Epstein-Barrin virus liittyvät mahakarsinoo-: raportti Iranista viimeisten neljän vuosikymmenen

Epstein-Barrin virus liittyvät mahakarsinoo-: raportti Iranista viimeisten neljän vuosikymmenen
tiivistelmä
tausta
Epstein-Barrin virus on osoittautunut liittyvän moniin ihmisen pahanlaatuisen lukien mahakarsinoo- , yksi tärkeimmistä ihmisen maligniteettien maailmassa. Ei ole tutkielma läsnäolo EBV mahalaukun adenokarsinoomaa Iranissa. Tool Menetelmät
Tutkimme läsnäolo EBV 273 formaliinilla parafinoidut tapauksissa mahalaukun syöpä Cancer Institute Teheranin yliopiston, vuodesta 1969 vuoteen 2004. In situ -hybridisaatio EBV-koodattu pieni RNA-1 (eber-1) tehtiin. Kanta positiivisten tapausten tutkittiin avulla polymeraasiketjureaktiolla ja /tai restriktiofragmenttipituuspolymorfismin analyysi.
Tulokset
Löysimme 9 (3%; 95% CI = 1-5%) EBV positiivisia tapauksia. Sukupuolten ero ei ollut statisticaly merkittävä. Osuus EBV-GC tapaukset hajanainen tyyppi oli suurempi kuin suoliston tyyppi (OR = 0,08; 95% CI = 0,002-0,64). EBV-GC tapauksissa ollut mitään yhteyttä iän, sijainnin ja hyökkäystä. Kuusi 9 EBV-GC tapausta syntyivät välisenä aikana 1928 ja 1930. Kaikki 9 tapausta olivat Type A. Prototyyppi F nähtiin 6 ulos 8 tapausta. Kirjoita "i" löydettiin 8 tapausta ja tyypin I 1 tapauksessa. XhoI + ja XhoI- polymorfismi oli 6 ja 3 tapauksista, vastaavasti.
Päätelmä
Tutkimuksemme on ensimmäinen kuvata taajuus EBV-GC Iranissa ja Lähi-idässä, korostaen hyvin alhainen esiintyvyys erityisiä ennusteeseen viittaavia ominaisuudet. Hallitsevuus EBV-GC syntymävuoden määräajaksi, viittaa siihen, että EBV-infektio tai muita tapahtumia varhaislapsuudessa voi liittyä kehittämiseen EBV-GC myöhemmin elämässä. Hallitsevuus tyyppiä "i" ja XhoI + tapaukset ovat ristiriidassa muiden tutkimusten Aasiassa ja on samanlainen kuin mitä on raportoitu Latinalaisen Amerikan maista.
Background
Epstein-Barrin virus (EBV) on kaikkialla läsnä kaksijuosteinen DNA virus ihmisen herpesvirus perhe, jolla on B-lymphotropism [1]. Yli 90% maailman aikuisväestöstä on serologisia todisteita tartunnan tämän viruksen [1]. Se on hankittu varhaislapsuudessa ja ikä infektio on paljon pienempi kehittymätön maissa, joissa sosioekonomiset ehto [1]. Sen jälkeen ensisijainen infektio, virus vahvistetaan elinikäisen piilevä infektio B-lymfosyyttien, jossa se on läsnä 1 10 5-10 6 verisolujen [2]. Se ilmaisee joitakin antigeenejä tässä piilevä vaiheessa, jotka osoittautuivat olevan joitakin kasvaimia synnyttävän ominaisuuksia [3-8]. On monia dokumentteja syy-yhteydestä EBV ja imukudoksen pahanlaatuisia kasvaimia, kuten Burkittin lymfooma päiväntasaajan Afrikassa [9], nenän T /NK-solujen lymfooma [10], Hodgkinin lymfooma [11] ja B-solulymfooma immunosuppressiopotilaita [12]. EBV on myös kapasiteettia tartuttamisesta epiteelisolujen, ja myös tumorogeenistä vaikutus näissä soluissa, joista nenänielun karsinooma on yksi tärkeä prototyyppien [13].
Ensimmäinen raportti EBV osallisuudesta mahakarsinoo- julkaistiin vuonna 1990 lymphoepithelial karsinooma mahan [14]. Niinpä vuonna 1992 Shibata ja Weiss raportoitu EBV havaitseminen 16% tavallisten mahakarsinooman US [15]. Sittemmin esiintyvyys EBV: hen liittyvien mahakarsinoo- (EBV-GC) on tutkittu ja raportoitu eri maissa, jotka vaihtelivat välillä 3-18% [15-34] on pienin esiintyvyys Filippiinit, Pakistan ja Korean joka on välillä 1-3% ja korkein Saksassa ja Yhdysvalloissa, joka on 16.-18%.
monia todisteita syy-suhde EBV ja mahakarsinoo- kuten mono- klonaalisesti ja virusten neoplastiset solut, jotka osoitettiin ainutlaatuinen terminaali toista EBV-DNA [35]; yhtenäinen läsnäolo EBV kaikkien kasvainsolujen havaitaan in situ -hybridisaatiolla Eber-1, mutta ei ympäröivään epiteelisoluissa [15-34] ja korkeus IgG- ja IgA-vasta-aineita viruksen kapsidin antigeenille useita kuukausia ennen kuin kliininen näyttö taudin [36 ].
EBV-GC esitetään joitakin vakio ominaisuus viittaavia tekijöitä, kuten alttius ylemmän kahden kolmasosan mahan [15-17, 19-31]; kohtalaisen eriytetty putkimainen huonosti eriytetty vankka tyyppi histologia [16-22, 32, 33]; joilla ei ole vaikutusta strooman hyökkäys ja selviytymisen [15, 16]; ja miesvaltaisuus useimmissa tutkimuksissa. Kuitenkin viimeinen ei nähdä poikkeuksellisesta tutkimuksissa, jotka suoritetaan Meksikossa [32, 37], Chile [16] ja Kiinassa [38]. Ikä riippuvuus ei ole ilmeistä useimmissa tutkimuksissa. Kuitenkin tutkimukset Kolumbiassa [19], ja Kazakstan [28] on korkeampi levinneisyys nuoremmilla potilailla.
EBV on kaksi erilaista, tyypin 1 ja tyypin 2, jotka eroavat niiden kyky muuntaa B-lymfosyyttien tilaan jatkuvan leviämisen [39]. Tyyppi 1 on vallitseva Länsi- ja Aasian maissa, kun taas B-tyyppi on hallitseva Afrikassa ja nähdään yleisemmin immunosuppressiopotilaita [40, 41]. Lisäksi on olemassa kolme muita muunnelmia, jotka eroavat restriktiofragmenttien pituuden polymorfismin (RFLP) käyttäen BamHI- ja Xhol-restriktioendonukleaasin entsyymejä. Tällä BamHI-F alueella Prototype F on maailmanlaajuisen jakelun ja "f" variantti, joka on ylimääräinen sivusto entsyymiä vallitsevana Etelä-Kiinan ja liittyy nenänielusyöpä [42, 43]. Polymorfismia BamHI-W1 /I1 raja-alueen johtaa kaksi versiota; tyypin I ja "i". Tyyppi I, joka on hallitseva Japanissa ja Kiinassa ei ole sivusto BamHI entsyymiä [44, 45] ja kirjoita 'i' ylimääräisellä BamHI nähdään yleisemmin länsimaissa [46]. Lopuksi, polymorfismi XhoI restriktiokohta Axon 1 LMP1 geenin määrittelee XhoI + mikä on yleisempää länsimaissa [47] ja Xhol -, joka on usein nähty Aasiassa [44].
Iran on yksi niistä maista, joilla on korkea esiintyvyys mahakarsinooman joiden vuotuinen ilmaantuvuus 26,1 kohden 100000 miehillä ja 11,1 naisilla. Se on toiseksi yleisin syöpä ja ensimmäinen johtava syy syöpään liittyvien kuolemien miesten Iranissa [48]. Kuitenkaan ole tutkimus yleisyydestä tai genotyypin EBV mahasyövän tällä alueella. Siksi päätimme arvioida sitä vanhin lähete keskus mahasyövän Iranissa. Tool Menetelmät
Näytteet
Tutkimme 273 kirurgisesti resektoitiin mahalaukun syöpätapausta tässä tutkimuksessa. Tapaukset valittiin satunnaisesti 1325 mahalaukun syöpätapausta rekisteröity syöpää laitoksissa Teheranin yliopistossa vuosina 1969-2004, joilla on ehjä parafiiniblokit ja patologisen raportteja. Formaliinilla parafinoidut kudosta näistä tapauksista valittiin ja lähetettiin Kagoshima University Graduate School of Lääketieteen ja hammaslääketieteen laitos, Japani, edelleen molekyyli arviointeja. Patologinen tiedot saatiin uudelleenarviointiin H &E värjättyä dioja kaksi patologit (AA & SGS). Kaikki käytettävissä demografiset tiedot saatiin käytettävissä patologisen ja lääkärinlausunnot potilaista.
Patologia
Kaikki näytteet uudelleen luokiteltu osin on hallitseva histologisten kaavaa suoliston ja hajanainen tyyppi mukaan Lauren luokituksen [49] ja sub-luokiteltu suuntaviivat japanilaisen tutkimuksen yhteiskuntaan mahasyövän [50] on hyvin eriytetty putkimainen adenokarsinooma (tub1), kohtuullisesti erilaistunut adenokarsinooma (tub2), kiinteä huonosti eriytetty adenokarsinooma (por1), jotka eivät ole kiinteitä huonosti eriytetty adenokarsinooma (por2 ), sinettisormus karsinooma (sig), mucinous karsinooma (FRA) ja huonosti eriytetty lymphoepithelial kaltainen karsinooma (LE).
kasvaimet sijainti mukaan hallitseva sijainnin leesiot luokiteltiin ylempi kolmas tai cardia, keski kolmannen tai runko ja alemman kolmannen tai antrum ohjeiden mukaan ja japanilaisen tutkimusryhmän yhteiskunta mahasyövän [50]. Ei ollut multifokaalinen tapauksessa Tutkimuksessamme.
Syvyys invaasion luokiteltiin limakalvon, Saharan limakalvon, muscularis propria ja seröösisiä osallistumista.
In situ -hybridisaatio
EBV tunnistettiin ilmentymistä EBV-koodattua pieni RNA-1 (Eber-1). In situ -hybridisaatio täydentävä digoksigeniinillä-leimatun 30-base oligomeeriä käytettiin havaitsemaan Eeberille-1 mukaisesti menetellen aikaisemmin kuvanneet Chang et ai [51]. 4-5-um: n leikkeet asennettu silaanilla päällystettyjä lasilevyjä valmisteltiin tapauskohtaisesti. Kudos on dioja oli parafiini, vedettömät, predigested pronaasilla, esihybridoitiin, ja sitten hybridisoidaan yön yli 37 ° C: ssa 0,5 ng digoksigeniinillä koetinsysteemejä. Hybridisaation signaali havaitun antidigoxigenin vasta-aineen ja alkalisen fosfataasin konjugaattia. Osiot potilaalta, joilla tiedetään Eber-positiiviset mahakarsinoo- käytettiin positiivisena kontrollina, ja aistia koetin Eeberille-1 käytettiin negatiivisena kontrollina kussakin menettelyssä.
Valmistus DNA
formaliinilla kiinnitetyt ja parafiini -Embedded näyte leikattiin 10 um paksuiksi viipaleiksi, ja DNA-näyte valmistettiin kuvatun menetelmän mukaan Greer et al [52]. Lyhyesti, leikkeet käsiteltiin ksyleenillä ja etanolia ja sentrifugoitiin 22000 g: ssä 20 minuutin ajan, ja tuloksena pelletti suspendoitiin uudelleen 100 ul: aan hajotuspuskuria (1 M Tris, pH 8,0, 50 mM EDTA, 0,5% Tween 20) 200 ug /ml proteinaasi K ja inkuboitiin 55 ° C: ssa yön yli. 10 minuutin kuluttua, joka kiehui 100 ° C: ssa, uuttamalla ja saostamalla DNA suoritettiin fenoli-kloroformilla ja etanolilla, vastaavasti.
Alukkeet ja koettimet
neljä eri alueilla, EBNA-3C, BamHI-F, BamHI-W1 /I1 ja Xhol in LMP1, käytettiin määrittämään viruksen genotyyppejä. Taulukossa 1 on esitetty luettelo alukesarjoista ja koettimia käytetään tässä study.Table 1 Luettelo alukkeiden ja koettimien Tässä tutkimuksessa käytetyt
genotyyppi
Sequence
tyypin mukaan koetin tai koon jälkeen RE1 digestion
Viite
EBNA-3C
Primers
Sense
5'- AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3 '
Antisense
5'-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3
Sample et ai. (53) B-luotaimet
Type 1
5'-GAAGATTCATCGTCAGTGTC-3 '
153 BP2
tyypin 2
5'- CCGTGATTTCTACCGGGAGT-3'
246 emäsparin
BamHI-F
Primers
Sense
5'- TCCCACCTGTTACCACATTC-3 '
Prototype F: 198 emäsparin
Lung et al. (54) B Antisense
5'- GGCAATGGGACGTCTTGTAA-3 '
Variant "f": 127 + 71 emäsparin
Probe
5'- AAGGCTACCGTGCTAATTACCTCC-3'
Hudson et al. (55) B-BamHI-W1 /I1
Primerit
Sense
5'- ACCTGCTACTCTTCGGAAAC-3 '
Tyyppi I: 205 emäsparin
Lung et al. (54) B Antisense
5'- TCTGTCACAACCTCACTGTC-3 '
Type "i": 130 + 75 ep
Xhol vuonna LMP1
Primers
Sense
5'- AACAGTAGCGCCAAGAGGAG-3 '
XhoI +: 113 bp
Sandvej et al. (56) B Antisense
5'- ATGGAACACGACCTTGAGAGG-3 '
XhoI-: 67 + 46 ep
1Restriction entsyymi; 2Base paria
tyypit 1 ja 2 tunnistettiin monistamalla U2 alueen EBNA-3C-geenin kuvattuja alukkeita Sample et ai [53], joka tuotti 153 ja 246 emäsparin fragmentit, vastaavasti. Ne kirjataan Southern täplähybridisaatio (SBH) jossa käytettiin tyypille ominaisia ​​sisäinen koettimet kuvanneet Sample et ai [53]. BamHI-F alue monistettiin alukkeilla joukko kuvanneet Lung et al [54]. Sen seurauksena 198-bp: n fragmentti pilkottiin BamHI-restriktioentsyymillä, joka yelled 198-bp: n fragmentin, kun kyseessä on villin tyypin F ja 127 bp: n ja 71 bp: n fragmenttien tapauksessa "f" variantti. Villin tyypin F ja F-muunnoksista vahvistettiin SBH sisäisen koettimen, kuten aiemmin on kuvattu [55]. Erottaa I /i variantteja, BamHI-W1 /I1 alue monistettiin käyttämällä alukesarjaa kuvanneet Lung et al [54]. Pilkkomalla BamHI restriktioentsyymillä yelled 205 bp: n fragmentti, tyypin I ja 130 bp: n ja 75 bp: n fragmenttien tapauksessa "i". Ne vahvistettiin myös SBH, jossa on kloonattu BamHI-I DNA-fragmenttia koettimena. Analyysi polymorfismin eksonin 1 LMP1 geenin suoritettiin käyttämällä alukesarjaa kuvanneet Sandvej et al [56], mikä johti 113 bp: n fragmentit. Digestion jälkeen XhoI restriktioentsyymillä, XhoI + tapaukset, jotka sisältävät XhoI katkaisukohdan (XhoI säilytetään) esittävät 67-emäsparin ja 46 emäsparin fragmentit mutta Xhol- - tapaukset osoittavat alkuperäisen pilkkoutumattomiin 113-emäsparin PCR-tuote. 113 emäsparin fragmentti PCR-tuotteen B95-8 solulinjaa käytettiin koetin vahvistaa XhoI pilkkomiskohta LMP1 jonka SBH [57].
Tyypin 1, villityypin F, tyypin I ja Xhol - viruksien B95-8 solulinjaa käytettiin positiivisena kontrollina. Solulinjat AG786 ja Akata ja kloonatun BamHI-'f 'ja BamHI- "i" DNA-fragmentit toimivat positiivisina säätimet tyypin 2, XhoI -, "f" variantti, ja kirjoita "i" viruksia, vastaavasti. Ihmisen herpesvirus 6 tartunnan solulinjassa MOLT-4, käytettiin negatiivisena kontrollina [58].
Polymeraasiketjureaktio
monistaminen kohde-DNA: t suoritettiin käyttäen 2 pl DNA: ta ja seosta 10 mM Tris-HCl, pH 8,0 , 50 mm KCI, 1,5 mM MgCl 2, 200 uM dNTP: itä, 1 uM kutakin aluketta ja 1,0 U Taq-polymeraasia (Hot Star, Qiagen, Saksa) lopullisessa tilavuudessa 25 ui seosta. Protokolla, jota käytetään monistamiseen EBNA-3C-geeni oli: yksi sykli 95 ° C: ssa 15 min, jota seurasi 40 sykliä denaturointi 95 ° C 1 min, pariutuminen 46 ° C: ssa 1 minuutin ajan ja pidennys 72 ° C: ssa 1 min ja lopuksi päättyi 5 min 72 ° C: ssa. Käytetty protokolla BamHI-F, BamHI-W1 /I1 ja Xhol-monistus oli: yksi sykli 95 ° C: ssa 5 min, jota seurasi 40 sykliä denaturointi 95 ° C 1 min, pariutuminen 43 ° C: ssa 1 minuutin ajan ja venymä 72 ° C 1 min ja lopuksi päättyi 5 min 72 ° C: ssa. Elektroforeesi 2% agaroosigeelissä ja värjäys 0,5 ug /ml etidiumbromidia tehtiin tunnistamiseksi PCR-tuotteita.
Restriktiofragmenttipituuspolymorfismin analyysi
Amplified DNA tuotteet (15 ui) pilkottiin 10 U: BamHI tai XhoI-restriktioentsyymeillä, mukaan valmistajan ohjeiden ja visualisoidaan elektroforeesilla 2% agaroosigeelissä, värjättiin 0,5 ug /ml etidiumbromidia, ja siirrettiin nylon-kalvo SBH.
Southern blot -hybridisaatio
erityisyys PCR reaktio varmistettiin SBH. Elektroforeettisen DNA siirrettiin Hybond N + nailonmembraanille (Amersham Pharmacia Biotech, Iso-Britannia) kapillaariblottauksella käyttämällä 0,4 N NaOH-liuosta. Membraanit esihybridisoidaan hybridisaatiopuskuria 1 h 42 ° C: ssa. Lisäämisen jälkeen koetin, hybridisaatio suoritettiin yön yli 42 ° C: ssa. Koettimet tyypit A ja B, ja BamHI-I F leimattiin Dig oligonukleotidin 3'-päähän -leimauskittiä ja havaita Dig luminoivien havaitseminen (Boehringer Mannheim, Saksa). Havaitsemiseksi BamHI-fragmentti ja Xhol polymorfismi LMP1, hybridisaatio suoritettiin käyttäen ECL suora leimaus ja havainnointi (Amersham Pharmacia Biotech, Iso-Britannia) mukaisesti valmistajan ohjeiden mukaisesti.
Tilastollinen analyysi
Tilastollinen analyysi oli tehdä käyttämällä LogExact 7.0 ohjelmistoa (tilastollinen paketti regressio menettelyä featuring tarkka menetelmä); Cytel Studio 7.0.0 paketti (Cytel Software Corporation, 2005). Tarkka testi binary logistinen analyysi suoritettiin vertaamaan osuus EBV positiivisia tapauksia keskuudessa mahalaukun adenokarsinoomaa. Sukupuolen, ikäryhmän (< 50, 50-69 ja ≥ 70 vuotta), anatominen sijainti kasvain (antrum, runko ja cardia), hyökkäys kasvain (kalvojenpoiston, muut) ja Lauren histologista luokitusta laskettiin mukaan riippumatonta muuttujaa. Multinominal muuttujat jaettiin n-1
dummy binominal muuttujat (n
oli määrä luokkia). Ristitulosuhde 95%: n luottamusväli laskettiin kunkin luokan. Tyypin 1 virhe (α) asetettiin 0,05. Kaikki p-arvot olivat kaksipuolisia.
Tulokset
Tutkimme 273 mahasyövistä lukien 196 (72%) miehillä ja 77 (28%) naisilla. Keski-ikä oli 57,3 ± 11,3 (SD) vuotta (vaihteluväli: 24-90; mediaani: 58). Suurin osa niistä (108 tapausta, 66%) oli välillä 50-69 vuotta, 54 (20%) tapauksessa oli alle 50, ja jäljellä oli yli 70 vuotta. Sata kolmekymmentä tapausta (48%) sijaitsi antrumissa, ja 64 (23%) ja 71 (26%) tapauksista sijaitsi kehon ja cardia, vastaavasti. 5 tapauksessa sijainti ei ole määritetty ja 3 tapauksessa aina mahalaukun seinämän olivat mukana (linitis plastica), jotka eivät sisälly tilastollinen analyysi. Kuten taulukossa 2, suurin osa tapauksista oli suoliston tyyppi (56%). Taulukko 2 jakauma Eber-1 positiivisia mahakarsinoomat histologiset tyypin ja sukupuolen
Histology1

Mies
Nainen
Yhteensä

eber + /N2 (%)
eber + /N (%)
Eber + /N (%)
Suoliston
1/113 (1)
0/39 (0)
1/152 (1) B-pap
0/11 (0)
0/3 (0)
0/14 (0) B tub1
0/36 (0)
0/11 (0)
0/47 (0) B tub2
1/50 (2)
0/16 (0)
1/66 (1) B-MUC
0/16 ( 0)
0/9 (0)
0/25 (0) B Diffuusi
7/83 (8)
1/38 (3)
8/121 (7 ) B por1
3/34 (8)
1/16 (6) B 4/50 (8) B por2
4/40 (10) B 0 /18 (0)
4/58 (8) B sig
0/9 (0)
0/4 (0)
0/13 (0)
1 pap: papillaarisen adenokarsinooma; tub1: hyvin eriytetty putkimainen adenokarsinooma; tub2: kohtuullisesti erilaistunut adenokarsinooma; por1: solid huonosti eriytetty adenokarsinooma; por2: ei-solid huonosti eriytetty adenokarsinooma; sig: sinettisormus solukarsinooman; MUC: mucinous karsinooma; 2 tapausten kokonaismäärä kussakin ryhmässä (Perustuu japanilaisen tutkimusryhmän yhteiskuntaan mahasyövän) B yleisyys EBV positiivisia tapauksia
Eber-1 havaittiin yhdeksässä 273 tapausta (3%), joita pidettiin EBV- GC. Signaali oli rajoitettu vain tumiin kasvainsolujen, mutta ei löydy ei-kasvainsolujen (Fig. 1). Kuva 1 tapauksessa EBV positiivinen gasrtric karsinooma. Kohtalaisen eriytetty putkimainen adenokarsinooma satunnaista tubul muodostuminen (A); ydinaseiden Eber positiivinen signaali kaikissa kasvainsolujen havaitaan in situ -hybridisaatio (B).
liittyvät tekijät EBV positiivisia tapauksia
Taulukossa 3 taajuudet EBV-GC iän, sukupuolen, asuinpaikan, histologia ja invaasio sekä seurauksena logististen analysis.Table 3 tulos logistinen analyysi
muuttujat
eber + /N1
(%)
OR2
95% CI2
Sukupuoli
Nainen
1/76
(1) B-1
viite
Mies
8/188
(4) B 0,3
0,01-2,96
P
= 0,595
Ikä
≥ 70
1/36
(3) B-1
viittaus
50-69
5/180
(3) B 0,8 ​​
0,08-44,62
< 50
3 /54
(6) B 1.3
0,08-81,25
P
muutossuunnat = 1.0
Sijainti
Ylä
1/71
(1)
1
viittaus
Lähi
5/64
(8)
6,0
+0,1-+77,86
Ala
3/130
(2)
1.4
,63-+296,7
P
heterogeenisyyden = 1.64
Histologia
Diffuusi
8/121
(7) B-1
viite
suoliston
1/152
(1) B 0,08
0,002-0,64
P
= 0,009
Invasion
Lihas
3/33
( 9) B 1
viittaus
serose
6/222
(3) B 3,6
0,47-24,03
P
= 0,243
1Total numero kussakin ryhmässä; 2OR ja 95%: n luottamusväli saatiin tarkka testi binary logistinen analyysi.
Sukupuoli ja ikä
Kahdeksan 188 (4%) uros tapauksista ja 1 ulos 76 (1%) naisten tapauksista oli EBV positiivisia. Vaikka oli miesvaltaisuus tässä tutkimuksessa ei ollut tilastollisesti merkitsevä (p
= 0,5). Myös mitään suhdetta iän ja EBV-GC (p
= 1).
Kasvaimen sijainti
mukaan anatominen sijainti, 5 out of 64 (8%) ruumiin kasvaimista, 1 out of 71 (1 %) sydämen kasvaimet ja 3 pois 130 (2%) antral kasvaimia EBV liittynyt. Vaikka suurin osa EBV-GC sijaitsivat ylä kaksi kolmasosaa, ei ollut merkittävää tilastollisesti (p
= 0,1).
Histologinen tyyppi
Perustuu Lauren luokitus, 8 ulos 121 (7%) diffuusi tyyppi tapaukset olivat EBV mutta vain 1 ulos 152 suolen tyyppiä oli EBV positiivinen, mikä oli tilastollisesti merkitsevä (p
= 0,009). Mukaan Japanin luokitusta, por2 ja por1 oli hallitseva histologiset tyypit EBV-GC (taulukko 2), mutta joka koskee vähän tapauksia kussakin ryhmässä tilastollista analyysiä ei voida suorittaa.
Invasion
Tässä tutkimuksessa siellä oli vain 2 tapausta, jotka koskivat ainoastaan ​​submukoosassa ja yksikään niistä näkyy Eber-1 signaalin ISH. Siten otetaan huomioon vähäinen lukumäärä, näissä tapauksissa ei pidetty tilastollisessa analyysissä. Ei ollut eroa EBV positiivisten ja negatiivisten tapausten osalta invaasion herakalvoon ja muscularis propria (p
= 0,24).
Muut havainnot
huomionarvoista kohta tutkimuksessamme oli se, että 6 ulos 9 EBV- GC potilaat olivat syntyneet vuosina "1928-1930". Kuitenkin tilastollinen analyysi ei tehty, koska vähäisen määrän.
Genotyypin
alatyypin EBV genomin määritettiin kaikissa 9 tapauksissa. Kaikki tapaukset olivat tyyppiä 1. BamHI-F alue monistettiin onnistuneesti 8 ulos 9 EBV-GC, joista kuusi heistä osoitti prototyyppi F (Fig. 2). Monistuminen BamHI-I /WI1 onnistunut kaikissa tapauksissa ja, yhtä lukuun ottamatta; kaikki tapaukset olivat "i" tyyppiä (Fig. 3). Analyysi polymorfismin eksonissa 1. LMP1 geenin paljasti, että 3 tapaukset olivat XhoI - ja 6 tapaukset olivat XhoI + (kuvio 4). Taulukko 4 tiivistää kaikki demografiset, patologisen ja genotyypin tiedot EBV-GC tässä study.Table 4 kliinis-patologisten ja geneettisiä ominaisuuksia EBV-GC

syntymävuosi
Diagnostic vuoden
Ikä
sukupuoli
lacation
Invasion
Histologia Lauren /WHO
EBNA-3 tyypin A /B
BamHI-F F /"f"
BamHI-I tyyppi I /"i"
XhoI +/-

1
1949
1981
32
Male
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
2
1929
1982
53
Male
Middle
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
3
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Intestinal/tub2
A
F
"i"
+
4
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
F
I
+
5
1940
1983
43
Female
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
6
1930
1986
56
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
ND1
"i"
+
7
1928
1988
60
Male
Upper
Serosa
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
8
1928
2001
73
Male
Middle
Serosa
Difuse/por2
A
"f'
"i"
-
9
1953
2002
49
Male
Lower
Seroasa
Diffuse/por2
A
"f"
"i"
+
1Ei määritelty; tub2: kohtalaisen eriytetty adenokarsinooma por1: solid huonosti eriytetty adenokarsinooma; por2: ei-solid huonosti eriytetty adenokarsinooma
Kuvio 2 tulos Etelä täplähybridisaatio varten BamHI-F alue. Neljä yksilöt tästä kuviosta nähdään, kukin näyte ladattiin 2 kaistaa kanssa ja ilman entsyymiä, vastaavasti vasemmalta. Ensimmäinen näyte ei monistettiin tässä kokeessa. Muut kolme näytteet ei katkaissut Bam-HI entsyymiä eli ne ovat villin tyypin F (+: positiivinen kontrolli, + /Enz: positiivinen kontrolli entsyymillä, -: negatiivinen kontrolli).
Kuvio 3 tulos Etelä täplähybridisaatio varten BamHI-W1 /I1 alue. Kukin näyte ladattiin 2 kaistaa kanssa ja ilman entsyymiä, vastaavasti vasemmalta. Näytteessä yksi ei ole bändi toisella kaistalla, joka viittaa siihen, että PCR-tuote hajotettiin, mutta emme voineet havaita hajanainen bändejä koska alkuperäinen bändi sisälsi pienen määrän DNA kopioita, joten piti sitä tyyppiä "i". Näytteet 2, 5, ja 6 pilkotaan, joka tarkoittaa, että ne ovat tyyppiä "i". Polymorfismi Näytteiden 3 ja 4 ei määritetty tässä kokeessa. (+: Positiivinen kontrolli, + /Enz: positiivinen kontrolli entsyymillä, -: negatiivinen kontrolli).
Kuva 4 tulos XhoI polymorfismin Southern blot -hybridisaatio. Kukin näyte ladattiin 2 kaistaa kanssa ja ilman entsyymiä vastaavasti vasemmalta. Ensimmäinen ja toinen näytteet pilkottiin entsyymillä, joka tarkoittaa, että ne ovat XhoI +. Kolmas on XhoI-. (+: Positiivinen kontrolli, + /Enz: positiivinen kontrolli entsyymillä, -: negatiivinen kontrolli).
Keskustelu
Tässä tutkimuksessa havaittu EBV-GC 3%: mahakarsinoomat ja ehdotti, että suurin osa mahalaukun karsinoomien Iran ovat EBV-negatiivisia. Ei ollut LELCs, jotka ovat hyvin tunnettuja olevan voimakkaasti yhteydessä EBV [59]. Pitsineuletta, joka on ainutlaatuinen morfologia EBV-positiivisten aikaisin mahakarsinoo- [60], ei nähty tutkimuksessamme. Tämä taajuus on alhaisimpia taajuuksia maailmassa. Kuten edellä mainittiin, mukaan WHO: n luokituksen, pohjoiseen Iran pidetään yhtenä alueista, joilla on korkea mahasyöpä taajuus maailmassa [61]. Harva tutkimukset Iranin osoittavat myös tämä seikka, paitsi että ne osoittavat enemmän tai vähemmän tasalaatuisuus koko maassa [48, 62, 63]. Täten alhaisen EBV-GC taajuus Iranissa tukee edellisen oletusta, että suuren riskin maissa GC on alhainen EBV-GC [64]. Tämä myös vahvistaa uskoa siihen, että on alhainen Aasiassa esiintyvyys 3% Koreassa [25], 6% Japanissa [24], 6% Kiinassa [26], 5% Intiassa [18], 2% Pakistan [29] ja maksimaalinen 10% Malesiassa [27], Taiwan [21] ja Kazakstan [28]. Tämä on kuitenkin paljon pienempi kuin Kazakstan taajuus, (meidän lähellä maa) monia yhtäläisyyksiä mukautetun ja yhteiskunnalliset olosuhteet.
Yleisyys EBV-GC hajanainen tyyppi mahakarsinoo- oli tutkimuksessamme, mikä näkyi useimmissa tutkimuksissa Latinalaisen Amerikan [16, 32] ja muutamat Aasian maat, kuten Korea [25], Kiina [26] ja Intia [18]. On kuitenkin olemassa monia ristiriitaisia ​​tutkimuksia, jotka ei ole mitään suhdetta tämän käsitteen [15, 17, 19, 23, 33]. Koriyama ym [23] ja niiden klassinen tutkimuksessa ehdotetaan, että on olemassa monia muita tekijöitä, joilla on vaikutusta esiintyvyys hajanainen tyyppi mahasyövän kuten ikä, sukupuoli ja sijainti sekä ristiriitaisia ​​tuloksia eri tutkimuksissa voidaan selittää ero jakelussa näiden tekijöiden.
Vaikka suhde mies /nainen oli noin 4 tutkimuksessamme, se ei ollut merkittävää tilastollista analyysiä. Puuttuminen sukupuolen etusija nähtiin muissa tutkimuksissa Meksikossa [32, 37] Chile [16] ja yksi alue Kiinassa [38]. Meidän pitäisi kuitenkin harkita, että pieni määrä positiivisten tapausten tutkimuksessamme voisi olla syy merkityksetön tuloksen analyysissä. Samaan aikaan, Koriyama et al [23] osoittavat, että sukupuolten mieltymys EBV rajoittuu hajanainen tyyppi GC ja ei näy suoliston tyyppi. Kuitenkin, mitä tulee vähäinen määrä meidän tapauksissa emme voineet analysoivat erikseen kutakin.
Kasvu syöpä yläosassa vatsan huolimatta laskua yhteensä esiintyvyys mahasyövistä nähdään monissa tutkimuksissa ympäri maailmaa [ ,,,0],65, 66]. On myös monia todisteita siitä, että tämän tyyppinen mahasyöpä on erilaisia ​​riskitekijöitä [67-69]. EBV on yksi niistä [15-31]. Abdirad ym [70] osoittavat myös, että on olemassa sellainen kasvu syöpä ylimmästä kolmanneksesta vatsaan Iranissa. Silti, huolimatta odotamme, tämä tutkimus ei osoittanut mitään suosiminen EBV ylä- tai keskimmäisen kolmanneksen vatsaan. On tärkeää huomata, että huolimatta monista vahvistavia tutkimuksia tässä yhteydessä, ei ole myöskään sellainen suhteessa meidän lähellä maissa, eli Kazakstan [28] ja Intia [18].
EBV tutkimuksessamme ei osoittanut nähden iän ja syvyys hyökkäystä. Jotkut tutkimukset osoittavat, että on olemassa taipumus EBV-GC esiintyvän alaikäraja [19, 26, 33, 38]. Kuitenkin Koriyama et al [23] kävi ilmi, että vain suoliston tyyppisen EBV-GC näyttää tämän ikä parempana, ja ehdotti, että ikäeroa altistumisesta erityisiä kofaktoreita kunkin tämäntyyppisten on todennäköinen syy.
Yksi mielenkiintoinen havainnot tässä tutkimuksessa on se, että 6 ulos meidän 9 EBV-GC tapaukset, jotka valittiin satunnaisesti, syntyivät välisenä aikana 1928 ja 1930. Vaikka emme voi tehdä mitään osalta tarkastellaan alhaisen useita myönteisiä tapauksissa tämä havainto näyttää olevan tärkeää, koska epidemiologinen tutkimus ehdotti, että EBV-infektion varhaisessa lapsuudessa saattaa liittyä kehittämiseen EBV-GC aikuisiässä [71]. Vaikka meillä ei ole todisteita, jotkut hypoteesi voitaisiin harkita. Esimerkiksi erityisiä ehtoja tai tapahtumia, jotka johtavat EBV-infektio varhaislapsuudessa tai tuloksena altistumisesta tiettyjä yhteistyön riskitekijöitä, jotka saattavat olla olemassa noin 1920-luvun lopulla. Siksi ehdotamme tapaus verrokkitutkimuksessa keskitytään mahakarsinoo- potilailla syntynyt noin 1920-luvun lopulla verrata esiintyvyys EBV näillä potilailla muiden kanssa.
Genotyypin viruksesta paljasti, että tyypin 1 on yksinomainen tyyppi kaikissa meidän EBV-GC. Hallitsevuus tyypin 1 on yhtä mieltä muissa tutkimuksissa [18, 45, 58, 40]. Tyypin 2 on enimmäkseen nähty Afrikassa [40] ja on uskomus, että se on heikompi kuin tyypin 2 ja on useimmiten nähdään immuunivajaissa potilailla [40, 72]. Prototyyppi F BamHI-F oli yleisin tässä tutkimuksessa. Tämäntyyppinen on maailmanlaajuinen jakelu paitsi Etelä-Kiinassa joka "f" variantti on yleistä ja aiheuttaa nenänielun karsinooma [43, 45]. Meidän havainto on sama kuin samanlaiset tutkimukset syöpien Intiassa [18], Japan [73], ja Chile [58]. BamHI-W1 /I1 alueen polymorfismi analyysi osoittaa, että 90% tapauksista oli tyyppiä "i". Aiemmat tutkimukset osoittivat, että tyypin I on yleisin Aasiassa [45, 54] ja kirjoita "i" on kaikkein länsimaissa [46]. Tämä malli jakelu oli myös nähty vastaavissa tutkimuksissa EBV-GC [18, 45, 73]. Kuitenkin meidän havainto näyttää olevan samanlainen kuin länsimaissa kuten Corvalan havainnot Kolumbiassa ja Chilessä [58]. XhoI + oli yleisin tyyppi on Xhol-restriktiokohta eksonissa yksi LMP1 geenin tässä tutkimuksessa.

• Laparoskooppinen vs. avoin resektio mahalaukun ruuansulatuskanavan tukikudosten kasvaimiin: päivitetyn järjestelmällinen katsaus ja meta-analysis
• Mahdollinen osallistuminen Nrf2-välitteinen hemioksigenaasi-1 up-asetuksen suojaava vaikutus protonipumpun estäjä pantopratsoli vastaan ​​indometasiinin aiheuttamaa mahalaukun vaurioita rats