Potentialet i deferasirox som en ny terapeutisk modalitet i gastrisk kræft

Potentialet i deferasirox som en ny terapeutisk modalitet i mavekræft
Abstract
Baggrund
Jern er et afgørende element for celledeling, vækst og stofskifte. Men overskydende jern og ændret jern metabolisme er begge forbundet med tumor initiering og tumorvækst. Deferasirox er en oral jernkelator. Selv om nogle undersøgelser har vist, at deferasirox er en lovende kandidat til kræftbehandlinger, dets effektivitet mod mavekræft er endnu ikke fastlagt. Denne undersøgelse blev udført for at bestemme, om deferasirox udøver anti-tumor effekt i gastrisk cancer cellelinjer, og hvorvidt deferasirox og cisplatin virker synergistisk.
Metoder
Fire humane gastrisk cancer cellelinjer (AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638) blev behandlet med forskellige koncentrationer af deferasirox at bestemme IC 50 for hver cellelinie. Virkningerne af deferasirox på cellecyklussen blev vurderet ved flowcytometri, og virkningerne af deferasirox på jern metabolisme, cellecyklussen, og apoptose blev vurderet ved Western blotting. For at bestemme om deferasirox øger virkningen af ​​cisplatin, AGS celler blev dyrket i nærvær og fravær af cisplatin.
Resultater Salg Deferasirox inhiberede proliferation af alle gastriske cancercellelinier som vurderet ved MTT-assays. Da IC 50 af deferasirox var den laveste (under 10 uM) i AGS celler, blev udført efterfølgende eksperimenter i denne linje. Deferasirox opreguleres transferrin receptor 1-ekspression og nedsat ferroportin ekspression. Desuden deferasirox induceret G1 anholdelse; opreguleret p21, p27, og p53 udtryk; og nedreguleret cyclin D1, cyclin B, og CDK4 ekspression. Endvidere deferasirox induceret apoptose, opreguleret N-myc
nedstrøms reguleret gen 1 (NDRG1), og nedreguleret p-mTOR og c-myc ekspression. Det blev også vist sig at virke synergistisk med cisplatin.
Konklusioner
Vores resultater antyder, at deferasirox kan udøve antitumorvirkninger i forbindelse med mavekræft. Deferasirox påvirker en række forskellige veje og molekyler; for eksempel opregulerer deferasirox NDRG1 ekspression, hæmmer cellecyklussen, nedregulerer mTOR og c-myc-ekspression, og inducerer apoptose. Derudover synes deferasirox at potensere den anti-cancer effekter af cisplatin. Selvom effekten af ​​deferasirox stadig skal testes i fremtidige undersøgelser, hvis resultater præsenteres her viser, at deferasirox er en lovende ny anti-cancer terapeutisk middel.
Nøgleord
Deferasirox Mave neoplasma Cisplatin Baggrund
mavekræft er en af de førende årsager til kræft dødsfald i Korea [1]. Selv patienter med mavekræft viser fremragende resultater, hvis kræften opdages tidligt, er ubrugeligt avancerede og tilbagevendende gastrisk kræft stadig er forbundet med dårlig overlevelse. I de seneste årtier, har væsentlige forbedringer i kemoterapeutika forbedret overlevelse i fremskreden mavekræft. For nylig blev den samlede overlevelse signifikant forlænget hos patienter med HER2-positiv fremskreden gastrisk eller gastro-øsofageal junction kræft ved behandling med trastuzumab (HER-2 monoklonalt antistof) i kombination med konventionel kemoterapi [2]. Men den samlede overlevelse var kun 13,8 måneder. Derfor er nye agenter akut behov.
Jern er et væsentligt element for celledeling, vækst og stofskifte. Imidlertid har overskydende jern og ændret jern metabolisme blevet forbundet med tumor initiering og tumorvækst [3]. Epidemiologiske studier har afsløret, at højt indtag jern er forbundet med en øget risiko for colorectal cancer [4]. Mange kræftceller ændrer jern stofskifte fordi maligne celler kræver mere jern end normale celler. At øge den labile jern-puljen har cancerceller blevet vist at opregulere ekspressionen af ​​transferrin receptor 1 (TFR1) og hepcidin, ud over at nedregulering ferroportin ekspression [3].
Deferasirox (Exjade®), en oral tridentat jern ( Fe 3+) chelator, absorberes hurtigt fra tarmen og har en forholdsvis lang halveringstid (8 til 16 h). Således kan én gang daglig dosering opnå vedvarende cirkulerende lægemiddelniveauer tilstrækkelige til scavenging af ikke-transferrin-bundet plasma jern. Selvom deferasirox har været forbundet med nogle bivirkninger såsom gastrointestinale forstyrrelser, hududslæt, og renal toksicitet, er det relativt godt tolereret. Derfor deferasirox er i øjeblikket den mest almindeligt anvendte jernkelator til behandling af jernophobning sygdom [5].
Nylig har flere undersøgelser undersøgt potentiale deferasirox som et anti-neoplastisk middel. Deferasirox er blevet rapporteret at inhibere NF-KB-aktivitet i blodprøver fra patienter med myelodysplastisk syndrom og i leukæmicellelinier [6]; øvrigt deferasirox blev også vist at undertrykke mTOR pathway i myeloide leukæmiceller [7]. Med hensyn til kliniske data viste ét tilfælde rapport, at deferasirox behandling opnåede komplet remission hos patienter med kemoterapi-refraktær akut monocytisk leukæmi [8]. Endvidere post-hoc analyse af et multicenter forsøg afslørede, at deferasirox forbedret hæmatologiske parametre hos patienter med myelodysplastisk syndrom [9]. På nuværende tidspunkt er de fleste rapporter for deferasirox som et anti-neoplastisk middel været i hæmatologiske maligniteter; kun få undersøgelser har fokuseret på solide tumorer. For nylig, deferasirox blev vist at inhibere væksten af ​​lunge- og esophageal cancerceller både in vitro og in vivo [10, 11]. Men virkningen af ​​deferasirox på mavekræft endnu ikke er bestemt, og den mekanisme, hvormed deferasirox udøver sin antitumorvirkninger stadig dårligt forstået. Derfor blev denne undersøgelse udført for at undersøge, om deferasirox udøver anti-tumor effekt på gastrisk kræft cellelinjer og også, om deferasirox virker synergistisk med cisplatin.
Metoder
Cell kultur
Fire humane gastrisk cancer cellelinier (AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638) blev opnået fra den koreanske cellelinje Bank. Alle celler blev dyrket i RPMI 1640 medium indeholdende 10% føtalt bovint serum og antibiotika (100 U /ml penicillin og 100 ug /ml streptomycin) i en befugtet 5% CO 2 inkubator ved 37 ° C.
Reagenser og antistoffer
Deferasirox (Exjade®) blev doneret af Novartis (Basel, Schweiz). Gede polyklonalt anti-NDRG1 (N-myc
nedstrøms reguleret gen 1) (katalog nr. Ab37897) og kanin polyklonalt anti-ferroportin (katalog nr. Ab85370) antistoffer blev indkøbt fra Abcam (Cambridge, UK). Anti-TFR1 muse monoklonale antistoffer (katalog nr. 136.800) blev opnået fra Life Technologies (Carlsbad, CA, USA), og FeSO 4 blev indkøbt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-p53, anti-p27, p21, cyclin A, cyclin B, cyclin D1, cyclin E, CDK2, CDK4, CDK6, c-myc, pro-caspase 3, og BAX antistoffer blev indkøbt fra Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Anti-p-mTOR og pro-caspase 8-antistoffer blev opnået fra Cell Signaling Technology (Beverly, MA, USA).
Growth inhiberingsassay
Vækst inhibering blev målt med MTT (3- [4,5-dimethylthiazol- 2-yl] -2,5-diphenyltetrazoliumbromid) som tidligere beskrevet [12]. Kort beskrevet blev celler podet (2 × 10 3 celler /brønd) i 96-brønds mikrotiterplader (Nunc, Roskilde, Danmark) og inkuberet ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. MTT-opløsning (50 pi) fra Sigma (2 mg /ml i PBS) blev tilsat til hver brønd, og pladerne blev inkuberet i yderligere 4 timer ved 37 ° C. Efter denne inkubation blev MTT-opløsning aspireret fra. At solubilisere formazankrystaller dannet i levedygtige celler, blev 200 pi DMSO tilsat til hver brønd. Pladerne blev rystet i 30 minutter ved stuetemperatur, og absorbansen af ​​hver brønd ved 595 nm blev aflæst øjeblikkeligt med en scanning flere brønde spektrofotometer (Bio-Rad, iMarkTM mikropladelæser).
For at bestemme koncentrationen af ​​deferasirox kræves for at dræbe 50% af cellerne (IC 50), blev AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638-celler behandlet med 0, 1, 10, 50, og 100 uM af deferasirox i 24, 48, og 72 timer. Disse resultater blev anvendt til at vælge den gastriske cellelinie med den største følsomhed for deferasirox til alle efterfølgende eksperimenter.
Cellecyklusanalyse
Efter 24 h inkubation af AGS-celler med 0, 10 og 100 uM deferasirox ved 37 ° C, cellerne blev vasket to gange med PBS, fikseret natten over med 70% ethanol, vasket med PBS og farvet med 50 pg /ml propidiumiodid (PI) indeholdende RNase A ved 50 ug /ml. DNA indholdet af cellerne (10.000 celler /forsøgsgruppe) blev analyseret under anvendelse af et FACSCanto II flowcytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA) udstyret med BD FACSDivaTM software (v6.1.3). Procentsatserne af de cellepopulationer i hver celle cyklus fase (G1, S eller G2 /M) blev beregnet ud fra DNA-indholdet histogrammer.
Western blot-analyse
AGS celler blev inkuberet med 0, 10 og 100 uM af deferasirox ved 37 ° C i 24 timer. Cellerne blev vasket med PBS, resuspenderet i lysepuffer [50 mM Tris (pH 7,5), 1% NP-40, 2 mM EDTA, 10 mM NaCl, 20 ug /ml aprotinin, 20 ug /ml leupeptin og 1 mM phenylmethylsulfonylfluorid fluorid], og anbragt på is i 20 minutter. Proteiner i lysaterne (20-30 ug) blev opløst på 10-15% SDS-polyacrylamid denaturerende geler og overført til nitrocellulosemembraner til 90-120 min. Uspecifikke bindingssteder blev blokeret med 5% skummetmælk i 1 time, og membranerne blev derefter inkuberet natten over med primære antistoffer (alle ved en 1: 1000-fortynding). Antistofferne og de tilhørende processer, der blev brugt til at undersøge var følgende: anti-TFR1 og anti-ferroportin for jern metabolisme; anti-p53, p27, p21, cyclin A, cyclin B, cyclin D1, cyclin E, CDK2, CDK4 og CDK6 for cellecyklussen; anti-pro-caspase 3, pro-caspase 8, pro-caspase 9, og BAX for apoptose; anti-NDRG1 for metastase; og anti-p-mTOR og c-myc. Immunoreaktive bånd blev visualiseret med en ECL kit (Intron, Korea).
Statistisk analyse
Data er præsenteret som middelværdi ± SEMs (fejl søjler). Forskelle blev analyseret med Students t
test. P
værdier. ≪ 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant
Resultater
Effekt af deferasirox på væksten af ​​gastrisk kræft cellelinjer
evne deferasirox at hæmme væksten af ​​de fire gastrisk kræft cellelinjer var bestemt ved en MTT proliferationsassay. AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638 celler blev inkuberet med 0, 1, 10, 50 og 100 uM deferasirox ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. Deferasirox inhiberede væksten af ​​alle fire gastriske cancercellelinier på en dosis-afhængig og tids-afhængig måde (Fig. 1a). Da IC 50 deferasirox ved 72 timer var det laveste i AGS celler (mindre end 10 um) blev udført alle efterfølgende forsøg under anvendelse af disse celler. Fig. 1 Inhiberende virkning af deferasirox på væksten af ​​gastriske cancercellelinier. en Cellelevedygtighed blev målt ved MTT-assayet. AGS, MKN-28, SNU-484, og SNU-638 celler blev inkuberet med 0, 1, 10, 50, og 100 uM af deferasirox ved 37 ° C i 24, 48 eller 72 timer. Deferasirox behandling resulterede i dosisafhængig og tidsafhængig vækstinhibering i alle fire gastriske cancercellelinier. b AGS celler blev dyrket med 10 og 20 uM af enten alene eller i nærværelse af FeSO4 (100 uM) i 48 timer deferasirox. Den inhiberende virkning af deferasirox blev vendt ved FeSO4 supplement
AGS celler blev dyrket med 10 og 20 uM af enten alene eller i nærværelse af FeSO 4 (100 uM) i 48 timer deferasirox. Den hæmmende effekt af deferasirox blev vendt ved FeSO 4 supplement (fig. 1b).
Cell cyklus analyse i AGS celler
Iron udtømning inducerer G1 /S anholdelse ved at påvirke ekspressionen af ​​kritiske molekyler til cellecyklusprogression såsom cyclin D1 og p21 [13]. Virkningerne af deferasirox på cellecyklussen blev bestemt ved fluorescens-aktiveret cellesortering (FACS) under anvendelse af propidiumiodid. AGS celler blev inkuberet med 0, 10 og 100 uM af deferasirox ved 37 ° C i 24 timer. Som vist i fig. 2a, behandling af AGS celler med deferasirox i 24 timer førte til en ophobning af celler i G1-fasen på en dosis-afhængig måde (41,8% ved 0 pM, 53,7% ved 10 uM, og 77,2% ved 100 uM). Dette resultat indikerer, at deferasirox inducerer G1 anholdelse. Western blot analyse af cellecyklus-relaterede proteiner viste, at deferasirox inducerede opregulering af p21, p27, og p53, og nedregulering af cyclin D1, cyclin B, og CDK4 (fig. 2b). Disse resultater antyder, at anti-proliferative effekt af deferasirox skyldes cellecyklus inhibering. Fig. 2 Effekt af deferasirox på cellecyklusprogression i AGS celler. en AGS-celler blev inkuberet med 0, 10 og 100 uM af deferasirox ved 37 ° C i 24 timer. Cellecyklusprogression blev analyseret ved FACS. Deferasirox behandling i 24 timer førte til en dosisafhængig akkumulation af AGS-celler i G1-fasen (41,8% ved 0 pM, 53,7% ved 10 uM, og 77,2% ved 100 uM). b Western blot-analyse af cellecyklus-relaterede molekyler viste, at deferasirox opreguleret p21, p27, og p53 og nedreguleret cyclin D1, cyclin B, og CDK4
Virkning af deferasirox på jern metabolisme og andre veje Hus Til jernoptagelse i celle, cirkulerende jern-transferrin-komplekser binder til celleoverfladereceptoren TFR1. Jern udgange via ferroportin, et strygejern efflux pumpe, der er reguleret af hepcidin. I kræftceller, har TFR1 og hepcidin vist sig at blive opreguleret og ferroportin nedreguleres, hvilket kumulativt medføre øgede koncentrationer af intracellulær jern [3]. Virkningen af ​​deferasirox på jern metabolisme blev evalueret ved Western blot analyse af TFR1 og ferroportin. Niveauet af TFR1 steg efter 24 timers behandling med deferasirox. I modsætning hertil ferroportin ekspression faldt (fig. 3a). Disse resultater er i overensstemmelse med de tidligere undersøgelser [10, 11]. Fig. 3 Effekt af deferasirox på jern metabolisme og andre veje. en behandling med deferasirox i 24 timer resulterede i et øget niveau af TFR1 og en nedsat niveau af ferroportin. b Deferasirox også induceret apoptose, opreguleres NDRG1, og nedreguleret p-mTOR og c-myc som vurderet ved Western blot-analyse
Virkningerne af deferasirox på apoptose blev dernæst evalueret ved FACS og Western blot-analyse af apoptose-relaterede proteiner. Som vist i fig. 2a, AGS celler behandlet med deferasirox i 24 timer udviste en ophobning af celler i sub-G1 (apoptotiske) fase (3,2% ved 0 pM, 3,3% ved 10 uM, og 9,5% ved 100 uM). Endvidere deferasirox behandling faldt ekspressionen af ​​pro-caspase 3, pro-caspase 8, og pro-caspase 9 og forøget ekspression af BAX (fig. 3b). NDRG1 vides at være en suppressor af cellevækst og metastase. Deferasirox øgede niveauet af NDRG1. Desuden blev c-myc og phospho-mTOR ekspression faldt efter 24 timers behandling med deferasirox (fig. 3b). Disse resultater antyder, at deferasirox inducerer apoptose, inhiberer fjernmetastaser, og undertrykker c-myc og mTOR pathways.
Synergistiske virkning af deferasirox og cisplatin
at vurdere om deferasirox kunne øge virkningen af ​​cisplatin, AGS celler dyrket med eller uden cisplatin og deres levedygtighed blev bestemt ved anvendelse af MTT-assayet. Behandling med cisplatin i 48 timer reducerede antallet af levedygtige celler, med en IC 50 på 5-10 uM. For at bestemme om deferasirox udøver en synergistisk virkning med cisplatin blev AGS celler behandlet med 0, 2,5, 5, 10 og 20 uM af enten alene eller i nærværelse af en fast koncentration af cisplatin (5 uM) i 48 timer deferasirox. Som vist i fig. 4a, b, AGS celler behandlet med deferasirox og cisplatin viste en signifikant større reduktion i cellulær levedygtighed sammenlignet med celler behandlet med enten deferasirox eller cisplatin alene (P
< 0,01). Disse resultater antyder, at deferasirox forøger cisplatin-medieret inhibering af AGS cellevækst. Fig. 4 synergistiske virkning af deferasirox og cisplatin. a, B AGS celler behandlet med 0, 2,5, 5, 10 og 20 uM af deferasirox, enten alene eller i nærværelse af en fast koncentration af cisplatin (5 uM) i 48 timer. AGS celler behandlet med deferasirox og cisplatin havde et markant fald i cellulær levedygtighed sammenlignet med celler behandlet med enten deferasirox eller cisplatin alene
For at undersøge de molekylære mekanismer bag denne virkning, blev Western blot-analyse anvendes til at vurdere niveauerne af forskellige molekyler i AGS celler behandlet med deferasirox (5 uM), cisplatin (5 uM), eller begge dele. Kombinationen af ​​deferasirox og cisplatin resulterede i opregulering af NDRG1, p21, og p53. I modsætning hertil denne kombination resulterede i nedregulering af phospho-mTOR, ferroportin, og pro-caspase 9. Disse resultater antyder, at deferasirox potenserer anti-cancer virkninger af cisplatin gennem forskellige veje (fig. 5). Fig. 5 molekylære mekanismer for synergistisk virkning. Western blot-analyse blev udført med lysater af AGS celler behandlet med deferasirox (5 uM), cisplatin (5 uM), eller begge i 24 timer. Kombinationen af ​​deferasirox og cisplatin inducerede opregulering af NDRG1, p21, og p53, foruden den nedregulering af phospho-mTOR, ferroportin, og pro-caspase 9
Diskussion
I denne undersøgelse fandt vi, at deferasirox inhiberer spredning af gastriske cancerceller. Deferasirox viste sig også at fremkalde G1 anholdelse; opregulere p21, p27, og p53 udtryk; og nedregulerer cyclin D1, cyclin B, og CDK4 ekspression. Deferasirox også induceret apoptose, opreguleres NDRG1, og nedreguleret p-mTOR og c-myc. Disse resultater antyder, at deferasirox udøver antitumorvirkninger i gastriske celler cancer via forskellige veje. Specifikt vore data viser, at deferasirox ændrer jern metabolisme, inhiberer cellecyklusprogression, påvirker mTOR signal- og metastase veje, og inducerer apoptose. Derudover synes deferasirox at potensere den anti-proliferative virkning af cisplatin i maven cancerceller.
Jern er essentielt for cellens overlevelse, men kan også forårsage cellulær skade ved at generere reaktive oxygenarter [14]. Selv om niveauet af intracellulær jern stramt reguleret i normale celler, er niveauet af intracellulær jern forhøjede i cancerceller på grund af øget ekspression af TFR1 og hepcidin og reduceret ekspression af ferroportin [3]. Da overskydende jern og ændret jern metabolisme kan føre til tumor initiering og vækst, er jernkelatorer menes at være lovende anticancermidler. Adskillige former for evidens understøtter ideen om, at jernchelatorer er potentielle anti-tumor-terapeutiske midler. For det første forøgede niveauer af intracellulær jern kendt for at fremme DNA-syntese. Eftersom jern er af afgørende betydning for aktiviteten af ​​ribonukleotidreduktase, et nøgleenzym for DNA-syntese, jern spiller en vigtig rolle i celleproliferation [15]. Derfor øges jern kræves for at forøge ribonukleotidreduktase aktivitet i neoplastiske celler. For det andet kan jern udtømning forårsage G1 /S anholdelse og inducere apoptose [13]. Cyclin D1 binder til CDK4 og CDK6, hvilket resulterer i G1 /S progression via phosphorylering af retinoblastoma protein (RB). Denne phosphorylering igen resulterer i frigivelsen af ​​transkriptionsfaktoren E2F fra RB. Jern udtømning vides at nedsætte cyclin D1 og CDK ekspression. For det tredje kan overdreven cellulær jern drive Wnt signalvejen, som vides at være vigtige for tumorudvikling [16].
Vi udførte denne undersøgelse for at undersøge, om deferasirox udøver antitumorvirkninger i forbindelse med mavekræft. Vi valgte deferasirox ud af de mange kommercielt tilgængelige jernkelatorer grundet dens oral tilgængelighed og relativt lav toksicitet. Skønt de præcise mekanismer, hvormed deferasirox udøver sine anti-cancer effekter undersøges fortsat, vi den hypotese, at deferasirox inhiberer cellecyklusprogression baseret på tidligere undersøgelser [11, 17]. Vi fandt, at deferasirox induceret G1 anholdelse ved opregulering af p21 og p27 og nedregulering cyklin D1 og CDK4. Disse resultater støtter vores hypotese om, at deferasirox udøver sine antineoplastiske virkninger ved reguleringen af ​​cellecyklusprogression.
Jernkelatorerer kan inducere ekspressionen af ​​NDRG1, en kendt metastatisk suppressor, i en række forskellige humane cancere [18-20]. Den mekanisme, hvorved NDRG1 undertrykker metastase umiddelbart klart, selvom NDRG1 har vist sig at inhibere cellemigrering og invasion ved at modulere ekspressionen af ​​et antal af adhæsionsmolekyler [21]. NDRG1 ekspression er blevet vist at være betydeligt lavere i cancervæv sammenlignet med tilstødende normalt væv; desuden har NDRG1 ekspression blevet vist at være omvendt korreleret med metastase af visse kræftformer, såsom prostata og kolorektal cancer [22, 23]. Men er opnået afvigende resultater, vedrørende en mulig sammenslutning af NDRG1 med tumor progression. Interessant, NDRG har en påvist rolle i cellecykluskontrol. Specifikt NDRG1 ekspression opreguleres via p53-medieret induktion, og NDRG1 kan også inducere G1 /S standsning ved opregulering p21 [24]. Vi fandt, at deferasirox opregulerer ekspressionsniveauerne af NDRG1, p53, og p21. Selvom vi ikke assay cellemigrering eller undersøg metastase in vivo i den foreliggende undersøgelse, vores resultater tyder på, at deferasirox kan være i stand til at hæmme tumorvækst og metastase. Vi hypotesen, at den mekanisme, hvormed deferasirox udøver sine anti-tumor-virkninger kan involvere NDRG1.
Deferasirox har vist sig at forbedre den cytotoksiske virkning af cisplatin i esophageal cancer cellelinjer. Desuden cisplatin-resistente celler behandlet med en lav koncentration af deferasirox (5 uM) i kombination med cisplatin viste en signifikant reduktion i cellulær levedygtighed sammenlignet med celler behandlet med deferasirox eller cisplatin alene [10]. Vi fandt, at kombinationen af ​​deferasirox (5 uM) og cisplatin (5 uM) inducerede et signifikant fald i cellulær levedygtighed. Desuden er denne kombinerede behandling resulterede i opregulering af NDRG1, p21, og p53 og nedregulering af phospho-mTOR. Vores resultater tyder derfor på, at deferasirox potentielt kan forøge anti-cancer virkning af cisplatin i gastriske cancerceller. Desuden kan p53-NDRG1-p21 og mTOR veje blive inddraget i den synergistiske virkning af deferasirox med cisplatin.
Denne undersøgelse havde en række begrænsninger. For det første, begrænsede vi vores undersøgelse til gastrisk cancer cellelinjer og har ikke foretaget yderligere in vivo forsøg. Endvidere blev ekspressionen af ​​cellecyklus-relaterede proteiner kun vurderes ved Western blotting. Mere detaljerede oplysninger kunne være opnået ved immunopræcipitation og kinase assays. For at bestemme den anti-tumor effekt af deferasirox, ville være behov for yderligere forsøg, herunder in vivo-undersøgelse. Det er dog den første undersøgelse for at afdække antitumorvirkninger af deferasirox mod mavekræft.
Konklusioner
Afslutningsvis fandt vi, at deferasirox induceret antitumorvirkninger i gastriske cancerceller via forskellige veje. Specifikt deferasirox opreguleres NDRG1, inhiberede cellecyklusprogression, nedregulerede mTOR og c-myc ekspression, og apoptose. Endvidere deferasirox forstærkede den anti-cancer effekter af cisplatin. Selvom effekten af ​​deferasirox skal bekræftes i fremtidige undersøgelser, vores resultater viser, at deferasirox er en lovende anti-cancer terapeutisk middel og kan også være en effektiv kemoterapi sensibiliserende.
Erklæringer
Tak
Dette arbejde blev støttet af . forskningsfonden af ​​Hanyang University (HY-2013-MC)
Open AccessThis artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution 4.0 International License (http:. //creativecommons org /licenser /ved /4. 0 /), som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat du give passende kredit til den oprindelige forfatter (e) og kilden, give et link til Creative Commons-licensen, og angive, om ændringer blev foretaget. Creative Commons Public Domain Dedication frafald (http:. //Creativecommons org /public domain /nul /1. 0 /) gælder for de data, der stilles til rådighed i denne artikel, medmindre andet er angivet
Konkurrerende. interesser
forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.
forfattere bidrag
JC og YL deltog i design og analyse af den nuværende forskning. JC skrev papiret. JK foretaget de molekylære studier. YW, JU, BP bidrog i sammensætningen af ​​papiret. Alle forfattere læst og godkendt manuskriptet.

• Samtidig komposit adrenal fæokromocytom, flere gastriske stromale tumorer og pseudohermaphrodism hos en patient med von Recklinghausens disease
• Iris metastase af gastrisk adenocarcinom