Потенциал Deferasirox в качестве нового лечебного воздействия в желудочном cancer

потенциал Deferasirox в качестве нового лечебного воздействия при раке желудка
Аннотация
Справочная информация
Железо является одним из важнейших элементов для пролиферации клеток, роста и обмена веществ. Тем не менее, избыток железа и изменили метаболизма железа оба связаны с инициацией опухоли и рост опухоли. Deferasirox является пероральным хелатор железа. Хотя некоторые исследования показали, что Deferasirox является перспективным кандидатом для противораковых методов лечения, его эффективность против рака желудка до сих пор не определена. Данное исследование было проведено с целью определить, оказывает ли Deferasirox противоопухолевые эффекты в желудочном линиях раковых клеток и является ли Deferasirox и цисплатин действуют синергически.
Методы
Четыре желудка линии раковых клеток человека (AGS, MKN-28, СНУ-484, и СНУ-638) обрабатывали различными концентрациями Deferasirox для определения IC <суб> 50 для каждой клеточной линии. Эффекты Deferasirox на клеточный цикл оценивали с помощью проточной цитометрии, и эффекты Deferasirox на метаболизм железа, клеточного цикла и апоптоза оценивали с помощью вестерн-блоттинга. Для того, чтобы определить, усиливает ли Deferasirox эффект цисплатина, AGS клетки культивировали в присутствии и в отсутствие цисплатина.
Результаты
Deferasirox ингибирует пролиферацию всех желудочных линий раковых клеток, как оценивали с помощью МТТ-анализа. Поскольку ИС <суб> 50 из Deferasirox был самым низким (менее 10 мкМ) в AGS клетках, последующие эксперименты проводились в этой линии. Deferasirox повышающей регуляции рецептора трансферрина 1 экспрессию и снижение Ferroportin выражение. Кроме того, Deferasirox индуцированное G1 арест; активируемых р21, р27 и р53 выражение; и подавляются циклин D1, циклин В, и выражение CDK4. Кроме того, Deferasirox индуцированного апоптоза, усиливает свою активность N-Myc
вниз по течению регулируемого гена 1 (NDRG1), и подавляются п-МРМ и с-Мус выражение. Кроме того, было обнаружено, что синергически с цисплатином.
Выводы
Наши результаты свидетельствуют о том, что Deferasirox могут оказывать противоопухолевые эффекты в контексте рака желудка. Deferasirox влияет множество различных путей и молекул; например, Deferasirox выражение NDRG1 активирует, ингибирует клеточный цикл, подавляет экспрессию MTOR и с-Мус, и индуцирует апоптоз. Кроме того, по-видимому, Deferasirox потенцировать противораковым действием цисплатина. Хотя эффективность Deferasirox еще предстоит проверить в дальнейших исследованиях, результаты, представленные здесь, показывают, что Deferasirox является многообещающим новым противораковое терапевтическое средство.
Ключевые слова
Deferasirox Желудок новообразование Цисплатин фон
рака желудка является одним из основными причинами смертности от онкологических заболеваний в Корее [1]. Хотя пациенты с желудочным показывают отличные исходы рака, если рак обнаружен на ранней стадии, неоперабельный передовых и рецидивирующие рака желудка по-прежнему ассоциируются с бедными выживаемости. За последние несколько десятилетий, существенные улучшения в химиопрепаратов улучшение выживаемости при поздних стадиях рака желудка. В последнее время, общая выживаемость была значительно увеличена у пациентов с HER2-положительным расширенному желудка или желудочно-пищеводного рака соединительной обработкой трастузумаб (HER-2 моноклональное антитело), ​​в сочетании с традиционной химиотерапией [2]. Тем не менее, общая выживаемость составила всего 13,8 месяцев. Таким образом, новые агенты срочно требуются.
Железо является важным элементом для клеточной пролиферации, роста и обмена веществ. Тем не менее, избыток железа и изменили метаболизм железа, были связаны с инициацией опухолей и роста опухоли [3]. Эпидемиологические исследования показали, что высокое потребление железа связано с повышенным риском развития колоректального рака [4]. Многие раковые клетки изменяют метаболизм железа, потому что злокачественные клетки требуют больше железа, чем нормальные клетки. Для увеличения лабильный пул железа, раковые клетки, как было показано апрегулируются экспрессию рецептора трансферрина 1 (TfR1) и гепсидина, в дополнение к downregulating Ferroportin выражение [3].
Deferasirox (Exjade®), пероральный тридентатный железа ( Fe 3 +) хелатор, быстро всасывается из кишечника и имеет относительно длительный период полураспада (от 8 до 16 ч). Таким образом, один раз в день дозирования может достигнуть устойчивых циркулирующие уровни лекарственного средства, достаточные для продувкой не трансферрина связанного железа в плазме. Хотя Deferasirox было связано с некоторыми неблагоприятными эффектами, такими как желудочно-кишечные расстройства, кожная сыпь, и почечной токсичности, он относительно хорошо переносится. Поэтому Deferasirox в настоящее время является наиболее часто используемым хелатор железа для лечения болезни перегрузки железом [5].
В последнее время некоторые исследования исследовали потенциал Deferasirox в качестве противоопухолевого агента. Deferasirox сообщается ингибировать активность NF-kB в образцах крови от больных с МДС и в лейкозных клеток линии [6]; кроме того, Deferasirox был также показан для подавления MTOR пути в миелоидных лейкозных клеток [7]. Что касается клинических данных, один клинический случай показал, что лечение Deferasirox была достигнута полная ремиссия у больных с химиотерапией огнеупорный острого моноцитарного лейкоза [8]. Кроме того, постфактум анализ многоцентрового исследования показали, что Deferasirox улучшились гематологические показатели у больных с МДС [9]. В настоящее время большинство сообщений о Deferasirox в качестве противоопухолевого агента был в гематологических злокачественных новообразований; лишь немногие исследования были сосредоточены на солидных опухолей. Недавно Deferasirox было показано, ингибирует рост рака легких и рака пищевода клеток как в пробирке и в естественных условиях [10, 11]. Тем не менее, влияние Deferasirox на рак желудка до сих пор не определен, а механизм, с помощью которого Deferasirox оказывает свое противоопухолевые эффекты еще недостаточно изучена. Таким образом, это исследование было проведено с целью изучения оказывает ли Deferasirox противоопухолевые эффекты на желудочных линиях раковых клеток, а также действует ли Deferasirox синергически с цисплатином.
Методами
клеточной культуре
Четыре желудка клеточных линий рака человека (AGS, MKN-28, СНУ-484, и СНУ-638) были получены из корейской клеточной линии банка. Все клетки культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки и антибиотики (100 ед /мл пенициллина и 100 мкг /мл стрептомицина) в увлажненной 5% CO <суб> 2 инкубаторе при температуре 37 ° С. Реагенты и
антитела
Deferasirox (Exjade®) была подарена Novartis (Базель, Швейцария). Козьи поликлональные анти-NDRG1 (N-Myc
вниз по течению регулируемого гена 1) (№ по каталогу. Ab37897) и кроличьи поликлональные анти-Ferroportin (№ по каталогу. Ab85370) антитела были приобретены у Abcam (Кембридж, Великобритания). Анти-TfR1 моноклональных антител мыши (№ по каталогу. 136800) были получены из компании Life Technologies (Карлсбад, Калифорния, США), и FeSO <суб> 4 был приобретен у фирмы Sigma-Aldrich (Сент-Луис, штат Миссури, США). Анти-p53, анти-p27, p21, циклин A, циклин B, циклин D1, циклин Е, CDK2, CDK4, CDK6, с-Мус, про-каспазы 3, и Вах антитела были приобретены у Santa Cruz Biotechnology (Санта-Крус, Калифорния, США). Анти-п-МРМ и про-каспазы 8 антитела получали из Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Анализ ингибирования роста
Ингибирование роста измеряли с помощью МТТ (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-ил] -2,5-дифенилтетразолийбромид), как описано ранее [12]. В кратком изложении, клетки высевали (2 × 10 3 клеток /лунку) в 96-луночные планшеты для микротитрования (Nunc, Roskilde, Denmark) и инкубировали при 37 ° С в течение 24, 48 или 72 ч. Раствор МТТ (50 мкл) из Sigma (2 мг /мл в PBS) добавляли в каждую лунку, и планшеты инкубировали еще в течение 4 ч при 37 ° С. После этой инкубации раствор МТТ отсасывали. Для солюбилизации кристаллов формазана, образованных в жизнеспособных клетках, добавляли 200 мкл ДМСО добавляли в каждую лунку. Планшеты встряхивают в течение 30 мин при комнатной температуре, и оптическую плотность каждой лунки при длине волны 595 нм была немедленно считаны с помощью сканирующего многоямного спектрофотометра (Bio-Rad, iMarkTM Считыватель микропланшетов).
Для определения концентрации Deferasirox необходимого, чтобы убить 50% клеток (СК <суб> 50), AGS, MKN-28, SNU-484, и СНУ-638 клетки обрабатывали 0, 1, 10, 50, и 100 мкМ Deferasirox в течение 24, 48, и 72 ч. Эти результаты были использованы для выбора желудка линии клеток с наибольшей чувствительностью к Deferasirox для всех последующих экспериментов.
Клеточного цикла анализа
После 24-часовой инкубации клеток с AGS 0, 10 и 100 мкМ Deferasirox при 37 ° с, клетки дважды промывали PBS, фиксировали в течение ночи с 70% -ным этанолом, промывали PBS и окрашивали 50 мкг /мл пропидийиодидом (PI), содержащей РНКазы а при 50 мкг /мл. Содержание ДНК клеток (10000 клеток /экспериментальная группа) были проанализированы с использованием потока FACSCanto II цитометра (Becton Dickinson, Сан-Хосе, Калифорния, США), оснащенного программным обеспечением BD FACSDivaTM (v6.1.3). Процентное содержание клеточных популяций в каждой фазе клеточного цикла (G1, S, или G2 /M) были рассчитаны из гистограмм содержания ДНК.
Вестерн-блот-анализ
клетки AGS инкубировали с 0, 10, и 100 мкМ из Deferasirox при 37 ° С в течение 24 ч. Клетки промывали PBS, ресуспендировали в буфере для лизиса [50 мМ Трис (рН 7,5), 1% NP-40, 2 мМ ЭДТА, 10 мМ NaCl, 20 мкг /мл апротинина, 20 мкг /мл лейпептина и 1 мМ фенилметилсульфонила фторид], и помещали на лед в течение 20 мин. Белки в лизатов (20-30 мкг) были решены на 10-15% ДСН-полиакриламидном денатурирующих геле и переносили на нитроцеллюлозные мембраны в течение 90-120 мин. Сайты неспецифического связывания блокировали 5% обезжиренным молоком в течение 1 ч, а затем мембраны инкубировали в течение ночи с первичными антителами (все в разведении 1: 1000). Антитела и связанные с ними процессы, которые были использованы для исследования были следующими: анти-TfR1 и анти-Ferroportin для метаболизма железа; анти-р53, р27, р21, циклин А, циклин В, циклин D1, циклин Е, CDK2, CDK4 и CDK6 для клеточного цикла; анти-про-каспазы 3, про-каспазы 8, про-каспазы 9, и Вах апоптоза; анти-NDRG1 для метастазирования; и анти-п-МРМ и с-Мус. Иммунореактивного полосы визуализируют с помощью набора ECL (Интрон, Корея).
Статистический анализ
Данные представлены в виде средних значений ± SemS (столбики ошибок). Различия были проанализированы с помощью т
критерия Стьюдента. P
значений &ЛТ; 0,05. Считались статистически значимыми

Результаты Влияние Deferasirox на рост раковых клеток желудка линий
Способность Deferasirox ингибировать рост четырех желудочных линий раковых клеток было определяют с помощью анализа пролиферации МТТ. AGS, MKN-28, СНУ-484, и СНУ-638 клеток инкубировали с 0, 1, 10, 50 и 100 мкМ Deferasirox при 37 ° С в течение 24, 48, или 72 ч. Deferasirox ингибирует рост всех четырех желудочных линий раковых клеток в зависимости от дозы и зависимым от времени образом (фиг. 1а). Поскольку ИК <суб> 50 из Deferasirox в 72 часов был самым низким в AGS клетках (менее 10 мкм), все последующие эксперименты проводили с использованием этих клеток. Инжир. 1 Ингибирующий эффект Deferasirox на рост желудочных линий раковых клеток. жизнеспособность клеток измеряли с помощью МТТ-анализе. AGS, MKN-28, СНУ-484, и СНУ-638 клетки инкубировали с 0, 1, 10, 50 и 100 мкМ Deferasirox при 37 ° С в течение 24, 48 или 72 ч. Лечение Deferasirox приводило к зависимому от дозы и времени ингибированию роста во всех четырех желудочных линий раковых клеток. б AGS клетки культивировали с 10 и 20 мкМ Deferasirox либо отдельно, либо в присутствии FeSO4 (100 мкМ) в течение 48 ч. Ингибирующее действие Deferasirox было отменено FeSO4 добавки
AGS клетки культивировали с 10 и 20 мкМ Deferasirox либо отдельно, либо в присутствии FeSO <суб> 4 (100 мкМ) в течение 48 ч. Ингибирующее действие Deferasirox было отменено FeSO <суб> 4 добавка (рис. 1, б). Анализ
клеточного цикла в клетках AGS
истощения запасов железа вызывает G1 /S арест, влияя на экспрессию молекул критических для прогрессии клеточного цикла такие как циклин D1 и p21 [13]. Эффекты Deferasirox на клеточного цикла определяли с помощью флуоресцентной активированный сортировки клеток (FACS) с использованием йодида пропидия. Клетки AGS инкубировали с 0, 10 и 100 мкМ Deferasirox при 37 ° С в течение 24 ч. Как показано на рис. 2а, лечение AGS клеток с Deferasirox в течение 24 ч приводило к накоплению клеток в G1 фазе в зависимости от дозы (41,8% при 0 мкМ, 53,7% при концентрации 10 мкМ, и 77,2% при 100 мкМ). Этот результат указывает на то, что Deferasirox индуцирует G1 арест. Вестерн-блот-анализ белков клеточного цикла, связанных показали, что Deferasirox индуцирует активацию р21, р27 и р53, и понижающей регуляции циклин D1, циклин В, и CDK4 (рис. 2, б). Эти результаты свидетельствуют о том, что антипролиферативное действие Deferasirox связано с ингибированием клеточного цикла. Инжир. 2 Влияние Deferasirox на прогрессии клеточного цикла в клетках AGS. а AGS клетки инкубировали с 0, 10 и 100 мкМ Deferasirox при 37 ° С в течение 24 ч. прогрессию клеточного цикла анализировали с помощью FACS. Deferasirox лечение в течение 24 ч привело к дозозависимым накопление клеток в G1 AGS фазе (41,8% при 0 мкМ, 53,7% при концентрации 10 мкМ, и 77,2% при 100 мкМ). б Вестерн-блот-анализ молекул клеточного цикла, связанных показали, что Deferasirox повышающей регуляции p21, p27 и p53 и подавляются циклин D1, циклин и CDK4
Влияние Deferasirox на метаболизм железа и других путей
Для поглощения железа в клетка, циркулирующие железо-трансферрин комплексы связываются с рецептором клеточной поверхности TfR1. Железо выходит через ферропортина, с эффлюксного насоса железа, который регулируется гепсидина. В раковых клетках, TfR1 и гепсидин было показано, что и усиливает свою активность Ferroportin подавляется, что совокупно приводит к повышению концентрации внутриклеточного железа [3]. Эффект Deferasirox на метаболизм железа оценивали с помощью Вестерн-блот-анализом TfR1 и ферропортина. Уровень TfR1 увеличивается после 24 часов лечения с Deferasirox. В противоположность этому, Ferroportin выражение уменьшилось (рис. 3, а). Эти результаты согласуются с результатами предыдущих исследований [10, 11]. Инжир. 3 Влияние Deferasirox на метаболизм железа и других путей. Обработка с Deferasirox в течение 24 ч привело к увеличению уровня TfR1 и снижение уровня ферропортина. б Deferasirox также индуцирует апоптоз, повышающей регуляции NDRG1, и подавляются п-МРМ и с-Мус, оцененной с помощью Вестерн-блот-анализа
Эффекты Deferasirox на апоптоз Следующими были оценены с помощью FACS и Вестерн-блот-анализа связанных с апоптозом белков. Как показано на рис. 2а, AGS клетки, обработанные Deferasirox в течение 24 ч обнаруживал накопление клеток в суб-G1 (апоптотических) фазы (3,2% при 0 мкМ, 3,3% при 10 мкМ и 9,5% при 100 мкМ). Кроме того, лечение Deferasirox снижала экспрессию про-каспазы 3, про-каспазы 8, и про-каспазы 9 и усиливает экспрессию Вах (рис. 3, б). NDRG1, как известно, угнетать рост клеток и метастазирование. Deferasirox повысили уровень NDRG1. Кроме того, с-Мус и экспрессия фосфо-МРМ уменьшались через 24 ч лечения с Deferasirox (рис. 3, б). Эти результаты свидетельствуют о том, что Deferasirox индуцирует апоптоз, ингибирует отдаленные метастазы, и подавляет с-Мус и MTOR путей.
Синергетический эффект Deferasirox и цисплатин
Чтобы оценить, может ли Deferasirox усилить эффект цисплатина, AGS клетки культивировали с или без цисплатина и их жизнеспособности определяли с помощью анализа МТТ. Лечение с цисплатином в течение 48 ч уменьшается количество жизнеспособных клеток, с IC <суб> 50 5-10 мкМ. Для того, чтобы определить, оказывает ли Deferasirox синергетический эффект с цисплатином, AGS клетки обрабатывали 0, 2,5, 5, 10, и 20 мкМ Deferasirox либо отдельно, либо в присутствии фиксированной концентрации цисплатина (5 мкМ) в течение 48 ч. Как показано на рис. 4а, б, клетки AGS, обработанные Deferasirox и цисплатина показали значительно большее снижение жизнеспособности клеток по сравнению с клетками, обработанными либо Deferasirox или цисплатин в одиночку (P
≪ 0,01). Эти результаты свидетельствуют о том, что Deferasirox усиливает цисплатин-опосредованного ингибирования роста AGS клеток. Инжир. 4 Синергетический эффект Deferasirox и цисплатин. a, b AGS клетки обрабатывали 0, 2,5, 5, 10, и 20 мкМ Deferasirox, либо отдельно, либо в присутствии фиксированной концентрации цисплатина (5 мкМ) в течение 48 ч. клетки AGS, обработанные Deferasirox и цисплатин показали значительное снижение жизнеспособности клеток по сравнению с клетки, обработанные либо Deferasirox или только цисплатин
Чтобы исследовать молекулярные механизмы, лежащие в основе этого эффекта, Вестерн-блот-анализ был использован для оценки уровней различных молекул в AGS клетки, обработанные Deferasirox (5 мкМ), цисплатин (5 мкМ), или обоих. Сочетание Deferasirox и цисплатина привело к повышающей регуляции NDRG1, p21 и p53. В отличие от этого, эта комбинация привела к понижающей регуляции фосфорно-МРМ, ферропортина, и про-каспазы 9. Эти данные позволяют предположить, что Deferasirox потенцирует противораковым действием цисплатина через различные пути (рис. 5). Инжир. 5 Молекулярные механизмы синергического эффекта. Вестерн-блот-анализ проводили с лизатов AGS клеток, обработанных Deferasirox (5 мкМ), цисплатин (5 мкМ), либо и в течение 24 ч. Сочетание Deferasirox и цисплатин индуцирует повышающую регуляцию NDRG1, р21 и р53, в дополнение к понижающей регуляции фосфорно-МРМ, ферропортина и про-каспазы 9
Обсуждение
В этом исследовании мы обнаружили, что Deferasirox ингибирует пролиферацию клеток рака желудка. Deferasirox также индуцируют G1 арест; апрегулируются p21, p27 и p53 экспрессии; и циклин D1 подавляют, циклин B и выражение CDK4. Deferasirox также индуцирует апоптоз, повышающей регуляции NDRG1 и подавляются п-МРМ и с-Мус. Эти результаты свидетельствуют о том, что Deferasirox оказывает противоопухолевые эффекты в желудочном опухолевых клеток с помощью различных путей. В частности, наши данные свидетельствуют о том, что Deferasirox изменяет метаболизм железа, тормозит прогрессирование клеточного цикла, влияет на передачу сигналов MTOR и метастазирование путей и индуцирует апоптоз. Кроме того, по-видимому, Deferasirox потенцировать антипролиферативное действие цисплатина в раковых клетках желудка.
Железо необходимо для выживания клеток, но и может привести к повреждение клеток путем генерации активных форм кислорода [14]. Хотя уровень внутриклеточного железа жестко регулируется в нормальных клетках, уровень внутриклеточного железа повышается в раковых клетках, из-за повышенной экспрессии TfR1 и гепсидина и снижением экспрессии ферропортина [3]. Поскольку избытка железа и отредактированного метаболизме железа может приводить к инициации опухоли и ее роста, железо энтеросорбенты, как полагают, перспективными противораковыми средствами. Несколько линий доказательств подтверждают идею, что железо энтеросорбенты являются потенциальными терапевтическими противоопухолевыми. Во-первых, повышение уровня внутриклеточного железа, как известно, способствуют синтезу ДНК. Поскольку железо имеет важное значение для активности рибонуклеотидредуктазы, ключевого фермента для синтеза ДНК, железо играет важную роль в пролиферации клеток [15]. Таким образом, увеличение железа требуется для увеличения рибонуклеотидредуктазы активности в опухолевые клетки. Во-вторых, дефицит железа может привести к G1 /S арест и индуцирует апоптоз [13]. Циклин D1 связывается с CDK4 и CDK6, что приводит к G1 /S прогрессии через фосфорилирование белка ретинобластомы (RB). Это фосфорилирование в свою очередь, приводит к высвобождению фактора транскрипции E2F из РБ. истощения запасов железа, как известно, уменьшить циклин D1 и экспрессию CDK. В-третьих, чрезмерная клеточная железа может управлять сигнальный путь Wnt, который, как известно, является важным для прогрессирования опухоли [16].
Мы провели это исследование, чтобы исследовать, оказывает ли Deferasirox противоопухолевые эффекты в контексте рака желудка. Мы выбрали Deferasirox из многочисленных коммерчески доступных энтеросорбенты железа из-за его пероральном доступности и относительно низкой токсичности. Хотя точные механизмы, с помощью которых Deferasirox оказывает свое действие противораковых все еще расследуется, мы предположили, что Deferasirox ингибирует ход клеточного цикла на основе предыдущих исследований [11, 17]. Мы обнаружили, что индуцированное Deferasirox G1 ареста повышающей регуляции p21 и p27 и downregulating циклин D1 и CDK4. Эти данные подтверждают нашу гипотезу о том, что Deferasirox оказывает свое анти-опухолевого воздействия путем регуляции клеточного цикла.
Хелаторов железа может индуцировать экспрессию NDRG1, известного метастатическим супрессора, в различных злокачественных опухолях человека [18-20]. Механизм, с помощью которого NDRG1 подавляет метастазирование В настоящее время неясно, хотя NDRG1 было показано, ингибирует миграцию клеток и инвазию путем модуляции экспрессии ряда молекул адгезии [21]. Выражение NDRG1 было показано, значительно ниже, в опухолевой ткани по сравнению с нормальной тканью; Кроме того, выражение NDRG1 было показано, что обратно коррелирует с метастазированием некоторых видов рака, таких как простаты и рак толстой кишки [22, 23]. Тем не менее, противоречивые результаты были получены в отношении возможной ассоциации NDRG1 прогрессированию опухоли. Интересно, что NDRG имеет подтвержденную роль в контроле клеточного цикла. В частности, выражение NDRG1 активируется посредством индукции р53, и NDRG1 может также вызвать G1 /S ареста повышающей регуляции р21 [24]. Мы обнаружили, что Deferasirox активирует уровни экспрессии NDRG1, P53 и P21. Несмотря на то, что мы не пробирной миграцию клеток или исследовать метастазирование в естественных условиях в настоящем исследовании, полученные данные свидетельствуют о том, что Deferasirox могут быть способны ингибировать рост опухоли и метастазирование. Мы предполагаем, что механизм, с помощью которого Deferasirox проявляет свои противоопухолевые эффекты могут включать NDRG1.
Deferasirox было показано, усиливает цитотоксическое действие цисплатина в пищеводе линиях раковых клеток. Кроме того, цисплатин-резистентный клетки, обработанные с низкой концентрацией Deferasirox (5 мкМ) в сочетании с цисплатином показало значительное снижение жизнеспособности клеток по сравнению с клетками, обработанными Deferasirox или цисплатин только [10]. Мы обнаружили, что сочетание Deferasirox (5 мкМ) и цисплатин (5 мкМ) вызывало значительное снижение жизнеспособности клеток. Кроме того, это комбинированное лечение привело к повышающей регуляции NDRG1, р21 и р53 и понижающей регуляции фосфорно-МРМ. Наши результаты, таким образом, предположить, что Deferasirox потенциально может усилить эффект противораковой цисплатина в желудочном раковых клеток. Кроме того, р53-NDRG1-p21 и MTOR пути могут быть вовлечены в синергического эффекта Deferasirox с цисплатином.
Это исследование было иметь ряд ограничений. Во-первых, мы ограничили наше исследование желудочной линий раковых клеток и не проводили никаких экспериментов в естественных условиях. Кроме того, экспрессия белков клеточного цикла, связанных оценивали только с помощью вестерн-блоттинга. Более подробная информация может быть получена с помощью иммунопреципитации и киназы анализов. Для того, чтобы определить эффект противоопухолевый Deferasirox, будут необходимы дополнительные эксперименты, включая исследования в естественных условиях. Тем не менее, это первое исследование, чтобы исследовать противоопухолевые эффекты Deferasirox против рака желудка.
Выводы
В заключение, мы обнаружили, что Deferasirox индуцированное противоопухолевые эффекты в желудочном опухолевых клеток с помощью различных путей. В частности, Deferasirox повышающей регуляции NDRG1, прогрессирование тормозится клеточного цикла, подавляются MTOR и с-Мус выражение, и индуцированный апоптоз. Кроме того, Deferasirox потенцируют противораковым действием цисплатина. Хотя эффективность Deferasirox должна быть подтверждена в будущих исследованиях, наши результаты показывают, что Deferasirox является перспективным противораковым терапевтическим средством, а также может быть эффективной химиотерапии сенсибилизирующим.
Заявления
Благодарности
Эта работа была поддержана . исследовательский фонд Ханьянг университета (HY-2013-MC)
Open AccessThis статья распространяется в соответствии с условиями Creative Commons Attribution 4.0 License International (HTTP:. //CreativeCommons орг /лицензии /с /4. 0 /), что позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, вы даете соответствующий кредит с первоначальным автором (ами) и источник, обеспечить связь с лицензией Creative Commons, и указать, были внесены изменения. Посвящение отказ от права Creative Commons Public Domain (HTTP:. //CreativeCommons орг /общественное достояние /ноль /1. 0 /) применяется к данным, предоставляемым в этой статье, если не указано иное
Конкурирующие. интересы
авторы заявляют, что у них нет никаких конкурирующих интересов. вклады
Авторского
JC и участие YL в разработке и анализе настоящего исследования. JC написал бумагу. JK проведены молекулярные исследования. YW, JU, ВР внесла в составе бумаги. Все авторы прочитали и одобрили рукопись.

• Сопутствующая композит надпочечниковой феохромоцитома, множественные опухоли желудка стромы и псевдогерма…
• Iris метастаз аденокарциномы желудка