Il potenziale di deferasirox come una modalità terapeutica romanzo in cancer

gastrica Il potenziale di deferasirox come modalità terapeutica nel cancro gastrico
Abstract
sfondo
Il ferro è un elemento cruciale per la proliferazione cellulare, la crescita e il metabolismo. Tuttavia, l'eccesso di ferro e metabolismo del ferro alterato sono entrambi associati con l'inizio del tumore e la crescita del tumore. Deferasirox è un chelante del ferro per via orale. Anche se alcuni studi hanno indicato che deferasirox è un candidato promettente per le terapie anti-cancro, la sua efficacia contro il cancro gastrico non è ancora stata determinata. Questo studio è stato condotto per determinare se deferasirox esercita effetti anti-tumorali in linee cellulari di cancro gastrico e se deferasirox e cisplatino agire sinergicamente
. Metodi
quattro linee di cellule di cancro gastrico umano (AGS, MKN-28, SNU-484, e SNU-638) sono state trattate con varie concentrazioni di deferasirox per determinare l'IC 50 per ciascuna linea cellulare. Gli effetti di deferasirox sul ciclo cellulare sono stati valutati mediante citometria di flusso, e gli effetti di deferasirox sul metabolismo del ferro, il ciclo cellulare, apoptosi e sono stati valutati mediante Western blotting. Per determinare se deferasirox aumenta l'effetto di cisplatino, cellule AGS sono state coltivate in presenza e in assenza di cisplatino.
Risultati
Deferasirox inibiscono la proliferazione di tutte le linee di cellule di cancro gastrico valutata mediante analisi MTT. Poiché l'IC 50 del deferasirox era il più basso (inferiore a 10 mM) in cellule AGS, successivi esperimenti sono stati eseguiti in questa linea. Deferasirox upregulated recettore della transferrina 1 espressione e diminuita espressione ferroportina. Inoltre, deferasirox indotto l'arresto G1; p21 upregulated, p27, p53 e di espressione; e ciclina D1 downregulated, ciclina B, e l'espressione CDK4. Inoltre, l'apoptosi indotta deferasirox, upregulated N-Myc
a valle del gene regolato 1 (NDRG1), e downregulated p-mTOR e l'espressione di c-myc. E 'stato trovato anche per agire in sinergia con cisplatino.
Conclusioni
nostri risultati suggeriscono che deferasirox può esercitare effetti anti-tumorali nel contesto del cancro gastrico. Deferasirox colpisce un numero di diversi percorsi e molecole; per esempio, fa aumentare deferasirox espressione NDRG1, inibisce il ciclo cellulare, downregulates mTOR e c-myc espressione, e induce l'apoptosi. Inoltre, appare deferasirox per potenziare gli effetti anti-cancro di cisplatino. Anche se l'efficacia di deferasirox resta da testare in studi futuri, i risultati qui presentati indicano che deferasirox è un nuovo agente terapeutico anti-cancro promettente.
Parole
deferasirox Stomaco neoplasia Cisplatino Sfondo
cancro gastrico è una delle le principali cause di decessi correlati al cancro in Corea [1]. Anche se i pazienti con gastrica mostrano il cancro risultati eccellenti se il tumore è diagnosi precoce, tumori gastrici avanzati e ricorrenti inoperabili sono ancora associati con tassi di sopravvivenza poveri. Negli ultimi decenni, sostanziali miglioramenti nella chemioterapici hanno migliorato la sopravvivenza nel carcinoma gastrico avanzato. Recentemente, la sopravvivenza globale è stata significativamente prolungata in pazienti con cancro avanzato HER2-positivo giunzione gastrica o gastro-esofageo trattando con trastuzumab (HER-2 anticorpo monoclonale), in combinazione con la chemioterapia convenzionale [2]. Tuttavia, la sopravvivenza globale è stata solo 13,8 mesi. Pertanto, i nuovi agenti sono urgentemente necessari.
Il ferro è un elemento essenziale per la proliferazione cellulare, la crescita e il metabolismo. Tuttavia, l'eccesso di ferro e metabolismo del ferro alterata sono stati associati con l'inizio del tumore e la crescita tumorale [3]. Studi epidemiologici hanno rivelato che un apporto di ferro alto è associato ad un aumentato rischio di tumore del colon-retto [4]. Molte cellule tumorali alterano il metabolismo del ferro perché le cellule maligne richiedono più ferro delle cellule normali. Per aumentare il pool di ferro labile, le cellule tumorali hanno dimostrato di aumenta l'espressione del recettore della transferrina 1 (TFR1) e epcidina, oltre a downregulating espressione ferroportina [3].
Deferasirox (Exjade®), un ferro da stiro tridentate orale ( Fe 3+) chelante, viene rapidamente assorbito dall'intestino ed ha una relativamente lunga emivita (da 8 a 16 ore). Così, il dosaggio una volta al giorno può raggiungere sostenuti livelli di farmaco circolanti sufficienti per l'evacuazione di ferro plasmatico non legato alla transferrina. Anche se deferasirox è stata associata ad alcuni effetti negativi, come disturbi gastrointestinali, rash cutaneo, e tossicità renale, è relativamente ben tollerato. Pertanto, deferasirox è attualmente il chelante del ferro più comunemente usato per il trattamento della malattia sovraccarico di ferro [5].
Recentemente, diversi studi hanno studiato il potenziale di deferasirox come un agente anti-neoplastico. Deferasirox stato segnalato per inibire l'attività di NF-kB in campioni di sangue di pazienti affetti da sindrome mielodisplastica e leucemia nella cella linee [6]; Inoltre, deferasirox è stato anche dimostrato di reprimere la via mTOR nelle cellule di leucemia mieloide [7]. Per quanto riguarda i dati clinici, un case report ha mostrato che il trattamento con deferasirox raggiunto remissione completa nei pazienti con leucemia acuta monocitica chemioterapia refrattari [8]. Inoltre, l'analisi post hoc di uno studio multicentrico ha rivelato che deferasirox migliorato parametri ematologici nei pazienti con sindrome mielodisplastica [9]. Attualmente, la maggior parte delle segnalazioni di deferasirox come agente anti-neoplastica sono stati in neoplasie ematologiche; solo pochi studi si sono concentrati sui tumori solidi. Recentemente, deferasirox ha dimostrato di inibire la crescita delle cellule del polmone e cancro esofageo sia in vitro che in vivo [10, 11]. Tuttavia, l'effetto di deferasirox sul cancro gastrico non è ancora stata determinata, e il meccanismo con cui esercita deferasirox suoi effetti anti-tumorali rimane poco conosciuta. Pertanto, questo studio è stato condotto per verificare se deferasirox esercita effetti anti-tumorali su linee cellulari di cancro gastrico e anche se deferasirox agisce sinergicamente con cisplatino.
Metodi
cellulare cultura
Quattro linee di cellule di cancro gastrico umano (AGS, MKN-28, SNU-484, e SNU-638) sono stati ottenuti dal cellulare coreano linea Bank. Tutte le cellule sono state coltivate in terreno RPMI 1640 contenente 10% siero e antibiotici fetale bovino (100 U /ml di penicillina e 100 ug /ml di streptomicina) in un umidificata al 5% CO 2 incubatore a 37 ° C.
Reagenti e anticorpi
Deferasirox (Exjade®) è stata donata da Novartis (Basilea, Svizzera). Capra policlonale anti-NDRG1 (N-myc
a valle del gene regolato 1) (catalogo n. Ab37897) e coniglio policlonale anti-ferroportina (catalogo n. Ab85370) anticorpi sono stati acquistati da Abcam (Cambridge, UK). Anti-TFR1 topo anticorpi monoclonali (catalogo n. 136.800) sono stati ottenuti da Life Technologies (Carlsbad, CA, USA), e FeSO 4 è stato acquistato da Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, ciclina A, ciclina B, ciclina D1, ciclina E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspasi 3, e gli anticorpi BAX sono stati acquistati da Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR e pro-caspasi 8 anticorpi sono stati ottenuti da Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Inibizione della crescita inibizione test
La crescita è stata misurata con MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-il] -2,5-diphenyltetrazolium bromide) come precedentemente descritto [12]. Brevemente, le cellule sono state seminate (2 × 10 3 cellule /pozzetto) in 96 pozzetti micropiastre (Nunc, Roskilde, Danimarca) e incubate a 37 ° C per 24, 48 o 72 h. soluzione MTT (50 mL) da Sigma (2 mg /ml in PBS) è stato aggiunto a ciascun pozzetto e le piastre sono state incubate per altre 4 ore a 37 ° C. Dopo questa incubazione, la soluzione MTT è stato aspirato fuori. Per solubilizzare i cristalli formazano formate in cellule vitali, 200 ml di DMSO è stato aggiunto a ciascun pozzetto. Le piastre sono state agitate per 30 minuti a temperatura ambiente, e l'assorbanza di ciascun pozzetto a 595 nm è stato letto immediatamente con uno spettrofotometro a scansione multipozzetto (Bio-Rad, iMarkTM lettore di micropiastre).
Per determinare la concentrazione di deferasirox necessaria per uccidere 50% delle cellule (IC 50), AGS, MKN-28, SNU-484, e SNU-638 cellule sono state trattate con 0, 1, 10, 50, e 100 mM di deferasirox per 24, 48, e 72 h. Questi risultati sono stati usati per selezionare la linea cellulare gastrica con la massima sensibilità a deferasirox per tutti gli esperimenti successivi.
Ciclo cellulare analisi
Dopo 24 ore di incubazione delle cellule AGS con 0, 10, e 100 mM di deferasirox a 37 ° C, le cellule sono state lavate due volte con PBS, fissata durante la notte con il 70% di etanolo, lavato con PBS, e trattata con 50 mg /ml di ioduro di propidio (PI) contenente RNasi a a 50 mg /mL. Il contenuto del DNA delle cellule (10.000 cellule /gruppo sperimentale) sono stati analizzati utilizzando un flusso FACSCanto II citofluorimetro (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) dotato di software BD FACSDivaTM (V6.1.3). Le percentuali delle popolazioni di cellule in ogni fase del ciclo cellulare (G1, S, o G2 /M) sono stati calcolati dagli istogrammi contenuto di DNA.
Analisi Western Blot
cellule AGS sono state incubate con 0, 10 e 100 micron di deferasirox a 37 ° C per 24 h. Le cellule sono state lavate con PBS, risospese in tampone di lisi [50 mM Tris (pH 7.5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCl, 20 mg /ml aprotinina, 20 mg /ml leupeptina, e 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoro], e messo in ghiaccio per 20 min. Le proteine ​​in lisati (20-30 mg) sono stati risolti in 10-15% gel di denaturazione SDS-poliacrilammide e trasferiti su membrane di nitrocellulosa per 90-120 min. Aspecifiche siti di legame sono state bloccate con 5% di latte scremato per 1 h, e le membrane sono state incubate overnight con anticorpi primari (tutti a una diluizione 1: 1000). Gli anticorpi e dei relativi processi che sono stati utilizzati per indagare sono stati i seguenti: anti-TFR1 e anti-ferroportina per il metabolismo del ferro; anti-p53, p27, p21, ciclina A, ciclina B, ciclina D1, ciclina E, CDK2, CDK4, e CDK6 per il ciclo cellulare; anti-pro-caspasi 3, pro-caspasi 8, pro-caspasi 9, e BAX per apoptosi; anti-NDRG1 per metastasi; e anti-p-mTOR e c-myc. Le bande immunoreattive sono state visualizzate con un kit ECL (Intron, Corea).
Analisi statistica
dati sono presentati come mezzi SEM ± (barre di errore). Le differenze sono state analizzate con il test t di Student
. P
valori. ≪ 0,05 sono stati considerati statisticamente significativi
Risultati
Effetto di deferasirox sulla crescita di linee di cellule di cancro gastrico
La capacità di deferasirox di inibire la crescita delle quattro linee di cellule di cancro gastrico è stato determinato mediante un test MTT proliferazione. AGS, MKN-28, SNU-484, e SNU-638 cellule sono state incubate con 0, 1, 10, 50, e 100 mM deferasirox a 37 ° C per 24, 48 o 72 h. Deferasirox inibito la crescita di tutte le quattro linee di cellule di cancro gastrico in modo dose-dipendente e modo dipendente dal tempo (Fig. 1a). Dal momento che l'IC 50 di deferasirox a 72 H è stato il più basso in cellule AGS (meno di 10 micron), tutti gli esperimenti successivi sono stati eseguiti utilizzando queste cellule. Figura. 1 Effetto inibitorio di deferasirox sulla crescita di linee cellulari di cancro gastrico. una vitalità cellulare è stata misurata mediante il saggio MTT. AGS, MKN-28, SNU-484, e SNU-638 cellule sono state incubate con 0, 1, 10, 50, e 100 mM di deferasirox a 37 ° C per 24, 48 o 72 h. trattamento Deferasirox provocato inibizione della crescita dose-dipendente e dipendente dal tempo in tutte le quattro linee di cellule di cancro gastrico. b cellule AGS sono state coltivate con 10 e 20 pM di deferasirox da solo o in presenza di FeSO4 (100 mM) per 48 h. L'effetto inibitorio di deferasirox è invertita integratore FeSO4
cellule AGS sono state coltivate con 10 e 20 pM di deferasirox da solo o in presenza di FeSO 4 (100 mM) per 48 h. L'effetto inibitorio di deferasirox è stato invertito da FeSO 4 supplemento (fig. 1b). Analisi
del ciclo cellulare nelle cellule AGS
deplezione di ferro induce G1 /S arresto interessando l'espressione di molecole critiche per la progressione del ciclo cellulare come la ciclina D1 e p21 [13]. Gli effetti di deferasirox sul ciclo cellulare sono stati determinati mediante selezione delle cellule attivate fluorescenza (FACS) usando propidio ioduro. cellule AGS sono state incubate con 0, 10, e 100 mM di deferasirox a 37 ° C per 24 h. Come mostrato in Fig. 2a, trattamento delle cellule AGS con deferasirox per 24 h portato ad un accumulo di cellule in fase G1 in modo dose-dipendente (41,8% a 0 pM, 53,7% a 10 pM e 77,2% a 100 pM). Questo risultato indica che deferasirox induce arresto G1. Analisi Western Blot di proteine ​​del ciclo legati cellule ha mostrato che deferasirox ha indotto la sovraregolazione di p21, p27, p53 e, e la down-regulation di ciclina D1, ciclina B, e CDK4 (Fig. 2b). Questi risultati suggeriscono che l'effetto anti-proliferativo di deferasirox è dovuto alla inibizione del ciclo cellulare. Figura. 2 Effetto di deferasirox sulla progressione del ciclo cellulare nelle cellule AGS. a cellule AGS sono state incubate con 0, 10, e 100 mM di deferasirox a 37 ° C per 24 h. progressione del ciclo cellulare è stato analizzato da FACS. trattamento Deferasirox per 24 ore ha portato ad un accumulo dose-dipendente delle cellule AGS in fase G1 (41,8% a 0 pM, 53,7% a 10 pM e 77,2% a 100 pM). b analisi Western Blot di molecole ciclo del cellule ha mostrato che deferasirox p21, p27 upregulated, e p53 e downregulated ciclina D1, ciclina B, e CDK4
effetto di deferasirox sul metabolismo del ferro e altri percorsi Compra di assorbimento del ferro nel cellula, circolanti complessi ferro-transferrina si legano al recettore sulla superficie cellulare TFR1. Ferro esce tramite ferroportina, una pompa di efflusso di ferro che viene regolato da epcidina. Nelle cellule tumorali, TFR1 e epcidina hanno dimostrato di essere upregulated e ferroportina è inibiti e che cumulativamente portare ad un aumento delle concentrazioni di ferro intracellulare [3]. L'effetto di deferasirox sul metabolismo del ferro è stata valutata mediante analisi Western blot di TFR1 e ferroportina. Il livello di TFR1 aumentata dopo 24 ore di trattamento con deferasirox. Al contrario, l'espressione ferroportina diminuita (Fig. 3a). Questi risultati sono coerenti con quelli di studi precedenti [10, 11]. Figura. 3 Effetto di deferasirox sul metabolismo del ferro e altri percorsi. Un trattamento con deferasirox per 24 ore ha provocato un aumento del livello di TFR1 e una diminuzione del livello di ferroportina. b deferasirox apoptosi indotta anche, upregulated NDRG1, e downregulated p-mTOR e c-myc, come valutato mediante analisi Western Blot
Gli effetti di deferasirox sulla apoptosi sono stati prossimo valutati da FACS e l'analisi Western Blot di proteine ​​apoptosi correlati. Come mostrato in Fig. 2a, cellule AGS trattati con deferasirox per 24 h mostravano un accumulo di cellule in sub-G1 (apoptosi) fase (3,2% a 0 pM, 3,3% a 10 pM e del 9,5% a 100 pM). Inoltre, il trattamento deferasirox diminuito l'espressione di pro-caspasi 3, pro-caspasi 8, e pro-caspasi 9 e ha aumentato l'espressione di BAX (Fig. 3b). NDRG1 è noto per essere un soppressore della crescita cellulare e metastasi. Deferasirox ha aumentato il livello di NDRG1. Inoltre, c-myc e l'espressione fosfo-mTOR sono diminuiti dopo 24 ore di trattamento con deferasirox (Fig. 3b). Questi risultati suggeriscono che deferasirox induce apoptosi, inibisce la metastasi a distanza, e sopprime le vie c-Myc e mTOR.
Effetto sinergico di deferasirox e cisplatino
Per valutare se deferasirox potrebbe aumentare l'effetto di cisplatino, le cellule sono state coltivate con AGS o senza cisplatino e la loro vitalità è stata determinata utilizzando il saggio MTT. Il trattamento con cisplatino per 48 h ridotto il numero di cellule vitali, con un IC 50 di 5-10 micron. Per determinare se deferasirox esercita un effetto sinergico con cisplatino, cellule AGS sono stati trattati con 0, 2,5, 5, 10, e 20 mM di deferasirox da solo o in presenza di una concentrazione fissa di cisplatino (5 mM) per 48 h. Come mostrato in Fig. 4a, b, le cellule trattate con AGS deferasirox e cisplatino ha mostrato una riduzione significativamente maggiore nel vitalità cellulare rispetto alle cellule trattate sia con deferasirox o solo cisplatino (P
< 0,01). Questi risultati suggeriscono che deferasirox migliora l'inibizione cisplatino-mediata della crescita delle cellule AGS. Figura. 4 effetto sinergico di deferasirox e cisplatino. a, b cellule AGS sono stati trattati con 0, 2,5, 5, 10, e 20 mM di deferasirox, da solo o in presenza di una concentrazione fissa di cisplatino (5 mM) per 48 h. cellule AGS trattati con deferasirox e cisplatino ha mostrato una diminuzione significativa della vitalità cellulare rispetto alle cellule trattate sia con deferasirox o cisplatino da solo
per studiare i meccanismi molecolari alla base di questo effetto, analisi Western Blot è stato utilizzato per valutare i livelli di diverse molecole in AGS cellule trattate con deferasirox (5 micron), cisplatino (5 micron), o entrambi. La combinazione di deferasirox e cisplatino ha portato alla upregulation di NDRG1, p21 e p53. Al contrario, questa combinazione ha portato alla sottoregolazione di fosfo-mTOR, ferroportina, e pro-caspasi 9. Questi risultati suggeriscono che deferasirox potenzia gli effetti anti-cancro di cisplatino attraverso vari percorsi (Fig. 5). Figura. 5 Meccanismi molecolari di effetto sinergico. analisi Western blot è stata eseguita con lisati di cellule AGS trattati con deferasirox (5 mM), cisplatino (5 mM), o entrambi per 24 h. La combinazione di deferasirox e cisplatino ha indotto la upregulation di NDRG1, p21, p53 e, in aggiunta alla sottoregolazione di fosfo-mTOR, ferroportina, e pro-caspasi 9
Discussione
In questo studio, abbiamo riscontrato che inibisce deferasirox la proliferazione delle cellule di cancro gastrico. Deferasirox è stato anche trovato per indurre l'arresto G1; upregulate p21, p27, p53 e di espressione; e downregulate ciclina D1, ciclina B, e l'espressione CDK4. Deferasirox anche indotto l'apoptosi, NDRG1 upregulated e downregulated p-mTOR e c-myc. Questi risultati suggeriscono che deferasirox esercita effetti anti-tumorali in cellule di cancro gastrico attraverso vari percorsi. In particolare, i nostri dati indicano che deferasirox altera il metabolismo del ferro, inibisce la progressione del ciclo cellulare, colpisce di segnalazione mTOR e percorsi metastasi, e induce l'apoptosi. Inoltre, sembra deferasirox per potenziare l'effetto anti-proliferativo del cisplatino nelle cellule di cancro allo stomaco.
Il ferro è essenziale per la sopravvivenza delle cellule, ma può anche causare danni cellulari generando specie reattive dell'ossigeno [14]. Sebbene il livello di ferro intracellulare è strettamente regolata in cellule normali, i livelli di ferro intracellulare è elevata nelle cellule tumorali causa aumentata espressione di TFR1 e hepcidin e ridotta espressione di ferroportina [3]. Dal momento che l'eccesso di ferro e metabolismo del ferro alterato può portare alla iniziazione del tumore e la crescita, chelanti del ferro sono ritenuti essere promettenti agenti anti-cancro. Diverse linee di evidenza supportano l'idea che chelanti del ferro sono potenziali terapie anti-tumorali. In primo luogo, l'aumento dei livelli di ferro intracellulare sono noti per promuovere la sintesi del DNA. Poiché il ferro è essenziale per l'attività della ribonucleotide riduttasi, un enzima chiave della sintesi del DNA, il ferro svolge un ruolo importante nella proliferazione cellulare [15]. Pertanto, l'aumento di ferro è necessario per aumentare l'attività ribonucleotide riduttasi nelle cellule neoplastiche. In secondo luogo, la deplezione di ferro può causare G1 /S arresto e indurre apoptosi [13]. Ciclina D1 si lega a CDK4 e CDK6, ottenendo in tal modo G1 progressione /S tramite fosforilazione della proteina retinoblastoma (RB). Questa fosforilazione a sua volta provoca il rilascio del fattore di trascrizione E2F da RB. deplezione di ferro è noto per diminuire ciclina D1 e di espressione CDK. In terzo luogo, l'eccessiva ferro cellulare può guidare il percorso di segnalazione Wnt, che è noto per essere importante per la progressione del tumore [16].
Abbiamo condotto questo studio per verificare se deferasirox esercita effetti anti-tumorali nel contesto del cancro gastrico. Abbiamo scelto deferasirox su numerosi chelanti del ferro disponibili in commercio per la sua disponibilità orale e tossicità relativamente bassa. Anche se i precisi meccanismi con cui deferasirox esercita i suoi effetti anti-cancro sono ancora oggetto di indagine, abbiamo ipotizzato che deferasirox inibisce la progressione del ciclo cellulare sulla base di studi precedenti [11, 17]. Abbiamo riscontrato che deferasirox indotta G1 arresto da upregulating p21 e p27 e downregulating ciclina D1 e CDK4. Questi risultati sostengono la nostra ipotesi che esercita deferasirox suoi effetti anti-neoplastici regolando la progressione del ciclo cellulare.
Chelanti del ferro può indurre l'espressione di NDRG1, un noto soppressore metastatico, in una varietà di tumori umani [18-20]. Il meccanismo con cui NDRG1 sopprime metastasi attualmente non risulta chiaro, anche se NDRG1 ha dimostrato di inibire la migrazione cellulare e dell'invasione modulando l'espressione di un certo numero di molecole di adesione [21]. espressione NDRG1 ha dimostrato di essere significativamente più bassa nel tessuto del cancro rispetto al tessuto normale adiacente; Inoltre, l'espressione NDRG1 ha dimostrato di essere inversamente correlato con la metastasi di alcuni tumori, come prostata e cancro colorettale [22, 23]. Tuttavia, sono stati ottenuti risultati discordanti per quanto riguarda una possibile associazione di NDRG1 con la progressione del tumore. È interessante notare, NDRG ha un ruolo dimostrato nel controllo del ciclo cellulare. In particolare, l'espressione è upregulated NDRG1 tramite induzione p53-mediata, e NDRG1 può anche indurre G1 /S arresto da upregulating p21 [24]. Abbiamo riscontrato che deferasirox upregulates i livelli di espressione di NDRG1, p53, p21 e. Anche se non abbiamo saggio la migrazione delle cellule o indagare le metastasi in vivo nel presente studio, i nostri risultati suggeriscono che deferasirox sia in grado di inibire la crescita tumorale e le metastasi. Ipotizziamo che il meccanismo con cui deferasirox esercita i suoi effetti anti-tumorali possono comportare NDRG1.
Deferasirox ha dimostrato di aumentare l'effetto citotossico del cisplatino in linee cellulari di cancro esofageo. Inoltre, le cellule cisplatino-resistenti trattati con una bassa concentrazione di deferasirox (5 mM) in combinazione con cisplatino hanno mostrato una significativa riduzione della vitalità cellulare rispetto alle cellule trattate con deferasirox o cisplatino da solo [10]. Abbiamo trovato che la combinazione di deferasirox (5 mM) e cisplatino (5 mM) ha indotto una significativa diminuzione della vitalità cellulare. Inoltre, questo trattamento combinato ha portato alla upregulation di NDRG1, p21 e p53 e la down-regulation di fosfo-mTOR. I nostri risultati, quindi, suggeriscono che deferasirox può potenzialmente aumentare l'effetto anti-cancro di cisplatino in cellule di cancro gastrico. Inoltre, le vie p53-NDRG1-P21 e mTOR possono essere coinvolti nella effetto sinergico di deferasirox con cisplatino.
Questo studio ha avuto una serie di limitazioni. In primo luogo, abbiamo limitato il nostro studio di linee cellulari di cancro gastrico e non ha effettuato alcun esperimento in vivo. Inoltre, l'espressione di proteine ​​ciclo del cellulare è stata valutata solo mediante Western blotting. Informazioni più dettagliate potrebbe essere ottenuta mediante immunoprecipitazione e chinasi. Per determinare l'effetto anti-tumorale di deferasirox, sarebbero necessari ulteriori esperimenti inclusi nello studio vivo. Tuttavia, questo è il primo studio per studiare gli effetti antitumorali di deferasirox contro il cancro gastrico.
Conclusioni
In conclusione, abbiamo riscontrato che deferasirox indotto effetti anti-tumorali in cellule di cancro gastrico attraverso vari percorsi. In particolare, deferasirox upregulated NDRG1, progressione del ciclo cellulare inibita, downregulated mTOR e l'espressione di c-myc, e apoptosi indotta. Inoltre, deferasirox potenziato gli effetti anti-cancro di cisplatino. Anche se l'efficacia di deferasirox deve essere confermata in studi futuri, i nostri risultati indicano che deferasirox è un agente terapeutico anti-cancro promettente e può anche essere un efficace sensibilizzatore chemioterapia.
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da . il fondo di ricerca dell'Università di Hanyang (HY-2013-MC)
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concorrenti. interessi
Gli autori dichiarano di non avere interessi in competizione.
contributi degli autori
JC e YL partecipato alla progettazione e l'analisi della presente ricerca. JC ha scritto il giornale. JK effettuato gli studi molecolari. YW, JU, BP contribuito nella composizione della carta. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto.

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