Kimutatása promoter hipermetiláció CpG sziget E-cadherin a gyomor szív adenocarcinoma

kimutatása promoter hipermetiláció CpG sziget E-cadherin a gyomor adenokarcinóma szív katalógusa Abstract
Cél katalógusa Rendellenes hipermetiláció CpG-szigetek kapcsolatos tumor szuppresszor gének vezethet transzkripciós hangtompító a neoplázia. A cél az volt, hogy vizsgálja meg a promoter metiláció és kifejezése E-cadherin gén gyomor szív adenokarcinóma (GCA). Katalógusa Módszerek
Beágyazott MSP megközelítés immunhisztokémiai módszerrel és RT-PCR-rel használható, illetve, hogy vizsgálja meg a metilációs állapotát az 5 'CpG-szigetre az E-cadherin, annak fehérje expresszióját és mRNS expressziója a daganatokban és a megfelelő normális szövetekben.
Eredmények
E-cadherin metileztük 63 92 (68,5%) a tumor minták, amelyek szignifikánsan magasabb volt, mint a megfelelő normál szövetekben (P < 0,001). Metilezése frekvenciái színpadi III és a IV tumor szövetekben jelentősen magasabb volt, mint az I. szakaszban és a II tumor szövetekben (p = 0,01). Metilációs állapotát szegény differenciálás csoportban szignifikánsan magasabb volt, mint a közepesen és gyengén közepes differenciálódás csoportok között (P < 0,01). Immunfestéssel 51 92 tumor tisssues bizonyította heterogén, pozitív immunfestést a tumor szövetekben (44,6%), jelentősen eltér a párosított normál szövetekben (P < 0,001). Pozitív immunológiai stádiumú és IV tumor szövetekben jelentősen alacsonyabb volt, mint a szakaszban az I. és II tumor szövetekben (P < 0,01). Gyenge differenciálódás csoport is szignifikánsan alacsonyabb, mint a mérsékelt és szegény-mérsékelt differenciálódás csoportok (P < 0,05). 80 százaléka a tumor szövetek E-cadherin gén metilezett mutatta, inaktivált mRNS expresszióját.
Következtetések
Nagy metilációs állapotát az 5 'CpG-szigetre az E-cadherin gén lehet mechanizmusok egyikét a fejlesztés a gyomor kardiális adenokarcinóma .
kulcsszavak
E-cadherin metiláció gyomor kardiális adenokarcinóma Bevezetés
E-cadherin egy M r 120.000 transzmembrán glikoprotein expresszálódik, hámsejtek, és felelős a homofil, Ca 2 + -függő intercelluláris adhéziós, amely elengedhetetlen a fenntartásához normális szövet építészet epiteliális szövetekben [1]. A citoplazmatikus domén az E-cadherin kötődik a-, β- és y-catenins, amelyek viszont kapcsolódnak actins, és ez a kölcsönhatás kritikus funkciója [2]. Sejt-sejt és sejt-mátrix kölcsönhatások döntően részt neoplasztikus transzformáció és metasztázis a [3, 4]. Hibás sejt adhézió hozzájárulhat megszűnik a kontakt gátlás a növekedés és a veszteség a sejtadhézió lehet felelős a képessége rákos sejtek átlépni a normál szöveti határokat, és metasztázis [5]. A fontos az E-cadherin fenntartásában sejtadhéziós azt jelenti, hogy annak diszfunkció is fontos szerepet játszanak a tumorigenezisben. Elvesztése E-cadherin expresszió lép fel a különböző emberi tumorok, és feltételeztük, hogy egy fontos lépés a progresszió a daganatképződés invázió és metasztázis. [6]
Az utóbbi években számos tanulmány a kritikus szerepet az E-cadherin in tumorigenezis. Kimutatták, hogy a csíravonal-mutációk az E-cadherin gén kapcsolódik familiáris gyomor- és colorectalis rák [7, 8]. Továbbá, a szomatikus mutációk az E-cadherin is találtak gyomor karcinóma és allél elvesztése az E-cadherin pályáját 16q22.1 számoltak be különböző epiteliális tumorok, így például emlő-, petefészek-, endometrium-, és a prosztata karcinómák [9, 10] . Kivéve ezt genetikai elváltozások, epigenetikai megváltoztatását tartalmazzák hipermetiláció az 5 'CpG-szigetre belül a promoter az E-cadherin is felelős transzkripciós elnyomás a gén [11]. Ismeretes, hogy a rendellenes hipermetiláció CpG-szigetek társított tumorszuppresszor gének vezethet transzkripciós silencing in neoplasia [12]. Valóban, metiláció-asszociált silencing az E-cadherin képviseli a leggyakoribb oka annak inaktivációja több rákok, mint például a máj, a prosztata, mell és a nyelőcső [13-15].
Gyomor kardiális adenokarcinóma (GCA), amelyet korábban regisztrált a nyelőcsőrák vagy gyomorrák, már diagnosztizálták függetlenül nagyon elmúlt években, köszönhetően a javuló korai endoszkópos szűrés és patológiai diagnózis. Kína egy olyan ország a magas előfordulási régióiban GCA, Különösen Taihang hegy Észak-Kína. Külső tényezők, beleértve a táplálkozás hiányosság, egészségtelen életvitel, az alkoholfogyasztás és a dohányzás, patogén fertőzések általában úgy, mint a kockázati tényező GCA Kínában [16-18]. Azonban csak egy részhalmaza az egyének ki vannak téve a fent felsorolt ​​exogén kockázati tényezők fog fejlődni GCA, ami arra utal, hogy a többszörös genetikai és epigenetikai események hozzájárulhatnak a progresszió GCA. Ez egyre inkább felismerték, hogy epigenetikus csendesítése génexpresszió promoter CpG hipermetiláció fontos alternatív mechanizmust inaktiválásához tumorszuppresszor gének és tumorasszociált gének rákok [19]. Mutációk az E-cadherin gén ritkák GCA, így, ebben a tanulmányban, értékeltük a szerepe metilezése 5 'CpG-szigetre az E-cadherin és annak korreláció csökkent az E-cadherin expresszió GCA.
Módszerek
betegek és minták katalógusa tumor és párosítva normális szövetmintából kaptuk 92 beteg. Ezeket a szöveteket osztották két párhuzamos részből áll, az egyik rész fagyasztjuk és -80 ° C-on, amíg az RNS-t extraháltunk, a másik része volt formalinnal fixált és paraffinba ágyazott. Az esetek mind fekvőbetegek sebészi kezelés a negyedik Kapcsolt Kórház, Hebei Medical University 2004 és 2006 között a szövettani daganat tipizálása végeztük alapján eltávolított példányok a Department of Pathology az ugyanabban a kórházban. Minden gyomor kardiális carcinomák adenokarcinómák azok epicentrumok a gastrooesophagealis csomópont, azaz a 1 cm-rel, amíg 2 cm-rel a csomópont között a végén a cső alakú nyelőcső és az elején a saccularis gyomor [20]. Tájékoztatás a TNM stádium volt elérhető a kórházból felvételek és patológiai diagnózis. A tanulmány által jóváhagyott Etikai Bizottsága Hebei Cancer Institute és beleegyezését adta az összes felvett tárgyak. Katalógusa Metiláció specifikus polimeráz láncreakció (MSP) az E-cadherin promoter metiláció katalógusa genomiális DNS-t a gyomor szív adenocarcinoma és a szomszédos nem rosszindulatú szakaszok-t izoláltunk, paraffinba ágyazott szövet diákat standard módszerekkel egy egyszerűsített proteináz-K emésztés módszerrel. Ahhoz, hogy vizsgálja meg a DNS metiláció mintákat, mi kezelt genomi DNS-t nátrium-hidrogén-szulfit, a korábban leírtak szerint [21]. Röviden, 2 ug DNS-t denaturáltuk, 2 M NaOH-oldattal 37 ° C-on 10 percig, majd inkubáltuk 3 M nátrium-hidrogén-szulfit, pH 5,0, 50 ° C-on 16 órán át keverjük. Biszulfittal kezelt DNS-t ezután tisztítjuk, (DNS-t Cleanup Kit; Promega, Madison, Wisconsin, USA), inkubáltuk 3 M nátrium-hidroxiddal szobahőmérsékleten öt percig, kicsaptuk 10 M ammónium-acetát és 100% -os etanollal mossuk, 70% -os etanollal, és újra szuszpendáljuk 20 ul desztillált vízben.
nested PCR megközelítést használták, hogy meghatározzák a metiiációs állapotát belül az E-cadherin CpG-szigetre 1. exonban (szekvencia -126 bp és 144 bp képest transzkripciós start, GenBank hozzáférési szám D49685 ), amely már korábban publikált [15]. Az első PCR, 100 ng biszulfittal kezelt DNS-t felerősödik. A szekvenáló primereket voltak: 5'-GTTTA GTTTTGGGGAGGGGTT-3 '(szensz), és 5'-ACTAC TACTCCAAAAACCCATAACTAA-3' (antiszensz), és a kerékpáros körülmények egy ciklus 95 ° C-on 5 perc, amelyet 30 ciklus 95 ° C-on 30 s, 50 ° C-on 30 s, 72 ° C-on 30 s, és egy végső extenzió 72 ° C-on 5 percig melegítjük. A méret a termék ezt követően a kezdeti PCR-reakció 270 bp. A második PCR ciklusban, ez a termék hígítottuk 1: 50 vízben, és 2 ul, a hígítás használtak MSP. Nested primer szekvenciák az E-cadherin a metilezett reakció voltak: 5'-TG TAGTTACGTATTTATTTTTAGTGGCGTC-3 '(szensz), és 5'-CGAATACGATCGAATCGAACCG-3' (antiszensz), és primer szekvenciák a metilálatlan reakció voltak: 5'-TGGTTGTAGTTATGTATTTATT TTTAGTGGTGTT-3 '(szensz), és 5'-ACACCAAATA CAATCAAATCAAACCAAA-3' (antiszensz). A PCR paraméterei a következők voltak, mint a fent felsorolt, kivéve, hogy a lágyítási hőmérséklet a metilált és metilálatlan reakciók 64 ° C és 62 ° C, ill. A termék mérete metilált és metilálatlan reakciók a 112 és 120 bp volt. Az emlőrák sejtvonal MB-MDA-231, amely bemutatja metiláció és hangtompító az E-cadherin és reagens üres használtunk pozitív és negatív kontrollként.
Immunhisztokémiai festését E-cadherin
E-cadherin expresszió határoztuk meg immunfestés az avidin-biotin komplex immunperoxidáz módszerrel, amelyet végeztünk párhuzamos kórszövettani metszetet paraffinba ágyazott tumor részt, és a párosított normál szövetben. Az endogén peroxidáz blokkoltuk 3% -os hidrogén-peroxid 10 percig, majd a mikrohullámú antigén-visszanyerés kilenc percen át 98 ° C-on 10 mM nátrium-citrát pufferben (pH = 6,0), és inkubáljuk 2% normál lószérum, hogy minimalizálja a nem specifikus kötődés. A tárgylemezeket egymás után inkubáltuk primer monoklonális, egér anti-E-cadherin antitesttel (1: 100 hígítás, foszfáttal pufferolt sóoldat, Santa Cruz, SC-8426) egy éjszakán át 4 ° C-on, biotinilált szekunder antitest 30 percig 37 ° C-on és ABC reagens 45 percen át 37 ° C-on. 0,5% 3,3'-diaminobenzidin (Sigma, St. Louis, MO) használtunk a ChromaGen. A negatív kontroll, a primer antitest váltotta egér IgG-vel. A lemezeket normál gyomornyálkahártya használtunk pozitív kontrollként.
Mérése mRNS expresszióját az E-cadherin
RNS-t kivontuk fagyasztott metszet szövetekből standard módszerekkel Trizol (Invitrogen, USA). cDNS-t szintetizáltunk a Advantage RT-for-PCR készlettel (Clontech, Palo Alto, CA) oligo (dT) priming ajánlott a jegyzőkönyvben biztosított. A GAPDH-gén használtuk kontrollként. A primer szekvenciák az E-cadherin volt 5 ° ‰ -CGACCCAACC CAAGAATCTA-3 ° ‰ (sense) és 5 ° ‰ -AATGGCAG GAATTTGCAATC-3 ° ‰ (antiszensz), primer szekvenciája GAPDH 5 ° ‰ -GGGAAACTGTGGCGT GAT-3 ° ‰ (sense) és 5 ° ‰ -GTGGTCGTTGAGGG CAAT-3 ° ‰ (antiszensz), a termék mérete is 202 bp és 342 bp volt. A PCR termékeket oldani 2% -os agaróz gélen és a jel intenzitását mennyiségileg számítógép segítségével képalkotó rendszer. A szinteket a gén transzkriptumok számszerűsíthető az arány a intenzitása az E-cadherin jel intenzitása β-aktin. Inaktivált expressziós pontoztuk amikor expresszióját az E-cadherin gén tumor minta < 25% az expressziójának a megfelelő normál minta.
Statisztikai analízis
Statisztikai analízist SPSS10.0 szoftver (SPSS Company, Chicago, Illinois, USA). Fisher-féle egzakt teszt és a Chi-négyzet tesztet használtunk értékeléséhez statisztikai jelentőségét különbségek és hasonlítsa kategorikus egyesületek. Kétoldalas vizsgálatokat jelentőség meghatározására használt, és a P értékek 0,05-nél kisebb értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak az összes statisztikai teszteket.
Eredménye
Tárgy jellemzőit
Mint az 1. táblázatban látható, a 92 GCA beteget kapott A kutatás többek között 73 férfi és 19 nő, életkor között mozgott 38 ~ 76, átlagéletkor 56,9. Minden esetben soroltuk 4 tumor-node-metasztázis (TNM) szakaszában szerinti UICC szabvány 8. Az I. szakasz (8,7%), 32. szakasz II (34,8%), 38. szakasz III (41,3%), 14 szakasz IV (15,2%). Szerint a kóros fázisok, az esetek soroltuk 3 csoport, 42 (45,7%) mérsékelt csoport, 34 (36,9%), rossz-közepes csoport és 16 (17,4%), rossz group.Table 1 Klinikai és patológiai jellemzői GCA betegek katalógusa Csoportok Matton n (%) Matton Sex katalógusa Férfi katalógusa 73 (79,3) fiatal női katalógusa 19 (20.7 ) hotelben átlag életkor években (SD) hotelben 56,9 (8,86) hotelben TNM katalógusa I
8 (8.7) hotelben II
32 (34,8) hotelben III
38 (41,3) hotelben IV katalógusa 14 (15,2) hotelben Kóros differenciálódása tumor katalógusa mérsékelt katalógusa 42 (45,7) hotelben gyenge vagy mérsékelt katalógusa 34 (36,9)
szegény
16 (17,4)
metiláció elemzése E-cadherin gén katalógusa A metilációs elemzés sikeresen végre az összes tumoros és párosított normális szövet minta (1. ábra). A minták 10%, metilációs analízist megismételtük a minőség-ellenőrzés. 63 (68,5%) mennyiségben a 92 GCA daganatok E-cadherin metiláció volt kimutatható, míg csak a 10 (10,9%) a párosított normál szövetekben E-cadherin metiláció volt kimutatható. A frekvencia az E-cadherin metilezésével tumorszövetekben szignifikánsan magasabb volt, mint a páros normál szövetekben (P < 0,001). Amikor csoportosítottuk TNM szakaszban gyakorisága E-cadherin gén metilációs GCA stádiumú III és IV-es szint (78,8%) szignifikánsan magasabb volt, mint a GCA stádiumú I. szakasz és a II (55%) (χ2 = 5,96, p = 0,01 ). Amikor rétegzett patológiai szakaszában, az E-cadherin gén metilációs frekvencián mérsékelt, gyenge közepes és gyenge csoportban 52,4%, 73,5% és 100%, gyakorisága E-cadherin gén metilációs szegény csoport szignifikánsan magasabb, mint a közepes vagy gyenge -moderate csoportok (χ2 = 8,92, p = 0,003) (2. táblázat). 1. ábra A metilezési analízist az E-cadherin tumorszövetben (T) és a megfelelő normál szövetben (N). U: jelenlétét jelzi metilálatlan gének; m: jelenlétét jelzi metilált gének. 1. és 2. esetben: a tumor-specifikus metilezés; 3. eset: a tumor teljesen metilezett, míg a megfelelő normál szövetben van egy nagyon halvány sáv bizonyító metilezés; 4. eset: mind a tumor és a megfelelő normális szövet metilálatlanok. Katalógusa 2. táblázat E-cadherin metiláció és immunhisztokémiai festéssel jellemzőit GCA betegek katalógusa Csoport Matton metilációs állapotát Matton P Matton immunhisztokémiai Matton P Matton M katalógusa U katalógusa -
+ katalógusa TNM katalógusa I
4 katalógusa 4 katalógusa 2 | 6 katalógusa II katalógusa 18 katalógusa 14 katalógusa 13 katalógusa 9 katalógusa III
29 katalógusa 9 katalógusa 26 katalógusa 12 katalógusa IV katalógusa 12 katalógusa 2 | 0.015a katalógusa 10 katalógusa 4 katalógusa 0.002a katalógusa Kóros differenciálódása tumor katalógusa mérsékelt katalógusa 22 katalógusa 20 katalógusa 20 katalógusa 2 | gyenge vagy mérsékelt katalógusa 25 katalógusa 9 katalógusa 18 katalógusa 16 katalógusa szegény katalógusa 16
0 katalógusa 0.003b katalógusa 13
3 katalógusa 0.022b katalógusa P értéke színpad és IV betegek ellen szakaszban az I. és II betegeknél, b P értéke szegény differenciálódás csoport ellen mérsékelt és szegény-mérsékelt csoportok
immunfestése E-cadherin gén
Mint a 2. táblázatban látható, a festődés volt heterogén 51 tumor szövetekben, a tumor sejtek csökkent hártyás E-cadherin festés összekeverünk tumorsejtek jelezve az erőteljes membrán festés (2. ábra). A protein expresszió 44,6% volt a daganatos szövetben, míg párosított normális szövetmintából összes bizonyított diffúz erős hártyás E-cadherin festéssel. Gyakorisága fehérje expresszió szignifikánsan különbözött a tumor és a párosított normál szövetekben (P < 0,001). Amikor rétegzett a TNM szakaszaiban, Frekvencia az E-cadherin gén fehérje expresszióját a szakaszban a III és a IV tumor szövetekben (30,8%) szignifikánsan kisebb volt, mint az I. szakaszban és a II tumor szövetekben (62,5%) (χ2 = 9,21, p = 0,002) . Gyakorisága az E-cadherin gén fehérje expresszióját szegény csoport szignifikánsan alacsonyabb, mint a mérsékelt és szegény-mérsékelt csoportok (χ2 = 5,23, P = 0,022). 2. ábra E-cadherin immunostain a GCA szövetben. A: pozitív festést (normális szövet). B: negatív festési (GCA szövet).
MRNS expressziója az E-cadherin gén
szintje a transzkriptumok határoztuk meg a 32 kiválasztott fagyasztott GCA minták RT-PCR analízis (3. ábra). A 32 GCA minta, többek között 2 I. szakasz, 2. szakasz II 8. szakasz III és 8. szakasz IV esetekben, amikor a tumor metilezzük 12 esetben (2 I. szakasz, 4. szakasz II 4. stádiumú és 2. szakasz IV) metilálatlanok E-cadherin gén. Egy 202 bp-s fragmentumot az E-cadherin gén transzkriptum keletkezett, egy 342 bp-GAPDH fragmensét az átirat, mint a kontroll. 16 (1 Stage II, 7. szakasz III és 8. szakasz IV) esetben (80%) inaktivált mRNS expresszió volt megfigyelhető 20 tumor minták E-cadherin gén metilezett, a másik 4 (2 I. stádiumú, 1 szakasz II 1. szakasz III) esetben mutatott pozitív kifejezés. 12 tumor minták E-cadherin gén metilálatlan összes mutatott pozitív expresszióját az E-cadherin gén. 3. ábra mRNS analízise E-cadherin tumor szövetekben. 1: 100 bp DNS marker 2,4,5,6,9: pozitív mRNS expresszió 3,7,8: negatív mRNS expresszióját. Katalógusa Vita katalógusa Kína egy olyan ország a magas előfordulási emésztőrendszer rákos, amely többek között a nyelőcső karcinóma, a gyomorrák és a gyomor szív adenokarcinóma (GCA). GCA, amely korábban regisztrált nyelőcsőrák vagy gyomorrák, már diagnosztizálták függetlenül nagyon elmúlt években, köszönhetően a javuló korai endoszkópos szűrés és patológiai diagnózis. Azt javasolták, több epidemiológiai adatok, hogy az előfordulási gyakorisága a GCA növekszik az elmúlt években. Egyes kutatások kimutatták, hogy a mechanizmus és a klinikai tünete a GCA eltér gyomorrák, de hasonló a nyelőcsőrák. A pontos mechanizmus bekövetkezésének GCA is tisztázatlan a pillanatban. Általánosan elfogadott, hogy az örökletes tényező, amely irritáló előfordulását tumor, beleértve a két mechanizmus, a genetika és epigenetics mechanizmus. Genetikai rendellenességek proto-onkogének és tumorszuppresszor gének jól ismert változások, amelyek gyakran szerepet játszanak a rák patogenezisében. Azonban epigenetikai inaktiválása egyes tumorszuppresszor gének által aberráns promoter metiláció gyakran megfigyelhető számos rák és döntő szerepet játszanak a tumorigenezisben. Bár a genetikai rendellenességek állhatnak a változások a DNS-szekvencia, epigenetikai események vezethetnek génexpressziós változásokat előforduló változások nélkül a DNS-szekvencia. Ha a tumor szuppresszor gének érintettek, azt eredményezi, általában transzkripciós silencing, és így inaktiválása hogy gént. Lehet majd ruházza növekedési előnye, hogy ezek a sejtek, amelyek kedveznek a rák fejlődését [22].
Tagjaként sejtadhéziós molekula, az E-cadherin fontos szerepet játszanak fenntartásában sejtadhézió és diszfunkció vezethet tumorigenesis.6 A biológiai következményeit diszfunkció zavarok intercelluláris adhéziós és értékvesztés a ß-catenin közvetítette transzaktivációját [23]. A mai napig azonban a szabályozási mechanizmusok felelős megváltozott szintek az E-cadherin fehérjéket GCA még nem tisztázott. Leírták, hogy hipermetiláció E-cadherin kapcsolatban voltak a gyomorrák és a nyelőcső-adenocarcinoma [21, 24]. Azonban nincs más jelentése közötti kapcsolat Ecadherin metiláció és tumorigenezis GCA. Ebben a vizsgálatban kimutattuk, hogy hipermetiláció 5 'CpG-szigetre az E-cadherin promoter történt gyakran GCA szövetekben (68,5%), és hogy ez a metilezést változás társult csökkent expresszióját az E-cadherin fehérje. Adataink azt javasolta, hogy epigenetikus csendesítése az E-cadherin promoter keresztül hipermetiláció lehet az egyik kritikus mechanizmus inaktiválása a gén GCA. Géncsendesítéssel kapcsolódó hipermetiláltsági közvetítik metil-kötő fehérjék, amelyek kötődnek denaturált citozin és felvenni egy komplex fehérjék elnyomják átírás, köztük a hiszton dezacetilázok [25].
Tanulmányunkban azt találtuk, hogy az az esetek többségében megvizsgáltuk, E-cadherin metiláció volt tumorspecifikus. Azonban 10 esetekben, amelyekben a metilációt változás volt jelen mind tumor, mind a párosított normál szövetekben ugyanabból a betegnek. Tekintettel az érzékenységet a beágyazott MSP, akkor lehetséges, hogy normálisnak tűnő foglalt minták egy ritka rákos sejt, amely nem volt kimutatható által histomorphology. Mivel a korlátozás a minta, nem foglalkoztunk a metiláció az E-cadherin normál cardia szövetekben. Azonban normális nyelőcső szövet nem mutattak rendellenes E-cadherin metiláció az egyes tanulmányok [21] és a korábbi vizsgálatok, melyek az E-cadherin metiláció különböző daganattípusok, normális szövetekben a csontvelőből, emlő, pajzsmirigy, és az orális nyálkahártya voltak metilálatlan [ ,,,0],14, 26]. Ezek az adatok amellett szólnak, hogy az E-cadherin promoter metiláció egy rendellenes eseményt. Az a tény, hogy csak észlelt metilezés párosított normál szöveteket a betegeknél, akiknél a megfelelő tumor is metilezzük összhangban van azzal a hipotézist, hogy a rák ezen személyek merült fel egy metilezett klonális prekurzor. Egy vizsgálatban a daganatos progresszió Barrett-nyelőcső hipermetiláció a tumor szupresszor gén p16 volt kimutatható kórosan normálisnak tűnő példányok kapott a beteg, aki később kifejlesztett diszplázia [27]. Ezért epigenetikus inaktiválása tumorszuppresszor gének lehet korai jellemzője tumorigenezis.
Eredményeink azt mutatták, hogy a fehérje expressziója Ecadherin tumor szövetekben jelentősen alacsonyabb, mint a párosított normál szövetekben azonban immunhisztokémiai festéssel is kimutatta, normális membrán festés az E -cadherin néhány tumor minták E-cadherin metilezés. Számos lehetséges események okait. Először is, ez valószínűleg annak a ténynek köszönhető, hogy a immunhisztokémiai festéssel nem volt olyan érzékeny, mint a PCR kimutatásában szubpopulációk sejtek gén metiláció és így alulszabályozása E-cadherin. Másodszor, a tumor szövetek keveredik néhány normális szövetekben, és azt mutatta, normális membrán festés az E-cadherin. Harmadszor, a gén heterogén metilezést vagy egy allél metiláció lehet fontos oka. Vizsgálataink azt találtuk, hogy a metilációs állapotát a tumor szövetekben, hogy mindkét mutatott pozitív fehérje expresszióját és hipermetiláció hiányosak voltak Ecadherin metilezés. Ezenkívül kimutatták, hogy a DNS-metilációs amely elnyomott génexpressziót elsősorban transzkripciós szinten, és a sűrűsége a CpG-szigetre metiláció kapcsolatban állt a elfojtott mértékű transzkripció [28]. Dicky promoter lehet teljesen elnyomható kisebb sűrűségű metiláció azonban, amikor promoter fokozza enhanser, funkciója a transzkripció kerül beolvasásra. Tanulmányunkban azt is megállapította, pozitív mRNS expressziója bizonyos tumor minták E-cadherin gén metilált. Ez részben annak a ténynek köszönhető, hogy a mértéke promóter metiláció volt Elégtelen, hogy elnyomja az E-cadherin transzkripciót. Minden, a mi tanulmány azt javasolta, hogy az epigenetikai elnémítása az E-cadherin promoter keresztül hipermetilációt lehet az egyik mechanizmus inaktiválása E-cadherin GCA. Katalógusa nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa Köszönjük a betegek és a kontroll személyek hogy részt vesz a vizsgálatban.
támogatták a jelentős megkülönböztető tárgyak alapja Hebei tartományban. katalógusa

• Klinikai jelentősége uPA rendszer gyomorrák peritoneális áttétek
• Epstein-Barr-vírus-specifikus metilezésével emberi gének gyomorrák sejtek