Potencial deferasiroksa kot nova terapevtska modalnosti pri raku želodca

Potencial deferasiroksa kot nova terapevtska modalnosti raka želodca
Abstract
Ozadje
Železo je bistven element za celično proliferacijo, rast in presnovo. Vendar se presežek železa in spremenjeno presnovo železa oba povezana s tumorsko začetku in tumorske rasti. Deferasiroks je peroralno kelator železa. Čeprav so nekatere študije pokazale, da je deferasiroks obeta za terapij proti raku, še ni bila ugotovljena njegova učinkovitost proti raku želodca. Ta študija je bila izvedena, da se ugotovi, ali deferasiroks izvaja anti-tumorske učinke v želodcu raka celičnih linijah in ali deferaksiroksa in cisplatinom delujejo sinergistično.
Metode
Štiri človekovih želodca rakave celične linije (AGS, MKN-28, snu-484, in snu-638), smo obdelali z različnimi koncentracijami deferasiroksom določiti IC 50 za vsako celične linije. Učinki deferasiroksom na celičnem ciklu smo ovrednotili s pretočno citometrijo in učinki deferasiroksom na presnovo železa, celični ciklus, in apoptoze so bili ocenjeni z Western blot. Da bi ugotovili, ali deferasiroks izboljša učinek cisplatina, so bili vzgojeni v prisotnosti in odsotnosti cisplatinom AGS celice.
Rezultati
deferaksiroksa inhibira proliferacijo vseh želodčnih raka celičnih linijah kot so jih ocenili MTT testih. Ker je bil IC 50 deferasiroksa najnižja (pod 10 mikrometrov) v AGS celicah, so poznejše poskuse izvedli v tej vrstici. Deferasiroks molekul transferina receptor 1 izražanja in zmanjšala ferroportin izraz. Poleg tega deferasiroks povzročene G1 aretacijo; molekul p21, P27 in p53 izražanje; in navzdol reguliranih ciklin D1, ciklin B in CDK4 izražanje. Poleg tega deferasiroks inducirane apoptoze, molekul N-myc
nadaljnjega urejeno gen 1 (NDRG1) in navzdol reguliranih p-mTOR in c-myc izraz. Ugotovljeno je bilo tudi, da se sinergistično delovanje z cisplatinom.
Sklepe
Naši rezultati kažejo, da lahko deferasiroks izvajati protitumorskih učinkov v zvezi z rakom želodca. Deferasiroks vpliva več različnih poti in molekul; na primer, deferasiroks upregulates NDRG1 ekspresijo, zavira celični ciklus, zmanjša število mTOR in c-myc ekspresijo, in inducira apoptozo. Poleg tega deferasiroks zdi, da okrepi učinke proti raku cisplatin. Čeprav je učinkovitost deferasiroksa še treba preskusiti v prihodnje študije, rezultati so predstavljeni tukaj kaže, da je deferasiroks obetaven roman proti raku terapevtsko sredstvo.
Ključne besede
Deferasiroks Želodec neoplazme Cisplatin Ozadje
raka želodca, je eden izmed vodilni vzroki smrti zaradi raka v Koreji [1]. Čeprav pri bolnikih z želodčnim rakom kažejo odlične rezultate, če se rak odkrije zgodaj, so pogonskega napredne in ponavljajoče želodčni rak še vedno povezana s slabimi stopnje preživetja. V zadnjih nekaj desetletjih so znatne izboljšave v kemoterapevtiki izboljšalo preživetje pri napredovalem raku želodca. Pred kratkim je bilo splošno preživetje značilno podaljšanim pri bolnikih s HER2 pozitivnega napredovalo želodca ali gastroezofagealne raka križišča z obdelavo s trastuzumabom (HER-2 monoklonskih protiteles) v kombinaciji s konvencionalno kemoterapijo [2]. Vendar pa je bilo celotno preživetje le 13,8 mesecev. Zato so nujno potrebni novi agenti.
Železo je bistven element za celično proliferacijo, rast in presnovo. Vendar pa so presežek železa in spremenjen metabolizem železa, povezane s tumorsko začetek in rast tumorja [3]. Epidemiološke študije so pokazale, da je visoka vnos železa povezana s povečanim tveganjem za kolorektalnega raka [4]. Mnogi rakave celice spremenijo presnovo železa zaradi maligne celice zahtevajo več železa kot normalne celice. Povečanje labilno bazen železa so rakave celice pokazale, da upregulate ekspresijo transferinskega receptorja 1 (TFR1) in hepcidin, poleg downregulating ferroportin izražanje [3].
Deferasiroksom (Exjade®), je oralna trovalenten železo ( Fe 3+) kelator, se hitro absorbirajo iz črevesja in ima relativno dolgo razpolovno dobo (8 do 16 h). Tako lahko odmerjanje enkrat dnevno doseže trajna nivoje drog zadostna za splakovalnega ne-transferina-vezan plazmi železa. Čeprav je bil deferasiroks povezan z nekaterimi neželenimi učinki, kot so gastrointestinalne motnje, kožni izpuščaj in toksičnosti za ledvice, je relativno dobro prenaša. Zato deferasiroks je trenutno najpogosteje uporabljena kelator železa za zdravljenje železa preobremenitveno bolezni [5].
Nedavno so številne študije raziskovali potencial deferasiroksa kot antineoplastičnim sredstvom. Deferasiroks so poročali, da zavira NF-κB aktivnost v vzorcih krvi bolnikov z mielodisplastičnega sindroma in levkemije celic vodi [6]; Poleg tega, deferasiroks je pokazala tudi, da zatiranju mTOR poti v mieloične levkemije celic [7]. Glede kliničnih podatkov, eno poročilo primera je pokazala, da je zdravljenje deferasiroks dosegli popolno remisijo pri bolnikih s kemoterapijo neodzivnih akutne monocitne levkemije [8]. Poleg tega, post hoc analiza multicentrični sojenja je razkrila, da deferasiroks izboljšalo hematoloških parametrov pri bolnikih s mielodisplastičnega sindroma [9]. Trenutno je večina poročil deferasiroksa kot antineoplastičnim sredstvom bil v hematoloških malignosti; le nekaj študij so se osredotočili na trdnih tumorjev. Nedavno je bil deferasiroks dokazano, da zavira rast pljuč in rakave celice požiralnika in vitro in in vivo [10, 11]. Vendar pa še ni bil določen učinek deferasiroksa za raka želodca, in mehanizem, s katerim deferasiroks doseže svoj anti-tumorskih učinkov še vedno slabo razumemo. Zato je bila izvedena študija, da razišče, ali deferasiroks izvaja anti-tumorske učinke na želodcu raka celičnih linijah, pa tudi, ali deferasiroksa deluje sinergistično s cisplatinom.
Metod
celični kulturi
štiri človeške želodčne rak celičnih linij (AGS, MKN-28, snu-484, in snu-638) so bili pridobljeni iz korejske Cell Line Bank. Vse celice smo kultivirali v RPMI 1640 medij, ki vsebuje 10% fetalnega govejega seruma in antibiotiki (100 U /ml penicilina in 100 fig /ml streptomicina) v navlaženi 5% CO 2 inkubator pri 37 ° C.
Reagenti in Protitelesa
Deferasiroks (Exjade®) je podaril Novartis (Basel, Švica). Goat poliklonalni anti-NDRG1 (N-myc
nadaljnjega regulirani gena 1) (kataloška št. Ab37897) in zajec poliklonski anti-ferroportin (kataloška št. Ab85370) protitelesa so bili kupljeni od Abcam (Cambridge, UK). Anti-TFR1 miško monoklonska protitelesa (kataloška št. 136800) so bili pridobljeni iz Life Technologies (Carlsbad, CA, ZDA), in FeSO 4 je bila kupljena od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, ZDA). Anti-p53, anti-P27, p21, ciklin A, ciklin B, ciklin D1, ciklin E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-kaspaze 3, in BAX protitelesa so bili kupljeni od Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, ZDA). Anti-p-mTOR in pro-kaspaze 8 protitelesa so bili pridobljeni iz signalizacijo med celicami tehnologijo (Beverly, MA, ZDA).
Inhibicije rasti inhibicije
Rast je bila izmerjena z MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-il] -2,5-difeniltetrazolijevega bromid), kot je opisano predhodno [12]. Na kratko smo zasejali celice (2 x 10 3 celic /vdolbino) v 96-vdolbinico mikrotitrske plošče (Nunc, Roskilde, Danska) in inkubiranih pri 37 ° C za 24, 48 ali 72 ur. raztopine MTT (50 xl) iz Sigma (2 mg /ml v PBS) smo dodali v vsako vdolbino in plošče inkubiramo dodatne 4 ure pri 37 ° C. Po tej inkubaciji smo raztopino MTT odsesali. Da solubiliziramo formazana kristalov, ki nastanejo pri živih celic je bil 200 u.l DMSO dodamo v vsako vdolbino. Plošče smo stresali 30 minut pri sobni temperaturi in absorbanco vsake vdolbine pri 595 nm je bila takoj brati s skeniranje multiwell spektrofotometrom (Bio-Rad, iMarkTM čitalec mikroplošča).
Za določitev koncentracije deferasiroksa potrebnega za ubijanje 50% celic (IC 50) so AGS, MKN-28, snu-484 in snu-638 celice obdelali z 0, 1, 10, 50 in 100 uM deferasiroksa pri 24, 48 in 72 h. Ti rezultati so bili uporabljeni za izbiro linije želodčne celice z največjo občutljivostjo deferasiroksu za vse nadaljnje poskuse.
Cell ciklusu
Po 24 h inkubacije AGS celic z 0, 10 in 100 um deferasiroksa pri 37 ° C ° C, so bile celice dvakrat sprali s PBS, ki so določene preko noči z 70% etanolom, speremo s PBS in obarvamo z 50 ug /ml propidijevim jodidom (PI), ki vsebuje RNaze A pri 50 ug /ml. Vsebina DNA celic (10.000 celic /eksperimentalna skupina) smo analizirali s pomočjo toka FACSCanto II citometrom (Becton Dickinson, San Jose, CA, ZDA), opremljeno z BD FACSDivaTM programske opreme (v6.1.3). Odstotki populacij celic v vsaki fazi celičnega cikla (G1, S ali G2 /M) smo izračunali iz histogramov vsebin DNK.
Western blot analizo
AGS celice smo inkubirali z 0, 10 in 100 um deferasiroksa pri 37 ° C 24 ur. Celice smo sprali s PBS, resuspendirali v liznega pufra [50 mM Tris (pH 7,5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCI, 20 g /ml aprotinina, 20 ug /ml leupeptina in 1 mM fenilmetilsulfonil fluorid], in postavi na ledu 20 minut. Beljakovine v lizatov (20-30 mikrogramov), je bilo rešenih na 10-15% SDS-poliakrilamid denaturacije geli in prenese na nitroceluloza membrane za 90-120 min. Nespecifično vezavo mesta smo blokirali s 5% posnetega mleka za 1 uro in membrane smo nato inkubirali preko noči s primarnimi protitelesi (vse po razredčenju 1: 1000). Protitelesa in s tem povezanih postopkov, ki so bili uporabljeni za preiskavo so bili naslednji: anti-TFR1 in anti-ferroportin za metabolizem železa; anti-p53, P27, p21, ciklin A, ciklin B, ciklin D1, ciklin E, CDK2, CDK4 in CDK6 za celičnega ciklusa; anti-pro-kaspaze 3, pro-kaspaze 8, pro-kaspaze 9 in BAX za apoptoze; anti-NDRG1 za metastaze; in anti-p-mTOR in c-myc. Imunološko pasovi so vidne tudi z ECL komplet (Intron, Koreja).
Statistična analiza
so podatki predstavljeni kot pomeni ± SEM (barov napak). Razlike smo analizirali s testom t
študenta. P
vrednot. ≪ 0,05 smo imeli statistično značilno
Rezultati
Učinek deferasiroksa na rast želodčnega raka celičnih linij
sposobnost deferasiroksa zavirajo rast štirih želodčnega raka celičnih linij je bila določimo s testom z MTT proliferacije. AGS, MKN-28, snu-484 in snu-638 celice smo inkubirali z 0, 1, 10, 50 in 100 um deferasiroksom pri 37 ° C za 24, 48 ali 72 ur. Deferasiroks inhibira rast vseh štirih želodčnih raka celičnih linijah v odvisnosti od odmerka in časovno odvisen način (sl. 1a). Ker IC 50 deferasiroksa v 72 urah je bila najnižja v AGS celic (manj kot 10 um), so bile vse nadaljnje poskuse izvajajo z uporabo teh celic. Fig. 1 Inhibitorni učinek deferasiroksa na rast želodčnega raka celičnih linij. viabilnost celic smo izmerili z MTT testom. AGS, MKN-28, snu-484 in snu-638 celice smo inkubirali z 0, 1, 10, 50 in 100 uM deferasiroksa pri 37 ° C za 24, 48 ali 72 ur. Zdravljenje deferasiroks povzročilo od odmerka odvisne in časovno odvisno zavrtje rasti v vseh štirih želodčnega raka celičnih linijah. b AGS celice smo gojili pri 10 in 20 uM deferasiroksa bodisi samostojno ali v prisotnosti FeSO4 (100 uM) za 48 ur. Zaviralni učinek deferasiroksa je obrnil s FeSO4 dodatek
so AGS celice gojili z 10 in 20 um deferasiroksa bodisi samostojno ali v prisotnosti FeSO 4 (100 uM) za 48 ur. Zaviralni učinek deferasiroksa je obrnil s FeSO 4 dodatek (sl. 1b). Analiza
Celični ciklus v AGS celicah
izčrpavanje Iron sproži G1 /S aretaciji vpliva na izražanje kritičnih molekul, za napredovanje celičnega cikla kot ciklin D1 in p21 [13]. Učinki deferasiroksom na celičnega cikla smo določili s sortiranjem celic fluorescenčno aktivira (FACS) z propidium jodid. AGS celice smo inkubirali z 0, 10 in 100 um deferasiroksa pri 37 ° C 24 h. Kot je prikazano na sliki. 2a, zdravljenje AGS celic z deferasiroksom 24 ur privedla do kopičenja celic v G1 fazo način odvisnosti od odmerka (41,8% pri 0 um, 53,7% v 10 uM in 77,2% pri 100 um). Ta rezultat kaže, da deferasiroks povzroča G1 aretacijo. Western blot analizo proteinov celic povezanih cikla so pokazali, da deferasiroks inducirano uravnavanjem p21, p27 in p53 ter downregulation za ciklin D1, ciklin B in CDK4 (sl. 2b). Ti rezultati kažejo, da je anti-proliferativni učinek deferasiroksa zaradi inhibicije celičnega cikla. Fig. 2 Vpliv deferasiroksa o napredovanju celičnega ciklusa v AGS celicah. a AGS celice smo inkubirali z 0, 10 in 100 um deferasiroksa pri 37 ° C 24 h. napredovanje celičnega ciklusa je bila analizirana z FACS. Zdravljenje deferasiroks 24 h pripeljalo do akumulacije v odmerka odvisno AGS celic v G1 fazo (41,8% na 0 uM, 53,7% v 10 uM in 77,2% pri 100 um). b Western blot analizo molekul celic, povezane kroga je pokazala, da deferasiroks molekul p21, p27 in p53 in navzdol reguliranih ciklin D1, ciklin B in CDK4
Učinek deferasiroksom na presnovo železa in drugih poti
za privzem železa v celic, v obtoku železo-transferina kompleksi vežejo na celični površinski receptor TFR1. Iron izhodi preko ferroportin, iztočno črpalko železa, ki ga ureja hepcidin. V rakavih celicah, TFR1 in hepcidin se je pokazalo, da je treba molekul in ferroportin je navzdol reguliranih, ki skupaj vodijo do povečane koncentracije znotrajceličnih železa [3]. Učinek deferasiroksa na presnovo železa je ocenil blot analizo zahodni TFR1 in ferroportin. Stopnja TFR1 povečala po 24 urah zdravljenja z deferasiroksa. V nasprotju s tem, ferroportin izraz zmanjšala (sl. 3a). Ti rezultati so skladni s tistimi iz prejšnjih študij [10, 11]. Fig. 3 Vpliv deferasiroksa na presnovo železa in drugih poteh. čistilne s deferasiroksom za 24 ur za posledico povečano stopnjo TFR1 in zmanjšano stopnjo ferroportin. b Deferasiroks tudi inducirano apoptozo, molekul NDRG1 in navzdol reguliranih p-mTOR in c-myc, kot jih blot analizo Western
učinkov deferasiroksom na apoptoze oceni so poleg ocenila FACS in blot analizo zahodni proteinov, povezanih z apoptoze. Kot je prikazano na sliki. 2a, AGS celice, obdelane s deferasiroksom 24 h razstavljen kopičenje celic v sub-G1 (apoptotske) fazo (3,2% na 0 um, 3,3% na 10 uM in 9,5% pri 100 um). Poleg tega je zdravljenje deferasiroks zmanjšano ekspresijo pro-kaspaze 3, pro-kaspaze 8 in pro-kaspaze 9 in povečano izražanje BAX (sl. 3b). NDRG1 je znano, da je supresor celične rasti in metastaz. Deferasiroks povečala raven NDRG1. Poleg tega so c-myc in fosfo-mTOR ekspresijo po 24 urah zdravljenja z deferasiroksom zmanjšala (Sl. 3b). Ti rezultati kažejo, da deferasiroks inducira apoptozo, zavira oddaljenih metastaz in zatira c-myc in mTOR poti.
Sinergijski učinek deferasiroksom in cisplatina
Da bi ocenili, ali bi deferasiroks poveča učinek cisplatina, so AGS celice gojili z ali brez cisplatina in njihovo preživetje je bila določena z MTT testom. Zdravljenje s cisplatinom 48 ur zmanjša število živih celic, z IC 50 5-10 um. Da ugotovi, ali deferasiroks izvaja sinergistični učinek s cisplatinom smo AGS celice obdelali z 0, 2,5, 5, 10 in 20 uM deferasiroksa bodisi samostojno ali v prisotnosti stalne koncentracije cisplatina (5 uM) za 48 ur. Kot je prikazano na sliki. 4a, b, AGS celice, ki se zdravijo z deferasiroksom in cisplatinom so pokazale bistveno večje zmanjšanje celičnega preživetja v primerjavi s celicami, zdravljenih bodisi deferasiroksom ali cisplatinom samim (P
< 0,01). Ti rezultati kažejo, da deferasiroks krepi-cisplatin zavrtje rasti AGS celic. Fig. 4 Sinergijski učinek deferasiroksom in cisplatina. A smo b AGS celice obdelali z 0, 2,5, 5, 10 in 20 uM deferasiroksa, bodisi samostojno ali pa v prisotnosti stalne koncentracije cisplatina (5 uM) za 48 ur. AGS celice, ki se zdravijo z deferasiroksom in cisplatina pokazala znatno zmanjšanje celične viabilnosti celic s celicami, zdravljeni bodisi z deferasiroksom ali cisplatinom samim
Da bi raziskali molekularne mehanizme, ki podpirajo ta učinek, je Western blot analiza uporablja za ocenjevanje ravni posameznih molekul v AGS celice, ki se zdravijo z deferasiroksom (5 iM), cisplatin (5 iM), ali oboje. Kombinacija deferasiroksom in cisplatina povzročila uravnavanjem NDRG1, p21 in p53. V nasprotju s tem pa ta kombinacija povzročilo downregulation na fosfo-mTOR, ferroportin in pro-kaspaze 9. Ti rezultati kažejo, da deferasiroks ojača proti raku učinke cisplatinom prek različnih poti (sl. 5). Fig. 5 Molekularni mehanizmi sinergijski učinek. Western blot analiza je bila opravljena z lizatov AGS celicah, obdelanih s deferasiroksom (5 uM), cisplatin (5 uM), ali oboje 24 h. Kombinacija deferasiroksom in cisplatina inducirano uravnavanjem NDRG1, p21 in p53, poleg downregulation na fosfo-mTOR, ferroportin in pro-kaspaze 9
Razprava
V tej študiji smo ugotovili, da deferasiroksom zavira širjenje želodca rakavih celic. Deferasiroks Ugotovljeno je bilo tudi, da povzroči G1 aretacijo; upregulate p21, p27 in p53 izražanja; in upocasnjujejo ciklin D1, ciklin B in CDK4 izraz. Deferasiroks povzroča tudi apoptozo, molekul NDRG1 in navzdol reguliranih p-mTOR in c-myc. Ti rezultati kažejo, da deferasiroks izvaja protitumorske učinke v želodcu rakavih celic prek različnih poteh. Natančneje, naši podatki kažejo, da deferasiroks spremeni metabolizem železa, zavira napredovanje celičnega cikla vpliva na mTOR signalizacije in metastaze poti, in inducira apoptozo. Poleg tega deferasiroks zdi, da okrepi antiproliferativna učinek cisplatinom rakavih celic na želodcu.
Železo je bistven za preživetje celic, lahko pa povzroči tudi poškodbe celic, ki ga ustvarjajo reaktivnih kisikovih vrst [14]. Čeprav je stopnja znotrajcelične železa dobro urejena v normalnih celicah, je stopnja znotrajcelične železa povišano rakavih celic zaradi povečanega izražanja TFR1 in hepcidin in zmanjšano izražanje ferroportin [3]. Ker odvečnega železa in spremenjeni železa presnovo lahko privede do tumorja začetek in rast, so kelatorji železa verjeli, da se obeta boj proti raku. Precej podatkov podpira zamisel, da so kelatorji železa potencialni anti-tumor zdravljenja. Prvič, so znani povišane vsebnosti znotrajcelične železa za spodbujanje sintezo DNA. Ker je železo bistvena za delovanje ribonukleotid reduktaze, ključni encim za sintezo DNA, železo igra pomembno vlogo v celično proliferacijo [15]. Zato je potrebna večja železo za bogatenje ribonukleotidno reduktaze dejavnost neoplastične celice. Drugič, izčrpavanje železo povzroči G1 /S aretacijo in inducira apoptozo [13]. Ciklin D1 veže CDK4 in CDK6, kar ima za posledico G1 /S napredovanja preko fosforilacije retinoblastom beljakovin (RB). To fosforilacija se posredno tudi v sprostitvi prepis faktorja E2F od RB. izčrpavanje Železo je znano, da zmanjša ciklin D1 in CDK izraz. Tretjič, lahko pretirana celični železo voziti signalno pot NT, za katerega je znano, da so pomembne za napredovanje tumorjev [16].
Smo opravili to študijo, da bi raziskala, ali deferasiroks izvaja anti-tumorske učinke v zvezi z rakom želodca. deferasiroks od številnih komercialno dostopnih kelatorji železa smo se odločili zaradi ustnega razpoložljivosti in relativno nizko toksičnost. Čeprav natančne mehanizme, s katerimi deferasiroks doseže svoj učinek proti raku še vedno preiskuje, smo predpostavili, da deferasiroks zavira napredovanje celičnega ciklusa, ki temelji na predhodnih raziskavah [11, 17]. Ugotovili smo, da deferaksiroksa povzroča G1 aretaciji navzgornje regulacije p21 in p27 in downregulating ciklin D1 in CDK4. Te ugotovitve potrjujejo našo hipotezo, da deferasiroks doseže svoj antineoplastične učinke, ki jih ureja potek celičnega ciklusa.
Kelatorji železa lahko povzroči izražanje NDRG1, znanega metastatskega supresorski, v različnih človeških rakov [18-20]. Mehanizem, s katerim NDRG1 zatira metastaz je trenutno nejasno, čeprav je bil NDRG1 izkazalo, da inhibira migracijo celic in invazijo z moduliranjem ekspresije številnih adhezijskih molekul [21]. NDRG1 izraz se je izkazalo, da je bistveno nižja v tkivu raka v primerjavi s sosednjimi normalnega tkiva; Poleg tega je bilo NDRG1 izraz izkazalo za obratno povezana z metastazami nekaterih vrst raka, kot je prostata in kolorektalnega raka [22, 23]. Vendar pa je bilo neskladnih rezultati doseženi v zvezi z morebitno pridružitev NDRG1 z napredovanja tumorja. Zanimivo je, da NDRG ima dokazano vlogo pri nadzoru celičnega cikla. Natančneje, je NDRG1 izražanje molekul s pomočjo indukcije-p53 posredovana, in NDRG1 lahko povzroči G1 /S aretaciji navzgornje regulacije p21 [24]. Ugotovili smo, da deferasiroks upregulates raven izražanja NDRG1, p53 in p21. Čeprav nismo testom migracije celic ali preiskavo metastaz in vivo v tej študiji, naši rezultati kažejo, da lahko deferasiroks lahko zavirajo rast tumorja in metastaz. Predpostavljamo, da je mehanizem, s katerim deferasiroks doseže svoj anti-tumorske učinke lahko vključujejo NDRG1.
Deferaksiroksa Dokazano je, da povečanje citotoksični učinek cisplatina v požiralnika raka celičnih linijah. Poleg tega cisplatina odporna na celice, obdelane z nizko koncentracijo deferasiroksom (5 uM) v kombinaciji s cisplatinom pokazali znatno znižanje celičnega preživetja v primerjavi s celicami, ki so se zdravili z deferasiroksom ali cisplatinom samim [10]. Ugotovili smo, da je kombinacija deferasiroksa (5 uM) in cisplatinom (5 uM) povzročil znatno zmanjšanje celičnega preživetja. Poleg tega ta kombinirano zdravljenje povzročilo uravnavanjem NDRG1, p21 in p53 ter downregulation na fosfo-mTOR. Naši rezultati, zato predlagamo, da se deferasiroks lahko izboljša učinek proti raku cisplatina v želodčnih rakavih celic. Poleg tega lahko p53-NDRG1-P21 in mTOR poti se vključijo v sinergijski učinek deferasiroksa s cisplatinom.
Ta študija imel številne omejitve. Prvič, smo omejeni naše študije na želodcu raka celičnih linijah in ni opravila nobenih in vivo poskusov. Poleg tega je bila ekspresija proteinov celic povezanih s ciklom ocenijo le z Western blotting-om. Podrobnejše informacije lahko pridobljeno z imunoprecipitacije in kinaz testov. Za določitev učinka protitumorsko deferasiroksa bi bila potrebna dodatna poskusi tudi študije in vivo. Kljub temu, da je to prva študija, naj preuči učinke anti-tumor deferasiroksom proti raku želodca.
Sklepi
Na koncu smo ugotovili, da so deferaksiroksa povzroča anti-tumorske učinke želodčne rakavih celic prek različnih poti. Natančneje, deferasiroks molekul NDRG1, zaviral napredovanje celičnega ciklusa, navzdol reguliranih mTOR in c-myc izražanja in inducira apoptozo. Poleg tega deferasiroks potencira učinke proti raku cisplatin. Čeprav je treba učinkovitost deferasiroksa potrjena v prihodnje študije, naši rezultati kažejo, da je deferasiroks obetaven proti raku terapevtsko sredstvo in je lahko tudi učinkovito kemoterapijo preobčutljivosti.
Izjave
Zahvala
To delo je podprt s . raziskovalni sklad Hanyang University (HY-2013-MC)
Odpri AccessThis članek se razširja pod pogoji Creative Commons 4.0 Mednarodne License (http: //. creativecommons org /licence /s /4. 0 /), ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, če daš ustrezen kredit izvirnega avtorja (-ev) in virom, zagotovi povezavo do licence Creative Commons, in navesti, ali prišlo do sprememb. Odprava Creative Commons Public Domain Posvetilo (http: //. creativecommons org /javna last /nič /1. 0 /) se uporablja za podatke, ki so na voljo v tem članku, razen če ni drugače navedeno
konkurirati. interesi
Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov. prispevkov
avtorjev
JC in YL sodelovali pri oblikovanju in analizi te raziskave. JC napisal papirja. JK opravi molekularne študije. YW, JU, BP prispeval v sestavi papirja. Vsi avtorji prebrali in potrdil rokopis.

• Sočasno kompozitni nadledvične feokromocitoma, več želodca stromalni tumorji in pseudohermaphrodism pri bolniku z von Recklinghausens disease
• Iris metastaze želodca adenocarcinoma