Epstein-Barr virus associeret gastrisk karcinom: en rapport fra Iran i de sidste fire decades

Epstein-Barr virus associeret gastrisk karcinom: en rapport fra Iran i de sidste fire årtier
Abstrakt
Baggrund
Epstein Barr virus har vist sig at være forbundet med mange af de humane maligniteter inklusive gastrisk karcinom, en af ​​de vigtigste humane maligniteter i verden. Der har ikke været nogen undersøgelse om tilstedeværelsen af ​​EBV i gastrisk adenocarcinom i Iran.
Metoder
Vi undersøgte forekomsten af ​​EBV i 273 formalinfikserede faste paraffinindlejrede tilfælde af gastrisk karcinom fra Cancer Institute of Teheran Universitet, fra 1969 til 2004. In situ-hybridisering af EBV-kodet lille RNA-1 (EBER-1) blev udført. Stammen af ​​positive tilfælde blev undersøgt ved hjælp af polymerasekædereaktion og /eller restriktionsfragmentlængde-polymorfisme analyse Search Results
Vi fandt 9. (3%; 95% CI = 1-5%) EBV positive tilfælde. Den kønsbestemte forskel var ikke statisticaly signifikant. Andelen af ​​EBV-GC sager i diffus type var højere end intestinal type (OR = 0,08; 95% CI = 0,002-0,64). EBV-GC sager havde ingen relation til alder, beliggenhed og invasion. Seks ud af ni EBV-GC sager blev født i perioden mellem 1928 og 1930. Alle 9 sager var type A. Prototype F blev set i 6 ud af 8 sager. Skriv "i" blev fundet i 8 sager og type I i en sag. XhoI + og XhoI- polymorfi udgjorde 6 og 3 af tilfældene, hhv.
Konklusion
Vores undersøgelse er den første til at beskrive hyppigheden af ​​EBV-GC i Iran og Mellemøsten, fremhæver en meget lav prævalens med specifik clinicopathologic funktioner. Overvægten af ​​EBV-GC fødsel år i en bestemt periode, tyder på, at EBV-infektion eller andre begivenheder på tidlige barndom kan være relateret til udvikling af EBV-GC senere i livet. Overvægten af ​​typen "i" og XhoI + tilfælde er selvmodsigende til andre undersøgelser i Asien og svarer til, hvad der er rapporteret fra latinamerikanske lande.
Baggrund
Epstein-Barr virus (EBV) er en allestedsnærværende dobbeltstrenget DNA virus fra human herpesvirus-familien, som har B-lymphotropism [1]. Mere end 90% af de voksne i verden har serologisk tegn på infektion med denne virus [1]. Det er erhvervet i den tidlige barndom og alder infektion er meget lavere i uudviklede lande med lav socioøkonomisk tilstand [1]. Efter primær infektion, virus etablerer en livslang latent infektion i B-celle lymfocytter, hvor det er til stede i en i 10 5-10 6 cirkulerende celler [2]. Det udtrykker nogle antigener i denne latente fase, som er vist sig at have nogle onkogene egenskaber [3-8]. Der er mange dokumenter om årsagssammenhæng mellem EBV og lymfoide maligne sygdomme såsom Burkitts lymfom i ækvatoriale Afrika [9], nasal T /NK-celle lymfom [10], Hodgkins lymfom [11] og B-celle lymfom hos immunsupprimerede patienter [12]. EBV har også evnen til at inficere epithelceller, og har også tumorgen virkning i disse celler, hvorfra nasopharynx karcinom er en af ​​de vigtige prototyper [13].
Den første rapport af EBV involvering i gastrisk carcinom blev offentliggjort i 1990 i lymphoepithelial carcinom i maven [14]. Derfor i 1992 Shibata og Weiss rapporterede EBV detektion i 16% af almindelig gastrisk karcinom i USA [15]. Siden da har forekomsten af ​​EBV-associeret gastrisk karcinom (EBV-GC) blevet undersøgt og rapporteret i forskellige lande som lå mellem 3 til 18% [15-34] med den laveste forekomst i Papua Ny Guinea, Pakistan og Korea, som er mellem 1 til 3% og den højeste i Tyskland og USA, som er 16 til 18%
der er mange beviser på årsagssammenhæng mellem EBV og gastrisk karcinom såsom:. monoklonalitet af vira i neoplastiske celler, som blev påvist ved unik terminal gentagelse af EBV-DNA [35]; ensartet tilstedeværelse af EBV i alle tumorceller påvist ved in situ hybridisering af EBER-1, men ikke i omgivende epitelceller [15-34] og elevation af IgG- og IgA-antistoffer mod virale capsid antigen flere måneder før klinisk præsentation af sygdommen [36 .]
EBV-GC viser nogle konstante karakteristiske clinicopathologic funktioner såsom prædisponering for øvre to tredjedele af maven [15-17, 19-31]; en moderat differentieret rørformet til dårligt differentieret solid type histologi [16-22, 32, 33]; ikke har nogen virkning i stromal invasion og overlevelse [15, 16]; og mandlig dominans i de fleste af undersøgelserne. Imidlertid er den sidste ikke set i nogle særlige undersøgelser, der udføres i Mexico [32, 37], Chile [16] og Kina [38]. Alder afhængighed er ikke indlysende i de fleste undersøgelser. Men studier i Colombia [19], og Kasakhstan [28] viser en højere prævalens blandt yngre patienter.
EBV har to store typer, type 1 og type 2, der adskiller sig i deres evne til at omdanne B-lymfocytter i en tilstand af konstant proliferation [39]. Type 1 er fremherskende i de vestlige og asiatiske lande, mens B-type er fremherskende i Afrika og ses oftere hos immunsupprimerede patienter [40, 41]. Desuden er der tre andre varianter, som udmærker sig ved restriktionsfragmentlængde-polymorfisme (RFLP) ved anvendelse af BamHI- og Xhol restriktionsendonuklease-enzymer. Ved BamHI-F region Prototype F har den verdensomspændende distribution og "f" variant, som har en ekstra site for enzym er fremherskende i det sydlige Kina og er forbundet med nasopharyngeal carcinom [42, 43]. Polymorfi i BamHI-W1 /I1 grænseområde fører til to varianter; type I og »i«. Type I, som er fremherskende i Japan og Kina har ingen site for BamHI enzym [44, 45], og skriv 'i' med en ekstra BamHI site er set mere almindeligt i de vestlige lande [46]. Endelig polymorfi i XhoI restriktionssite i Axon 1 i LMP1-genet definerer XhoI + som er mere udbredt i de vestlige lande [47] og XhoI -., Som ofte ses i Asien [44]
Iran er et af de lande, som har en høj forekomst af gastrisk karcinom med en årlig incidens på 26,1 pr 100.000 for mænd og 11,1 for kvinder. Det er den anden mest udbredte kræft og den første hyppigste årsag til kræft dødsfald blandt mænd i Iran [48]. Der er imidlertid ingen undersøgelse om forekomsten eller genotypen af ​​EBV i gastrisk cancer i dette område. Derfor besluttede vi at evaluere den i den ældste indbringelsen center for mavekræft i Iran.
Metoder
Prøver
Vi undersøgte 273 kirurgisk resektion kræfttilfælde gastrisk i denne undersøgelse. Sagerne blev tilfældigt udvalgt fra 1325 gastriske kræfttilfælde registreret i kræft institutter Teheran Universitet mellem 1969-2004, som har intakte paraffinblokke og patologiske rapporter. Formalin paraffinindlejret væv fra disse sager blev udvalgt og sendt til Kagoshima University Graduate School of Medical og Dental Sciences, Japan, for yderligere molekylære evalueringer. Patologiske data blev opnået med revurdering af H &E farvede objektglas med to patologer (AA & SGS). Alle tilgængelige demografiske data blev indhentet fra de tilgængelige patologiske og medicinske rapporter patienterne.
Patologi
Alle prøver blev omklassificeret i forbindelse med fremherskende histologiske mønster som tarm og diffus type i henhold til Lauren klassifikationen [49], og sub-klassificeret i henhold til retningslinjerne i den japanske forskning samfund for mavekræft [50] for godt differentieret rørformet adenocarcinom (tub1), moderat differentieret adenocarcinom (tub2), fast dårligt differentieret adenocarcinom (por1), ikke-fast dårligt differentieret adenocarcinom (por2 ), signetring celle karcinom (SIG), mucinøs karcinom (MUC) og dårligt differentieret lymphoepithelial-lignende carcinom (LE).
tumorer placering i henhold til fremherskende placering af læsioner blev klassificeret som øverste tredjedel eller mavemunden, midterste tredjedel eller krop og nederste tredjedel eller antrum i overensstemmelse med retningslinjerne for den japanske forskning samfund for mavekræft [50]. Der var ingen multifokal tilfældet i vores undersøgelse.
Dybden af ​​invasionen blev klassificeret som slimhinde, sub-slimhinde, muscularis propria og serøse involvering.
In situ hybridisering
EBV blev identificeret ved ekspression af EBV-kodet small RNA-1 (EBER-1). In situ-hybridisering med en komplementær digoxigenin-mærket 30 baser oligomer blev anvendt til at detektere EBER-1 ifølge den tidligere beskrevet af Chang et al [51] procedure. 4-5-um snit monteret på silan-overtrukne objektglas blev fremstillet til hvert tilfælde. Vævet på objektglassene blev deparaffineret, rehydreret, predigested med pronase, præhybridiseret og derefter hybridiseret natten over ved 37 ° C med 0,5 ng digoxigenin-mærket probe. Den hybridiseringssignal blev detekteret ved et antidigoxigenin antistof-alkalisk phosphatase-konjugat. Snit fra en patient med kendt EBER-positive gastrisk carcinom blev anvendt til en positiv kontrol, og sense probe til EBER-1 blev anvendt til en negativ kontrol for hver procedure.
Fremstilling af DNA
formalinfikseret og paraffin -embedded prøve blev skåret i 10 um tykke skiver, og DNA-prøve blev fremstillet ved at følge fremgangsmåden beskrevet af Greer et al [52] metode. Kort fortalt blev skiver behandlet med xylen og ethanol og centrifugeret ved 22.000 g i 20 minutter, og den resulterende pellet blev resuspenderet i 100 pi digestionspuffer (1 M Tris, pH 8,0, 50 mM EDTA, 0,5% Tween 20) med 200 ug /ml proteinase K og inkuberet ved 55 ° C natten over. Efter 10 min kogning ved 100 ° C, ekstraktion og udfældning af DNA blev udført med phenol-chloroform og ethanol hhv. Salg Primere og prober Salg Fire forskellige regioner, EBNA-3C, BamHI-F, BamHI-W1 /I1, og Xhol-sted i LMP1, blev anvendt til bestemmelse af virale genotyper. Tabel 1 viser en liste over primersæt og prober anvendt i den foreliggende study.Table 1 Liste over primere og prober anvendt i denne undersøgelse
Genotype
Sequence
type af sonde eller størrelse efter RE1 fordøjelse
reference
EBNA-3C
Primere
Sense
5'-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3 '
Antisense
5'-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3
Sample et al. (53)
Sonder
Type 1
5'-GAAGATTCATCGTCAGTGTC-3 '
153 BP2
Type 2
5'-CCGTGATTTCTACCGGGAGT-3'
246 bp
BamHI-F
Primere
Sense
5'-TCCCACCTGTTACCACATTC-3 '
Prototype F: 198 bp
Lung et al. (54)
Antisense
5'-GGCAATGGGACGTCTTGTAA-3 '
Variant "f": 127 + 71 bp
Probe
5'-AAGGCTACCGTGCTAATTACCTCC-3'
Hudson et al. (55)
BamHI-W1 /I1
Primere
Sense
5'-ACCTGCTACTCTTCGGAAAC-3 '
Type I: 205 bp
Lung et al. (54)
Antisense
5'-TCTGTCACAACCTCACTGTC-3 '
Skriv "i": 130 + 75 bp
XhoI websted i LMP1
Primere
Sense
5' AACAGTAGCGCCAAGAGGAG-3 '
XhoI +: 113 bp
Sandvej et al. (56)
Antisense
5'-ATGGAACACGACCTTGAGAGG-3 '
XhoI-: 67 + 46 bp
1Restriction enzym; 2Base pair Salg type 1 og 2 blev genkendt af amplifikation af U2 region af EBNA-3C gen ved primere beskrevet af Sample et al [53], hvilket gav 153 og 246-bp fragmenter hhv. De er anerkendt af Southern blot hybridisering (SBH) med typespecifikke interne prober beskrevet af Sample et al [53]. BamHI-F region blev amplificeret ved primerne sæt beskrevet af Lung et al [54]. Den deraf 198-bp fragment blev fordøjet med BamHI restriktionsenzym, som råbte en 198-bp fragment i tilfælde af vildtype F og 127-bp og 71 bp fragmenter i tilfælde af "f 'variant. Vildtype-F og F-varianter blev bekræftet ved SBH med det indre probe som beskrevet før [55]. For at skelne i /i varianter, blev BamHI-W1 /I1 region amplificeret under anvendelse af primersættet beskrevet af Lung et al [54]. Fordøjelse med BamHI restriktionsenzym råbte 205-bp fragment i type I og 130-bp og 75 bp fragmenter i tilfælde af "jeg". De blev også bekræftet af SBH med et klonet BamHI-I DNA-fragment-sonde. Analyse af polymorfi i exon 1 i LMP1-genet blev udført under anvendelse af et primersæt beskrevet af Sandvej et al [56], som resulterede 113-bp fragmenter. Efter fordøjelse med Xhol restriktionsenzym, XhoI + sager, der indeholder XhoI spaltningsstedet (XhoI holdt) viser 67-bp og 46 bp fragmenter, men XhoI - sager se originalversionen ufordøjet 113 bp PCR-produkt. Den 113 bp fragment af PCR-produkt af B95-8-cellelinje blev anvendt som probe for at bekræfte XhoI-spaltningssted af LMP1 af SBH [57].
For type 1, vildtype F, type I, og XhoI - vira B95-8-cellelinien blev anvendt som positiv kontrol. De cellelinier AG786 og Akata og det klonede BamHI-'f "og BamHI-" i "DNA-fragmenter tjente som positive kontroller for type 2, XhoI -," f "variant, og skriv" I "virus, hhv. Humant herpesvirus 6 inficeret cellelinie MOLT-4 anvendt som negativ kontrol [58].
Polymerasekædereaktion
Amplifikation af mål-DNA'er blev udført under anvendelse 2 pi DNA og blanding af 10 mM Tris-HCI, pH 8,0 , 50 mm KCI, 1,5 mM MgCl 2, 200 uM dNTP'er, 1 uM af hver primer og 1,0 U Taq Polymerase (Hot Star, Qiagen, Tyskland) i et slutvolumen på 25 pi blanding. Den anvendte protokol til amplifikation af EBNA-3C-genet var en cyklus ved 95 ° C i 15 minutter, efterfulgt af 40 cykler af denaturering ved 95 ° C i 1 min, annealing ved 46 ° C i 1 minut og forlængelse ved 72 ° C i 1 min og endelig endte med 5 minutter ved 72 ° C. Den anvendte protokol til BamHI-F, BamHI-W1 /I1 og XhoI-sted amplifikation var en cyklus ved 95 ° C i 5 minutter efterfulgt af 40 cykler af denaturering ved 95 ° C i 1 min, annealing ved 43 ° C i 1 min og forlængelse ved 72 ° C i 1 min og endelig endte med 5 minutter ved 72 ° C. Elektroforese i en 2% agarosegel og farvning med 0,5 ug /ml ethidiumbromid blev udført for at identificere de PCR-produkter.
Restriktionsfragmentlængde-polymorfisme analyse
Amplified DNA-produkter (15 pi) blev spaltet med 10 U af BamHI- eller Xhol restriktionsenzymer ifølge fabrikantens instruktioner og visualiseret ved elektroforese i en 2% agarosegel farvet med 0,5 ug /ml ethidiumbromid og overført til en nylonmembran for SBH.
Southern blot hybridisering
Specificitet af PCR reaktionen blev bekræftet ved SBH. Den elektroforetiske DNA blev overført til en Hybond N + nylon membran (Amersham, Pharmacia Biotech, UK) ved kapillær blotting under anvendelse 0,4 N NaOH-opløsning. Membraner blev præhybridiseret med hybridiseringsbuffer i 1 time ved 42 ° C. Efter tilsætning af proben, blev hybridisering udført natten over ved 42 ° C. Prober af type A og B, og BamH-I F blev mærket med Dig oligonukleotid 3'-endemærkning kit og detekteret ved Dig luminescerende detektion (Boehringer Mannheim, Tyskland). Til detektering af BamHI-fragment og Xhol polymorfi i LMP1, blev hybridisering udført under anvendelse af ECL direkte mærkning og påvisning (Amersham, Pharmacia Biotech, UK) ifølge producentens instruktioner.
Statistisk analyse
Statistisk analyse var gøres ved hjælp LogExact 7.0 software (en statistisk pakke til regression procedure featuring nøjagtige metode); Cytel Studio 7.0.0 pakke (Cytel Software Corporation, 2005). Præcis test af binær logistisk analyse blev udført for at sammenligne andelen af ​​EBV positive tilfælde blandt gastrisk adenocarcinom. Sex, aldersgrupper (< 50, 50-69 og ≥ 70 år), anatomiske placering af tumor (antrum, krop og mavemunden), invasion af tumor (serosa, andre) og Laurens histologisk klassifikation blev inkluderet som uafhængige variable. Multinominal variabler blev delt til n-1
dummy binominal variabler (n
var antallet af kategorier). Odds ratio med 95% konfidensinterval blev beregnet for hver kategori. Type 1 fejl (α) blev sat til 0,05. Alle p-værdier var tosidet.
Resultater
Vi undersøgte 273 gastrisk kræft, herunder 196 (72%) mænd og 77 (28%) kvinder. Gennemsnitsalderen var 57,3 ± 11,3 (SD) år (interval: 24-90; median: 58). De fleste af dem (108 sager, 66%) var mellem 50 til 69 år, 54 (20%) tilfælde var under 50, og de resterende var over 70 år. Et hundrede tredive sager (48%) var placeret i antrum, og 64 (23%) og 71 (26%) tilfælde var placeret i kroppen og Cardia, hhv. I 5 tilfælde blev placeringen ikke defineret, og i 3 tilfælde hele mavens væg var involveret (linitis plastica), som ikke indgik i den statistiske analyse. Som vist i tabel 2 er de fleste af tilfældene var intestinal type (56%). Tabel 2 Fordeling af Eber-1-positive gastriske carcinomer ved histologisk type og køn
Histology1

Male
Female
Total

EBER + /N2 (%)
EBER + /N (%)
EBER + /N (%)
Intestinal
1/113 (1)
0/39 (0)
1/152 (1)
pap
0/11 (0)
0/3 (0)
0/14 (0)
tub1
0/36 (0)
0/11 (0)
0/47 (0)
tub2
1/50 (2)
0/16 (0)
1/66 (1)
muc
0/16 ( 0)
0/9 (0)
0/25 (0)
Diffus
7/83 (8)
1/38 (3)
8/121 (7 )
por1
3/34 (8)
1/16 (6)
4/50 (8)
por2
4/40 (10)
0 /18 (0)
4/58 (8)
SIG
0/9 (0)
0/4 (0)
0/13 (0)
en pap: papillær adenocarcinom; tub1: godt differentieret rørformet adenocarcinom; tub2: moderat differentieret adenocarcinom; por1: solid dårligt differentieret adenocarcinom; por2: ikke-solid dårligt differentieret adenocarcinom; SIG: signetring celle karcinom; muc: mucinøs carcinoma; 2 samlede antal sager i hver gruppe (Baseret på japansk forskning samfund for mavekræft)
Forekomst af EBV positive tilfælde
EBER-1 blev påvist i ni ud af 273 tilfælde (3%), der blev betragtet som EBV GC. Signalet var begrænset kun til kernerne i tumorceller, men ikke i ikke-tumorceller (fig. 1). Figur 1 Et tilfælde af EBV positive gasrtric carcinom. Moderat differentieret adenocarcinom rørformet med lejlighedsvis tubul formation (A); nukleare EBER positivt signal i alle tumorceller detekteret med in situ hybridisering (B).
Faktorer forbundet med EBV positive tilfælde
Tabel 3 viser frekvenserne af EBV-GC efter alder, køn, placering, histologi og invasion samt som følge af logistiske analysis.Table 3 resultat af logistisk analyse
Variabler
EBER + /N1
(%)
OR2
95% CI2
Køn
Kvindelige
1/76
(1)
1
henvisning
Mand
8/188
(4)
0,3
0,01-2,96
P
= 0,595
Age
≥ 70
1/36
(3)
1
henvisning
50-69
5/180 Hotel (3)
0,8
0,08-44,62
< 50
3 /54 Hotel (6)
1,3
0,08-81,25
P
for trend = 1,0
Beliggenhed
Øvre
1/71
(1)
1
henvisning
Mellemøsten
5/64 Hotel (8)
6,0
,1-77,86
Lavere
3/130
(2)
1.4
0,63-296,7
P
for heterogenitet = 1,64
Histologi
Diffuse
8/121 Hotel (7)
1
henvisning
Intestinal
1/152
(1)
0,08
0,002-0,64
P
= 0,009
invasion
muskel
3/33
( 9)
1
henvisning
serose
6/222 Hotel (3)
3,6
0,47-24,03
P
= 0,243
1Total nummer i hver gruppe; 2or og 95% konfidensinterval blev opnået fra eksakte test af binær logistisk analyse.
Køn og alder
Otte ud af 188 (4%) mandlige sager og en ud af 76 (1%) kvindelige tilfælde var EBV positive. Selv om der var en mandlig overvægt i denne undersøgelse, var det ikke statistisk signifikant (p
= 0,5). Der var også nogen relation mellem alder og EBV-GC (p
= 1).
Tumor placering
Ifølge anatomiske placering, 5 ud af 64 (8%) organ tumorer, 1 af 71 (1 %) Hjerte tumorer og 3 ud af 130 (2%) antral tumorer blev EBV forbundet. Selv om de fleste af EBV-GC var placeret i øverste to tredjedele, det var ikke signifikant statistisk (p
= 0,1).
Histologisk type,
Baseret på Laurens klassificering, 8 ud af 121 (7%) diffus typen tilfælde var EBV associerede men kun 1 ud af 152 intestinal type var EBV positiv, hvilket var statistisk signifikant (p
= 0,009). Ifølge japansk klassificering, por2 og por1 blev de fremherskende histologiske typer i EBV-GC (Tabel 2), men med hensyn til det lave antal sager i hver gruppe kunne ikke udføres statistisk analyse.
Invasion
I denne undersøgelse er der var kun to sager, der blev begrænset til submucosa og ingen af ​​dem viser EBER-1 signal i ISH. Således overvejer af det lave antal, disse sager blev ikke behandlet i statistisk analyse. Der var ingen forskel mellem EBV positive og negative sager om invasion til serosa og muscularis propria (p
= 0,24).
Andre fund
bemærkelsesværdigt punkt i vores undersøgelse var, at 6 ud af 9 EBV GCS patienter blev født mellem "1928-1930". Imidlertid blev den statistiske analyse ikke foretaget på grund af det lave antal.
Genotypebestemmelse
undertype af EBV-genomet blev bestemt i alle 9 tilfælde. Alle vores tilfælde var type 1. BamHI-F region blev forstærket med succes i 8 ud af 9 af EBV-GCS, som seks af dem viste prototype F (fig. 2). Forstærkning af BamHI-I /WI1 lykkedes i alle tilfælde og, undtagen én; alle tilfælde var "i" type (fig. 3). Analyse af polymorfi i exon 1 af LMP1-gen viste, at 3 sager var XhoI - og 6 tilfælde var XhoI + (Fig 4). Tabel 4 opsummeret alle de demografiske, patologiske og genotypiske data for EBV-GC i dette study.Table 4 klinisk-patologiske og genetiske karakteristika EBV-GC

Født år
diagnostisk år
Age
Køn
lacation
invasion
Histologi Lauren /WHO
EBNA-3 type A /B
BamHI-F type F /"f"
BamHI-jeg skriver I /"i"
XhoI +/-

1
1949
1981
32
Male
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
2
1929
1982
53
Male
Middle
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
3
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Intestinal/tub2
A
F
"i"
+
4
1928
1983
55
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
F
I
+
5
1940
1983
43
Female
Lower
Muscle
Diffuse/por1
A
F
"i"
-
6
1930
1986
56
Male
Middle
Serosa
Diffuse/por2
A
ND1
"i"
+
7
1928
1988
60
Male
Upper
Serosa
Diffuse/por1
A
F
"i"
+
8
1928
2001
73
Male
Middle
Serosa
Difuse/por2
A
"f'
"i"
-
9
1953
2002
49
Male
Lower
Seroasa
Diffuse/por2
A
"f"
"i"
+
1Not bestemt; tub2: moderat differentieret adenocarcinom por1: solid dårligt differentieret adenocarcinom; por2: ikke-solid dårligt differentieret adenocarcinom
Figur 2 Resultat af Southern blot hybridisering for BamHI-F region. Fire prøver ses i denne figur, blev hver prøve indlæst i 2 baner med og uden enzym, henholdsvis fra starter. Den første prøve blev ikke amplificeret i dette eksperiment. De andre tre prøver blev ikke spaltet af Bam-HI enzym, der betyder, at de er vildtype F. (+: positiv kontrol; + /Enz: positiv kontrol med enzym -: negativ kontrol).
Figur 3 Resultat af det sydlige blot hybridisering for BamHI-W1 /I1 region. Hver prøve blev påsat i 2 baner med og uden enzym, henholdsvis fra starter. I prøve en der er ingen bånd i den anden vognbane, som tyder på, at PCR-produktet blev fordøjet, men vi kunne ikke finde de fragmenterede bands siden den oprindelige band indeholdt lille antal DNA-kopier, så vi betragtet det som type "i". Prøverne 2, 5 og 6 spaltes hvilket betyder, at de er af type "i". Polymorfi af prøver 3 og 4 blev ikke bestemt i dette eksperiment. (+: Positiv kontrol; + /Enz: positiv kontrol med enzym; -: negativ kontrol).
Figur 4 Resultat af Xhol polymorfi i Southern blot-hybridisering. Hver prøve blev påsat i 2 baner med og uden enzym henholdsvis fra starter. Den første og den anden prøver spaltes med enzym, som betyder, at de er XhoI +. Den tredje er XhoI-. (+: Positiv kontrol; + /Enz: positiv kontrol med enzym; -: negativ kontrol).
Diskussion
foreliggende undersøgelse detekteret EBV-GC'er i 3% af gastriske carcinomer og foreslog, at størstedelen af ​​gastriske carcinomer i Iran er EBV-negative. Der var ingen LELCs, som er kendt for at være stærkt forbundet med EBV [59]. Hulmønster, som er en unik morfologi i EBV-positiv tidlig gastrisk karcinom [60], blev ikke set i vores undersøgelse. Denne frekvens er blandt de laveste frekvenser i verden. Som nævnt ovenfor ifølge WHO klassifikation, er den nordlige del af Irans betragtes som en af ​​de regioner med høj gastrisk karcinom frekvens i verden [61]. De sparsomme studier i Iran viser også dette faktum, bortset fra at de viser mere eller mindre homogenitet i hele landet [48, 62, 63]. Således er den lave EBV-GC frekvens i Iran støtter den tidligere hypotese, at høj risiko lande for GC har lave EBV-GC [64]. Dette bekræfter også den tro, at det er lavt i Asien som forekomsten af ​​3% i Korea [25], 6% i Japan [24], 6% i Kina [26], 5% i Indien [18], 2% i Pakistan [29] og maksimal 10% i Malaysia [27], Taiwan [21] og Kasakhstan [28]. Dette er imidlertid meget lavere end Kasakhstan frekvens, (vores nærliggende land) med mange ligheder i de brugerdefinerede og socioøkonomiske forhold.
Forekomsten af ​​EBV-GC i diffust typen gastrisk karcinom var mere i vores undersøgelse, hvilket blev set i de fleste studier af Latinamerika [16, 32], og nogle lande i Asien som Korea [25], Kina [26] og Indien [18]. Men der er mange modstridende undersøgelser, der ikke udviste nogen sammenhæng i dette koncept [15, 17, 19, 23, 33]. Koriyama et al [23] i deres klassiske undersøgelse foreslog, at der er mange andre faktorer, der har indflydelse på forekomsten af ​​diffuse form mavekræft såsom alder, køn og placering og de modstridende resultater i forskellige undersøgelser kunne forklares ved forskellen i fordelingen af disse faktorer.
Selvom forholdet mellem mand /kvinde var ca. 4 i vores undersøgelse, var det ikke signifikant i statistisk analyse. Fraværet af præference køn blev set i andre undersøgelser i Mexico [32, 37] Chile [16] og et område i Kina [38]. Dog bør vi overveje, at det lave antal af positive tilfælde i vores undersøgelse kan være årsagen til ubetydelige resultat i analysen. I mellemtiden, Koriyama et al [23] viser, at præference køn for EBV er begrænset til diffus typen GC og ses ikke i tarm type. Ikke desto mindre, om det lave antal af vores sager, vi kunne ikke foretage analysen særskilt for hver type.
Stigning i kræft i øvre del af maven på trods af faldet i den samlede forekomst af gastrisk kræft ses i mange undersøgelser rundt omkring i verden [ ,,,0],65, 66]. Der er også mange beviser, at denne form for mavekræft har forskellige risikofaktorer [67-69]. EBV er en af ​​dem [15-31]. Abdirad et al [70] viser også, at der er en sådan stigning i kræft i øverste tredjedel af maven i Iran. Men på trods af vores forventning, denne undersøgelse viste ingen præference af EBV for øvre eller midterste tredjedel af maven. Det er vigtigt at bemærke, at på trods af mange bekræftende studier i denne sammenhæng, er der også en sådan forbindelse i vores nærliggende lande, dvs. Kasakhstan [28] og Indien [18].
EBV i vores undersøgelse viste ingen relation med alderen og dybden af ​​invasion. Nogle undersøgelser viser, at der er tendens til EBV-GC at forekomme i lavere alder [19, 26, 33, 38]. Men Koriyama et al [23] viste, at kun intestinal type EBV-GC viser denne præference alder, og foreslog, at forskellen i alder af udsættelse for specifikke cofaktorer for hver af disse typer er den sandsynlige årsag.
En af de interessante resultaterne af den foreliggende undersøgelse er, at 6 ud af vores 9 EBV-GC sager, der blev udvalgt tilfældigt, blev født i perioden mellem 1928 og 1930. Selvom vi ikke kunne udføre nogen analyse i forbindelse med det lave antal af positive tilfælde, dette fund synes vigtigt, da en epidemiologisk undersøgelse foreslået, at EBV infektion på den tidlige barndom kan være relateret til udvikling af EBV-GC i voksenalderen [71]. Selvom vi har ingen beviser, kunne nogle hypotese overvejes. For eksempel, særlige betingelser eller begivenheder, der fører til EBV infektion i den tidlige barndom eller af at være udsat for nogle specifikke co-risikofaktorer, som kan have eksisteret omkring slutningen af ​​1920'erne. Derfor foreslår vi en sag kontrol undersøgelse med fokus på gastrisk karcinom hos patienter, der er født omkring slutningen af ​​1920'erne for at sammenligne forekomsten af ​​EBV hos disse patienter med de andre.
Genotypebestemmelse af viruset afslørede, at type 1 er den eksklusive typen i alle vores EBV-GC. Overvægten af ​​type 1 er i overensstemmelse med andre undersøgelser [18, 45, 58, 40]. Type 2 er det meste ses i Afrika [40], og der er en tro på, at det er svagere end type 2 og er mest hos immundefekte patienter [40, 72]. Prototypen F ved BamHI-F var den mest almindelige type i denne undersøgelse. Denne type har en verdensomspændende distribution, undtagen i det sydlige Kina, som "f" variant er fremherskende og forårsager nasopharyngeal carcinom [43, 45]. Vores konklusion er den samme som tilsvarende undersøgelser i gastrisk kræft i Indien [18], Japan [73], og Chile [58]. BamHI-W1 /I1 region polymorfi analyse viser, at 90% af vores sager var typen "i". Tidligere undersøgelser har vist, at type I er den mest udbredte i Asien [45, 54], og skriv "jeg" er den mest i de vestlige lande [46]. Dette mønster af fordeling var blevet også set i lignende undersøgelser på EBV-GC [18, 45, 73]. vores fund synes imidlertid at være magen til de vestlige lande som Corvalan fund i Colombia og Chile [58].

• Laparoskopisk versus åben resektion for gastriske gastrointestinale stromale tumorer: en opdateret systematisk gennemgang og meta-analyse
• En mulig involvering af Nrf2-medieret hem oxygenase-1 opregulering i beskyttende virkning af protonpumpeinhibitoren pantoprazol mod indomethacin-induceret gastrisk beskadigelse hos rotter