Detektioun vum Promoteur hypermethylation vun der CpG Insel vun E-cadherin zu gastric härzwierksam adenocarcinoma

Detectioun vum Promoteur hypermethylation vun der CpG Insel vun E-cadherin zu gastric härzwierksam adenocarcinoma VerfÜgung méiglech VerfÜgung mat Manque hypermethylation vun CpG Inselen Zweck VerfÜgung assoziéiert entholl suppressor Genen kënnen ze transcriptional silencing zu neoplasia Féierung. D'Zil vun dëser Etude war de Promoteur methylation an Ausdrock vun E-cadherin Gentherapie zu gastric härzwierksam adenocarcinoma (GCA) ze ermëttelen. VerfÜgung Method VerfÜgung A gemaach MSP Approche, immunohistochemistry Method an RT-Hinnen alleguer waren benotzt respektiv der ënnersicht methylation Zoustand vun de 5 "CpG Insel vun E-cadherin, seng FAQ Ausdrock an mRNA Ausdrock an erhéijen an entspriechend normal Stoffer. VerfÜgung Resultater VerfÜgung E-cadherin war an 63 vun 92 (68.5%) entholl uplanzen methylated, déi däitlech méi héich war, déi wéi normal Stoffer (P &Si besteet; 0.001) an entspriechend. Methylation Ofstänn vu Etapp III an entholl Stoffer IV war méi héich wéi déi vun der Bühn ech an II entholl Stoffer (P = 0.01). Methylation Status vun aarme dat Grupp war wiesentlech méi héich wéi moderéiert an aarm-méisseg dat Gruppen (P &Si besteet; 0.01). Vun immunostaining 51 vun 92 entholl tisssues bewisen heterogen, positiv immunostaining vun entholl Stoffer (44.6%), vill verschidden aus reagéiert normal Stoffer (P &Si besteet; 0.001). Positiv immunostaining vun Bühn III an entholl Stoffer IV war wesentlech méi déif wéi Etapp ech an II entholl Stoffer (P &Si besteet; 0.01). Aarmséileg dat Grupp war och vill méi niddereg wéi moderéiert an aarm-méisseg dat Gruppen (P &Si besteet; 0,05). 80 Prozent vun entholl Stoffer mat E-cadherin Gentherapie zougedréckt inactivated mRNA Ausdrock methylated. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung High methylation Zoustand vun de 5 "CpG Insel vun E-cadherin Gentherapie eent vun de Mechanismen kënnt vun gastric härzwierksam adenocarcinoma zu der Entwécklung ginn . VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung e-cadherin methylation gastric Erschléisse härzwierksam adenocarcinoma VerfÜgung e-cadherin ass eng M r 120.000 transmembrane glycoprotein op epithelial Zellen ausgedréckt an ass responsabel fir homophilic, Ca 2 + -dependent intercellular Haftung datt fir d'Erhale vun normal Otemschwieregkeeten Architektur an epithelial Stoffer essentiel ass [1]. D'cytoplasmic Domän vun E-cadherin Photo'en ze α-, β-, an γ-catenins, déi zu actins Hausnummeren am Tour sinn, an dat normaalt ass kritesch fir hir Funktioun [2]. Zell-Zell a Zell-Matrixentgasung Interaktioune sinn zu neoplastic Transformatioun an Metastasen entscheedend Équipe [3, 4]. Defekt Zell Haftung kënnen ze Verloscht vun Kontakt inhibition vun Wuesstem a Verloscht vun Zell Haftung bäidroen fir d'Géigner vun Kriibs Zellen Kont kann normal Otemschwieregkeeten agedeelt an Metastasen ze Kräiz [5]. D'Wichtegkeet vun E-cadherin zu Zell Haftung Erhalen erausfonnt datt seng Viagra eng wichteg Roll an tumorigenesis spille kann. Verloscht vun E-cadherin Ausdrock vun enger Rei vu mënschlechen erhéijen existeiert an Hypothes ass e wichtege Schrëtt an der Werdegang vun entholl Opstellung zu Invasioun an Metastasen [6] gin. VerfÜgung An de leschte Joeren, et sinn eng Rei Studien op der kritescher Roll vun E-cadherin zu tumorigenesis. Et ass déi meeschten-Linn kennen vun der Gentherapie ass zu familial gastric an colorectal Kriibs Zesummenhang E-cadherin dës [7, 8]. Ausserdeem, huet somatic Projet'en vun E-cadherin och zu gastric carcinoma an allelic Verloscht vun der E-cadherin nët um 16q22.1 fonnt gouf zu verschiddene epithelial erhéijen wéi Broscht, spillt, endometrial, an Aarbecht carcinomas [9, 10] gemellt . Ausser fir dës genetesch hire Restaurant, och epigenetic Verfall hypermethylation vun de 5 "CpG Insel bannent de Promoteur vum E-cadherin och fir transcriptional Repressioun vun der Gentherapie responsabel ass [11]. Et ass bekannt, datt Manque hypermethylation vun CpG Inselen verbonne mat Genen entholl suppressor zu transcriptional silencing zu neoplasia Féierung kann [12]. Tatsächlech methylation-verbonne silencing vun E-cadherin duerstellt déi gemeinsam Ursaach fir seng inactivation zu puer Cancers wéi Liewer, Aarbecht, Broscht an esophageal [13-15]. Gastric härzwierksam adenocarcinoma (GCA) VerfÜgung, déi fréier enregistréiert gouf onofhängeg vun ganz rezent Joer diagnostizéiert, wéinst der Verbesserung vun fréi Bild vum Schädel an pathologic Diagnos esophageal Kriibs oder gastric Kriibs, gouf. China ass e Land mat héije Heefegkeet Regioune vun GCA, Besonnech am Taihang Bierg vun North China. Exogenous Faktoren dorënner Ernährung hunn, ongesonde liewege Gewunnechten, Konsum vun Alkohol an Tubak, sinn pathogenic Aids allgemeng als de Risiko Faktoren a Betruecht gezu fir GCA an China Entwécklungslänner [16-18]. Mä nëmmen eng Ziel vun Individuën an der uewen opgezielt exogenous Risiko Faktoren ausgesat géif GCA entwéckelen, datt verschidde genetesch a epigenetic Evenementer suggeréiert kann de Werdegang vun GCA bäidroen. Et gëtt elo ëmmer méi erkannt, dass epigenetic silencing vun der Gentherapie Ausdrock vun Promoteur CpG hypermethylation eng wichteg alternative Mechanismus ass zu inactivating entholl suppressor Genen an entholl verbonne Genen vun Cancers [19]. Projet'en vun der E-cadherin Gene sinn seelen zu GCA, also, vun dëser Etude, mir d'Roll vun methylation vun de 5 "CpG Insel vun E-cadherin a seng Korrelatioun mat reduzéierter E-cadherin Ausdrock vun GCA bewäert. VerfÜgung Method VerfÜgung kennen an uplanzen VerfÜgung entholl a vläit normal Otemschwieregkeeten uplanzen vun 92 Patiente kritt huet. Dëse Stoffer sech an zwee parallel Deeler, war een Deel gefruer an gespäichert bei -80 ° C bis RNS ofgebaut gouf, déi aner Hallschent huet formalin-fix a paraffin-Ënnerbewosstsinn. D'Fäll waren all inpatients fir chirurgesch Behandlung an de véierte laizistesch Spidol, Hebei Medical University tëscht 2004 an 2006 Histological entholl ennerluecht huet op der Basis vun resected uplanzen an de Chiffer vu wirklech vum selwechte Spidol duerchgefouert. All gastric härzwierksam carcinomas sech adenocarcinomas mat hire epicenters um gastroesophageal menaarbecht, i.e. vun 1 cm uewen bis 2 cm ënnert der Kräizung tëscht dem Enn vun der Bléien esophagus an den Ufank vun der saccular Mo [20]. Informatiounen iwwert TNM Stadium war vum Spidol Opzeechnungen an agebousst Diagnos sinn. D'Etude gouf vun der Ethik Comité vun Hebei Cancer Institut an Awëllegung ofgeseent gouf vun all rekrutéiert Sujeten kritt. VerfÜgung Methylation spezifesch polymerase Kette Reaktioun (MSP) fir E-cadherin Promoteur methylation VerfÜgung Frankräich DNA aus gastric härzwierksam adenocarcinomas an bascht nonmalignant Rubriken war vun paraffin-Ënnerbewosstsinn Otemschwieregkeeten drënner zur Norm Methoden isoléiert enger vereinfachter proteinase K unzereegen Method benotzt. Fir d'DNA methylation Musteren ënnersicht, behandelt mir Frankräich DNA mat Natrium bisulfite, wéi virdru beschriwwen [21]. An dowéinst, 2 μg vun DNA sech fir 10 Minutten, bei 37 ° C vun incubation mat 3 M Natrium bisulphite, pH5.0, fir 16 Stonnen op 50 ° C an duerno mat 2 M NaOH denatured. Bisulphite behandelt DNA war dann sidd (DNA Donatiounen Kit; Promega, Madison, Wisconsin, USA), incubated mat 3 M NaOH bei Raumtemperatur fir fënnef Minutten, Preisen, mat 10 M ammonium acetate an 100% Ethanol, mat 70% Ethanol gewäsch, an zu 20 μl destilléiert Waasser resuspended. a gemaach Hinnen alleguer Approche VerfÜgung benotzt gouf de methylation Status innerhalb vun der E-cadherin CpG Insel an Exon 1 (Haaptrei -126 BP bis +144 BP famill ze Transkriptiouns ufänken, GenBank Bäitrëtt Zuel D49685 ze bestëmmen ) dass virdrun verëffentlecht gouf [15]. An der éischter Ronn vun Hinnen alleguer, 100 NG vun bisulfite-behandelt DNA sech Kick. D'sequencing primers sech 5'-GTTTA GTTTTGGGGAGGGGTT-3 "(Senn) an 5'-ACTAC TACTCCAAAAACCCATAACTAA-3" (antisense), an de Vëlo ware een Zyklus vun 95 ° C an 5 min, gefollegt vun 30 Zykle vun 95 ° C fir 30 ass, 50 ° C fir 30 ass, 72 ° C fir 30 ass, an engem leschte Extensioun bei 72 ° C fir 5 min. D'Gréisst vun de Produit no dësem initial Hinnen alleguer Reaktioun war 270 BP. 50 zu Waasser, an 2 μl vun der dilution sech fir MSP benotzt: fir d'zweet Ronn vun Hinnen alleguer, war dëse Produit 1 verdënntem. Gemaach primer Message fir E-cadherin fir d'methylated Reaktioun waren 5'-TG TAGTTACGTATTTATTTTTAGTGGCGTC-3 "(Senn) an 5'-CGAATACGATCGAATCGAACCG-3" (antisense), an primer Message fir d'unmethylated Reaktioun waren 5'-TGGTTGTAGTTATGTATTTATT TTTAGTGGTGTT-3 "(Senn) an 5'-ACACCAAATA CAATCAAATCAAACCAAA-3" (antisense). Hinnen alleguer Parameteren sech als uewen opgezielt, ausser dass d'annealing Temperaturen fir d'methylated an unmethylated Reaktioune waren 64 ° C an 62 ° C, respektiv. De Produit gouf vun der methylated an unmethylated Reaktioune waren 112 an 120 BP, bzw.. Der Broscht Kriibs Zell Linn MB-MDA-231, deen methylation an silencing vun E-cadherin an reagent Coordonnéeën weist sech als positiv an negativ Kontrollen benotzt. VerfÜgung Immunohistochemical staining fir E-cadherin VerfÜgung E-cadherin Ausdrock alles war duerch immunostaining der avidin-biotin komplex immunoperoxidase Method benotzen, déi op parallel histopathological Sektiounen aus paraffin-Ënnerbewosstsinn entholl Rubrik a vläit normal Otemschwieregkeeten gesuergt huet. Endogenous peroxidase war fir 10 Minutte mat 3% Waasserstoff Hem blockéiert, gefollegt vun Schleck erëm antigen retrieval fir néng Minutt op 98 ° C an 10 mm Natrium citrate Prellbock (pH 6.0) an zu 2% normal Päerd serum incubated ze minimiséieren Net-spezifesch obligatoresch. D'drënner waren Rei mat der Primärschoul monoclonal incubated, Maus anti-E-cadherin antibody (1: 100 dilution zu phosphate gefiermt Salins, Santa Cruz, sc-8426) Iwwernuechtung bei 4 ° C, biotinylated Secondaire antibody fir 30 min bei 37 ° C an ABC reagent fir 45 min bei 37 ° C. 0,5% 3,3'-Diaminobenzidine (Fläch, St Louis, MO) war den chromagen benotzt. Fir eng negativ Kontroll, war de primären antibody mat Maus IgG ersat. Drënner mat normal gastric mucosa sech als eng positiv Kontroll. VerfÜgung Kilometréierung vun mRNA Ausdrock vu E-cadherin benotzt VerfÜgung RNS aus gefruerenem Rubrik Stoffer déi Norm Methoden ofgebaut gouf benotzt Trizol (Invitrogen, USA). cDNA war mat de Virdeel RT-for-Hinnen alleguer Kit (Clontech, gekësst Alto, CA) mat oligo (DT) vernoléissecht Wierderbuch als gëtt an de Protokoll ze recommandéieren. D'GAPDH Gentherapie war wéi enger Kontroll benotzt. Primer Message vun E-cadherin goufen 5 ° ‰ -CGACCCAACC CAAGAATCTA-3 ° ‰ (Senn) an 5 ° ‰ -AATGGCAG GAATTTGCAATC-3 ° ‰ (antisense), primer Haaptrei vun GAPDH goufen 5 ° ‰ -GGGAAACTGTGGCGT Gat-3 ° ‰ (Senn) an 5 ° ‰ -GTGGTCGTTGAGGG CAAT-3 ° ‰ (antisense), waren Produit Gréisst 202 BP an 342 BP, bzw.. Hinnen alleguer Produiten waren op 2% agarose gels an Signal intensities geléist goufen e Computer Imaging System laachen benotzt. Den Niveau vun der Gentherapie gët sech als Verhältnis vun der Intensitéit vun der E-cadherin Signal un d'Intensitéit vun β-actin laachen. Inactivated Ausdrock war domatter den Ausdrock vun enger E-cadherin Gentherapie an der entholl Prouf war &Si besteet; 25% vun sengem Ausdrock vun de jeeweilegen normal Prouf. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung statistique Analyse Leeschtung war mat SPSS10.0 Software Package (SPSS Company, Chicago, Illinois, USA). Fisher d'exakt Test an Chi-Feld Test sech benotzt statistesch Bedeitung vun Differenzen ze evaluéieren an Diskussioun Associatiounen vergläichen. Zwee-eesäitegen Tester benotzt goufen Bedeitung ze bestëmmen, a P Wäerter manner wéi 0,05 als statistesch relevant erauskoum sech fir all iwwerleen Tester. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Betreff Charakteristiken VerfÜgung Als zu Table dës 1, 92 GCA Patienten goufen an dës Fuerschung, dorënner 73 männlech a 19 weiblech, Alter gounge vun 38 ~ 76, mengen Alter 56,9. All vun de Fäll goufen nees 4 entholl-Node-Metastasen (TNM) Etappen no UICC Liewesniveau, ech 8 vun Bühn kléngen (8.7%), 32 vun der Etapp II (34.8%), 38 vun der Etapp III (41.3%), 14 vun der Bühn IV (15.2%). Laut der agebousst Phasen, huet de Fäll an 3 Gruppen séiert, 42 (45.7%) vun moderéiert Grupp, 34 (36.9%) vun aarme-méisseg Grupp an 16 (17.4%) vun aarme group.Table 1 Séminairen a agebousst Charakteristike vun GCA Patienten VerfÜgung Groups
n (%)
Sex VerfÜgung Männlech VerfÜgung 73 (79.3) VerfÜgung Weiblech VerfÜgung 19 (20.7 ) VerfÜgung Mëttler Alter am Joer (Fils) VerfÜgung 56.9 (8.86) VerfÜgung TNM Etapp VerfÜgung ech 8 (8.7 VerfÜgung) VerfÜgung II VerfÜgung 32 (34.8) VerfÜgung III
38 (41.3) VerfÜgung IV VerfÜgung 14 (15.2) VerfÜgung agebousst dat vun entholl VerfÜgung moderéiert VerfÜgung 42 (45.7) VerfÜgung aarmséileg-méisseg VerfÜgung 34 (36.9)
aarmséileg VerfÜgung 16 (17.4) VerfÜgung methylation Analyse vun E-cadherin Gentherapie VerfÜgung D'Analyse methylation war an all entholl a vläit normal Otemschwieregkeeten uplanzen (Dorënner 1) erfollegräich gesuergt. Fir 10% vun Echantillonen, war methylation Analyse fir Qualitéitskontroll widderholl. An 63 (68.5%) vun 92 erhéijen GCA E-cadherin methylation nogewise gouf, iwwerdeems nëmmen zu 10 (10,9%) vun vläit normal Stoffer E-cadherin methylation festgestallt gouf. D'Frequenz vun E-cadherin methylation vun entholl Stoffer war wiesentlech méi héich wéi vläit normal Stoffer (P &Si besteet; 0.001). Wann stratified fir TNM Etappen, Heefegkeet vun E-cadherin Gentherapie methylation vun GCA Patienten mat Etapp III a Etapp IV (78.8%) waren vill méi héich wéi GCA Patienten mat Etapp ech a Etapp II (55%) (χ2 = 5,96, P = 0,01 ). Wann fir agebousst Etappen stratified, goufen d'E-cadherin Gentherapie methylation Ofstänn vun moderéiert, aarm-méisseg an aarme Grupp 52,4%, 73,5% an 100%, déi meescht vun E-cadherin Gentherapie methylation vun aarme Grupp vill méi héich wéi déi vun moderéiert an den armen -moderate Gruppen (χ2 = 8,92, P = 0.003) (Table 2). Figur 1 Methylation Analyse vun E-cadherin zu entholl Otemschwieregkeeten (T) an entspriechend normal Otemschwieregkeeten (N). U: beweist d'Präsenz vun unmethylated Genen; m: beweist d'Präsenz vun methylated Genen. Fäll 1 an 2: entholl-spezifesch methylation; Fall 3: de entholl ass voll methylated hierkommen, déi entspriechend normal Otemschwieregkeeten huet eng ganz liichtschwaache Band methylation Musiktherapie-; Fall 4: souwuel vun entholl an entspriechend normal Otemschwieregkeeten unmethylated VerfÜgung Table 2 E-cadherin methylation an immunohistochemical staining Charakteristiken vun GCA Patienten VerfÜgung <. Protokoll> Group
methylation Status
P
Immunohistochemical staining
P
M VerfÜgung U VerfÜgung -
+ VerfÜgung TNM Etapp VerfÜgung ech 4 VerfÜgung 4 VerfÜgung 2 VerfÜgung 6 VerfÜgung II VerfÜgung 18 zu 14 zu 13 VerfÜgung 9
III VerfÜgung 29 VerfÜgung 9 VerfÜgung 26 zu 12 VerfÜgung IV VerfÜgung 12 VerfÜgung 2 VerfÜgung 0.015a VerfÜgung 10 VerfÜgung 4 VerfÜgung 0.002a VerfÜgung agebousst dat vun entholl VerfÜgung moderéiert VerfÜgung 22 zu 20 zu 20 VerfÜgung 2 VerfÜgung aarmséileg-méisseg VerfÜgung 25 VerfÜgung 9 VerfÜgung 18 zu 16 VerfÜgung aarm VerfÜgung 16 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0.003b VerfÜgung 13 VerfÜgung 3 VerfÜgung 0.022b VerfÜgung engem P Wäert vun Bühn III a IV Patienten géint Etapp ech an II Patienten, b P Wäert vun den armen dat Grupp géint moderéiert an aarm-méisseg Gruppen VerfÜgung Immunostaining vun E-cadherin Gentherapie VerfÜgung Als zu Table dës 2, déi staining war heterogen zu 51 entholl Stoffer, entholl Zellen mat ofgeholl membranous E-cadherin staining sech mat entholl Zellen gemëscht weist staark membranous staining (Dorënner 2). Heefegkeet vun FAQ Ausdrock war 44,6% vun entholl Stoffer, iwwerdeems vläit normal Otemschwieregkeeten uplanzen bewisen all staark membranous E-cadherin staining diffusen. Heefegkeet vun FAQ Ausdrock war vill verschidden tëscht entholl a vläit normal Stoffer (P &Si besteet; 0.001). Wann stratified fir TNM Etappen, Heefegkeet vun E-cadherin Gentherapie FAQ Ausdrock vu Etapp III an entholl Stoffer IV (30,8%) ass vill méi niddereg wéi dat am Etapp ech an II entholl Stoffer (62.5%) (χ2 = 9,21, P = 0.002) . Heefegkeet vun E-cadherin Gentherapie FAQ Ausdrock vun aarme Grupp vill méi niddereg wéi dat vun moderéiert an aarm-méisseg Gruppen (χ2 = 5,23, P = 0.022). Figur 2 E-cadherin immunostain zu GCA Otemschwieregkeeten. A: positiv staining (normal Otemschwieregkeeten). B:. Negativen staining (GCA Otemschwieregkeeten) VerfÜgung mRNA Ausdrock fir den E-cadherin Gentherapie VerfÜgung Niveauen vun der gët sech an der 32. ausgewielt gefruer GCA Echantillon vun RT-Hinnen alleguer Analyse (Dorënner 3) geschoss. Déi 32 GCA Echantillon dorënner 2 vu Etapp ech, 2 vun Bühn II, 8 vun Bühn III an 8 vun Bühn IV vun Fäll, wou d'entholl war methylated an 12 Fäll (2 vun Bühn ech, 4 vun Etappen II, 4 vun Bühn III an 2 vun Bühn IV) mat unmethylated E-cadherin Gentherapie. Eng 202 BP Brochstéck vun der ët E-cadherin Gentherapie war entsteet, mat engem 342 BP GAPDH Brochstéck vun der ët als Kontrollorgan. 16 (1 vun Bühn II, 7 vun Bühn III an 8 vun Bühn IV) Fäll (80%) vun inactivated mRNA Ausdrock sech zu 20 entholl Echantillon mat E-cadherin Gentherapie methylated, déi aner 4 (2 vun Bühn ech, observéiert 1 vun II Etapp, 1 vu Etapp III) Fäll zougedréckt positiven Ausdrock. 12 entholl Echantillon mat E-cadherin Gentherapie unmethylated all zougedréckt positiven Ausdrock vu E-cadherin Gentherapie. Figur 3 mRNA Analyse vun E-cadherin zu entholl Stoffer. 1: 100 BP DNA Bewaacher 2,4,5,6,9: positiv mRNA Ausdrock 3,7,8:. Negativen mRNA Ausdrock VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung China ass e Land mat héije Heefegkeet vun digestive TRACT Kriibs déi esophageal dorënner carcinoma, gastric Kriibs an gastric härzwierksam adenocarcinoma (GCA). onofhängeg vun ganz rezent Joer diagnostizéiert, wéinst der Verbesserung vun fréi Bild vum Schädel an pathologic Diagnos GCA, déi fréier als esophageal Kriibs oder gastric Kriibs ugemellt war, gouf. Et ass duerch e puer epidemiological Date proposéiert, datt d'Heefegkeet vun GCA ass an de leschte Joren ëmmer méi. Verschidde Fuerschung huet gewisen, datt de rechtlechen a Krankheete Zuel vun GCA ass anescht aus gastric Kriibs mee gläicht esophageal Kriibs. Déi genau Mechanismus vun der Optriede vun GCA bleift fir de Moment net bekannt. Et ass allgemeng dass der ierfgroussherzoglecher Faktor akzeptéiert, dass de Optriede vun entholl dorënner zwee Mechanismus, Genetik an epigenetics Mechanismus heidriwwer. Genetesch abnormalities vun proto-oncogenes an entholl suppressor Genen sinn bekannt Ännerungen déi an Kriibs pathogenesis dacks Équipe ginn. Allerdéngs, Epigenetic inactivation vu bestëmmte entholl suppressor Genen vun aberrant Promoteur methylation ass dacks zu puer Cancers observéiert a vläicht eng dréien Roll an tumorigenesis Leeschtung. Iwwerdeems genetesch abnormalities mat Ännerungen an DNA Haaptrei verbonne sinn, kënnen epigenetic Evenementer zu Ännerungen an der Gentherapie Ausdrock bréngen, datt ouni Ännerungen am DNA Haaptrei geschéien. Wann entholl suppressor Genen betraff sinn, Resultater et normalerweis zu transcriptional silencing an, dohier, inactivation vu dass Gentherapie. Et kann dann Wuesstem Virdeeler fir dësen Zellen eegens datt Kriibs Entwécklung positiv [22]. VerfÜgung Als Member vun Zell Haftung molekulare, E-cadherin eng wichteg Roll spillen Zell Haftung an ënnerhalen a seng Viagra zu tumorigenesis.6 der biologescher Dépassement Konsequenzen vun sengen Viagra och Stéierungen intercellular Haftung an Doudesfall vun SS-catenin-mediated transactivation [23]. Fir Datum, hunn awer responsabel der reglementaresche Mechanismen fir verännert Niveau vun E-cadherin Proteinen am GCA net opgekläert ginn. Et ass confirméiert datt hypermethylation vun E-cadherin mat gastric Kriibs an esophageal adenocarcinoma verbonne waren [21, 24]. Mä, et gëtt keng aner Rapport iwwert d'Relatiounen tëscht Ecadherin methylation an tumorigenesis vun GCA. An dëser Etude, awer mir dass hypermethylation vun de 5 "CpG Insel vun der E-cadherin Promoteur dacks zu GCA Stoffer occured (68.5%) an datt dës methylation ännere mat reduzéierter Ausdrock vu E-cadherin FAQ verbonne war. Eis Date proposéiert datt epigenetic silencing vun der E-cadherin Promoteur via hypermethylation eent vun de kriteschen Mechanismus fir inactivation vun dëser Gentherapie zu GCA kann. Gene silencing mat hypermethylation assoziéiert ass mediated vun Duerch-verbindlech Proteinen datt zu methylated cytosines kruet an engem Komplex vun Proteinen do- datt Transkriptiouns géint, dorënner histone deacetylases [25]. VerfÜgung An eiser Etude, hunn mer dat an der Majoritéit vun de Fäll mir iwwerpréift, E-cadherin methylation war entholl spezifesch. Ee, 10 Fäll vun deenen den methylation änneren war dobäi an zwee entholl an normal Stoffer aus dem selwechten Patient vläit. Opgrond vun der Empfindlechkeet vun gemaach MSP, ass et méiglech, dass normal-Rostain uplanzen eng rare Kriibs Zell aus, datt déi histomorphology undetectable war. Wéinst der begrenzten Dauer vun specimen, hu mir studéieren der methylation vun E-cadherin zu normal Cardia Stoffer net. Allerdéngs, normal esophageal Otemschwieregkeeten net aberrant E-cadherin methylation an e puer Studien [21] an am fréiere Studien enquêtéiert E-cadherin methylation zu verschiddene entholl Zorte, normal Stoffer aus Schanken hiirgestallt show hat, Broscht, Schild, a mëndlech mucosa sech unmethylated [ ,,,0],14, 26]. Dës Donnéeë ugeholl staark, dass den E-cadherin Promoteur methylation ass eng aberrant event. De Fait, datt mer nëmmen methylation an vläit normal Stoffer aus Patienten an deenen jeeweilegen entholl methylated gouf och festgestallt gëtt konsequent mat der Hypothes, datt de Kriibs an dëse Persounen aus engem methylated clonal Virleefer ausgebrach. An enger Étude vun neoplastic Werdegang vun Barrett d'esophagus, hypermethylation vun der Gentherapie p16 entholl suppressor war zu pathologically normal-Rostain uplanzen vun engem Patient kritt fonnt déi spéider dysplasia entwéckelt [27]. Dofir, kann epigenetic inactivation vun entholl suppressor Genen eng fréi Fonktioun vun tumorigenesis ginn. Eis Resultater VerfÜgung zougedréckt datt FAQ Ausdrock vun Ecadherin zu entholl Stoffer vill méi niddereg wéi dat vun vläit normal Stoffer, awer och immunohistochemical staining normal membranous staining vu E zougedréckt -cadherin zu puer entholl Echantillon mat E-cadherin methylation. Et gi verschidde méiglech Grënn fir d'Evenementer. Éischt, Dat war wahrscheinlech wéinst der Tatsaach, datt immunohistochemical staining als Hinnen alleguer net esou sensibel war subpopulations vun Zellen mat Gentherapie methylation an domat downregulation vun E-cadherin z'entdecken. Zweet, entholl Stoffer kënnen e puer normal Stoffer mingle a kënnen normal membranous staining vun E-cadherin gewisen. Drëtt, Gentherapie heterogenic methylation oder eng allele methylation vläicht e wichtege Grond ginn. An eise Studien, fonnt mir datt de methylation Status vun der entholl Stoffer déi souwuel zougedréckt positive FAQ Ausdrock an hypermethylation onkomplett Ecadherin methylation goufen. Ausserdeem, ass et, datt DNA methylation bewisen, déi Ausdrock Gentherapie Trupen haaptsächlech zu transcriptional Niveau an d'Dicht vun CpG Insel methylation war fir d'Trupen Ofschloss vun Transkriptiouns Zesummenhang [28]. Dicky Promoteur ka komplett duerch niddreg Dicht methylation opgeléist ginn, awer, wann Promoter vun enhanser verstäerkte war, Funktioun vun Transkriptiouns ginn Sensor. An eiser Etude, hunn mir och positiv mRNA Ausdrock vun e puer entholl Echantillon mat E-cadherin Gentherapie methylated. Et deelweis wéinst der Tatsaach, datt d'Ausmooss vun Promoteur methylation war insufficent E-cadherin Transkriptiouns zu oofgesinn. An all, proposéiert Eis Etude dass epigenetic silencing vun der E-cadherin Promoteur via hypermethylation eent vun de Mechanismus fir inactivation vun E-cadherin zu GCA kann. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Mir d'Patienten a Kontroll Persounen Merci Deel vun dëser Etude matgemaach. VerfÜgung vun Stipendie aus der Pri- ënnerscheed Sujeten Grënnung vun Hebei Provënz ënnerstëtzt ginn. VerfÜgung

• Séminairen Bedeitung vun der uPA System vun gastric Kriibs mat peritoneal Metastasen
• Epstein-Barr Virus-spezifesch methylation vum mënschleche Genen vun gastric Kriibs Zellen