Airway cellularity, lipidov naložený makrofágy a mikrobiológie žalúdočnej šťavy a dýchacích ciest u detí s refluxnou ezofagitídou

Airway cellularity, lipidov naložený makrofágy a mikrobiológie žalúdočnej šťavy a dýchacích ciest u detí s refluxnou ezofagitídou
abstraktné
pozadia
refluxná choroba pažeráka (GERD) môže spôsobiť respiračné ochorenie u detí z opakovanej aspirácie žalúdočného obsahu. GERD je možné definovať niekoľkými spôsobmi a jedným z najčastejších spôsobu je prítomnosť refluxnej ezofagitídy. U detí s GERD a respiračným ochorením, neutrofília dýchacích ciest bol opísaný. Avšak, nie sú tam žiadne prospektívnej štúdie, ktoré skúmali celularita dýchacích ciest u detí s GERD, ale bez ochorenia dýchacích ciest. Cieľom tejto štúdie bolo porovnať (1) BAL cellularity a lipid naloženého makrofágov index (LLMI) a (2) mikrobiológie z BAL a žalúdočných štiav detí s GERD (G +) k tým bez (G-).
metódy
U 150 detí vo veku < 14 rokov, žalúdočných aspirates a boli získané pri voleným ohybnou vrchnou endoskopia výplachom bronchoskopickom dýchacích ciest (BAL). GERD bolo definované ako prítomnosť refluxnej ezofagitídy na distálnom pažeráka biopsia.
Výsledky
BAL neutrofilov% v skupine G- (n = 63) bola mierne, ale významne vyššia ako v skupine G + (n = 77), ( medián 7,5 a 5 v tomto poradí, p = 0,002). Lipid naložený index makrofágov (LLMI), BAL percenta lymfocytov, eozinofilov a makrofágov boli podobné v oboch skupinách. Vírusové štúdie boli negatívne u všetkých, bakteriálnych kultúr pozitívny v 20,7% z balzy a 5,3% žalúdočných aspirates. BAL kultúry neodráža žalúdočnej sekrécie kultúry vo všetkých ale jedno dieťa.
Záver
U detí bez respiračné ochorenia, GERD definovaná prítomnosťou refluxnej ezofagitídy, nie je spojená s BAL bunkovej profil alebo LLMI abnormality. Abnormálne mikrobiológie dýchacích ciest, ak je prítomný, nie je v spojení s refluxnej ezofagitídy a neodráža, že žalúdočných štiav.
Úvod
Refluxná (GOR) je veľmi časté a sú definované ako priechod obsahu žalúdka do pažeráka , GOR ochorenia (GERD) je definovaná ako príznakov alebo komplikácií gor [1]. GERD zahŕňa prítomnosť ezofagitídy, histologicky definované v pažeráku biopsia a zvýšenie indexu refluxu na ph merače v spojení s príslušnými symptómami [2, 1]. GOR a GERD je spojená s pľúcnou chorobou a postulovaný mechanizmy zahŕňajú ašpirácie žalúdočnej komponentov, tracheo-žalúdočné reflexu, a senzorická nervová stimulácia [3]. Sekundárne aspirácie sa vzťahuje k aspirácii žalúdočného obsahu, ktoré obsahujú ústne a požitie mikroorganizmy, ako aj žalúdočných štiav. Bez zlatý štandard definuje opakované ašpirácie [4], súčasné testy zahŕňajú jadrovú medicínu testov).) [5], a kvantifikácia lipidov naloženého makrofágov v bronchoalveolárnej laváže (BAL) [6]. Je otázne, či zvýšená lipidov naloženého makrofágy index (LLMI) je užitočným ukazovateľom pre recidivujúce ašpirácie [7, 8]. Aj keď je v LLMI ochorenie pľúc ašpirácie zvýšila, je aj v iných pľúcnych chorôb [6, 9, 10]. Zvýšená LLMI bola preukázaná vo vysoko vybraných skupín detí s ochorením pľúc [11], ale existuje málo údajov týkajúcich BAL detí bez ochorenia pľúc a GERD.
Posúdenie profilu dýchacích ciest sa stále viac používajú v oblasti výskumu, ako aj v klinickej liek k podpornej (ale nie definitívnu) diagnóze respiračných ochorení u detí [12, 13]. Dýchacie cesty bunkový profil u detí s GERD, bez toho aby ich chronické pľúcne ochorenia nie je známa a tieto znalosti budú užitočné pre porovnávacie klinické a výskumné účely.
Ciele tejto štúdie bolo porovnať, (1) BAL bunkovom a lipid naloženého makrofágov index ( LLMI) a (2) mikrobiológie z BAL a žalúdočných štiav detí s GORD (G +) pre tých, ktorí nemajú (G-). hypotézu sme, že dýchacie cesty u detí s refluxnej ezofagitídy bola väčšia pravdepodobnosť, že sa zvýšil LLMI a neutrofília rekurentná malom objeme ašpirácie, a že bakteriálnej flóry v pľúcach by bola podobná ako v žalúdočnej sekrécie tekutiny.
metódy
deti vo veku 0.75-14 rokov podstupujúcich elektívny flexibilné hornej endoskopia boli vyzvané k účasti na štúdii (augusta 2002 do júna 2004). Všetky deti podstupujú pružnú hornú endoskopia videl poradcu pediatrickú gastroenterológ a postup vykonáva v celkovej anestézii, vrátane endotracheálnej intubácie. Deti boli zapísal na štúdium na ranu svojho postupu. Anamnéza bola získaná od svojich rodičov na štandardizovanom proforma pre všetky deti. vylučovacích kritérií, boli; Deti s neuro-vývojové abnormality, známa základné kardiorespiračné ochorenie iné ako astma a tí s anamnézou primárnou sania (kašľa a tlmivky s kanálmi najmenej dvakrát týždenne). GERD bol považovaný za prítomný, ak histológie distálnej pažeráka biopsia ukázala, refluxnej ezofagitídy stanovenej patológov zaslepených dýchacie histórii dieťaťa [14]. Písomný súhlas nebol získaný a štúdie schválená etickou komisiou pre ľudské našej inštitúcie.
Na počiatku ohybnou vrchnou endoskopia, žalúdočné šťavy bol získaný priamo pod víziu a odsať do hlienu pasce. Pri < bolo získaných 0,5 mls, bol použitý 5 alebo 10 mililitrům fyziologického roztoku a počet kolónií organizmu (v prípade, kultivované) bol opravený v rovnakom pomere. Pre získanie BAL tekutiny, non-bronchoskopickom štandardizované a opakovateľné [15]. Technika bola využitá. Stručne povedané, s hlavou dieťaťa sa obrátil doľava, čo 8F katétra bol odovzdaný v čo najväčšej miere prostredníctvom endotracheálnej trubice, zabezpečenie toho, aby to išlo nad rámec odhadovaného Carina mieste. Sterilný fyziologický roztok (1 ml /kg do maximálne 20 ml) sa instiluje a odsaje do hlienu pasce a tento vzorka bol použitý pre mikrobiológiu vyšetrenie. Ďalším 1 ml /kg (maximálne 20 ml) sa instiluje a 2 nd zbierka využité pre cytológiu a lipidov naloženého makrofágov počet. počet buniek bola vykonaná na bunkovej suspenziu, cytocentrifuze sklíčka boli pripravené a zafarbené (modifikované Wrighta farbenie Diff Quik, Lab, AIDS, Narrabeen, NSW, Austrália), pre bunky diferenciálnej profilu (400 buniek počíta, keď je to možné). Medzi ďalšie diapozitívy boli pripravené pre použitie LLMI Oil Red O škvrnu (Sigma Chemicals), kde 100 makrofágy počítal a strelil 0-4 [16, 4]. LLMI (rozmedzí 0 až 400) bola získaná pridaním týchto skóre. Všetky bunkové a LLMI vyšetrenie bola vykonaná cytologists nepoznali detského anamnézy
Kvantitatívne aeróbnych kultúr baktérií boli podniknuté v BAL a žalúdočných štiav za použitia štandardných sterilných slučiek. (10 & 100 ul) v krvi a čokoládové agarové doštičky pre detekciu aeróbnych baktérií. Doštičky boli inkubované pri 35 ° C počas 48 hodín a izolátov spočítané a označené na úrovni rodu. Pozitívne bakteriálne kultúra bola definovaná ako rast ≥10 4 kolónie tvoriacich jednotiek /ml [17]. Vírusové štúdie boli tiež vykonané na BAL; DFA antigén (DFA) bola použitá na detekciu RSV, adenovírus, vírusy parainfluenzy 1,2,3 a chrípky A a B. V prípade vírusovej testovanie priame imunofluorescenčné antigén negatívne, amplifikácie nukleovej kyseliny (NAA) testy boli vykonávané vo všetkých vyššie uvedených vírusov pomocou multiplex PCR [18]
Štatistická analýza
Deti boli kategorizované s GERD (G +) a nemajú Gord (G-). Chi square bol použitý k porovnaniu kategorické premenné medzi skupinami a kurzových pomer vyššie. Údaje neboli normálne a tieto boli použité tak non parametrické analýzy; Mann-Whitney pre porovnanie medzi skupinami 2 a Kruskal Wallis, keď > boli porovnané 2 skupiny. Mediány a rad inter-kvartilu (IQR) boli použité pre všetky popisné údaje. Dva sledoval p hodnota menšia ako 0,05 bola považovaná za významnú. SPSS verzia 11 bola využitá pre všetky štatistické výpočty.
Výsledky
priemerný vek 150 detí (91 chlapcov a 56 dievčat), ktorí sú bol 8,2 rokov (IQR 7). Primárne indikácie pre oesophago-gastroskopia boli bolesti brucha (n = 77), opakované vracanie (n = 35), zlé priberanie na váhe (n = 20), revízie predchádzajúceho lézie (n = 19) a udusenia (n = 17); Niektoré deti mali viac ako jeden primárny indikáciu pre oesophago-gastroskopia. Most (n = 136, 90,7%), deti boli klinicky podozrivý z GERD a ezofagitída bol prítomný u 77 (51,3%) detí. Tam bolo 77 detí v kategórii G +, 73 v G-. Iba 17 detí malo vystavením tabakovému dymu a ako počty boli malé, porovnanie neboli vykonané.
G- skupiny (medián 7, IQR 13) mala významný, ale malý nárast BAL neutrofilov% v porovnaní so skupinou G + (5, 7,5), p = 0,002. Nebol žiadny významný rozdiel v percentách makrofágov, lymfocytov, eozinofilov a LLMI v BAL, medzi G + a G- skupín (tabuľka 1, str rozmedzí 0,23 do 0,78). Keď deti, ktorých BAL ukázalo pozitívne bakteriálne kultúry boli vylúčené (n = 31), BAL neutrofilov% bol stále výrazne vyššia u G- (n = 52), ako G + (n = 67) s deťmi, p = 0,009; medián 7 versus 4% v uvedenom poradí. Percentá makrofágov, lymfocytov, eozinofilov a LLMI v BAL, medzi G + a G- skupiny zostali významne nelíšia, keď tí, s BAL pozitívne kultúry boli excluded.Table 1 Bunková profil detí sú zoskupené podľa prítomnosti alebo neprítomnosti GERD

G + N = 77
G- N = 73
lymfocytov%
Median, IQR
4.0, 3
4.4 4
neutrofilných%
Median, IQR
5, 7.5
7,5, 14
makrofágov%
Median, IQR
89, 16
88,3, 14
Eozinofilné%
Median, IQR NETHRY.cz 0, 0
0, 0
Celkový počet bunka
Median, IQR
96, 175
116, 83,5
LLM index
Median, IQR
42, 47
38, 30
G + = skupinu s refluxnej ezofagitídy
G- = skupina bez refluxnej ezofagitídy
Vírusové štúdie (DFA a NAA) boli negatívne v všetky vzorky BAL. Pozitívne bakteriálne kultúry bol nájdený Bals z 31 detí (20,7%) a žalúdočných aspirátu z 8 (5,3%) detí, stolný 2. Osemnásť detí malo výrazný rast S. pneumoniae
vo svojom BAL, ale iba jedným z tieto deti mali výrazný rast s pneumoniae
v ich žalúdku ašpirácie (10 5). S. aureus
bol nájdený v BAL 2 detí a jeden z nich mal tiež nízky počet (10 2) S. aureus v ich žalúdočnej sekrécie. Bunková profil týchto 31 detí (medián% neutrofilov bolo 20, IQR 34;% lymfocyty 6, 8,5,% makrofágy 65.5, 34) bol významne odlišné od tých, bez pozitívneho BAL kultúry (% neutrofily 5, 4;% lymfocyty 3, 4;% makrofágy 90, 9); p 0,00001 pre všetky typy buniek. Deti, ktoré sa G + neboli väčšia pravdepodobnosť, že pozitívne BAL kultúru ako G-skupiny (tabuľka 3). Tridsať sedem detí bolo užívanie v poslednej dobe (počas jedného týždňa) a inhibítory protónovej pumpy (PPI). Použitie PPI neovplyvnila G + /G- stav (p = 0,452), a tiež mal významný vplyv na BAL pozitívneho stavu kultúry (p = 0,762), alebo žalúdočné sekrécie kultúry (p = 0,092) .Table 2 pozitívne bakteriálne kultúry v BAL a žalúdočnej sekrécie
Rast organizmu tvoriace jednotky ≥104 kolónie
BAL n
žalúdočnej sekrécie n
S. pneumoniae
19
6
H. influenzae
10
0
M. catarrhalis
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0
2
Tabuľka 3 Porovnanie skupín s pozitívnou bakteriálne kultúry v BAL

BAL kultúry


kategórii Skupina
Negatívne správa (< 104 KTJ /ml)

pozitívny (≥104 CFU /ml)
hodnota p
OR, 95% CI
G-
52
17
G +
67
14
0,27
0,64, 0,29 - 1,42
G + = skupina s refluxnej ezofagitídy
G- = skupina bez refluxnej ezofagitídy
Diskusia
150 detí sme ukázali, že deti s GERD a bez podkladového pľúc problém nemajú žiadnu abnormalitu v ich dýchacích ciest bunkovej profilu alebo LLMI. V skutočnosti percento neutrofilov bol v skupine G-významne vyššia ako v skupine G + (rozdiel medzi skupinami bol však malá a nie je klinicky významná). Tiež sme ukázali, že pozitívny bakteriálne kultúry s uznávanými respiračných patogénov bol na pomerne vysokej úrovni 20,6% a nebola ovplyvnená G + stave. A konečne sme ukázali, že mikrobiológie dýchacích ciest neodráža že žalúdočných aspirates u detí s alebo bez GERD.
Toto je prvá štúdia, ktorá skúmala celularita dýchacích ciest a mikrobiológie dýchacích ciest u detí bez základného ochorenia dýchacích ciest v súvislosti s GERD , Aj keď je podiel neutrofilov v BAL G- detí bola vyššia ako v G + deti, je rozdiel medzi skupinami bol malý (stredný rozdiel vo výške 2%), a v klinickom kontexte nie je významný. Tieto BAL hodnoty sú veľmi blízko k rozsahu opísanom v normálnych detí [12]. Tam je nedostatok údajov o zisteniach dýchacích ciest u pacientov s GERD bez základného ochorenia pľúc. Naše zistenia sú podobné malé (n = 11), štúdie u dospelých s GERD (bez ochorenie pľúc), ktorý tiež popísané, že GERD nebola spojená s neutrofília dýchacích ciest. Naše zistenia neprítomnosti neutrofília dýchacích ciest u detí s GERD sú na rozdiel od štúdií, ktoré skúmali BAL u detí s chronického respiračného ochorenia [11]. Je pravdepodobné, že neutrofília dýchacích ciest v prítomnosti ochorení dýchacích ciest, je z respiračného ochorenia samotnej, skôr ako z stimuláciou tracheo-žalúdočné reflexu. V skutočnosti v našej štúdii, podiel neutrofilov v BAL u detí s GERD bola nižšia ako u detí bez GERD. Avšak absencia neutrofília dýchacích ciest neznamená absenciu neutrofilné zápal, ako sme neskúmala pre neutrofilných markery ako IL-8.
Sme nenašli žiadny rozdiel v LLMI u detí s alebo bez GERD. V našej štúdii LLMI nie je užitočný marker prítomnosti refluxnej ezofagitídy u detí bez základného ochorenia dýchacích ciest. Tieto hodnoverné vysvetlenie zahŕňajú; Žiadny z týchto detí malo sekundárny ašpiráciu a /alebo LLMI nie je citlivý test pre sekundárnu ašpirácie. V skutočnosti bola spochybnená užitočnosť LLMI ako citlivý a špecifický marker ašpirácie u detí [6, 9, 10]., A Colombo hlásil, že LLMI bola najvyššia u pacientov, underdoing chemoterapiu a štep vs hostiteľovi [4]. Krishnan a jeho kolegovia nedávno opísal zlú špecifickosť a citlivosť LLMI aspiračnej [19]. Avšak používajú tracheálnej vdychovanie [4], ktorý nie je reprezentatívny BAL [20, 21]. BAL tekutina je spoločná štandardizovaná metóda pre posudzovanie celularita dýchacích ciest dýchacích oblasti [12].
Zistili sme vysoký výskyt pozitívny bakteriálne kultúry (bežných respiračných baktérií v BAL, ale nie v žalúdku aspirate) v našom súbore detí , ktoré sú definované na zvolenej prahu ≥10 4 cfu /ml na základe predchádzajúcej štúdie [17]. Avšak, diagnostický prah pre kvantitatívne kultúry na BAL pre zápal priedušiek u detí (na rozdiel od zápal pľúc), nie je známy a opatrnosť je nutná pri výklade BAL mikrobiológie [12]. Ako neutrofília dýchacích ciest bol tiež prítomný u detí s pozitívnou bakteriálne kultúry je pravdepodobné, že výsledky kultivácie boli významné. Nenašli sme žiadny vzťah medzi dýchacích ciest a žalúdočnej sekrécie mikrobiológie, čo naznačuje, že aspirácie žalúdočného patogénov nebol významný u týchto detí. Naše zistenia sú na podporu štúdiu, ktorá dokazuje, že žalúdok nie je zdrojom pre kolonizáciu horných dýchacích ciest a pľúc [22]. Prehĺtanie respiračných sekrétov bežných respiračných baktérií, je nepravdepodobné, že by mať za následok pozitívnu žalúdočnej sekrécie kultúry ako žalúdočná šťava má baktericídne účinok; S. aureus
je zabitý počas 30-45 minút po naočkovaní, zatiaľ čo P. aeruginosa
je zabitý v 60-90 minút [23].
Naše dáta nemôžu byť extrapolovať na iné definície GERD. Skúmali sme GERD definovaný pažeráka biopsia, spoločné metódy diagnostiky GERD u detí v Austrálii. Na našom pracovisku, oesophago-gastroskopia je viac bežne vykonávaná ako ph merače (približne 800 a 300, respektíve za rok). Rôzne techniky sa používajú pre potvrdenie alebo podporujú diagnózu GERD. Avšak neexistuje jediný ideálny metóda pre objektívne vymedzenie všetkých typoch GERD. Každá metóda má svoje výhody aj nevýhody /Obmedzenie. Avšak, pravdepodobne ezofagitída je definícia zlatý štandard, ale je pravdepodobné, že aj najmenej citlivá diagnostická metóda zvlášť pri GERD je mierne a /alebo príležitostné alebo prerušované. Americký Gastroenterology Association (AGA) zásady týkajúce sa ph merače uviedol: "Pri absencii ezofagitídy, nie je tam žiadny zlatý štandard pre definíciu GERD ..." [2]. ph merače bolo hlásené, že je citlivejšia, ale tam je značná nezhoda, čo je nezvyčajný ph merače [1]. Tiež, niektorí argumentujú, že gastroenterológov ph merače sám o sebe nemôže byť použitý na diagnostiku GERD, vzhľadom k známe problémy načrtnuté v pokynoch Aga. Tak, podobné zistenia pomocou GERD na báze ph merače a možno viackanálového intraluminálne monitorovanie elektrickej impedancie, (pravdepodobne viac citlivé metódy pre hodnotenie GERD varianty tj kyseliny a non-žalúdočných štiav [24]) by bolo nutné prijať záver, že všetky typy GERD sú spojené s normálnou dýchacích ciest bunkovej profilu, inak tiež detí. Avšak, vzhľadom na to, že neexistuje žiadna významná odchýlka od normálu v oboch skupinách detí skúmaných v tejto štúdii, je nepravdepodobné, že akýkoľvek druh kyseliny spojené s GERD bude spojená s abnormálnym bunkovom dýchacích ciest u detí bez ochorenia pľúc.
Záver
We k záveru, že u detí bez ochorenia dýchacích ciest, prítomnosť GERD definovaný refluxnej ezofagitídy, nie je spojená s BAL bunkovej profil alebo LLMI abnormality. Abnormálne mikrobiológie dýchacích ciest, ak je prítomný, neodráža to žalúdočných štiav, a nie je spojený s gastroezofágového refluxu.
Vyhlásenie
Poďakovanie
Sme vďační J Gaffney, Mary DaSilva a zdravotných sestier oddelenie gastroenterológia, Royal detská nemocnica, ako aj anestéziológovia najmä Drs Chris Beem, a Newton, I. Webb, D Hill a M Pabari, bez ktorých by tento projekt nebolo možné. Táto štúdia bola čiastočne financovaná z Kráľovskej detskej nemocnice nadácie a Sylvia a Charles Viertel Charitable Foundation. ABC je podporovaný Royal detská nemocnica nadácie a praktizujúceho Fellowship z austrálskeho národného zdravia a Rade pre lekársky výskum.

• Expresie profil mucínu (MUC2, MUC5AC a MUC6) v Helicobacter pylori infikovaných preneoplastické a neoplastické humánne gastrický epithelium
• Nadmerná expresia Slimák je spojená s lymfatických uzlín a zlou prognózou u pacientov s žalúdočnej cancer