Airway cellularité, macrophages chargés de lipides et de la microbiologie du suc gastrique et des voies respiratoires chez les enfants avec l'oesophagite par reflux

Airway cellularité, macrophages chargés de lipides et de la microbiologie du suc gastrique et des voies respiratoires chez les enfants avec l'oesophagite par reflux
Résumé de l'arrière-plan
maladie de reflux gastro-œsophagien (RGO) peuvent causer des maladies respiratoires chez les enfants de l'aspiration récurrente du contenu gastrique. RGO peut être définie de plusieurs manières et celle de la méthode la plus courante est la présence de l'oesophagite par reflux. Chez les enfants avec RGO et les maladies respiratoires, des voies respiratoires neutrophilie a été décrite. Cependant, il n'y a pas d'études prospectives qui ont examiné les voies respiratoires cellularité chez les enfants atteints du RGO mais sans maladie respiratoire. Les objectifs de l'étude étaient de comparer (1) BAL cellularité et des lipides indice de macrophage chargé (LLMI) et, (2) la microbiologie des BAL et les sucs gastriques des enfants atteints de RGO (G +) à ceux sans (G-).
Méthodes
En 150 enfants âgés < 14 ans, aspiration gastrique et lavage endobronchique des voies aériennes (BAL) ont été obtenues au cours de l'endoscopie élective supérieure flexible. Résultats de RGO a été définie comme la présence de l'oesophagite par reflux sur distales œsophagiennes biopsies.
BAL neutrophiles% dans le groupe G- (n = 63) était légèrement mais significativement plus élevé que dans le groupe G + (n = 77), ( médiane de 7,5 et 5, respectivement, p = 0,002). Lipid indice de macrophage chargé (LLMI), les pourcentages BAL de lymphocytes, des éosinophiles et des macrophages étaient similaires entre les groupes. Des études virales ont été négatives dans toutes les cultures bactériennes, positif dans 20,7% des LBA et 5,3% des aspirats gastriques. cultures BAL ne reflètent pas les cultures de aspirés gastriques chez tous sauf un enfant.
Conclusion
Chez les enfants sans maladie respiratoire, RGO définie par la présence de l'oesophagite par reflux, est pas associé à BAL profil cellulaire ou LLMI anomalie. Présentation
Gastroesophageal le reflux de la microbiologie anormale des voies respiratoires, lorsqu'il est présent, ne sont pas liées au reflux œsophagite et ne reflète pas celle des sucs gastriques. (GOR) est très commun et défini comme le passage du contenu gastrique dans l'œsophage . RGO (RGO) est défini comme étant les symptômes ou les complications de la GOR [1]. RGO comprend la présence d'œsophagite, histologiquement définie sur la biopsie oesophagienne, et l'augmentation de l'indice de reflux sur pHmétrie en association avec des symptômes appropriés [2, 1]. GOR et RGO est associée à la maladie pulmonaire et les mécanismes postulés comprennent l'aspiration des composants gastriques, trachéo-gastrique réflexe, et la stimulation du nerf sensitif [3]. aspiration secondaire se rapporte à l'aspiration du contenu gastrique, qui contiennent des micro-organismes ingérés par voie orale et ainsi que les jus gastriques. En l'absence de norme de définition d'aspiration récurrente [4], de l'or, les tests actuels comprennent des tests de médecine nucléaire.)) [5], et la quantification des macrophages chargés de lipides dans le lavage broncho-alvéolaire (LBA) [6]. Il est controversé si un index des macrophages chargés augmentation des lipides (LLMI) est un indicateur utile pour l'aspiration pulmonaire récurrente [7, 8]. Bien que LLMI est augmentée dans des maladies du poumon aspiration, il se retrouve également dans d'autres maladies pulmonaires [6, 9, 10]. Augmenté LLMI a été bien documentée dans des groupes très sélectionnés d'enfants atteints de maladie pulmonaire [11], mais il y a peu de données concernant les BAL des enfants sans maladie pulmonaire et de l'évaluation de RGO. Du profil des voies aériennes est de plus en plus utilisés dans la recherche ainsi que dans clinique la médecine pour le diagnostic de soutien (mais pas définitif) des maladies respiratoires chez les enfants [12, 13]. Le profil cellulaire des voies respiratoires des enfants avec RGO sans maladie pulmonaire chronique est inconnue et cette connaissance sera utile à des fins cliniques et de recherche comparative.
Les objectifs de l'étude étaient de comparer, (1) BAL cellularité et des lipides macrophage chargé index ( LLMI) et, (2) la microbiologie des BAL et les sucs gastriques des enfants atteints de RGO (G +) à ceux sans (G-). Nous avons supposé que les voies respiratoires des enfants atteints de l'oesophagite par reflux étaient plus susceptibles d'avoir augmenté LLMI et neutrophilie de petite récurrente aspiration de volume, et que la flore bactérienne dans les poumons serait similaire à celle dans le liquide d'aspiration gastrique.
Méthodes
les enfants âgés de 0.75-14 ans devant subir une endoscopie flexible supérieur ont été invités à participer à l'étude (Août 2002 à Juin 2004). Tous les enfants subissant une endoscopie flexible supérieur avaient vu un gastroentérologue pédiatrique consultant et la procédure réalisée sous anesthésie générale, y compris intubation endotrachéale. Les enfants ont été recrutés pour l'étude, le matin de leur procédure. L'histoire médicale a été obtenue à partir d'un parent sur un proforma standardisé pour tous les enfants. Les critères d'exclusion étaient; les enfants présentant des anomalies du développement neurologique, les maladies cardiorespiratoires connues sous-jacente autre que l'asthme et ceux qui ont une histoire clinique d'aspiration primaire (toux et inducteurs avec des aliments d'au moins deux fois par semaine). RGO était considéré comme présent si l'histologie de la biopsie oesophagienne distale a montré œsophagite de reflux déterminées par les pathologistes aveuglés à l'histoire des voies respiratoires de l'enfant [14]. Le consentement écrit a été obtenu et l'étude approuvée par le comité d'éthique humaine de notre institution.
Au début de l'endoscopie haute flexible, le suc gastrique a été obtenu directement sous la vision et aspirée dans un piège de mucus. Lorsque < 0,5 ml a été obtenue, 5 ou 10 ml de sérum physiologique a été utilisé et le nombre de colonies d'un organisme (si cultivé) a été corrigée par le même facteur. Pour obtenir du liquide BAL, un non-bronchoscopie standardisée et reproductible [15]. On a utilisé la technique. En bref, avec la tête de l'enfant tourné vers la gauche, un cathéter 8F a été adoptée dans la mesure du possible grâce à la sonde endotrachéale, assurant qu'il est allé au-delà du site de carina estimé. sérum physiologique stérile (1 ml /kg jusqu'à un maximum de 20 ml) a été instillé et aspirée dans un piège de mucus, ce spécimen a été utilisé pour l'examen de la microbiologie. Un autre 1 ml /kg (maximum de 20 ml) a été instillé et 2 e collection utilisée pour la cytologie et de lipides comte macrophage chargé. Nombre de cellules a été réalisée sur la suspension de cellules, diapositives cytocentrifugation ont été préparées et colorées (modifié la coloration de Wright, Diff Quik, Lab Aids, Narrabeen, NSW, Australie) pour le profil différentiel de cellules (400 cellules comptées lorsque cela est possible). Diapositives supplémentaires ont été préparées pour LLMI utilisant Oil Red O tache (Sigma Chemicals) où 100 macrophages comptés et marqués 0-4 [16, 4]. LLMI (gamme 0-400) a été obtenue par l'addition de ces scores. Tous les examens cellulaires et LLMI ont été effectuées par des cytologistes aveuglés à l'histoire médicale des enfants
cultures aérobies quantitatives de bactéries ont été menées sur le BAL et les sucs gastriques en utilisant des boucles stériles standard. (10 & 100 ul) sur le sang et gélose chocolat plaques pour la détection Les bactéries aérobies. Les plaques ont été incubées à 35 ° C pendant 48 heures et comptées et les isolats identifiés au niveau du genre. Culture bactérienne positive a été définie comme la croissance de ≥ 10 4 unités formant des colonies /ml [17]. Des études virales ont également été effectuées sur BAL; antigène immunofluorescence directe (DFA) a été utilisé pour détecter le VRS, adénovirus, virus parainfluenza 1,2,3 et de la grippe A et B. Si le test de l'antigène d'immunofluorescence directe virale était négative, l'amplification de l'acide nucléique des tests (NAA) ont été entreprises pour tous les virus ci-dessus en utilisant la PCR multiplex [18] L'analyse statistique

enfants ont été classés ayant RGO (G +) et ne pas avoir RGO (G-). Chi carré a été utilisé pour comparer les variables catégorielles entre les groupes et les odds ratio décrit. Les données ne sont pas normalement distribués et analyses ainsi non paramétriques ont été utilisés; Mann-Whitney pour les comparaisons entre les 2 groupes et Kruskal Wallis lorsque > 2 groupes ont été comparés. Médianes et interquartile (IQR) ont été utilisés pour toutes les données descriptives. Deux valeurs de p queue de < 0,05 a été considérée comme significative. SPSS ver 11 a été utilisé pour tous les calculs statistiques.
Résultats de l'âge médian des 150 enfants (91 garçons et 56 filles) recrutés était de 8,2 ans (IQR 7). Les principales indications pour oesophago-gastroscopie étaient la douleur abdominale (n = 77), vomissements récurrents (n = 35), le gain de poids faible (n = 20), l'examen de la lésion précédente (n = 19) et d'étouffement (n = 17); certains enfants avaient plus d'une indication primaire pour oesophago-gastroscopie. La plupart (n = 136, 90,7%) enfants ont été cliniquement suspectés d'avoir RGO et œsophagite était présent dans 77 (51,3%) des enfants. Il y avait 77 enfants dans G catégorie +, 73 en G-. Seuls 17 enfants avaient été exposés à la fumée de tabac et que les numéros étaient petits, les comparaisons ne sont pas faites.
Groupe G- (médiane 7, IQR 13) a eu une augmentation significative mais faible dans le BAL neutrophiles% par rapport à la G + groupe (5, 7.5), p = 0,002. Il n'y avait pas de différence significative dans les pourcentages de macrophages, les lymphocytes, les éosinophiles et LLMI dans BAL entre G + et les groupes G- (tableau 1, gamme de p de 0,23 à 0,78). Lorsque les enfants dont BAL a montré la culture bactérienne positifs ont été exclus (n = 31), BAL neutrophiles% était encore significativement plus élevée chez G- (n = 52) que G + (n = 67) des enfants, p = 0,009; médiane de 7 vs 4% respectivement. Les pourcentages de macrophages, les lymphocytes, les éosinophiles et LLMI dans BAL entre G + et les groupes G- restaient pas significativement différente lorsque ceux culture positive BAL étaient excluded.Table 1 profil cellulaire des enfants regroupés par la présence et l'absence de RGO

G + N = 77
G- N = 73
lymphocytaire%
Median, IQR
4.0, 3
4.4 , 4
neutrophiles%
Median, IQR
5, 7,5
7,5, 14
Macrophage%
Median, IQR
89, 16
88,3, 14
éosinophiles%
Median, IQR
0, 0
0, 0
cellule total count
médian, IQR
96, 175
116, 83,5 index
LLM
médian, IQR
42, 47
38, 30
G + = groupe avec oesophagite par reflux
G- = groupe sans oesophagite par reflux
études virales (DFA et NAA) étaient négatifs dans tous les échantillons de BAL. cultures bactériennes positives a été trouvé dans les LBA de 31 enfants (20,7%) et les aspirats gastriques de 8 (5,3%) des enfants, tableau 2. Dix-huit enfants ont eu une croissance significative de S. pneumoniae
dans leur BAL mais seulement l'un des ces enfants ont connu une croissance significative de S pneumoniae
dans leur aspiration gastrique (10 5). S. aureus
a été trouvé dans la BAL de 2 enfants et l'un d'eux avait aussi un faible nombre (10 2) de S. aureus dans leur aspiration gastrique. Le profil cellulaire de ces 31 enfants (% de neutrophiles médiane était de 20, IQR 34;% de lymphocytes 6, 8,5;% de macrophages 65,5, 34) était significativement différentes de celles sans culture de BAL positif (% de neutrophiles 5, 4;% lymphocytes 3, 4;% des macrophages 90, 9); p 0,00001 pour tous les types de cellules. Les enfants qui étaient G + ne sont pas plus susceptibles d'avoir la culture de BAL positive que le groupe G- (tableau 3). Trente-sept enfants ont eu recours récent (moins d'une semaine) des inhibiteurs de la pompe à protons (IPP). L'utilisation du PPI n'a pas d'influence G + /état G- (p = 0,452) et a également eu aucun effet significatif sur BAL état de culture positive (p = 0,762) ou de la culture de l'aspiration gastrique (p = 0,092) .Table 2 bactéries positives de la culture dans le BAL et aspiration gastrique
croissance de l'organisme de ≥104 unité formant colonie
BAL n
aspirat gastrique n
S. pneumoniae
19
10
0
M. de catarrhalis de 6
H. influenzae
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0 2
Tableau 3 comparaisons des groupes avec la culture bactérienne positive BAL

culture BAL


catégorie Groupe
Negative (< 104 ufc /ml)
Le plus positif (≥104 ufc /ml)
valeur p
OU, 95% CI
G-
52
17
G +
67
14
0,27
0,64, 0,29 à 1,42
G + = groupe avec oesophagite par reflux
G- = groupe sans œsophagite de reflux Discussion de
Dans 150 enfants , nous avons montré que les enfants avec RGO et sans un problème pulmonaire sous-jacente ont aucune anomalie dans leur profil cellulaire des voies respiratoires ou LLMI. En effet, le pourcentage de neutrophiles était significativement plus élevé dans le groupe G- que dans le groupe G + (la différence entre les groupes était toutefois faible et non significative sur le plan clinique). Nous avons également montré que la culture bactérienne positive avec les agents pathogènes respiratoires reconnus était relativement élevé à 20,6% et n'a pas été influencée par l'état G +. Enfin, nous avons montré que la microbiologie des voies respiratoires ne reflète pas celle des aspirats gastriques chez les enfants avec et sans RGO.
Cette étude est la première qui a examiné cellularité des voies respiratoires et de la microbiologie des voies respiratoires des enfants sans une maladie respiratoire sous-jacente en relation avec RGO . Bien que le pourcentage de neutrophiles dans le BAL d'enfants G- était supérieur à celui des enfants G +, la différence entre les groupes est faible (écart médian de 2%) et dans le contexte clinique, cela est non significatif. Ces valeurs BAL sont très proches de la plage décrite chez les enfants normaux [12]. Il y a un manque de données sur les résultats des voies respiratoires chez les patients atteints du RGO sans une maladie pulmonaire sous-jacente. Nos résultats sont semblables à une petite étude (n = 11) chez les adultes avec RGO (sans maladie pulmonaire) qui a également décrit que RGO n'a pas été associée à des voies respiratoires neutrophilie. Nos conclusions de l'absence de voies respiratoires neutrophilie chez les enfants atteints du RGO sont en contraste avec les études qui ont examiné BAL chez les enfants atteints de maladies respiratoires chroniques [11]. Il est probable que les voies aériennes neutrophilie en présence d'une maladie respiratoire est de la maladie respiratoire elle-même, plutôt que de la stimulation du réflexe trachéo-gastrique. En effet, dans notre étude, le pourcentage de neutrophiles dans le BAL des enfants atteints de RGO était inférieur à celui des enfants sans RGO. Cependant, l'absence de voies aériennes neutrophilie ne signifie pas absence d'inflammation neutrophile comme nous n'avons pas examiné les marqueurs neutrophiles comme l'IL-8.
Nous ne avons trouvé aucune différence dans LLMI chez les enfants avec ou sans RGO. Dans notre étude, LLMI est pas un marqueur de la présence de l'oesophagite par reflux chez les enfants utiles sans une maladie respiratoire sous-jacente. Les explications plausibles comprennent; aucun de ces enfants avaient une aspiration secondaire et /ou LLMI est pas un test sensible pour l'aspiration secondaire. En effet, l'utilité de LLMI comme un marqueur sensible et spécifique de l'aspiration chez les enfants a été remise en question [6, 9, 10]., Et Colombo a rapporté que LLMI était le plus élevé chez les patients underdoing chimiothérapie et maladie du greffon contre l'hôte [4]. Krishnan et ses collègues ont décrit récemment la faible spécificité et la sensibilité de LLMI pour l'aspiration [19]. Cependant ils ont utilisé des aspirats trachéaux [4], ce qui est représentatif de la BAL [20, 21]. LBA est la méthode normalisée commune pour l'examen des voies respiratoires cellularité dans le domaine respiratoire [12].
Nous avons trouvé une incidence élevée de la culture bactérienne positive (des bactéries respiratoires communes dans le BAL, mais pas dans l'aspiration gastrique) dans notre cohorte d'enfants , définie sur un seuil choisi de ≥10 4 ufc /ml sur la base des études précédentes [17]. Cependant, le seuil de diagnostic pour la culture quantitative sur BAL pour la bronchite chez les enfants (par opposition à la pneumonie) est inconnue et la prudence est nécessaire dans l'interprétation de la microbiologie BAL [12]. Comme les voies respiratoires neutrophilie était également présent chez les enfants avec la culture bactérienne positive, il est probable que les résultats de la culture étaient significatives. Nous ne avons trouvé aucune relation entre les voies respiratoires et gastriques aspirée microbiologie, ce qui suggère que l'aspiration des pathogènes gastriques n'a pas été significative chez ces enfants. Nos résultats sont en faveur d'une étude montrant que l'estomac est pas une source pour la colonisation des voies respiratoires supérieures et de la pneumonie [22]. Avaler des sécrétions respiratoires des bactéries respiratoires courantes est peu probable que dans la culture de l'aspiration gastrique positif suc gastrique a un effet bactéricide; S. aureus
est tué dans les 30-45 minutes de l'inoculation alors que P. aeruginosa
est tué dans 60-90 minutes [23].
Nos données ne peuvent être extrapolés à d'autres définitions de RGO. Nous avons examiné RGO défini par biopsie oesophagienne, une méthode courante de diagnostic du RGO chez les enfants en Australie. Dans notre institution, oesophago-gastroscopie est plus communément effectuée que pHmétrie (environ 800 et 300 respectivement par an). Une variété de techniques sont utilisées pour confirmer le diagnostic ou le soutien du RGO. Cependant il n'y a pas de méthode parfaite unique pour la définition objective de tous les types de RGO. Chaque modalité a ses avantages et ses inconvénients /limitations. Néanmoins, sans doute est oesophagite la définition de l'étalon-or, mais est également probable que la méthode la moins sensible de diagnostic en particulier lorsque le RGO est doux et /ou occasionnelle ou intermittente. L'American Gastroenterology Association (AGA) des lignes directrices sur pHmétrie a déclaré "En l'absence d'oesophagite, il n'y a pas de norme d'or pour la définition du RGO ..." [2]. pHmétrie a été signalé à être plus sensibles, mais il y a désaccord considérable ce qui constitue une anomalie pHmétrie [1]. En outre, certains gastroentérologues soutiennent que pHmétrie seul ne peut pas être utilisé pour diagnostiquer le RGO, étant donné les problèmes connus décrits dans les lignes directrices de l'AGA. Ainsi, des résultats similaires en utilisant RGO basé sur pHmétrie et peut-être multi-canal intraluminal surveillance de l'impédance électrique, (sans doute une méthode plus sensible pour évaluer RGO variantes à savoir l'acide et non-reflux acide [24]) serait nécessaire de conclure que tous les types de RGO sont associées à un profil de voie respiratoire cellulaire normale par ailleurs bien des enfants. Toutefois, étant donné qu'il n'y avait pas d'anomalie significative dans les deux groupes d'enfants examinés dans cette étude, il est peu probable que tout type d'acide lié RGO sera associé à cellularité des voies respiratoires anormaux chez les enfants sans maladie pulmonaire.
Conclusion
Nous conclure que, chez les enfants sans maladie respiratoire, présence de RGO définie par l'oesophagite par reflux, est pas associé à profil cellulaire BAL ou LLMI anomalie. microbiologie anormale des voies respiratoires, lorsqu'il est présent, ne reflète pas celle des sucs gastriques et, est pas associé à l'oesophagite par reflux.
Déclarations
Remerciements
Nous sommes reconnaissants à J Gaffney, Mary DaSilva et les infirmières de la Département de gastro-entérologie, Hôpital royal Children, ainsi que les anesthésistes en particulier les Drs Chris Beem, A Newton, je Webb, D Hill, et M Pabari, sans qui ce projet ne serait pas possible. Cette étude a été financée en partie par la Fondation de l'Hôpital de Royal Children et par la Fondation de bienfaisance Sylvia et Charles Viertel. ABC est soutenu par la Fondation de l'Hôpital de Royal Children et par un praticien Fellowship de l'Australian Medical Research Council national de santé et.

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