El potencial de deferasirox como una novela modalidad terapéutica en el cáncer gástrico

El potencial de deferasirox como una novela modalidad terapéutica en el cáncer gástrico
Resumen Antecedentes

El hierro es un elemento crucial para la proliferación celular, el crecimiento y el metabolismo. Sin embargo, el exceso de hierro y una alteración del metabolismo del hierro se asocian con la iniciación del tumor y el crecimiento tumoral. Deferasirox es un quelante de hierro oral. Aunque algunos estudios han indicado que el deferasirox es un candidato prometedor para las terapias contra el cáncer, su eficacia contra el cáncer gástrico aún no ha sido determinada. Este estudio se realizó para determinar si deferasirox ejerce efectos antitumorales en líneas celulares de cáncer gástrico y si deferasirox y cisplatino actúan de forma sinérgica.
Métodos
cuatro líneas celulares de cáncer gástrico humano (AGS, MKN-28, SNU-484, y SNU-638) se trataron con varias concentraciones de deferasirox para determinar la IC 50 para cada línea celular. Los efectos de deferasirox sobre el ciclo celular se evaluaron por citometría de flujo, y los efectos de deferasirox en el metabolismo del hierro, el ciclo celular y la apoptosis se evaluó por transferencia Western. Para determinar si deferasirox aumenta el efecto de cisplatino, las células AGS se cultivaron en presencia y ausencia de cisplatino.
Resultados
Deferasirox inhibieron la proliferación de todas las líneas celulares de cáncer gástrico según la evaluación de ensayos de MTT. Dado que la IC 50 de deferasirox fue la más baja (por debajo de 10 mM) en las células AGS, los experimentos posteriores se realizaron en esta línea. Deferasirox upregulated receptor de transferrina 1 de expresión y la disminución de la expresión de la ferroportina. Por otra parte, el deferasirox inducida G1 detención; p21 regulada al alza, p27, p53 y expresión; y ciclina D1 downregulated, ciclina B, y la expresión de CDK4. Por otra parte, la apoptosis inducida deferasirox, upregulated N-myc
aguas abajo de genes regulados 1 (NDRG1), y downregulated p-mTOR y la expresión de c-myc. Se encontró también para actuar sinérgicamente con cisplatino.
Conclusiones
Nuestros resultados sugieren que deferasirox puede ejercer efectos anti-tumorales en el contexto de cáncer gástrico. Deferasirox afecta a un número de diferentes vías y moléculas; por ejemplo, deferasirox upregulates expresión NDRG1, inhibe el ciclo celular, regula a la baja mTOR y c-myc expresión, e induce la apoptosis. Además, el deferasirox parece potenciar los efectos anticancerígenos de cisplatino. Aunque la eficacia de deferasirox aún no se ha probado en estudios futuros, los resultados presentados aquí indican que deferasirox es un agente terapéutico novedoso contra el cáncer prometedor.
Palabras clave
deferasirox estómago neoplasia cisplatino Antecedentes
El cáncer gástrico es una de las principales causas de muerte por cáncer en Corea [1]. Aunque los pacientes con cáncer gástrico muestran excelentes resultados si el cáncer se detecta temprano, el cáncer gástrico avanzado inoperable y recurrentes permanecen asociados a bajas tasas de supervivencia. En las últimas décadas, las mejoras sustanciales en los agentes quimioterapéuticos han mejorado la supervivencia en el cáncer gástrico avanzado. Recientemente, la supervivencia global se prolongó significativamente en pacientes con cáncer avanzado de unión gástrica o gastro-esofágico HER2 positivo por tratamiento con trastuzumab (HER-2 anticuerpo monoclonal) en combinación con la quimioterapia convencional [2]. Sin embargo, la supervivencia global fue de sólo el 13,8 meses. Por lo tanto, se necesitan urgentemente nuevos agentes.
El hierro es un elemento esencial para la proliferación celular, el crecimiento y el metabolismo. Sin embargo, el exceso de hierro y la alteración del metabolismo del hierro se han asociado con la iniciación del tumor y el crecimiento del tumor [3]. Los estudios epidemiológicos han puesto de manifiesto que un alto consumo de hierro está asociada con un mayor riesgo de cáncer colorrectal [4]. Muchas células cancerosas alteran el metabolismo del hierro, porque las células malignas requieren más hierro que las células normales. Para aumentar la piscina de hierro lábil, las células cancerosas se han demostrado para regular positivamente la expresión del receptor de transferrina 1 (TFR1) y la hepcidina, además de la regulación negativa de la expresión ferroportina [3].
Deferasirox (Exjade®), un hierro tridentado oral ( Fe 3+) quelante, se absorbe rápidamente en el intestino y tiene una vida media relativamente larga (8 a 16 h). Por lo tanto, una dosis diaria puede alcanzar niveles sostenidos de drogas que circulan suficientes para la compactación de hierro en plasma no unido a la transferrina. Aunque deferasirox se ha asociado con algunos efectos adversos tales como trastornos gastrointestinales, erupciones en la piel, y la toxicidad renal, que está relativamente bien tolerado. Por lo tanto, deferasirox es actualmente el agente quelante del hierro más comúnmente utilizado para el tratamiento de enfermedad por sobrecarga de hierro [5].
Recientemente, varios estudios han investigado el potencial de deferasirox como un agente anti-neoplásico. Deferasirox se ha informado que inhiben la actividad de NF-kappa B en muestras de sangre de pacientes con síndrome mielodisplásico y en células de leucemia líneas [6]; Por otra parte, deferasirox también fue demostrado que reprimir la vía de mTOR en células de leucemia mieloide [7]. En cuanto a los datos clínicos, un caso clínico mostró que el tratamiento con deferasirox logró una remisión completa en pacientes con leucemia monocítica aguda refractaria a la quimioterapia [8]. Además, el análisis post hoc de un ensayo multicéntrico reveló que deferasirox mejoró los parámetros hematológicos en pacientes con síndrome mielodisplásico [9]. En la actualidad, la mayoría de los informes de deferasirox como un agente anti-neoplásica han estado en malignidades hematológicas; sólo unos pocos estudios se han centrado en los tumores sólidos. Recientemente, deferasirox ha demostrado inhibir el crecimiento de células de pulmón y cáncer de esófago tanto in vitro como in vivo [10, 11]. Sin embargo, el efecto de deferasirox con cáncer gástrico ha no se ha determinado, y el mecanismo por el cual el deferasirox ejerce sus efectos antitumorales sigue siendo poco conocida. Por lo tanto, este estudio se realizó para investigar si deferasirox ejerce efectos antitumorales en líneas celulares de cáncer gástrico y también si deferasirox actúa sinérgicamente con cisplatino.
Métodos Cell Cultura y
Cuatro líneas celulares de cáncer gástrico humano (AGS, MKN-28, SNU-484, y SNU-638) se obtuvieron de la célula de Corea Line Bank. Todas las células se cultivaron en RPMI 1640 que contiene 10% de suero y antibióticos fetal bovino (100 U /ml de penicilina y 100 g /ml de estreptomicina) en una atmósfera humidificada 5% de CO 2 incubadora a 37 ° C.
Reactivos y anticuerpos
deferasirox (Exjade®) fue donado por Novartis (Basilea, Suiza). Policlonal de cabra anti-NDRG1 (N-myc
gen regulado aguas abajo 1) (catálogo no. Ab37897) y policlonal de conejo anti-ferroportina (catálogo no. Ab85370) anticuerpos fueron adquiridos de Abcam (Cambridge, UK). Los anticuerpos monoclonales anti-TFR1 ratón (nº de catálogo. 136800) se obtuvieron de Life Technologies (Carlsbad, CA, EE.UU.), y FeSO 4 se adquirió de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EE.UU.). Anti-p53, anti-p27, p21, ciclina A, ciclina B, ciclina D1, ciclina E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspasa 3, y los anticuerpos BAX se compraron desde Santa Cruz de Biotecnología (Santa Cruz, CA, EE.UU.). Anti-p-mTOR y pro-caspasa 8 anticuerpos se obtuvieron de Señalización Celular Tecnología (Beverly, MA, EE.UU.). Ensayo de inhibición del crecimiento
La inhibición del crecimiento
se midió con MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-il] -2,5-difeniltetrazolio) tal como se describe anteriormente [12]. Brevemente, se sembraron células (2 × 10 3 células /pocillo) en placas de 96 pocillos de microtitulación (Nunc, Roskilde, Dinamarca) y se incubaron a 37 ° C durante 24, 48, o 72 h. solución MTT (50 l) de Sigma (/ml en PBS 2 mg) se añadió a cada pocillo, y las placas se incubaron durante 4 h más a 37 ° C. Después de esta incubación, la solución de MTT se aspiró. Para solubilizar los cristales de formazán formados en células viables, se añadieron 200 l de DMSO a cada pocillo. Las placas se agitaron durante 30 min a temperatura ambiente, y la absorbancia de cada pocillo a 595 nm se leyó inmediatamente con un espectrofotómetro de barrido multipocillo (Bio-Rad, lector de microplacas iMarkTM).
A determinar la concentración de deferasirox requerida para matar 50% de las células (IC 50), AGS, MKN-28, SNU-484, y SNU-638 células fueron tratadas con 0, 1, 10, 50, y 100 mM de deferasirox para 24, 48, y 72 h. Estos resultados se utilizaron para seleccionar la línea celular gástrica con la mayor sensibilidad al deferasirox para todos los experimentos posteriores.
Análisis del ciclo celular
Después de 24 h de incubación de las células AGS con 0, 10, y 100 M de deferasirox a 37 ° C, las células se lavaron dos veces con PBS, se fijaron durante la noche con 70% de etanol, se lavó con PBS, y se tiñeron con 50 mg /ml de yoduro de propidio (PI) que contiene RNasa a a 50 mg /ml. El contenido de ADN de las células (10.000 células /grupo experimental) se analizaron mediante un citómetro de flujo FACSCanto II (Becton Dickinson, San Jose, CA, EE.UU.) equipado con el software BD FACSDivaTM (v6.1.3). Los porcentajes de las poblaciones de células en cada fase del ciclo celular (G1, S, o G2 /M) se calcularon a partir de los histogramas de contenido de ADN.
Análisis de transferencia de Western
células AGS se incubaron con 0, 10 y 100 mM de deferasirox a 37 ° C durante 24 h. Las células se lavaron con PBS, se resuspendieron en tampón de lisis [Tris 50 mM (pH 7,5), 1% NP-40, EDTA 2 mM, NaCl 10 mM, 20 mg /ml de aprotinina, 20 mg /ml de leupeptina, y 1 de fenilmetilsulfonilo mM fluoruro], y se coloca en hielo durante 20 min. Las proteínas en los lisados ​​(20-30 g) se resolvieron en 10 a 15% en geles desnaturalizantes de poliacrilamida-SDS y se transfirieron a membranas de nitrocelulosa durante 90-120 min. sitios de unión no específicos se bloquearon con leche desnatada al 5% durante 1 h, y las membranas se incubaron durante la noche con anticuerpos primarios (todos a una dilución 1: 1000). Los anticuerpos y los procesos relacionados que se utilizaron para investigar fueron los siguientes: anti-TFR1 y anti-ferroportina para el metabolismo del hierro; anti-p53, p27, p21, ciclina A, ciclina B, ciclina D1, ciclina E, CDK2, CDK4, CDK6 y para el ciclo celular; anti-pro-caspasa 3, la procaspasa 8, procaspasa 9, y BAX para la apoptosis; anti-NDRG1 para la metástasis; y anti-p-mTOR y c-myc. Las bandas inmunorreactivas se visualizaron con un kit ECL (Intron, Corea).
El análisis estadístico
Los datos se presentan como medias ± SEM (barras de error). Las diferencias se analizaron con la t de Student
. P
valores. ≪ 0,05 se consideraron estadísticamente significativos
Resultados
Efecto de deferasirox en el crecimiento de líneas celulares de cáncer gástrico México La capacidad de deferasirox para inhibir el crecimiento de las cuatro líneas celulares de cáncer gástrico se determinado por un ensayo de proliferación de MTT. AGS, MKN-28, SNU-484, y SNU-638 células se incubaron con 0, 1, 10, 50, y 100 mM deferasirox a 37 ° C durante 24, 48, o 72 h. Deferasirox inhibió el crecimiento de las cuatro líneas celulares de cáncer gástrico de una manera dependiente del tiempo y dependiente de la dosis (Fig. 1a). Dado que la IC 50 de deferasirox a las 72 h fue la más baja en las células AGS (menos de 10 m), todos los experimentos posteriores se realizaron con estas células. Higo. 1 Efecto inhibidor de deferasirox en el crecimiento de líneas celulares de cáncer gástrico. una viabilidad celular se midió por el ensayo MTT. AGS, MKN-28, SNU-484, y SNU-638 células se incubaron con 0, 1, 10, 50, y 100 mM de deferasirox a 37 ° C durante 24, 48, o 72 h. tratamiento Deferasirox resultó en la inhibición del crecimiento dependiente de la dosis y dependiente del tiempo en las cuatro líneas celulares de cáncer gástrico. b células AGS se cultivaron con 10 y 20 M de deferasirox ya sea solo o en presencia de FeSO4 (100 mM) durante 48 h. El efecto inhibidor de deferasirox se invirtió por el suplemento FeSO4
células AGS se cultivaron con 10 y 20 M de deferasirox ya sea solo o en presencia de FeSO 4 (100 mM) durante 48 h. El efecto inhibidor de deferasirox fue revertida por FeSO 4 suplemento (Fig. 1b).
Análisis del ciclo celular en células AGS
agotamiento de hierro induce la detención G1 /S al afectar a la expresión de moléculas críticas para la progresión del ciclo celular tales como la ciclina D1 y p21 [13]. Los efectos de deferasirox sobre el ciclo celular se determinaron por clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) utilizando yoduro de propidio. células AGS se incubaron con 0, 10, y 100 mM de deferasirox a 37 ° C durante 24 h. Como se muestra en la Fig. 2a, el tratamiento de células AGS con deferasirox durante 24 h dio lugar a una acumulación de células en la fase G1 de una manera dependiente de la dosis (41,8% a 0 M, 53,7% a los 10 m, y 77,2% a 100 mM). Este resultado indica que el deferasirox induce la detención G1. Western blot de las proteínas relacionadas con el ciclo celular mostró que el deferasirox indujo la regulación al alza de p21, p27, y p53, y la regulación a la baja de la ciclina D1, ciclina B y CDK4 (Fig. 2b). Estos resultados sugieren que el efecto anti-proliferativo de deferasirox es debido a la inhibición del ciclo celular. Higo. 2 Efecto de deferasirox en la progresión del ciclo celular en células AGS. a células AGS se incubaron con 0, 10, y 100 mM de deferasirox a 37 ° C durante 24 h. la progresión del ciclo celular se analizó por FACS. tratamiento Deferasirox durante 24 h dio lugar a una acumulación dependiente de la dosis de las células AGS en fase G1 (41,8% a 0 M, 53,7% a los 10 m, y 77,2% a 100 mM). b Western blot de las moléculas relacionadas con el ciclo celular mostró que el deferasirox p21, p27 upregulated y downregulated p53 y ciclina D1, ciclina B y CDK4
Efecto de deferasirox en el metabolismo del hierro y otras vías Opiniones sobre la absorción de hierro en el célula, que circulan complejos de hierro-transferrina se unen al receptor de la superficie celular TFR1. Hierro sale por la ferroportina, una bomba de salida de hierro que está regulado por la hepcidina. En las células cancerosas, y TFR1 hepcidina han demostrado ser upregulated y ferroportina es downregulated, que conducen de forma acumulativa a mayores concentraciones de hierro intracelular [3]. El efecto de deferasirox en el metabolismo del hierro se evaluó mediante análisis de transferencia Western de TFR1 y ferroportina. El nivel de TFR1 aumentó después de 24 h de tratamiento con deferasirox. En contraste, la expresión ferroportina disminuyó (Fig. 3a). Estos resultados son consistentes con los de estudios anteriores [10, 11]. Higo. 3 Efecto de deferasirox en el metabolismo del hierro y otras vías. Un tratamiento con deferasirox durante 24 h dio lugar a un aumento del nivel de TFR1 y una disminución del nivel de ferroportina. b deferasirox la apoptosis inducida también, upregulated NDRG1 y downregulated p-mTOR y c-myc como se evaluó mediante análisis de transferencia Western
Los efectos de deferasirox en la apoptosis se evaluó por FACS próxima y Western blot de las proteínas relacionadas con la apoptosis. Como se muestra en la Fig. 2a, las células AGS tratados con deferasirox durante 24 h mostraron una acumulación de células en sub-G1 (apoptótico) fase (3,2% a 0 M, 3,3% a 10 m, y 9,5% a 100 mM). Por otra parte, el tratamiento deferasirox disminuyó la expresión de pro-caspasa 3, pro-caspasa 8 y caspasa-9 Pro y el aumento de la expresión de BAX (Fig. 3b). NDRG1 es conocido por ser un supresor del crecimiento celular y la metástasis. Deferasirox aumentó el nivel de NDRG1. Además, c-myc y la expresión de fosfo-mTOR se redujeron después de 24 h de tratamiento con deferasirox (Fig. 3b). Estos resultados sugieren que el deferasirox induce la apoptosis, inhibe la metástasis a distancia, y suprime las vías de c-myc y mTOR.
Efecto sinérgico de deferasirox y cisplatino
Para evaluar si deferasirox podría aumentar el efecto de cisplatino, las células fueron cultivadas con AGS o sin cisplatino y su viabilidad se determinó utilizando el ensayo de MTT. El tratamiento con cisplatino durante 48 h redujo el número de células viables, con una CI 50 de 5 a 10 mM. Para determinar si deferasirox ejerce un efecto sinérgico con cisplatino, las células AGS se trataron con 0, 2,5, 5, 10, y 20 mM de deferasirox ya sea solo o en presencia de una concentración fija de cisplatino (5 M) durante 48 h. Como se muestra en la Fig. 4a, b, las células AGS tratados con deferasirox y cisplatino mostró una significativamente mayor disminución de la viabilidad celular en comparación con las células tratadas con cualquiera de deferasirox o cisplatino solo (P
< 0,01). Estos resultados sugieren que deferasirox aumenta la inhibición mediada por cisplatino del crecimiento de células AGS. Higo. 4 Efecto sinérgico de deferasirox y cisplatino. a, células AGS B fueron tratados con 0, 2,5, 5, 10, y 20 mM de deferasirox, ya sea solo o en presencia de una concentración fija de cisplatino (5 M) durante 48 h. células AGS tratados con deferasirox y cisplatino mostraron una disminución significativa de la viabilidad celular en comparación con las células tratadas con cualquiera de deferasirox o cisplatino solo
Para investigar los mecanismos moleculares que subyacen a este efecto, se utilizó el análisis de transferencia Western para evaluar los niveles de varias moléculas en AGS las células tratadas con deferasirox (5 mM), cisplatino (5 mM), o ambos. La combinación de deferasirox y cisplatino resultó en la regulación positiva de NDRG1, p21, y p53. Por el contrario, esta combinación dio lugar a la regulación a la baja de fosfo-mTOR, ferroportina, y pro-caspasa 9. Estos hallazgos sugieren que el deferasirox potencia los efectos anticancerígenos de cisplatino a través de varias vías (Fig. 5). Higo. 5 Mecanismos moleculares de efecto sinérgico. El análisis de transferencia Western se realizó con lisados ​​de células AGS tratados con deferasirox (5 mM), cisplatino (5 mM), o ambos para 24 h. La combinación de deferasirox y cisplatino indujo la regulación al alza de NDRG1, p21, p53 y, además de la regulación a la baja de fosfo-mTOR, ferroportina, y procaspasa 9
Discusión
En este estudio, hemos encontrado que inhibe deferasirox la proliferación de células de cáncer gástrico. Deferasirox también fue encontrado para inducir la detención G1; regular al alza de p21, p27, p53 y expresión; y regular a la baja la ciclina D1, ciclina B, y la expresión de CDK4. Deferasirox también indujo la apoptosis, NDRG1 upregulated y downregulated p-mTOR y c-myc. Estos resultados sugieren que deferasirox ejerce efectos anti-tumorales en células de cáncer gástrico a través de diversas vías. Específicamente, nuestros datos indican que deferasirox altera el metabolismo del hierro, inhibe la progresión del ciclo celular, afecta a la señalización de mTOR y las vías de la metástasis, e induce la apoptosis. Además, deferasirox parece potenciar el efecto anti-proliferativo de cisplatino en células de cáncer de estómago.
El hierro es esencial para la supervivencia celular, pero también puede causar el daño celular mediante la generación de especies reactivas de oxígeno [14]. Aunque el nivel de hierro intracelular está estrechamente regulada en las células normales, el nivel de hierro intracelular es elevado en las células de cáncer debido a una mayor expresión de TFR1 y la hepcidina y la reducción de expresión de ferroportina [3]. Dado que el exceso de hierro y la alteración del metabolismo de hierro puede conducir a la iniciación del tumor y el crecimiento, se cree que los quelantes del hierro a ser prometedores agentes anti-cáncer. Varias líneas de evidencia apoyan la idea de que los quelantes de hierro son potenciales agentes terapéuticos anti-tumorales. En primer lugar, se sabe que el aumento de los niveles de hierro intracelular para promover la síntesis de ADN. Puesto que el hierro es esencial para la actividad de la ribonucleótido reductasa, una enzima clave para la síntesis de ADN, el hierro juega un papel importante en la proliferación celular [15]. Por lo tanto, se requiere una mayor hierro para aumentar la actividad de la ribonucleótido reductasa en células neoplásicas. En segundo lugar, el agotamiento de hierro puede causar G1 detención /S e inducir la apoptosis [13]. Ciclina D1 se une a CDK4 y CDK6, lo que resulta en G1 /S progresión a través de la fosforilación de la proteína retinoblastoma (RB). Esta fosforilación su vez resulta en la liberación del factor de transcripción E2F de RB. agotamiento de hierro se conoce para disminuir la ciclina D1 y la expresión de CDK. En tercer lugar, el hierro celular excesiva puede conducir la vía de señalización Wnt, que se sabe que es importante para la progresión del tumor [16].
Se realizó este estudio para investigar si deferasirox ejerce efectos anti-tumorales en el contexto de cáncer gástrico. Elegimos deferasirox de los numerosos quelantes de hierro disponibles comercialmente debido a su disponibilidad oral y toxicidad relativamente baja. Aunque los mecanismos precisos por los cuales deferasirox ejerce sus efectos contra el cáncer aún están siendo investigadas, la hipótesis de que el deferasirox inhibe la progresión del ciclo celular en base a estudios anteriores [11, 17]. Se encontró que el deferasirox inducida G1 detención por la regulación positiva de p21 y p27 y la regulación negativa de la ciclina D1 y CDK4. Estos resultados apoyan nuestra hipótesis de que deferasirox ejerce sus efectos antineoplásicos por la regulación de la progresión del ciclo celular.
Quelantes de hierro puede inducir la expresión de NDRG1, un supresor metastásico conocido, en una variedad de cánceres humanos [18-20]. El mecanismo por el cual NDRG1 suprime la metástasis es claro, actualmente, aunque NDRG1 se ha demostrado para inhibir la migración celular y la invasión por la modulación de la expresión de un número de moléculas de adhesión [21]. expresión NDRG1 ha demostrado ser significativamente menor en el tejido canceroso en comparación con el tejido normal adyacente; Además, la expresión NDRG1 se ha demostrado que se correlaciona inversamente con la metástasis de algunos tipos de cáncer, tales como la próstata y el cáncer de colon [22, 23]. Sin embargo, los resultados discrepantes se han obtenido con respecto a una posible asociación de NDRG1 con la progresión tumoral. Curiosamente, NDRG tiene un papel demostrado en el control del ciclo celular. Específicamente, la expresión NDRG1 es upregulated través de la inducción mediada por p53, y NDRG1 también puede inducir G1 /S detención por la regulación positiva de p21 [24]. Se encontró que deferasirox regula por incremento los niveles de expresión de NDRG1, p53, y p21. Aunque no nos ensayo de migración celular o investigar metástasis in vivo en el presente estudio, nuestros resultados sugieren que el deferasirox puede ser capaz de inhibir el crecimiento tumoral y la metástasis. Nuestra hipótesis es que el mecanismo por el cual el deferasirox ejerce sus efectos antitumorales puede implicar NDRG1.
Deferasirox se ha demostrado para mejorar el efecto citotóxico de cisplatino en líneas celulares de cáncer de esófago. Además, las células resistentes al cisplatino tratados con una baja concentración de deferasirox (5 M) en combinación con cisplatino mostraron una reducción significativa en la viabilidad celular en comparación con las células tratadas con deferasirox o cisplatino solo [10]. Hemos encontrado que la combinación de deferasirox (5 M) y cisplatino (5 M) indujo una disminución significativa de la viabilidad celular. Por otra parte, este tratamiento combinado dio lugar a la regulación al alza de NDRG1, p21 y p53 y la regulación a la baja de fosfo-mTOR. Nuestros resultados, por lo tanto, sugieren que deferasirox potencialmente puede mejorar el efecto anti-cáncer de cisplatino en células de cáncer gástrico. Por otra parte, las vías de p53-p21 y NDRG1-mTOR pueden estar implicados en el efecto sinérgico de deferasirox con cisplatino.
Este estudio tiene varias limitaciones. En primer lugar, hemos restringido nuestro estudio de líneas celulares de cáncer gástrico y no se realizó ningún experimento in vivo. Además, la expresión de proteínas relacionadas con el ciclo celular se evaluó solamente por transferencia Western. Más información detallada podría haber sido obtenida mediante ensayos de inmunoprecipitación y quinasa. Para determinar el efecto antitumoral de deferasirox, serían necesarios experimentos adicionales, incluyendo el estudio in vivo. Sin embargo, este es el primer estudio para investigar los efectos antitumorales de deferasirox contra el cáncer gástrico.
Conclusiones
En conclusión, hemos encontrado que deferasirox inducida efectos antitumorales en células de cáncer gástrico a través de diversas vías. Específicamente, deferasirox upregulated NDRG1, progresión del ciclo celular inhibida, downregulated mTOR y la expresión de c-myc, y la apoptosis inducida. Por otra parte, el deferasirox potenció los efectos anticancerígenos de cisplatino. Aunque la eficacia de deferasirox debe confirmarse en futuros estudios, nuestros resultados indican que el deferasirox es un agente terapéutico contra el cáncer prometedor y puede ser también un sensibilizador de quimioterapia eficaz.
Declaraciones
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por . el fondo de investigación de la Universidad de Hanyang (HY-2013-MC) logo articles abierto AccessThis se distribuye bajo los términos de la licencia Creative Commons Reconocimiento 4.0 Licencia Internacional (http:. //creativecommons org /licencias /por /4. 0 /), que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que se dé el crédito correspondiente al autor original (s) y la fuente, proporcionar un enlace a la licencia Creative Commons, e indicar si se hicieron cambios. La renuncia Creative Commons Public Domain Dedication (http:. //Creativecommons org /publicdomain /cero /1 0 /) se aplica a los datos facilitados en este artículo, a menos que se indique lo contrario
de la competencia. los intereses
autores declaran que no tienen intereses en competencia.
contribuciones de los autores
JC y YL participaron en el diseño y análisis de la presente investigación. JC escribió el documento. JK llevó a cabo los estudios moleculares. YW, JU, BP contribuyó en la composición del papel. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito.

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