celularidad de las vías respiratorias, macrófagos cargados de lípidos y la microbiología de jugo gástrico y las vías respiratorias en niños con esofagitis por reflujo

celularidad de las vías respiratorias, macrófagos cargados de lípidos y la microbiología de jugo gástrico y las vías respiratorias en niños con esofagitis por reflujo
Resumen Antecedentes

la enfermedad por reflujo gastroesofágico (ERGE) pueden causar enfermedades respiratorias en niños de aspiración recurrente del contenido gástrico. ERGE puede ser definida de varias maneras y una de el método más común es la presencia de la esofagitis por reflujo. En los niños con ERGE y las enfermedades respiratorias, las vías respiratorias neutrofilia se ha descrito. Sin embargo, no existen estudios prospectivos que han examinado la celularidad de las vías respiratorias en niños con ERGE pero sin enfermedad respiratoria. Los objetivos del estudio fueron comparar (1) BAL celularidad y lípidos índice de macrófagos cargados (LLMI) y, (2) la microbiología de BAL y los jugos gástricos de los niños con ERGE (G +) para los que no tienen (G).
métodos Hoteles en 150 niños de edades comprendidas < 14 años, aspirados gástricos y lavado broncoscópico de las vías respiratorias (BAL) se obtuvieron durante la endoscopia superior flexible electiva. ERGE se definió como la presencia de la esofagitis por reflujo en biopsias esofágicas distales.
Resultados
BAL neutrófilos% en el grupo G (n = 63) fue marginalmente pero significativamente más alto que en el grupo G + (n = 77), ( mediana de 7,5 y 5, respectivamente, p = 0.002). índice de macrófagos cargados de lípidos (LLMI), los porcentajes de BAL linfocitos, eosinófilos y macrófagos fueron similares entre los grupos. Estudios virales fueron negativos en todos los cultivos bacterianos positivos, en el 20,7% de LBA y en el 5,3% de los aspirados gástricos. BAL culturas no reflejan las culturas aspirado gástrico en todos menos un niño.
Conclusión Hoteles en niños sin enfermedad respiratoria, la ERGE se define por la presencia de esofagitis por reflujo, no está asociado con el perfil celular BAL o anormalidad LLMI. Microbiología anormal de las vías respiratorias, cuando está presente, no está relacionado con la esofagitis por reflujo y no refleja la de los jugos gástricos.
Introducción
de reflujo gastroesofágico (RGE) es muy común y se define como el paso del contenido gástrico hacia el esófago . enfermedad GOR (ERGE) se define como los síntomas o complicaciones de GOR [1]. ERGE incluye la presencia de esofagitis, histológicamente definidas en la biopsia del esófago, y el aumento de índice de reflujo en pHmetry en asociación con síntomas apropiados [2, 1]. GOR y ERGE se asocia con enfermedad pulmonar y mecanismos postulados incluyen la aspiración de los componentes gástricos, reflejo traqueo-gástrico, y la estimulación del nervio sensorial [3]. aspiración secundaria se refiere a la aspiración del contenido gástrico, que contienen microorganismos orales y ingeridos, así como los jugos gástricos. Con no estándar de oro de la definición de aspiración recurrente [4], las pruebas actuales incluyen pruebas de medicina nuclear).) [5], y la cuantificación de los macrófagos cargados de lípidos en el lavado broncoalveolar (BAL) de fluido [6]. Es controvertido si un índice macrófagos cargados de lípidos aumentado (LLMI) es un indicador útil para la aspiración pulmonar recurrente [7, 8]. Aunque LLMI se incrementa en la enfermedad de pulmón aspiración, que se encuentra también en otras enfermedades pulmonares [6, 9, 10]. Aumentó LLMI ha sido bien documentado en grupos muy seleccionados de los niños con enfermedad pulmonar [11], pero hay pocos datos en relación con BAL de los niños sin enfermedad pulmonar y la ERGE.
Evaluación del perfil de la vía aérea se utiliza cada vez más en la investigación, así como en la clínica medicina para el diagnóstico de apoyo (pero no definitiva) de las enfermedades respiratorias en niños [12, 13]. El perfil celular de las vías respiratorias de los niños con ERGE sin enfermedad pulmonar crónica es desconocida y este conocimiento será útil para fines clínicos y de investigación comparativa.
Los objetivos del estudio fueron comparar, (1) índice de celularidad y BAL macrófagos cargados de lípidos ( LLMI) y, (2) la microbiología de BAL y los jugos gástricos de los niños con ERGE (G +) para los que no tienen (G). Tenemos la hipótesis de que las vías respiratorias de los niños con esofagitis por reflujo eran más propensos a haber aumentado LLMI y neutrofilia del recurrente pequeña aspiración volumen, y que la flora bacteriana en los pulmones serían similares a los que en el líquido aspirado gástrico.
Métodos
los niños de entre 0.75-14 años sometidos a endoscopia superior flexible electiva fueron invitados a participar en el estudio (agosto de 2002 hasta junio de 2004). Todos los niños sometidos a endoscopia superior flexible habían visto a un gastroenterólogo pediátrico consultor y el procedimiento que se realiza bajo anestesia general, incluyendo la intubación endotraqueal. Los niños fueron inscritos para el estudio en la mañana de su procedimiento. historial médico se obtuvo de un padre en una proforma estandarizado para todos los niños. Los criterios de exclusión fueron; niños con anomalías del desarrollo neurológico, conocidos subyacente de la enfermedad cardiorrespiratoria otro entonces el asma y aquellos con un historial clínico de aspiración primaria (tos y Bobinas con los canales por lo menos dos veces a la semana). ERGE se consideró presente si la histología de la biopsia del esófago distal mostró esofagitis por reflujo determinados por patólogos cegados a la historia respiratoria del niño [14]. Se obtuvo el consentimiento por escrito y el estudio aprobado por el comité de ética humana de nuestra institución.
Al comienzo de la endoscopia superior flexible, se obtuvo el jugo gástrico directamente bajo la visión y succiona en una trampa de moco. Cuando < se obtuvieron 0,5 ml, se utilizó 5 o 10 ml de solución salina y recuento de colonias de un organismo (si cultivada) fue corregido por el mismo factor. Para obtener el líquido BAL, un no bronchoscopic estandarizada y repetible [15]. Se utilizó la técnica. En pocas palabras, con la cabeza del niño hacia la izquierda, un catéter 8F se aprobó la medida de lo posible a través del tubo endotraqueal, asegurando que iba más allá del sitio de carina estimado. solución salina normal estéril (1 ml /kg hasta un máximo de 20 ml) se instiló y succiona en una trampa de moco y este espécimen fue utilizado para el examen de microbiología. A más de 1 ml /kg (máximo de 20 ml) fue inculcado y el º 2 de recogida utilizado para la citología y lípidos recuento de macrófagos cargados. recuento de células se realizó en la suspensión celular, cytocentrifuge diapositivas fueron preparadas y teñidas (tinción de Wright modificado, Dif Quik, Lab Sida, Narrabeen, NSW, Australia) para el perfil diferencial de células (400 células contadas cuando sea posible). diapositivas adicionales se prepararon para LLMI utilizando Oil Red O mancha (Sigma Chemicals), donde 100 macrófagos contados y anotó 0-4 [16, 4]. LLMI (rango de 0 a 400) se obtuvo mediante la adición de estas puntuaciones. Todos los exámenes celulares y LLMI fueron realizadas por citotecnólogos ciego a la historia médica de los niños
cultivos aeróbicos cuantitativas de bacterias fueron llevadas a cabo en BAL y los jugos gástricos mediante bucles estériles estándar. (10 & 100 ul) en placas de sangre y agar chocolate para la detección bacterias de aeróbica. Las placas se incubaron a 35 ° C durante 48 horas y aísla cuentan y se identificaron a nivel de género. cultivo bacteriano positivo se definió como el crecimiento de ≥ 10 4 formadoras de colonias de unidades /ml [17]. También se realizaron estudios virales en BAL; antígeno de inmunofluorescencia directa (DFA) se utilizó para detectar RSV, adenovirus, virus de parainfluenza 1,2,3 y de la influenza A y B. Si la prueba de antígeno viral por inmunofluorescencia directa fue negativa, amplificación de ácidos nucleicos (NAA) se llevaron a cabo pruebas para todos los virus anteriores utilizando el multiplex PCR [18] El análisis estadístico

Los niños se clasificaron con ERGE (G +) y no tener ERGE (G). Chi cuadrado se utilizó para comparar variables categóricas entre los grupos y las odds ratio descrito. Los datos no se distribuyen normalmente y por lo tanto se utilizaron los análisis no paramétricos; Mann-Whitney para las comparaciones entre los grupos 2 y Kruskal Wallis cuando > se compararon 2 grupos. Las medianas y rango intercuartil (IQR) se utilizaron para todos los datos descriptivos. Dos valor de p cola de < 0,05 se consideró significativo. SPSS ver 11 se utilizó para todos los cálculos estadísticos.
Resultados
La edad media de los 150 niños (91 varones y 56 mujeres) estudiados fue de 8,2 años (IQR 7). Las indicaciones principales para oesophago-gastroscopia fueron dolor abdominal (n = 77), vómitos recurrentes (n = 35), poco aumento de peso (n = 20), la revisión de lesión previa (n = 19) y asfixia (n = 17); algunos niños tenían más de una indicación primaria para oesophago-gastroscopia. La mayoría (n = 136, 90,7%) niños fueron clínicamente sospechosos de tener ERGE y esofagitis estaba presente en 77 (51,3%) niños. Había 77 niños en la categoría G +, 73 en G-. Sólo 17 niños tenían exposición al humo de tabaco y como los números eran pequeños, no se hicieron comparaciones.
Grupo G- (mediana de 7, 13 IQR) tuvieron un aumento significativo, pero pequeño en el BAL neutrófilos% en comparación con el grupo G + (5, 7,5), p = 0,002. No hubo diferencias significativas en los porcentajes de macrófagos, linfocitos, eosinófilos y LLMI en BAL entre G grupos G- (tabla 1, el rango desde 0,23 hasta 0,78 p) + y. Cuando se excluyeron los niños cuyos BAL mostró cultivo bacteriano positivo (n = 31), BAL neutrófilos% todavía era significativamente mayor en G- (n = 52) que G + (n = 67) niños, p = 0,009; mediana de 7 vs 4%, respectivamente. Los porcentajes de macrófagos, linfocitos, eosinófilos y LLMI en BAL entre grupos G + y G- no sigue siendo significativamente diferente cuando los que tienen la cultura alcoholemia positiva eran excluded.Table 1 perfil celular de los niños agrupados por la presencia y ausencia de la ERGE

G + N = 77
G- n = 73
linfocitos%
mediana, IQR
4.0, 4.4 3
, 4% de neutrófilos

mediana, IQR página 5, 7.5
7,5, 14% de macrófagos

mediana, IQR
89, 16
88.3, ​​14
eosinófilos%
mediana, IQR
0, 0
0, 0
total de células
mediana, IQR
96, 175
116, 83,5 índice
LLM la mediana
, IQR
42, 47
38, 30
+ G = grupo con esofagitis por reflujo
G = grupo sin esofagitis por reflujo
estudios virales (DFA y NAA) fueron negativos en todas las muestras de BAL. cultivos bacterianos positivos se encontró en el LBA de 31 niños (20,7%) y los aspirados gástricos de 8 (5,3%) niños, la tabla 2. Dieciocho niños tuvieron un crecimiento significativo de S. pneumoniae
en su BAL pero sólo uno de estos niños tuvieron un crecimiento significativo de S pneumoniae
en su aspirado gástrico (10 5). S. aureus
fue encontrado en el BAL de 2 hijos y uno de ellos también tenía un recuento bajo (10 2) de S. aureus en su aspirado gástrico. El perfil celular de estos 31 niños (mediana% de neutrófilos fue de 20, IQR 34;% de linfocitos 6, 8,5;% de macrófagos 65.5, 34) fue significativamente diferente a los que no tienen la cultura alcoholemia positiva (% de neutrófilos 5, 4;% de linfocitos 3, 4;% macrófagos 90, 9); p de 0,00001 para todos los tipos de células. Los niños que estaban G + no eran más propensos a tener la cultura alcoholemia positiva que el grupo G (tabla 3). Treinta y siete niños tenían el consumo reciente (dentro de una semana) de los inhibidores de la bomba de protones (IBP). El uso de IBP no influir en el estado de G + /G (p = 0,452) y también tuvo ningún efecto significativo en BAL estado cultivo positivo (p = 0,762) o el cultivo de aspirado gástrico (p = 0,092) .Tabla 2 bacterias positivas y la cultura en el LBA aspirado gástrico
Crecimiento del organismo de la unidad formadora de colonias ≥104
BAL n
aspirado gástrico n
S. pneumoniae
19 página 6
H. influenzae
10
0
M. catarrhalis
7
0
S. aureus
3
0
Candida
0
2 Tabla 3 Las comparaciones de grupos con cultivo bacteriano positivo en el LBA
Francia culture BAL


categoría de grupo
negativo (< 104 ufc /ml)

positivo (≥104 uFC /ml) guía empresas p valor
OR, IC del 95%
G-
52
17
G +
67 página 14
0,27
0,64, 0,29-1,42
+ G = grupo con esofagitis por reflujo
G = grupo sin discusión la esofagitis por reflujo
En 150 niños , hemos demostrado que los niños con ERGE y sin un problema pulmonar subyacente tienen ninguna anormalidad en su perfil celular de las vías respiratorias o LLMI. De hecho, el porcentaje de neutrófilos fue significativamente mayor en el grupo G- que en el grupo G + (la diferencia entre los grupos fue sin embargo pequeña y no clínicamente significativo). También hemos demostrado que el cultivo bacteriano positivo con patógenos respiratorios reconocidos fue relativamente alta en el 20,6% y no fue influenciado por el estado de G +. Por último se demostró que la microbiología de las vías respiratorias no se corresponde con la de aspirado gástrico en niños con y sin ERGE.
Este es el primer estudio que ha examinado las vías respiratorias celularidad y la microbiología de las vías respiratorias de los niños sin una enfermedad respiratoria subyacente en relación con la ERGE . Aunque el porcentaje de neutrófilos en el BAL de los niños G- fue mayor que en los niños G +, la diferencia entre los grupos fue pequeño (mediana de la diferencia de 2%) y en el contexto clínico esto no es significativo. Estos valores BAL están muy cerca de la gama descrita en niños normales [12]. Hay una escasez de datos sobre los resultados de las vías respiratorias en pacientes con ERGE sin una enfermedad pulmonar subyacente. Nuestros resultados son similares a un estudio pequeño (n = 11) en adultos con ERGE (sin enfermedad pulmonar), que también describe que la ERGE no se asoció con las vías respiratorias neutrofilia. Nuestros resultados de ausencia de neutrofilia de las vías respiratorias en niños con ERGE están en contraste con los estudios que han examinado BAL en niños con enfermedad respiratoria crónica [11]. Es probable que las vías respiratorias neutrofilia en presencia de enfermedad respiratoria es de la enfermedad respiratoria en sí en lugar de a partir de la estimulación del reflejo de traqueo-gástrico. De hecho, en nuestro estudio, el porcentaje de neutrófilos en el BAL de los niños con ERGE fue menor que en los niños sin ERGE. Sin embargo, la ausencia de las vías respiratorias neutrofilia no significa ausencia de inflamación neutrofílica como no examinamos los marcadores de neutrófilos, como la IL-8.
No se encontró ninguna diferencia en LLMI en niños con o sin ERGE. En nuestro estudio, LLMI no es un marcador útil de la presencia de esofagitis por reflujo en niños sin una enfermedad respiratoria subyacente. Las posibles explicaciones incluyen; ninguno de estos niños tuvo aspiración secundaria y /o LLMI no es una prueba sensible para la aspiración secundaria. De hecho, la utilidad de LLMI como un marcador sensible y específico de la aspiración en los niños ha sido cuestionado [6, 9, 10]., Y Colombo informó de que LLMI fue más alta en pacientes underdoing la quimioterapia y la enfermedad del injerto contra huésped [4]. Krishnan y sus colegas describen recientemente, la pobre especificidad y sensibilidad de LLMI para la aspiración [19]. Sin embargo solían aspirado traqueal [4], que no es representativo de BAL [20, 21]. LBA es el método estándar común para examinar las vías respiratorias celularidad en el campo de las vías respiratorias [12].
Se encontró una alta incidencia de cultivo bacteriano positivo (de bacterias respiratorias comunes en el BAL pero no en el aspirado gástrico) en nuestra cohorte de niños , que se define en un umbral elegido de ≥10 4 ufc /ml en base a estudios anteriores [17]. Sin embargo, el umbral de diagnóstico para el cultivo cuantitativo de BAL para la bronquitis en los niños (a diferencia de la neumonía) es desconocida y es necesario tener precaución en la interpretación de la microbiología BAL [12]. Como las vías respiratorias neutrofilia también estaba presente en los niños con cultivo bacteriano positivo es probable que los resultados del cultivo fueron significativas. No se encontró ninguna relación entre la vía aérea y la microbiología aspirado gástrico, lo que sugiere que la aspiración de patógenos gástrico no fue significativa en estos niños. Nuestros resultados están en apoyo de un estudio que muestra que el estómago no es una fuente para la colonización del tracto respiratorio superior y la neumonía [22]. La deglución de secreciones respiratorias de bacterias respiratorias comunes es poco probable que resulte en la cultura aspirado gástrico positivo como el jugo gástrico tiene un efecto bactericida; S. aureus
muere dentro de 30-45 minutos de la inoculación mientras que P. aeruginosa
se mataron en 60-90 minutos [23].
Nuestros datos no pueden ser extrapolados a otras definiciones de la ERGE. Examinamos la ERGE define por biopsia de esófago, un método común de diagnóstico de ERGE en niños en Australia. En nuestra institución, oesophago-gastroscopia se realiza con mayor frecuencia que pHmetría (aproximadamente 800 y 300, respectivamente, por año). Una variedad de técnicas se utilizan para confirmar o apoyar el diagnóstico de ERGE. Sin embargo no existe un método único para la perfecta definición objetiva de todos los tipos de ERGE. Cada modalidad tiene sus ventajas y desventajas /limitaciones. Sin embargo, podría decirse que la esofagitis es la definición estándar de oro, pero también es probable que el método de diagnóstico menos sensible sobre todo cuando la ERGE es leve y /u ocasional o intermitente. Las recomendaciones de la Asociación Americana de Gastroenterología (AGA) en pHmetry declararon "En ausencia de esofagitis, no existe un estándar de oro para la definición de la ERGE ..." [2]. pHmetría ha informado a ser más sensible, pero existe un desacuerdo considerable lo que constituye una pHmetría anormal [1]. Además, algunos gastroenterólogos sostienen que solo pHmetry no se puede utilizar para diagnosticar la ERGE, dados los problemas conocidos descritos en las directrices de la AGA. Por lo tanto, los resultados similares usando la ERGE en base a pHmetría y monitorización de la impedancia eléctrica intraluminal tal vez multicanal, (posiblemente un método más sensible para evaluar la ERGE variantes es decir, ácido y no ácido reflujo [24]) habría que concluir que todos los tipos de ERGE están asociados con el perfil celular de las vías respiratorias normales en los niños por lo demás bien. Sin embargo, dado que no había ninguna anormalidad significativa en ambos grupos de niños examinados en este estudio, es poco probable que cualquier tipo de ácido relacionados con ERGE se asociará con celularidad de la vía aérea anormal en los niños sin enfermedad pulmonar.
Conclusión
Nos la conclusión de que, en niños sin enfermedad respiratoria, presencia de ERGE se define en la esofagitis por reflujo, no está asociado con el perfil celular BAL o anormalidad LLMI. Microbiología anormal de las vías respiratorias, cuando está presente, no refleja la de los jugos gástricos y, no está asociado con esofagitis por reflujo.
Declaraciones
Agradecimientos
Agradecemos a J Gaffney, María DaSilva y las enfermeras de la Departamento de Gastroenterología, hospital Royal Children, así como los anestesistas, en particular, los doctores Chris Beem, un Newton, que Webb, D Hill, y M Pabari, sin los cuales este proyecto no sería posible. Este estudio fue financiado en parte por la Fundación del Hospital de Niños de Real y por la Fundación Sylvia y Charles Viertel Charitable. ABC es apoyado por la Fundación del Hospital de Niños de Real y por un médico de la beca del Consejo de Investigación Médica de Salud Nacional de Australia.

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