Odkrivanje promotor hypermethylation otoka CpG elektronskega kadherina v želodcu srca odkrivanje adenocarcinoma

od promotorja hypermethylation otoka CpG elektronskega kadherina v želodčni srca adenokarcinom
Abstract
Cilj
Nenormalna hypermethylation za CpG otokov, povezanih z zaviralnih genov lahko povzroči transkripcijske utišanja v novotvorb. Cilj te raziskave je bil raziskati promotor metilacije in izražanje E-kadherina gena v želodčni srca adenokarcinom (GCA).
Metode
ugnezdeni pristop PPN, smo uporabili metodo imunohistokemija in RT-PCR oziroma preizkusiti metilacijskega statusa otoka 5 'CpG elektronskega kadherina, njegove proteinske ekspresije in mRNA izražanja v tumorjih in pripadajočega normalnih tkivih.
rezultatov
E-kadherina metiliramo pri 63 od 92 (68,5%) tumorskih osebke, ki so je bila bistveno višja od tiste, ki v ustreznih normalnih tkiv (P < 0,001). Metilacije frekvence stadija III in IV tumorskih tkivih, je bila bistveno višja kot v fazi I in II tumorskih tkivih (P = 0,01). Stanje metilacija slabe diferenciacije skupini je znatno višja kot zmerno in slabe zmerno skupin diferenciacije (P < 0,01). Z imunskim barvanjem 51 od 92 tumor tisssues dokazali heterogeno, pozitivno imunskim barvanjem tumorskih tkiv (44,6%), ki se znatno razlikujejo od izravnanih normalnih tkiv (P < 0,001). Pozitivna imunskim barvanjem stadija III in IV tumorskih tkivih, je bila bistveno nižja od fazi I in II tumorskih tkivih (P < 0,01). Slaba diferenciacija skupina je tudi bistveno nižji kot zmerno in slabe zmerni skupin diferenciacije (P < 0,05). 80 odstotkov tumorskih tkiv z E-kadherina gena metiliran dokazale, inaktiviran mRNA izražanja.
Sklepi
Visoka metilacijskega statusa otoka 5 'CpG E-kadherina gena je lahko eden od mehanizmov za razvoj želodčnega srčnega adenokarcinoma .
Ključne besede
E-kadherina metilacija želodca srčni adenokarcinom Uvod
E-kadherina je M r 120.000 transmembranski glikoprotein, izraženo na epitelnih celic in je odgovoren za homophilic, Ca 2 + -dependent intercelularno oprijema, ki je bistvenega pomena za vzdrževanje normalne strukture tkiva v epitelijskih celic [1]. Citoplazemski domena E-kadherina veže a-, β- in gama-catenins, ki so v zameno, povezane z actins, in ta interakcija je ključnega pomena za njeno delovanje [2]. interakcije Cell-celic in celične-matrix Pomembno je vključenih v neoplastične transformacije in metastaz [3, 4]. oprijema pomanjkljiva celica lahko prispeva k izgubi zaviranje rasti in izgubo celično adhezijo kontaktnega lahko predstavljajo sposobnost rakavih celic prečkati normalnih mej tkiv in metastaz [5]. Pomen E-kadherina za ohranjanje adhezijo celic pomeni, da lahko njen disfunkcija igrajo pomembno vlogo pri tumorigeneze. Izguba E-kadherina ekspresijo pojavlja v različnih človeških tumorjev in hipotezo, da je pomemben korak napredovanja od nastanka tumorja na invazije in metastaz [6].
V zadnjih letih so številne študije na kritično vlogo E-kadherina v tumorigeneze. Dokazano je, da je zarodne linije mutacije gena E-kadherina povezano z družinsko želodca in kolorektalnega raka [7, 8]. Poleg tega je bilo ugotovljeno tudi somatske mutacije E-kadherina želodčnega raka in alelov izgube E-kadherina locus na 16q22.1 so poročali v različnih epitelijskih tumorjev kot dojk, jajčnikov, endometrija in raka prostate [9, 10] . Razen za to genskih sprememb, epigenetsko sprememba vključuje hypermethylation na 5 'otoku CpG v promotor E-kadherina je odgovoren tudi za transkripcijske represijo gena [11]. Znano je, da lahko nenormalno hypermethylation od CpG otokov, povezanih z zaviralnih genov vodi do transkripcijske utišanje v neoplazije [12]. Dejansko,-metilacija povezana utišanje E-kadherina predstavlja najpogostejši vzrok za njeno inaktivacijo v več rakavih obolenj, kot so jetra, prostate, dojk in požiralnika [13-15].
Želodčni srčne adenokarcinom (GCA), ki je bila prej registrirana kot požiralnika raka ali raka želodca, je bil diagnosticiran neodvisno zelo zadnjih letih zaradi izboljšanja zgodnjega endoskopske presejanja in patološko diagnozo. Kitajska je država z visoko pojavnostjo regijah GCA, posebej v Taihang gore severne Kitajske. Zunanji dejavniki, vključno s pomanjkanjem prehrane, nezdravih življenjskih navad, uživanje alkohola in tobaka, so patogeni okužbe na splošno veljajo za dejavnike tveganja za razvoj GCA na Kitajskem [16-18]. Vendar pa lahko le podmnožica posameznikov, ki so izpostavljeni zgoraj navedenih zunanjih dejavnikov tveganja bi razvili GCA, kar kaže, da so številne genetske in epigenetski dogodki prispevajo k napredovanju GCA. Zdaj je bolj znano, da je epigenetsko utišanje genov z promotorja CpG hypermethylation pomemben alternativni mehanizem za inaktivacijo zaviralnih genov in tumorjev, povezanih genov raka [19]. Mutacije gena E-kadherina so redki GCA, zato v tej študiji smo ocenili vlogo metiliranjem otoka 5 'CpG elektronskega kadherina in njeno skladnost z zmanjšano E-kadherina izražanja v GCA.
Metode
Bolniki in vzorci
so Tumor in v parih običajne vzorce tkiva, pridobljena od 92 bolnikov. Te tkiva so bile razdeljene v dva vzporedna dela, en del pa je zamrznemo in shranimo pri -80 ° C dokler je bila vzeta RNK, je drugi del formalinom fiksno in parafin-vgrajeni. Primeri so bili vsi stacionarno zdravljenje za kirurško zdravljenje v četrtem odvisnimi bolnišnici, Hebei Medical University med 2004 in 2006. histoloških tumorja tipkanje je bila izvedena na podlagi odstranjenimi osebkov v oddelku za patologijo isti bolnišnici. Vse želodčne srčne karcinomov so adenokarcinomov s svojimi žarišča na gastroezofagealnem prehodu, tj od 1 cm nad do 2 cm pod stičišča med koncem cevnega požiralniku in v začetku saccular želodca [20]. Informacije o TNM uprizoritve je na voljo od bolnišničnih posnetkov in patološko diagnozo. Študija je odobril Odbor za etiko Hebei Cancer Institute in je bila pridobljena privolitev vseh zaposli predmetov.
Metiliranje specifične verižne reakcije s polimerazo (MSP) za E-kadherina promotorja metilacije
genomske DNK iz želodca srčnih adenokarcinome in sosednje nemaligna sekcije smo izolirali iz-parafin vgrajeni diapozitivi tkiva s standardnimi metodami, ki uporabljajo poenostavljeno proteinsko K metodo prebave. Preučiti vzorce DNA metilacije smo obdelamo genomske DNA z natrijevim bisulfitom, kot smo že prej [21] opisano. Na kratko, 2 ug DNA smo denaturiran z 2 M NaOH pri 37 ° C za 10 minut, čemur sledi inkubacija s 3 M natrijevega bisulfita, pH5.0, pri 50 ° C 16 ur. Bisulfit obdelano DNA smo nato očistili (DNK čiščenje Kit; Promega, Madison, Wisconsin, ZDA), inkubiran s 3 M NaOH pri sobni temperaturi pet minut, oborimo z 10 M amonijevega acetata in 100% etanola, sprali z 70% etanola in resuspendirali v 20 ul destilirane vode.
ugnezdeni pristop PCR smo uporabili za določitev metilacijskega statusa v E-kadherina otoku CpG v Exon 1 (zaporedje -126 bp do +144 bp glede na prepisu začetku, GenBank pristop številka D49685 ), ki je bila predhodno objavljene [15]. V prvem krogu PCR smo pomnožili 100 ng bisulfit-obdelanega DNK. So zaporedja primerji so bili 5'-GTTTA GTTTTGGGGAGGGGTT-3 '(čut) in 5'-ACTAC TACTCCAAAAACCCATAACTAA-3' (antisense) in pogoji kolesarske bili en cikel 95 ° C za 5 minut, čemur sledi 30 ciklov 95 ° C za 30 sekund, 50 ° C za 30 sekund, 72 ° C za 30 sekund, in končno podaljšanje pri 72 ° C 5 min. Velikost proizvoda po tem začetnem PCR reakcijo je 270 bp. V drugem krogu PCR je bil ta produkt razredčimo 1: 50 v vodi, in so bile uporabljene 2 xl redčenju za PPN. Ugnezdene oligonukleotidov zaporedja za E-kadherina za metiliranega reakcije so bile 5'-TG TAGTTACGTATTTATTTTTAGTGGCGTC-3 '(čut) in 5'-CGAATACGATCGAATCGAACCG-3' (antisense) in oligonukleotidov sekvence za nemetiliran reakcije so bile 5'-TGGTTGTAGTTATGTATTTATT TTTAGTGGTGTT-3 "(smisel) in 5'-ACACCAAATA CAATCAAATCAAACCAAA-3 '(antisense). Parametri PCR so bili, kot je navedeno zgoraj, razen da so žarjenje temperature za metilnim in nemetiliran reakcij 64 ° C in 62 ° C oz. Velikosti metilni in nemetiliran reakcij izdelkov so 112 in 120 bp, oz. rak dojke celična linija MB-MDA-231, kar kaže metilacije in utišanje E-kadherina in slepi reagenti so bili uporabljeni kot pozitivne in negativne kontrole.
Imunohistokemijsko za E-kadherina
E-kadherina izražanja je bila določena s imunskim barvanjem z avidin-biotin kompleksno metodo imunoperoksidazni, ki je bila izvedena na vzporednih histopatoloških oddelkov iz-parafin vgrajeni oddelku tumorja in združeno normalno tkivo. Endogene peroksidaze smo blokirali s 3% vodikovega peroksida za 10 minut, čemur sledi pridobivanje mikrovalovno antigena devet minut pri 98 ° C v 10 mM natrijevega citratnega pufra (pH 6,0) ter inkubiramo v 2% normalnem konjski serum za zmanjšanje nespecifične vezave. Drsniki bile zaporedno inkubirali s primarnim monoklonskih, miška anti-E-kadherina protitelo (1: 100 redčenje v fosfatnim pufrom, Santa Cruz, SC-8426) preko noči pri 4 ° C, biotinilirano sekundarna protitelesa 30 minut pri 37 ° C in ABC reagent za 45 min pri 37 ° C. 0,5% 3,3'-Diaminobenzidine (Sigma, St. Louis, MO) uporabimo kot chromagen. Za negativno kontrolo smo primarno protitelo nadomesti z miško IgG. Drsi z normalnim želodčne sluznice smo uporabili kot pozitivno kontrolo.
Merjenje mRNA ekspresije E-kadherina
RNA je bila ekstrahirana iz zamrznjenega profilnih tkiv s standardnimi metodami, ki uporabljajo TRIzola (Invitrogen, ZDA). cDNA smo sintetizirali s pomočjo Advantage RT-za-PCR kit (Clontech, Palo Alto, CA) z oligo (dT) polnjenju, kot je priporočeno v protokolu določeno. Gen GAPDH smo uporabili kot kontrolo. Primer zaporedja E-kadherina bilo 5 ° ‰ -CGACCCAACC CAAGAATCTA-3 ° ‰ (občutek) in 5 ° ‰ -AATGGCAG GAATTTGCAATC-3 ° ‰ (antisense), so primer zaporedje GAPDH 5 ° ‰ -GGGAAACTGTGGCGT GAT-3 ° ‰ (občutek) in 5 ° ‰ -GTGGTCGTTGAGGG CAAT-3 ° ‰ (antisense), je bila velikost izdelka 202 bp in 342 bp, oz. PCR produkti so razrešili na 2% agaroznem gelu in intenzitete signala so količinsko, z uporabo sistema računalniške slikanje. Ravni genov transkriptov kvantificiramo kot razmerje intenzitete E-kadherina signala z intenzivnostjo P-aktina. Inaktiviran izraz je dosegel ko je bila ekspresija E-kadherina gena v vzorcu tumorja z < 25% njegovega izražanja v ustreznem normalnem vzorcu.
Statistična analiza
Statistična analiza je bila opravljena s pomočjo SPSS10.0 programski paket (SPSS Company, Chicago, Illinois, ZDA). Fisherjev natančni test in hi-kvadrat test smo uporabili za oceno statistične značilnosti razlik in primerjati kategorični združenja. Obojestransko testi so bili uporabljeni za določitev pomena in vrednosti P manj kot 0,05 šteli za statistično značilne za vse teste statistične.
Rezultati
predmet značilnosti
Kot je prikazano v tabeli 1, je bilo 92 bolnikov GCA pridobljene v te raziskave, vključno s 73 moških in 19 ženskih, starost med 38 ~ 76, povprečna starost 56,9. Vsi primeri so bili razdeljeni v 4 tumorja-node-metastaz (TNM) stopnje po UICC standardom, 8 I. stopnjo (8,7%), 32 stopnji II (34,8%), 38 stadija III (41,3%), 14 v koraku IV (15,2%). Glede na patoloških faze, so bili primeri, razvrščeni v 3 skupine, 42 (45,7%), zmerne skupine, 34 (36,9%) slabe zmerno skupine in 16 (17,4%), slabe group.Table 1 Klinični in patološke karakteristike bolniki GCA
Skupine
n (%)
seks
Moški
73 (79,3)
Moški
19 (20,7 )
Povprečna starost v letih (SD)
56.9 (8.86)
stopnjo TNM
sem
8 (8.7)
II
32 (34,8)
III
38 (41,3)
IV
14 (15,2)
Patološka diferenciacije tumorja
zmerno
42 (45,7)
slabe zmerno
34 (36,9)
slaba
16 (17,4)
analiza Metiliranie E-kadherina gena
analiza metilacije je bila uspešno izvedena v vseh tumorja in seznanjen normalnih vzorcev tkiva (slika 1). Za 10% vzorcev je bila analiza metilacija ponovi za nadzor kakovosti. V 63 (68,5%) od 92 GCA tumorjev E-kadherina bila odkrita metilacija, medtem ko je seznanjenih normalnih tkivih je bila odkrita šele v 10 (10,9%), E-kadherina metilacija. Pogostost E-kadherina metiliranjem tumorskih tkiv je bistveno višja od parnih normalnih tkiv (P < 0,001). Ko stratificiran za TNM stopnjah, Pogostost E-kadherina genske metilacije bolnikov GCA s stopnjo III in stadiju IV (78,8%) je bila bistveno višja kot pri bolnikih, GCA s stadijem I in fazo II (55%) (χ2 = 5,96, p = 0,01 ). Ko stratificirali patoloških fazah, so E-kadherina gen metilacije frekvence so zmerne, slaba zmerno in slabo skupini 52,4%, 73,5% in 100%, pogostost E-kadherina genske metilacije slabe skupine občutno višji kot v zmerno in slabo -moderate skupine (χ2 = 8,92, P = 0,003) (tabela 2). Slika 1 Analiza metiliranje E-kadherina v tumorsko tkivo (T) in ustreza normalno tkivo (N). u: označuje prisotnost nemetiliran geni; m: označuje prisotnost metilirani genov. Primerih 1 in 2: tumorsko specifični metilacija; Primer 3: tumor popolnoma metiliran, ker ima ustrezna normalno tkivo zelo šibek trak dokazuje metilacije; Primer 4: oba tumorja in ustreznega normalnega tkiva nemetiliran
Tabela 2 E-kadherina metilacije in Imunohistokemične značilnosti obarvanje bolnikov GCA
<. col> Skupina
stanje metilacija
P
Imunohistokemijsko
P
M
U
-
+
stage TNM
sem
4
4
2
6
II
18
14
13
9
III
29
9
26
12
IV
12
2
0.015a
10.
4
0.002a
patološko diferenciacijo tumorja
zmerna
22
20
20
2
slabo zmerno
25
9
18
16
slabo
16
0
0.003b
13
3
0.022b
v vrednosti P od stadija III in IV bolnikov pred stadijem I in bolnikov II, b P vrednosti slaba diferenciacija skupina proti zmerni in slabe Moderirate skupin
imunskim barvanjem E-kadherina gena
Kot je prikazano v tabeli 2, je obarvanje heterogeni 51 tumorskih tkivih, tumorske celice z zmanjšano membranskih E-kadherina obarvanja zmešamo z tumorskih celicah Prikaz močno membranskih obarvanje (slika 2). Pogostost izražanja proteinov je v tumorskih tkivih 44,6%, medtem ko je v paru običajne vzorce tkiva vse dokazali difuzno močno membranskih E-kadherina madeže. Pogostost izražanja proteinov je bila bistveno drugačna od tumorja in seznanjenih normalnih tkivih (P < 0,001). Ko stratificiran za TNM stopnjah, Pogostost E-kadherina gen beljakovin izražanja stadija III in IV tumorskih tkiv (30,8%) je bila precej nižja kot v fazi I in II tumorskih tkiv (62,5%) (χ2 = 9,21, P = 0,002), . Pogostost E-kadherina gen beljakovin izraz slabe skupine znatno nižji od tistega v zmernih in revnih zmernim skupin (χ2 = 5.23, P = 0,022). Slika 2 E-kadherina immunostain v GCA tkivu. A: pozitivno obarvanje (normalno tkivo). B:. Negativno obarvanje (GCA tkivo)
mRNA izraz za E-kadherina Gene
ravneh transkriptov so bile določene v 32 izbranih zamrznjenih vzorcih GCA z analizo RT-PCR (slika 3). V 32 GCA vzorcev, vključno z 2 fazi I, 2 stopnji II, 8 faze III in 8 faze IV primerov, v katerih je bil tumor methylated in 12 primerih (2 fazi I, 4 faze II, 4 etape III in 2 v koraku IV) s nemetiliran gen-E kadherina. 202 bp fragment E-kadherina genskega transkripta je bila ustvarjena s 342 bp GAPDH fragment transkript kot kontrolo. 16 (1 faze II, 7 faze III in 8 v koraku IV) primerov (80%) inaktiviranega mRNA ekspresije smo v 20 vzorcih tumorja opazili pri E-kadherina gena metiliran, druga 4 (2 etape I, 1 faza II, 1 odrskih III) primerih so pokazali pozitiven izraz. 12 vzorcih tumorjev z E-kadherina gena nemetiliran so pokazali pozitivno izražanje E-kadherina gena. Slika 3 Analiza mRNA E-kadherina v tumorskih tkivih. 1: 100 bp DNA dvojno podajo 2,4,5,6,9: pozitivno mRNA izraz 3,7,8. Negativna mRNA izraz
Razprava
Kitajska je država z visoko incidenco raka prebavnega trakta, ki vključuje požiralnika karcinom, rak želodca in želodca srčne adenokarcinom (GCA). GCA, ki je bila prej registrirana kot požiralnika raka ali raka želodca, je bil diagnosticiran neodvisno zelo zadnjih letih zaradi izboljšanja zgodnjega endoskopske presejanja in patološko diagnozo. Predlagano je bilo, ki jih več epidemioloških podatkov, da se pojavnost GCA narašča v zadnjih letih. Nekatere raziskave so pokazale, da je mehanizem in klinični simptom GCA drugačen od raka želodca vendar podoben raka na požiralniku. Natančen mehanizem nastanka GCA ostaja nejasno, za trenutek. Na splošno velja, da je dedni dejavnik, ki draži nastanek tumorja, vključno z dvema mehanizem, genetike in mehanizem epigenetiki. Genetske nepravilnosti proto-onkogeni in zaviralnih genov so znane spremembe, ki so pogosto povezani z rakom patogenezo. Vendar pa je Epigensko inaktivacijo nekaterih zaviralnih genov odklonska promotorja metilacije pogosto opazili v številnih oblik raka in lahko igrajo ključno vlogo pri tumorigeneze. Pri čemer so genetske nepravilnosti povezana s spremembami v zaporedju DNA, lahko epigenetske dogodki vodijo do sprememb v izražanju genov, ki nastanejo brez sprememb v sekvenci DNA. Če so prizadeti tumor supresorski geni, ima za posledico običajno v transkripcijsko utišanje in posledično inaktivacijo tega gena. Nato lahko dajejo prednost rasti teh celic, ki podpirajo razvoj raka [22].
Kot član celične adhezije molekulsko, E-kadherina igrajo pomembno vlogo pri ohranjanju adhezijo celic in njene disfunkcije lahko povzročijo tumorigenesis.6 Biološko posledice njegove disfunkcije vključujejo motnje v medceličnem oprijema in oslabitev ß-catenin posredovano transaktivacije [23]. Do danes pa še niso pojasnjeni regulativnih mehanizmov, ki so odgovorni za spremenjene ravni E-kadherina beljakovin v GCA. Ugotovljeno je bilo, da so hypermethylation E-kadherina, povezane z rakom želodca in požiralnika adenokarcinom [21, 24]. Vendar pa obstaja nobena druga poročila o odnosu med Ecadherin metilacije in tumorigeneze za GCA. V tej študiji smo pokazali, da hypermethylation otoka 5 'CpG promotor E-kadherina pogosto zgodila v GCA tkivih (68,5%) in da je ta metilacija sprememba je bila povezana z zmanjšano ekspresijo E-kadherina proteina. Naši podatki kažejo, da lahko epigenetsko utišanje promotorja E-kadherina preko hypermethylation eden od kritičnega mehanizem za inaktivacijo tega gena v GCA. Gen za dušenje zvoka povezana z hypermethylation je posredovana s metil-vezavo proteinov, ki se vežejo na metilnim cytosines in zaposlujejo kompleksa proteinov, ki zavirajo transkripcijo, vključno histonskih deacetilaz [25].
V naši raziskavi smo ugotovili, da v večini primerov smo pregledali,-E kadherina metilacija bil tumor specifičen. Vendar, v kateri je bilo 10 primerov sprememba metiliranje prisotna v obeh tumorja in paru normalnega tkiva iz istega pacienta. Glede na občutljivost ugnezdenih PPN, je možno, da je normalno, pojavljajo vzorci vsebovali redko rakavo celico, ki je ni mogoče odkriti z Histomorfologija. Zaradi omejitve vzorcu nismo študija metiliranje E-kadherina v normalnih Cardia tkivih. Vendar pa je normalno požiralnika tkivo ni pokazal zmotne E-kadherina metilacije v nekaterih študijah [21] in v prejšnjih študijah preiskovanju E-kadherina metilacije v različnih vrstah tumorjev, so normalne tkiva iz kostnega mozga, dojke, ščitnice, in ustne sluznice nemetiliran [ ,,,0],14, 26]. Ti podatki jasno kažejo, da je E-kadherina promotor metilacija zmotno dogodek. Dejstvo, da smo zaznali le metilacije v parih normalnih tkiv pri bolnikih, pri katerih je bila metilirani tudi ustrezna tumor je v skladu s hipotezo, da je rak v teh posameznikov je nastala iz metiliranega klonsko predhodnika. V študiji neoplastične napredovanja v požiralnik Barrett je hypermethylation od zaviralnih genov P16 odkrili v patološko normalnih-pojavljajo vzorcev, pridobljenih od bolnika, ki se je kasneje razvila displazije [27]. Zato lahko epigenetsko inaktivacijo zaviralnih genov zgodnji značilnost tumorigeneze.
Naši rezultati so pokazali, da protein izraz Ecadherin v tumorskih tkivih bistveno nižja kot v parnih normalnih tkivih pa Imunohistokemijsko tudi pokazala normalno membranskih barvanje E -cadherin v nekaterih vzorcih tumorja z E-kadherina metilacije. Obstaja več možnih razlogov za dogodke. Najprej To je verjetno zaradi dejstva, da Imunohistokemijsko ni bilo tako občutljiva, kot je PCR pri odkrivanju podpopulacije celic z genskim metilacije in posledično downregulation e- kadherina. Drugič, tumorske tkiva družijo nekaj normalnega tkiva, lahko pa je pokazala normalno membranskih barvanje E-kadherina. Tretja, gen heterogenimi metilacija ali alel metilacija lahko pomemben vzrok. V naših raziskavah smo ugotovili, da je bilo stanje metilacija tumorskih tkivih, ki se je ugotovil pozitivno izražanje beljakovin in hypermethylation nepopolna Ecadherin metilacija. Poleg tega je bilo dokazano, da je DNA metilacije, ki zatreti izražanje genov predvsem v transkripcijski ravni in gostota CpG otoku metilacije je bila v zvezi z potlačene stopnjo transkripcije [28]. Dicky promotor se lahko popolnoma zatreti z nižjo metilacije gostoto, vendar pa, ko je bil promotor okrepljena z enhanser, bo najdena funkcija prepisu. V naši raziskavi smo ugotovili, da tudi pozitivno mRNA izraz v nekaterih vzorcih tumorja z E-kadherina gena metilirani. To je deloma posledica dejstva, da je bil obseg promotor metilacije premalo, da bi zatrl E-kadherina prepis. V vseh, Naša študija je nakazala, da lahko epigenetsko utišanje promotor E-kadherina preko hypermethylation eden od mehanizmov za deaktivacijo E-kadherina v GCA.
Izjave
Zahvala
Zahvaljujemo bolnikov in kontrolnih posameznikov za sodelovanje v tej raziskavi.
podprta s sredstvi iz precejšnje značilne teme temelj provinci Hebei.

• Klinični pomen sistema uPA pri raku želodca s peritonealno metastazami
• Epstein-Barr virus specifična metilacija človeških genov v želodcu rakave celice