Potensialet i deferasiroks som en roman terapeutisk modalitet i magekreft

Potensialet i deferasiroks som en roman terapeutisk modalitet i magekreft
Abstract
Bakgrunn
Jern er et viktig element for celledeling, vekst og metabolisme. Men overflødig jern og endret jern metabolisme er begge assosiert med startfasen og tumorvekst. Deferasiroks er en oral jernbindende. Selv om noen studier har indikert at deferasiroks er en lovende kandidat for anti-kreft terapier, sin effektivitet mot magekreft er ennå ikke bestemt. Denne undersøkelsen ble gjennomført for å avgjøre om deferasiroks utøver anti-tumor effekter i mage kreft cellelinjer og om deferasiroks og cisplatin handle synergi
. Metoder
Fire menneskelige mage kreft cellelinjer (AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638) ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av deferasiroks for å bestemme den IC 50 for hver cellelinje. Virkningene av deferasiroks på cellesyklusen ble evaluert ved flow-cytometri, og effekten av deferasiroks på jernmetabolismen, cellesyklus, og apoptose ble bestemt ved Western blotting. For å bestemme hvorvidt deferasiroks forsterker effekten av cisplatin, AGS-celler ble dyrket i nærvær og fravær av cisplatin.
Resultater
Deferasiroks hemmet proliferasjonen av alle gastrisk cancer cellelinjer som bestemt ved MTT-analyser. Siden IC 50 av deferasiroks var den laveste (under 10 pM) i AGS-celler, ble følgende forsøk utført i denne linjen. Deferasiroks oppregulert transferrin reseptor 1 uttrykk og redusert ferroportin uttrykk. Videre deferasiroks indusert G1 arrest; oppregulert p21, p27 og p53 uttrykk; og downregulated cyklin D1, cyclin B, og CDK4 uttrykk. Videre deferasiroks indusert apoptose, oppregulert N-myc
nedstrøms regulert gen 1 (NDRG1), og nedregulert p-mTOR og c-myc uttrykk. Det ble også funnet til å virke synergistisk med cisplatin.
Konklusjoner
Våre resultater tyder på at deferasiroks kan utøve anti-tumoreffekter i forbindelse med magekreft. Deferasiroks påvirker en rekke forskjellige stier og molekyler; for eksempel, oppregulerer deferasiroks NDRG1 uttrykk, hemmer cellesyklus, nedregulerer mTOR og c-myc ekspresjonen, og induserer apoptose. I tillegg vises deferasiroks å forsterke anti-kreft effekt av cisplatin. Selv om effekten av deferasiroks gjenstår å bli testet i fremtidige studier, de resultatene som presenteres her indikerer at deferasiroks er en lovende ny anti-kreft terapeutisk middel.
Nøkkelord
Deferasiroks magen svulst Cisplatin Bakgrunn
Magekreft er en av de viktigste årsakene til kreft-relaterte dødsfall i Korea [1]. Selv om pasienter med magekreft viser gode resultater hvis kreften oppdages tidlig, er ubrukelige avanserte og tilbakevendende magekreft fortsatt forbundet med dårlig overlevelse. I de siste tiårene, har betydelige forbedringer i cytostatika bedret overlevelse i avansert magekreft. Nylig, total overlevelse var signifikant forlenget hos pasienter med HER2-positiv avansert mage eller gastro-øsofageal kreft krysset ved behandling med trastuzumab (HER-2 monoklonalt antistoff) i kombinasjon med konvensjonell kjemoterapi [2]. Men total overlevelse var bare 13,8 måneder. Derfor er nye agenter presserende behov.
Jern er et viktig element for celledeling, vekst og metabolisme. Imidlertid overskudd av jern og endret jernmetabolismen har vært forbundet med startfasen og tumorvekst [3]. Epidemiologiske studier har vist at et høyt jerninntak er forbundet med en økt risiko for tykktarmskreft [4]. Mange kreftceller endre jern metabolisme fordi maligne celler krever mer jern enn normale celler. For å øke den labile jern bassenget, har kreftceller vist seg å oppregulere ekspresjonen av transferrin reseptor 1 (TFR1) og hepcidin, i tillegg til downregulating ferroportin uttrykk [3].
Deferasiroks (Exjade®), en muntlig tredentat jern ( fe 3+) chelator, absorberes raskt fra tarmkanalen og har en relativt lang halveringstid (8 til 16 timer). Således kan dosering én gang daglig oppnå vedvarende sirkulerende legemiddelnivåer som er tilstrekkelig for rense av ikke-transferrin-bundet plasma jern. Selv om deferasiroks har vært forbundet med noen bivirkninger som gastrointestinale forstyrrelser, hudutslett, og renal toksisitet, er det forholdsvis godt tolerert. Derfor er deferasiroks for tiden den mest brukte jern chelator i behandling av jern overbelastning sykdom [5].
Nylig har flere studier undersøkt muligheten av deferasiroks som et anti-neoplastisk middel. Deferasiroks har blitt rapportert å inhibere NF-kB aktivitet i blodprøver fra pasienter med myelodysplastisk syndrom og i leukemicellelinjer [6]; dessuten deferasiroks ble også vist å undertrykke mTOR banen i myeloide leukemiceller [7]. Når det gjelder kliniske data, ett tilfelle rapport viste at deferasiroks behandling oppnådde komplett remisjon hos pasienter med kjemoterapi-ildfast akutt monocytic leukemi [8]. Videre post hoc analyse av en multisenterstudie som viste at deferasiroks forbedret hematologiske parametere hos pasienter med myelodysplastisk syndrom [9]. I dag har de fleste rapporter om deferasiroks som et anti-neoplastisk middel vært i hematologisk kreftsykdom; bare noen få studier har fokusert på solide tumorer. Nylig, deferasiroks ble vist å hemme veksten av lunge- og esophageal kreftceller både in vitro og in vivo [10, 11]. Effekten av deferasiroks på gastrisk kreft har ikke ennå blitt bestemt, og den mekanismen som deferasiroks utøver sin anti-tumoreffekter forblir dårlig forstått. Derfor denne studien ble gjennomført for å undersøke om deferasiroks utøver anti-tumor effekter på mage kreft cellelinjer og også om deferasiroks virker synergistisk med cisplatin.
Metoder
Cell kultur
Fire menneskelige mage kreft cellelinjer (AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638) ble oppnådd fra den koreanske cellelinje Bank. Alle celler ble dyrket i RPMI 1640 medium inneholdende 10% føtalt bovint serum og antibiotika (100 U /ml penicillin og 100 ug /ml streptomycin) i en fuktet 5% CO 2 inkubator ved 37 ° C.
Reagenser og antistoffer
Deferasiroks (Exjade®) ble donert av Novartis (Basel, Sveits). Geitepolyklonalt anti-NDRG1 (N-myc
nedstrøms regulert gen 1) (katalog nr. Ab37897) og kanin polyklonale anti-ferroportin (katalog nr. Ab85370) antistoffer ble kjøpt fra Abcam (Cambridge, UK). Anti-TFR1 mus monoklonale antistoffer (katalog nr. 136800) ble hentet fra Life Technologies (Carlsbad, CA, USA), og FeSO 4 ble kjøpt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, cyclin A, cyclin B, cyclin D1, cyclin E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspase 3, og BAX antistoffer ble kjøpt fra Santa Cruz Bioteknologi (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR og pro-kaspase 8-antistoffer ble erholdt fra Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Veksthemmende analyse
Veksthemming ble målt ved hjelp av MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-yl] -2,5-difenyltetrazoliumbromid) som tidligere beskrevet [12]. I korthet ble cellene sådd ut (2 x 10 3 celler /brønn) i 96-brønners mikrotiterplater (Nunc, Roskilde, Danmark) og inkubert ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. MTT-løsning (50 ul) fra Sigma (2 mg /ml i PBS) ble tilsatt til hver brønn, og platene ble inkubert i ytterligere 4 timer ved 37 ° C. Etter denne inkubering ble MTT-oppløsning suges av. For å oppløse formazankrystaller dannet i levedyktige celler, ble 200 ul DMSO tilsatt til hver brønn. Platene ble ristet i 30 min ved romtemperatur, og absorbansen til hver brønn ved 595 nm ble avlest umiddelbart med en skanning for flere brønner spektrofotometer (Bio-Rad, iMarkTM mikroplateleser).
For å bestemme konsentrasjonen av deferasiroks kreves for å drepe 50% av cellene (IC 50), ble AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638-celler ble behandlet med 0, 1, 10, 50 og 100 uM av deferasiroks for 24, 48, og 72 timer. Disse resultatene ble brukt til å velge den gastriske cellelinjen med den største følsomhet for deferasiroks for alle etterfølgende eksperimenter.
Cellesyklusanalyse
Etter 24-timers inkubasjon av AGS-celler med 0, 10 og 100 uM av deferasiroks ved 37 ° C, ble cellene vasket to ganger med PBS, fiksert over natten med 70% etanol, vasket med PBS, og farget med 50 ug /ml propidiumjodid (PI) som inneholder RNase A ved 50 ug /ml. DNA-innholdet i cellene (10.000 celler /eksperimentell gruppe) ble analysert ved hjelp av en FACSCanto II flowcytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) utstyrt med BD FACSDivaTM programvare (v6.1.3). Prosentandelene av de cellepopulasjoner i hver cellesyklus fase (G1, S eller G2 /M) ble beregnet ut fra DNA-innhold histogrammene.
Western blot-analyse
AGS-celler ble inkubert med 0, 10 og 100 pM av deferasiroks ved 37 ° C i 24 timer. Cellene ble vasket med PBS, resuspendert i lyseringsbuffer [50 mM Tris (pH 7,5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCl, 20 mikrogram /ml aprotinin, 20 ug /ml leupeptin, og 1 mM fenylmetylsulfonylfluorid fluor], og plassert på is i 20 min. Proteiner i lysatene (20-30 ug) ble løst på 10-15% SDS-polyacrylamid-denaturerende geler og overført til nitrocellulosemembraner i 90-120 min. Ikke-spesifikke bindingsseter ble blokkert med 5% skummet melk i 1 time, og membranene ble deretter inkubert over natten med primære antistoffer (alle ved en 1: 1000 fortynning). Antistoffene og de relaterte fremgangsmåter som ble brukt for å undersøke var som følger: anti-TFR1 og anti-ferroportin for jernmetabolismen; anti-p53, p27, p21, cyklin A, cyclin B, cyklin D1, cyklin E, CDK2, CDK4, CDK6 og for cellesyklus; anti-pro-caspase 3, pro-caspase 8, pro-caspase 9, og BAX for apoptose; anti-NDRG1 for metastaser; og anti-p-mTOR og c-myc. Immunreaktive bånd ble visualisert med en ECL kit (Intron, Korea).
Statistisk analyse
Data er presentert som gjennomsnitt ± SEM (feilfelt). Forskjeller ble analysert med Student t
test. P
verdier. ≪ 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
Effekt av deferasiroks på veksten av magekreft cellelinjer
evne deferasiroks å hemme veksten av de fire magekreft cellelinjer var bestemt ved en MTT-proliferasjonsanalyse. AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638-celler ble inkubert med 0, 1, 10, 50 og 100 uM deferasiroks ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. Deferasiroks hemmet veksten av alle fire mage cancer-cellelinjer på en doseavhengig og tidsavhengig måte (fig. 1a). Siden IC 50 av deferasiroks ved 72 timer var den laveste i AGS celler (mindre enn 10 um), ble alle etterfølgende eksperimenter utført ved hjelp av disse cellene. Fig. 1 Inhiberende effekt av deferasiroks på veksten av magecancercellelinjer. en Cellelevedyktigheten ble målt ved MTT-analyse. AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638-celler ble inkubert med 0, 1, 10, 50 og 100 uM av deferasiroks ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. Deferasiroks behandling resulterte i doseavhengig og tidsavhengig vekst-inhibering i alle fire mage cancer-cellelinjer. b AGS-celler ble dyrket med 10 og 20 uM av deferasiroks enten alene eller i nærvær av FeSO4 (100 uM) i 48 timer. Den hemmende effekten av deferasiroks ble reversert ved FeSO4 supplement
AGS-celler ble dyrket med 10 og 20 uM av deferasiroks enten alene eller i nærvær av FeSO 4 (100 uM) i 48 timer. Den hemmende effekten av deferasiroks ble reversert av FeSO 4 supplement (Fig. 1b).
Cell syklus analyse i AGS celler
Iron uttømming induserer G1 /S arrest ved å påvirke uttrykket av kritiske molekyler for cellecyklusprogresjonen for eksempel cyklin D1 og p21 [13]. Effektene av deferasiroks på cellesyklusen ble bestemt ved fluorescens-aktivert cellesortering (FACS) under anvendelse av propidiumjodid. AGS-celler ble inkubert med 0, 10 og 100 uM av deferasiroks ved 37 ° C i 24 timer. Som vist på fig. 2a, behandling av AGS celler med deferasiroks i 24 timer førte til en akkumulering av celler i G1 fase på en doseavhengig måte (41,8% ved 0 uM, 53,7% ved 10 uM, og 77,2% ved 100 pM). Dette resultatet indikerer at deferasiroks induserer G1 arrest. Western blot-analyse av cellesyklusrelaterte proteiner, viste at deferasiroks indusert oppregulering av p21, p27 og p53, og nedregulering av cyclin D1, cyclin B, og CDK4 (fig. 2b). Disse resultater antyder at den anti-proliferative effekt av deferasiroks er på grunn av cellesyklus-inhibering. Fig. 2 Effekt av deferasiroks på cellesyklusprogresjon i AGS celler. a AGS-celler ble inkubert med 0, 10 og 100 uM av deferasiroks ved 37 ° C i 24 timer. Cellesyklusprogresjon ble analysert ved FACS. Deferasiroks behandling i 24 timer førte til en doseavhengig akkumulering av AGS celler i G1 fase (41,8% ved 0 uM, 53,7% ved 10 uM, og 77,2% ved 100 pM). b Western blot analyse av cellesyklusrelaterte molekyler viste at deferasiroks oppregulert p21, p27 og p53 og downregulated cyclin D1, cyclin B, og CDK4
Effekt av deferasiroks på jern metabolisme og andre veier
For jern opptak inn i celle, sirkulerende jern-transferrin-komplekser binder seg til celleoverflatereseptoren TFR1. Iron avslutter via ferroportin, en efflukspumpen jern som er regulert av hepcidin. I kreftceller, har TFR1 og hepcidin blitt vist å være oppregulert og ferroportin er nedregulert, som samlet fører til økte konsentrasjoner av intracellulære jern [3]. Effekten av deferasiroks på jern metabolisme ble evaluert av Western blot analyse av TFR1 og ferroportin. Nivået av TFR1 øket etter 24 timer med behandling med deferasiroks. I motsetning til dette, redusert ferroportin ekspresjon (Fig. 3a). Disse resultatene er i samsvar med tidligere studier [10, 11]. Fig. 3 Effekt av deferasiroks på jern metabolisme og andre veier. en behandling med deferasiroks for 24 timer førte til økt nivå av TFR1 og et redusert nivå av ferroportin. b Deferasiroks også indusert apoptose, oppregulert NDRG1, og nedregulert p-mTOR og c-myc som vurderes av Western blot analyse
Virkningene av deferasiroks på apoptose ble neste evaluert av FACS og Western blot analyse av apoptose relaterte proteiner. Som vist på fig. 2a, AGS celler behandlet med deferasiroks i 24 timer oppviste en akkumulering av celler i sub-G1 (apoptotiske) fase (3,2% ved 0 uM, 3,3% ved 10 uM og 9,5% ved 100 pM). Videre redusert deferasiroks behandling ekspresjonen av pro-kaspase 3, pro-kaspase 8, og pro-kaspase 9 og økt ekspresjon av BAX (fig. 3b). NDRG1 er kjent for å være en suppressor av cellevekst og metastase. Deferasiroks økt nivå av NDRG1. I tillegg ble det c-myc og fosfo-mTOR-ekspresjon ble redusert etter 24 timers behandling med deferasiroks (fig. 3b). Disse resultatene tyder på at deferasiroks induserer apoptose, hemmer fjernmetastaser, og undertrykker c-myc og mTOR trasé.
Synergistisk effekt av deferasiroks og cisplatin
å vurdere om deferasiroks kan forsterke effekten av cisplatin, AGS celler ble dyrket med eller uten cisplatin og deres levedyktighet ble bestemt ved anvendelse av MTT-analysen. Behandling med cisplatin i 48 timer redusert antall av levedyktige celler, med en IC 50 på 5-10 uM. For å bestemme hvorvidt deferasiroks utøver en synergistisk effekt med cisplatin, ble AGS-celler behandlet med 0, 2,5, 5, 10, og 20 uM av deferasiroks enten alene eller i nærvær av en fast konsentrasjon av cisplatin (5 uM) i 48 timer. Som vist på fig. 4a, b, AGS celler behandlet med deferasiroks og cisplatin viste en signifikant større reduksjon i cellelevedyktighet sammenlignet med celler behandlet med enten deferasiroks eller cisplatin alene (P
< 0,01). Disse resultatene tyder på at deferasiroks forbedrer cisplatin-mediert inhibering av AGS cellevekst. Fig. 4 synergistisk effekt av deferasiroks og cisplatin. a, b AGS-celler ble behandlet med 0, 2,5, 5, 10, og 20 uM av deferasiroks, enten alene eller i nærvær av en fast konsentrasjon av cisplatin (5 uM) i 48 timer. AGS-celler behandlet med deferasiroks og cisplatin viste en signifikant reduksjon i cellelevedyktighet sammenlignet med celler behandlet med enten deferasiroks eller cisplatin alene
For å undersøke de molekylære mekanismer som ligger under denne effekten, ble Western blot-analyse for å vurdere nivået av ulike molekyler i AGS celler behandlet med deferasiroks (5 uM), cisplatin (5 uM), eller begge deler. Kombinasjonen av deferasiroks og cisplatin resulterte i oppregulering av NDRG1, p21 og p53. I motsetning til denne kombinasjonen resulterte i nedregulering av fosfo-mTOR, ferroportin, og pro-kaspase 9. Disse funnene tyder på at deferasiroks potenserer anti-kreft effekt av cisplatin gjennom ulike baner (fig. 5). Fig. 5 Molekylære mekanismer for synergistisk effekt. Western blot-analyse ble utført med lysater av AGS-celler behandlet med deferasiroks (5 uM), cisplatin (5 uM), eller begge deler i 24 timer. Kombinasjonen av deferasiroks og cisplatin indusert oppregulering av NDRG1, p21 og p53, i tillegg til nedregulering av fosfor-mTOR, ferroportin, og pro-caspase 9
Diskusjon
I denne studien fant vi at deferasiroks hemmer spredning av magekreftceller. Deferasiroks ble også funnet å indusere G1 arrest; oppregulere p21, p27 og p53 uttrykk; og nedregulere cyklin D1, cyclin B, og CDK4 uttrykk. Deferasiroks også indusert apoptose, oppregulert NDRG1, og nedregulert p-mTOR og c-myc. Disse resultatene tyder på at deferasiroks utøver anti-tumoreffekter i magecancerceller via forskjellige veier. Nærmere bestemt våre data indikerer at deferasiroks endrer jernmetabolismen, inhiberer cellesyklusprogresjon, påvirker mTOR-signalisering og metastase trasé, og induserer apoptose. I tillegg vises deferasiroks til å potensiere den anti-proliferative effekt av cisplatin i magekreftceller.
Jern er viktig for celleoverlevelse, men kan også føre til cellulær skade ved generering av reaktive oksygenarter [14]. Selv om nivået av intracellulær jern er strengt regulert i normale celler, er nivået av intracellulær jern forhøyet i kreftceller på grunn av økt ekspresjon av TFR1 og hepcidin og redusert ekspresjon av ferroportin [3]. Da overskudd av jern og endres jern metabolisme kan føre til tumorvekst og initiering, blir jernchelatorer antas å være lovende antikreftmidler. Flere linjer av bevis støtter ideen om at jernbindende er potensielle anti-tumor terapi. For det første har økte nivåer av intracellulært jern kjent for å fremme DNA-syntese. Siden jern er essensiell for aktiviteten av ribonukleotid-reduktase, et nøkkelenzym for DNA-syntese, spiller jern en viktig rolle i celleproliferasjon [15]. Derfor økes jern som kreves for å utfylle ribonukleotidreduktase-aktivitet i neoplastiske celler. Dernest kan jern uttømming forårsake G1 /S arrest og indusere apoptose [13]. Cyclin D1 binder seg til CDK4 og CDK6, og dermed resultere i G1 /S progresjon via fosforylering av retinoblastom protein (RB). Dette fosforylering igjen resulterer i utslipp av transkripsjonsfaktoren E2F fra RB. Jern uttømming er kjent for å redusere cyklin D1 og CDK uttrykk. For det tredje, kan overdreven celle jern drive Wnt signalveien, som er kjent for å være viktig for tumorprogresjon [16].
Vi utførte denne studie for å undersøke hvorvidt deferasiroks utøver anti-tumoreffekter i forbindelse med magekreft. Vi valgte deferasiroks ut av de mange kommersielt tilgjengelige jernchelatorer på grunn av sin oral tilgjengelighet og relativt lav toksisitet. Selv om de nøyaktige mekanismene som deferasiroks utøver sin anti-kreft effekt er fortsatt under etterforskning, hypotese vi at deferasiroks hemmer cellesyklusprogresjon basert på tidligere studier [11, 17]. Vi fant ut at deferasiroks indusert G1 arrest ved oppregulering p21 og p27 og downregulating cyclin D1 og CDK4. Disse funnene støtter vårt hypotese at deferasiroks utøver sin anti-neoplastiske effekt ved å regulere cellesyklusprogresjon.
Jern-chelatorer kan indusere ekspresjon av NDRG1, en kjent metastatisk suppressor, i en rekke humane cancere [18-20]. Den mekanisme ved hvilken NDRG1 undertrykker metastase for tiden er uklar, selv om NDRG1 er blitt vist å hemme cellemigrering og invasjon ved å modulere ekspresjon av et antall av adhesjonsmolekyler [21]. NDRG1 ekspresjon er vist å være signifikant lavere i kreftvevet sammenlignet med tilstøtende normalt vev; Videre har NDRG1 ekspresjon er vist å være omvendt korrelert med metastasering av enkelte kreftformer, slik som prostata- og tykktarmskreft [22, 23]. Imidlertid har avvikende resultater er oppnådd om en mulig sammenheng mellom NDRG1 med tumorprogresjon. Interessant nok har NDRG et vist rolle i cellesykluskontroll. Spesielt er NDRG1 uttrykk oppregulert via p53-mediert induksjon, og NDRG1 kan også indusere G1 /S arrest etter oppregulering p21 [24]. Vi fant at deferasiroks oppregulerer uttrykket nivåer av NDRG1, p53 og p21. Selv om vi ikke analysere cellemigrasjon eller undersøke metastaser in vivo i denne studien, våre funn tyder på at deferasiroks kan være i stand til å hemme tumorvekst og metastasering. Vi hypotese at den mekanismen som deferasiroks utøver sin anti-tumoreffekter kan innebære NDRG1.
Deferasiroks har vist seg å øke den cytotoksiske effekt av cisplatin i esophageal kreftcellelinjer. I tillegg, cisplatin-resistente celler behandlet med en lav konsentrasjon av deferasiroks (5 uM) i kombinasjon med cisplatin, viste en signifikant reduksjon i cellelevedyktigheten sammenlignet med celler behandlet med deferasiroks eller cisplatin alene [10]. Vi har funnet at kombinasjonen av deferasiroks (5 uM) og cisplatin (5 uM) induserte en signifikant reduksjon i cellulære levedyktighet. Videre har denne kombinerte behandling resulterte i oppregulering av NDRG1, p21 og p53 og nedregulering av fosfo-mTOR. Våre resultater antyder derfor at deferasiroks kan potensielt øke den anti-kreft effekt av cisplatin i magekreftceller. Videre kan p53-NDRG1-p21 og mTOR trasé være involvert i synergistisk effekt av deferasiroks med cisplatin.
Denne studien har en rekke begrensninger. For det første, begrenset vi vår studie til magekreft cellelinjer og ikke utføre in vivo eksperimenter. I tillegg ble ekspresjon av cellesyklusrelaterte proteiner som vurderes bare ved Western blotting. Mer detaljert informasjon kan ha blitt oppnådd ved immunoutfellingsstudier og kinase analyser. For å bestemme den anti-tumor effekt av deferasiroks, vil ytterligere forsøk, inkludert in vivo studie være nødvendig. Likevel, dette er den første studien å undersøke anti-tumor effekter av deferasiroks mot magekreft.
Konklusjoner
konklusjon, fant vi at deferasiroks indusert anti-tumor effekter i mage kreftcellene via ulike veier. Nærmere bestemt, deferasiroks oppregulert NDRG1, inhiberte cellesyklusprogresjon, downregulated mTOR og c-myc ekspresjonen, og induserte apoptose. Videre deferasiroks potenseres anti-kreft effekt av cisplatin. Selv om effekten av deferasiroks må bekreftes i fremtidige studier, viser våre resultater at deferasiroks er en lovende anti-kreft terapeutisk middel, og kan også være en effektiv kjemoterapi allergen.
Erklæringer
Takk
Dette arbeidet ble støttet av . forskningsfondet for Hanyang University (HY-2013-MC)
Åpne AccessThis artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution 4.0 Internasjonale lisens (http:. //creative org /lisenser /ved /4. 0 /), som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt at du gir riktig kreditt til den opprinnelige forfatteren (e) og kilde, gi en link til Creative Commons-lisens, og angi om endringer ble gjort. Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creative org /offentlig eiendom /null /1. 0 /) gjelder for data som gjøres tilgjengelig i denne artikkelen, med mindre annet er angitt
Konkurrerer. interesser
forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
forfatternes bidrag
JC og YL deltok i design og analyse av foreliggende forskning. JC skrev avisen. JK utført de molekylære studier. YW, JU, BP bidro i sammensetningen av papir. Alle forfatterne lest og godkjent manuskriptet.

• Samtidig kompositt adrenal pheochromocytoma, flere mage stromal tumor og pseudohermaphrodism hos en pasient med von Recklinghausens disease
• Iris metastasering av mage adenocarcinoma