Epstein-Barrovej spájaný karcinóm žalúdka: správa z Iránu v posledných štyroch decades

vírus Epstein-Barrovej spojené karcinóm žalúdka: správy z Iránu v posledné štyri desaťročia
Abstrakt
pozadia
Epstein vírus Barr bolo preukázané, že sú spojené s mnohými ľudských malignít vrátane karcinómu žalúdka, jedného z najdôležitejších ľudských malígnych ochorení na svete. Nedošlo k žiadnej štúdie o prítomnosti EBV v adenokarcinóme žalúdka v Iráne.
Metódy
Vyšetrili sme prítomnosť EBV vo 273 fixované formaldehydom a zaliate parafínom prípadov karcinómu žalúdka z Cancer Institute of Teheránskej univerzite, od roku 1969 do roku 2004. In situ hybridizácia EBV kódované malé RNA-1 (Eber-1) bola vykonaná. Kmeň pozitívnych prípadov bolo preskúmané pomocou PCR a /alebo reštrikčných fragmentov analýzy polymorfizmu dĺžky
Výsledky
sme našli 9. (3%; 95% CI = 1-5%) EBV pozitívne prípady. Rozdiel pohlavia nebol štatisticky významný. Podiel prípadov EBV-GC v difúznym typu bola vyššia ako črevnú typu (OR = 0,08, 95% CI = 0,002 - 0,64). Prípady EBV-GC nemal žiadnu súvislosť s vekom, umiestnenia a invázie. Šesť z 9 prípadov EBV-GC sa narodili v období medzi 1928 a 1930. Všetky 9 prípadoch išlo o typ A. Prototyp F bol pozorovaný u 6 z 8 prípadov. Typ "i" bol nájdený v 8 prípadoch a typ Aj v 1 prípade. XhoI + a XhoI- polymorfizmus predstavovali 6 a 3 prípadov, resp.
Záver
Naša štúdia je prvou, ktorá popisuje početnosť EBV-GC v Iráne a na Strednom východe, zdôrazňuje veľmi nízky výskyt s konkrétnym patologickým Vlastnosti. Prevaha EBV-GC rok narodenia v stanovenú dobu, naznačuje, že EBV infekcie alebo inej udalosti v ranom detstve môže súvisieť s vývojom EBV-GC neskôr v živote. Prevaha typu "i" a XhoI + prípady sú v rozpore s inými štúdiami v Ázii a je podobný tomu, čo je hlásených z krajín Latinskej Ameriky.
Pozadie
Epstein-Barrovej (EBV) je všadeprítomná dvouřetězcová DNA vírus z rodiny vírusov ľudského herpes, ktorý je B-lymphotropism [1]. Viac ako 90% dospelej populácie vo svete majú serologic známky infekcie týmto vírusom [1]. Je získané počas raného detstva a staroby infekcie je v nerozvinutých krajinách omnoho nižšie s nízkou sociálno-ekonomického stavu [1]. V nadväznosti na primárnej infekcie, vírus vytvára celoživotné latentné infekcie v B-lymfocytov, kde je prítomná v 1 z 10 5-10 6 cirkulujúcej bunky [2]. Vyjadruje niektoré antigény v tejto latentnej fázy, ktorá sa preukáže, že niektoré onkogénne vlastnosti [3-8]. Existuje mnoho dokumentov o príčinnej súvislosti medzi EBV a lymfoidných malignít, ako je Burkittovho lymfómu v rovníkovej Afrike [9], nosové T /NK lymfóm [10], Hodgkinov lymfóm [11] a B-bunkového lymfómu u pacientov so zníženou imunitou [12]. EBV má tiež schopnosť infikovať epitelové bunky, a tiež má tumorogenic účinok v týchto bunkách, z ktorého nazofaryngálne karcinóm je jedným z dôležitých prototypov [13].
Prvú správu o zapojenie EBV v karcinómu žalúdka bola uverejnená v roku 1990 lymfoepiteliální karcinómu žalúdka [14]. V dôsledku toho, v roku 1992 Shibata a Weiss hlásené detekciu EBV u 16% bežného karcinómu žalúdka v USA patente [15]. Od tej doby, prevalencia karcinómu žalúdka EBV asociované (EBV-GC) bola skúmaná a popísaná v rôznych krajinách, ktoré sa pohybovali medzi 3 až 18% [15-34] s najnižším výskytom v Papue-Novej Guinei, Pakistan a Kórea, ktorá je rozmedzí 1 až 3% a najvyššie v Nemecku a USA, čo predstavuje 16 až 18%
Existuje mnoho dôkazov o príčinný vzťah medzi EBV a karcinómu žalúdka, ako sú :. monoclonality vírusov v nádorových bunkách, ktoré bolo preukázané unikátne terminálom opakovanie EBV DNA [35]; Jednotná prítomnosť EBV vo všetkých nádorových buniek, detegovaných in situ hybridizácia Eber-1, ale nie v okolí epitelové bunky [15-34] a zvýšenie IgG a IgA protilátky proti vírusový kapsidový antigén niekoľko mesiacov pred klinického obrazu ochorenia [36 .]
EBV-GC ukazuje niektoré konštantný charakteristické klinické jednotky funkcie, ako je predispozíciou k hornej dve tretiny žalúdka [15-17, 19-31]; mierne diferencovaný rúrkový zle diferencované pevný typ histológia [16-22, 32, 33]; majúci v stromálny invázie a prežitie žiadny vplyv [15, 16]; a mužská prevaha vo väčšine štúdií. Avšak, posledný z nich nie je vidieť v niektorých výnimočných štúdiách, ktoré sa vykonávajú v Mexiku [32, 37], Čile [16] a Číny [38]. Vek závislosť však nie je v mnohých štúdiách. Avšak štúdie v Kolumbii [19], a Kazachstan [28] vykazujú vyššiu prevalenciu medzi mladších pacientov.
EBV má dva hlavné typy, typ 1 a typ 2, ktoré sa líšia v ich schopnosti transformovať B-lymfocyty do stavu nepretržité proliferácia [39]. Typ 1 je prevláda v západných a ázijských krajinách, zatiaľ čo typ B je prevládajúce v Afrike a je vidieť častejšie u pacientov so zníženou imunitou [40, 41]. Okrem toho existujú tri ďalšie varianty, ktoré sa líšia podľa dĺžky reštrikčných fragmentov (RFLP polymorfizmu) za použitia BamHI a Xhol reštrikčné endonukleázou enzýmy. V oblasti BamHI-F Prototyp F má celosvetovú distribúciu a "F" varianta, ktorá má zvláštne miesto pre enzým je prevláda v južnej Číne a je spojená s karcinómom nosohltanu [42, 43]. Polymorfizmus BamHI-W1 /I1 hraničnej oblasti vedie k dvom variantmi; typu I a "i". Typu I, ktorý je prevládajúci v Japonsku a Číne nemá miesto pre BamHI enzýmu [44, 45] a zadajte "i" s extra BamHI je vidieť častejšie v západných krajinách [46]. A konečne, polymorfizmus restrikčné miesto Xhol v axónu 1 génu LMP1 definuje XhoI +, ktorá je viac prevláda v západných krajinách [47], a XhoI -., Ktorý je často vidieť v Ázii [44]
Irán je jednou z krajín, ktoré majú vysoký výskyt karcinómu žalúdka s ročným výskytom 26.1 na 100,000 u mužov a 11,1 u žien. Ide o druhú najčastejšou rakovinou a prvý hlavnou príčinou úmrtí súvisiacich s rakovinou u mužov v Iráne [48]. Avšak, neexistuje žiadna štúdia o výskyte alebo genotypu EBV v karcinómu žalúdka v tejto oblasti. Preto sme sa rozhodli ho vyhodnotiť v najstaršej postúpení centra pre rakovinu žalúdka v Iráne.
Metódy
Vzorky
sme vyšetrili 273 chirurgicky resekciou prípadov rakoviny žalúdka v tejto štúdii. Prípady boli náhodne vybrané z 1325 prípadov rakoviny žalúdka registrovaných v rakovinových ústavov Teheránskej univerzite v rokoch 1969 - 2004, ktoré majú intaktné parafínové bloky a patologické správy. Formalínu pevné parafínu zaliate tkaniva z týchto prípadov boli vybrané a odoslané do Kagošima University Graduate School lekárskych a stomatologických vied, Japonsko, pre ďalšie molekulárne hodnotenie. Patologické dáta bola získaná s prehodnotenie H &E nafarbená dvoma patológmi (AA &Co. SGS). Všetky dostupné demografické údaje boli získané z dostupných patologických a lekárskej správy o pacienta.
Pathology
Všetky vzorky boli znova dané do súvislosti je prevládajúci histologického modelu ako črevné a difúzneho typu podľa Lauren klasifikácie [49] a sub-klasifikované podľa smerníc japonskej výskumnej spoločnosti pre rakovinu žalúdka [50] na dobre diferencovaný tubulárnej adenokarcinóm (tub1), stredne diferencovaný adenokarcinóm (tub2), pevný zle diferencovaný adenokarcinóm (por1), non-solid zle diferencovaný adenokarcinóm (por2 ), pečatný prsteň karcinóm (SIG), mucinózní karcinóm (MUC) a zle diferencované lymfoepiteliální-like karcinóm (LE).
umiestnenie nádorov podľa prevažujúceho umiestnenie lézie boli klasifikované ako horná tretina alebo kardio, strednej tretine alebo telo a dolnej tretiny alebo Antrum podľa pokynov japonskej výskumnej spoločnosti pre rakovinu žalúdka [50]. Nebolo multifokálne prípad v našej štúdii.
Hĺbka invázie bola klasifikovaná ako slizničnej, sub-sliznice, muscularis propria a serózna zapojenie.
In situ hybridizácia
EBV bola identifikovaná pomocou expresie EBV kódované malé RNA-1 (Eber-1). In situ hybridizácia s komplementárnymi digoxigeninem značené 30 báza oligoméry bola použitá na detekciu Eber-1 v súlade s postupom opísaným skôr Chang et al [51]. 4-5-um rezy namontovaná na silánom potiahnuté sklíčka boli pripravené pre každý prípad. Tkanivo sa na sklíčka bola zbavené parafínu, rehydratuje, predigested s prednáša, prehybridizovány, a potom hybridizovány cez noc pri 37 ° C s 0,5 ng digoxigeninem značené sondy. Hybridizačný signál bol detekovaný pomocou antidigoxigenin konjugátu protilátka-alkalickej fosfatázy. Rezy od pacienta so známym karcinómu žalúdka Eber-pozitívne boli použité pozitívne kontroly a zmysel sondu Eber-1 bol použitý pre negatívna kontrola pre každý postup.
Príprava DNA
formol-pevné a parafín -embedded vzorka bol rozrezaný na 10 um hrubé plátky, a vzorka DNA bola pripravená podľa metódy opísanej Greer et al [52]. Krátko, rezy boli ošetrené xylénom a etanolom a odstredí pri 22000 g počas 20 minút, a výsledná peleta bola resuspendované v 100 ul vyhnívacie pufru (1 M Tris, pH 8,0, 50 mM EDTA, 0,5% Tween 20) s 200 ug /ml proteinázy K a inkubujú sa pri teplote 55 ° C cez noc. Po 10 min pri teplote varu 100 ° C, extrakciu a zrážanie DNA bola vykonaná s fenol-chloroformu a etanolu, v danom poradí.
Primery a sondy
Štyri rôzne regióny, EBNA-3C, BamHI-F, BamHI-W1 /I1 a XhoI miesto v LMP1, boli použité na určenie vírusovej genotypov. Tabuľka 1 zobrazuje zoznam súborov primérov a sond je používaný v predloženom study.Table 1 Zoznam primerov a sond používaných v tejto štúdii
genotypu
Sequence
Type sondou alebo veľkosti po re1 digescii Logo Microton: Referencie
spoločností EBNA-3C
Pôdy
Sense
5'-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3 '
antisencie
5'-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3
Vzorka et al. (53)
sondy
Type 1
5'-GAAGATTCATCGTCAGTGTC-3 '
153 BP2
Type 2
5'-CCGTGATTTCTACCGGGAGT-3'
246 bp
BamHI-F
Primery
Sense
5'-TCCCACCTGTTACCACATTC-3 '
Prototyp F: 198 bp
Lung et al. (54)
antisencie
5'-GGCAATGGGACGTCTTGTAA-3 '
Variant "f": 127 + 71 bp
Probe
5'-AAGGCTACCGTGCTAATTACCTCC-3'
Hudson et al. (55)
BamHI-W1 /I1
priméry
Sense
5'-ACCTGCTACTCTTCGGAAAC-3 '
Typ I: 205 bp
Lung et al. (54)
antisencie
5'-TCTGTCACAACCTCACTGTC-3 '
Sem "i": 130 + 75 bp
Xhol miesta v LMP1
Pôdy
Sense
5'- AACAGTAGCGCCAAGAGGAG-3 '
XhoI +: 113 bp
Sandvej et al. (56)
antisencie
5'-ATGGAACACGACCTTGAGAGG-3 '
XhoI-: 67 + 46 bp
1Restriction enzýmu; 2Base páry
typy 1 a 2 boli uznané amplifikáciu U2 oblasti EBNA-3C génu priméry opísanými v Sample et al [53], ktorá sa získa 153 a 246 bp fragmenty, v danom poradí. Oni sú uznávané blot hybridizáciou Southern (SBH) s internými sondami typovo špecifickými opísanými Ukážka et al [53]. BamHI-F oblasť bola amplifikovaná pomocou sady primérov opísanej Lung et al [54]. Z toho vyplývajúce fragment 198 bp bol naštiepený pomocou BamHI štiepenia enzýmom, ktorý zareval 198 bp fragment v prípade divokého typu F a 127-bp a 71 bp fragmentov v prípade, že "f 'varianty. Divokého typu F a F varianty boli potvrdené SBH s vnútorným sondou, ako bolo opísané skôr [55]. Rozlišovať I /i varianty sa /I1 región BamHI-W1 bola amplifikovaná za použitia sady Prímom opísanej Lung et al [54]. Trávenie BamHI štiepenia enzýmom zareval 205 bp fragment typ I a 130 bp a 75 bp fragmentov v prípade "i". Boli tiež potvrdzuje SBH s klonovaným fragmentom sondou BamHI-I DNA. Analýza polymorfizmu exónu 1 v LMP1 génu bola vykonávaná s použitím súboru primerov popísaný Sandvej et al [56], čo viedlo 113-bp fragmenty. Po štiepenie štiepenia enzýmom XhoI, Xhol + prípady, ktoré obsahujú XhoI štiepenie (XhoI chovaná) ukazujú 67-bp a 46 bp fragmenty, ale XhoI - prípady ukazujú pôvodné nestrávené 113 bp PCR produktu. Fragment o veľkosti 113 bp PCR produktu z bunkovej línie B95-8 bol použitý ako sonda pre potvrdenie štiepne miesto Xhol LMP1 podľa SBH [57].
U typu 1, divoký typ F, typ I, a XhoI - vírusy bunková línia B95-8 bola použitá ako pozitívna kontrola. Bunkové línie AG786 a agát a klonovaný BamHI-'f "a BamHI-" i "fragmenty DNA slúžili ako pozitívne kontroly typu 2, XhoI -" f "variant, a zadajte" i "vírusov, resp. Ľudský herpes vírus 6 infikované bunkové línie molto-4 použitý ako negatívna kontrola [58].
Polymerázová reťazová reakcia
amplifikácie cieľovej DNA sa vykonáva za použitia 2 ul DNA a zmesi 10 mM Tris-HCl, pH 8,0 , 50 mM KCI, 1,5 mM MgCl 2, 200 uM dNTP, 1 uM každého primeru a 1,0 U Taq polymerázy (Hot Star, Qiagen, Germany) v konečnom objeme 25 ul zmesi. Protokol použitý pre amplifikáciu EBNA-3C génu bol jeden cyklus pri teplote 95 ° C počas 15 minút, nasledovalo 40 cyklov denaturácie pri 95 ° C po dobu 1 minúty, teplotná hybridizácia pri 46 ° C po dobu 1 minúty a predĺženie pri 72 ° C počas 1 min a nakoniec skončila sa 5 minút pri teplote 72 ° C. Protokol použitý pre BamHI-F, BamHI-W1 /I1 a amplifikáciu miesta Xhol bol jeden cyklus pri 95 ° C po dobu 5 minút a následne 40 cyklov denaturácie pri 95 ° C po dobu 1 minúty, teplotná hybridizácia pri 43 ° C počas 1 min a predĺženie pri 72 ° C po dobu 1 minúty a nakoniec skončila sa 5 minút pri teplote 72 ° C. Elektroforéza v 2% agarózovom géli a farbením s 0,5 ug /ml etídiumbromidu bola vykonaná s cieľom identifikovať PCR produktov.
Polymorfizmus dĺžky reštrikčných fragmentov analýza
produkty amplifikovanej DNA (15 ul) boli štiepené 10 U všetkých BamHI a Xhol restrikčné enzýmy, podľa návodu výrobcu a vizualizované elektroforézou v 2% agarózovom géli farbeného s 0,5 ug /ml etídiumbromidu a prenesené na nylonovú membránu pre SBH.
hybridizácie Southern
Špecifickosť PCR reakcia bola potvrdená SBH. Elektroforetická DNA bola prenesená na Hybond N + nylonovú membránu (Amersham, Pharmacia Biotech, UK) pomocou kapilárneho Blot za použitia 0,4 N roztoku NaOH. Membrány boli předhybridizovány s hybridizačním pufru po dobu 1 hodiny pri teplote 42 ° C. Po pridaní sondy, hybridizácia bola vykonávaná cez noc pri 42 ° C. Sondy typu A a B, a BamH I-F boli značené pomocou Dig oligonukleotidom 3'-end súpravy pre značenie a detekované Dig luminiscenčné diagnostické súpravy (Boehringer Mannheim, Nemecko). Pre detekciu fragmentu BamHI-I a Xhol polymorfizmus v LMP1, hybridizácia bola vykonávaná s použitím ECL priameho značenia a detekčné súprava (Amersham, Pharmacia Biotech, UK) podľa inštrukcií výrobcu.
Štatistická analýza Štatistická analýza bola
vykonané pomocou softvéru LogExact 7,0 (štatistický balík pre regresné konanie predstavovať presný spôsob); Cytel Studio 7.0.0 Balík (Cytel Software Corporation, 2005). Presný test binárneho logistického analýza bola vykonaná pre porovnanie podielu EBV pozitívnych prípadov medzi adenokarcinóme žalúdka. Sex, vekových skupín (< 50, 50-69 a ≥ 70 rokov), anatomická umiestnenia nádoru (Antrum, telo a kardio), invázia nádoru (seroza, iní) a histologické klasifikácia Lauren boli zahrnuté ako nezávislé premenné. Polynóm premenné boli rozdelené do n-1
dummy binomicky premenných (n
bol počet kategórií). Pomer šancí s 95% intervalom spoľahlivosti bola vypočítaná pre každú kategóriu. 1 Chyba typu (α) bola stanovená na 0,05. Všetky hodnoty p boli obojstranný.
Výsledky
sme vyšetrili 273 karcinómov žalúdka, vrátane 196 (72%) mužov a 77 (28%) žien. Priemerný vek bol 57,3 ± 11,3 (SD) rokov (rozsah: 24-90; medián: 58). Väčšina z nich (108 prípadov, 66%) sa pohybovali v rozmedzí 50 až 69 rokov, 54 (20%) prípadov boli pod 50 ° C a zvyšok nad 70 rokov. Jedno sto tridsať prípadov (48%) boli umiestnené v dutine, a 64 (23%) a 71 (26%) prípadov boli umiestnené na tele i kardio, resp. V 5 prípadoch bola poloha nie je definovaná a v 3 prípadoch boli všetky steny žalúdka zapojený (linitis PLASTICA), ktoré neboli zahrnuté do štatistickej analýzy. Ako je uvedené v tabuľke 2, väčšina prípadov boli Typ reklamy v čreve (56%). Tabuľka 2 Distribúcia Eber 1-pozitívnych karcinómov žalúdka histologickým typom a pohlavia
Muž
Žena
Celkom

Eber + /N2 (%)
Eber + /N (%)
Eber + /N (%)
črevných
1/113 (1)
0/39 (0)
sto päťdesiat dvětina (1)
pap
0/11 (0)
0/3 (0)
0/14 (0)
tub1
0/36 (0)
0/11 (0)
0/47 (0)
tub2
1/50 (2)
0/16 (0)
1/66 (1)
MUC
0/16 ( 0)
0/9 (0)
0/25 (0)
Difúzna
7/83 (8)
1/38 (3)
8/121 (7 )
por1
3/34 (8)
1/16 (6)
4/50 (8)
por2
4/40 (10)
0 /18 (0)
4/58 (8)
sig
0/9 (0)
0/4 (0)
0/13 (0)
1 PAP: papilárne adenokarcinóm; tub1: dobre diferencovaný tubulárnej adenokarcinóm; tub2: stredne diferencovaný adenokarcinóm; por1: pevná zle diferencovaný adenokarcinóm; por2: non-pevná zle diferencovaný adenokarcinóm; sig: pečatný prsteň karcinóm bunka; MUC: mucinózní karcinóm; 2 celkový počet prípadov v každej skupine
Prevalencia EBV pozitívnych prípadov (na japonskej výskumnej spoločnosti pre rakovinu žalúdka based)
Eber-1 bola zistená u deviatich z 273 prípadov (3%), ktoré boli považované za EBV GC. Signál bol obmedzený iba na jadrách nádorových bunkách, ale nebol nájdený v non-nádorových buniek (Obr. 1). Obrázok 1 Prípad EBV pozitívne gasrtric karcinómu. Stredne diferencovaného adenokarcinómu rúrkovitý s občasným tvorbou tubúl (A); jadrový Eber pozitívnym signálom vo všetkých nádorových buniek detekovaná pomocou in situ hybridizácia (B).
faktory spojené s EBV pozitívnych prípadov
Tabuľka 3 ukazuje početnosť výskytu EBV-GC podľa veku, pohlavia, umiestnenie, histológie a invázie, ako v dôsledku logistickej analysis.Table 3 výsledok logistickej analýzy
premennej
Eber + /N1
(%)
OR2
95% CI2
rodovej rovnosti
Žena
1/76
(1)
1 referencie
Muž
8/188
(4)
0.3
0,01-2,96
P
= 0,595
Vek
≥ 70
1/36
(3)
1 referencie
50-69
5/180
(3)
0,8
0,08-44,62 Hotel < 50 Sims 3 /54
(6)
1.3
0,08-81,25
P Apartmán V trende = 1,0
Miesto
hornom
1/71
(1)
1 referencie
stred
5/64
(8)
6,0
, 1-77,86
Dolné
3/130
(2)
1,4
, 63-296,7
P
pre heterogénnosť = 1,64
histológia
difúznu
8/121
(7)
1 referencie
črevnej
sto päťdesiat dvětina
(1)
0,08
0,002 - 0,64
P
= 0,009
Invasion
Muscle
3/33
( 9)
1 referencie
serosa
6/222
(3)
3,6
0,47-24,03
P
= 0,243
1pokoje číslo v každej skupine; Asi 2x a 95% interval spoľahlivosti boli získané od exaktného testu binárne logistickej analýzy.
Pohlavie a vek
osem z 188 (4%) mužských prípadov a 1 z 76 (1%), ženské prípady boli EBV pozitívne. Hoci tam bol muž prevaha v tejto štúdii, to nebol štatisticky významný (p
= 0,5). Tam bol tiež žiadny vzťah medzi vekom a EBV-GC (p
= 1).
Umiestnenie nádoru
Podľa anatomické polohe 5 z 64 (8%) telových nádorov, jeden z 71 (1 %), srdcové nádory a 3 z 130 (2%) antrálnej nádory boli spojené s EBV. Hoci väčšina z EBV-GC sa nachádza v horných dvoch tretinách, že to nie je štatisticky významný (p
= 0,1).
Histologický typ
na Lauren klasifikáciu, 8 na základe z 121 (7%) difúzna púzdra typu boli spojené s EBV, ale iba 1 z 152 črevného typu bola EBV pozitívne, ktorý bol štatisticky významný (p = 0,009
). Podľa japonského klasifikácie, por2 a por1 boli prevládajúce histologické druhy v EBV-GC (tabuľka 2), ale vzhľadom na nízky počet prípadov v každej skupine štatistická analýza nemohla byť vykonaná.
Invázia
V tejto štúdii boli iba 2 prípady, ktoré boli obmedzené na submukóze a žiadna z nich ukazuje Eber-1 signál v ISH. Takto, vzhľadom na nízky počet, tieto prípady neboli považované pri štatistickej analýze. Nebol žiadny rozdiel medzi EBV pozitívnych a negatívnych prípadoch ohľadom invázie do blany a muscularis propria (p
= 0,24).
Ďalšie zistenia
pozoruhodné mieste v našej štúdii bola skutočnosť, že 6 z 9 EBV pacienti GCS sa narodili medzi "rokoch 1928-1930". Avšak, štatistická analýza nebola vykonaná z dôvodu nízkeho počtu.
Genotypu
subtyp EBV genómu bola stanovená vo všetkých 9 prípadoch. Všetky naše prípadov boli typu 1. BamHI-F región bol úspešne amplifikovaná v 8 z 9 EBV-GC, ktorý šesť z nich ukázal prototyp F (obr. 2). Amplifikácia BamHI-I /WI1 bol úspešný vo všetkých prípadoch a, s výnimkou jedného; Všetky prípady boli "aj" typu (pozri obr. 3). Analýza polymorfizmu exónu 1 LMP1 génu ukázala, že 3 prípady boli XhoI - a 6 prípadov bolo Xhol + (obr.4). Tabuľka 4 zhŕňa všetky demografické, patologické a genotypové dáta EBV-GC sa v tomto study.Table 4 klinicko-patologické a genetické znaky EBV-GC

rok narodenia
Diagnostic rok
Age
Pohlavie
Lacation
Invasion
histológia Lauren /WHO
EBNA-3 typ A /B
typu BamHI-F F /"f"
BamHI-i typu i /"aj"
XhoI +/-

1
1949
1981
32
Male
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
2
1929
1982
53
Male
Middle
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
3
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Intestinal/tub2
A
F
"i"
+
4
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
F
I
+
5
1940
1983
43
Female
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
6
1930
1986
56
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
ND1
"i"
+
7
1928
1988
60
Male
Upper
Serosa
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
8
1928
2001
73
Male
Middle
Serosa
Difuse/por2
A
"f'
"i"
-
9
1953
2002
49
Male
Lower
Seroasa
Diffuse/por2
A
"f"
"i"
+
1Není stanovené; tub2: stredne diferencovaný adenokarcinóm por1: pevná zle diferencovaný adenokarcinóm; por2: non-pevná zle diferencovaný adenokarcinóm
Obrázok 2 Výsledok Southern blot hybridizácia pre BamHI-F regiónu. Štyri vzorky sú vidieť na tomto obrázku, každú vzorku bol vložený 2 pruhy s a bez enzýmu, v tomto poradí zľava. Prvá vzorka bol amplifikovaný nie je v tomto experimente. Ostatné tri exempláre neboli štiepi Bam HI-enzýmu, čo znamená, že sú divokého typu F. (+: pozitívna kontrola; + /Enz: pozitívna kontrola s enzýmom, -: negatívna kontrola).
Obrázok 3 Výsledok južnej hybridizácia pre BamHI-W1 /I1 regiónu. Každá vzorka bol vložený 2 pruhy s a bez enzýmu, v tomto poradí zľava. V jednej vzorke je v druhom jazdnom pruhu, čo naznačuje, že produkt PCR rozštiepený ale my sme nemohli zistiť roztrieštených pásma pretože pôvodný kapela obsahovala malé množstvo kópií DNA žiadna kapela, takže sme považoval to za typ "i". Vzorky 2, 5 a 6 sa štiepia, čo znamená, že sú typu "i". Polymorfizmus vzoriek 3 a 4 neboli stanovené v tomto experimente. (+: Pozitívna kontrola; + /Enz: pozitívna kontrola s enzýmom, -: negatívna kontrola).
Obrázok 4 Výsledok Xhol polymorfizmus v južnom blot hybridizácie. Každá vzorka bol vložený 2 pruhy s a bez enzýmu, respektíve zľava. Prvá a druhá vzorky sa štiepi enzýmom, čo znamená, že sú Xhol +. Tretí z nich je XhoI-. (+: Pozitívna kontrola; + /Enz: Pozitívne kontrolnú vzorku s enzýmom, -: negatívna kontrola).
Diskusia
tejto štúdii zistený EBV-GCS u 3% žalúdočných karcinómov a naznačil, že väčšina žalúdočných karcinómov u myších iran sú EBV-negatívne. Neboli zistené žiadne LELCs, ktoré sú veľmi dobre známe, že sú pevne spojené s EBV [59]. Čipky vzor, ​​ktorý je unikátny morfológia v EBV-pozitívne začiatkom karcinómu žalúdka [60], nebol vidieť v našej štúdii. Táto frekvencia je medzi najnižšie frekvencie na svete. Ako už bolo spomenuté vyššie, podľa klasifikácie WHO, na severe Iránu je považovaný za jednu regiónoch s vysokou frekvenciou karcinómu žalúdka vo svete [61]. Riedke štúdie v Iráne tiež ukazujú, túto skutočnosť okrem toho, že vykazujú viac či menej homogenite celej krajine [48, 62, 63]. To znamená, že frekvencia low-GC EBV v Iráne podporuje skoršie hypotézu, že Zem s vysokým rizikom pre GC majú nízky výskyt EBV-GC [64]. To tiež potvrdzuje presvedčenie, že má nízky obsah Ázii ako prevalencia vo výške 3% v Kórei [25], 6% v Japonsku [24], 6% v Číne [26], 5% v Indii [18], 2% Pakistan [29] a maximálne 10% v Malajzii [27], Taiwan [21] a Kazachstanu [28]. To je však oveľa nižší ako Kazachstane frekvencie, (naše okolie krajina) s mnohými podobnosťami vo zvyku a sociálno-ekonomických podmienkach.
Prevalencia EBV-GC v karcinómu žalúdka rozptyľovať typ bol viac v našej štúdii, čo je skutočnosť, ktorá bola pozorovaná vo väčšine štúdií Latinskej Ameriky [16, 32] a niektoré krajiny v Ázii, ako sú Kórea [25], Čína [26] a v Indii [18]. Avšak, existuje mnoho protichodné štúdie, ktoré nevykazovali žiadny vzťah tohto pojmu [15, 17, 19, 23, 33]. Koriyama et al [23] vo svojej klasickej štúdie navrhuje, že existuje mnoho ďalších faktorov, ktoré majú vplyv na výskyt difúzneho typu karcinómu žalúdka, ako je vek, pohlavie a umiestnenie a konfliktné výsledky v rôznych štúdií môže byť vysvetlená rozdielmi v distribúcii z týchto faktorov.
Aj keď pomer muž /žena bola približne 4 v našej štúdii, že nebol významný pri štatistickej analýze. Absencia rodovej preferencie bol zaznamenaný v iných štúdiách v Mexiku [32, 37] Čile [16] a jednu oblasť v Číne [38]. Je však potrebné vziať do úvahy, že nízky počet pozitívnych prípadov v našej štúdii by mohlo byť príčinou nevýznamného výsledku v analýze. Medzitým Koriyama et al [23] ukazujú, že preferencie žien a mužov pre EBV je obmedzená na difúzna typu GC a nie je vidieť na črevnú typu. Avšak, pokiaľ ide o nízky počet našich prípadov sme nemohol vykonať analýzu oddelene pre každý druh.
Zvýšenie karcinómu hornej časti žalúdka cez zníženie celkovej incidencie karcinómov žalúdka je vidieť v mnohých štúdiách na celom svete [ ,,,0],65, 66]. Existuje aj mnoho dôkazy, že tento typ karcinómu žalúdka má rôzne rizikové faktory [67-69]. EBV je jedným z nich [15-31]. Abdirad et al [70] tiež ukazujú, že tam je taký nárast rakoviny hornej tretine žalúdka v Iráne. Napriek naším očakávaním, táto štúdia nepreukázali žiadnu preferenciu EBV pre hornú alebo strednej tretine žalúdka. Je dôležité si všimnúť, že napriek mnohým potvrdzujúcich štúdií v tejto súvislosti, tam je tiež žiadny takýto vzťah v našich susedných krajinách, teda Kazachstan [28] a Indie [18].
EBV v našej štúdii nebol preukázaný žiadny vzťah s vekom a hĺbkou invázie. Niektoré štúdie ukazujú, že existuje tendencia EBV-GC sa vyskytuje v nižšieho veku [19, 26, 33, 38]. Avšak, Koriyama et al [23] ukázal, že iba črevné typ EBV-GC ukazuje toto staroby, a navrhuje, že rozdiel v čase vystavenia špecifické kofaktory pre každý z týchto typov je pravdepodobný dôvod.
Jedným zo zaujímavých závery tejto štúdie je fakt, že šesť z našich 9 prípadoch EBV-GC, ktoré boli vybrané náhodne, sa narodili v období medzi rokom 1928 a 1930. aj keď sme nemohli uskutočniť žiadnu analýzu vzhľadom na nízky počet pozitívnych prípadov, toto zistenie sa zdá dôležité, pretože epidemiologická štúdia naznačila, že infekcia v ranom detstve EBV môže súvisieť s vývojom EBV-GC v dospelosti [71]. Hoci nemáme žiadny dôkaz, by mohli byť považované za jedny hypotéza. Napríklad, špecifické podmienky alebo udalosti, ktoré viedli k EBV infekciu v ranom detstve alebo sú dôsledkom s expozíciou niektoré špecifické spoločné rizikové faktory, ktoré by mali existovať okolo roku 1920. Preto navrhujeme riadiace Prípadová štúdia so zameraním na karcinómu žalúdka u pacientov narodených okolo roku 1920 porovnať výskyt EBV u týchto pacientov s ostatnými.
Genotypizácia vírusu bolo zistené, že typ 1 je exkluzívny typ vo všetkých naše EBV-GC. Prevaha typu 1 je v súlade s inými štúdiami [18, 45, 58, 40]. Typ 2 je väčšinou vidieť v Afrike [40] a tam je viera, že je slabší ako typ 2 a je väčšinou vidieť v imunodeficientných pacientov [40, 72]. Prototyp F na BamHI-F bola najčastejším typom v tejto štúdii. Tento typ má celosvetovú distribúciu okrem v južnej Číne, ktorá "f" variant je rozšírená a spôsobuje nosohltana karcinóm [43, 45]. Naše zistenia je rovnaký ako podobné štúdie u karcinómov žalúdka v Indii [18], Japonsku [73], a Chile [58]. BamHI-W1 analýza /I1 región polymorfizmus ukazuje, že 90% našich prípadov boli typu "i". Predchádzajúce štúdie odhalili, že typ I je najviac prevláda v Ázii [45, 54] a zadajte "i" je najviac v západných krajinách [46]. Tento spôsob distribúcie sa tiež pozorovali v podobných štúdií na EBV-GC [18, 45, 73]. Avšak, naše zistenia sa zdá byť podobný západných krajinách, ako je Corvalan nálezov v Kolumbii a Čile [58].

• Laparoskopická resekcia oproti otvorené pre žalúdočné gastrointestinálnom strómovými tumorom: aktualizovanú systematického prehľadu a metaanalýzy
• Možné zapojenie Nrf2-sprostredkovanej hemové oxygenázy-1, up-regulácia v ochrannom účinku inhibítora protónovej pumpy pantoprazolu proti indometacínom vyvolanej gastrickej poškodenie u potk…