A potenciális deferazirox mint új terápiás lehetőség a gyomor cancer

potenciális deferazirox mint új terápiás lehetőség a gyomorrák katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa vas létfontosságú elem sejtburjánzást, a növekedés és az anyagcserét. Azonban a felesleges vasat, és megváltozott vasanyagcsere egyaránt összefügg a tumor kialakulása és a tumor növekedését. Deferazirox orális vaskelátor. Bár egyes tanulmányok azt mutatták, hogy deferaziroxra ígéretes jelölt rákellenes terápiák hatékonyságát ellen gyomorrák még nem határozták meg. Ezt a vizsgálatot végeztek annak megállapítására, hogy deferaziroxra fejt ki tumorellenes hatást gyomor rákos sejtvonalban, és hogy deferasirox és ciszplatin szinergetikusan.
Módszerek
négy humán gyomor rákos sejtvonalak (AGS, MKN-28, SNU-484, és SNU-638) kezeltük különböző koncentrációkban deferazirox hogy meghatározzák az IC 50 az egyes sejtvonalak. A hatások a deferazirox a sejtciklus értékeltük áramlási citometriával, és a hatása a deferazirox vas anyagcsere, a sejtciklus és apoptózis értékelték Western-blottal. Annak meghatározására, hogy deferaziroxra fokozza a hatását a ciszplatin, AGS sejteket jelenlétében és hiányában a ciszplatin.
Eredmények
Deferazirox gátolta a proliferációt az összes gyomor rákos sejtvonalak által felmért MTT assay. Mivel az IC 50 deferazirox volt a legalacsonyabb (10 mikrométer alatti) Az AGS sejtek ezt követő kísérleteket végeztünk ebben a sorban. Deferazirox serkentett transzferrin receptor 1 expressziót és csökkent ferroportin kifejezést. Sőt, deferasirox indukált G1; serkentett p21, p27 és p53 expresszió; és downregulált ciklin D1 ciklin B és CDK4 kifejezés. Továbbá deferasirox által indukált apoptózis, serkentett N-myc
downstream szabályozott gén 1 (NDRG1) és downregulált p-mTOR és a c-myc expresszió. Azt is megállapították, hogy szinergetikusan ciszplatinnal.
Következtetések
Eredményeink azt sugallják, hogy a deferazirox fejthet tumorellenes hatások összefüggésben gyomorrák. Deferazirox befolyásolja számos különböző utak és molekulák; például deferasirox upregulálja NDRG1 kifejezés, gátolja a sejtciklus, gátló módon szabályozza az mTOR és c-myc expresszió, és apoptózist indukál. Ezen túlmenően, deferazirox úgy tűnik, hogy potencírozzák rákellenes hatását a ciszplatin. Bár a hatékonyságát deferasirox továbbra is tesztelni kell a jövőbeli vizsgálatokban, az itt bemutatott eredmények azt jelzik, hogy deferaziroxra ígéretes daganatellenes terápiás szer. Katalógusa Kulcsszavak katalógusa Deferazirox Gyomor daganata Cisplatin Háttér katalógusa Gyomorrák egyike a vezető oka a rák összefüggő halálesetek Koreában [1]. Bár gyomorrákos betegeknél mutatják kiváló eredményeket, ha a rák korai észlelése, működésképtelen haladó és visszatérő gyomorrák még mindig jár a rossz túlélési arány. Az elmúlt néhány évtizedben jelentős javulást kemoterápiás szer javította a túlélést előrehaladott gyomorrákban. A közelmúltban, a teljes túlélés szignifikánsan meghosszabbította betegekben a HER2-pozitív előrehaladott gyomorrák vagy gyomor-nyelőcső csomópont rák kezelve trastuzumab (HER-2 monoklonális antitest) kombinálva hagyományos kemoterápiával [2]. Azonban a teljes túlélés csak 13,8 hónap. Ezért új szerekre van sürgősen szükség.
A vas létfontosságú elem sejtburjánzást, a növekedés és az anyagcserét. Azonban, a felesleges vas és megváltozott vasanyagcsere összefüggésbe hoztak tumor iniciációs és a tumor növekedését [3]. Az epidemiológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a magas vas-bevitel jár fokozott kockázata a colorectalis rák [4]. Sok rákos sejtek megváltoztatják vas anyagcsere mert rosszindulatú sejtek igényelnek több vas, mint a normál sejtekben. Ahhoz, hogy növelje a labilis vas medence, a rákos sejtek kimutatták, hogy upregulate expressziójának transzferrin receptor 1 (TFR1) és hepcidin, továbbá a mTOR gátlása miatt csökken ferroportin kifejezés [3].
Deferazirox (Exjade®), egy orális háromfogú vas ( Fe 3+) kelátképzőt, gyorsan felszívódik a bélből, és van egy viszonylag hosszú felezési idő (8-16 óra). Így a napi egyszeri adagolási lehet elérni tartós keringő gyógyszer szintje elegendő az oxigénelnyelő a nem transzferrin-kötött plazma vas. Bár a deferazirox kapcsolatba hozható bizonyos káros hatásokat, mint például a gyomor-bél zavarok, bőrkiütés, és a vese toxicitás, akkor viszonylag jól tolerálható. Ezért deferasirox jelenleg a leggyakrabban használt vaskelációs kezelésére vastúlterhelés betegség [5].
Nemrégiben több tanulmány vizsgálta a potenciális deferazirox mint egy anti-neoplasztikus ágens. Deferazirox leírták, hogy gátolják az NF-kB aktivitását a vérben betegektől származó mintákban, myelodysplasiás szindróma és a leukémia sejtvonalak; [6] Sőt, deferasirox is kimutatták, hogy elnyomják a mTOR-útvonal a myeloid leukémiás sejtekben [7]. Ami a klinikai adatok, egy esetben a jelentés kimutatta, hogy deferaziroxra kezelés teljes remissziót betegeknél kemoterápiára nem reagáló akut monocitás leukémia [8]. Továbbá, post hoc elemzés egy multicentrikus vizsgálat során kiderült, hogy deferaziroxra javult a hematológiai paramétereket myelodysplasiában [9]. Jelenleg a legtöbb jelentések deferazirox mint egy anti-neoplasztikus ágens már hematológiai rosszindulatú betegségek; csak néhány tanulmány középpontjában a szilárd daganatok. Nemrégiben deferazirox kimutatták, hogy gátolja a növekedést a tüdő és a nyelőcső rákos sejtek in vitro és in vivo körülmények között [10, 11]. A hatás azonban a deferazirox a gyomorrák még nem határozták meg, és a mechanizmus, amellyel deferaziroxra kifejti daganatellenes hatása is kevéssé ismertek. Ezért ezt a vizsgálatot, hogy vizsgálja meg, hogy deferaziroxra fejti tumorellenes hatását a gyomor rákos sejtvonalak, valamint, hogy deferasirox működik szinergikusan ciszplatinnal. Katalógusa Methods katalógusa Sejttenyésztés katalógusa négy humán gyomor rákos sejtvonalak (AGS, MKN-28, SNU-484, és SNU-638) nyertük ki a koreai sejtvonal Bank. Minden sejteket tenyésztettünk RPMI 1640 közegben, amely 10% magzati borjúszérumot és antibiotikumokat (100 U /ml penicillint és 100 ng /ml sztreptomicin), párásított 5% -os CO 2 inkubátorban 37 ° C-on.
Reagensek és antitestek katalógusa deferazirox (Exjade®) adományozta Novartis (Basel, Svájc). Kecske poliklonális anti-NDRG1 (N-myc
downstream szabályozott gén 1) (katalógusszám. Ab37897), és nyúl poliklonális anti-ferroportin (katalógusszám. Ab85370) antitestek vásároltunk a ABCAM (Cambridge, Egyesült Királyság). Anti-TFR1 egér monoklonális antitestek (katalógusszám. 136.800) szereztünk be a Life Technologies (Carlsbad, CA, USA), és FeSO 4 a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, ciklin A, ciklin B, a ciklin D1, ciklin E, CDK2, CDK4, CDK6, a c-myc, a pro-kaszpáz 3, és a bax antitesteket vásárolt a Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR és a pro-kaszpáz-8 antitesteket kapunk, a Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Növekedés gátlás vizsgálattal
Növekedés gátlás mértük MTT-t (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-il] -2,5-difenil-bromid) a korábban leírtak [12]. Röviden, a sejteket leoltottuk (2 × 10 3 sejt /mérőhely) 96-lyukú mikrotiter lemezeket (Nunc, Roskilde, Dánia), és inkubáljuk 37 ° C-on 24, 48, vagy 72 órán át. MTT-oldatot (50 ul) a Sigma (2 mg /ml PBS-ben) adunk az egyes lyukakhoz, és a lemezeket inkubáltuk további 4 órán át 37 ° C-on. Az inkubálás után az MTT-oldatot leszívtuk,. Szolubilizálására a formazán kristályokat képződött életképes sejteket 200 ul DMSO-t adunk az egyes lyukakhoz. A lemezeket rázatjuk 30 percig szobahőmérsékleten, és minden lyuk abszorbanciáját 595 nm-en olvastuk le azonnal egy pásztázó soklyukú spektrofotométerrel (Bio-Rad, iMarkTM microplate reader).
Koncentrációjának meghatározására deferazirox elpusztításához szükséges 50% -a sejtek (IC 50), AGS, MKN-28, SNU-484, és SNU-638 sejteket kezeltünk 0, 1, 10, 50, és 100 uM deferazirox 24, 48, és 72 órán át. Ezeket az eredményeket kiválasztásához használt a gyomor sejtvonal a legnagyobb érzékenység a deferazirox minden további kísérletekhez.
Cell cycle analysis
után 24 órás inkubálás AGS sejteket 0, 10, és 100 uM deferazirox 37 ° C-on, majd a sejteket kétszer mossuk PBS-sel, fix egy éjszakán át 70% -os etanollal, PBS-sel mostuk, és megfestettük 50 ug /ml propidium-jodid (PI) tartalmazó RNáz a 50 ng /ml. A DNS-t tartalmaz a sejteket (10000 sejt /kísérleti csoport) segítségével elemeztük egy FACSCanto II áramlási citométerrel (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) felszerelt BD FACSDivaTM szoftver (v6.1.3). A százalékokat a sejt populáció minden egyes sejtciklusban fázis (G1, S, vagy G2 /M) számítottuk ki a DNS-t tartalom hisztogramok.
Western blot analízis
AGS sejteket inkubáltunk 0, 10, és 100 uM deferazirox 37 ° C-on 24 órán át. A sejteket PBS-sel mostuk, újra szuszpendáljuk lízis-pufferben [50 mM Tris (pH = 7,5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCl-ot, 20 ng /ml aprotinin, 20 ng /ml leupeptin és 1 mM fenil-metil- fluorid], és jégre tettük 20 percig. Fehérjék a lizátumban (20-30 ng) megoldani 10-15% -os SDS-poliakrilamid denaturáló gélen, és nitrocellulóz membránokra visszük át 90-120 percig. A nemspecifikus kötőhelyeket blokkoltuk 5% lefölözött tej, 1 H és a membránokat azután éjszakán át inkubáltuk primer antitestekkel (összes 1: 1000 hígításban). Az antitestek és a kapcsolódó folyamatok, hogy használták, hogy vizsgálják az alábbiak voltak: anti-TFR1 és anti-ferroportin a vas anyagcsere; anti-p53, p27, p21, ciklin A, ciklin B, a ciklin D1, ciklin E, CDK2, CDK4 és CDK6 a sejtciklus; anti-pro-kaszpáz 3, pro-kaszpáz-8, pro-kaszpáz-9, és a Bax apoptózist; anti-NDRG1 számára metasztázis; és az anti-p-mTOR és a c-myc. Az immunreaktív sávokat láthatóvá tételéhez ECL készlet (intron, Korea).
Statisztikai analízis katalógusa Az adatokat átlag ± SEM (hibasávokat). Különbségek analizáltuk a Student-féle t
teszt. P
értékek < 0,05 tekintettük statisztikailag szignifikánsnak.
Eredménye
hatása deferazirox a növekedés gyomor rákos sejtvonalak
Az a képesség, deferazirox, hogy gátolja a növekedést a négy gyomor rákos sejtvonal volt határoztuk meg MTT proliferációs vizsgálati eljárásban. AGS, MKN-28, SNU-484, és SNU-638 sejteket inkubáltunk 0, 1, 10, 50, és 100 uM deferaziroxra 37 ° C-on 24, 48, vagy 72 órán át. Deferazirox gátolta a növekedést a mind a négy gyomor rákos sejtvonalak dózis-függő és időfüggő módon (1A.). Mivel az IC 50 deferazirox 72 h volt a legalacsonyabb AGS sejteket (kevesebb, mint 10 jiM), az összes ezt követő kísérleteket hajtottunk végre ezekben a sejtekben. Ábra. 1 gátló hatása deferazirox növekedésére gyomor rákos sejtvonalak. Cell életképesség mértük az MTT assay. AGS, MKN-28, SNU-484, és SNU-638 sejteket inkubáltunk 0, 1, 10, 50, és 100 uM deferazirox 37 ° C-on 24, 48, vagy 72 órán át. Deferazirox kezelés eredményezte dózisfüggő és időfüggő növekedés gátlás mind a négy gyomor rákos sejtvonalak. b AGS sejteket tenyésztettünk, 10 és 20 uM deferazirox önmagában vagy jelenlétében FeSO4 (100 jiM) 48 órán át. A gátló hatást a deferazirox megfordult FeSO4 kiegészítésében
AGS sejteket tenyésztettünk, 10 és 20 uM deferazirox önmagában vagy jelenlétében FeSO 4 (100 jiM) 48 órán át. A gátló hatása deferasirox megfordult FeSO 4-kiegészítő (ábra. 1b). Katalógusa sejtciklus analízis AGS sejtek katalógusa vashiányt indukál G1 /S letartóztatás érintő kifejezése kritikus molekulák sejtciklus mint például a ciklin D1 és a p21 [13]. A hatások a deferazirox a sejtciklus határoztuk meg fluoreszcencia-aktivált sejt (FACS) alkalmazásával propidium-jodid. AGS sejteket 0, 10, és 100 uM deferazirox 37 ° C-on 24 órán át. Ábrán látható. 2a, a kezelés a AGS sejtek deferaziroxra 24 órán felhalmozódásához vezetett a sejtek G1 fázisban dózis-függő módon (41,8% 0 uM, 53,7% 10 uM, és 77,2% 100 uM). Ez az eredmény azt jelzi, hogy deferaziroxra indukálja a G1. Western-blot analízis a sejtciklus-kapcsolatos fehérjék azt mutatta, hogy a deferazirox indukált az fokozza a p21, p27, és a p53, és a downregulációját ciklin D1, ciklin B, és CDK4 (ábra. 2b). Ezek az eredmények azt sugallják, hogy az anti-proliferatív hatása deferazirox annak köszönhető, hogy a sejtciklus gátlás. Ábra. 2 hatása deferasirox a sejtciklus AGS sejtekben. egy AGS sejteket 0, 10, és 100 uM deferazirox 37 ° C-on 24 órán át. Sejtciklus előrehaladását elemeztük FACS. Deferazirox kezelés 24 órán vezetett dózisfüggő akkumulációját AGS sejtek G1 fázisban (41,8% 0 uM, 53,7% 10 uM, és 77,2% 100 uM). b Western blot analízis A sejtciklus-rokon molekulák azt mutatta, hogy deferazirox serkentett p21, p27, és a p53 és downregulált ciklin D1, ciklin B, és CDK4
hatása deferazirox vas anyagcsere és egyéb utak
vas felvételét a sejt, keringő vas-transzferrin komplexek kötődnek a sejtfelszíni receptorok TFR1. Iron kilép keresztül ferroportin, vasaló kiáramlási pumpa, amely szabályozza a hepcidin. A ráksejtekben TFR1 és hepcidin kimutatták, hogy fokozódik és ferroportin van downregulált, amely halmozottan vezet megnövekedett koncentrációjú intracelluláris vas [3]. A hatás a deferazirox a vas anyagcsere értékeltük Western blot analízise TFR1 és ferroportin. A szint TFR1 emelkedett 24 óra után a kezelés deferasirox. Ezzel szemben a ferroportin expresszió csökkent (3A.). Ezek az eredmények összhangban vannak a korábbi vizsgálatokkal [10, 11]. Ábra. 3 Hatás deferazirox vas anyagcsere és egyéb utak. egy kezelés deferaziroxra 24 órán eredményezett fokozott TFR1 és csökkent szintje ferroportin. b Deferazirox is apoptózist indukált, serkentett NDRG1, és downregulált p-mTOR és a c-myc felmért Western-blot analízis
A hatások a deferazirox apoptózisra arra következő értékeltük FACS és Western-blot-analízis az apoptózis kapcsolódó fehérjéket. Ábrán látható. 2a, AGS kezelt sejtek deferaziroxra 24 órán mutatott felhalmozódásához sejtek sub-G1 (apoptotikus) fázist (3,2% 0 uM, 3,3% 10 jiM és 9,5% 100 uM). Sőt, deferasirox kezelés csökkentette a kifejezés a pro-kaszpáz-3, pro-kaszpáz-8, és a pro-kaszpáz-9 és a megnövekedett expresszióját BAX (ábra. 3b). NDRG1 ismert, hogy egy szuppresszor a sejtek növekedését és a metasztázist. Deferazirox emelte a NDRG1. Ezen túlmenően, a c-myc és foszfo-mTOR expresszió csökkent 24 óra után végzett kezelés deferazirox (ábra. 3b). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy deferasirox apoptózist indukál, gátolja a távoli áttétek, és elnyomja a c-myc és mTOR útvonal.
Szinergikus hatása deferasirox és ciszplatin katalógusa Annak megállapítására, hogy deferaziroxra fokozhatja a hatását a ciszplatin, AGS sejteket a vagy a nélkül a ciszplatin és életképességüket meghatároztuk az MTT assay. A ciszplatinnal végzett kezelés 48 órán csökkentette az életképes sejtek számát, egy IC 50 5-10 um. Annak meghatározására, hogy a deferazirox fejt ki szinergetikus hatást ciszplatinnal, AGS sejteket kezeltünk 0, 2,5, 5, 10, és 20 uM deferazirox vagy önmagukban, vagy a jelenléte egy adott koncentrációjú ciszplatin (5 uM) 48 órán át. Ábrán látható. 4a, b, AGS kezelt sejtek deferasirox és ciszplatin szignifikánsan nagyobb csökkenést celluláris életképesség képest kezelt sejtek akár deferaziroxra vagy ciszplatin önmagában (p
< 0,01). Ezek az eredmények azt sugallják, hogy a deferazirox fokozza a cisplatin által közvetített gátlását AGS sejtek növekedését. Ábra. 4 szinergikus hatása deferasirox és ciszplatinnal. Az A, B AGS sejteket kezeltünk 0, 2,5, 5, 10, és 20 uM deferazirox, akár önmagában, akár a jelenlétében rögzített koncentrációban a ciszplatin (5 uM) 48 órán át. AGS kezelt sejtek deferasirox és cisplatinnal jelentős csökkenést mutatott a sejtes életképesség képest kezelt sejtek akár deferaziroxra vagy ciszplatint önmagában
Annak vizsgálatára, a molekuláris mechanizmusok mögöttes ezt a hatást, Western-blot analízist használtunk, hogy értékelje a szintek különböző molekulák AGS kezelt sejtek deferazirox (5 jiM), ciszplatin (5 uM), vagy mindkettő. A kombináció a deferazirox és ciszplatin eredményezte túlszabályzását NDRG1, p21, p53. Ezzel ellentétben, ez a kombináció eredményeként a downregulációját foszfo-mTOR, ferroportin, és a pro-kaszpáz 9. Ezek az eredmények azt sugallják, hogy a deferazirox potencírozza a rákellenes hatását a ciszplatin különböző utak (ábra. 5). Ábra. 5 molekuláris mechanizmusai szinergikus hatást. Western-blot-analízist végeztünk lizátum AGS kezelt sejtek deferazirox (5 jiM), ciszplatin (5 uM), vagy mindkét 24 órán át. A kombináció a deferazirox és ciszplatin indukálta a túlszabályzását NDRG1, p21, és a p53, amellett, hogy a downregulációját foszfo-mTOR, ferroportin, és a pro-kaszpáz 9
Megbeszélés
Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy deferazirox gátolja elterjedése gyomor rákos sejteket. Deferazirox is megállapították, hogy rábírja a G1 letartóztatását; upregulate p21, p27 és p53 expresszió; és downregulate ciklin D1, ciklin B, és CDK4 expresszió. Deferazirox is apoptózist indukált, serkentett NDRG1, és downregulált p-mTOR és a c-myc. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy deferaziroxra fejt tumorellenes hatását a gyomorrák sejtek keresztül különböző utak. Pontosabban, adataink azt mutatják, hogy deferaziroxra megváltoztatja vasanyagcsere, gátolja a sejtciklus előrehaladását, befolyásolja az mTOR jelátviteli utak és metasztázis, és apoptózist indukál. Ezen túlmenően, deferazirox úgy tűnik, hogy potencírozzák az anti-proliferatív hatása ciszplatin gyomor rákos sejtekben.
Vas elengedhetetlen a sejt túlélését, de szintén okozhat sejtkárosodás generálásával reaktív oxigéngyökök [14]. Bár az intracelluláris vas szorosan szabályozza a normális sejtekben, a szint a sejten belüli vas emelkedett a rákos sejtekben fokozott expressziója következtében a TFR1 és hepcidin és csökkent expressziója ferroportin [3]. Mivel feleslegben vas és megváltozott vasanyagcsere vezethet tumor iniciációs és a növekedés, vaskelátorokkal úgy gondolják, hogy ígéretes rákellenes szerek. Számos bizonyíték támasztja alá, hogy a vas kelátképzők potenciális tumor-ellenes terápiák. Először is, megnövekedett intracelluláris vas ismert, hogy elősegíti a DNS-szintézis. Mivel a vas elengedhetetlen aktivitásának ribonukleotid reduktáz, egy kulcsfontosságú enzim a DNS-szintézist, vas fontos szerepet játszik a sejtproliferációban [15]. Ezért fokozott vas szükséges növelni ribonukleotid reduktáz aktivitás daganatos sejtek. Másodszor, vashiányt okozhat G1 /S letartóztatás és apoptózist indukál [13]. A ciklin D1 kötődik a CDK4 és CDK6, miáltal a G1 /S progresszió keresztül foszforilációját retinoblasztóma fehérje (RB). Ez a foszforiláció viszont felszabadulását eredményezi a transzkripciós faktor E2F-re RB. Vas kimerülése ismert, hogy csökkenti a ciklin D1 és a CDK kifejezést. Harmadszor, a túlzott cellás vas vezetheti a Wnt jelátadó útvonal, amelyről ismert, hogy fontos a tumor progresszióját [16].
Végeztünk ebben a vizsgálatban, hogy vizsgálja meg, hogy deferaziroxra fejt ki tumorellenes hatások összefüggésben gyomorrák. Azért választottuk deferasirox ki a számos kereskedelmi forgalomban kapható vaskelátorokkal miatt az orális elérhetőséget és viszonylag alacsony toxicitása. Bár a pontos mechanizmus, amellyel az deferaziroxra kifejti rákellenes hatása még mindig folyik a nyomozás, feltételeztük, hogy deferaziroxra gátolja a sejtciklus előrehaladását alapuló korábbi tanulmányok [11, 17]. Azt találtuk, hogy deferaziroxra indukált G1 felfelé szabályozásával p21 és p27 és mTOR gátlása miatt csökken a ciklin D1 és CDK4. Ezek az eredmények alátámasztják a hipotézist, hogy a deferazirox fejti ki daganatellenes hatások szabályozása által a sejtciklus előrehaladását.
Vaskelátorokkal indukálhatja a kifejezés a NDRG1, egy ismert áttétes szupresszor, a különböző humán rákos megbetegedések [18-20]. A mechanizmus, amellyel NDRG1 elnyomja metasztázis, jelenleg nem tisztázott, bár NDRG1 kimutatták, hogy gátolják a sejtek migrációját és invázióját által expressziójának modulálására számos adhéziós molekulák [21]. NDRG1 expresszióját kimutatták, hogy szignifikánsan alacsonyabb a rákos szövetben képest szomszédos normál szövetben; Sőt, NDRG1 expresszióját kimutatták, hogy fordítottan arányos a metasztázis egyes ráktípusok, mint például a prosztata- és végbélrák [22, 23]. Azonban eltérő eredményeket kaptak kapcsolatos esetleges szövetség NDRG1 tumor progresszióját. Érdekes, NDRG van egy bizonyított szerepe van a sejtciklus-szabályozás. Pontosabban, NDRG1 expresszió fokozódik keresztül a p53-közvetített indukcióját, és NDRG1 is indukálja a G1 /S letartóztatás upregulating P21 [24]. Azt találtuk, hogy a deferazirox upregulálja az expressziós szintjét NDRG1, p53, és a p21. Bár nem assay sejtmigrációt vagy vizsgálja metasztázis in vivo a jelen vizsgálatban, eredményeink arra utalnak, hogy a deferazirox képes lehet gátolni a tumor növekedését és a metasztázist. Feltételezzük, hogy a mechanizmus, amely által deferaziroxra kifejti tumorellenes hatásokat magában NDRG1.
Deferazirox kimutatták, hogy fokozza a citotoxikus hatása ciszplatin nyelőcsőrák sejtvonalakban. Ezen túlmenően, a ciszplatin-rezisztens sejteket kezelt alacsony koncentrációban deferazirox (5 uM) a ciszplatinnal kombinációban mutatott szignifikáns csökkenést a celluláris életképesség képest kezelt sejtek deferaziroxra vagy ciszplatinnal önmagában [10]. Azt találtuk, hogy a kombináció a deferazirox (5 uM) és ciszplatin (5 uM) szignifikáns mértékben csökkenti a sejt életképességét. Sőt, ez a kombinált kezelés hatására a túlszabályzását NDRG1, p21 és a p53 és a downregulációját foszforilált mTOR. Eredményeink tehát azt sugallják, hogy deferasirox potenciálisan fokozza a rákellenes hatását ciszplatin gyomor rákos sejtekben. Sőt, a p53-NDRG1-p21 és az mTOR útvonal is be lehet vonni a szinergikus hatása deferasirox ciszplatinnal.
Ez a tanulmány azonban számos korlátja. Egyrészt szűkítettük tanulmány gyomorrák sejtvonalakon, és nem végez semmilyen in vivo kísérletekben. Ezen túlmenően, a kifejezés a sejtciklus-kapcsolatos fehérjék értékelték csak Western-blottal. További részletes információkat kaptunk volna immunprecipitációval és kináz assay. Annak meghatározására, az anti-tumor hatását deferazirox, további kísérleteket beleértve in vivo vizsgálat lenne szükség. Mindazonáltal, ez az első olyan vizsgálat, hogy vizsgálja meg az anti-tumor hatását deferazirox ellen gyomorrák.
Következtetések
Összefoglalva, azt találtuk, hogy a deferazirox indukált tumorellenes hatást gyomor rákos sejtekben keresztül különböző utak. Pontosabban, deferasirox serkentett NDRG1, gátolt a sejtciklus előrehaladását, downregulált mTOR és c-myc expresszió, és az indukált apoptózist. Sőt, deferasirox fokozta a rákellenes hatása a ciszplatin. Bár a hatékonyságát deferasirox meg kell erősíteni a jövőbeli vizsgálatokban, eredményeink azt mutatják, hogy deferaziroxra ígéretes rákellenes terápiás szer, és azt is, hogy hatékony kemoterápia érzékenyítő. Katalógusa nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa Ezt a munkát támogatott a kutatási alap Hanyang Egyetem (HY-2013-MC).
Nyitott AccessThis cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! 4.0 International License (http: //creativecommons. org /engedélyeket /által /4. 0 /), amely lehetővé teszi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, ha kellő hitelt az eredeti szerző (k), és a forrás, egy linket a Creative Commons licenc, és jelezze, ha változások történtek. A Creative Commons Public Domain Dedication lemondás (http: //creativecommons. Org /közkincs /zero /1 0 /) vonatkozik a rendelkezésre bocsátott adatok ebben a cikkben, ha másképp nem jeleztük.
Versengő érdekek katalógusa a szerzők kijelentik, hogy nem ellentétes érdekek. katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa JC és YL részt a tervezési és elemzési a jelen kutatás. JC írta a papírt. JK végzett molekuláris vizsgálatok. YW, JU, a BP hozzájárult az összetétele a papír. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a kéziratot. Katalógusa

• Egyidejű kompozit mellékvese phaeochromocytoma, többszörös gyomor stroma tumorok és pseudohermaphrodism olyan betegben, von Recklinghausens betegség
• Iris áttéte gyomor adenokarcinóma