La detección de hipermetilación de promotores de la isla CpG de E-cadherina en el adenocarcinoma gástrico cardiaco

La detección de hipermetilación de promotores de la isla CpG de E-cadherina en el adenocarcinoma gástrico cardiaco
Resumen Objetivo

anormales de hipermetilación de las islas CpG asociadas con genes supresores de tumores puede conducir a silenciamiento transcripcional en la neoplasia. El objetivo de este estudio fue investigar la metilación del promotor y expresión del gen de la E-cadherina en el adenocarcinoma gástrico cardiaco (ACG).
Métodos
Un enfoque MSP anidada, el método de inmunohistoquímica y RT-PCR se utilizaron, respectivamente, para examinar la el estado de metilación de la isla 5 'CpG de e-cadherina, la expresión de la proteína y la expresión de mRNA en tumores y tejidos normales correspondientes.
resultados
e-cadherina fue metilado en 63 de 92 muestras de tumores (68,5%), que fue significativamente mayor que en los tejidos normales (P < 0,001) correspondiente. frecuencias de metilación de la etapa III y tejidos tumorales IV fue significativamente más alta que en la etapa I y tejidos tumorales II (P = 0,01). estado de metilación de pobre grupo diferenciación fue significativamente mayor que los grupos de diferenciación moderada y pobre-moderadas (P < 0,01). Por inmunotinción 51 de 92 tisssues tumorales demostraron heterogénea inmunotinción positiva de los tejidos tumorales (44,6%), significativamente diferentes de los tejidos normales emparejados (P < 0,001). inmunotinción positiva de la etapa III y IV tejidos tumorales fue significativamente menor que la etapa I y tejidos tumorales II (P < 0,01). grupo diferenciación deficiente también fue significativamente menor que los grupos de diferenciación moderados y pobres moderados (P < 0,05). 80 por ciento de los tejidos tumorales con el gen E-cadherina metilado mostró la expresión de ARNm inactivado.
Conclusiones
estado de alta metilación de la isla 5 'CpG del gen de la E-cadherina puede ser uno de los mecanismos en el desarrollo de adenocarcinoma gástrico cardiaco .
Palabras clave
e-cadherina metilación adenocarcinoma gástrico cardiaco Introducción
e-cadherina es un H r 120.000 glicoproteína transmembrana expresado en las células epiteliales y es responsable de homophilic, Ca 2 + -dependiente de adhesión intercelular, que es esencial para el mantenimiento de la arquitectura del tejido normal en los tejidos epiteliales [1]. El dominio citoplásmico de E-cadherina se une a alfa-, β-, y gamma-cateninas, que son a su vez vinculado a actins, y esta interacción es crítica para su función [2]. interacciones célula-célula y célula-matriz están implicadas crucialmente en la transformación neoplásica y la metástasis [3, 4]. la adhesión celular defectuoso puede contribuir a la pérdida de inhibición por contacto del crecimiento y la pérdida de la adhesión celular puede dar cuenta de la capacidad de las células de cáncer de cruzar los límites de tejido normal y metástasis [5]. La importancia de la E-cadherina en el mantenimiento de la adhesión celular implica que su disfunción puede desempeñar un papel importante en la tumorigénesis. La pérdida de expresión de E-cadherina se produce en una variedad de tumores humanos y es la hipótesis de ser un paso importante en la progresión de la formación de tumores a la invasión y metástasis [6].
En los últimos años, hay varios estudios sobre el papel crítico de E-cadherina en la tumorigénesis. Se ha demostrado que las mutaciones de la línea germinal del gen de la E-cadherina se relaciona con gástrico familiar y el cáncer colorrectal [7, 8]. Por otra parte, también se han encontrado mutaciones somáticas de E-cadherina en el carcinoma gástrico y la pérdida alélica del locus E-cadherina en 16q22.1 se ha informado en diferentes tumores epiteliales como el de mama, de ovario, de endometrio, y carcinomas de próstata [9, 10] . Excepto por esto alteraciones genéticas, alteración epigenética incluyen hipermetilación de la "isla CpG 5 en el promotor de E-cadherina también es responsable de la represión transcripcional del gen [11]. Se sabe que la hipermetilación anormal de islas CpG asociadas con genes supresores de tumores puede llevar a silenciamiento transcripcional en la neoplasia [12]. De hecho, el silenciamiento de la metilación asociada de E-cadherina representa la causa más común para su inactivación en varios tipos de cáncer, como el hígado, próstata, mama y esófago [13-15].
Adenocarcinoma gástrico cardiaco (ACG), que antes se ha registrado como cáncer de esófago o cáncer gástrico, ha sido diagnosticado de forma independiente en años muy recientes, debido a la mejora en la detección temprana y el diagnóstico endoscópico patológico. China es un país con regiones de alta incidencia de ACG, especialmente en Taijang de montaña del norte de China. Los factores exógenos, incluyendo la deficiencia de la nutrición, hábitos de vida poco saludables, el consumo de alcohol y tabaco, infecciones patógenas son generalmente considerados como los factores de riesgo para el desarrollo de la ACG en China [16-18]. Sin embargo, sólo un subconjunto de individuos expuestos a los factores de riesgo exógenos anteriormente enumerados se desarrollaría GCA, lo que sugiere que múltiples eventos genéticos y epigenéticos puede contribuir a la progresión de GCA. Ahora se reconoce cada vez más que el silenciamiento epigenético de la expresión génica por el promotor CpG hipermetilación es un mecanismo importante alternativa para la inactivación de los genes supresores de tumores y genes asociados a tumores en el cáncer [19]. Las mutaciones del gen de la E-cadherina son raros en la ACG, por lo tanto, en este estudio, se evaluó el papel de la metilación de la isla 5 'CpG de E-cadherina y su correlación con la expresión de E-cadherina en la reducción de la ACG.
Métodos
pacientes y muestras
tumoral y muestras de tejidos normales emparejados se obtuvieron de 92 pacientes. Estos tejidos se dividieron en dos partes paralelas, una parte se congelaron y almacenaron a -80 ° C hasta que se extrajo el ARN, la otra parte fue fijado en formalina y embebidos en parafina. Los casos fueron todos los pacientes hospitalizados para el tratamiento quirúrgico de la Cuarta Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Hebei entre escribir tumor histológico 2004 y 2006. Se llevó a cabo sobre la base de las piezas resecadas en el Departamento de Anatomía Patológica del mismo hospital. Todos los carcinomas gástricos cardiacos eran adenocarcinomas con sus epicentros en la unión gastroesofágica, es decir, de 1 cm por encima de hasta 2 cm por debajo de la unión entre el extremo del esófago tubular y el comienzo del estómago sacular [20]. La información sobre la estadificación TNM estaba disponible a partir de grabaciones de hospital y el diagnóstico patológico. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Instituto de Cáncer de Hebei y se obtuvo el consentimiento informado de todos los sujetos reclutados.
Reacción en cadena de la polimerasa específica de metilación (MSP) para la E-cadherina metilación del promotor
ADN genómico de los adenocarcinomas gástricos y cardíacos adyacentes secciones no malignas fue aislado de parafina embebido diapositivas de tejidos por métodos estándar utilizando un método de digestión de proteinasa K simplificado. Para examinar los patrones de metilación del ADN, se trataron ADN genómico con bisulfito de sodio, como se describe anteriormente [21]. En resumen, 2 g de ADN se desnaturalizaron con NaOH 2 M a 37 ° C durante 10 minutos, seguido de incubación con 3 M de bisulfito de sodio, pH 5,0, a 50 ° C durante 16 horas. Bisulfito trata a continuación se purificó el ADN (kit de limpieza de ADN; Promega, Madison, Wisconsin, EE.UU.), se incubaron con NaOH 3 M a temperatura ambiente durante cinco minutos, se precipitó con acetato de 10 M de amonio y 100% de etanol, se lavó con 70% de etanol, y resuspendió en 20 l de agua destilada.
Un enfoque de PCR anidada se utilizó para determinar el estado de metilación dentro de la isla CpG E-cadherina en el exón 1 (secuencia de -126 pb a 144 pb en relación al inicio de la transcripción, el número de acceso del GenBank D49685 ) que se ha publicado previamente [15]. En la primera ronda de PCR, 100 ng de ADN tratado con bisulfito se amplifica. Los cebadores de secuenciación fueron 5'-GTTTA GTTTTGGGGAGGGGTT-3 '(sentido) y 5'-ACTAC TACTCCAAAAACCCATAACTAA-3' (antisentido), y las condiciones de ciclación fueron un ciclo de 95 ° C durante 5 min, seguido de 30 ciclos de 95 ° C durante 30 s, 50 ° C durante 30 s, 72 ° C durante 30 s, y una extensión final a 72 ° C durante 5 min. El tamaño del producto después de esta reacción inicial PCR era 270 pb. Para la segunda ronda de PCR, este producto se diluyó 1: 50 en agua, y se utilizaron 2 l de la dilución para MSP. secuencias de los cebadores anidados para la E-cadherina para la reacción metilada fueron 5'-TG TAGTTACGTATTTATTTTTAGTGGCGTC-3 '(sentido) y 5'-CGAATACGATCGAATCGAACCG-3' (antisentido), y secuencias de cebadores para la reacción no metilada fueron 5'-TGGTTGTAGTTATGTATTTATT TTTAGTGGTGTT-3 '(sentido) y 5'-ACACCAAATA CAATCAAATCAAACCAAA-3' (antisentido). parámetros de PCR fueron como se indica anteriormente, excepto que las temperaturas de recocido para las reacciones metiladas y no metiladas fueron 64 ° C y 62 ° C, respectivamente. Los tamaños de los productos de las reacciones metilados y no metilados fueron 112 y 120 pb, respectivamente. La línea celular de cáncer de mama MDA-MB-231, lo que demuestra la metilación y silenciamiento de E-cadherina y reactivos espacios en blanco se utilizaron como controles positivos y negativos.
Tinción inmunohistoquímica para se determinó por E-cadherina
expresión de E-cadherina inmunotinción utilizando el método de inmunoperoxidasa avidina-biotina, que se realizó en secciones histopatológicas paralelas de la sección tumoral incluido en parafina y vinculado tejido normal. La peroxidasa endógena fue bloqueada con peróxido de hidrógeno al 3% durante 10 minutos, seguido de la recuperación de antígenos de microondas durante nueve minutos a 98 ° C en tampón de citrato de sodio 10 mM (pH 6,0) y se incubó en suero normal de caballo al 2% para minimizar la unión no específica. Los portaobjetos se incubaron secuencialmente con monoclonal primario, anticuerpo de ratón anti-E-cadherina (1: 100 dilución en solución salina tamponada con fosfato, Santa Cruz, sc-8426) durante la noche a 4 ° C, el anticuerpo secundario biotinilado durante 30 min a 37 ° C y ABC reactivo durante 45 minutos a 37 ° C. 0,5% de 3,3'-diaminobencidina (Sigma, St Louis, MO) se utilizó como cromógeno. Para un control negativo, el anticuerpo primario fue sustituido con IgG de ratón. Diapositivas con mucosa gástrica normal se utilizaron como control positivo.
Medición de la expresión de ARNm de E-cadherina
ARN fue extraído de la sección de los tejidos congelados por métodos estándar utilizando Trizol (Invitrogen, EE.UU.). cDNA se sintetizó usando el Advantage RT-para-PCR kit (Clontech, Palo Alto, CA) con oligo de cebado (dT) como se recomienda en el protocolo proporcionado. El gen GAPDH se utilizó como control. Primer secuencias de E-cadherina fueron 5 ° ‰ -CGACCCAACC CAAGAATCTA-3 ° ‰ (sentido) y 5 ° ‰ -AATGGCAG GAATTTGCAATC-3 ° ‰ (antisentido), secuencia del cebador de GAPDH eran 5 ° ‰ -GGGAAACTGTGGCGT GAT-3 ° ‰ (sentido) y 5 ° ‰ -GTGGTCGTTGAGGG CAAT-3 ° ‰ (antisentido), el tamaño del producto fueron de 202 pb y 342 pb, respectivamente. Los productos de PCR se resolvieron en geles de agarosa al 2% y la intensidad de señal se cuantificó usando un sistema de imágenes por computadora. Los niveles de transcritos de genes se cuantificaron como la relación de la intensidad de la señal de E-cadherina a la intensidad de β-actina. expresión inactivada se obtuvo cuando la expresión de un gen de E-cadherina en la muestra de tumor fue < 25% de su expresión en la muestra normal correspondiente.
El análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó utilizando el software SPSS 10.0 paquete (SPSS Company, Chicago, Illinois, EE.UU.). La prueba exacta de Fisher y el test de Chi-cuadrado se utilizaron para evaluar la significación estadística de las diferencias y comparar las asociaciones categóricas. Dos lados pruebas se utilizan para determinar la significación, y los valores de p inferior a 0,05 se consideró estadísticamente significativo para todas las pruebas estadísticas.
: Resultados de la características de los sujetos
Como se muestra en la Tabla 1, 92 pacientes con ACG se obtuvieron en esta investigación, incluyendo 73 hombres y 19 mujeres, edad varió de 38 a 76, con una media de 56,9 años. Todos los casos fueron clasificados en 4 tumor-nódulo-metástasis (TNM) etapas de acuerdo con la norma de la UICC, 8 de la etapa I (8,7%), 32 de la etapa II (34,8%), 38 en estadio III (41,3%), 14 de la etapa IV (15,2%). De acuerdo con las fases patológicas, los casos fueron clasificados en 3 grupos, 42 (45,7%) del grupo moderado, 34 (36,9%) del grupo de pobres moderados y 16 (17,4%) de los pobres group.Table 1 Características clínicas y patológicas de los pacientes con ACG
Grupos
n (%) guía empresas Sexo Masculino

73 (79,3)
Mujer página 19 (20,7 )
La edad media en años (SD)
56,9 (8,86): perfil del estadio TNM
I
8 (8,7)
II
32 (34,8)
III
38 (41,3)
IV página 14 (15,2)
Patológica de la diferenciación del tumor
moderada
42 (45,7)
pobres-moderada
34 (36,9)
mala
16 (17,4)
El análisis de metilación del gen de la e-cadherina Francia El análisis de metilación se realizó con éxito en todo el tumor y el tejido normal emparejados muestras (Figura 1). Para 10% de las muestras, se repitió el análisis de metilación para el control de calidad. En 63 (68,5%) de los 92 tumores GCA E-cadherina se detectó metilación, mientras que sólo en 10 (10,9%) de los tejidos normales emparejados se detectó metilación E-cadherina. La frecuencia de metilación E-cadherina de tejidos tumorales fue significativamente mayor que los tejidos normales emparejados (P < 0,001). Cuando estratificado por estadios TNM, la frecuencia de metilación del gen de la E-cadherina de los pacientes con ACG con estadio III y IV (78,8%) fueron significativamente más altos que los pacientes con ACG con estadio I y estadio II (55%) (χ2 = 5,96, p = 0,01 ). Cuando estratificado por estadios patológicos, los E-cadherina frecuencias de genes de metilación del grupo moderado, con pocos moderado y pobres fueron 52,4%, 73,5% y 100%, la frecuencia de la E-cadherina metilación del gen de la mala grupo significativamente más alta que en moderado y pobres grupos Moderado (χ2 = 8,92, P = 0,003) (Tabla 2). Figura 1 El análisis de metilación de E-cadherina en el tejido tumoral (T) y el tejido normal (N) correspondiente. T: indica la presencia de genes metilados; m: indica la presencia de genes metilados. Los casos 1 y 2: la metilación del tumor-específica; Caso 3: el tumor es totalmente metilados, mientras que el tejido normal correspondiente tiene una banda muy débil que demuestra la metilación; Caso 4: tanto de las características de tinción inmunohistoquímica de los pacientes con ACG
Grupo
estado de metilación
P
tinción inmunohistoquímica
P
M sobre U CD -
+
estadio TNM
I
4 de 4
2 6
II
18 página 14 página 13 página 9
III
29 página 9
26 página 12 página 12
IV
2 0.015a
10
4 de 0.002a
la diferenciación histológico de tumor
moderada
22
20
20
2-moderada pobres
25 página 9
18
16
pobres
16
0
0.003b página 13 página 3
0.022b
un valor P de la etapa III y IV a los pacientes contra los pacientes en estadio I y II, b valor de p de pobres grupo de diferenciación frente a los grupos moderados y pobres moderados
inmunotinción del gen e-cadherina
Como se muestra en la Tabla 2, la tinción fue heterogénea en 51 tejidos tumorales, las células tumorales con disminuyeron membranosa e-cadherina tinción se mezclaron con células tumorales mostrando una fuerte tinción membranosa (Figura 2). La frecuencia de expresión de la proteína era 44,6% en los tejidos tumorales, mientras que las muestras de tejido normales emparejados todos demostraron difuso fuerte tinción de cadherina E membranosa. La frecuencia de expresión de la proteína fue significativamente diferente entre tumor y los tejidos normales emparejados (P < 0,001). Cuando estratificado por estadios TNM, la frecuencia de la E-cadherina expresión de la proteína del gen de la etapa III y tejidos tumorales IV (30,8%) fue significativamente menor que en la etapa I y tejidos II tumores (62,5%) (χ2 = 9,21, p = 0,002) . Frecuencia de E-cadherina expresión de la proteína del gen de la mala grupo significativamente menor que en grupos moderados y pobres moderada (χ2 = 5,23, P = 0,022). Figura 2 E-cadherina immunostain en el tejido GCA. A: tinción positiva (tejido normal). B:. Tinción negativa (GCA tejido)
expresión de ARNm para el gen de la E-cadherina
Los niveles de las transcripciones se determinaron en las 32 muestras congeladas GCA seleccionados mediante análisis de RT-PCR (Figura 3). Las 32 muestras GCA incluyendo 2 de la etapa I, 2 de la etapa II, 8 de la etapa III y 8 de la etapa IV de los casos en los que el tumor fue metilado y 12 casos (2 de la etapa I, 4 de las fases II, 4 de la etapa III y 2 de la etapa IV) con el gen no metilado e-cadherina. Se generó un fragmento de 202 pb de la transcripción del gen E-cadherina, con un fragmento de GAPDH 342 pb de la transcripción como control. 16 (1 de la etapa II, 7 de la etapa III y 8 de la etapa IV) de los casos (80%) de la expresión de ARNm inactivada se observaron en 20 muestras tumorales con el gen de la E-cadherina metilado, el otro 4 (2 de la etapa I, 1 de fase II, III) de 1 etapa casos mostraron expresión positiva. 12 muestras de tumores con el gen E-cadherina no metilado todos mostraron expresión positiva del gen de la E-cadherina. Figura 3 Análisis de ARNm de E-cadherina en los tejidos tumorales. 1: 100 pb marcador de ADN 2,4,5,6,9: la expresión del ARNm positivo 3,7,8:. La expresión de ARNm negativo
Discusión China China es un país con una alta incidencia de cáncer del tracto digestivo que incluyendo esofágico carcinoma, cáncer gástrico y adenocarcinoma gástrico cardiaco (ACG). GCA, que fue anteriormente registrado como cáncer de esófago o cáncer gástrico, se ha diagnosticado independientemente en años muy recientes, debido a la mejora en la detección temprana y el diagnóstico endoscópico patológico. Se ha sugerido por varios datos epidemiológicos que la incidencia de GCA está aumentando en los últimos años. Algunas investigaciones han demostrado que el mecanismo y clínica de los síntomas de GCA es diferente de cáncer gástrico pero similar a cáncer de esófago. El mecanismo exacto de la ocurrencia de GCA está claro por el momento. Se acepta generalmente que el factor hereditario que la irritación de la aparición de tumor incluyendo dos mecanismo, la genética y el mecanismo de la epigenética. Las anomalías genéticas de los proto-oncogenes y genes supresores de tumores son los cambios conocidos que están involucrados con frecuencia en la patogénesis del cáncer. Sin embargo, la inactivación epigenética de ciertos genes supresores de tumores por metilación aberrante promotor se observa frecuentemente en varios tipos de cáncer y puede desempeñar un papel fundamental en la tumorigénesis. Mientras anomalías genéticas se asocian con cambios en la secuencia de ADN, los eventos epigenéticos pueden conducir a cambios en la expresión génica que se producen sin cambios en la secuencia de ADN. Si se afectan los genes supresores de tumor, da lugar por lo general en el silenciamiento de la transcripción y, por lo tanto, la inactivación de ese gen. Entonces puede conferir ventajas de crecimiento de estas células que favorecen el desarrollo del cáncer [22].
Como miembro de la adhesión celular molecular, E-cadherina desempeñar un papel importante en el mantenimiento de la adhesión celular y su disfunción puede resultar en tumorigenesis.6 El biológica consecuencias de su disfunción incluyen rotura de la adhesión intercelular y el deterioro de la transactivación mediada por ß-catenina [23]. Hasta la fecha, sin embargo, no se han dilucidado los mecanismos reguladores responsables de la alteración de los niveles de proteínas de E-cadherina en la ACG. Se ha informado de que la hipermetilación de E-cadherina se asocia con el cáncer gástrico y adenocarcinoma esofágico [21, 24]. Sin embargo, no hay ningún otro informe sobre la relación entre la metilación y la tumorigénesis Ecadherin de la ACG. En este estudio, hemos demostrado que la hipermetilación de la isla 5 'CpG del promotor de E-cadherina ocurrió con frecuencia en los tejidos GCA (68,5%) y que este cambio de metilación se asoció con la expresión reducida de la proteína E-cadherina. Nuestros datos sugieren que el silenciamiento epigenético del promotor de E-cadherina mediante hipermetilación puede ser uno de los mecanismo crítico para la inactivación de este gen en GCA. el silenciamiento de genes asociados con hipermetilación está mediada por proteínas de unión a metil-que se unen a las citosinas metiladas y reclutan un complejo de proteínas que reprimen la transcripción, incluyendo las histonas desacetilasas [25].
En nuestro estudio, encontramos que en la mayoría de los casos hemos examinado, la metilación E-cadherina era específico del tumor. Sin embargo, 10 casos en los que el cambio de metilación se presente tanto en tumor y los tejidos normales emparejados del mismo paciente. Dada la sensibilidad de la MSP anidada, es posible que los especímenes de aspecto normal contenían una célula de cáncer raro que era indetectable por histomorfología. Debido a la limitación de la muestra, no estudiamos la metilación de E-cadherina en los tejidos normales cardias. Sin embargo, el tejido esofágico normal no mostró metilación aberrante E-cadherina en algunos estudios [21] y en estudios previos investigar metilación E-cadherina en diferentes tipos de tumores, tejidos normales de la médula ósea, de mama, de tiroides, y la mucosa oral fueron no metilado [ ,,,0],14, 26]. Estos datos sugieren fuertemente que el promotor de la E-cadherina metilación es un evento aberrante. El hecho de que sólo se detectó metilación en tejidos normales emparejados de pacientes en los que también se metiló el tumor correspondiente es consistente con la hipótesis de que el cáncer en estos individuos surgió de un precursor metilado clonal. En un estudio de la progresión neoplásica en el esófago de Barrett, se detectó la hipermetilación del gen p16 supresor de tumores en las muestras patológicamente de aspecto normal obtenidas de un paciente que desarrolló más tarde displasia [27]. Por lo tanto, la inactivación epigenética de genes supresores de tumores puede ser una característica temprana de la tumorigénesis.
Nuestros resultados mostraron que la expresión de proteínas de Ecadherin en los tejidos tumorales significativamente menor que en los tejidos normales emparejados, sin embargo, la tinción inmunohistoquímica también mostró tinción membranosa normal de E -cadherin en algunas muestras tumorales con metilación E-cadherina. Hay varias razones posibles para los eventos. En primer lugar, esto se debe probablemente al hecho de que la tinción inmunohistoquímica no era tan sensible como la PCR en la detección de las subpoblaciones de células con la metilación de genes y, por tanto, la regulación por disminución de la E-cadherina. En segundo lugar, los tejidos tumorales pueden mezclarse algunos tejidos normales y pueden mostró tinción membranosa normal de E-cadherina. En tercer lugar, la metilación del gen heterogéneo o un alelo metilación pueden ser una razón importante. En nuestros estudios, hemos encontrado que el estado de metilación de los tejidos tumorales que ambos mostraron expresión de la proteína positivo y hipermetilación estaban incompletos metilación Ecadherin. Además, se ha demostrado que la metilación de ADN que suprime la expresión génica, principalmente en el nivel de la transcripción y de la densidad de la isla CpG metilación se relaciona con el grado suprimida de la transcripción [28]. promotor Dicky puede ser completamente suprimida por la metilación de densidad más baja, sin embargo, cuando el promotor se mejoró por enhanser, se recuperará la función de la transcripción. En nuestro estudio, también encontramos la expresión de ARNm positivo en algunas muestras tumorales con genes metilados E-cadherina. Se debe en parte al hecho de que el grado de metilación del promotor era insufficent para suprimir la transcripción de E-cadherina. En total, Nuestro estudio sugiere que el silenciamiento epigenético del promotor de la E-cadherina a través de la hipermetilación puede ser uno de los mecanismos para la inactivación de E-cadherina en la ACG.
Declaraciones
Agradecimientos
Agradecemos a los pacientes y el control por participar en este estudio.
apoyado por becas de la fundación temas distintivos considerable de la provincia de Hebei.

• Significado clínico del sistema de uPA en el cáncer gástrico con metastasis
• -Virus específica de metilación de genes humanos en células de cáncer gástrico Epstein-Barr