Le potentiel de déférasirox comme une modalité thérapeutique dans le cancer gastrique

Le potentiel de déférasirox comme une modalité thérapeutique dans le cancer gastrique
Résumé de l'arrière-plan
Le fer est un élément crucial pour la prolifération cellulaire, la croissance et le métabolisme. Cependant, un excès de fer et le métabolisme du fer modifié sont tous deux associés à l'initiation de la tumeur et la croissance tumorale. Le déférasirox est un chélateur du fer par voie orale. Bien que certaines études ont indiqué que le déférasirox est un candidat prometteur pour les thérapies anti-cancer, son efficacité contre le cancer gastrique n'a pas encore été déterminée. Cette étude a été menée afin de déterminer si le déférasirox exerce des effets anti-tumoraux dans des lignées cellulaires de cancer gastrique et si le déférasirox et le cisplatine agissent en synergie
. Méthodes
Quatre __gVirt_NP_NNS_NNPS<__ lignées cellulaires de cancer gastrique humain (AGS, MKN-28, SNU-484, et SNU-638) ont été traités avec différentes concentrations de déférasirox pour déterminer l'IC 50 pour chaque lignée cellulaire. Les effets de la deferasirox sur le cycle cellulaire ont été évalués par cytométrie de flux, et les effets de deferasirox sur le métabolisme du fer, le cycle cellulaire et l'apoptose a été évaluée par Western Blot. Les résultats pour déterminer si deferasirox améliore l'effet du cisplatine, les cellules AGS ont été cultivées en présence et en l'absence de cisplatine.
Déférasirox ont inhibé la prolifération de toutes les lignées cellulaires de cancer gastrique comme évalué par des dosages de MTT. Etant donné que le circuit intégré 50 deferasirox était la plus faible (inférieure à 10 pm) dans les cellules AGS, les expériences suivantes ont été réalisées dans cette ligne. Déférasirox upregulated récepteur de la transferrine 1 expression et diminution de l'expression de la ferroportine. En outre, le déférasirox induite G1 arrestation; p21 upregulated, p27, et l'expression de p53; et la cycline régulée à la baisse D1, cycline B et l'expression de la CDK4. En outre, l'apoptose induite par le déférasirox, upregulated N-myc
aval gène régulé 1 (NDRG1), et downregulated p-mTOR et c-myc expression. On a également constaté agir en synergie avec le cisplatine.

Conclusions Ces résultats suggèrent que deferasirox peut exercer des effets antitumoraux dans le contexte du cancer gastrique. Le déférasirox affecte un certain nombre de différentes voies et molécules; par exemple, régule à la hausse l'expression deferasirox NDRG1, inhibe le cycle cellulaire, la régulation négative de mTOR et c-myc d'expression, et induit l'apoptose. De plus, semble deferasirox pour potentialiser les effets anti-cancer du cisplatine. Bien que l'efficacité du déférasirox reste à tester dans les études futures, les résultats présentés ici indiquent que le déférasirox est un nouvel agent prometteur thérapeutique anti-cancer.
Mots-clés
déférasirox Estomac néoplasme cisplatine Contexte
Le cancer gastrique est l'un des les principales causes de décès liés au cancer en Corée [1]. Bien que les patients montrent de cancer de l'estomac d'excellents résultats si le cancer est détecté tôt, les cancers gastriques avancés et inopérables récurrents sont toujours associés à faible taux de survie. Au cours des dernières décennies, des améliorations substantielles dans les agents chimiothérapeutiques ont amélioré la survie dans le cancer gastrique avancé. Récemment, la survie globale a été significativement prolongée chez les patients à un stade avancé du cancer de jonction gastrique ou gastro-oesophagien HER2-positif par le traitement avec le trastuzumab (HER-2 anticorps monoclonal) en combinaison avec la chimiothérapie conventionnelle [2]. Cependant, la survie globale était seulement 13,8 mois. Par conséquent, de nouveaux agents sont nécessaires de toute urgence.
Le fer est un élément essentiel pour la prolifération cellulaire, la croissance et le métabolisme. Cependant, un excès de fer et le métabolisme du fer modifié ont été associés à l'initiation de la tumeur et la croissance tumorale [3]. Des études épidémiologiques ont montré qu'une consommation élevée de fer est associée à un risque accru de cancer colorectal [4]. De nombreuses cellules cancéreuses modifient le métabolisme du fer, car les cellules malignes ont besoin de plus de fer que les cellules normales. Pour augmenter le pool de fer labile, les cellules cancéreuses ont été montré pour upregulate l'expression du récepteur de la transferrine 1 (TFR1) et hepcidine, en plus de la régulation négative de l'expression de la ferroportine [3].
Déférasirox (Exjade®), un fer à repasser tridenté orale ( Fe 3+) chélateur, est rapidement absorbé par l'intestin et a une demi-vie relativement longue (8 à 16 h). Ainsi, une administration quotidienne peut atteindre des niveaux soutenus de médicaments en circulation suffisantes pour le balayage du fer plasmatique non lié à la transferrine. Bien que le déférasirox a été associé à des effets indésirables tels que les troubles gastro-intestinaux, éruptions cutanées, et la toxicité rénale, il est relativement bien toléré. Par conséquent, le déférasirox est actuellement chélateur du fer le plus couramment utilisé pour le traitement de la maladie de surcharge en fer [5].
Récemment, plusieurs études ont étudié le potentiel de déférasirox comme agent anti-néoplasique. Deferasirox a été rapportée inhiber l'activité de NF-kB dans des échantillons sanguins provenant de patients atteints de syndrome myélodysplasique et la leucémie à cellules lignes [6]; Par ailleurs, deferasirox a été également montré pour réprimer la mTOR dans les cellules de leucémie myéloïde [7]. En ce qui concerne les données cliniques, un rapport de cas a montré que le traitement de déférasirox ont obtenu une rémission complète chez les patients avec une chimiothérapie réfractaire leucémie monocytaire aiguë [8]. En outre, l'analyse post hoc d'un essai multicentrique a révélé que le déférasirox a amélioré les paramètres hématologiques chez les patients atteints de syndrome myélodysplasique [9]. À l'heure actuelle, la plupart des rapports de deferasirox en tant qu'agent anti-néoplasique ont été dans les hémopathies malignes; seules quelques études ont porté sur des tumeurs solides. Récemment, deferasirox a été montré pour inhiber la croissance des cellules du poumon et cancer de l'oesophage à la fois in vitro et in vivo [10, 11]. Cependant, l'effet du déférasirox sur le cancer gastrique n'a pas encore été déterminé, et le mécanisme par lequel exerce déférasirox ses effets anti-tumoraux reste mal comprise. Par conséquent, cette étude a été menée afin de déterminer si le déférasirox exerce des effets anti-tumoraux sur des lignées cellulaires de cancer gastrique et également si le déférasirox agit en synergie avec le cisplatine. Quatre lignées cellulaires de cancer gastriques humaines
Méthodes
culture cellulaire (AGS, MKN-28, SNU-484, et SNU-638) ont été obtenus à partir de la cellule coréenne Bank Line. Toutes les cellules ont été cultivées dans un milieu RPMI 1640 contenant 10% de sérum et d'antibiotiques de foetus de bovin (100 U /ml de pénicilline et 100 ug /ml de streptomycine) dans un humidifiée à 5% de CO 2 incubateur à 37 ° C. Les réactifs et
anticorps de déférasirox (Exjade®) a été offert par Novartis (Bâle, Suisse). Chèvre polyclonal anti-NDRG1 (N-myc en aval
gène régulé 1) (n ° de catalogue. Ab37897) et polyclonal de lapin anti-ferroportine (catalogue n °. Ab85370) les anticorps ont été achetés auprès de Abcam (Cambridge, UK). Des anticorps monoclonaux anti-TFR1 souris (catalogue no. 136800) ont été obtenues auprès de Life Technologies (Carlsbad, CA, USA), et FeSO 4 a été acheté auprès de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, cycline A, cycline B, cycline D1, cycline E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspase 3, et les anticorps BAX ont été achetés auprès de Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR et pro-caspase 8 anticorps ont été obtenus à partir de Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Inhibition de la croissance test
inhibition de la croissance a été mesurée avec MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-yl] -2,5- diphényltétrazolium) comme décrit précédemment [12]. En bref, on a ensemencé des cellules (2 x 10 3 cellules /puits) dans 96 puits de plaques de microtitrage (Nunc, Roskilde, Danemark) et on fait incuber à 37 ° C pendant 24, 48 ou 72 heures. solution de MTT (50 ul) de Sigma (2 mg /ml dans du PBS) ont été ajoutés à chaque puits et les plaques ont été incubées pendant 4 h supplémentaires à 37 ° C. Après cette incubation, la solution de MTT a été éliminé par aspiration. Pour solubiliser les cristaux de formazan formés dans des cellules viables, à 200 ul de DMSO ont été ajoutés à chaque puits. Les plaques ont été agitées pendant 30 min à température ambiante, et l'absorbance de chaque puits à 595 nm a été lue immédiatement avec un spectrophotomètre à balayage multipuits (Bio-Rad, iMarkTM lecteur de microplaques).
Pour déterminer la concentration du déférasirox nécessaire pour tuer 50% des cellules (IC 50), les cellules AGS, MKN-28, SNU-484 et SNU-638 ont été traitées avec 0, 1, 10, 50 et 100 uM de deferasirox à 24, 48 et 72 h. Ces résultats ont été utilisés pour sélectionner la lignée cellulaire gastrique avec la plus grande sensibilité au déférasirox pour toutes les expériences ultérieures. Analyse du cycle cellulaire
Après 24 heures d'incubation des cellules AGS avec 0, 10, et 100 uM de déférasirox à 37 ° C, les cellules ont été lavées deux fois avec du PBS, fixées pendant une nuit avec 70% d'éthanol, on l'a lavé avec du PBS et colorées avec 50 pg /ml d'iodure de propidium (PI) contenant de la RNase A à 50 pg /ml. Les teneurs en ADN des cellules (10.000 cellules /groupe expérimental) ont été analysées en utilisant un flux FACSCanto II cytomètre (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) équipé du logiciel BD FACSDivaTM (v6.1.3). Les pourcentages des populations de cellules dans chaque phase du cycle cellulaire (G1, S ou G2 /M) ont été calculées à partir des histogrammes de la teneur en ADN.
Analyse par Western blot
cellules AGS ont été incubées avec 0, 10 et 100 pM de deferasirox à 37 ° C pendant 24 heures. Les cellules ont été lavées avec du PBS, remises en suspension dans du tampon de lyse [50 mM de Tris (pH 7,5), 1% de NP-40, 2 mM d'EDTA, 10 mM de NaCl, 20 ug /ml d'aprotinine, 20 pg /ml de leupeptine et 1 mM de phénylméthylsulfonyle fluorure], et placé sur de la glace pendant 20 min. Les protéines présentes dans les lysats (20 à 30 ug) ont été réglées sur 10 à 15% de SDS-polyacrylamide gels dénaturants et transférés sur des membranes de nitrocellulose pendant 90 à 120 min. Les sites de liaison non spécifiques ont été bloqués avec 5% de lait écrémé pendant 1 h, et les membranes ont été ensuite mises en incubation pendant une nuit avec des anticorps primaires (tous à une dilution 1: 1000). Les anticorps et les processus connexes qui ont été utilisés pour étudier étaient les suivants: anti-TFR1 et anti-ferroportine pour le métabolisme du fer; l'anti-p53, p27, p21, cycline A, cycline B, cycline D1, la cycline E, la CDK2, de la CDK4 et CDK6 pour le cycle cellulaire; anti-pro-caspase 3, pro-caspase 8, pro-caspase 9 et BAX pour l'apoptose; anti NDRG1 des métastases; et anti-p-mTOR et c-myc. Les bandes immunoréactives ont été visualisées avec un kit ECL (Intron, Corée).
Analyse statistique
Les données sont présentées en tant que moyen MEB ± (barres d'erreur). Les différences ont été analysées avec t
test de Student. P
valeurs <. Résultats
Effet de 0,05 ont été considérées comme statistiquement significative du déférasirox sur la croissance des lignées cellulaires de cancer gastrique
La capacité du déférasirox à inhiber la croissance des quatre lignées cellulaires de cancer gastrique a été déterminée par un test MTT de prolifération. les cellules AGS, MKN-28, SNU-484 et SNU-638 ont été incubées avec 0, 1, 10, 50 et 100 uM déférasirox à 37 ° C pendant 24, 48 ou 72 heures. Deferasirox a inhibé la croissance de l'ensemble des quatre lignées cellulaires de cancer gastrique dans un (Fig. 1a), dépendante de la dose et de manière dépendante du temps. Depuis l'IC 50 du déférasirox à 72 h était le plus bas dans les cellules AGS (moins de 10 uM), toutes les expériences ultérieures ont été effectuées à l'aide de ces cellules. Figue. 1 Effet inhibiteur de deferasirox sur la croissance de lignées cellulaires de cancer gastrique. une viabilité cellulaire a été mesurée par le test MTT. les cellules AGS, MKN-28, SNU-484 et SNU-638 ont été incubées avec 0, 1, 10, 50 et 100 uM de deferasirox à 37 ° C pendant 24, 48 ou 72 heures. deferasirox traitement a entraîné une inhibition de la croissance dépendante de la dose et dépendante du temps dans les quatre lignées cellulaires de cancer gastrique. b cellules AGS ont été cultivées avec 10 et 20 uM de deferasirox soit seul, soit en présence de FeSO4 (100 uM) pendant 48 h. L'effet inhibiteur de deferasirox a été inversée par complément FeSO4
cellules AGS ont été cultivées avec 10 et 20 uM de deferasirox soit seul, soit en présence de FeSO 4 (100 uM) pendant 48 h. L'effet inhibiteur du déférasirox a été infirmée par FeSO 4 supplément (Fig. 1b). Analyse du cycle cellulaire
dans les cellules AGS
déplétion en fer induit G1 /S arrestation en affectant l'expression des molécules critiques pour la progression du cycle cellulaire tels que la cycline D1 et p21 [13]. Les effets de la deferasirox sur le cycle cellulaire ont été déterminées par un tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) en utilisant l'iodure de propidium. les cellules AGS ont été incubées avec 0, 10 et 100 uM de deferasirox à 37 ° C pendant 24 h. Comme on le voit sur la Fig. 2a, le traitement des cellules AGS avec deferasirox pendant 24 heures a conduit à une accumulation de cellules en phase G1 d'une manière dépendante de la dose (41,8% à 0 uM 53,7% à 10 uM, et de 77,2% à 100 uM). Ce résultat indique que le déférasirox induit G1 arrestation. Analyse par Western blot des protéines liées au cycle cellulaire a montré que le déférasirox a induit la surexpression de p21, p27, et p53, et la régulation négative de la cycline D1, cycline B et CDK4 (fig. 2b). Ces résultats suggèrent que l'effet anti-prolifératif de deferasirox est due à l'inhibition du cycle cellulaire. Figue. 2 Effet du deferasirox sur la progression du cycle cellulaire dans les cellules AGS. un cellules AGS ont été incubées avec 0, 10 et 100 uM de deferasirox à 37 ° C pendant 24 h. la progression du cycle cellulaire a été analysé par FACS. traitement deferasirox pendant 24 heures a conduit à une accumulation dépendante de la dose de cellules AGS en phase G1 (de 41,8% à 0 uM 53,7% à 10 uM, et de 77,2% à 100 uM). b analyse par Western blot de molécules liées au cycle cellulaire a montré que déférasirox p21, p27 upregulated et p53 et downregulated cycline D1, cycline B et CDK4 de Effet de déférasirox sur le métabolisme du fer et d'autres voies
Pour l'absorption du fer dans le cellule de circulation des complexes fer-transferrine se lient au récepteur de surface cellulaire TFR1. Fer sort par la ferroportine, une pompe à efflux de fer qui est réglementée par l'hepcidine. Dans les cellules cancéreuses, et TFR1 hepcidine se sont révélés être régulés positivement ferroportine et est régulée à la baisse, ce qui conduit à une augmentation cumulative des concentrations en fer intracellulaires [3]. L'effet du déférasirox sur le métabolisme du fer a été évaluée par analyse par Western blot de TFR1 et ferroportine. Le niveau de TFR1 augmenté après 24 h de traitement avec déférasirox. En revanche, l'expression de la ferroportine a diminué (Fig. 3a). Ces résultats sont cohérents avec ceux des études précédentes [10, 11]. Figue. 3 Effet de deferasirox sur le métabolisme du fer et d'autres voies. un traitement par deferasirox pendant 24 heures a donné lieu à une augmentation du niveau TFR1 et une diminution du niveau de la ferroportine. b déférasirox l'apoptose induite aussi, upregulated NDRG1 et régulée à la baisse p-mTOR et c-myc évaluée par analyse par Western blot
Les effets de déférasirox sur l'apoptose ont ensuite été évalués par FACS et analyse par Western blot des protéines liées à l'apoptose. Comme on le voit sur la Fig. 2a, les cellules AGS traitées avec deferasirox pendant 24 heures présentaient une accumulation de cellules en sous-G1 (apoptose) phase (0% à 3,2 uM, 3,3% à 10 uM, et de 9,5% à 100 pm). En outre, le traitement de déférasirox a diminué l'expression de la pro-caspase 3, pro-caspase 8, et pro-caspase 9 et a augmenté l'expression de Bax (Fig. 3b). NDRG1 est connu pour être un suppresseur de croissance cellulaire et les métastases. Le déférasirox a augmenté le niveau de NDRG1. En outre, c-myc et l'expression phospho-mTOR ont diminué après 24 h de traitement avec deferasirox (Fig. 3b). Ces résultats suggèrent que le déférasirox induit l'apoptose, inhibe les métastases à distance, et supprime les c-myc et mTOR voies.
Effet synergique du déférasirox et de cisplatine
Pour évaluer si le déférasirox pourrait renforcer l'effet du cisplatine, les cellules ont été cultivées avec AGS ou sans cisplatine et leur viabilité a été déterminée en utilisant le test MTT. Le traitement avec le cisplatine pendant 48 heures a réduit le nombre de cellules viables, avec une CI 50 de 5 à 10 uM. Pour déterminer si deferasirox exerce un effet synergique avec le cisplatine, les cellules AGS ont été traitées avec 0, 2,5, 5, 10 et 20 uM de deferasirox soit seul, soit en présence d'une concentration fixe de cisplatine (5 uM) pendant 48 h. Comme on le voit sur la Fig. 4a, b, les cellules AGS traités avec déférasirox et le cisplatine a montré une diminution significativement plus importante de la viabilité cellulaire par rapport aux cellules traitées avec le déférasirox ou le cisplatine seul (P
< 0,01). Ces résultats suggèrent que l'inhibition améliore deferasirox cisplatine induite par la croissance de cellules AGS. Figue. 4 Effet synergique du déférasirox et de cisplatine. a, b les cellules AGS ont été traitées avec 0, 2,5, 5, 10 et 20 uM de deferasirox, soit seul, soit en présence d'une concentration fixe de cisplatine (5 uM) pendant 48 h. les cellules AGS traitées par le déférasirox et le cisplatine ont montré une diminution significative de la viabilité cellulaire par rapport aux cellules traitées avec le déférasirox ou le cisplatine seul
Pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents cet effet, l'analyse Western blot a été utilisé pour évaluer les niveaux de diverses molécules dans AGS les cellules traitées avec deferasirox (5 uM), le cisplatine (5 uM), ou les deux. La combinaison du déférasirox et de cisplatine a abouti à la surexpression de NDRG1, p21 et p53. En revanche, cette combinaison a abouti à la régulation négative de phospho-mTOR, ferroportine et pro-caspase 9. Ces résultats suggèrent que le déférasirox potentialise les effets anti-cancer du cisplatine par différentes voies (Fig. 5). Figue. 5 Mécanismes moléculaires de l'effet synergique. L'analyse Western blot a été réalisée avec des lysats de cellules traitées avec AGS deferasirox (5 uM), le cisplatine (5 uM), ou les deux pendant 24 h. La combinaison du déférasirox et de cisplatine a induit la surexpression de NDRG1, p21 et p53, en plus de la régulation négative de phospho-mTOR, ferroportine et pro-caspase 9
Discussion
Dans cette étude, nous avons constaté que inhibe déférasirox la prolifération des cellules cancéreuses gastriques. Le déférasirox a également été trouvé pour induire G1 arrestation; upregulate p21, p27, et l'expression de p53; et réguler négativement la cycline D1, la cycline B et l'expression de la CDK4. Le déférasirox a également induit l'apoptose, NDRG1 upregulated et downregulated p-mTOR et c-myc. Ces résultats suggèrent que deferasirox exerce des effets anti-tumoraux dans les cellules cancéreuses gastriques par différentes voies. En particulier, nos données indiquent que deferasirox modifie le métabolisme du fer, inhibe la progression du cycle cellulaire, affecte la signalisation de mTOR et les voies de métastases, et induit l'apoptose. De plus, semble deferasirox pour potentialiser l'effet anti-prolifératif du cisplatine dans des cellules cancéreuses de l'estomac.
Le fer est essentiel à la survie cellulaire, mais peut également causer des dommages cellulaires en générant des espèces réactives de l'oxygène [14]. Bien que le taux de fer intracellulaire est étroitement régulée dans les cellules normales, le taux de fer intracellulaire est élevée dans les cellules cancéreuses en raison de l'expression accrue de l'hepcidine et TFR1 et réduit l'expression de la ferroportine [3]. Depuis l'excès de fer et le métabolisme du fer modifié peut conduire à l'initiation de la tumeur et la croissance, chélateurs du fer sont soupçonnés d'être prometteurs agents anti-cancéreux. Plusieurs preuves soutiennent l'idée que les chélateurs de fer sont thérapeutiques potentiels anti-tumorales. En premier lieu, l'augmentation des taux de fer intracellulaire sont connus pour favoriser la synthèse de l'ADN. Étant donné que le fer est essentiel pour l'activité de ribonucléotide réductase, une enzyme clé pour la synthèse de l'ADN, le fer joue un rôle important dans la prolifération cellulaire [15]. Par conséquent, le fer accru est nécessaire pour augmenter l'activité de ribonucléotide réductase dans des cellules néoplasiques. Deuxièmement, l'épuisement de fer peut causer G1 /S arrestation et induire l'apoptose [13]. Se lie à la cycline D1 CDK4 et CDK6, ce qui entraîne G1 /S par l'intermédiaire de la progression de la phosphorylation de la protéine rétinoblastome (RB). Cette phosphorylation entraîne à son tour dans la libération de l'E2F facteur de transcription de RB. l'appauvrissement en fer est connu pour diminuer la cycline D1 et l'expression de CDK. Troisièmement, le fer cellulaire excessive peut conduire la voie de signalisation Wnt, qui est connu pour être important pour la progression tumorale [16].
Nous avons effectué cette étude pour déterminer si le déférasirox exerce des effets anti-tumoraux dans le contexte du cancer gastrique. Nous avons choisi déférasirox sur les nombreux chélateurs de fer disponibles dans le commerce en raison de sa disponibilité orale et une toxicité relativement faible. Bien que les mécanismes précis par lesquels déférasirox exerce ses effets anti-cancer sont encore en cours d'enquête, nous avons supposé que le déférasirox inhibe la progression du cycle cellulaire basée sur des études antérieures [11, 17]. Nous avons constaté que le déférasirox induite G1 arrestation par upregulating p21 et p27 et la régulation négative de la cycline D1 et CDK4. Ces résultats confirment notre hypothèse selon laquelle deferasirox exerce ses effets antinéoplasiques en régulant la progression du cycle cellulaire. Le plus chélateurs de fer peut induire l'expression de NDRG1, un suppresseur métastatique connu, dans une variété de cancers humains [18-20]. Le mécanisme par lequel NDRG1 supprime les métastases sont actuellement pas claire, bien que NDRG1 a été montré pour inhiber la migration et l'invasion cellulaire par la modulation de l'expression d'un certain nombre de molécules d'adhésion [21]. l'expression NDRG1 a été montré significativement plus faible dans le tissu cancéreux par rapport au tissu normal adjacent; En outre, l'expression NDRG1 a été montré à être inversement corrélée avec les métastases de certains cancers, tels que la prostate et le cancer colorectal [22, 23]. Cependant, les résultats discordants ont été obtenus en ce qui concerne une éventuelle association de NDRG1 avec la progression de la tumeur. Il est intéressant de NDRG a un rôle démontré dans le contrôle du cycle cellulaire. Plus précisément, l'expression NDRG1 est régulée positivement par induction médiée par p53, et NDRG1 peut également induire G1 /S arrestation par upregulating p21 [24]. Nous avons constaté que déférasirox upregulates les niveaux de NDRG1, p53 et p21 expression. Bien que nous n'osons la migration cellulaire ou d'enquêter sur les métastases in vivo dans la présente étude, nos résultats suggèrent que le déférasirox peut être capable d'inhiber la croissance tumorale et les métastases. Nous croyons que le mécanisme par lequel deferasirox exerce ses effets anti-tumoraux peuvent impliquer NDRG1. Le plus Déférasirox a été montré pour augmenter l'effet cytotoxique de cisplatine dans des lignées cellulaires de cancer de l'œsophage. En outre, les cellules résistantes au cisplatine traitées avec une faible concentration de deferasirox (5 uM) en association avec le cisplatine ont montré une réduction significative de la viabilité cellulaire par rapport aux cellules traitées avec le cisplatine seul ou deferasirox [10]. Nous avons constaté que la combinaison de deferasirox (5 uM) et de cisplatine (5 uM) a induit une diminution significative de la viabilité cellulaire. En outre, ce traitement combiné a entraîné la surexpression de NDRG1, p21 et p53 et la régulation négative de phospho-mTOR. Nos résultats, par conséquent, donnent à penser que deferasirox peut potentiellement augmenter l'effet anticancéreux de la cisplatine dans des cellules cancéreuses gastriques. En outre, les p53-NDRG1-p21 et mTOR voies peuvent être impliqués dans l'effet synergique du déférasirox avec le cisplatine.
Cette étude a eu un certain nombre de limites. Tout d'abord, nous avons limité notre étude à des lignées cellulaires de cancer gastrique et ne pas effectuer d'expériences in vivo. En outre, l'expression des protéines liées au cycle cellulaire a été évaluée que par Western Blot. Des informations plus détaillées auraient pu être obtenues par immunoprécipitation et kinases essais. Pour déterminer l'effet anti-tumoral du déférasirox, des expériences supplémentaires, y compris dans l'étude in vivo seraient nécessaires. Néanmoins, cette étude est la première à étudier les effets anti-tumoraux de déférasirox contre le cancer gastrique.
Conclusions
En conclusion, nous avons trouvé que les effets anti-tumoraux déférasirox induite dans les cellules de cancer gastrique par diverses voies. Plus précisément, NDRG1 deferasirox régulés à la hausse, la progression du cycle cellulaire inhibée, régulée à la baisse mTOR et c-myc, l'expression et l'apoptose induite. En outre, le déférasirox potentialisé les effets anti-cancer du cisplatine. Bien que l'efficacité du déférasirox doit être confirmée dans les études futures, nos résultats indiquent que le déférasirox est un agent thérapeutique anti-cancer prometteuse et peut également être un sensibilisateur de chimiothérapie efficace. Déclarations de
Remerciements
Ce travail a été soutenu par . le fonds de recherche de l'Université Hanyang (HY-2013-MC)
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concurrence. intérêts
les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts. les contributions de
auteurs
JC et YL ont participé à la conception et l'analyse de la présente recherche. JC a écrit le papier. JK a réalisé les études moléculaires. YW, JU, BP a contribué dans la composition du papier. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit.

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