Detekcija promotora Hipermetilacija od CpG otoka E-kadherina u želučanom srčane adenocarcinoma

Detekcija promotora Hipermetilacija od CpG otoka E-kadherina u želučanom srčanog adenokarcinoma pregled Sažetak
Cilj pregled abnormalnog Hipermetilacija CpG otočića povezanih s tumor supresorski geni mogu dovesti do transkripcije ušutkavanja u neoplazije. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati promotora metilacije i izražavanje gena E-kadherina u želučanom srčanog adenokarcinom (OKS).
Metode
ugniježdenom MSP pristup, imunohistokemijski način i RT-PCR korišteni su redom ispitati metilacije status 5 'CpG otoku E-kadherina, njegova ekspresija proteina i mRNA ekspresije u tumorima i odgovara normalna tkiva. pregled Rezultati
E-kadherina je metiliran na 63 od 92 (68,5%) tumorskih uzoraka, koje bila je značajno viša nego u odgovarajućim normalna tkiva (p 0.001). Metilacije frekvencije IV tumorskim tkivima faze III i bio je znatno veći nego u fazi I i II tumorskim tkivima (P = 0.01). Metiliranje status slabe diferencijacije skupini bio je znatno viši od umjerenih i siromašnih umjerenih diferencijaciju (P < 0.01). Do imunološko 51 od 92 tumorske tisssues pokazao heterogen, pozitivno imunološko tumorskih tkiva (44,6%), znatno se razlikuju od podudarnih normalnih tkiva (P 0,001). Pozitivan imunološko IV tumorskim tkivima faze III i bio je znatno manji od stadija I i II tumorskih tkiva (p 0,01). Loše razlikovanje skupina je također bio znatno niži nego umjerenim i siromašnih umjerenih diferencijaciju skupina (P < 0,05). 80 posto tumorskog tkiva s genom E-kadherina metiliranom pokazali inaktivirani mRNA ekspresije. Pregled Zaključci
visoke metilacija stanje 5 'CpG otoka gena E-kadherina može biti jedan od mehanizama u razvoju srčane želučanog adenokarcinoma . pregled Ključne riječi pregled, E-kadherina metilacije želuca srčana adenokarcinom Uvod pregled, E-kadherina je M r 120.000 transmembranski glikoprotein izražen na epitelnim stanicama i odgovoran je za homofilno, Ca 2 + ovisni međustanična adheziju koja je bitna za održavanje normalne arhitekture tkiva u epitelnim tkivima [1]. Citoplazmatsku domenu E-kadherina veže na a-, β- i y-katenini, koji su sa svoje strane povezane s actins, a ova interakcija je kritična za funkciju [2]. Stanica-stanica i stanica-matriks ključne su uključeni u neoplastične transformacije i metastaze [3, 4]. Neispravan adhezija stanica može doprinijeti gubitku kontakt inhibicije rasta i gubitka stanične adhezije može objasniti sposobnost stanica raka da prelaze normalne granice tkiva i metastaza [5]. Važnost E-kadherina u održavanju adheziju stanica podrazumijeva da je njegova disfunkcija može igrati važnu ulogu u nastanku tumora. Gubitak ekspresije E-kadherina javlja u različitim humanim tumorima i pretpostavlja se da je važan korak u napredovanju od formiranja tumora do invazije i metastaziranja [6]. Netlogu U posljednjih nekoliko godina, postoji nekoliko studija o kritičnoj ulozi E-kadherina u nastanku tumora. Pokazano je da se klica linije mutacije gena E-kadherina odnosi se na familijarne želuca i rak debelog crijeva [7, 8]. Nadalje, somatske se mutacije E-kadherina također su otkriveni u želučanom karcinoma i aleličke gubitak lokus E-kadherina u 16q22.1 je prijavljen u različitim epitelnim tumorima, kao što su rak dojke, jajnika, endometrija i karcinoma prostate [9, 10] , Osim ovih genetskih promjena, epigenetičko izmjene uključuju Hipermetilacija od 5 'CpG unutar promotora E-kadherina otoku je također odgovoran za potiskivanjem transkripcije gena [11]. Poznato je da nenormalan Hipermetilacija CpG otočića povezanih s gena za suzbijanje tumora može dovesti do transkripcije odsutnost novotvorinom [12]. Doista, metilacije povezane utišavanje E-kadherina predstavlja najčešći uzrok za inaktivaciju nekoliko vrsta raka, kao što su jetra, prostate, dojke i jednjaka [13-15].
Želučane srčani adenokarcinom (OKS), koji je prije bio registriran kao rak jednjaka ili raka želuca, bio je nezavisno dijagnosticiran u vrlo posljednjih nekoliko godina, s obzirom na napredak u ranom endoskopske pregleda i patološke dijagnoze. Kina je zemlja s visokim udjelom regijama OKS, posebno u Taihang gori sjevernoj Kini. Egzogeni čimbenici, uključujući nedostatak prehrane, nezdravi životnih navika, konzumiranja alkohola i duhana, patogene infekcije obično se smatraju faktorima rizika za razvoj OKS u Kini [16-18]. Međutim, samo podskup osoba izloženih gore navedenih egzogenih čimbenika rizika će razviti OKS, sugerirajući da više genetske i Epigenetske događaja može doprinijeti napredovanju OKS. Sada se sve više prepoznaje da epigenetičko utišavanje ekspresije gena s promotora CpG Hipermetilacija je važan alternativni mehanizam u inaktivaciju gena za suzbijanje tumora i tumora povezanih gena u karcinomima [19]. Mutacije gena E-kadherina su rijetke u OKS, dakle, u ovom ispitivanju, smo ocijenili ulogu metiliranjem 5 'CpG otoka E-kadherina i korelirana sa smanjenom ekspresijom E-kadherina u OKS.
Methods
Pacijenti i primjerci pregled tumora i upareni normalne uzorci tkiva su dobivene od 92 pacijenata. Tih tkiva su bili podijeljeni u dvije paralelne dijela, jedan dio je smrznuta i pohranjena na -80 ° C do RNA je ekstrahirana, a drugi dio je bio formalinom fiksiranih i paraffin-embedded. Slučajevi su svi Bolnički pacijenti za kirurško liječenje u poslovnoj vezi bolnici Četvrto, Hebei University Medical između 2004. i 2006. godine Histološki tumor tipkanje provedena je na temelju reseciranih primjeraka u Zavodu za patologiju u istoj bolnici. Svi želučani srčane karcinomi su adenokarcinom sa svojim epicentara na gastroezofagealnog spoja, dakle od 1 cm gore do 2 cm ispod spoju između kraja cijevnog jednjaka i početkom saccular želuca [20]. Informacije o TNM je dostupna od bolničkih snimaka i patološku dijagnozu. Istraživanje je odobrilo Etičko povjerenstvo Hebei Cancer Institute i dobije informirani pristanak od svih regrutira subjekata. Pregled, lančana reakcija polimeraze specifičan Metilacija (MSP) za E-kadherina promotora metilacije
genomske DNA iz želuca srčanih adenokarcinoma i susjedstvu nemaligno sekcija je izoliran iz parafin uklopljenih stakalca tkiva standardnim metodama pomoću pojednostavljeno proteinaze K načina razgradnje. Ispitati uzoraka DNA metilacije, pomiješa se genomske DNA s natrij bisulfitom, kao što je prethodno opisano [21]. Ukratko, 2 ug DNA su denaturirane s 2 M NaOH na 37 ° C tijekom 10 minuta, nakon čega slijedi inkubacija sa 3 M natrij-bisulfita, pH5.0, na 50 ° C tijekom 16 sati. Bisulfit pomiješa DNA je pročišćena (čišćenje Kit DNA, Promega, Madison, Wisconsin, USA), inkubirane s 3 M NaOH na sobnoj temperaturi tijekom pet minuta, istaloži se s 10 M amonij acetata i 100% etanola, ispere s 70% etanolom, a ponovno suspendiran u 20 ul destilirane vode.
ugniježdenom PCR pristup korišten je za određivanje statusa metilacija unutar E-kadherina CpG otoka u eksona 1 (slijed -126 bp do +144 bp u odnosu na transkripcije početak, pristupni broj GenBank D49685 ) koji je prethodno objavljen [15]. U prvom krugu PCR, 100 ng pročišćenih bisulfit-DNA pojačan. Početnici za sekvencioniranje bili 5'-GTTTA GTTTTGGGGAGGGGTT-3 '(smislena) i 5'-ACTAC TACTCCAAAAACCCATAACTAA-3' (antisense), i uvjeti su bili biciklističke jedan ciklus od 95 ° C tijekom 5 minuta, a zatim 30 ciklusa od 95 ° C za 30 s, 50 ° C tijekom 30 s, 72 ° C tijekom 30 s, i finalne ekstenzije na 72 ° C tijekom 5 minuta. Veličina produkta nakon tog PCR reakcije je 270 bp. Za drugi krug PCR, ovaj proizvod se razrijedi 1: 50 u vodi, te su korišteni 2 ul razrjeđenja za MSP. Ugniježđeni prajmer sekvence E-kadherina za metiliranog reakciju su 5'-TG TAGTTACGTATTTATTTTTAGTGGCGTC-3 '(smislena) i 5'-CGAATACGATCGAATCGAACCG-3' (antisense) i nizovi primera za unmethylated reakciju su 5'-TGGTTGTAGTTATGTATTTATT TTTAGTGGTGTT-3 '(smislena) i 5'-ACACCAAATA CAATCAAATCAAACCAAA-3' (antisense). PCR parametri kao što je gore navedeno, osim što su temperature žarenja za metilirani i nemetiliranih reakcije bili su 64 ° C i 62 ° C, respektivno. Veličina produkt metilnog i nemetiliranih reakcije bili su 112 i 120 bp. se koristi stanična linija karcinoma dojke MB-MDA-231, što ukazuje metiliranje i odsutnost E-kadherina i reagensa praznine kao pozitivne i negativne kontrole.
Imunohistokemijsko bojanje E-kadherina
ekspresije E-kadherina je određena imunološko pomoću avidin-biotin složenu metodu imunoperoksidaznog, koja je izvedena na paralelnim patohistološke dijelovima iz stavka tumora parafinske ugrađen i upareni normalno tkivo. Endogene peroksidaze je blokirana s 3% -tnim vodikovim peroksidom na 10 minuta, nakon čega slijedi pronalaženje microwave antigen devet minuta na 98 ° C u 10 mM natrij-citratnog pufera (pH 6,0) i inkubira u 2% normalnog konjskog seruma za smanjivanje nespecifično vezanje. Stakalca su postupno inkubirane s primarnim monoklonskih, mišjim anti-E-kadherina antitijela (1: 100 razrjeđenje u fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini, Santa Cruz, SC-8426) preko noći pri 4 ° C, biotinilirano sekundarnih antitijela tijekom 30 minuta na 37 ° C, ABC reagens za 45 min na 37 ° C. 0,5% 3,3'-diaminobenzidinu (Sigma, St. Louis, MO) je korišten kao chromagen. Za negativnu kontrolu, primarna antitijela je zamijenjen mišji IgG. Slajdovi normalne sluznice želuca su korišteni kao pozitivna kontrola. Pregled Mjerenje ekspresije mRNA E-kadherina pregled RNA ekstrahirana je iz zamrznutih sekcija tkiva prema standardnim postupcima koristeći Trizol (Invitrogen, USA). cDNA bila je sintetizirana pomoću Advantage RT-za-PCR set (Clontech, Palo Alto, CA) s oligo (dt) priming preporučeni u protokolu. GAPDH gen je korišten kao kontrola. Sekvencijama E-kadherina je 5 ° ‰ -CGACCCAACC CAAGAATCTA-3 ° ‰ (osjećaj) i 5 ° ‰ -AATGGCAG GAATTTGCAATC-3 ° ‰ (negativna), primer slijed GAPDH je 5 ° ‰ -GGGAAACTGTGGCGT GAT-3 ° ‰ (smislena) i 5 ° ‰ -GTGGTCGTTGAGGG CAAT 3 ° ‰ (antisense), veličina proizvoda bila 202 bp i 342 bp. PCR proizvodi su razdvojeni na 2% agaroznom gelu i intenziteta signala se mjere pomoću računala imaging sustav. Razine genskih transkripata je kvantificiran kao omjer intenziteta signala E-kadherina na intenzitet P-aktin. Inaktiviranog ekspresija je postignuto kad je ekspresija gena u E-kadherina u uzorku tumora bila je < 25% njegove ekspresije u odgovarajućem normalnom uzorku.
Statistička analiza pregled, Statistička analiza je provedena pomoću SPSS10.0 softvera (SPSS Company, Chicago, Illinois, USA). Fisherov egzaktni test i hi-kvadrat test se koristi za procjenu statističke značajnosti razlika i usporedite kategoričke asocijacije. Dvostrano testovi su korišteni za određivanje značenja, a P vrijednosti manje od 0,05 smatrane su statistički značajne za sve statističke testove. Pregled Rezultati
subjekta karakteristike pregled Kao što je prikazano u tablici 1, 92 OKS pacijenti su dobiveni u ovo istraživanje, uključujući i 73 muških i 19 ženskih, dobi između 38 ~ 76, srednja dob 56,9. U svim slučajevima bile razvrstane u 4 tumorski čvor-metastaza (TNM) stupnja prema UICC standarda, 8. prvom stadiju (8,7%), 32 od faza II (34,8%), 38 scenskih III (41,3%), 14 od stadiju IV (15,2%). Prema patološkim fazama, predmeti su podijeliti u 3 skupine, 42 (45,7%) umjerene grupe, 34 (36,9%) od lošeg umjereno skupine i 16 (17,4%) od lošeg group.Table 1 Kliničke i patološke karakteristike OKS pacijenti pregled Grupe
n (%)
Sex pregled Muški pregled 73 (79,3) pregled Ženski pregled 19 (20,7 ) pregled Srednja dob u godinama (SD) pregled 56.9 (8.86)
TNM stadij pregled sam
8 (8.7) pregled II
32 (34,8) pregled, III
38 (41,3) pregled IV pregled, 14 (15,2) pregled Patološka diferencijacije tumora pregled umjereno pregled 42 (45,7) pregled, loše umjereno pregled 34 (36,9)
loša pregled 16 (17,4) pregled Metilacija analiza gena E-kadherina
analizu metilacije uspješno je provedena u svim tumora i paru Normalno uzorcima tkiva (slika 1). Za 10% uzoraka, metilacije analiza se ponavlja za kontrolu kvalitete. U 63 (68,5%) od 92 OKS tumora E-kadherina metilacije je otkriven, a samo u 10 (10,9%) od uparenih normalnog tkiva je otkriven E-kadherina metilacije. Učestalost E-kadherina metiliranjem tumorskih tkiva bila je značajno veća nego u paru normalnog tkiva (p 0.001). Kada je stratificiran TNM stadija, učestalosti gena E-kadherina metilacije OKS bolesnika s stadiju III i stadiju IV (78,8%) bili su značajno viši od OKS bolesnika s stadiju I i faze II (55%) (X2 = 5,96, p = 0,01 ). Kada je stratificiran patološkim fazama, E-kadherina gen metilacije frekvencije umjereno, loše-umjerenom i siromašnih skupini bili su 52,4%, 73,5% i 100%, učestalost E-kadherina gena metilacije slabe skupine značajno veći nego u umjerenim i siromašnih -moderate skupine (χ2 = 8,92, P = 0,003) (Tablica 2). Slika 1 Metilacija analiza E-kadherina u tumorskom tkivu (T), a odgovarajući normalno tkivo (N). u: ukazuje na prisutnost nemetiliranih gena; m: ukazuje na prisutnost metiliranih gena. Slučajevima 1 i 2: tumorski specifični metiliranje; Slučaj 3: tumor potpuno metiliran, a odgovarajući normalno tkivo Ima vrlo slab sastav koji pokazuje metiliranje; Slučaj 4: oba tumora i odgovara normalnom tkivu unmethylated pregled Tablica 2 E-kadherina metilacije i imunohistokemijska karakteristike obojenja OKS pacijenata pregled <. col> Grupa
metilacije status
P
Imunohistokemijsko bojanje
P
M
U pregled -
+ pregled TNM stadij pregled sam
4
4
2 pregled, 6 pregled II pregled, 18 pregled, 14 pregled, 13 pregled, 9 Netlogu III
29 pregled, 9
26 pregled, 12 pregled IV pregled 12. pregled 2
0.015a pregled 10. pregled 4
0.002a pregled patološka diferencijacije tumora pregled umjerena pregled 22 pregled, 20 pregled, 20 pregled 2
lošeg umjereno Netlogu 25 pregled, 9
18 pregled, 16 pregled siromašnih pregled, 16
0 pregled 0.003b pregled 13 pregled 3
0.022b pregled p vrijednost od faze III i IV pacijenata protiv stadiju i i II pacijenata, b P vrijednosti siromašnih diferencijacija skupina protiv umjeren i siromašnih umjereno skupina
imunološko E-kadherina gena
Kako je prikazano u tablici 2, bojanje je heterogena u 51 tumorskog tkiva, tumorske stanice sa smanjenom membranskom E-kadherina bojanje pomiješani su s tumorskim stanicama pokazuje jaku membranskom bojanje (Slika 2). Učestalost ekspresije proteina bila je 44,6% u tumorskim tkivima, dok je u paru normalne Uzorci tkiva sve pokazao difuzne jak Membranozni E-kadherina bojenje. Učestalost ekspresije proteina bila značajno različita između tumora i normalnog tkiva upareni (P < 0.001). Kada je stratificiran TNM stadija, učestalosti E-kadherina gena proteina izražavanja IV tumorskih tkiva (30,8%) stadiju III i bio je znatno niži nego u fazi I i II tumorskih tkiva (62,5%) (χ2 = 9,21, P = 0,002) , Učestalost E-kadherina ekspresije gena proteina slabe skupine znatno nižoj od one u umjerenom i siromašnih umjereno skupine (X2 = 5,23, P = 0,022). Slika 2 E-kadherina u imunološko OKS tkivu. A: pozitivno bojenje (normalno tkivo). B:. Negativno obojeni (OKS tkivo) izraz pregled mRNA za E-kadherina gena pregled razinama transkripata određena je u 32 odabranih zamrznutih uzoraka u OKS pomoću RT-PCR analize (Slika 3). 32 uzoraka OKS uključujući 2. fazi sam, 2. faze II, 8 iz faze III i 8. fazi IV slučajeva u kojima je tumor bio metiliran i 12 slučajeva (2. Faza I, 4, u fazi II, 4 pozornice III i 2. stadiju IV) sa unmethylated E-kadherina gena. 202 bp fragment genskog transkripta E-kadherina generiran s 342 bp fragmenta GAPDH transkripta kao kontrolom. 16 (1 od faze II, 7 faze III 8. stadiju IV) slučajeva (80%) od inaktiviranih mRNA ekspresije su kod 20 uzoraka tumora s genom E-kadherina metiliran, drugi 4 (2 faze I, 1. faza II, 1. stadij III) slučajeva pokazao pozitivan izraz. 12 uzoraka tumora s genom E-kadherina unmethylated svi su pokazali pozitivnu ekspresiju gena E-kadherina. Slika 3. Analiza mRNA E-kadherina u tumorskim tkivima. 1: 100 bp DNA marker 2,4,5,6,9: pozitivno mRNA 3,7,8. Negativna ekspresija mRNA pregled Rasprava pregled Kina je zemlja s visokom incidencijom karcinoma probavnog trakta koja uključujući i jednjaka karcinom, karcinom želuca i želuca srčani adenokarcinom (OKS). OKS, koje je prethodno registriran kao rak jednjaka ili raka želuca, bio je nezavisno dijagnosticiran u vrlo posljednjih nekoliko godina, s obzirom na napredak u ranom endoskopske pregleda i patološke dijagnoze. On je predložio nekoliko epidemioloških podataka da je učestalost OKS je u porastu u posljednjih nekoliko godina. Neka istraživanja su pokazala da je mehanizam i klinički simptom OKS se razlikuje od raka želuca, ali slična raka jednjaka. Točan mehanizam nastanka OKS ostaje nejasno u tom trenutku. Općenito je prihvaćeno da je nasljedni faktor koji iritiraju pojavu tumora, uključujući dva mehanizma, genetike i epigenetika mehanizam. Genetske abnormalnosti protoonkogena i supresorskih gena tumora poznate su promjene koje se često uključeni u patogenezi raka. Međutim, Epigenetske inaktivacija određenih gena za suzbijanje tumora nenormalnom promotora metiliranjem često se promatra u nekoliko vrsta raka i može imati ključnu ulogu u nastanku tumora. Dok su genetske abnormalnosti povezane s promjenama u DNA sekvenci epigenetski događaji mogu dovesti do promjena u ekspresiji gena koji se javljaju bez promjene DNA. Ako se tumor supresor gena, uzrokuje najčešće u transkripcijskoj utišavanja, a time i inaktivaciju tim genom. Onda mogu dati prednost rasta za te stanice koje favoriziraju razvitak karcinoma [22].
Kao član stanične adhezije molekularne, E-kadherina imaju važnu ulogu u održavanju stanične adhezije te je njegova disfunkcija može dovesti tumorigenesis.6 Biološka posljedice njegove disfunkcije uključuju poremećaje u međustanične adhezije i umanjenje vrijednosti ß-katenina posredovanog transaktivacije [23]. Do danas, međutim, regulatorni mehanizmi odgovorni za promijenjenim razine proteina E-kadherina u OKS nisu razjašnjeni. On je izvijestio da Hipermetilacija E-kadherina su povezani s karcinomom želuca i jednjaka adenokarcinoma [21, 24]. Međutim, ne postoje druge Izvješće o odnosu između Ecadherin metilacije i tumorigenezi OKS. U ovom istraživanju, pokazali smo da Hipermetilacija od 5 'CpG otoka promotora E-kadherina dogodila često u OKS tkivima (68,5%), te da je ta promjena metilacija povezana je sa smanjenom ekspresijom proteina E-kadherina. Naši podaci sugerirao da epigenetičko utišavanje promotora E-kadherina preko Hipermetilacija može biti jedan od kritične mehanizam inaktivacije tog gena u OKS. Utišavanje gena povezana s Hipermetilacija posredovan je metil-vezujući proteini koji se vežu na metilnim citozini i zaposliti kompleks proteina koji potiskuju transkripciju, uključujući histon deacetilaze [25].
U našem istraživanju, otkrili smo da u većini slučajeva ispitali smo, E-kadherina metilacije je tumor specifične. Međutim, 10 slučajevi u kojima je promjena metilacijskom prisutan i tumora, a upareni normalna tkiva od istog pacijenta. S obzirom na osjetljivost ugniježđena MSP, moguće je da su normalni-pojavljivanje primjerci sadržani rijedak stanicu raka koja je neprimjetnu histomorphology. Zbog ograničenja uzorka, nismo proučavati metilacije E-kadherina u normalnim kardija tkiva. Međutim, normalna jednjaka tkivo nije pokazao neprirodni E-kadherina metilacije u nekim studijama [21] iu prethodnim studijama istražuje E-kadherina metilacije u različitim vrstama tumora, normalna tkiva iz koštane srži, dojke, štitnjače, i sluznice usne šupljine su nemetiliran [ ,,,0],14, 26]. Ovi podaci snažno sugerirao da je E-kadherina promotor metilacije je netipična događaj. Činjenica da smo samo otkriti metilacije u uparenih normalnim tkivima pacijenata kod kojih je također metiliranih odgovarajući tumor je u skladu s hipotezom da je rak u tim pojedincima proizlaze iz metiliranog klonskom prekursora. U studiji neoplastične napredovanja u Barrett je jednjak, Hipermetilacija od gena p16 tumor supresorski je otkriven u patološki normalnim-pojavljivanje uzoraka dobivenih od pacijenta koji je kasnije razvio displazija [27]. Stoga epigenetičko inaktivacija gena za suzbijanje tumora može biti rani značajka tumorogenezi.
Naši rezultati pokazuju da je ekspresija proteina u tumorskim tkivima Ecadherin znatno niži nego onaj kod uparenih normalnim tkivima, međutim, Imunokemijsko bojenje je također pokazao normalnu membranskom bojenje E -cadherin u nekim uzorcima tumora s E-kadherina metilacije. Postoji nekoliko mogućih razloga za događaje. Prvo, to je vjerojatno zbog činjenice da je imunohistokemijski bojenje nisu toliko osjetljive kao PCR u otkrivanju subpopulacije stanica genske metilacije, a time i silazni E-kadherina. Drugo, tumorskih tkiva može miješati nekoliko normalna tkiva i mogu pokazali su normalnu membranskom bojenje E-kadherina. Treće, gen heterogena metilacije ili alela metilacije može biti važan razlog. U našim istraživanjima, otkrili smo da je metilacije status tumorskih tkiva da oba pokazuju pozitivnu ekspresiju proteina i Hipermetilacija bili nepotpuni Ecadherin metilacije. Nadalje, dokazano je da je DNA metilacije koji potiskuje ekspresiju gena uglavnom u razini transkripcije i gustoća CpG otoka metilacija se odnosi na potisnuti stupanj transkripcije [28]. Dicky promotor može potpuno potisnuti nižim metilacije gustoće, međutim, kada promotor je poboljšana enhanser, će se dohvatiti funkcija transkripcije. U našoj studiji, mi smo također otkrili pozitivan izražaj mRNK u nekim uzorcima tumora s gena E-kadherina metiliran. Je djelomično zbog činjenice da stupanj promotora metilacije bila nepotpunoj suzbiti transkripciju E-kadherina. Sve u svemu, Naše istraživanje sugerira da epigenetičko utišavanje od promotora E-kadherina preko Hipermetilacija može biti jedan od mehanizama za inaktivaciju E-kadherina u OKS.
Izjavama pregled Zahvale pregled Zahvaljujemo pacijentima i kontrolnih pojedinaca za sudjelovanje u ovom istraživanju.
Oslanjajući se darovnica iz znatnog karakterističan subjekata postanka pokrajini Hebei. pregled

• Klinički značaj uPA sustava raka želuca s metastazama peritonealnoj
• Epstein-Barr virus-specifične metiliranje ljudskih gena u stanicama raka želuca