Hengitysteiden soluihin, rasva-kuormattuna makrofagien ja mikrobiologian mahanesteen ja hengitysteihin lapsilla refluksiesofagiitti

Hengitysteiden soluihin, rasva-kuormattuna makrofagien ja mikrobiologian mahanesteen ja hengitysteihin lapsilla refluksiesofagiitti
tiivistelmä
tausta
refluksitauti (GERD) voivat aiheuttaa hengityselinsairauksia lapsilla toistuvia toive mahansisällön. Refluksitaudin voidaan määritellä useilla tavoilla ja yksi yleinen tapa on läsnä ruokatorvitulehduksen. Lapsilla, joilla refluksitaudin ja hengityselinten sairauksien, hengitysteiden neutrofiliaa on kuvattu. On kuitenkin olemassa mitään tulevaisuutta koskevia tutkimuksia, jotka ovat tutkineet hengitysteiden cellularity lapsilla refluksitaudin mutta ilman hengityselinsairauksia. Tavoitteet Tutkimuksen verrattaisiin (1) BAL sellulaarisuus ja lipidien kuormitettu makrofagi-indeksi (LLMI) ja, (2) mikrobiologian BAL ja mahalaukun mehut lasten refluksitaudin (G +) niille ilman (G-).
menetelmät
150 ikäisillä lapsilla < 14-vuotta, mahalaukun aspiraatteja ja bronkoskooppiset hengitysteiden huuhtelu (BAL) saatiin aikana valittavia joustava ylempi tähystykseen. Refluksitaudin määriteltiin läsnäolo refluksiesofagiitin distaaliseen ruokatorven koepaloja.
Tulokset
BAL neutrofiilien% vuonna G- ryhmässä (n = 63) oli hieman, mutta huomattavasti suurempi kuin G + (n = 77), ( mediaani 7,5 ja 5, p = 0,002). Lipid kuormattuna makrofagien indeksi (LLMI), BAL prosenttiosuudet lymfosyyttien, eosinofiilien ja makrofagien olivat samanlaiset ryhmien välillä. Viral tutkimukset olivat negatiivisia kaikkiaan bakteeriviljelmissä positiivinen 20,7% of Balş ja 5,3%: lla mahalaukun aspiraateilla. BAL viljelmät eivät vastanneet mahalaukun aspirate kulttuureissa kaikissa paitsi yhdessä lapsi.
Päätelmä
Lapsilla ilman hengityselinsairauksia, GERD määritellään läsnäolo refluksiesofagiitin, ei liity BAL solujen profiilin tai LLMI poikkeavuus. Epänormaali mikrobiologian hengitysteihin, kun läsnä, ei liity refluksiesofagiitin ja ei heijasta että mahalaukun mehut.
Johdanto
Refluksitaudin (GOR) on hyvin yleinen ja määritellään kulkua mahalaukun sisältö ruokatorveen . GOR tauti (GERD) määritellään oireita tai komplikaatioita GOR [1]. Refluksitaudin sisältää läsnäolo ruokatorven tulehdus, histologisesti määritellään ruokatorven koepala, ja lisääntynyt refluksi indeksin pHmetry asiaankuuluvan oireita [2, 1]. GOR ja refluksitaudin liittyy keuhkoahtaumatautia ja oletettujen mekanismeihin sisältyy toive mahalaukun komponentteja, henkitorven ja mahalaukun refleksi, ja aistien hermostimulaatioon [3]. Toissijainen toive koskee toive mahansisällön, jotka sisältävät suun ja nautitaan mikro-organismeihin sekä mahalaukun mehut. Joilla ei kultakantaan määritellään toistuvat pyrkimys [4], nykyinen testit sisältävät isotooppilääketieteen testejä).) [5] ja kvantifiointi rasva kuormattuna makrofagien bronkoalveolaarinen huuhtelu (BAL) nesteen [6]. On kiistelty siitä, onko kohonnut lipidi- kuormattuna makrofagien indeksi (LLMI) on hyödyllinen indikaattori toistuvia keuhkoihin vetäminen [7, 8]. Vaikka LLMI on lisääntynyt toive keuhkosairaus, se on havaittu myös muissa keuhkosairaudet [6, 9, 10]. Lisääntynyt LLMI on hyvin dokumentoitu hyvin valittujen ryhmien lasten keuhkosairaus [11], mutta on vain vähän tietoja, jotka koskevat BAL Näiden lasten keuhkosairaus ja GERD.
Arviointi hengitysteiden profiilin käytetään yhä enemmän tutkimuksen sekä kliinisissä lääkettä tukeva (mutta ei lopullinen) todeta hengityselinsairauksien lapsilla [12, 13]. Hengitysteiden solujen profiilin lasten refluksitaudin ilman krooninen keuhkosairaus on tuntematon ja tämä tieto on hyötyä vertaileva kliininen ja tutkimustarkoituksiin.
Tavoitteet Tutkimuksen oli vertailla, (1) BAL sellulaarisuus ja lipidien kuormitettu makrofagi-indeksi ( LLMI) ja, (2) mikrobiologian BAL ja mahalaukun mehut lasten refluksitaudin (G +) niille ilman (G-). Olemme oletettu, että hengitystiet lasten refluksiesofagiitin olivat todennäköisesti kasvaneen LLMI ja neutrofiliaa toistuvista pienet toive, ja että bakteeriflooraan keuhkoissa olisi samanlainen kuin mahalaukun aspirate nestettä. Tool Menetelmät
ikäiset lapset ,75-14vuosi tehdään elektiivinen joustava ylempi tähystykseen kutsuttiin osallistumaan tutkimukseen (elokuu 2002 kesäkuuhun 2004). Kaikki lapset, joille joustava ylempi tähystykseen oli nähnyt konsulttina lapsipotilailla gastroenterologi ja menettely suoritetaan yleisanestesiassa lukien endotrakeaalista intubaatio. Lapset otettiin tutkimukseen aamulla heidän menettelyn. Sairaushistoria saatiin vanhemman standardoituun proforma kaikille lapsille. Hylkäämisperusteet olivat; lasten neurologiset kehityshäiriöt poikkeavuudet, tunnettu taustalla sydän- tauti muut sitten astma ja ne, joilla on kliininen historia ensisijaisen toive (yskää ja kuristimet joissa syötteet vähintään kaksi kertaa viikossa). Refluksitaudin pidettiin läsnä, jos histologia distaalisen ruokatorven koepala osoitti refluksiesofagiittipotilaat määräytyy patologit sokaissut lapsen hengityselinten historia [14]. Kirjallinen suostumus saatiin ja tutkimuksen hyväksynyt toimielimemme ihmisen eettinen komitea.
Alkaessa taipuisan ylemmän tähystykseen, mahanestettä saatiin suoraan visio ja imetty osaksi limaa ansaan. Kun < 0,5 ml saatiin, 5 tai 10 ml suolaliuoshuuhtelu käytettiin ja pesäkelukua organismin (jos viljelty) korjattiin samalla kertoimella. Saadakseen bronkoalveolaarinesteen, ei-bronkoskooppiset standardoituja ja toistettavissa [15]. tekniikkaa käytettiin. Lyhyesti, lapsen pää kääntyi vasemmalle, joka on 8F katetri hyväksyttiin mahdollisuuksien kautta intubaatioputken, varmistaen, että se ylitti arvioidun carina sivustolla. Steriiliä normaalia suolaliuosta (1 ml /kg enintään 20 ml) tiputettiin ja imetty osaksi limaa ansaan ja tämä yksilö käytettiin mikrobiologian tutkimus. Lisäksi 1 ml /kg (enintään 20 ml) tiputettiin ja 2 nd kokoelma hyödynnetään sytologisella ja lipidien kuormattuna makrofagien määrä. Solumäärä suoritettiin solususpension, cytocentrifuge dioja valmistettiin ja värjättiin (muokattu Wrightin tahra, Diff Quik, Lab Aids, Narrabeen, NSW, Australia) solujen ero profiilin (400 solua laskettiin mikäli mahdollista). Muita diat valmisteltiin LLMI käyttäen Oil Red O tahra (Sigma Chemicals), jossa 100 makrofageja laskettiin ja sijoitettiin 0-4 [16, 4]. LLMI (vaihteluväli 0-400) saatiin lisäämällä näiden tulokset. Kaikki solu ja LLMI tutkimukset suoritettiin cytologists sokko lasten terveydentilasta.
Kvantitatiivinen aerobisia viljelmiä bakteereita toteutettujen BAL ja mahalaukun mehut tavallisilla steriiliä silmukoita (10 & 100 ui) veren ja suklaata agarmaljoille havaitsemiseen aerobisten bakteerien. Levyjä inkuboitiin 35 ° C: ssa 48 tuntia ja eristää laskettiin ja tunnistettiin sukuun tasolle. Positiivinen bakteeri- viljelmä määriteltiin kasvu ≥10 4 pesäkettä muodostavaa yksikköä /ml [17]. Viral tutkimuksia suoritettiin myös BAL; Immunofluoresenssitutkimuksessa antigeeni (DFA) käytettiin havaitsemaan RSV, adenovirus, parainfluenssavirukset 1,2,3 ja influenssa A ja B Jos virus suoraan immuunifluoresenssivasta antigeeni testaus oli negatiivinen, nukleiinihappoamplifikaatiotestillä (NAA) kokeet tehtiin kaikkien edellä virukset käyttämällä moninkertaista PCR [18]
tilastollinen analyysi
Lapset luokiteltiin ottaa refluksitaudin (G +) ja joilla ei ole GERD (G-). Chi square käytettiin vertaamaan kategorisen muuttujien ryhmien välillä ja riskisuhde on kuvattu. Tiedot eivät normaalisti jakautunut ja näin parametritonta analyysejä käytettiin; Mann-Whitney väliseen vertailuun 2 ryhmien ja Kruskal Wallis kun > 2 ryhmää verrattiin. Mediaanit ja inter-kvartiilin alue (IQR) käytettiin kaikkien kuvaukset. Kaksisuuntaisia ​​p-arvo < 0,05 pidettiin merkittävänä. SPSS ver 11 käytettiin kaikille tilastolliseen laskentaan.
Tulokset
mediaani-ikä 150 lasta (91 poikaa ja 56 tyttöä) rekrytoitiin oli 8,2 vuotta (IQR 7). Ensisijainen indikaatiot oesophago-gastroskopiaa olivat vatsakipu (n = 77), toistuvaa oksentelua (n = 35), huono painonnousu (n = 20), yhteenveto aikaisempien vaurion (n = 19) ja tukehtuminen (n = 17); jotkut lapset oli enemmän kuin yksi ensisijainen osoitus oesophago-gastroskopiaa. Suurin osa (n = 136, 90,7%) lapsista oli kliinisesti epäillään olevan refluksitaudin ja esofagiitti oli läsnä 77 (51,3%) lasta. Oli 77 lasta G + luokkaan 73 G-. Vain 17 lapsilla oli tupakansavulle altistumisen ja luvut olivat pieniä, vertailuja ei tehty.
G- ryhmä (mediaani 7, IQR 13) oli merkittävä, mutta pieni lisäys BAL neutrofiilien% verrattuna G + -ryhmän (5, 7,5), p = 0,002. Ei ollut merkittävää eroa prosentteina makrofagien, lymfosyyttien, eosinofiilien ja LLMI BAL välillä G + ja G- ryhmien (taulukko 1, p alue 0,23-,78). Kun lapset, joiden BAL positiivisesti bakteerikulttuuri jätettiin (n = 31), BAL neutrofiilien% oli edelleen merkitsevästi korkeampi G- (n = 52) kuin G + (n = 67) lasta, p = 0,009; mediaani 7 vs 4%: lla. Prosenttiosuudet makrofagit, lymfosyytit, eosinofiilit ja LLMI BAL välillä G + ja G- ryhmien pysyi ole merkittävästi erilainen, kun ne, joilla BAL positiivinen kulttuuri olivat excluded.Table 1 Cellular profiilia lasten ryhmitelty läsnä ja poissa refluksitaudin

G + N = 77
G- N = 73
lymfosyyttien%
mediaani, IQR
4,0, 3
4,4 , 4
Neutrofiilien%
mediaani, IQR
5, 7,5
7,5, 14
Macrophage%
mediaani, IQR
89, 16
88,3, 14
Eosinofiilinen%
mediaani, IQR
0, 0
0, 0
Yhteensä solumäärä
mediaani, IQR
96, 175
116, 83,5
varatuomari index
mediaani, IQR
42, 47
38, 30
G + = ryhmä refluksiesofagiitti
G- = ryhmä ilman refluksiesofagiittipotilaat
Viral tutkimukset (DFA ja NAA) olivat negatiivisia kaikki BAL näytteet. Positiivinen bakteeriviljelmät löydettiin BALS 31. lasta (20,7%) ja mahalaukun aspiraateissa 8 (5,3%) lapsista, taulukko 2. Kahdeksantoista lapsille kasvatti merkittävästi S. pneumoniae
niiden BAL mutta vain yksi nämä lapset oli merkittäviä S pneumoniae -bakteerin kasvua
niiden mahalaukun aspirate (10 5). S. aureus
löydettiin BAL 2 lasta ja yksi näistä oli myös pieni määrä (10 2) S. aureus niiden mahalaukun aspirate. Solu profiilia näistä 31 lasta (mediaani% neutrofiilejä oli 20, IQR 34;% lymfosyyteistä 6, 8,5,% makrofageja 65,5, 34) oli merkittävästi erilainen kuin ilman positiivisia BAL kulttuuri (% neutrofiilejä 5, 4,% lymfosyyteistä 3, 4;% makrofagit 90, 9); p 0,00001 kaikissa solutyypeissä. Lapset, jotka olivat G + ollut todennäköisemmin positiivinen BAL kulttuuri kuin G- ryhmä (taulukko 3). Kolmekymmentä seitsemän lasta oli hiljattain (viikon sisällä) protonipumpun estäjät (PPI). Käyttö PPI ei vaikuttanut G + /G- tila (p = 0,452) ja myös ei ollut merkittävää vaikutusta BAL positiivinen kulttuuri tila (p = 0,762) tai mahalaukun aspirate kulttuuri (p = 0,092) .table 2 Positiivinen bakteerit kulttuurin BAL ja mahalaukun aspirate
kasvu organismin ≥104 pesäkkeitä muodostava yksikkö
BAL n
mahalaukun aspirate n
S. pneumoniae

19
6
H. influenzae
10
0
M. catarrhalis
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0
2
Taulukko 3 vertailut ryhmien positiivista bakteerikulttuuri BAL

BAL kulttuuri


ryhmä kategoria
Negative (< 104 pmy /ml)

Positiivinen (≥104 cfu /ml)
p arvo
OR, 95% CI
G-
52
17
G +
67
14
0,27
0,64, 0,29-1,42
G + = ryhmä refluksiesofagiitti
G- = ryhmä ilman refluksiesofagiittipotilaat
keskustelu
150 lasta olemme osoittaneet, että lasten refluksitaudin ja ilman taustalla keuhkovika ole mitään poikkeavuutta niiden hengitysteiden solujen profiilin tai LLMI. Itse prosenttiosuus neutrofiilien oli merkitsevästi suurempi G- ryhmässä kuin G + ryhmä (ero ryhmien välillä oli kuitenkin pieni eikä kliinisesti merkittäviä). Olemme myös osoittaneet, että positiiviset bakteerien kulttuuri tunnustettu hengitystiepatogeenit oli suhteellisen korkea 20,6% ja ollut vaikutusta G + valtion. Lopuksi osoitimme, että mikrobiologian hengitysteiden ei heijasta että mahalaukun aspirates lapsilla ja ilman refluksitaudin.
Tämä on ensimmäinen tutkimus, joka on tarkastellut hengitysteiden sellulaarisuus ja mikrobiologian hengitysteiden lapsista ilman taustalla hengityselinten sairaus suhteessa refluksitaudin . Vaikka osuus neutrofiilien BAL on G- lasten oli korkeampi kuin G + lapsille, ero ryhmien välillä oli pieni (mediaani ero 2%) ja kliinisessä yhteydessä tämä ei ole merkittävä. Nämä BAL arvot ovat hyvin lähellä alue on kuvattu normaalit lapset [12]. On niukasti tietoa hengitysteiden havainnot potilailla, joilla refluksitaudin ilman taustalla keuhkosairaus. Meidän havainnot ovat samanlaisia ​​kuin pieni (n = 11) tutkimuksessa aikuisilla refluksitaudin (ilman keuhkosairaus), joka myös kuvattu, että refluksitaudin ei liittynyt hengitysteiden neutrofiliaa. Meidän havainnot puuttuminen hengitysteiden neutrofiliaa lapsilla refluksitaudin ovat toisin tutkimuksissa on tutkittu BAL lapsilla, joilla on krooninen hengityselinten sairaus [11]. On todennäköistä, että hengitysteiden neutrofilia läsnä ollessa hengitysteiden sairaus on peräisin hengityselinsairaus itse pikemminkin kuin stimulaation henkitorven mahalaukun refleksi. Itse tutkimuksessamme, prosenttiosuus neutrofiilien BAL lasten refluksitaudin oli alhaisempi kuin lapsilla ilman refluksitaudin. Kuitenkin puuttuminen hengitysteiden neutrofiliaa ei tarkoita puuttumista neutrofiilisten tulehdus emme tutkia varten neutrofiiliseen markkereita, kuten IL-8.
Emme löytäneet mitään eroa LLMI lasten kanssa tai ilman GERD. Tutkimuksessamme LLMI ei ole käyttökelpoinen merkkiaine läsnäolosta refluksiesofagiitin lapsilla ilman taustalla hengityselinten sairaus. Uskottavaa selitykset ovat; yksikään näistä lapsista oli biologinen toive tai /ja LLMI ole herkkä testi toissijainen toive. Itse hyödyllisyys LLMI niin herkkä ja spesifinen merkki toive lapsilla on kyseenalaistettu [6, 9, 10]., Ja Colombo raportoitu että LLMI oli korkein potilailla underdoing kemoterapiaa ja siirre vs isäntä tauti [4]. Krishnan ja kollegat äskettäin kuvattu huono spesifisyys ja herkkyys LLMI toive [19]. Kuitenkin he käyttivät henkitorven aspirates [4], joka ei edusta BAL [20, 21]. Bronkoalveolaarinesteen on yhteiset standardoidut tutkimusmenetelmä hengitysteiden cellularity keuhkosairauksien alueella [12].
Löysimme yleisyydestä positiivisten bakteerien kulttuuri (yhteistä hengityselinten bakteerien BAL mutta ei mahan aspirate) meidän kohortin lasten , määritellään valitun kynnyksellä ≥10 4 pmy /ml perustuu aiempiin tutkimuksiin [17]. Kuitenkin diagnostinen kynnys määrällisiä kulttuurin BAL keuhkoputkentulehdus lapsilla (toisin kuin keuhkokuume) on tuntematon ja varovaisuutta tarvitaan tulkinnassa BAL mikrobiologian [12]. Koska hengitysteiden neutrofiliaa oli läsnä myös lapsilla, joilla on positiivinen bakteeri kulttuuri on todennäköistä, että kulttuuri tulokset olivat merkittäviä. Emme löytäneet mitään suhdetta hengitysteiden ja mahan aspirate mikrobiologian, mikä viittaa siihen, että toive mahalaukun taudinaiheuttajia ei ollut merkittävää näillä lapsilla. Meidän havainnot ovat tueksi tutkimus osoittaa, että vatsa ei ole lähde kolonisaatiota ylähengitysteiden ja keuhkokuume [22]. Nieleminen hengitysteiden eritteiden yhteistä hengitysteiden bakteeri ei todennäköisesti johda positiivinen mahalaukun aspirate kulttuurin mahanesteessä on bakteereja tappava vaikutus; S. aureus
kuolee 30-45 minuutin rokotus taas P. aeruginosa
tapetaan 60-90 min [23].
Tuloksemme eivät ole yleistettävissä muihin määritelmiin refluksitaudin. Tutkimme refluksitaudin määritelty ruokatorven koepala, yhteinen menetelmänä refluksitaudin lapsilla Australiassa. Meidän laitos, oesophago-gastroskopia on yleisesti suoritetaan kuin pHmetry (noin 800 ja 300 vastaavasti vuodessa). Erilaisia ​​tekniikoita käytetään vahvistamaan tai tukemaan diagnoosi refluksitaudin. Kuitenkaan ei ole yhtä täydellinen menetelmä objektiivisen määritelmän kaiken refluksitaudin tyyppejä. Jokaisella modality on etunsa ja haittansa /rajoituksia. Kuitenkin luultavasti esofagiitti on kultakanta määritelmää, mutta on myös todennäköisesti vähiten herkkä diagnostisen menetelmän varsinkin kun GERD on lievä ja /tai satunnaista tai ajoittaista. American Gastroenterology Association (AGA) ohjeet pHmetry totesi "Ilman esofagiitti, ei ole kultaa standardi määritelmän GERD ..." [2]. pHmetry on raportoitu olevan herkempiä, mutta on huomattavaa erimielisyyttä, mikä on epänormaalin pHmetry [1]. Myös jotkut gastroenterologeista väittävät, että pHmetry yksinään ei voi diagnosoida refluksitaudin, kun otetaan huomioon tunnetut ongelmat esitettyjä AGA suuntaviivoja. Siten samankaltaisia ​​löydöksiä käyttäen refluksitaudin perustuu pHmetry ja kenties monikanavainen intraluminaaliset sähköisen impedanssin valvonta, (luultavasti herkempi arviointimenetelmä refluksitaudin varianttien eli happo ja ei-Refluksi [24]) olisi tarpeen päätellä, että kaikenlaiset refluksitaudin liittyvät normaali hengitysteiden solujen profiili muuten hyvin lapsille. Koska kuitenkin ei ollut merkittävää poikkeavuutta molemmissa ryhmissä lasten tutkittu tässä tutkimuksessa, on epätodennäköistä, että mitä tahansa happoa liittyvien refluksitaudin liitetään epänormaali hengitysteiden cellularity lapsilla ilman keuhkosairaus.
Johtopäätös
Me päättelevät, että lapset ilman hengitysteiden sairaus, läsnäolo refluksitaudin määritelty refluksiesofagiitin, ei liity BAL solujen profiilin tai LLMI poikkeavuus. Epänormaali mikrobiologian hengitysteihin, kun läsnä, ei heijasta että mahalaukun mehut ja, ei liity refluksiesofagiittia.
Julistukset
Kiitokset
Olemme kiitollisia J Gaffney, Mary DaSilva ja hoitajien on Department of Gastroenterology, Royal lastensairaalassa sekä anestesialääkäreitä erityisesti Drs Chris Beem A Newton, minä Webb, D Hill, ja M Pabari, jota ilman tämä hanke ei olisi mahdollista. Tämä tutkimus oli osittain rahoittama Royal lastensairaalassa Foundation ja Sylvia ja Charles Viertel hyväntekeväisyysyhdistykseksi. ABC tukee Royal lastensairaalassa Foundation ja jonka harjoittaja Fellowship Australian National Health ja Medical Research Council.

• Expression profiilia musiineja (MUC2, MUC5AC ja MUC6) Helicobacter pylori tartunnan preneoplasti- ja neoplastisia ihmisen mahalaukun epithelium
• Yliekspressio Snail liittyy imusolmuke etäpesäke ja huonon ennusteen potilailla mahalaukun syöpä