Epstein-Barr virus geassocieerde maagcarcinoom: een verslag van Iran in de afgelopen vier decennia

Epstein-Barr virus geassocieerde maagcarcinoom: een verslag van Iran in de afgelopen vier decennia
Abstract achtergrond
Epstein-Barr virus is bewezen te worden geassocieerd met veel van de menselijke maligniteiten waaronder maagcarcinoom een van de belangrijkste menselijke maligniteiten ter wereld. Er is geen enkele studie over de aanwezigheid van EBV in adenocarcinoom van de maag in Iran geweest.
Methods
We onderzochten de aanwezigheid van EBV in 273 formaline gefixeerde in paraffine ingebedde gevallen van maagkanker van Cancer Institute van de Universiteit van Teheran, van 1969 tot 2004. In situ hybridisatie van EBV gecodeerde kleine RNA-1 (EBER-1) uitgevoerd. De stam van positieve gevallen werd onderzocht door middel van polymerase kettingreactie en /of restrictiefragmentlengtepolymorfisme analyse
Resultaten
We vonden 9. (3%; 95% CI = 1-5%) EBV positieve gevallen. Het geslacht verschil was niet significant statisticaly. Het aandeel van de EBV-GC gevallen diffuse soort was hoger dan intestinale type (OR = 0,08; 95% CI = 0,002-,64). EBV-GC gevallen had geen relatie met de leeftijd, de locatie en de invasie. Zes van de 9 EBV-GC zaken werden geboren in de periode tussen 1928 en 1930. Alle 9 gevallen waren Type A. Prototype F werd gezien in 6 van de 8 gevallen. Typ "i" werd gevonden in 8 gevallen en typ ik in 1 geval. XhoI + en XhoI- polymorfisme verantwoord 6 en 3 van de gevallen, respectievelijk.
Conclusie
Onze studie is de eerste om de frequentie van EBV-GC beschrijven in Iran en het Midden-Oosten, de nadruk op een zeer lage prevalentie van specifieke clinicopathologic Kenmerken. Het overwicht van EBV-GC geboortejaar in een vaste periode, suggereert dat EBV infectie of andere gebeurtenissen in de vroege jeugd later kan worden gerelateerd aan de ontwikkeling van EBV-GC in het leven. Het overwicht van het type "i" en Xhol + gevallen zijn in tegenspraak met andere studies in Azië en is vergelijkbaar met wat is gemeld uit Latijns-Amerikaanse landen. Achtergrond
Epstein-Barr virus (EBV) is een alomtegenwoordige dubbelstrengs DNA virus van humaan herpes virus familie, die B-lymphotropism heeft [1]. Meer dan 90% van de volwassenen in de wereld serologisch bewijs van infectie met dit virus [1]. Het wordt verworven tijdens de vroege kinderjaren en de leeftijd van de infectie is veel lager in onderontwikkelde landen met een lage sociaal-economische toestand [1]. Na primaire infectie, het virus wordt een levenslange latente infectie in de B-cel-lymfocyten, waar het aanwezig is in 1 op de 10 10/05 6 circulerende cellen [2]. Het drukt een aantal antigenen in deze latente fase, die is bewezen dat sommige oncogene eigenschappen [3-8] te hebben. Er zijn vele documenten causale verband tussen EBV en lymfoïde maligniteiten zoals lymfoom van Burkitt in equatoriaal Afrika [9], nasale T /NK-cellymfoom [10], Hodgkin-lymfoom [11] en B-cellymfoom bij patiënten met immunosuppressie [12]. EBV heeft ook het vermogen infecteren epitheelcellen, en heeft ook tumorigene effect in deze cellen waaruit het nasofaryngeale carcinoom is een van de belangrijke prototypes [13]. Ondernemingen De eerste melding van EBV betrokkenheid bij maagcarcinoom werd in 1990 in lymfo carcinoom van de maag [14]. Bijgevolg is in 1992 Shibata en Weiss gerapporteerd EBV detectie in 16% van de gewone maagcarcinoom in U.S. [15]. Sindsdien is de prevalentie van EBV-geassocieerde maagcarcinoom (EBV-GC) onderzocht en gerapporteerd in de verschillende landen, die varieerde van 3 tot 18% [15-34] met de laagste prevalentie in Papoea-Nieuw-Guinea, Pakistan en Zuid-Korea, die is tussen 1-3% en het hoogst in Duitsland en US die 16 tot 18%
Er zijn veel bewijzen causale verband tussen EBV en maagcarcinoom voorzien:. monoklonaliteit van de virussen in neoplastische cellen die werd aangetoond door unieke terminal herhaling van EBV DNA [35]; uniforme aanwezigheid van EBV in alle tumorcellen gedetecteerd door in situ hybridisatie van EBER-1, maar niet in de omliggende epitheelcellen [15-34] en elevatie van IgG- en IgA-antilichamen tegen virale capside antigeen enkele maanden voor klinische presentatie van de ziekte [36 .]
EBV-GC toont enkele karakteristieke constante clinicopathologic faciliteiten zoals predispositie voor bovenste tweederde van de maag [15-17, 19-31]; een matig gedifferentieerd buisvormige om slecht gedifferentieerde solide type histologie [16-22, 32, 33]; geen effect in stromale invasie en overleving [15, 16]; en mannelijke dominantie in de meeste studies. Echter, de laatste niet gezien in sommige uitzonderlijke studies die zijn uitgevoerd in Mexico [32, 37], Chili [16] en China [38]. Leeftijd afhankelijkheid is niet evident in de meeste studies. Maar studies in Colombia [19], en Kazachstan [28] blijkt een hogere prevalentie onder jongere patiënten.
EBV heeft twee belangrijke types, type 1 en type 2 die verschillen in hun vermogen om B-lymfocyten te zetten in een toestand van voortdurende proliferatie [39]. Type 1 is overheersend in Westerse en Aziatische landen, terwijl B-type overheerst in Afrika en wordt vaker gezien bij patiënten met immunosuppressie [40, 41]. Daarnaast zijn er drie andere varianten, die zich onderscheiden door restrictiefragment (RFLP) middels BamHI en Xhol restrictie-endonuclease-enzymen. Voor deze BamHI-F regio Prototype F heeft wereldwijde distributie en "f" variant die een extra plaats voor enzym overheerst in Zuid-China en is geassocieerd met nasofarynxcarcinoom [42, 43]. Polymorfisme in BamHI-W1 /I1 grensgebied leidt tot twee varianten; type I en 'i'. Type I, die overheerst in Japan en China heeft geen plaats voor BamHI enzym [44, 45] en typ 'i' met een extra BamHI site is meer in het algemeen in de westerse landen [46] gezien. Tenslotte polymorfisme in Xhol restrictieplaats in axon 1 van de LMP1 gen definieert XhoI + komen vaker in westerse landen [47] en XhoI -., Die vaak wordt gezien in Azië [44]
Iran is een van de landen met een hoge incidentie van maagcarcinoom met een jaarlijkse incidentie van 26,1 per 100.000 voor mannen en 11,1 voor vrouwen te hebben. Het is de tweede meest voorkomende kanker en het eerste belangrijkste oorzaak van kankersterfte bij mannen in Iran [48]. Er is echter geen enkele studie over de prevalentie of genotype van EBV in maagkanker op dit gebied. Daarom hebben we besloten om het in de oudste verwijzing centrum voor maagkanker in Iran te evalueren.
Methods
Exemplaren
We onderzochten 273 chirurgisch weggesneden maagkanker gevallen in deze studie. De zaken werden willekeurig geselecteerd uit 1325 maagkanker gevallen van kanker instituten van de Universiteit van Teheran tussen 1969 geregistreerd - 2004 die intact paraffineblokken en pathologische rapporten. Formaline gefixeerd paraffine-ingebed weefsel van deze gevallen werden geselecteerd en naar Kagoshima University Graduate School of Medical and Dental Sciences, Japan, voor verdere moleculaire evaluaties. Pathologische gegevens werden verkregen met re-evaluatie van H & E gekleurde dia's door twee pathologen (AA & SGS). Alle beschikbare demografische gegevens werden verkregen uit de beschikbare pathologische en medische rapporten van de patiënten.
Pathologie
Al de monsters werden opnieuw ingedeeld ten aanzien van de overheersende histologische patroon als darm- en diffuse type volgens Lauren classificatie [49] en sub-ingedeeld volgens de richtlijnen van de Japanse research Society voor maagkanker [50] om goed gedifferentieerd buisvormige adenocarcinoom (tub1), matig gedifferentieerd adenocarcinoom (tub2), solide slecht gedifferentieerd adenocarcinoom (por1), niet-vaste slecht gedifferentieerde adenocarcinoom (por2 ), zegelring cell carcinoma (sig), mucineus carcinoom (MUC) en slecht gedifferentieerde lymfo-achtige carcinoom (LE). Ondernemingen de tumoren locatie volgens overheersende plaats van de laesies werden geclassificeerd als bovenste derde of cardia, middelste derde of lichaam en lagere derde of antrum volgens de richtlijnen van de Japanse research Society voor maagkanker [50]. Er was geen multifocale case in onze studie. Ondernemingen De diepte van invasie werd geclassificeerd als mucosale, sub-mucosale, muscularis propria en sereuze betrokkenheid.
In situ hybridisatie
EBV werd geïdentificeerd door de expressie van EBV-gecodeerde kleine RNA-1 (EBER-1). In situ hybridisatie met digoxigenine gemerkte complementaire 30-base oligomeer werd gebruikt voor het detecteren EBER-1 volgens de eerder beschreven door Chang et al [51] procedure. 4-5-um secties, gemonteerd op glasplaatjes silaan gecoate werden bereid voor elk geval. Het weefsel werd op de objectglaasjes paraffine ontdaan, gerehydrateerd predigested met pronase, geprehybridiseerd, en dan overnacht gehybridiseerd bij 37 ° C met 0,5 ng digoxigenine-gemerkte probe. Het hybridisatiesignaal werd gedetecteerd door een antidigoxigenin antilichaam-alkalische fosfatase conjugaat. Secties van een patiënt met bekende EBER-positieve maagcarcinoom maakten we een positieve controle, en sense sonde EBER-1 werd gebruikt voor een negatieve controle voor elke procedure.
Bereiding van DNA Ondernemingen De met formaline gefixeerd en in paraffine Ingebedde monster werd gesneden in 10 urn dikke plakken en DNA-monster werd bereid volgens de methode beschreven door Greer et al [52] methode. In het kort werden de plakjes behandeld met xyleen en ethanol en gecentrifugeerd bij 22.000 g gedurende 20 minuten en de resulterende pellet werd geresuspendeerd in 100 pl digestie buffer (1 M Tris, pH 8,0, 50 mM EDTA, 0,5% Tween 20) met 200 ug /ml proteïnase K en geïncubeerd bij 55 ° C overnacht. Na 10 minuten koken bij 100 ° C, extractie en precipitatie van DNA werd met fenol-chloroform en ethanol, respectievelijk uitgevoerd.
Primers en probes
Vier verschillende gebieden, EBNA-3C, BamHI-F, BamHI-W1 /I1 en XhoI-plaats in LMP1, werden gebruikt om virale genotypen te bepalen. Tabel 1 toont de lijst van de primer sets en sondes die in de onderhavige study.Table 1 Lijst van de primers en probes die in deze studie
Genotype
Sequence
Type van sonde of grootte na RE1 spijsvertering
Reference
EBNA-3C
primers
Sense
5'-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3 '
Antisense
5'-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3
Sample et al. (53)
Probes
Type 1
5'-GAAGATTCATCGTCAGTGTC-3 '
153 BP2
Type 2
5'-CCGTGATTTCTACCGGGAGT-3'
246 bp
BamHI-F
primers
Sense
5'-TCCCACCTGTTACCACATTC-3 '
Prototype F: 198 bp
Lung et al. (54)
Antisense
5'-GGCAATGGGACGTCTTGTAA-3 '
Variant "f": 127 + 71 bp
Probe
5'-AAGGCTACCGTGCTAATTACCTCC-3'
Hudson et al. (55)
BamHI-W1 /I1
Primers
Sense
5'-ACCTGCTACTCTTCGGAAAC-3 '
Type I: 205 bp
Lung et al. (54)
Antisense
5'-TCTGTCACAACCTCACTGTC-3 '
Typ "i": 130 + 75 bp
Xhol site in LMP1
Primers
Sense
5' AACAGTAGCGCCAAGAGGAG-3 '
Xhol +: 113 bp
Sandvej et al. (56)
Antisense
5'-ATGGAACACGACCTTGAGAGG-3 '
XhoI-: 67 + 46 bp
1Restriction enzym; 2Base paren
Types 1 en 2 werden herkend door amplificatie van U2 regio EBNA-3C gen van primers door Sample et al [53] die 153 en 246 bp fragmenten respectievelijk opgeleverd. Ze worden erkend door Southern blot hybridisatie (SBH) met type-specifieke interne probes beschreven door Sample et al [53]. De regio BamHI-F werd versterkt door de primers set beschreven door Lung et al [54]. Het gevolg 198-bp fragment werd gedigereerd met BamHI restrictie-enzym dat een 198-bp fragment in het geval van wildtype F en 127 bp en 71 bp fragmenten bij 'f' variant bedrijfsniveau. Het wildtype F en f varianten werden bevestigd door SBH met de interne probe zoals eerder beschreven [55]. Om onderscheid te maken I /i-varianten, werd het BamHI-W1 /I1 regio versterkt met behulp van de primer set beschreven door Lung et al [54]. Digestie met restrictie-enzym BamHI riep 205-bp fragment in type I en 130 bp en 75 bp fragmenten bij 'i'. Zij werden ook bevestigd door SBH een gekloneerd-BamHI-DNA-fragment probe. Analyse van polymorfisme in exon 1 van LMP1-gen werd uitgevoerd met een primerset beschreven door Sandvej et al [56] die 113 bp fragmenten resulteerde. Na digestie met Xhol restrictie-enzym, XhoI + gevallen die XhoI splitsingsplaats (XhoI gehouden) bevatten tonen 67 bp en 46 bp fragmenten maar Xhol - cases tonen de originele onverteerde 113 bp PCR-product. De 113 bp fragment van het PCR-product van B95-8 cellijn werd gebruikt als de probe om XhoI splitsingsplaats van LMP1 te bevestigen door SBH [57].
Bij type 1, wild type F, type I, en Xhol - virussen de B95-8 cellijn werd gebruikt als positieve controle. De cellijnen AG786 en Akata en het gekloneerde BamHI-'f 'en BamHI- "i" DNA-fragmenten dienden als positieve controles voor type 2, Xhol -, "f" variant, en typ "i" virussen, respectievelijk. Humaan herpesvirus 6 geïnfecteerde cellijn MOLT-4 als negatieve controle gebruikt [58].
Polymerase kettingreactie
Amplificatie van doelwit DNAs gebruikte 2 pl DNA en mengsel van 10 mM uitgevoerd Tris-HCl, pH 8,0 , 50 mm KCl, 1,5 mM MgCl 2, 200 uM dNTP, 1 uM van elke primer en 1,0 U Taq polymerase (Hot Star, Qiagen, Duitsland) in een eindvolume van 25 pi mengsel. Het protocol voor amplificatie van EBNA-3C-gen was één cyclus bij 95 ° C gedurende 15 min, gevolgd door 40 cycli van denaturatie bij 95 ° C gedurende 1 minuut, hybridisatie bij 46 ° C gedurende 1 min en verlenging bij 72 ° C gedurende 1 min en tenslotte eindigde met 5 minuten bij 72 ° C. Het protocol voor BamHI-F, BamHI-W1 /I1 en XhoI-plaats amplificatie was één cyclus bij 95 ° C gedurende 5 minuten gevolgd door 40 cycli van denaturatie bij 95 ° C gedurende 1 minuut, hybridisatie bij 43 ° C gedurende 1 min en verlenging bij 72 ° C gedurende 1 min en eindigde uiteindelijk met 5 minuten bij 72 ° C. Elektroforese in een 2% agarosegel en kleuring met 0,5 ug /ml ethidiumbromide werd de identificatie van de PCR-producten uitgevoerd.
Restrictiefragmentlengtepolymorfisme-analyse
geamplificeerde DNA-producten (15 ul) werden geknipt met 10 U van BamHI en Xhol restrictie-enzymen, volgens de instructies van de fabrikant en gevisualiseerd door elektroforese op een 2% agarose gel gekleurd met 0,5 ug /ml ethidiumbromide en overgebracht op een nylon membraan SBH.
Southern blot hybridisatie
Specificiteit van PCR reactie werd bevestigd door SBH. De elektroforetische DNA werd overgebracht op een Hybond N + nylonmembraan (Amersham Pharmacia Biotech, UK) door capillair blotten via 0,4 N NaOH-oplossing. De membranen werden voorgehybridiseerd hybridisatie buffer gedurende 1 uur bij 42 ° C. Na het toevoegen van de probe, hybridisatie werd overnacht uitgevoerd bij 42 ° C. Probes van types A en B, en BamH I-F werden gelabeld met Dig oligonucleotide 3'-end labeling kit en gedetecteerd door Dig luminescente detectie kit (Boehringer Mannheim, Duitsland). Voor het detecteren van het BamHI-XhoI-fragment en polymorfisme in LMP1, werd hybridisatie uitgevoerd met het ECL direct labeling en detectie kit (Amersham Pharmacia Biotech, UK) volgens de aanwijzingen van de fabrikant.
Statistische analyse Statistische analyse werd
gedaan met behulp van LogExact 7.0 software (een statistisch pakket voor regressie procedure met exacte methode); Cytel Studio 7.0.0 pakket (Cytel Software Corporation, 2005). Exact test binaire logistische analyse werd uitgevoerd om het aantal EBV positieve gevallen bij maagdarmkanker vergelijken. Geslacht, leeftijdsgroepen (< 50, 50-69 en ≥ 70 jaar), anatomische locatie van de tumor (antrum, lichaam en cardia), invasie van de tumor (serosa, anderen) en histologische classificatie Lauren's werden opgenomen als onafhankelijke variabelen. Multinominale variabelen werden verdeeld over n-1
dummy binominal variabelen (n
was het aantal categorieën). Odds ratio met 95% betrouwbaarheidsinterval werd berekend voor elke categorie. Type 1 fout (α) werd vastgesteld op 0,05. Alle p-waarden zijn tweezijdig.
Resultaten
We onderzochten 273 maagkanker waaronder 196 (72%) mannen en 77 (28%) vrouwen. De gemiddelde leeftijd was 57,3 ± 11,3 (SD) jaar (uitersten: 24-90; mediaan: 58). Meeste (108 gevallen, 66%) waren 50 tot 69 jaar, 54 (20%) gevallen waren onder 50 en de resterende ouder dan 70 jaar. Honderd dertig gevallen (48%) bevonden zich in antrum en 64 (23%) en 71 (26%) gevallen in lichaam en cardia, respectievelijk. In 5 gevallen werd de locatie niet gedefinieerd en in 3 gevallen de maagwand waren betrokken (Linitis Plastica), die niet zijn opgenomen in de statistische analyse. Zoals weergegeven in tabel 2, het merendeel van de gevallen waren intestinale type (56%). Tabel 2 Verdeling van EBER-1 positieve maagcarcinomen door histologische type en geslacht
Histology1

Man
Vrouw
Total

EBER + /N2 (%)
EBER + /N (%)
EBER + /N (%)
Intestinale
1/113 (1)
0/39 (0)
1/152 (1)
pap
0/11 (0)
0/3 (0)
0/14 (0)
tub1
0/36 (0)
0/11 (0)
0/47 (0)
tub2
1/50 (2)
0/16 (0)
1/66 (1)
MUC
0/16 ( 0)
0/9 (0)
0/25 (0)
Zend
7/83 (8)
1/38 (3)
8/121 (7 )
por1
3/34 (8)
16/01 (6)
4/50 (8)
por2
4/40 (10)
0 /18 (0)
4/58 (8)
sig
0/9 (0)
0/4 (0)
0/13 (0)
1 pap: papillair adenocarcinoom; tub1: goed gedifferentieerd buisvormige adenocarcinoom; tub2: matig gedifferentieerd adenocarcinoom; por1: solide slecht gedifferentieerd adenocarcinoom; por2: non-solid slecht gedifferentieerd adenocarcinoom; sig: zegelring cell carcinoma; muc: mucinous carcinoma; 2 totaal aantal gevallen in elke groep (gebaseerd op de Japanse onderzoek samenleving voor maagkanker)
prevalentie van EBV positieve gevallen
EBER-1 werd gedetecteerd in negen van de 273 gevallen (3%), die als EBV werden beschouwd GC. Het signaal werd alleen beperkt tot de kernen van tumorcellen, maar niet in niet-tumorcellen (Fig. 1). Figuur 1 Een geval van EBV positieve gasrtric carcinoom. Matig gedifferentieerd adenocarcinoom buisvormige met occasionele vorming Tubul (A); nucleaire EBER positief signaal in alle tumorcellen gedetecteerd met in situ hybridisatie (B).
Factoren geassocieerd met EBV positieve gevallen
Tabel 3 toont de frequenties van EBV-GC leeftijd, geslacht, plaats, histologie en invasie en als gevolg van de logistieke analysis.Table 3 resultaat van de logistieke analyse
Variabelen
EBER + /N1
(%)
OR2
95% CI2
Geslacht
Vrouwelijk
1/76
(1) 1
verwijzing
Man
8/188
(4)
0.3
0,01-2,96
P
= 0,595
Age
≥ 70
1/36
(3) 1
verwijzing
50-69
5/180
(3)
0.8
,08-44,62 Restaurant < 50
3 /54
(6)
1.3
,08-81,25
P
voor trend = 1,0
Locatie
Upper
1/71
(1)
1
verwijzing
Midden
5/64
(8)
6,0
,1-77,86
Neder
3/130
(2)
1.4
,63-296,7
P
voor heterogeniteit = 1,64
histologie
Diffuse
8/121
(7) 1
verwijzing
intestinale
1/152
(1)
0,08
0,002-,64
P
= 0,009
Invasion
Muscle
3/33
( 9) 1
verwijzing
serose
6/222
(3)
3.6
,47-24,03
P
= 0,243
1Totale nummer in elke groep; 2or en 95% betrouwbaarheidsinterval werden verkregen uit exact test van binaire logistieke analyse.
Geslacht en leeftijd
Acht op de 188 (4%) mannelijke gevallen en 1 van de 76 (1%) vrouwelijke gevallen waren EBV positief. Hoewel er een mannelijke dominantie in deze studie was niet statistisch significant (p
= 0,5). Ook was er geen relatie tussen leeftijd en EBV-GC (p
= 1).
Tumor locatie
Volgens anatomische locatie, op 5 van de 64 (8%) lichaam tumoren, 1 op 71 (1 %) cardiale tumoren en 3 van de 130 (2%) antral tumoren werden EBV geassocieerd. Hoewel de meeste van EBV-GC bevonden zich in de bovenste twee derde, het was niet significant statistisch (p
= 0,1).
Histologische soort
Op basis van de indeling van Lauren, 8 van de 121 (7%) diffuse soort gevallen waren EBV-geassocieerde, maar slechts 1 op de 152 intestinale soort was EBV positief, wat statistisch significant was (p
= 0,009). Volgens de Japanse indeling, por2 en por1 werden de overheersende histologische soorten van EBV-GC (tabel 2), maar gezien het geringe aantal gevallen per groep statistische analyse kon worden uitgevoerd.
Invasion
In deze studie zijn waren slechts 2 gevallen die waren beperkt tot submucosa en geen van hen toont EBER-1-signaal in ISH. Dus, gezien het geringe aantal, deze gevallen werden niet meegenomen in de statistische analyse. Er was geen verschil tussen EBV positieve en negatieve zaken met betrekking tot de invasie te serosa en muscularis propria (p
= 0,24).
Andere bevindingen
De opmerkelijk punt in onze studie was het feit dat 6 van de 9 EBV GC patiënten werden geboren tussen "1928-1930". Echter, de statistische analyse niet gemaakt vanwege het geringe aantal.
Genotypering Ondernemingen De subtype van EBV-genoom werd bepaald in alle 9 gevallen. Al onze gevallen waren Type 1. De BamHI-F gebied werd met succes geamplificeerd in 8 van 9 van EBV-GCs, waarbij zes van hen bleek prototype F (fig. 2). Amplificatie van BamHI-I /wi1 was succesvol in alle gevallen en, behalve één; alle gevallen waren "i" type (fig. 3). Analyse van polymorfisme in exon 1 van de LMP1-gen bleek dat 3 gevallen waren Xhol - en 6 gevallen waren XhoI + (figuur 4). Tabel 4 samengevat alle demografische, pathologische en genotypische gegevens van de EBV-GC in deze study.Table 4 Clinico-pathologische en genetische kenmerken van EBV-GC

Geboorte jaar
Diagnostic jaar
Age
Gender
lacation
Invasion
Histologie Lauren /WHO
EBNA-3 type A /B
BamHI-F type F /"f"
BamHI-I type I /"i"
XhoI +/-

1
1949
1981
32
Male
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
2
1929
1982
53
Male
Middle
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
3
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Intestinal/tub2
A
F
"i"
+
4
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
F
I
+
5
1940
1983
43
Female
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
6
1930
1986
56
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
ND1
"i"
+
7
1928
1988
60
Male
Upper
Serosa
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
8
1928
2001
73
Male
Middle
Serosa
Difuse/por2
A
"f'
"i"
-
9
1953
2002
49
Male
Lower
Seroasa
Diffuse/por2
A
"f"
"i"
+
1Not vastgesteld; tub2: matig gedifferentieerd adenocarcinoom por1: solid slecht gedifferentieerd adenocarcinoom; por2: non-solid slecht gedifferentieerd adenocarcinoom
Figuur 2 Resultaat van Zuid blothybridisatie voor BamHI-F regio. Vier monsters worden gezien in deze figuur, werd elk monster geladen in lanen 2 met en zonder enzym, respectievelijk van links. Het eerste monster werd niet geamplificeerd in dit experiment. De andere drie monsters werden niet gesplitst door Bam-HI enzym dat betekent dat ze zijn wild-type F. (+: positieve controle; + /enz: positieve controle met enzym; -: negatieve controle).
Figuur 3 Resultaat van het zuiden vlek hybridisatie voor BamHI-W1 /I1 regio. Elk monster werd geladen in lanen 2 met en zonder enzym, respectievelijk van links. In één monster is er geen band in de tweede rijstrook, die suggereert dat de PCR-product werd geknipt, maar we konden niet detecteren de versnipperde bands sinds de oorspronkelijke band bevatte klein aantal DNA-kopieën, dus we beschouwen het als type "i". Monsters 2, 5 en 6 worden gekliefd waardoor ze type "i". Polymorfisme van monsters 3 en 4 werden niet bepaald in dit experiment. (+: Positieve controle; + /enz: positieve controle met enzym; -: negatieve controle).
Figuur 4 Resultaat van Xhol polymorfisme in het zuiden van blot hybridisatie. Elk monster werd geladen in lanen 2 met en zonder enzymen respectievelijk van links. De eerste en tweede monsters worden gesplitst met enzymen waardoor ze XhoI +. De derde is XhoI-. (+: Positieve controle; + /enz: positieve controle met enzym; -: negatieve controle).

Discussie De onderhavige studie gedetecteerd EBV-GC in 3% van maag- carcinomen en suggereerde dat de meerderheid van gastrische carcinomen Iran zijn EBV-negatief. Er waren geen LELCs, die goed bekend zijn sterk geassocieerd met EBV [59]. Kant patroon, wat een unieke morfologie EBV-positieve vroege maagkanker [60], werd niet gezien in onze studie. Deze frequentie is van de laagste frequenties in de wereld. Zoals hierboven vermeld, volgens de WHO classificatie, Noord Iran wordt beschouwd als één van de regio's met hoge frequentie maagcarcinoom ter wereld [61]. De spaarzame studies in Iran tonen ook daarmee behalve dat ze tonen min of meer homogeniteit hele land [48, 62, 63]. Zo is de lage EBV-GC frequentie in Iran steunt de vorige hypothese dat een hoog risico landen voor GC hebben lage tarieven van de EBV-GC [64]. Dit bevestigt ook de overtuiging dat het laag in Azië de prevalentie van 3% in Korea [25], 6% in Japan [24], 6% in China [26], 5% in India [18], 2% in Pakistan [29] en maximaal 10% in Maleisië [27], Taiwan [21] en Kazachstan [28]. Dit is echter veel lager dan Kazachstan frequentie (onze nabijgelegen land) met veel overeenkomsten in de aangepaste en sociaal-economische omstandigheden. Ondernemingen De prevalentie van EBV-GC in diffuse Type maagcarcinoom was in onze studie, hetgeen werd waargenomen in de meeste studies Latijns Amerika [16, 32] en enkele landen in Azië, zoals Korea [25], China [26] en India [18]. Er zijn echter veel tegenstrijdige studies die geen relatie dit concept [15, 17, 19, 23, 33] vertoonde. Fukushima et al [23] in hun klassieke studie voorgesteld dat er vele andere factoren die invloed op de incidentie van diffuse soort maagkanker zoals leeftijd, geslacht en de locatie en de tegenstrijdige resultaten in verschillende studies kon worden verklaard door het verschil in verdeling deze factoren.
Hoewel de verhouding man /vrouw ongeveer 4 in onze studie was niet significant in statistische analyse. De afwezigheid van geslacht voorkeur werd gezien in andere studies in Mexico [32, 37] Chili [16] en één gebied in China [38]. Toch moeten we bedenken dat het lage aantal positieve gevallen in onze studie de reden van onbeduidende resultaat in de analyse zou kunnen zijn. Ondertussen Koriyama et al [23] blijkt dat het geslacht voorkeur voor EBV beperkt type GC diffunderen en wordt niet gezien in intestinale type. Niettemin over het lage aantal onze gevallen konden niet de analyse apart uitgevoerd voor elk type.
Toename kanker van het bovenste deel van de maag, ondanks daling van de totale incidentie van maagkanker is te zien in vele studies wereldwijd [ ,,,0],65, 66]. Er zijn ook vele bewijzen dat deze vorm van maagkanker heeft verschillende risicofactoren [67-69]. EBV is een van hen [15-31]. Abdirad et al [70] blijkt ook dat er een dergelijke stijging van de kanker van de bovenste derde van de maag in Iran. Ondanks onze verwachting, deze studie geen voorkeur van de EBV voor de bovenste of middelste derde deel van de maag te laten zien. Het is belangrijk op te merken dat ondanks vele bevestigende studies in dit verband is er ook geen dergelijke betrekking, onze nabijgelegen landen, namelijk Kazachstan [28] en India [18].
EBV in onze studie werd geen relatie vertonen met de leeftijd en invasiediepte. Sommige studies geven aan dat er neiging van EBV-GC optreden bij lagere leeftijd [19, 26, 33, 38]. Echter, Koriyama et al [23] blijkt dat slechts intestinale type EBV-GC toont dit leeftijdsvoorkeur en voorgesteld leeftijdsverschil van blootstelling aan specifieke cofactoren voor elk van deze is de waarschijnlijke oorzaak.
Een interessant bevindingen van dit onderzoek is het feit dat 6 van onze 9 EBV-GC gevallen die willekeurig werden geselecteerd, werden geboren in de periode tussen 1928 en 1930. Hoewel we geen analyse ten aanzien van het lage aantal positieve gevallen kan uitvoeren, deze bevinding lijkt belangrijk omdat een epidemiologische studie suggereerde dat EBV-infectie bij jonge kinderen kan verband houden met de ontwikkeling van EBV-GC bij volwassenen [71]. Hoewel we geen bewijs hebben, zouden sommige hypothese worden beschouwd. Bijvoorbeeld, specifieke voorwaarden of gebeurtenissen, die leiden tot EBV-infectie bij jonge kinderen of verkregen blootstelling aan een speciale co-risicofactoren die kunnen bestaan ​​rond de late jaren 1920. Daarom stellen wij een patiënt-controleonderzoek gericht op maagcarcinoom patiënten geboren rond de late jaren 1920 om de prevalentie van EBV te vergelijken bij deze patiënten volgen.
Genotypering van het virus bleek dat type 1 is het exclusieve soort in heel onze EBV-GC. Het overwicht van type 1 is in overeenstemming met andere studies [18, 45, 58, 40]. Type 2 komt vooral in Afrika [40] en er is een geloof dat zwakker is dan het type 2 en komt vooral bij immunodeficiënte patiënten [40, 72]. Het prototype F aan BamHI-F was het meest voorkomende type in deze studie. Dit type heeft een wereldwijde distributie, behalve in het zuiden van China, die "f" variant is wijd verspreid en veroorzaakt nasofarynxcarcinoom [43, 45]. Onze bevinding is gelijk studies die in maagkanker in India [18], Japan [73] en Chili [58]. BamHI-W1 /I1 regio polymorfisme analyse blijkt dat 90% van onze gevallen waren type "i". Eerdere studies bleek dat type I is de meest voorkomende in Azië [45, 54] en typ "i" is het meest in de westerse landen [46]. Dit patroon van verdeling werden ook gezien in vergelijkbare studies op EBV-GC [18, 45, 73]. Echter, onze bevinding lijkt vergelijkbaar met westerse landen als Corvalan bevindingen in Colombia en Chili [58] te zijn. XhoI + is de meest voorkomende soort in XhoI restrictieplaats in exon één van de LMP1-gen in de huidige studie.

• Laparoscopische resectie versus geopend voor de maag gastro-intestinale stromale tumoren: een bijgewerkte systematische review en meta-analyse
• Een mogelijke betrokkenheid van Nrf2-gemedieerde heem oxygenase-1 up-regeling in beschermende effect van de protonpompremmer pantoprazol tegen-indomethacine geïnduceerde maagschade in rats