľudských nádoroch sú stále kontroverzné.
Metódy
metódou imunohistochémia (IHC) a Western blot boli použité skúmať expresiu proteínu z 14. -3-3ơ v rakovinou žalúdka a spárovaných normálnych priľahlých žalúdočnej sliznice. Obdržať prevádzkové analýzy charakteristika (ROC) krivky bola použitá na stanovenie medznej skóre pre 14-3-3ơ vyjadrenie v tréningovom sete (n = 66). Pre validáciu, ROC odvodené medzné skóre bol podrobený analýze združenia 14-3-3ơ expresie s výsledkami liečby a klinickými charakteristikami z testovacej kolekcie (n = 86) a celkové pacientov (n = 152).
výsledky
frekvencie a expresie expresné hladiny 14-3-3ơ boli u karcinómu žalúdka výrazne vyššia ako v normálnej žalúdočnej sliznice. Korelačný analýza preukázala, že vysoká expresia 14-3-3ơ v karcinómu žalúdka bol významne koreluje s klinickom štádiu a invázie tumoru. Navyše v sade testovaní a celkových pacientov, Kaplan-Meier analýza ukázala, že zvýšená expresia 14-3-3ơ predpovedal horšie celkové prežívanie (OS) a prežívanie bez progresie (PFS). Dôležité je, že vysoká 14-3-3ơ expresie bola tiež spojená so skrátenou dobou prežitia v štádiu III a IV etapa pacientov s rakovinou žalúdka. Multivariačný analýzy bolo zistené, že expresia 14-3-3ơ bol nezávislý prognostický parameter u karcinómu žalúdka.
Závery
Tieto nálezy poskytujú dôkaz, že vysoká expresia 14-3-3ơ môže byť dôležitá v progresii nádoru a servery ktorá je vo forme nezávislý molekulárnej marker pre zlou prognózou rakoviny žalúdka. Tým, že nadmerná expresia 14-3-3ơ identifikuje pacientov s vysokým rizikom a je nový terapeutický cieľ pre molekulárnu tohto nádoru.
Pozadie
rakovina žalúdka, je jednou z najčastejších príčin úmrtí na nádorové ochorenie na celom svete [1] , a to najmä v východoázijských krajinách, ako je Čína, Japonsko [2]. V roku 2005 tam bolo približne 0,4 milióna nových prípadov a 0,3 milióna úmrtí na rakovinu žalúdka v Číne [3]. Napriek nedávnej pokroky v operačných techník a lekárske ošetrenie, celkovo 5-ročné prežitie rakoviny žalúdka v Číne zostáva na nízkej úrovni u asi 40%. Mnoho štúdií bolo preukázané, že viac genetické zmeny, vrátane nádorových supresorových génov, onkogény, bunkových adhéznych molekúl, regulátory bunkového cyklu, a rastových faktorov, sú zodpovedné za rozvoj a progresiu karcinómu žalúdka [4]. Štúdia rozlúštil mnoho aberantne exprimovaných génov u rakoviny žalúdka, vrátane BMI1
[5], COX-2
[6], HER3
[7], RKIP stroje a STAT3
[8], SPARC
[9] a HER2
[10, 11], ktoré robia hodnotenie rizika u pacientov s karcinómom žalúdka presnejšie. Avšak sľubné molekuly, ktoré majú klinicko /prognostický význam u karcinómu žalúdka zostávajú v podstate obmedzená. Je potrebné ďalej rozumieť molekulárne mechanizmy zapojené do karcinómu žalúdka a identifikovať ďalšie cenné prognostických markerov, aby sa nielen zlepší horšiu prognózu, ale aj poskytnúť nové sľubné ciele terapie.
14-3-3 proteíny sú skupinou o 30 kD dimerizovaných vysoko konzervované proteíny a všadeprítomný vyjadril vo všetkých eukaryotických organizmov [12]. Existuje sedem blízko príbuzné gény (β, γ, ε, η, ζ, O, ▼) v 14-3-3 proteínov rodiny. Tieto gény často tvoria heterodiméry alebo homodimery a viažu sa na viac ako 100 rôznych proteínových ligandov [13, 14]. Tak, 14-3-3 proteíny sú zapojené do mnohých rôznych signalizačných procesov, vrátane bunkovej proliferácie, riadenie bunkového cyklu, apoptózy a malígne transformácie [14, 15]. Medzi siedmimi izotypov, 14-3-3ơ bol pôvodne charakterizovaný ako ľudský prsné epitelu značkou 1 (HME1) a identifikovaný ako tumor potláča génu [12, 16]. Rastúce dôkazy ukázali, že 14-3-3ơ štatisticky významne znížená alebo stratená v dôsledku umlčanie génu prostredníctvom hypermetylace v niekoľkých pevných nádorov [17-22]. Predchádzajúce správy zistené, že znížená expresia 14-3-3ơ predpovedá zlú prežitia u rakoviny prsníka a rakoviny nosohltana [23, 24]. Avšak v rozpore s nádorového supresor úlohu 14-3-3σ, nadmerné expresie 14-3-3ơ v pankreatickej nádorové bunky vedie k rezistencii na lieky, bunkovej migrácie a invázie [25]. Okrem toho, vysoká expresia 14-3-3σ bol nezávislý prognostický faktor pre zlú prežitie v pankreasu a rakoviny hrubého čreva [26, 27]. To znamená, že biologická úloha 14-3-3ơ v tumorigenezi a progresii rôznych typov ľudskej rakoviny sa líši v závislosti od konkrétneho typu rakoviny. Tu sme vybrali vzoriek rakoviny žalúdka s prísnym protokolom k detekcii 14-3-3ơ expresných dynamiku a analyzovať ich klinicko /prognostický významy.
Metódy
Pacienti
celkom 216 pacientov s primárnou rakovinou žalúdka z archívu ústavu patológie v treťom a druhom Affiliated nemocnice Sun Yat-Sen University (Guangzhou, Čína) boli spočiatku prijateľní v našej štúdii. Všetci pacienti absolvovali úvodnú chirurgickú resekciu od marca 2001 do januára 2006. Ďalej sme tienené pacienti s použitím prísne kritériá oprávnenosti protokol takto: mikroskopicky potvrdený adenokarcinóm žalúdka; bez metastatických ochorení; bez predchádzajúcej chemoterapie alebo rádioterapie histórie; prijímanie jednotný režimu ako prvá línia chemoterapiu po resekcii primárneho nádoru (sme zjednotené ako FOLFOX režime: fluóruracil, leukovorín a oxaliplatina), a žiadna liečba žiarenia podávaním niektorého z pacientov; majú viac ako 5 rokov sledovania obdobia. Nakoniec, 52 pacientov so stratou sledovanie a 12 pacientov s deficitom v klinických charakteristík boli vylúčení z tejto štúdie, čo viedlo k 152 pacientov s karcinómom žalúdka dôjde k jeho ďalšie klinické a prežitie analýzy. V detailoch, celková kohorta pozostávala zo 105 samcov a 47 žien s priemerným vekom 58,0 rokov (rozmedzie 27 až 81 rokov). 103 pacientov bolo censused ako smrť počas 5 rokov follow-up doby, vrátane 5 prípadov zomrelo z pooperačných komplikácií a 98 prípadov zomrelo na progresiu nádoru. Celkových pacientov, 66 pacientov bolo náhodne rozdelené na počítači (softvér SPSS 17.0) pre trénovacej množiny, a zvyšných 86 pacientov bolo náhodne rozdelených do testovacej sady. Klinicko-patologické premenné oboch kohorty, ako je vek, pohlavie, klinickom štádiu, invázie nádoru, štádiu uzla, a histológia diferenciácie, boli zahrnuté v tejto štúdii. Všetky nádory boli klasifikované a predstavené podľa revidovaných pokynov presadzovaných Medzinárodnej únie proti rakovine. Získali sme súhlas a na schválenie pacientov z etickou komisiou ústavu pre výskum Sun Yat-Sen University pre použitie klinických materiálov opísaných v tejto štúdii.
Mikroskopické sústavy tkanív výstavbu
tkanive mikročipov (TMA) boli konštruované ako metóda je popísané vyššie podľa Xie et al [28]. Stručne, parafínu zaliate tkaniva bloky a zodpovedajúce histologické Hematoxylin a eosin-nafarbená boli prekryté pre odber vzoriek TMA. Záujem o core tkanivovej biopsie (0,6 mm v priemere) boli razené od reprezentatívnych nádorových oblastí az priľahlej žalúdočnej sliznice tkaniva z blokov individuálneho darcu tkanív pomocou trepanie (trojmo valcov z karcinómu tkaniva a jeden valec z normálneho priľahlej žalúdočnej sliznice tkaniva). Tkanivové vojne potom boli prenesené do príjemcu parafínového bloku v definovaných polohách pomocou tkanivo rozostavili nástroj (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA).
Imunohistochemické analýzu a vyhodnotenie
TMA sklíčka boli zbavené parafínu v xyléne , rehydratované pomocou triedeného alkoholu, ponorí do 3% peroxidu vodíka po dobu 10 minút, aby sa blokovanie endogénnej peroxidázy, a antigén vyvolané tlakom varí po dobu 3 minút v Tris /EDTA (pH = 8,0). Potom boli doštičky inkubované s primárnou protilátkou 14-3-3σ (monoklonálne myšou, 01:50, Santa Cruz, SC-100638) po dobu 1 hodiny pri teplote miestnosti. Potom, čo bol inkubované so sekundárnou protilátkou po dobu 30 minút, vzorky boli farbené DAB (3, 3-Diaminobenzidine). Nakoniec sa rezy boli kontrastne hematoxylínom, dehydratáciu a montáž. Negatívna kontrola bola získaná nahradením primárnej protilátky s normálnym myšiam IgG. Známe kĺzačky kolorektálny karcinóm imunologické-pozitívnych boli použité ako pozitívne kontroly, ako bolo oznámené predtým [27].
Hnedé granule v cytoplazme 14-3-3σ boli považované za pozitívne farbenie. Získali sme intenzitu farbenie nasledujúcim spôsobom: 0, žiadne farbenie; 1+, mierne farbenie; 2+, mierne farbenie; 3+, intenzívne farbenie. Oblasť farbenie bola hodnotená nasledovne: 0, žiadne farbenie buniek v akýchkoľvek mikroskopických polí; 1+, < 30% tkaniva, farbené pozitívne; 2+, medzi 30% a 60% postriekané pozitívne; 3+, > 60% morený pozitívne. 14-3-3σ expresie bola hodnotená v kombinácii hodnotenia intenzity a predĺženie farbenie. Minimálny počet bodov, keď sčítavajú (intenzita + rozšírenie) 0, a maximum 6. Kritériá použitá v tejto štúdii bola široko prijaté skôr [24]. Expresia 14-3-3σ bola hodnotená a pripísal dvoma nezávislými patológov (DRS. F Tang a ZY Feng), ktorí boli oslepení na klinicko-data. Dohoda z týchto dvoch patológov na IHC skóre dosiahol 84% (128 zhodné skóre na celkových 152 prípadov), čo naznačuje, náš skórovacej systém bol veľmi pevný a opakovateľné. Ak sú výsledky vykazované týmito dvoma patológmi boli zhodné, bola zvolená hodnota. Avšak, interobservační nezhody (približne 6% z celkového počtu prípadov) boli hodnotené druhýkrát, po ktorom nasleduje preukaznými rozsudku oboch patológov.
Western blot analýzu
rakovinou žalúdka a párové normálne priľahlé žalúdočnej sliznice bolo rozdrvené a lyžovanie pufrom RIPA na ľade predtým, než je podrobený analýze Western blot. Koncentrácia proteínu bola detekovaná metódou Bradford s BSA (Sigma-Aldrich) ako štandardu. Rovnaká množstvo buniek a tkanív extraktu (40 ug) boli podrobené SDS-PAGE a prenesené na nitrocelulózové membránu (Bio-Rad) pre protilátky blotting. Membrána bola potom blokované a inkubované s myšou anti-glyceraldehyd 3-fosfát dehydrogenázy (GAPDH) protilátka (Abmart, # M20006) a myší anti-14-3-3σ protilátky (Santa Cruz, SC-100638).
Voľba cutoff skóre pre 14-3-3σ "pozitívny" výrazom
analýza ROC krivky bol podrobený výberu 14-3-3σ cut-off skóre v tréningovom sete, ako bolo popísané vyššie [29]. Stručne povedané, citlivosť a špecifickosť pre výsledok bytia študovalo bol pri každej skóre vynesené generovať ROC krivku. Skóre lokalizované najbližšie k bodu, ako na maximálnej citlivosti a špecifickosti, bod (0.0, 1.0) na krivke, bol vybraný ako cut-off skóre čo vedie k čo najväčšiemu počtu nádorov, ktoré boli správne klasifikované ako majúce alebo nemajúce výsledok. Aby bola uľahčená analýza ROC krivky, funkcia prežitie boli dichotomized :. Prežitie (smrť VS. ostatné (cenzurované, živý alebo úmrtia z iných príčin))
Následná kontrola
Všetci pacienti mali nadväzujúce evidenciu pre viac ako 5 rokov. Po ukončení liečby, pacienti boli sledovaní po 3 mesačných intervaloch v priebehu prvých 3 rokov a 6 mesiacov intervaloch. Celková doba prežitia bola definovaná ako čas od diagnózy do dátumu úmrtia alebo pri censused na posledný deň, ak pacienti boli ešte nažive. Prežívanie bez progresie bola definovaná ako čas od diagnózy do dátumu lokálnej poruchy /vzdialených metastáz alebo odo dňa úmrtia alebo pri censused na posledný deň.
Štatistická analýza Apartmán V analýze prežitia, optimálna Miesto rezu na 14- 3-3σ expresie bol získaný ROC analýzy v tréningovom sete (n = 66). Pre overenie, že vzťahy medzi 14-3-3σ výraz, ktorý bol klasifikovaný pomocou ROC analýzy generované medzné bod, a OS, PFS boli hodnotené v testovacej kolekcie (n = 86) a celkové pacientov (n = 152). Tento test chi-square alebo Fisherov presný test bol použitý pre vyhodnotenie vzťahu medzi 14-3-3σ prejavu a klinicko-premenných. Multivariačný Cox proporcionálny nebezpečenstvo model bol využitý odhadnúť pomer rizika a 95% intervaly spoľahlivosti pre výsledky liečby. Vzťahy medzi 14-3-3σ expresie a OS, PFS boli stanovené pomocou Kaplan-Meierovej analýzy. Log-rank testy boli vykonané na hodnotu rozdielu v prežitie pravdepodobnosťou medzi podskupín pacientov. Všetky p
Hodnoty uvedené boli obojstranné a p Hotel < 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú. Štatistická analýza bola vykonaná pomocou SPSS v. 17.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).
Výsledky
14-3-3σ výraz v žalúdku nádorových a normálnych žalúdočnej sliznice
bol detekovaný 14-3-3σ v cytoplazme a je nadmerne exprimovaný v karcinómu žalúdka (obrázok 1A a 1A '), zatiaľ čo normálne párové žalúdočnej sliznice ukázalo takmer negatívne expresie (obrázok 1B a 1b'). V súlade s týmto výsledkom, Western blot analýza ukázala, podobný nález v žalúdku nádorových a normálnych priľahlých žalúdočnej sliznice (obrázok 1C). Obrázok 1 14-3-3σ expresie v ľudských primárnych karcinómu žalúdka a normálnym priľahlé žalúdočné slizničnej tkanivo. (A) 14-3-3σ bola detekovaná v cytoplazme a nadmerne exprimovaný v žalúdočnej tkanive rakoviny (100 x). (B) V tesnej blízkosti nenádorových žalúdočnej sliznice tkanív ukázala takmer negatívne expresiu 14-3-3σ (100 x). (A '), (B') preukázali vyšší zväčšenie (400 ×) z oblasti boxu v (A) a (B), resp. (C) Analýza Western blot 14-3-3σ expresie v reprezentatívnych žalúdočnej tkanive rakoviny (T) a normálne priľahlé slizničnej tkanivo (N). Rovné nakladanie proteínu bola určená GAPDH.
Ak chcete ďalej posudzuje analýzu prežitia a vyhnúť sa problémom viacnásobný výber Miesto rezu, analýza ROC krivka bola použitá na stanovenie medznej skóre pre 14-3-3σ vyjadrenie. Ako je znázornené na obrázku 2A a 2B je 14-3-3σ cut-off skóre pre OS a PFS v tréningovom sete bol 3,25 (p Hotel <0,001) a 3,35 (p
= 0,003), resp. Preto sme vybrali 14-3-3σ výraz skóre 3 (viac ako 3 vs. ≤ 3) ako jednotný limitná bod pre analýzu prežitie v testovacej súprave. Obrázok 2 Receiver pracuje charakteristickej (ROC) krivky analýza 14-3-3σ cut-off skóre v tréningovom sete. (A) 14-3-3σ limitná bod pre celkové prežitie v tréningovom sete. (B) 14-3-3σ limitná bod pre prežitie bez progresie v tréningovom sete. Na každom imunohistochemické skóre, citlivosť a špecifickosť pre výsledok bol študovaný bola vynesená, čím sa vyvíja ROC krivky. 14-3-3σ cutoff skóre pre celkové prežitie, prežitie bez progresie bol 3,25 a 3,35, resp.
14-3-3σ expresie a klinické rysy
klinické príznaky týchto dvoch kohorty pacientov, vrátane veku, pohlavia , klinické štádium, nádorové invázie, stupeň uzla, histológia diferenciácie, 14-3-3σ výraz, boli zhrnuté v tabuľke 1. ROC odvodený 14-3-3σ medzné skóre 3 pri výcviku úspešne nastavená oddelene testovanie zasadený do vysokej ( 44/86, 51,2%) a nízky (štyridsať dva osemdesiat šestiny, 48,8%) 14-3-3σ výraz podskupiny. Vysoká expresia 14-3-3σ bola nájdená hlavne v pokročilejších štádiách nádorových (77/107 v stupni III + IV VS. 12/45 v štádiu I + II, s
= 0,004). Okrem toho, korelačný analýza preukázala, že vysoká 14-3-3σ expresie bola korelované s klinickým štádiom (p Hotel < 0,001 pre sadu) a invázie nádoru (p Hotel < 0,001 pre výcvik set a p =
0,005 pre testovanie sady) v oboch sadách. 14-3-3σ spojené s vekom pacientov z testovacej kolekcie (p
= 0,01), ale nie v tréningovom sete. Nepodarilo sa nám zistiť akýkoľvek vzťah medzi 14-3-3σ s inými charakteristikami pacienta, vrátane pohlavia, stupni uzla, a histológia differentiation.Table 1 Asociácie 14-3-3σ prejavu s charakteristikami chorého v primárnej rakovinou žalúdka
Variabilné
všetkých prípadoch
Tréningová súprava (n = 66)
Testovanie set (n = 86)


Najvyššieho
prejavu
Low
výraz
p
čo by
spoločností
vysoká
výraz
Low
výraz
p
Vek (roky)
≥ 58,00 b
83
25 (30,1%)
13 (15,7%)
0,627
29 (34,9%)
16 (19,3%)
0,010 Hotel < 58,00
69
20 (29,0%)
8 (11,6%)
15 (21,7%)
26 (37,7%)
Pohlavie
Male
105
29(27.6%)
16(15.2%)
0.340
31(29.5%)
29(27.6%)
0.887
Female
47
16(34.0%)
5(10.6%)
13 (27,7%)
13 (27,7%)
klinickom štádiu
I + II 45
6 (13,3%)
12 (26,7%)
0,000
6 (13,3%)
21 (46,7%)
0,000
III + IV
107
39 (36,4%)
9 (8,4%)
38 (35,5 %)
21 (19,6%)
invázie tumoru
T1+T2
23
0(0%)
7(30.4%)
0.000
3(13.0%)
13(56.5%)
0.005
T3+T4
129
45(34.9%)
14(10.9%)
41 (31,8%)
29 (22,5%)
Node javiskovej
N0+N1
101
32(31.7%)
15(14.9%)
0.979
24(23.8%)
30(29.7%)
0.105
N2+N3
51
13(25.5%)
6(11.8%)
20 (39,2%)
12 (23,5%)
histológia-diferenciačný
Well
51
15(29.4%)
11(21.6%)
0.123
11(21.6%)
14(27.5%)
0.395
Poorly
101
31(30.7%)
10(9.9%)
33 (32,7%)
28 (27,7%)
test x2
b priemerným vekom
14-3-3σ expresie a analýzy prežitie: jednorozmerné analýze prežitie
Ako je znázornené na obrázku 3A a 3C, Kaplan-Meier analýza ukázala, že zvýšená 14-3-3σ výraz silne predpovedá horšie OS z testovacej kolekcie (p Hotel <0,001) a celkovo pacientov (p Hotel &0,001). Navyše 14-3-3σ výraz bol tiež silný prognostický faktor pre PFS v testovacej kolekcie (p Hotel < 0,001, 3B) a celkovo pacientov (p Hotel < 0,001, 3D obrázok). Vzhľadom k tomu sa zlou prognózou u rakoviny žalúdka neskorej fáze, ďalšia analýza bola vykonaná s ohľadom na 14-3-3σ výraz v podskupín pacientov s karcinómom žalúdka s pódiom III a IV. Výsledky ukázali, že v porovnaní s 14-3-3σ nízkou expresiou, vysoká expresia 14-3-3σ vykazovali významný trend smerom k horšej OS a PFS u pacientov s rakovinou žalúdka štádia III (p = 0,001 pre
OS a p
= 0,017 pre PFS obrázku 4A a 4B) a štádium IV (p Hotel < 0,001 pre OS a p = 0,001
pre PFS, obrázok 4C a 4D). Výsledky v celkových pacientov boli podobné tým, ktoré nachádzajú v testovacej kolekcie (obrázok 4E-H). Obrázok 3 Kaplan-Meierovej analýzy prežitia 14-3-3σ prejavu v sade testovania a celkové pacientmi. (A) Vyššia 14-3-3σ expresie bola v úzkej korelácii so zlou celkové prežitie a (B) prežívania bez progresie v testovacej súprave. (C) Pacienti s vyšším 14-3-3σ prejave tiež získal horšie celkové prežívanie a (d) prežívania bez progresie celkových pacientov. V sade testovania a celkových pacientov a medián celkového prežitia u pacientov s nízkou a vysokou expresiou 14-3-3σ bolo 73,0 VS. 17.0 mesiacov (p Hotel < 0,001) a 73,0 VS. 14.0 mesiacov (p Hotel <0,001)., Resp
Obrázok 4 Kaplan-Meierovej analýzy prežitia 14-3-3σ prejavu v podskupín pacientov s karcinómom žalúdka s štádia III a IV (log-rank test). (A) Pravdepodobnosť celkové prežitie a (B) prežívanie bez progresie u pacientov s etapa III rakoviny žalúdka v testovacej súprave: nízku expresiou, n = 17; vysoká expresia, n = 26; (C), pravdepodobnosť celkového prežitia a (D), prežitie bez progresie zo stupňa IV u pacientov s rakovinou žalúdka v testovacej súprave: nízku expresiou, n = 5; vysoká expresia, n = 11. (E) Pravdepodobnosť celkové prežitie a (f) prežívanie bez progresie u pacientov s etapa III rakoviny žalúdka v celkovom pacientov nízkou expresiou, n = 22; vysoká expresia, n = 55; (G) Pravdepodobnosť celkové prežitie a (H), prežitie bez progresie etapy IV u pacientov s rakovinou žalúdka v celkovom pacientov nízka prejavu, n = 9; vysoká expresia, n = 21.
Multiviariačnou Cox regresnej analýzy
Aby sa zamedzilo vplyvu spôsobeného jednorozmerné analýze expresie 14-3-3σ, ako aj ďalšie parametre bola skúmaná v viacrozmerné analýzy Cox (tabuľka 2 a tabuľka 3). V testovacej kolekcie, bolo skutočne zistené, 14-3-3σ byť významný nezávislý prognostický faktor pre zlú OS (pomer rizika, 4.527; 95% CI, 2,274 až 9,012; p Hotel &0,001, tabuľka 2) a PFS (pomer rizika, 3,582; 95% CI 1,717 až 7,475; p = 0,001
, tabuľka 2). Podobné výsledky boli pozorované aj u celkových pacientov (pomer rizika, 5,161; 95% CI, 2,990-8,909; p Hotel < 0,001 pre OS a pomer rizika, 4.416; 95% CI, 2.482-7.856; p Hotel <0,001 pre PFS, tabuľka 3). Z ostatných parametrov bolo zistené, že klinické štádium byť nezávislý prognostický faktor pre prežitie pacienta v testovacom sete, ale nie v celkovom patients.Table 2 Výsledky viacrozmerné analýzy Cox proporcionálne nebezpečenstvo z testovacej kolekcie
Variabilné
za smrť
Pre prežitie bez progresie

Hazard Ratio

95% interval spoľahlivosti
p
Hazard Ratio
95% interval spoľahlivosti
p

Age < 58.00
rokov (oproti ≥ 58 rokov)
1,101
0,637 až 1,902 0,731
1,056
0,577 až 1,936 0,859
Pohlavie Muž
(VS . Žena)
0,772
0,408 1,461 do 0,427
1,049 0,525
na 2.094
0,892
Klinické štádium
IV + III (VS II + I)
3,391
1,156-9,949
0,026 5,220
1,529 až 17,823 0,008
invázie tumoru
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1)
1,066 0,320
na 3.553
0,917 0,730
0,206 až 2.585
0,626
Uzlové fázy N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
0,705
0,387-1,282
0,251 0,735
0,373 až 1,448 0,373
diferenciácie
nízka (VS. Vysoká)
0,862 0,437
na 1.701
0,668 0,936
0,442 až 1.982
0,863
14-3-3σ
Positive (Negative VS.)
4,527
2,274-9,012
0,000 3,582
1,717 až 7,475 0,001
Tabuľka 3 Výsledky viacrozmerné analýzy Cox proporcionálny nebezpečenstvo s celkovým pacientov
Variabilné
za smrť
Pre prežitie bez progresie

Hazard Ratio
95% interval spoľahlivosti
p
Hazard Ratio
95% interval spoľahlivosti
p
Age < 58.00
rokov (oproti ≥ 58 rokov)
1,046
0,701 až 1,562 0,825
1,036
0654 na 1,642 0,880
Pohlavie Muž
(VS . Žena)
0,713 0,474
to1.073
0,105 0,733
0,409 až 1,278 0,165
Klinické štádium
IV + III (VS II + I)
0,988 0,500
to1.952
0,972 1,355
0,558-3,121
0,476
invázie tumoru
T 4 + T 3 (VS. T 2 + T 1 )
2.175
0,896 až 5.278
0,086 1,432
0,547 až 3.747
0,465
Uzlové fázy N 3 + N 2
(VS. N 1 + N 0)
1,056 0,681
to1.638
0,808 1,243
0,751 až 2.059
0,397
diferenciácie
nízky (VS. High)
0,765 0,470
to1.243
0,279 0,810
0,478 to1.375
0,463
14-3-3σ
Positive (Negative VS.)
5,161
2,990 - 8,909
0,000 4,416
2,482 až 7,856 0,000
diskusiu
rakovinou žalúdka je jedným z najčastejších nádorových ochorení na celom svete a to predstavuje jednu z najvážnejších verejného zdravia problém [1]. Recidívy a metastáz sú stále hlavnými problémami pre chudobných prežitie pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka [30]. Aj keď predchádzajúce štúdie ukázali, že mnoho aberantne exprimovaných génov v žalúdku nádoru môže pomôcť zaradiť riziko výsledky liečby [5-11], viac nových molekulárnych markerov, ktoré môžu identifikovať progresiu nádoru a predpovedať prognózu jednotlivo sú stále naliehavo potrebné. 14-3-3 proteínov rodiny získali veľkú pozornosť v posledných rokoch v dôsledku ich zapojenie do rakovín reguláciu rôznych bunkových procesov [14, 15]. Medzi siedmimi izoforiem, 14-3-3σ je up-regulovaná p53 ako reakcia na poškodenie DNA a izoluje sa základnými mitotické iniciačný komplex, cdc2-cyklin B1, od vstupu do jadra, čím sa zabráni iniciácii mitózy [31]. V dôsledku toho 14-3-3σ indukuje G2 zástavu a umožňuje opravu poškodenia DNA. Tak, líši od ostatných členov rodiny, 14-3-3σ je definovaná ako negatívny regulátor kontrolných bodov bunkového cyklu a potenciálny tumor-supresorové proteín [12]. Avšak, biologická úloha 14-3-3ơ v tumorigenezi a progresii rôznych typov ľudských nádorov zostáva kontroverzné. Tu k ďalšiemu odhaliť biologickú funkciu 14-3-3ơ v rakoviny žalúdka, sme študovali 14-3-3ơ výrazom dynamiku a analyzujú ich klinicko /prognostických významov u 152 nádorových vzoriek.
V tejto štúdii vypracovať objektívny 14-3-3σ limitná bod pre analýzu prežitie sme použili analýzu ROC krivky pre generovanie medzné skóre v tréningovom sete. 14-3-3σ výraz, ktorý bol klasifikovaný ako vysoké a nízke úrovne u ROC odvodené medzné bod, sa najmä zistilo, že je vyššia, v pokročilejších štádiách nádorov (fázy III a IV), čo naznačuje, že by mohol byť 14-3-3σ podieľajú na progresiu rakoviny žalúdka. Korelačný analýza ďalej ukázala, že vysoké 14-3-3σ expresie bola spojená s klinickom štádiu a invázie nádoru u rakoviny žalúdka (tabuľka 1). Navyše v sade testovaní a celkových pacientov s vysokým 14-3-3ơ výraz predpovedalo významné OS a PFS nevýhodu v porovnaní s nízkou 14-3-3ơ expresného podskupiny (obrázok 3). Dôležité je, že ešte horšie prognostický vplyv zvýšenej expresie 14-3-3σ sa preukázala u pacientov s štádiu III a IV nádorov (obrázok 4), čo naznačuje, že by mohol byť 14-3-3ơ nový faktor pre stanovenie rizika rakoviny žalúdka. Okrem toho mnohorozmerné analýzy z testovacej kolekcie a celkové pacientov bolo zistené, že 14-3-3ơ výraz bol nezávislý prognostický parametrov. Celkovo vzaté, naše výsledky tejto štúdie poskytli dôkazy, že zvýšené expresie 14-3-3σ u karcinómu žalúdka môže uľahčiť zvýšené malígny a horšie prognostické fenotyp tohto nádoru.
S ohľadom na prognostického dopadu 14-3-3σ

• Vzťah medzi črevné hormóny a homeostázy glukózy po bariatrickej chirurgie
• P27Kip1, regulované kináza glykogénsyntázu-3p, vedie k diferenciácii HMBA indukovanej ľudských buniek karcinómu žalúdka