Het potentieel van deferasirox als een nieuwe therapeutische modaliteit in de maag cancer

Het potentieel van deferasirox als een nieuwe therapeutische modaliteit bij maagkanker
Abstracte achtergrond
IJzer is een cruciaal element voor de proliferatie, groei en stofwisseling. Echter, teveel aan ijzer en veranderde ijzermetabolisme worden beiden geassocieerd met tumor initiatie en tumorgroei. Deferasirox is een orale ijzerchelator. Hoewel sommige studies hebben aangetoond dat deferasirox is een veelbelovende kandidaat voor anti-kankertherapieën, de doeltreffendheid ervan tegen maagkanker is nog niet bepaald. Deze studie werd uitgevoerd om te bepalen of deferasirox oefent antitumorale effecten bij maagkanker cellijnen en of deferasirox en cisplatine synergistisch werken.
Methods
Vier menselijke maagkanker cellijnen (AGS, MKN-28, SNU-484, en SNU-638) werden behandeld met verschillende concentraties van deferasirox de IC 50 bepalen voor elke cellijn. De effecten van deferasirox op de celcyclus werden beoordeeld door flowcytometrie en de effecten van deferasirox op ijzermetabolisme, de celcyclus en apoptose werd vastgesteld door Western blotting. Deferasirox te bepalen of het effect van cisplatine verbetert, AGS cellen werden gekweekt in de aanwezigheid en afwezigheid van cisplatine.
Resultaten
Deferasirox remde de proliferatie van maagkanker cellijnen zoals beoordeeld door MTT assays. Aangezien de IC 50 van deferasirox was de laagste (onder 10 uM) in AGS cellen werden verdere experimenten uitgevoerd in deze lijn. Deferasirox opgereguleerd transferrinereceptor 1 expressie en een verminderde ferroportin expressie. Bovendien deferasirox geïnduceerde G1 arrestatie; opgereguleerd p21, p27 en p53 meningsuiting; en gedownreguleerd cycline D1, cycline B en CDK4 expressie. Bovendien deferasirox geïnduceerde apoptose, opgereguleerd N-myc
stroomafwaartse gereguleerd gen 1 (NDRG1) en gedownreguleerd p-mTOR en c-myc-expressie. Ook bleek synergistisch met cisplatine.
Conclusies Home Onze resultaten suggereren dat deferasirox antitumorale effecten kan uitoefenen in het kader van maagkanker. Deferasirox invloed op een aantal verschillende paden en moleculen; bijvoorbeeld deferasirox upregulates NDRG1 expressie remt de celcyclus, zorgt voor neerwaartse regulering mTOR en c-myc-expressie en apoptose. Bovendien lijkt deferasirox de anti-kanker effecten van cisplatina potentiëren. Hoewel de effectiviteit van deferasirox nog worden getest in toekomstige studies, de hier gepresenteerde resultaten geven aan dat deferasirox is een veelbelovende nieuwe anti-kanker therapeutisch middel.
Sleutelwoorden
Deferasirox Maag gezwellen cisplatine Achtergrond
Maagkanker is een van de belangrijkste oorzaken van kanker-gerelateerde sterfgevallen in Korea [1]. Hoewel patiënten met maagkanker tonen uitstekende resultaten als de kanker is vroeg ontdekt, zijn onbruikbaar geavanceerde en recidiverende maagkanker nog steeds geassocieerd met een slechte overlevingskansen. In de afgelopen decennia, een aanzienlijke verbetering van chemotherapeutische middelen hebben verbeterde overleving bij gevorderde maagkanker. Onlangs werd overall overleving significant bij patiënten met HER2-positieve advanced maag of gastro-oesofageale overgang kanker verlengd door behandeling met trastuzumab (HER-2 monoklonaal antilichaam) in combinatie met conventionele chemotherapie [2]. Echter, de totale overleving was slechts 13,8 maanden. Daarom zijn nieuwe agenten dringend noodzakelijk.
IJzer is een essentieel element voor de proliferatie, groei en stofwisseling. Echter, teveel aan ijzer en veranderde ijzermetabolisme geassocieerd met tumor initiatie en tumorgroei [3]. Epidemiologische studies hebben aangetoond dat een hoge ijzerinname wordt geassocieerd met een verhoogd risico op colorectale kanker [4]. Veel kankercellen veranderen ijzermetabolisme omdat kwaadaardige cellen vereisen meer ijzer dan normale cellen. Toenemen labiele ijzer pool hebben kankercellen is aangetoond dat de expressie van transferrinereceptor 1 (TFR1) en hepcidin upregulate naast neerwaarts reguleren ferroportin expressie [3].
Deferasirox (Exjade®), een orale tridentaat ijzer ( fe 3+) chelator wordt snel geabsorbeerd uit de darm en heeft een relatief lange halfwaardetijd (8-16 uur). Aldus kan eenmaal daagse dosering bereiken langdurige circulerende geneesmiddelniveaus voldoende voor de opruiming van niet-transferrine gebonden ijzer plasma. Hoewel deferasirox wordt geassocieerd met een aantal bijwerkingen zoals maagdarmstoornissen, huiduitslag en niertoxiciteit, is het relatief goed verdragen. Daarom deferasirox is momenteel de meest gebruikte ijzerchelaatvormer voor het behandelen van ijzerstapeling ziekte [5].
Recentelijk verschillende studies het potentieel van deferasirox onderzocht als een anti-neoplastisch middel. Deferasirox is beschreven dat NF-KB activiteit te remmen in bloedmonsters van patiënten met myelodysplastisch syndroom en bij leukemie cellijnen [6]; Bovendien deferasirox werd ook aangetoond dat de mTOR-route te onderdrukken in myeloïde leukemiecellen [7]. Ten aanzien van klinische gegevens, één geval rapport toonde aan dat deferasirox behandeling bereikte complete remissie bij patiënten met chemotherapie-refractaire acute monocytische leukemie [8]. Bovendien post hoc analyse van een multicenter studie bleek dat deferasirox verbeterd hematologische parameters bij patiënten met myelodysplastisch syndroom [9]. Op dit moment hebben de meeste meldingen van deferasirox als een anti-neoplastisch middel in hematologische maligniteiten geweest; slechts weinig studies gericht op vaste tumoren. Onlangs werd aangetoond deferasirox de groei van long- en slokdarmkanker cellen remt zowel in vitro als in vivo [10, 11]. Het effect van deferasirox op maagkanker is nog niet vastgesteld en het mechanisme waarmee deferasirox oefent zijn antitumorale effecten blijft slecht begrepen. Daarom werd deze studie uitgevoerd om te onderzoeken of deferasirox oefent anti-tumor effect op maagkanker cellijnen en of deferasirox synergistisch werkt met cisplatine.

Werkwijzen Celkweek
Vier menselijke maagkanker cellijnen (AGS, MKN-28, SNU-484 en SNU-638) werden verkregen van de Korean Cell Line Bank. Alle cellen werden gekweekt in RPMI 1640 medium dat 10% foetaal runderserum en antibiotica (100 U /ml penicilline en 100 ug /ml streptomycine) in een bevochtigde 5% CO 2 incubator bij 37 ° C.
Reagentia en antilichamen
Deferasirox (Exjade®) werd geschonken door Novartis (Basel, Zwitserland). Geit polyklonaal anti-NDRG1 (N-myc
stroomafwaartse gereguleerde gen 1) (catalogus nr. Ab37897) en konijn polyklonaal anti-ferroportin (catalogus nr. Ab85370) antilichamen werden gekocht bij Abcam (Cambridge, UK). Anti-TFR1 muizen monoklonale antilichamen (catalogus nr. 136800) werden verkregen van Life Technologies (Carlsbad, CA, USA) en FeSO 4 werd gekocht bij Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, cycline A, cycline B, cycline D1, cycline E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspase 3 en BAX antilichamen werden verkregen van Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR en pro-caspase 8 antilichamen werden verkregen van Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Groei remmingstest
Remming van groei werd gemeten met MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-yl] -2,5-difenyltetrazoliumbromide) zoals eerder beschreven [12]. Kort samengevat werden cellen uitgezaaid (2 x 10 3 cellen /putje) in 96-well microtiterplaten (Nunc, Roskilde, Denemarken) en geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 24, 48 of 72 uur. MTT oplossing (50 ui) van Sigma (2 mg /ml in PBS) werd aan elk putje toegevoegd en de platen werden gedurende nog eens 4 uur bij 37 ° C. Na deze incubatie werd het MTT oplossing afgezogen. De formazan kristallen gevormd in levende cellen te solubiliseren werd 200 pl DMSO aan elk putje toegevoegd. De platen werden gedurende 30 minuten geschud bij kamertemperatuur, en de absorptie van elk putje bij 595 nm werd onmiddellijk gelezen met een scanning multiwell spectrofotometer (Bio-Rad, iMarkTM microplaat reader). Belgique Om de concentratie van deferasirox moeten doden bepalen 50% van de cellen (IC 50) werden AGS, MKN-28, SNU-484 en SNU-638 cellen behandeld met 0, 1, 10, 50 en 100 uM deferasirox voor 24, 48 en 72 h. Deze resultaten werden gebruikt om de maag cellijn met de grootste gevoeligheid selecteren op deferasirox voor alle volgende experimenten.
Celcyclusanalyse
Na 24-uur incubatie van AGS cellen met 0, 10 en 100 uM deferasirox bij 37 ° C werden de cellen tweemaal met PBS gewassen, overnacht gefixeerd met 70% ethanol, gewassen met PBS en gekleurd met 50 ug /ml propidiumjodide (PI) met RNase A bij 50 ug /ml. Het DNA inhoud van de cellen (10.000 cellen /experimentele groep) werden geanalyseerd met een FACSCanto II stroomcytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) uitgerust met BD FACSDivaTM software (v6.1.3). De percentages van de celpopulaties in elke fase van de celcyclus (G1, S of G2 /M) werden berekend uit de DNA inhoud histogrammen.
Western blotanalyse
AGS cellen geïncubeerd met 0, 10 en 100 uM van deferasirox bij 37 ° C gedurende 24 uur. De cellen werden gewassen met PBS, geresuspendeerd in lysisbuffer [50 mM Tris (pH 7,5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCl, 20 ug /ml aprotinine, 20 ug /ml leupeptine en 1 mM fenylmethylsulfonylfluoride fluoride] en geplaatst op ijs gedurende 20 min. Eiwitten in de lysaten (20-30 ug) werden gescheiden op 10-15% SDS-polyacrylamide denaturerende gels en overgebracht op nitrocellulose membranen gedurende 90-120 min. Niet-specifieke bindingsplaatsen werden geblokkeerd met 5% magere melk gedurende 1 uur, en de membranen werden vervolgens overnacht geïncubeerd met primaire antilichamen (allemaal op een 1: 1000 verdunning). De antilichamen en de processen die werden gebruikt om te onderzoeken waren als volgt: anti-TFR1 en anti-ferroportin voor ijzermetabolisme; anti-p53, p27, p21, cycline A, cycline B, cycline D1, cycline E, CDK2, CDK4 en CDK6 de celcyclus; anti-pro-caspase 3, pro-caspase 8, pro-caspase 9 en BAX voor apoptose; anti-NDRG1 voor metastase; en anti-p-mTOR en c-myc. Immunoreactieve banden werden gevisualiseerd met ECL kit (Intron, Korea).
Statistische analyse
gegevens worden weergegeven als het gemiddelde ± SEM (foutbalken). Verschillen werden geanalyseerd met Student's t Electronics Test. P
waarden <. 0,05 werden als statistisch significant
Resultaten
Effect van deferasirox op de groei van maagkanker cellijnen
Het vermogen van deferasirox om de groei van de vier maagkanker cellijnen te remmen was bepaald door een MTT-proliferatie-assay. AGS, MKN-28, SNU-484 en SNU-638-cellen werden geïncubeerd met 0, 1, 10, 50 en 100 uM deferasirox bij 37 ° C gedurende 24, 48 of 72 uur. Deferasirox remde de groei van alle vier maagkanker cellijnen een dosis-afhankelijke en tijdsafhankelijke wijze (fig. 1a). Aangezien de IC 50 deferasirox van 72 uur was het laagst in AGS cellen (minder dan 10 pM) werden alle volgende experimenten uitgevoerd met behulp van deze cellen. Fig. 1 remmende effect van deferasirox op de groei van maagkanker cellijnen. een levensvatbaarheid van de cellen werd gemeten door de MTT-bepaling. AGS, MKN-28, SNU-484 en SNU-638-cellen werden geïncubeerd met 0, 1, 10, 50 en 100 uM deferasirox bij 37 ° C gedurende 24, 48 of 72 uur. Deferasirox behandeling resulteerde in een dosis-afhankelijke en tijdsafhankelijke remming van de groei in alle vier maagkanker cellijnen. b AGS-cellen werden gekweekt met 10 en 20 uM deferasirox alleen of in aanwezigheid van FeSO4 (100 uM) gedurende 48 uur. Het remmende effect van deferasirox werd omgekeerd door FeSO4 supplement
AGS-cellen werden gekweekt met 10 en 20 uM deferasirox alleen of in de aanwezigheid van FeSO 4 (100 uM) gedurende 48 uur. Het remmende effect van deferasirox werd teruggedraaid door FeSO 4 supplement (Fig 1b.).
Cell cycle analysis in AGS cellen
Iron uitputting induceert G1 /S arrestatie door het beïnvloeden van de expressie van kritische moleculen voor voortgang van de celcyclus zoals cycline D1 en p21 [13]. De effecten van deferasirox op de celcyclus werden bepaald door fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) gebruikt propidium jodide. AGS cellen werden geïncubeerd met 0, 10 en 100 uM deferasirox bij 37 ° C gedurende 24 uur. Zoals getoond in Fig. 2a, AGS behandeling van cellen met deferasirox gedurende 24 uur leidde tot een accumulatie van cellen in G1 fase in een dosis-afhankelijke wijze (41,8% bij 0 pM, 53,7% bij 10 uM en 77,2% bij 100 uM). Dit resultaat geeft aan dat deferasirox induceert G1 arrestatie. Western blot analyse van met celcyclus verwante proteïnen toonde aan dat deferasirox induceerde de opwaartse regulatie van p21, p27 en p53, en downregulatie van cycline D1, cycline B en CDK4 (fig. 2b). Deze resultaten suggereren dat de anti-proliferatieve effect van deferasirox wordt veroorzaakt door remming van de celcyclus. Fig. 2 Effect van deferasirox op de voortgang van de celcyclus in AGS-cellen. een AGS cellen geïncubeerd met 0, 10 en 100 uM deferasirox bij 37 ° C gedurende 24 uur. Voortgang van de celcyclus werd geanalyseerd met FACS. Deferasirox behandeling gedurende 24 uur leidde tot een dosisafhankelijke accumulatie van AGS cellen in G1 fase (41,8% bij 0 pM, 53,7% bij 10 uM en 77,2% bij 100 uM). b Western blotanalyse van met celcyclus verwante moleculen bleek dat deferasirox opgereguleerd p21, p27 en p53 en gedownreguleerd cycline D1, cycline B en CDK4
Effect van deferasirox ijzer- metabolisme en andere routes
voor ijzeropname in de cel circulerende ijzer-transferrine complexen binden aan de celoppervlak receptor TFR1. Iron verlaat via ferroportin, een ijzeren efflux pomp die wordt gereguleerd door hepcidin. In kankercellen, hebben TFR1 en hepcidin aangetoond opgereguleerd en ferroportin wordt gedownreguleerd is die tegelijkertijd leiden tot verhoogde concentraties van intracellulaire ijzer [3]. Het effect van deferasirox op ijzermetabolisme werd geëvalueerd door Western blot analyse van TFR1 en ferroportin. Het niveau van TFR1 verhoogd na 24 uur behandeling met deferasirox. Daarentegen ferroportin verminderde expressie (Fig. 3a). Deze resultaten zijn consistent met die van eerdere studies [10, 11]. Fig. 3 Effect van deferasirox op ijzermetabolisme en andere routes. een behandeling met deferasirox gedurende 24 uur resulteerde in een verhoogd niveau van TFR1 en een verlaagd niveau van ferroportin. b Deferasirox induceerde ook apoptose, opgereguleerd NDRG1 en gedownreguleerd p-mTOR en c-myc zoals bepaald door Western blot analyse
De effecten van deferasirox op apoptose werden vervolgens geëvalueerd door FACS en Western blot analyse van apoptose-gerelateerde eiwitten. Zoals getoond in Fig. 2a, AGS cellen behandeld met deferasirox gedurende 24 uur vertoonde een accumulatie van cellen in sub-G1 (apoptotische) fase (3,2% bij 0 uM, 3,3% bij 10 uM en 9,5% bij 100 uM). Bovendien deferasirox behandeling verminderde de expressie van pro-caspase 3, pro-caspase 8, en pro-caspase 9 en verhoogde de expressie van BAX (fig. 3b). NDRG1 staat bekend als een suppressor van celgroei en metastase. Deferasirox verhoogde het niveau van NDRG1. Bovendien, c-myc en fosfo-mTOR expressie werden afgenomen na 24 uur behandeling met deferasirox (fig. 3b). Deze resultaten suggereren dat deferasirox induceert apoptose remt metastasen op afstand, en onderdrukt de c-myc en mTOR trajecten.
Synergistische effect van deferasirox en cisplatine Belgique Om te beoordelen of deferasirox het effect van cisplatine verhoogt, AGS-cellen werden gekweekt met of zonder cisplatin en de levensvatbaarheid werd bepaald met de MTT assay. Behandeling met cisplatine gedurende 48 h verminderde het aantal levensvatbare cellen met een IC 50 van 5-10 pM. Te bepalen of deferasirox oefent een synergetisch effect met cisplatine werden AGS cellen behandeld met 0, 2,5, 5, 10 en 20 uM deferasirox alleen of in aanwezigheid van een vaste concentratie van cisplatine (5 uM) gedurende 48 uur. Zoals getoond in Fig. 4a, b, AGS cellen behandeld met deferasirox met cisplatine een significant grotere afname in cellulaire levensvatbaarheid in vergelijking met cellen behandeld met hetzij deferasirox of cisplatine alleen (P
< 0,01). Deze resultaten suggereren dat deferasirox verbetert cisplatin-gemedieerde remming van AGS celgroei. Fig. 4 Synergetisch effect van deferasirox en cisplatine. a, b AGS werden cellen behandeld met 0, 2,5, 5, 10 en 20 uM deferasirox, alleen of in aanwezigheid van een vaste concentratie van cisplatine (5 uM) gedurende 48 uur. AGS cellen behandeld met deferasirox met cisplatine een significante afname in cellulaire levensvatbaarheid in vergelijking met cellen behandeld met hetzij deferasirox of cisplatine alleen Belgique Om de moleculaire mechanismen effect te onderzoeken, werd Western-blotanalyse toegepast om de niveaus van verschillende moleculen in AGS beoordelen cellen behandeld met deferasirox (5 uM), cisplatine (5 uM), of beide. De combinatie van deferasirox en cisplatina resulteerde in de opregulatie van NDRG1, p21 en p53. Daarentegen Deze combinatie resulteerde in de downregulatie fosfo-mTOR, ferroportin en pro-caspase 9. Deze bevindingen suggereren dat deferasirox versterkt de antikanker effecten van cisplatina via verschillende wegen (fig. 5). Fig. 5 Moleculaire mechanismen van synergetisch effect. Western blot analyse werd uitgevoerd met lysaten van AGS cellen behandeld met deferasirox (5 uM), cisplatine (5 uM), of beide voor 24 uur. De combinatie van deferasirox en cisplatine geïnduceerde opwaartse regulatie van de NDRG1, p21 en p53, naast de downregulatie fosfo-mTOR, ferroportin en pro-caspase 9

Bespreking In deze studie hebben we vastgesteld dat deferasirox remt de proliferatie van maagkanker cellen. Deferasirox bleek ook G1 induceren; upregulate p21, p27 en p53 meningsuiting; en neerwaarts reguleren cycline D1, cycline B en CDK4 expressie. Deferasirox ook geïnduceerde apoptose, opgereguleerd NDRG1 en gedownreguleerd p-mTOR en c-myc. Deze resultaten suggereren dat deferasirox uitoefent antitumorale effecten bij maagkanker cellen via verschillende wegen. Specifiek, onze gegevens aan dat deferasirox verandert ijzermetabolisme, remt de voortgang van de celcyclus, beïnvloedt mTOR signalering en metastase routes en induceert apoptose. Bovendien lijkt deferasirox aan het anti-proliferatieve effect van cisplatina in de maag kankercellen potentieert.
IJzer is essentieel voor celoverleving maar ook cellulaire schade veroorzaakt door het genereren van reactieve zuurstofsoorten [14]. Hoewel het niveau van intracellulair ijzer strak gereguleerd in normale cellen, is het niveau van intracellulair ijzer verhoogd bij kankercellen door verhoogde expressie van TFR1 en hepcidin en verminderde expressie van ferroportin [3]. Aangezien teveel aan ijzer en veranderde ijzermetabolisme kan leiden tot tumor initiatie en groei worden ijzerchelatoren aangenomen dat veelbelovende anti-kankermiddelen. Verscheidene lijnen van bewijs ondersteunen het idee dat ijzerchelatoren potentiële anti-tumor therapieën. Eerst worden verhoogde intracellulaire ijzer bekend dat DNA-synthese bevorderen. Omdat ijzer is essentieel voor de activiteit van ribonucleotide reductase, een essentieel enzym voor DNA-synthese, ijzer speelt een belangrijke rol bij celproliferatie [15]. Daarom wordt verhoogd ijzer nodig om ribonucleotide reductase activiteit verhogen in neoplastische cellen. Ten tweede kan ijzeruitputting veroorzaken G1 /S arrestatie en apoptose [13]. Cycline D1 bindt aan CDK4 en CDK6, waardoor in G1 /S progressie verkregen via fosforylatie van retinoblastoma eiwit (RB). Deze fosforylering resulteert in het vrijkomen van de transcriptiefactor E2F van RB. Ijzeruitputting is bekend cycline D1 en CDK verminderde expressie. Ten derde kan overmatige cellulaire ijzer de Wnt signaling pathway, die bekend is van belang om tumorprogressie [16] te drijven.
We voerden deze studie onderzocht of deferasirox oefent antitumorale effecten in het kader van maagkanker. We kozen voor deferasirox uit de vele in de handel verkrijgbare ijzerchelatoren vanwege de orale beschikbaarheid en de relatief lage toxiciteit. Hoewel de exacte mechanismen waarmee deferasirox oefent zijn anti-kanker effecten worden nog onderzocht veronderstelden we dat deferasirox remt celcyclusprogressie gebaseerd op eerdere studies [11, 17]. We vonden dat deferasirox geïnduceerd G1 arrestatie door opwaarts reguleren van p21 en p27 en neerwaarts reguleren van cycline D1 en CDK4. Deze bevindingen ondersteunen onze hypothese dat deferasirox oefent zijn anti-neoplastische effecten door het reguleren celcyclus.
Ijzerchelatoren kan de expressie van NDRG1, een bekende metastatische suppressor induceren in een verscheidenheid aan menselijke kankers [18-20]. Het mechanisme waardoor NDRG1 onderdrukt metastase dit moment niet duidelijk, hoewel NDRG1 is aangetoond dat celmigratie en invasie remmen door het moduleren van de expressie van een aantal adhesiemoleculen [21]. NDRG1 expressie is aangetoond significant lager in kankerweefsel opzichte van aangrenzend normaal weefsel zijn; Bovendien is NDRG1 expressie aangetoond omgekeerd gecorreleerd met de uitzaaiing van bepaalde kankers, zoals prostaatkanker en colorectale kanker [22, 23]. Er zijn echter afwijkende resultaten verkregen met betrekking tot een mogelijke associatie van NDRG1 met de progressie van de tumor. Interessant, NDRG heeft een bewezen rol in de controle van de celcyclus. Specifiek wordt NDRG1 expressie opgereguleerd via p53-gemedieerde inductie en NDRG1 kunnen induceren G1 /S arrestatie door opwaarts reguleren van p21 [24]. We vonden dat deferasirox upreguleert de expressieniveaus van NDRG1, p53 en p21. Hoewel we niet celmigratie testen hebben onderzocht of metastase in vivo in deze studie, onze bevindingen suggereren dat deferasirox staat zijn om tumorgroei en metastase remmen. We veronderstellen dat het mechanisme waardoor deferasirox oefent zijn anti-tumor effecten NDRG1 inhouden.
Deferasirox is aangetoond dat het cytotoxisch effect van cisplatine bij slokdarmkanker cellijnen verbeteren. Bovendien, cisplatin-resistente cellen behandeld met een lage concentratie van deferasirox (5 uM) in combinatie met cisplatine een significante vermindering van cellulaire levensvatbaarheid in vergelijking met cellen behandeld met deferasirox of cisplatine alleen [10]. We vonden dat de combinatie van deferasirox (5 uM) en cisplatine (5 uM) induceerde een significante afname in cellulaire levensvatbaarheid. Bovendien is deze gecombineerde behandeling resulteerde in de opregulatie van NDRG1, p21 en p53 en downregulatie fosfo-mTOR. Onze resultaten daarom suggereren dat deferasirox potentieel kunnen bijdragen aan de anti-kanker effect van cisplatine bij maagkanker cellen. Bovendien kan de p53-p21-NDRG1 en mTOR routes betrokken bij het synergetische effect van deferasirox met cisplatine.
Deze studie had een aantal beperkingen. Ten eerste, we beperken ons onderzoek aan maagkanker cellijnen en geen in vivo-experimenten niet uitvoeren. Daarnaast is de expressie van celcyclus verwante proteïnen werd beoordeeld met Western blotting. Meer gedetailleerde informatie kan zijn verkregen door immunoprecipitatie en kinase-assays. Het antitumoreffect van deferasirox te bepalen, kan voor aanvullende experimenten ook in vivo onderzoek vereist. Toch is dit de eerste studie om de antitumorale effecten van deferasirox tegen maagkanker onderzoeken.

Conclusie Concluderend vonden we dat deferasirox geïnduceerde antitumorale effecten bij maagkanker cellen via verschillende wegen. In het bijzonder, deferasirox opgereguleerd NDRG1, remde voortgang van de celcyclus, neerwaarts gereguleerd mTOR en c-myc expressie en geïnduceerde apoptose. Bovendien deferasirox versterkt de antikanker effecten van cisplatina. Hoewel de effectiviteit van deferasirox moet worden bevestigd in de toekomst studies, onze resultaten geven aan dat deferasirox is een veelbelovende anti-kanker therapeutisch middel en kan ook een effectieve chemotherapie sensibiliserend is.
Verklaringen
Dankwoord
Dit werk werd ondersteund door . het onderzoeksfonds van Hanyang University (hy-2013-MC)
Open AccessThis artikel wordt gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution 4.0 International License (http:. //creativecommons org /licenties /door /4. 0 /), die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elk medium toestaat, mits u de juiste krediet te geven aan de oorspronkelijke auteur (s) en de bron, een link naar de Creative Commons-licentie, en aangeven of wijzigingen zijn aangebracht. De Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creativecommons org /publicdomain /zero /1 0 /) van toepassing op de ter beschikking gestelde in dit artikel, tenzij anders vermeld data
Competing. belangen
de auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. bijdragen
Authors '
JC en YL deel aan het ontwerp en de analyse van het huidige onderzoek. JC schreef de krant. JK voerde de moleculaire studies. YW, JU, BP bijgedragen de samenstelling van het papier. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het manuscript.

• Gelijktijdige composiet bijnieren feochromocytoom, meerdere maag stromale tumoren en pseudohermaphrodism bij een patiënt met de ziekte van von Recklinghausens
• Iris metastase van maagdarmkanker