Airway celularnost, lipidov obremenjeno makrofagov in mikrobiologija želodčnega soka in dihal pri otrocih z refluksni ezofagitis

Airway celularnost, lipidov obremenjeno makrofagov in mikrobiologija želodčnega soka in dihal pri otrocih z refluksni ezofagitis
Abstract
Ozadje
Gastroezofagealna refluksna bolezen (Gord), lahko povzroči bolezen dihal pri otrocih s ponavljajočim se aspiracijo želodčne vsebine. Gord je mogoče opredeliti na več načinov in eden izmed najbolj razširjenih metode je prisotnost refluksnega ezofagitisa. Pri otrocih z Gord in bolezni dihal, je dihalnih poti nevtrofilija opisano. Vendar pa ni prihodnje študije, ki so pregledani dihalnih poti celičnost pri otrocih z Gord vendar brez bolezni dihal. Cilji raziskave so bili za primerjavo (1) BAL celularnost in lipidov indeks obremenjeno makrofagov (LLMI) in (2) mikrobiologija BAL in želodčnih sokov otrok s Gord (G +) tistih, ki so brez (G-).
metode
Pri 150 otrocih, starih od < 14 let, želodca aspirati in bronhoskopskih dihal lavažo (BAL) so izdelani v izbirni prilagodljiv zgornji endoskopijo. Gord je opredeljena kot prisotnost refluksni ezofagitis na distalnih požiralnika biopsij.
Rezultati
BAL nevtrofilcev% v skupini G-(n = 63) je bilo malo, vendar bistveno višja kot v skupini G + (n = 77), ( mediana 7,5 in 5, p = 0,002). Lipidov obremenjen indeks makrofagov (LLMI), so BAL odstotek limfocitov, eozinofilnih in makrofaga obeh skupinah podobna. Virusne študije so bili negativni v vseh, bakterijskih kultur pozitivna v 20,7% od Bals in pri 5,3% želodca aspirati. BAL kulture ne odražajo želodčne sesanje kulture v vseh, razen enega otroka.
Zaključek
Pri otrocih brez bolezni dihal, Gord opredeljena s prisotnostjo refluksni ezofagitis, ni povezana z BAL mobilnega profil ali LLMI anomalije. Nenormalno mikrobiologija dihalnih poti, kadar je prisoten, ni povezana z refluksni ezofagitis in ne odraža, da želodčnih sokov.
Uvod
Gastroezofagealna refluksna (GOR) je zelo pogosta in so opredeljena kot prehod želodčne vsebine v požiralnik . GOR bolezen (Gord) je opredeljena kot simptomov ali komplikacij gor [1]. Gord vključuje prisotnost ezofagitisa, histološko opredeljen na požiralnika biopsijo, in povečan indeks povratni o pHmetry v povezavi z ustreznimi simptomi [2, 1]. GOR in Gord je povezana s pljučno boleznijo in domneval mehanizmi vključujejo aspiracijo želodčne komponent, tracheo-želodčni refleks, in senzorično stimulacijo živcev [3]. Sekundarna težnja se nanaša na aspiracijo želodčne vsebine, ki vsebujejo ustne in zaužite mikroorganizme, kot tudi želodčnih sokov. Brez zlatega standarda opredelitve ponavljajoče aspiracijo [4], trenutni testi vključujejo jedrsko medicino testi).) [5], in količinsko lipidov obremenjena makrofagov v bronhoalveolarni lavažo (BAL) tekočine [6]. To je sporno, ali je obremenjeno indeks makrofagov povečala lipidov (LLMI) koristen kazalec za ponavljajoče se pljučne aspiracije [7, 8]. Čeprav je LLMI v aspiracijo pljučne bolezni povečala, je bilo ugotovljeno tudi v drugih pljučnih bolezni [6, 9, 10]. Povečana je bila LLMI dobro dokumentirano v zelo izbranih skupin otrok z boleznimi pljuč, [11] vendar je le malo podatkov o BAL otrok brez pljučne bolezni in Gord.
Oceno profila dihalnih poti se vse bolj uporabljajo v raziskavah kot tudi v klinični zdravilo za podporno (vendar ne dokončen) diagnozo bolezni dihal pri otrocih [12, 13]. Dihalnih poti celični profil otrok s Gord brez kronične pljučne bolezni ni znan, in to znanje bo koristno za primerjalne klinične in raziskovalne namene.
Cilji raziskave so bili za primerjavo, (1) BAL celularnosti in lipidov obremenjeno makrofagov indeks ( LLMI) in (2) mikrobiologija BAL in želodčnih sokov otrok s SVRP (G +) do tistih, ki nimajo (G). hipoteza smo, da so dihalne poti otrok s refluksni ezofagitis bolj verjetno, da se je povečal LLMI in nevtrofilija s ponavljajočimi majhnega volumna aspiracije, in da bi bili bakterijska flora v pljučih, podoben tistemu v želodčni sesanje tekočine.
Metode
Otroci, stari od 0.75-14 let, ki so v postopku izbirni prilagodljivo zgornjo endoskopijo so bili povabljeni k sodelovanju v raziskavi (avgusta 2002 do junija 2004). Vsi otroci, ki so v postopku prilagodljivo zgornjo endoskopijo je videl svetovalca pediatrični gastroenterolog in postopek izvaja v splošni anesteziji, vključno endotrahealni intubaciji. Otroci so bili vključeni v študije o zjutraj postopek. Anamneza smo dobili od staršev na standardizirani predračuna za vse otroke. Merila za izključitev so bili; otroci z nepravilnostmi nevro-razvojna, znani osnovni srca in bolezni drugega potem astmo in tistih s klinično zgodovino primarne aspiracije (kašelj in dušilke s krmo, vsaj dvakrat na teden). Gord je štelo prisotna, če histologijo distalnega požiralnika biopsija je pokazala, refluks ezofagitis s patologi slepo otrokovemu dihal zgodovini [14] določene. Pisno soglasje je bilo pridobljeno in študija, ki jo odbor za človekove etiko naše institucije odobrijo.
Na začetku prilagodljivo zgornjo endoskopijo, je želodčni sok, pridobljen neposredno pod nadzorom in suctioned v sluzi past. Ko < smo pridobili 0,5 mililitrov, je bila uporabljena 5 ali 10 mililitrov na slane izpiranje in štetje kolonij organizma (če kultivirani) je bila popravljena z istim faktorjem. Za pridobitev BAL tekočino, ki ni bronhoskopskih standardizirano in ponovljivo [15]. Tehnika je bila uporabljena. Na kratko, z otrokovo glavo obrnil na levo, 8F kateter bil čim bolj skozi sapnik cev, ki zagotavlja, da je šlo preko ocenjenega Carina mestu. Sterilne solne raztopine (1 ml /kg do največ 20 mL) smo vzbudil in suctioned v sluzi past in ta vzorec je bil uporabljen za pregled mikrobiologijo. Še 1 ml /kg (največ 20 mL) je vzbudil in 2 nd zbiranje uporabiti za citologijo in lipidov obremenjeno makrofagov štetjem. Število celic je bila izvedena na celične suspenzije, so bili pripravljeni in obarvajo cytocentrifuge diapozitive (spremenjen Wright je madež, Diff Quik, Lab aidsu, Narrabeen, NSW, Avstralija), za diferencialno celic profila (400 celic šteje, ko je to mogoče). Dodatne diapozitivi so bili pripravljeni za LLMI uporabo Oil Red O madež (Sigma Chemicals), kjer je 100 makrofagov prešteti in dosegel 0-4 [16, 4]. LLMI (razpon 0-400) dobimo z dodajanjem teh rezultatov. Vse celični in LLMI preiskave so bile izvedene s cytologists slepo na anamnezo otroško
kvantitativnih aerobne kulture bakterij so bile izvedene na BAL in želodčnih sokov z uporabo standardnih sterilnih zank. (10 & 100 ul) v krvi in ​​čokolada agar plošče za odkrivanje iz aerobne bakterije. Plošče smo inkubirali pri 35 ° C za 48 ur in izolatov prešteti in identificirajo ravni rodu. Pozitivna bakterijske kulture je bila opredeljena kot rast ≥ 10 4, ki tvorijo kolonije enot /ml [17]. Virusne študije so bile izvedene tudi BAL; direktna imunofluorescenca antigena (DFA) je bila uporabljena za odkrivanje RSV, adenovirus, parainfluenza virusi 1,2,3 in gripe A in B. Če je virusna direktna imunofluorescenčnim testiranje antigen negativen, pomnoževanje nukleinske kisline (NAA) testi so bile izvedene pri vseh omenjenih virusov s pomočjo multipleks PCR [18]
Statistična analiza
Otroci so kategorizirana ob Gord (G +) in ne ob Gord (G). Hi-kvadrat smo uporabili za primerjavo kategorični spremenljivk med skupinami in razmerje obetov opisanih. Podatki običajno niso bili razdeljeni in so se tako nahajajo analize parametrov; Mann-Whitney primerjave med 2 skupini in Kruskal Wallis ko > so primerjali 2 skupini. Mediane in razpon med četrtina (IQR) so bili uporabljeni pri vseh opisnih podatkov. Dve zimsko p vrednost < 0.05 je zdelo pomembno. SPSS ver 11 je bil uporabljen za vse statističnega izračuna.
Rezultati
Mediana starost 150 otrok (91 dečkov in 56 deklic) zaposli bila 8,2 leta (IQR 7). Primarni indikacije za oesophago-gastroskopijo so bolečine v trebuhu (n = 77), ponavljajočega bruhanja (n = 35), slaba telesne mase (n = 20), pregled prejšnje poškodbe (n = 19) in zadušitve (n = 17); Nekateri otroci so imeli več kot eno primarno indikacijo za oesophago-gastroskopijo. Večina (n = 136, 90,7%), otroci so bili klinično osumljena Gord in ezofagitis je bila prisotna v 77 (51,3%) otrok. Je bilo 77 otrok v G + kategoriji, 73 v G-. Le 17 otroci so imeli izpostavljenost tobačnega dima in saj so številke majhne, ​​primerjave niso bile narejene.
G-skupino (mediana 7, IQR 13) je imela veliko, vendar majhno povečanje BAL nevtrofilcev% v primerjavi z G + skupini (5, 7,5), p = 0,002. Ni bilo bistvene razlike v odstotkih makrofagov, limfocitov, eozinofilcev in LLMI v BAL med G + in G- skupin (tabela 1, str dosega 0,23 na 0,78). Ko so bili otroci, katerih BAL pokazala pozitivno bakterijsko kulturo izključena (n = 31), BAL nevtrofilcev% je še vedno precej višja v G- (n = 52) od G + (n = 67) za otroke, p = 0,009; mediana 7 vs 4% oz. Odstotki makrofagov, limfocitov, eozinofilcev in LLMI v BAL med G + in G- skupinah ni vedno precej razlikujejo, ko so bili tisti z BAL pozitivni kulturi excluded.Table 1 Cellular profil otrok, razvrščene po prisotnosti in odsotnosti Gord

G + N = 77
G N = 73
limfocitov%
Mediana, IQR
4.0, 3
4.4 , 4
nevtrofilcev%
Mediana, IQR
5, 7,5
7,5, 14
makrofagov%
Mediana, IQR
89, 16
88.3, ​​14
eozinofilno%
Mediana, IQR
0, 0
0, 0
Skupaj štetje celic
Mediana, IQR
96, 175
116, 83,5 indeks
LLM
Mediana, IQR
42, 47
38, 30
G + = skupino z refluksni ezofagitis
G = skupina brez refluksnega ezofagitisa
bili Virusne študije (DFA in NAA) negativen vsi BAL vzorci. Pozitivne bakterijske kulture je bilo v Bals od 31 otrok (20,7%) in želodca aspirati od 8 (5,3%) otrok, tabela 2. Osemnajst otrok imel velike rasti S. pneumoniae
v svoji BAL, ampak le eden izmed ti otroci so imeli znatno rast s pneumoniae
v svojem želodca aspiracija (10 5). S. aureus
je bilo v BAL 2 otrok in eden od njih je imel tudi majhno število (10 2) S. aureus v svojem želodčni aspirat. Celični profil teh 31 otrok (mediana% nevtrofilcev je bil 20, IQR 34;% limfociti 6, 8,5,% makrofagov 65,5, 34) je bila bistveno drugačna od tiste, ki nimajo pozitivnega BAL kulture (% nevtrofilci 5, 4;% limfocitov 3, 4;% makrofagov 90, 9); p 0,00001 za vse vrste celic. Otroci, ki so bili G + niso bili bolj verjetno, da bodo pozitivno BAL kulturo, kot je G-skupine (tabela 3). Trideset sedem otrok, je bilo v zadnjem času (v enem tednu) z zaviralci protonske črpalke (PPI). Uporaba PPI ni vplivalo na G + /G-status (p = 0,452) in tudi ni imela pomembnega vpliva na BAL pozitivnem stanju kulture (p = 0,762) ali želodčni aspirat kulture (p = 0,092) .table 2 Pozitivni bakterije kultura v BAL in želodčni aspirat
rast organizma ≥104 tvorijo kolonije enot
BAL n
želodca aspirat n
S. pneumoniae

19
6
H. influenzae

10
0
M. catarrhalis
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0
2
Tabela 3 Primerjava skupin s pozitivno bakterijske kulture v BAL

BAL kulture


kategorija Skupina
Negativno (< 104 cfu /ml)

Pozitivno (≥104 cfu /ml)
p vrednost
OR, 95% CI
G-
52
17
G +
67
14
0,27
0,64, 0,29-1,42
G + = skupina z refluksni ezofagitis
G = skupina brez refluksnega ezofagitisa
Razprava
in 150 otrok smo pokazali, da imajo otroci z Gord in brez osnovnega problema pljuč nobene nepravilnosti v svojem dihalnih poti celični profil ali LLMI. Dejansko je odstotek nevtrofilov v skupini G-bistveno višja kot v skupini G + (razlika med skupinama Vendar pa je bil majhen in ni klinično pomembne). Pokazali smo tudi, da je bil pozitiven bakterijske kulture s priznanimi respiratornih patogenov relativno visoka, 20,6% in ni vplivala G + stanju. Končno smo pokazali, da mikrobiologija dihalnih poti ne odraža, da želodčnih aspirati pri otrocih z in brez Gord.
To je prva študija, ki je preučila dihalnih poti celičnost in mikrobiologijo dihalnih poti otrok brez osnovnega bolezni dihal v povezavi z Gord . Čeprav je bil delež nevtrofilcev v BAL od g- otrok višja kot v G + otrocih je bila razlika med skupinama majhna (mediana razlika 2%) in v kliničnem kontekstu to ni pomembno. Te BAL vrednosti so zelo blizu območju, opisanem v normalnih otroke [12]. Tam je na voljo premalo podatkov o ugotovitvah dihalnih poti pri bolnikih z Gord brez osnovne bolezni pljuč. Naše ugotovitve so podobne majhno (n = 11) študiji pri odraslih z Gord (brez pljučne bolezni), ki prav tako opisanega da Gord ni bila povezana s dihalnih poti nevtrofilija. Naše ugotovitve o odsotnosti dihalnih poti nevtrofilija pri otrocih z Gord so v nasprotju s študijami, ki so pregledane BAL pri otrocih s kronične bolezni dihal [11]. Verjetno je, da je dihalnih poti nevtrofilija v prisotnosti respiratorne bolezni od samega respiratorne bolezni, namesto iz stimulacijo tracheo-želodčni refleks. Dejansko je v naši raziskavi, je bil odstotek nevtrofilcev v BAL otrok s Gord nižja kot pri otrocih brez Gord. Vendar pa odsotnost dihalnih poti nevtrofilija ne pomeni odsotnost nevtrofilnih vnetja ker nismo preučiti, nevtrofilnih označevalci, kot so IL-8.
Nismo našli nobene razlike v LLMI pri otrocih z ali brez Gord. V naši raziskavi, LLMI ni uporaben označevalec prisotnosti refluksnega ezofagitisa pri otrocih brez osnovne bolezni dihal. V verjetne razlage vključujejo; nobeden od teh otrok je imelo srednjo stremljenje in /ali LLMI ni občutljiv test za sekundarno aspiracije. Dejansko je bila uporabnost LLMI kot občutljivo in specifično marker aspiracije pri otrocih vprašljiva [6, 9, 10]., Ter Colombo poročali, da je bil LLMI najvišja pri bolnikih underdoing kemoterapijo in presadek proti bolezni gostiteljici [4]. Krishnan in sodelavci je pred kratkim opisal slabo specifičnost in občutljivost LLMI za aspiracije [19]. Vendar pa se uporabljajo sapnika posrka [4], ki ni reprezentativna za BAL [20, 21]. BAL tekočina je skupna standardizirana metoda za pregled dihalnih poti celičnost na področju dihal [12].
Našli smo zelo pogosto pozitivne bakterijske kulture (skupnih respiratornimi bakterijami v BAL, vendar ne v želodčni aspirat), v našem kohorti otrok , ki je opredeljen v izbrani pragu ≥10 4 cfu /ml, ki temelji na predhodnih raziskavah [17]. Vendar pa je diagnostični prag za kvantitativno kulture na BAL za bronhitis pri otrocih (v nasprotju s pljučnico) ni znan in je potrebna previdnost pri razlagi BAL mikrobiologije [12]. Kot je dihalnih nevtrofilija prisotna tudi pri otrocih s pozitivnim bakterijske kulture je verjetno, da so bili rezultati kultura pomembna. Nismo našli nobenega odnosa med dihalnih poti in želodca aspirat mikrobiologije, kar pomeni, da aspiracija želodčne patogenov ni bila pomembna pri teh otrocih. Naše ugotovitve so v podporo študiji, ki kaže, da je želodec ni vir za kolonizacijo zgornjih dihal in pljučnico [22]. Požiranje izločki dihal skupnih bakterij dihal je malo verjetno, da pride do pozitivne želodčni aspirat kulture, kot je želodčni sok baktericidni učinek; S. aureus
je ubil v 30-45 minutah cepljenja, medtem ko P. aeruginosa
je ubitih v 60-90 minutah [23].
Naši podatki se ne smejo ekstrapolirati na druge opredelitve Gord. preučiti smo Gord opredeljeno požiralnika biopsijo, skupne metode diagnosticiranja Gord pri otrocih v Avstraliji. V naši ustanovi, oesophago-gastroskopijo je bolj pogosto izvaja kot pHmetry (približno 800 in 300 oziroma na leto). Različne tehnike se uporabljajo za potrditev ali podpirajo diagnozo Gord. Vendar ne obstaja ena sama odlična metoda za objektivno definicijo vseh vrst Gord. Vsak modalnost ima svoje prednosti in slabosti /omejitve. Kljub temu, verjetno ezofagitis je definicija zlati standard, ampak je verjetno tudi najmanj občutljiva diagnostična metoda, še posebej, če je Gord blaga in /ali občasno ali s prekinitvami. V ameriški Gastroenterologija Association (AGA) smernice za pHmetry je dodal: "V odsotnosti ezofagitisa, ni zlati standard za opredelitev GERB ..." [2]. pHmetry so poročali, da so bolj občutljivi, vendar obstaja velika nesoglasja, kar pomeni nenormalno pHmetry [1]. Prav tako nekateri gastroenerologi trdijo, da pHmetry sama ne more uporabljati za diagnosticiranje Gord, glede na znane probleme, opisane v smernicah Aga. Tako podobne ugotovitve uporabljajo Gord na osnovi pHmetry in morda večkanalnega intraluminalno spremljanje električne impedance, (verjetno pa bolj občutljivo metodo za ocenjevanje Gord variante tj kisline in ne-kisli refluks [24]), bi bilo treba ugotoviti, da so vse vrste Gord so povezani z normalno dihal celično profilu sicer tudi otrokom. Glede na to, da ni bilo pomembno nepravilnost pri obeh skupinah otrok, obravnavanih v tej študiji, je malo verjetno, da se bodo vse vrste kisline, povezane Gord povezana z nenormalnim dihalnih poti celularnosti pri otrocih brez pljučne bolezni.
Zaključek
We sklepamo, da je pri otrocih, ki nimajo bolezni dihal, prisotnost Gord opredeljena refluksni ezofagitis, ni povezana z BAL mobilnega profil ali LLMI anomalije. Nenormalno mikrobiologija dihalnih poti, če je prisoten, ne odraža, da želodčnih sokov in ni povezana z refluksni ezofagitis.
Izjave
Zahvala
Hvaležni smo J Gaffney, Mary DaSilva in medicinske sestre iz Oddelek za gastroenterologijo, Bolnišnica Royal otroke kot tudi anesteziologi zlasti Drs Chris BEEM, A Newton, I Webb, D Hill, in M ​​Pabari, brez katerih ta projekt ne bi bilo mogoče. Ta študija je bila delno financira Royal otroški bolnišnici Foundation in Sylvio in Charles viertel dobrodelne fundacije. ABC podpira Royal otroški bolnišnici Fundacije in ga Praktik štipendijo iz avstralskega državnega zdravje in Svetu za medicinske raziskave.

• Izražanje profil MUCINS (MUC2, MUC5AC in MUC6) v Helicobacter pylori okuženih pre-neoplastične in neoplastične človeškega želodca epithelium
• Čezmerno Polž je povezana z bezgavkah metastaz in slabo prognozo pri bolnikih z rakom želodca