Airway cellularity, lipid laden makrofager og mikrobiologi av magesyren og luftveiene hos barn med refluksøsofagitt

Airway cellularity, lipid laden makrofager og mikrobiologi av magesyren og luftveiene hos barn med refluksøsofagitt
Abstract
Bakgrunn
gastroøsofageal reflukssykdom (GERD) kan forårsake luftveissykdom hos barn fra tilbakevendende aspirasjon av mageinnhold. GORD kan defineres på flere måter, og en av de mest vanlige metoden er tilstedeværelsen av refluksøsofagitt. Hos barn med Gord og luftveislidelser, har luftveis neutrophilia blitt beskrevet. Det finnes imidlertid ingen prospektive studier som har undersøkt luftvei cellularitet i barn med GORD men uten luftveissykdom. Målet med studien var å sammenligne (1) BAL cellularity og lipid laden makrofag indeks (LLMI) og (2) mikrobiologi av BAL og mage juice til barn med GERD (G +) for dem uten (G-).
metoder
I 150 barn i alderen < 14-årene, mage aspirates og bronkoskopi luftveiskylling (BAL) ble oppnådd i løpet av elektive fleksibel øvre endoskopi. GERD ble definert som tilstedeværelse av refluksøsofagitt på distale øsofagus biopsier.
Resultater
BAL nøytrofile% i G- gruppe (n = 63) var marginalt, men betydelig høyere enn i G + gruppe (n = 77), ( median på 7,5 og 5 henholdsvis, p = 0,002). Lipid laden makrofag indeks (LLMI), BAL prosenter av lymfocytter, eosinofile og makrofag var lik mellom gruppene. Viral studiene var negativ i det hele tatt, bakteriekulturer positive i 20,7% av Bals og i 5,3% av mage aspirates. BAL kulturer gjenspeiler ikke mage aspirer kulturer i alle unntatt ett barn.
Konklusjon
Hos barn uten luftveissykdom, GERD definert ved tilstedeværelse av refluksøsofagitt, ikke er assosiert med BAL mobil profil eller LLMI unormalt. Unormal mikrobiologi i luftveiene, når den er tilstede, ikke er relatert til refluks øsofagitt og reflekterer ikke at av mage juice.
Innledning
gastroøsofageal refluks (GOR) er svært vanlig og definert som passering av mageinnhold til spiserøret . GOR sykdom (GERD) er definert som symptomer eller komplikasjoner av GOR [1]. GERD inkluderer tilstedeværelsen av øsofagitt, histologisk definert på spiserørs biopsi, og økt reflux indeksen på pHmetry i samarbeid med aktuelle symptomer [2, 1]. GOR og Gord er assosiert med lungesykdom og postulerte mekanismer inkluderer aspirasjon av mage komponenter, tracheoøsofageal mage refleks, og sensoriske nervestimulering [3]. Sekundær aspirasjon gjelder aspirasjon av mageinnhold, som inneholder muntlige og ingemikroorganismer samt mage juice. Med ingen gullstandard for å definere tilbakevendende aspirasjon [4], aktuelle testene inkluderer nukleærmedisin tester).) [5] og kvantifisering av lipid laden makrofager i bronchoalveolar lavage (BAL) væske [6]. Det er omstridt hvorvidt økt lipid laden makrofager indeks (LLMI) er en nyttig indikator for tilbakevendende lunge aspirasjon [7, 8]. Selv om LLMI økes i aspirasjon lungesykdom, er det også funnet i andre lungesykdommer [6, 9, 10]. Økt LLMI er godt dokumentert i svært utvalgte grupper av barn med lungesykdom [11], men det er lite data om BAL av barn uten lungesykdom og GERD.
Vurdering av luftveis profilen er i økende grad brukes i forskning så vel som i klinisk medisin for støttende (men ikke definitive) diagnose av sykdommer i luftveiene hos barn [12, 13]. Luftveiene cellulære profilen til barn med GERD uten kronisk lungesykdom er ukjent, og denne kunnskapen vil være nyttig for sammenlignende kliniske og forskningsformål.
Målet med studien var å sammenligne, (1) BAL cellularity og lipid laden makrofag indeks ( LLMI) og (2) mikrobiologi av BAL og mage juice til barn med GERD (G +) til de som ikke har (G-). Vi hypotese at luftveiene til barn med refluksøsofagitt var mer sannsynlig å ha økt LLMI og neutrophilia fra tilbakevendende lite volum aspirasjon, og at bakteriefloraen i lungene vil være lik som i aspirer magevæske.
Metoder
barn i alderen 0.75-14 år elektiv fleksibel øvre endoskopi ble invitert til å delta i studien (august 2002 til juni 2004). Alle barn som gjennomgår fleksibel øvre endoskopi hadde sett en konsulent pediatrisk gastroenterolog og prosedyren utføres under generell anestesi inkludert endotrakeal intubasjon. Barn ble registrert for studien om morgenen sin prosedyre. Medisinsk historie ble hentet fra en forelder på en standardisert proforma for alle barn. Eksklusjonskriterier var; barn med nevroutviklings abnormiteter, kjent underliggende kardiorespiratorisk sykdom andre da astma og de med en klinisk historie av primær aspirasjon (hoste og choker med feeds minst to ganger i uken). GERD ble ansett tilstede hvis histologi av distal spiserørs biopsi viste refluksøsofagitt bestemt av patologer blindet for barnets luft historie [14]. Skriftlig samtykke ble innhentet og studiet er godkjent av vår institusjon menneskelige etikkomité.
Ved starten av den fleksible øvre endoskopi, ble gastric juice hentet direkte under visjonen og suges inn i en slim felle. Når < 0,5 ml ble oppnådd, ble 5 eller 10 ml av saltløsning i flukt brukt og kimtall av en organisme (hvis dyrkede) ble korrigert med samme faktor. For å få BAL væske, et ikke-bronkoskopi standardiserte og repeterbare [15]. Teknikken ble benyttet. Kort fortalt med barnets hode slått til venstre, ble en 8F kateter gått så langt som mulig gjennom endotrakealtuben, slik at det gikk utover den estimerte carina nettstedet. Sterilt normalt saltvann (1 ml /kg til maksimalt 20 ml) ble dryppet og suges inn i en felle mucus, og denne prøven ble brukt for mikrobiologiske undersøkelser. En ytterligere 1 ml /kg (maksimalt 20 ml) ble dryppet, og 2 nd samling benyttes for cytologi og lipid nedtynget makrofag teller. Celletall ble utført på cellesuspensjonen ble cytosentrifuge lysbilder forberedt og farget (modifisert Wright flekken, Diff Quik, Lab Aids, Narrabeen, NSW, Australia) for celle differensial profil (400 celler telles når det er mulig). Andre lysbilder var forberedt på LLMI hjelp Oil Red O flekk (Sigma Chemicals) hvor 100 makrofager telles og scoret 0-4 [16, 4]. LLMI (range 0-400) ble oppnådd ved tilsetning av disse score. Alle cellulære og LLMI undersøkelser ble utført av CELLESPESIALIST blindet til barnas medisinske historie
Kvantitative aerobe kulturer av bakterier ble foretatt på BAL og mage juice ved hjelp av standard sterile sløyfer. (10 & 100 ul) på blod og sjokolade agarskåler for deteksjon av aerobe bakterier. Platene ble inkubert ved 35 ° C i 48 timer og isolater som telles og identifisert til slekten nivå. Positiv bakteriekultur ble definert som vekst av ≥10 4 kolonidannende enhet /ml [17]. Viral studier ble også utført på BAL; direkte immunofluorescens antigen (DFA) ble brukt til å påvise RSV, adenovirus, parainfluenza virus 1,2,3 og influensa A og B. Hvis viralt antigen direkte immunfluorescens-testing var negativ, nukleinsyre-amplifikasjon (NAA) tester ble foretatt for alle de ovennevnte virus ved hjelp av multipleks PCR [18]
Statistisk analyse
Barn ble kategorisert som har GERD (G +) og ikke har GERD (G-). Chi kvadrat ble brukt til å sammenligne kategoriske variabler mellom grupper og odds ratio beskrevet. Data ble normalt ikke fordelt og dermed ikke parametriske analyser ble brukt; Mann-Whitney for sammenligninger mellom 2 grupper og Kruskal Wallis når > 2 grupper ble sammenlignet. Medianer og inter-kvartil område (IQR) ble brukt for alle data. To tailed p verdien av < 0,05 ble betraktet som signifikant. SPSS ver 11 ble benyttet for all statistisk beregning. Search Results
Median alder for de 150 barn (91 gutter og 56 jenter) rekruttert var 8,2 år (IQR 7). De primære indikasjoner for oesophago-gastroskopi var magesmerter (n = 77), tilbakevendende oppkast (n = 35), dårlig vektøkning (n = 20), gjennomgang av tidligere lesjon (n = 19) og kveles (n = 17); noen barn hadde mer enn én primær indikasjon for oesophago-gastroskopi. De fleste (n = 136, 90,7%) barn ble klinisk mistenkt for å ha GERD og øsofagitt var til stede i 77 (51,3%) barn. Det var 77 barn i G + kategori, 73 i G-. Kun 17 barna hadde eksponering til tobakksrøyk og som tallene var liten, ble sammenligninger ikke gjort.
G- gruppe (median 7, IQR 13) hadde en signifikant, men liten økning i BAL nøytrofil% når sammenlignet med G + gruppen (5, 7,5), p = 0,002. Det var ingen signifikant forskjell i prosenter av makrofager, lymfocytter, eosinofile og LLMI i BAL mellom G + og G- grupper (tabell 1, p range 0,23 til 0,78). Når barn som BAL viste positiv bakteriekultur ble ekskludert (n = 31), BAL nøytrofile% var fortsatt betydelig høyere i G- (n = 52) enn G + (n = 67) barn, p = 0,009; median på 7 vs 4% henholdsvis. Prosenter av makrofager, lymfocytter, eosinofile og LLMI i BAL mellom G + og G- gruppene forble ikke signifikant forskjellig når de med BAL positiv kultur var excluded.Table en Cellular profilen til barn gruppert etter tilstedeværelse og fravær av Stanget

G + N = 77
G- N = 73
lymfocyttkontroll%
Median, IQR
4,0, 3
4.4 4
nøytrofile%
Median, IQR
5, 7,5
7,5, 14
Macrophage%
Median, IQR
89, 16
88,3, 14
Eosinophil%
Median, IQR
0, 0
0, 0
Total legemer
Median,
IQR 96, 175
116, 83,5
LLM index
Median, IQR
42, 47
38, 30
G + = gruppe med refluksøsofagitt
G- = gruppe uten refluksøsofagitt
Viral studier (DFA og NAA) var negative i alle bAL prøver. Positive bakteriekulturer ble funnet i bals av 31 barn (20,7%) og de gastriske aspirater fra 8 (5,3%) barn, tabell 2. Atten barn hatt en betydelig vekst av S. pneumoniae
i deres BAL, men bare en av disse barna hadde betydelig vekst av S pneumoniae
i sin mage aspirat (10 5). S. aureus
ble funnet i BAL av 2 barn og en av disse hadde også et lavt antall (10 2) av S. aureus i sin mage aspirer. Den cellulære profilen til disse 31 barna (median% nøytrofile var 20, IQR 34;% lymfocytter 6, 8,5,% makrofager 65,5, 34) var signifikant forskjellig for de uten positiv BAL kultur (% nøytrofile 5, 4;% lymfocytter 3, 4;% makrofager 90, 9); p fra 0,00001 til alle celletyper. Barn som var G + var ikke mer sannsynlig å ha positiv BAL kultur enn G- gruppen (tabell 3). Tretti syv barn hadde nylig bruk (innen en uke) av protonpumpehemmere (PPI). Bruk av PPI påvirket ikke G + /G- status (p = 0,452), og hadde heller ingen signifikant effekt på BAL positiv kultur tilstand (p = 0,762) eller gastrisk aspirat kultur (p = 0,092) .table 2 Positive bakteriekultur i BAL og gastrisk aspirat
Vekst av organismen av ≥104 kolonidannende enhet
BAL n
gastric aspirer n
S. pneumoniae <.no> 19
6
H. influenzae
10
0
M. catarrhalis
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0
2
Tabell 3 Sammenligning av grupper med positiv bakteriekultur i BAL

BAL kultur


Gruppe kategorien
Negative (< 104 cfu /ml)

Positiv (≥104 cfu /ml)
p-verdi
OR, 95% KI
G-
52
17
G +
67
14
0,27
0,64, 0,29 til 1,42
G + = gruppe med refluksøsofagitt
G- = gruppe uten refluksøsofagitt
diskusjon
I 150 barn vi har vist at barn med GERD og uten en underliggende lungeproblemer har ingen abnormitet i deres Airway cellular profil eller LLMI. Faktisk er den prosentandel av nøytrofile var signifikant høyere i G-gruppen enn i G + gruppen (forskjellen mellom gruppene var imidlertid liten og ikke klinisk signifikant). Vi har også vist at positive bakteriekultur med anerkjente respiratoriske patogener var relativt høy på 20,6% og ble ikke påvirket av G + stat. Til slutt viste vi at mikrobiologi av luftveiene ikke reflekterer at av mage aspirates hos barn med og uten GERD.
Dette er den første studien som har undersøkt luftveis cellularitet og mikrobiologi av luftveiene til barn uten en underliggende luftveissykdom i forbindelse med GERD . Selv om prosentandelen av neutrofiler i BAL av G- barn var høyere enn i G + barn, forskjellen mellom gruppene var liten (median forskjell på 2%) og i den kliniske sammenheng er dette ikke vesentlig. Disse BAL verdier er meget nær den som er beskrevet i normale barn [12] rekkevidde. Det er et sparsomt med data om luftveis funn hos pasienter med GERD uten en underliggende lungesykdom. Våre funn er lik en liten (n = 11) studie hos voksne med GERD (uten lungesykdom), som også beskrevet at GERD ikke var forbundet med luftveis neutrophilia. Våre funn av fravær av luftveis neutrophilia hos barn med GERD er i kontrast til studier som har undersøkt BAL hos barn med kronisk luftveissykdom [11]. Det er sannsynlig at luftveis neutrofili i nærvær av respiratorisk sykdom er fra luftveissykdom i seg selv snarere enn fra stimulering av tracheoøsofageal gastrisk refleks. Faktisk i vår studie, hvor mange prosent av nøytrofile i BAL av barn med GERD var lavere enn hos barn uten GORD. Men fraværet av luftveis neutrophilia ikke at fravær av nøytrofil inflammasjon som vi ikke undersøke for nøytrofile markører som IL-8.
Vi fant ikke noen forskjell i LLMI hos barn med eller uten GORD. I vår studie er LLMI ikke en nyttig markør for tilstedeværelse av refluksøsofagitt hos barn uten en underliggende luftveissykdom. De plausible forklaringer inkluderer; ingen av disse barna hadde sekundær aspirasjon og /eller LLMI er ikke en sensitiv test for sekundær aspirasjon. Faktisk nytten av LLMI som en sensitiv og spesifikk markør for aspirasjon hos barn har blitt avhørt [6, 9, 10]., Og Colombo rapportert at LLMI var høyest hos pasienter underdoing kjemoterapi og graft vs vert-sykdom [4]. Krishnan og kolleger nylig beskrev dårlig spesifisitet og sensitivitet av LLMI for aspirasjon [19]. Men de brukte tracheal aspirates [4], som ikke er representative for BAL [20, 21]. BAL fluid er det vanlig standardisert metode for undersøkelse av luftveier cellularitet i luft feltet [12].
Vi har funnet en høy forekomst av positive bakteriekultur (over vanlige luftveis bakterier i BAL, men ikke i mage aspireres) i vår kohort av barn definert på en valgt terskel på ≥10 4 cfu /ml basert på tidligere studier [17]. Imidlertid er den diagnostiske terskelen for kvantitativ kultur på BAL for bronkitt hos barn (i motsetning til lungebetennelse) ukjent og forsiktighet er nødvendig i tolkningen av BAL mikrobiologi [12]. Som luftveis neutrofili var også til stede i barn med positiv bakteriekultur, er det sannsynlig at dyrkningsresultatene var signifikante. Vi fant ikke noen sammenheng mellom luftveier og mage aspirer mikrobiologi, noe som tyder på at aspirasjon av mage patogener var ikke signifikant i disse barna. Våre funn er til støtte for en undersøkelse som viser at magen er ikke en kilde for kolonisering av de øvre luftveier og lungebetennelse [22]. Svelging av sekret fra luftveiene av vanlige luftveis bakterier er usannsynlig å resultere i positiv gastrisk aspirat kultur som gastric juice har en bakteriedrepende effekt; S. aureus
er drept i løpet av 30-45 minutter etter vaksinasjonen mens P. aeruginosa
er drept i 60-90 minutter [23].
Våre data kan ikke overføres til andre definisjoner av Stanget. Vi undersøkte GERD definert av spiserørs biopsi, en vanlig metode for å diagnostisere GERD hos barn i Australia. I vår institusjon, oesophago-gastroskopi er mer vanlig utføres enn pHmetry (ca. 800 og 300 henholdsvis per år). En rekke forskjellige teknikker er benyttet for å bekrefte eller understøtte diagnostisering av GORD. Men det er ingen enkel perfekte metoden for objektiv definisjon av alle Gord typer. Hver modalitet har sine fordeler og ulemper /begrensninger. Likevel, uten tvil øsofagitt er gull standard definisjon, men er også sannsynlig den minst følsomme diagnostiske metoden spesielt når GERD er mild og /eller sporadisk eller intermitterende. De amerikanske Gastroenterology Association (AGA) retningslinjer for pHmetry uttalte "I fravær av øsofagitt, er det ingen gullstandard for definisjonen av GERD ..." [2]. pHmetry har blitt rapportert å være mer sensitiv, men det er stor uenighet hva som utgjør en unormal pHmetry [1]. Også noen mage- og tarm hevder at pHmetry alene ikke kan brukes til å diagnostisere GORD, gitt de kjente problemer som er skissert i de AGA retningslinjer. Således lignende funn ved hjelp av GORD basert på pHmetry og kanskje flere kanaler intraluminal elektrisk impedans overvåking, (muligens er mer følsom metode for vurdering av GORD-varianter dvs. syre og ikke- sure oppstøt [24]), ville det være nødvendig å konkludere med at alle typer av GORD er forbundet med normal luftveier cellulær profilen hos ellers brønn barn. Men gitt at det var ingen signifikant avvik i begge grupper av barn som ble undersøkt i denne studien, er det lite sannsynlig at noen form for syrerelaterte GERD vil bli assosiert med unormal luftveis cellularity hos barn uten lungesykdom.
Konklusjon
Vi konkludere med at i barn uten luftveissykdom, tilstedeværelsen av Stanget definert av refluksøsofagitt, ikke er assosiert med BAL mobil profil eller LLMI unormalt. Unormal mikrobiologi i luftveiene, når den er tilstede, betyr ikke nødvendigvis at av mage juice, og er ikke knyttet til refluksøsofagitt.
Erklæringer
Takk
Vi er takknemlige for J Gaffney, Mary DaSilva og sykepleiere i Department of Gastroenterology, Royal Children Hospital samt anestesi spesielt legene Chris Beem, A Newton, jeg Webb, D Hill, og M Pabari, uten hvem dette prosjektet ikke ville være mulig. Denne studien ble delvis finansiert av Royal Children Hospital Foundation og av Sylvia og Charles Viertel Charitable Foundation. ABC er støttet av Royal Children Hospital Foundation og av en Practitioner Fellowship fra Australian National Health and Medical Research Council.

• Expression profilen til slimstoffer (MUC2, MUC5AC og MUC6) i Helicobacter pylori infiserte pre-neoplastiske og neoplastiske menneskelige mage epithelium
• Overekspresjon av Snail er assosiert med lymfeknutemetastase og dårlig prognose for pasienter med magekreft