Epstein-Barr karcinom virus želodca, povezanih: poročilo iz Irana v zadnjih štirih desetletjih

Epstein-Barr karcinom virus želodca, povezanih: poročilo iz Irana v zadnjih štirih desetletjih
Abstract
Ozadje
Epstein-Barr virus se je izkazalo, da je povezana z mnogimi človeškega maligne bolezni, vključno z rakom želodca eden izmed najpomembnejših človeških malignih sprememb v svetu. Ni bilo študija o prisotnosti EBV v adenokarcinomom želodca v Iranu.
Metode
Preverili smo prisotnost EBV v 273 formalin fiksno parafin vgrajeni primerov želodčnega raka od raka instituta teheranski univerzi, od leta 1969 do 2004. situ hibridizacijo-EBV kodiran majhne RNA-1 (Eber-1) je bila opravljena. Sev pozitivnih primerov je bila proučena s pomočjo verižne reakcije s polimerazo in /ali omejitev fragment analizo dolžina polimorfizem
Rezultati
Našli smo 9. (3%; 95% CI = 1-5%), EBV pozitivne primere. Razlika med spoloma ni bilo statisticno pomembna. Delež primerov EBV-GC v razpršenega tipa je bila višja od črevesne tipa (OR = 0,08, 95% CI = 0,002-0,64). Primeri EBV-GC imela nobene zveze s starostjo, lokacijo in invazijo. Šest od 9 primerov EBV-GC so bili rojeni v obdobju med 1928 in 1930. Vsi 9 primerih so bili tipa A. Prototype F je bila opažena v 6 od 8 primerov. Tip "i" je bilo v 8 primerih in tipa I v 1 primeru. XhoI + in XhoI- polimorfizem predstavljali 6 in 3 primere, oz.
Zaključek
Naša raziskava je prva, ki opisujejo pogostost EBV-GC v Iranu in na Bližnjem vzhodu, kar kaže na zelo nizko prevalenco s posebnim clinicopathologic Lastnosti. Prevladovanje EBV-GC leto rojstva v določenem obdobju, kaže, da se okužbe z EBV ali drugih dogodkov v zgodnjem otroštvu lahko povezano z razvojem EBV-GC kasneje v življenju. Prevlada tipa "i" in XhoI + primeri so v nasprotju z drugimi študij v Aziji in je podoben temu, kar poročajo iz držav Latinske Amerike.
Ozadje
virus Epstein-Barr (EBV) je vseprisotno dvojno vijačnico DNK virus z virusom humane herpes družine, ki ima B-lymphotropism [1]. Več kot 90% odraslih v svetu so serološki dokaz okužbe s tem virusom [1]. To se pridobi v zgodnjem otroštvu in starosti okužbe je veliko nižja v nerazvitih državah z nizkim socialno-ekonomskim pogojem [1]. Po primarni okužbi se virus vzpostavlja vseživljenjskega latentno okužbo limfocitov B-celic, kjer je prisotna pri 1 od 10 10/05 6 v obtoku celic [2]. To izraža antigene v tej latentni fazi, ki se je izkazalo, da so nekateri onkogeni lastnosti [3-8]. Obstaja veliko dokumentov o vzročni povezavi med EBV in limfnih malignih bolezni kot so limfom Burkittovega v ekvatorialni Afriki [9], limfom nosno T /NK [10], Hodgkinov limfom [11] in B-celični limfom pri bolnikih z oslabljenim imunskim [12]. EBV ima tudi sposobnost okužbo epitelijskih celic, in ima tudi tumorogenic učinek v teh celic iz katerih je nazofaringealni karcinom eden od pomembnih prototipov [13].
Je bila objavljena leta 1990 v prvem poročilu o vpletenosti EBV v raka želodca lymphoepithelial karcinom želodca [14]. Zato je leta 1992 Shibata in Weiss poročali odkrivanje EBV pri 16% navadnih raka želodca v ZDA [15]. Od takrat se je razširjenost raka želodca, EBV povezana (EBV-GC) Raziskati in navesti v različnih državah, ki se gibljejo med 3 do 18% [15-34 let] z najnižjo razširjenostjo na Papui Novi Gvineji, Pakistan in Koreja, ki je od 1 do 3%, najvišja pa v Nemčiji in ZDA, ki je 16 do 18%
Obstajajo številni dokazi za vzročno povezavo med EBV in raka želodca, kot so:. monoclonality virusov v neoplastične celice, ki se je izkazala s edinstveno terminal ponovitev EBV DNA [35]; enotna prisotnost EBV v vseh tumorskih celic, in situ hibridizacije Eber-1 odkrite, vendar ne v okolici epitelne celice [15-34], zvišanje IgG in IgA proti virusni kapsidnega antigena nekaj mesecev pred klinično sliko bolezni [36 .]
EBV-GC prikazuje nekaj stalnih značilnih clinicopathologic funkcije, kot so nagnjenost k zgornji dve tretjini želodca [15-17, 19-31]; zmerno razlikuje cevasto za slabo diferenciran trdna vrsta histologijo [16-22, 32, 33]; nima vpliva na stromalni invazije in preživetja [15, 16]; in moški prevlado v večini študij. Vendar pa je zadnja ni videl v nekaterih izjemnih študij, ki se izvajajo v Mehiki [32, 37], Čilom [16] in Kitajsko [38]. Starostne odvisnosti ni razvidno, v večini študij. Vendar študije v Kolumbiji [19], in Kazahstan [28] kažejo večjo razširjenost med mlajšimi bolniki.
EBV ima dve glavni vrsti, tipa 1 in tipa 2, ki se razlikujejo v svoji vlogi za preoblikovanje B-limfocitov v stanje stalno orožja [39]. Type 1 prevladuje v zahodnih in azijskih državah, medtem ko tip B prevladuje v Afriki in je videti bolj pogosto pri bolnikih z oslabljenim imunskim [40, 41]. Poleg tega obstajajo tudi tri druge variante, ki se odlikujejo po dolžine restrikcijskih fragmentov polimorfizma (RFLP) z BamHI in Xhol omejitev endonukleazna encimov. Na območju BamHI-F ima Prototip F distribucijo po vsem svetu in "F" varianto, ki ima posebno mesto za encim prevladuje na jugu Kitajske, ki je povezan z nazofaringealnega karcinoma [42, 43]. Polimorfizem v BamHI-W1 /I1 robnega območja vodi v dveh izvedbah; tip I in "i". Tipa I, ki je prevladujoč na Japonskem in na Kitajskem nima mesta za BamHI encima [44, 45] in tipa "i" z dodatnim BamHI strani je videti bolj pogosto v zahodnih državah [46]. Končno, polimorfizem v Xhol omejitve mestu v aksona 1 gena LMP1 opredeljuje Xhol , ki + je bolj razširjena v zahodnih državah [47] in Xhol -., Ki se pogosto kaže v Aziji [44]
Iran je ena izmed držav, ki imajo visoko incidenco raka želodca z letno incidenco 26,1 na 100.000 za moške in 11,1 za ženske. To je druga najbolj razširjena rak in prvi vodilni vzrok smrti zaradi raka pri moških v Iranu [48]. Vendar pa ni študija o razširjenosti ali genotipa EBV raka želodca na tem področju. Zato smo se odločili, da jo oceni v najstarejšem napotitev center za raka želodca v Iranu.
Metode
Osebki
smo pregledali 273 kirurško resekcija želodca primerov raka v tej študiji. Zadeve so bile naključno izbrane iz 1325 želodca primerov raka, registriranih v rakavih inštitutov teheranski univerzi med 1969 - 2004, ki so nedotaknjena parafinske bloke in patološke poročila. Formalina fiksno parafin vgrajeni tkivo teh primerih so bili izbrani in poslani Kagoshima University Graduate School medicinskih znanosti, na Japonskem, za nadaljnje molekularne vrednotenja. Patološki podatki so bili pridobljeni s ponovno oceno H & E barvna stekelca z dvema patologov (AA & SGS). Vsi razpoložljivi demografski podatki so bili pridobljeni iz razpoložljivih patoloških in zdravniških poročil bolnikov.
Pathology
Vsi vzorci so bili ponovno razvrščeni v zvezi s prevladujočo histološko vzorca kot črevesju in razpršenega tipa po klasifikaciji Lauren [49] in sub-razvrščena v skladu s smernicami japonske raziskovalne družbe za rakom želodca [50] z dobro diferenciranim cevasto adenokarcinom (tub1), zmerno diferencirani adenokarcinom (tub2), trdna slabo diferenciran adenokarcinom (por1), non-solid slabo diferenciran adenokarcinom (por2 ), Pečatnjak karcinom (sig), mucinozni karcinom (muc) in slabo diferenciran lymphoepithelial podobno karcinom (LE).
lokacijo tumorji v skladu s prevladujočo lokaciji lezij so razvrščene kot zgornja tretjina ali Kardije, srednji tretjini ali telo in spodnje tretjine ali antruma v skladu s smernicami japonske raziskovalne družbe za rakom želodca [50]. Ni bilo multifokalne primer v naši raziskavi.
Globino invazije je bil razvrščen kot sluznico, sub-sluznico, muscularis proprie in serozne udeležbo.
Situ hibridizacija
je EBV označene z izražanjem EBV-kodiranih majhne RNA-1 (Eber-1). Hibridizacija in situ s komplementarno digoksigeninom označenih 30-baznega oligomera je bila uporabljena za odkrivanje Eber-1 v skladu s postopkom, ki ga Chang et al [51] že prej opisali. 4-5 Lun sekcije montirana na silana prevlečena stekla drsi bili pripravljeni za vsak primer. Tkiva na straneh smo deparaffinized, rehidrirani predigested z pronaza, predhibirdiziramo in nato hibridiziramo preko noči pri 37 ° C z 0,5 ng digoksigenin-markirano sondo. Signal hibridizacija bila odkrita konjugata antidigoxigenin protiteles alkalne fosfataze. Profili iz bolnika z znanim raka želodca Eber pozitivni so bili uporabljeni za pozitivno kontrolo in občutek sondo Eber-1 smo uporabili za negativno kontrolo za vsakega postopka.
Priprava DNA
s formalinom fiksno in parafin -embedded osebek smo razrezali v 10 mikrometrov debele rezine in DNK vzorec smo pripravili po metodi, ki jo Greer et al [52] opisan. Na kratko smo rezine obdelali s ksilenom in etanola in centrifugirali pri 22.000 g 20 min in nastali pelet ponovno suspendiramo v 100 ul za razkroj pufra (1 M Tris, pH 8,0, 50 mM EDTA, 0,5% Tween 20) s 200 ug /ml proteinazi K in inkubirali pri 55 ° C preko noči. Po 10 min vre pri 100 ° C, ekstrakcija in padavin DNK je bila izvedena s fenolno-kloroformom in etanola oz.
Primerjev in sond
štiri različne regije, EBNE-3C, BamHI-F, BamHI-W1 /I1 in Xhol mestu v LMP1, so bile uporabljene za določitev virusne genotipov. Tabela 1 prikazuje seznam sete začetnih oligonukleotidov in sonde, ki se uporablja v tej study.Table 1 Seznam začetnih oligonukleotidov in sonde, ki se uporablja v tej študiji
genotipa
Sequence
tipa z sondo ali velikosti po RE1 prebavo
Reference
EBNA-3C
Temeljne barve
Sense
5'-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3 "
Protismiselno
5'-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3
Vzorec sod. (53)
sond
Type 1
5'-GAAGATTCATCGTCAGTGTC-3 '
153 BP2
tipa 2
5'-CCGTGATTTCTACCGGGAGT-3'
246 bp
BamHI-F
premazi
Sense
5'-TCCCACCTGTTACCACATTC-3 "
prototipov F: 198 bp
Lung et al. (54)
Protismiselno
5'-GGCAATGGGACGTCTTGTAA-3 '
Varianta "f": 127 + 71 bp
Probe
5'-AAGGCTACCGTGCTAATTACCTCC-3 "
Hudson et al. (55)
BamHI-W1 /I1
primers
Sense
5'-ACCTGCTACTCTTCGGAAAC-3 "
tipa I: 205 bp
Lung et al. (54)
Protismiselno
5'-TCTGTCACAACCTCACTGTC-3 '
tipa "i": 130 + 75 bp
Xhol mestu v LMP1
Temeljne barve
Sense
5'- AACAGTAGCGCCAAGAGGAG-3 '
XhoI +: 113 bp
Sandvej sod. (56)
Protismiselno
5'-ATGGAACACGACCTTGAGAGG-3 '
XhoI-: 67 + 46 bp
1Restriction encim; 2Base parih
Vrste 1 in 2 so priznane s pomnoževanjem U2 regije EBNA-3C gena, ki ga primerji, opisanih Vzorec et al [53], ki je dala 153 in 246-bp fragmente, oz. So priznavajo Southern blot hibridizacija (SBH) z za tip značilnimi notranjih sond, ki jih Vzorec et al [53] opisanih. Regija BamHI-F je bila dopolnjena s primerji niz, ki ga Lung et al [54] opisanega. Posledična 198-bp fragment smo razgradili s BamHI omejitev encima, ki vpil na 198-bp fragment v primeru divjega tipa F in 127-bt in 71-bt fragmentov v primeru "f" variante. Divjega tipa F in f variante so bile potrjene s SBH z notranjo sondo, kot je opisano prej [55]. Za razlikovanje /variante sem, da je bil BamHI-W1 /I1 regija pomnožili s pomočjo set primer s Lung et al [54] opisan. Prebava z BamHI omejitev encimom vpil 205-bp fragment v tipa I in 130 bt in 75 bt fragmentov v primeru "i". So bili potrjeni tudi SBH z kloniranega fragmenta sondo BamHI-I DNA. Analiza polimorfizma v eksonu 1 LMP1 gena smo izvedli ob uporabi primerske videz z Sandvej et al [56], kar je povzročilo 113-bp fragmenta opisanega. Po razkroju z Xhol restrikcijskim encimom, Xhol + primeri, ki vsebujejo cepišče Xhol (Xhol hranijo) kažejo 67-bp in 46 bp fragmente, vendar Xhol - primeri kažejo, izvirno neprebavljeno 113-bp PCR produkt. 113 bp fragment PCR produkta celične linije B95-8 smo uporabili kot sondo za potrditev Xhol cepitvenem mestu LMP1 z SBH [57].
Za tipa 1, divjega tipa F, tipa I in Xhol - virusi celična linija B95-8 uporabimo kot pozitivno kontrolo. V celične linije AG786 in Akata in klonirali BamHI-'f "in BamHI-" i "DNA fragmenti služil kot pozitivne kontrole za tip 2, Xhol -" f "varianto, in tipa" i "viruse oz. herpes virus humani 6 okužene celične linije MOLT-4 uporabimo kot negativno kontrolo [58].
verižno reakcijo s polimerazo
Pomnoževanje ciljne DNK je bila izvedena z uporabo 2 xl DNA in zmesi 10 mM Tris-HCl, pH 8,0 50 mm KCl, 1,5 mM MgCl 2, 200 uM dNTP-jev, 1 iM vsakega temeljni premaz in 1.0 U Taq polimerazo (Hot Star, Qiagen, Nemčija) v končnem volumnu 25 ul zmesi. Protokol se uporablja za pomnoževanje EBNE-3C gena bil en cikel pri 95 ° C za 15 minut, čemur sledi 40 ciklov denaturacijo pri 95 ° C 1 min, kaljenja pri 46 ° C 1 min in raztezek pri 72 ° C 1 min in končno končala s 5 min pri 72 ° C. Protokol uporabljen za BamHI-F, BamHI-W1 /I1 in Xhol mestu pomnoževanju bil en cikel pri 95 ° C za 5 minut, čemur sledi 40 ciklov denaturacijo pri 95 ° C 1 min, kaljenja pri 43 ° C 1 min in raztezek pri 72 ° C 1 min in končno končala s 5 min pri 72 ° C. Elektroforeza v 2% agaroznem gelu in barvanjem z 0,5 ug /ml etidijevim bromidom smo izvedli za identifikacijo produktov PCR.
Omejevanju analiza fragmenta dolžine polimorfizma
proizvodov pomnožena DNA (15 ul) smo razgradili z 10 U BamHI ali Xhol restrikcijski encimi, v skladu z navodili proizvajalca in z elektroforezo vizualizira v 2% agaroznem gelu, obarvanem z 0,5 ug /ml etidijevim bromidom in prenesen na najlonsko membrano za SBH.
Southernu hibridizacijo
Specifičnost PCR reakcija je bila potrjena z SBH. Elektropotopni DNK smo prenesli na najlonsko membrano Haybond-N + (Amersham, Pharmacia Biotech, UK) s kapilarno blotting uporabo 0,4 N raztopine NaOH. Membrane predhibirdiziramo s hibridizacijo pufrom za 1 uro pri 42 ° C. Po dodajanju sondo, smo hibridizacija izvedena preko noči pri 42 ° C. Sonde tipov A in B, in BamH-I F so bili označeni z Dig oligonukleotidov 3'-end komplet za označevanje in odkrije Dig svetlečega komplet za odkrivanje (Boehringer Mannheim, Nemčija). Za zaznavanje BamHI-I fragment in Xhol polimorfizem v LMP1 je hibridizacija izvaja z uporabo ECL neposredno označevanje in odkrivanje komplet (Amersham, Pharmacia Biotech, Združeno kraljestvo) v skladu z navodili proizvajalca.
Statistična analiza
bil Statistična analiza opravi s pomočjo LogExact 7,0 programske opreme (statistični paket za regresijsko postopku featuring natančne metode); Cytel Studio 7.0.0 paket (Cytel Software Corporation, 2005). Natančno test binarno logistično analiza je bila izvedena za primerjavo deleža EBV pozitivnih primerov med adenokarcinomom želodca. Spol, starostne skupine (< 50, 50-69 in ≥ 70 let), anatomsko lokacijo tumorja (antruma, telo in Cardia), invazije tumorja (serosa, drugi) in histološko klasifikaciji Lauren so bili vključeni kot neodvisne spremenljivke. Multinominal spremenljivke smo razdelili na n-1
nepravih Binominalna spremenljivk (n
je število kategorij). Razmerje obetov s 95% intervalom zaupanja smo izračunali za vsako kategorijo. Type 1 napaka (α) je bila določena na 0,05. Vse p vrednosti so bile dvostransko.
Rezultati
Pregledali smo 273 želodčni rak, vključno s 196 (72%) moških in 77 (28%) žensk. Povprečna starost je bila 57.3 ± 11,3 (SD) let (razpon: 24-90; mediana: 58). Večina (108 primerov, 66%) je bilo starih od 50 do 69 let, je bilo 54 (20%) primerov manj kot 50 in preostali so bili več kot 70 let. Sto trideset primerov (48%) so se nahajala v antruma, in 64 (23%) in 71 (26%) primerih so se nahajala v telesu in Kardije oz. V 5 primerih je lokacija ni bila opredeljena in v 3 primerih so bili vsi v želodcu stena vključen (linitis plastica), ki niso bile vključene v statistični analizi. Kot je prikazano v tabeli 2, večini primerov so bile črevesne tipa (56%). Tabela 2 Porazdelitev Eber-1 pozitivnimi želodca karcinomov s histološki tip in spol
Histology1

Moški
Ženski
Skupaj

Eber + /N2 (%)
Eber + /N (%)
Eber + /N (%)
črevesne
1/113 (1)
0/39 (0)
1/152 (1)
pap
0/11 (0)
0/3 (0)
0/14 (0)
tub1
0/36 (0)
0/11 (0)
0/47 (0)
tub2
1/50 (2)
0/16 (0)
1/66 (1)
muc
0/16 ( 0)
0/9 (0)
0/25 (0)
razpršenih
7/83 (8)
1/38 (3)
8/121 (7 )
por1
3/34 (8)
16/01 (6)
4/50 (8)
por2
4/40 (10)
0 /18 (0)
4/58 (8)
sig
0/9 (0)
0/4 (0)
0/13 (0)
1 pap: papilarni adenokarcinom; tub1: dobro diferenciran cevni adenokarcinom; tub2: zmerno diferencirani adenokarcinom; por1: trdna slabo diferencirani adenokarcinom; por2: non-solid slabo diferenciran adenokarcinom; sig: pečat karcinom obroč celic; muc: mucinozni karcinom; 2 Skupno število zadev, v vsaki skupini (na podlagi japonske raziskovalne družbe za rakom želodca)
Razširjenost EBV pozitivnih primerov
Eber-1 je bila odkrita v devetih od 273 primerov (3%), ki so bile ocenjene kot EBV GC. Signal je omejen samo na jedrih tumorskih celic, vendar ne najdemo v ne-tumorskih celic (sl. 1). Slika 1 Primer EBV pozitiven gasrtric karcinoma. Zmerno razlikujejo tubularni adenokarcinom z občasno tvorbo tubul (A); jedrska Eber pozitiven signal v vseh tumorskih celic, ugotovljenih z in situ hibridizacija (B).
dejavnikov, povezanih z EBV pozitivnih primerov
Tabela 3 prikazuje frekvence EBV-GC glede na starost, spol, lokacijo, histologijo in invazije, pa tudi kot rezultat logističnega analysis.Table 3 rezultat logistične analize
spremenljivk
Eber + /N1
(%)
OR2
95% CI2
spolov
ženska
1/76
(1)
1
referenčna
moški
8/188
(4)
0,3
0,01-2,96
P
= 0.595
Starost
≥ 70
1/36
(3)
1
referenčna
50-69
5/180
(3)
0,8
0,08-44,62
< 50
3 /54
(6)
1.3
0,08-81,25
P
za trend = 1,0
Kraj
zgornjem
1/71
(1)
1
referenčna
sredini
5/64
(8)
6,0
0,1-77,86
Spodnji
3/130
(2)
1.4
0,63-296,7
P
za heterogenosti = 1.64
Histologija
difuzna
8/121
(7)
1
referenčna
črevesne
1/152
(1)
0,08
0,002-0,64
P
= 0,009
Invasion
Muscle
3/33
( 9)
1
referenčna
serose
6/222
(3)
3.6
0,47-24,03
P
= 0,243
1Skupno številka v vsaki skupini; 2OR in 95% interval zaupanja so bili pridobljeni s točno preizkus binarno logistično analizo.
Spol in starost
osem od 188 (4%) moških primerih in 1 od 76 (1%), ženske primeri so bili EBV pozitivna. Čeprav je moški prevladujejo v tej študiji ni bilo statistično pomembna (p
= 0,5). Slišati je bilo tudi med starostjo in EBV-GC nobene povezave (p
= 1).
Tumor lokacija
Glede na anatomsko lokacijo, 5 od 64 (8%) telesa tumorjev, 1 od 71 (1 %) srčne tumorji in 3 iz 130 (2%) antralnih tumorji so EBV povezana. Čeprav je bila večina EBV-GC nahaja v zgornjih dveh tretjinah ni bilo pomembno statistično (p
= 0,1).
Histološki tip
Na podlagi razvrstitve Lauren, 8 od 121 (7%) razpršenih primeri tipa so povezana EBV, vendar samo 1 od 152 črevesne tip je bil EBV pozitiven, kar je bila statistično značilna (p
= 0,009). Po japonski razvrščanjem, por2 in por1 so prevladovali histološke vrste na EBV-GC (tabela 2), vendar pa je glede na majhno število primerov, v vsaki skupini statistično analizo ni bilo mogoče izvesti.
Invazija
V tej študiji je so bili samo 2 primerov, ki so omejene na submucosa in nobeden od njih prikazuje Eber-1 signal ISH. Tako je glede na majhno število, ti primeri so se ne šteje v statistično analizo. Ni bilo nobene razlike med EBV pozitivnih in negativnih primerov v zvezi z napadom na korena in muscularis proprie (p
= 0,24).
Druge ugotovitve
pomembnem mestu v naši raziskavi je bilo dejstvo, da je 6 od 9 EBV bolnikov GCS so bili rojeni med "1928-1930". Vendar pa je statistična analiza ni bila narejena zaradi majhnega števila.
Genotipizacija
podtip EBV genoma je bila določena v vseh 9 primerih. Vsi naši primerov je bilo tipa 1. regija BamHI-F je bila uspešno pomnožili v 8 od 9 EBV-GK, ki je šest od njih je pokazala prototip F (sl. 2). Pomnoževanje BamHI-I /WI1 bila uspešna v vseh primerih in razen ene; vsi primeri so bili "i" tipa (sl. 3). Analiza polimorfizma v eksona 1 LMP1 gena je pokazala, da so bili 3 primeri Xhol - in 6 primerov so Xhol + (slika 4). Tabela 4 povzeti vse demografske, patološke in genotip podatke o EBV-GC v tem study.Table 4 klinično-patološke in genetskih značilnosti EBV-GC

leto rojstva
Diagnostic leto
Starost
Spol
Lacation
Invasion
Histologija Lauren /WHO
EBNA-3 tipa A /B

tipa BamHI-F F /"f"
BamHI-I tipa I /"i"
Xhol +/-

1
1949
1981
32
Male
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
2
1929
1982
53
Male
Middle
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
3
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Intestinal/tub2
A
F
"i"
+
4
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
F
I
+
5
1940
1983
43
Female
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
6
1930
1986
56
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
ND1
"i"
+
7
1928
1988
60
Male
Upper
Serosa
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
8
1928
2001
73
Male
Middle
Serosa
Difuse/por2
A
"f'
"i"
-
9
1953
2002
49
Male
Lower
Seroasa
Diffuse/por2
A
"f"
"i"
+
1Not določena; tub2: zmerno diferenciran adenokarcinom por1: trdna slabo diferencirani adenokarcinom; por2: non-solid slabo diferenciran adenokarcinom
Slika 2 Izid južni blot hibridizacija za BamHI-F regiji. Štirje vzorci so videli v tej sliki je bil vsak vzorec naložen v 2 stez in brez encima, oziroma od leve. Prvi vzorec ni bil pomnožili v tem poskusu. Ostali trije primerki niso bili razcepi Bam-HI encima, kar pomeni, da so divji tip F. (+: pozitivna kontrola; + /enz: pozitivna kontrola z encimom, -: negativna kontrola).
Slika 3 Izid južni popivnamo hibridizacijo za BamHI-W1 /I1 regiji. Vsak vzorec smo nanesli na 2 stez in brez encima, vsakokrat v levo. V vzorcu enega ni bend v drugem pasu, kar kaže, da je bil produkt PCR prebavi, vendar nismo mogli odkriti razdrobljene pasove, saj je prvotna zasedba vsebuje majhno število kopij DNK, zato smo ga obravnava kot tip "i". Vzorci, 2, 5 in 6 se cepimo, kar pomeni, da so tipa "i". Polimorfizem vzorcev 3 in 4 niso bili določeni v tem poskusu. (+: Pozitivna kontrola; + /enz: pozitivna kontrola z encimom, -: negativna kontrola).
Slika 4 Izid Xhol polimorfizem v južni blot hibridizacija. Vsak vzorec je bil naložen v 2 stez in brez encima, oziroma od leve. Prvi in ​​drugi osebki cepimo z encimom, kar pomeni, da so XhoI +. Tretji je XhoI-. (+: Pozitivna kontrola + /Enz: pozitivna kontrola z encimom, -: negativen nadzor).
Razprava
tej študiji zaznali EBV-GCS pri 3% v želodcu karcinomov in predlagal, da se večina želodčnih karcinomov v Iran so EBV-negativni. Ni bilo LELCs, ki so dobro znano, da je treba močno povezane z EBV [59]. Čipke vzorec, ki je edinstven morfologija pri EBV-pozitivnih zgodnjega raka želodca [60], ni bila opažena v naši raziskavi. Ta frekvenca je med najnižjimi frekvenc v svetu. Kot že omenjeno, po klasifikaciji Svetovne zdravstvene organizacije, ki je na severu Irana velja za enega regije z visoko želodčnega karcinoma frekvenco v svetu [61]. Redki študije v Iranu kažejo tudi to dejstvo, razen, da se kažejo bolj ali manj homogeno po vsej državi [48, 62, 63]. Tako EBV-GC frekvenca v Iranu nizko podpira prejšnjo hipotezo, da imajo visoke države z visokim tveganjem za GC nizke stopnje EBV-GC [64]. To potrjuje tudi prepričanje, da je nizka v Aziji kot razširjenosti 3% v Koreji [25], 6% na Japonskem [24], 6% na Kitajskem [26], 5% v Indiji [18], za 2% Pakistan [29] in maksimalno 10% v Maleziji [27], Taiwan [21] in Kazahstan [28]. To pa je veliko nižja od Kazahstan frekvence, (naši bližini država) z veliko podobnosti v meri in socialno-ekonomskimi razmerami.
Razširjenost EBV-GC pri karcinomu difuzna tipa želodca je več v naši raziskavi, je dejstvo, ki je bil videti v večini študij Latinske Amerike [16, 32] in nekaterih državah v Aziji, kot so Koreja [25], Kitajska [26] in v Indiji [18]. Vendar pa obstaja veliko nasprotujočih si študij, ki ne kažejo nobenega odnosa v tem konceptu [15, 17, 19, 23, 33]. Koriyama et al [23] v svoji klasični študiji predlagano, da obstaja še veliko drugih dejavnikov, ki imajo vpliv na pojavnost difuznega tipa raka želodca, kot so starost, spol in lokacijo in nasprotujočih si rezultatov v različnih študijah je mogoče razložiti z razliko v porazdelitvi teh dejavnikov.
Čeprav je bilo razmerje moški /ženske približno 4 v naši raziskavi, ni bilo pomembno statistično analizo. Pomanjkanje želje spola so opazili pri drugih študijah v Mehiki [32, 37] Čile [16] in eno območje na Kitajskem [38]. Vendar pa moramo upoštevati, da je lahko majhno število pozitivnih primerov v naši raziskavi razlog nepomembno rezultata analize. Medtem, Koriyama et al [23] kažejo, da je prednost spolov za EBV omejen na razpršeno tipa GC in se ne vidi v črevesju tipa. Kljub temu, glede na majhno število naših primerov nismo mogli izvesti analize ločeno za vsako vrsto.
Povečanje raka zgornjem delu trebuha kljub zmanjšanju celotne incidenco želodčnega raka se kaže v številnih raziskavah po vsem svetu [ ,,,0],65, 66]. Obstajajo tudi številne dokaze, ki jih ima ta vrsta raka želodca različnih dejavnikov tveganja [67-69]. EBV je eden izmed njih [15-31]. Abdirad et al [70] prav tako kažejo, da je tako povečanje raka zgornji tretjini želodca v Iranu. Kljub naše pričakovanje, ta študija ni pokazala nobene prednosti za EBV za zgornji ali srednji tretjini želodca. Pomembno je opazil, da kljub več potrditvenih študij v zvezi s tem, je tudi takšno razmerje ni v naših sosednjih državah, in sicer Kazahstan [28] in Indija [18].
EBV v naši raziskavi ni pokazalo nobene povezave s starostjo in globino invazije. Nekatere študije kažejo, da je težnja EBV-GC pojavljajo v spodnjem dobi [19, 26, 33, 38]. Vendar Koriyama et al [23] je pokazala, da je le črevesno vrsta EBV-GC kaže to starostno prednost, in predlaga, da se razlika v starosti izpostavljenostjo nekaterim kofaktorjev je pri vsakem od teh vrst verjeten razlog.
Eden zanimivo izsledki te študije, je dejstvo, da je 6 od naših 9 primerih EBV-GC, ki so bili izbrani naključno, so bili rojeni v obdobju med 1928 in 1930. Kljub temu, da ni bilo mogoče izvesti nobene analize glede na majhno število pozitivnih primerov, ta ugotovitev se zdi pomembno, saj epidemiološka študija je nakazala, da se okužba z EBV v zgodnjem otroštvu lahko povezano z razvojem EBV-GC v odrasli dobi [71]. Čeprav nimamo dokazov, bi se lahko razmišljalo hipoteza. Na primer, posebnih pogojev ali dogodkov, ki vodijo do okužbe z EBV v zgodnjem otroštvu ali so posledica izpostavljenosti nekaterih posebnih dejavnikov sodelovanje tveganja, ki bi lahko obstajale okoli poznih 1920. Zato predlagamo študijo primerov in kontrol s poudarkom na raka želodca pri bolnikih, rojenih okoli poznih 1920 primerjati razširjenost EBV pri teh bolnikih z drugimi.
Genotipizacija virusa je pokazala, da tip 1 je ekskluzivni tip v vseh naša EBV-GC. Prevlada tipa 1 je v dogovoru z drugimi študijami [18, 45, 58, 40]. Tipa 2 se večinoma obravnavajo v Afriki [40] in je prepričanje, da je šibkejša od tipa 2 in se večinoma kaže v imunsko pomanjkljivostjo bolnike [40, 72]. Prototip F na BamHI-F je bila najpogostejša vrsta v tej študiji. Ta tip je svetovni porazdelitev, razen na jugu Kitajske, ki je "f" varianta razširjena in povzroča nazofaringealnega karcinoma [43, 45]. Naša ugotovitev je enaka kot podobne študije v želodcu raka v Indiji [18], na Japonskem [73], in Čilom [58]. BamHI-W1 analiza /I1 regija polimorfizem je razvidno, da je bilo 90% naših primerov tipa "i". Prejšnje študije so pokazale, da je tip mi je najbolj razširjena v Aziji [45, 54] in tipa "i" je najbolj v zahodnih državah [46]. Ta vzorec porazdelitve je bil viden tudi v podobnih raziskavah na EBV-GC [18, 45, 73]. Vendar se zdi, da je podoben zahodnih državah, kot Corvalan ugotovitev iz Kolumbije in Čila [58] naša ugotovitev. Xhol + je najbolj razširjena vrsta v Xhol omejitve mestu v eksonu enem od LMP1 gena v tej študiji.

• Laparoskopska v primerjavi z odprto resekcijo za zdravljenje želodčnih gastrointestinalni stromalni tumorji: posodobljen sistematični pregled in meta-analysis
• Morebitno sodelovanje Nrf2 posredovano hem oksidaza-1 up-regulacije v zaščitni učinek zaviralcev pantoprazola protonske črpalke proti-indometacin povzroča želodčne škodo v rats