Učinki myenteric denervacijo na zunajcelične matrike vlaken in distribucijo mastocitov v normalnem želodcu in želodčnih lesions

učinkih myenteric denervacijo na zunajcelične matrike vlaken in distribucijo mastocitov v normalnem želodcu in želodčnih lezij
Abstract
Ozadje
V tej študiji učinek myenteric denervacije z benzalkonijev klorid (BAC) inducirane o porazdelitvi fibrilarnega komponent ekstracelularnega matriksa (ECM) in vnetnih celicah smo raziskali v želodčnem karcinogeneze z N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) inducirane. Podgane so bile razdeljene v štiri poskusne skupine: non-denervirati (I) in denervirati želodcem (II), brez zdravljenja MNNG; nenamenski denervirati (III) in denervirati želodcev (IV) obdelamo z MNNG. Za histopatološko, istocasnem in stereoloških analize so odseki želodčnih fragmentov barvanega z Hematoxylin-eozin, Picrosirius-Hematoxylin, Gomori retikulinu, Weigert je resorcin-fuksina, toluidinska Blue in Alcian-Blue /safraninom (AB-SV).
Rezultati
BAC denervacijo povzroča povečanje pogostosti reticular in elastičnih vlaken v denervirati (skupina II) v primerjavi z ne-denerviranih želodcev (skupina I). Zdravljenje živali z MNNG povzroča razvoj adenokarcinoma v non-denerviranih in denerviranih želodcem (skupine III in IV, v tem zaporedju) z opazno povečanje relativnega obsega strome, pogostost reticular vlaken in vnetni infiltrat, ki je bil bolj intenzivno v skupino IV. so opazili povečanje pogostnosti elastičnih vlaken v adenokarcinomov od denervirati (skupine IV), v primerjavi z ne-denerviranih želodcev (skupina III), ki so pokazali, degradacijo teh vlaken. Razvoj lezije (skupine III in IV) je povezanih tudi s povečanjem prebivalstva mastocitov, zlasti AB in AB-SV pozitivi, slednji predvsem v denerviranega skupine IV.
Sklepi
Rezultati kažejo močna povezava v morfoloških sprememb komponent fibrilarnega ECM, večjo gostoto mastocitov in razvoj tumorjev, ki jih MNNG induciranih v ne-denerviranega rat želodcu ali denervirati s BAC. To kaže, da študija zunajceličnih in znotrajceličnih komponent tumorskega mikrookolja prispeva k razumevanju tumorske biologije z delovanjem myenteric denervacijo.
Ozadju
Interakcija med tumorskih celic in bližnjemu strome je eden od ključnih vidikov mehanizma celično proliferacijo tumorja in invazija [1]. Tumorske celice storiti preoblikovanje zunajceličnega matriksa (ECM), kompleksno mešanico vlaken (kolagen, reticular in elastična) in zmlete snovi, ki zagotavlja podporo celic [2], da se olajša komunikacijo in uhajanje nadzora, ki ga mikrookolja [3]. Sistem kolagena fibrilarnega deluje kot podporni okvir tkiv, kjer reticular vlakna povezujejo kolagenska vlakna v bazalnih lamin epitelnih, mišičnih in maščobnih celic; sistem microfibril-elastin igra vlogo pri enakomerno porazdelitev obremenitve, da se ohrani odpornost na zahteve lokalnih tkiva [4].
strukturne in funkcionalne celovitosti sistemov kolagen fibrilarnega in microfibril-elastina so pomembni za želodec za pakiranje hrane, izločati encime in kislin za prekinitev surove hranila in prenos zmesi v tankem črevesu. Te tri naloge so odvisne od eksogene (simpatičnega in parasimpatičnega oddelki avtonomne živčnega sistema) in notranjo inervacije (enteralne živčni sistem - ENS). Glavne sestavine VSD sta dve omrežji ali pleksusi nevronov in živčnih vlaknih myenteric in Submukozno pleksus [5]. VSD pomen za urejanje funkcij prebavil je opaziti po nanosu kationske površinsko aktivne snovi, benzalkonijev klorid (BAC), na seroznega plast, ki ima za posledico delno in selektivno uničenje myenteric pleteža nevronov [6]. Korelacija med kancerogenosti in VSD je bila dokazana na poskusnih modelih z myenteric denervacija z BAC in indukcijo tumorjev z N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) [7] in 1,2-dimetilhidazinom ( DMH) [8], z zmanjšanjem pojavnosti in velikosti gastrointestinalnih tumorjev.
imunske celice so močni viri parakrin signalov VSD. Še posebej so gastrorezistentne mastociti strateško pomembno lego in ima močne farmakološke posrednike, ki delujejo v obraz imunoloških dražljaji, ki lahko vplivajo na celovitost trakta prebavil [9]. Protitelo veže na jambor celice, zaradi česar so sposobni prepoznati specifične antigene in kažejo svojo prisotnost na VSD. ENS, po drugi strani, interpretira kemične signale mastocitov kot grožnjo in si prizadeva za odpravo nepravilnosti, kar zagotavlja zaščitni odziv [9]. Prisotnost mastocitov je opisana v več neoplazij, s pro ali anti-tumorskih vloge njihovih bioaktivnih mediatorji z vplivom mikrookolja tumorja [10-12] sproščene igre. Delovanje pro-tumorskih mediatorjev, kot so histamin, triptazo in kimaze lahko spodbujajo migracije in proliferacije celic, ki inducira izražanje adhezijskih molekul na endotelijskih celicah in s tem aktivira proces tumorsko angiogenezo, metastaz in širjenja [13-15]. Po drugi strani pa lahko nekatere citokine, kot interlevkin (IL) -2 in -21, tumor nekrotizirajočega faktorja (TNF) in heparina z mastociti sproščajo, delujejo kot sredstva proti raku, ki ga inhibiranje njihove rasti [16, 17].
številne študije so pokazale, da je med karcinogenezo povečanje števila mastocitov, opazili neurofibromas, lipomov, hemangiomov, tumorjev nadledvične žleze in kožo [18], ploščatocelični karcinomih [19], grla skvamoznih celic [20] in želodčni karcinomi [21]. V želodčnih adenokarcinomov, je majhna sproščanjem vsebine, shranjene v citoplazme granul mastocitov povezana s spremembami v mikrovaskularno bazalnih lamin, vključno z nepravilno debeline več plasti in šibke povezave z endotelijskih celic in pericytes ki prispevajo k preoblikovanju krvnih žil [22]. Po kirurški odstranitvi raka želodca, študije za preživetje je pokazala, da pri bolnikih s povečanim številom mastocitov pokazala slabšo prognozo primerjavi z bolniki z majhnim številom njih.
Namen raziskave je bil ugotoviti učinke kemične ablacijo myenteric nevroni o razdelitvi zunajcelične matrice vlaken in mastociti v želodčni sluznici, ki niso denerviranih in denerviranih želodci, in v modelu želodca kancerogenosti s MNNG uprave inducirane pri podganah.
Material in metode
Eksperimentalni načrt
bile ocenjene štiri eksperimentalne skupine. Skupine I (n = 5) in II (n = 5) non-denervirati in denervirati zaporedju, brez prisotnosti želodčnih novotvorbe; skupine III (n = 10) in IV (n = 10) niso denervirati in denervirati, oziroma s prisotnostjo želodčnih neoplazem. Fragmenti pilorično regiji (antruma) v želodcu, ki se uporablja v tej študiji so bili pridobljeni iz preiskav, ki jih Polli-LOPES et al. [7]. Eksperimentalni postopki so bili izvedeni v skladu s pravili Odbora za nego in Uporabe laboratorijskih živali Nacionalnega raziskovalnega sveta N.I.H. (ZDA) in Odbor za etiko pri poskusih na živalih (CEEA) od FAMERP (Protokol št 6193/2008), São José do Rio Preto, SP.
Živali
Moški Wistar
podgane tehtanje 100 na 150 g, pridobljen iz objekta živali v School of Medicine v Ribeirão Preto, Brazilija, so bile nastanjene (4 živali na kletko), pri temperaturah med 23 do 25 ° C, in prejeli hrano in vodo ad libitum
.
želodca denervacija
živali smo anestezirali im z ketamin hidroklorida in tiazin klorid (0,15 ml /0,05 ml /100 g telesne mase) [23]. Želodec vsake živali smo exteriorized prek središčne zgornjo laparotomijo trebuhu in izoliramo iz trebušne votline skozi majhno fenestracijo plastično folijo za temo uporabo 0,6% BAC (v /v) (Aldrich Chemical Co. razredčimo v fiziološki raztopini (0,9% NaCl) [7, 24]. izolirane želodcev ovijemo z gazo, namočeno v BAC ali slanice in hrani vlažen 30 minut [6, 7, 24]. bil serozne površina želodcev temeljito speremo s slanico, vrnilo orgle njihovo anatomsko mesto in trebušno steno je zašite. živali smo vzdrževali v plastične kletke (4 živali /kletke) pod nadzorovano temperaturo in prejeli hrano in vodo ad libitum
.
Indukcija neoplazij v želodcu antruma sluznici
Šestnajst tedne po operaciji, živali skupin III (non-denervirati) in IV (denervirati) zaužije raztopino N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) (Aldrich Chemical Co., Inc., Milwaukee, WI) raztopimo v destilirani in deionizirano vodo v koncentraciji 100 mg /L za 28 tednov. Živali so bile žrtvovane 2 meseca po zadnjem vnosu MNNG in želodci so bili zbrani za morfološko analizo.
Morfološke in kvantitativna analiza
ekstracelularnega matriksa vlaken
so osnovna Fragmenti o pilorusa predelu želodca (antruma) v 4% buffered formalin za 12 ur, speremo z vodo iz pipe, dehidrirano v etanolu zaporedno in vdelali v parafin. Za zunajcelični študije matrike, so odseki 4 m, debele obarvali z Hematoxylin-eozin [25], Picrosirius-Hematoxylin [26] in Gomori retikulinu [27] za histopatološko analizo, ter kolagena in reticular vlaken evalvacijo. Vlakna iz elastičnega sistema so preučevali s pomočjo [28] Weigert je resorcin-fuksina ki selektivno madeže tako elastična in elaunin vlaken (za oxytalan vlakna ostanejo neobarvano ker niso prej oksidira v tej študiji). Osebki so bili analizirani z Olympus BX60 svetlobnim mikroskopom (Olympus, Hamburg, Nemčija) in mikroskopskih polj so bile digitalizirane z uporabo Image-Pro Plus različice 4.5 za programsko opremo Windows (Media Kibernetika, Silver Springs, MD). Pet naključnih področja želodčne sluznice smo analizirali z uporabo × 20 cilj, in umerjanje je bilo izvedeno z Olympus ocenjena mikroskopsko stekelce. Kvantitativna analiza je bila določena v skladu s postopkom za Weibel [29], testni grid sistem s 168 točkami in 84 testnih linij, za primerjavo relativnega volumna (odstotek) želodčne sluznice predelkov (epitelijskega, strome in drugih oddelkov S, razen epitelij in STROMA) za Hematoxylin-eozin barvanjem in relativne pogostosti reticular in distribucije elastična vlakna (odstotne) za Gomori retikulinu in Weigert je resorcin- fuksina barvanjem oz. Vrednosti so navedene kot povprečje ± SEM relativnega volumna (odstotek) od želodca oddelkov sluznice in pomeni ± SEM relativne pogostosti reticular in distribucije elastična vlakna (odstotek).
Mast celice
Analiza mastocitov v želodcu antruma je bila izvedena v oddelkih obarvanih z toluidinska Blue 0,5% za kvantifikacijo nepoškodovanih in degranulated celic in s Alcian-Blue-safraninom (AB-SV) za kvantifikacijo sluznico in vezivnega tkiva mastocitov [30, 31]. V ta namen so bili analizirani šestdeset naključno območja želodčne sluznice, na žival, s Olympus svetlobnim mikroskopom (Olympus, Hamburg, Nemčija) z uporabo x 12,5 /16 milimetra očesni in cilj je x 40 moči (Zeiss, Nemčija) . Vrednosti so navedene kot povprečje ± SEM števila celic na mm 2.
Statistična analiza
Podatke smo analizirali z statistica 6.0 software (StarSoft, Inc., Tulsa, OK). Podatki so predstavljeni kot povprečje ± SEM in so bili predloženi na test t
Študentske in enosmerno analizo variance (ANOVA), nato pa do testa Tukey-Kramer multiple primerjave ali Bonferroni. Razlike pri vrednosti P
< 0.05 so bile upoštevane statistično značilne.
Rezultati
Histopatološka in histokemična analiza podganjih želodcev
Sprva smo proučevali pilorično fragmenti niso denerviranih in denerviranih želodcev po benzalkonijev klorid (BAC) (skupine I in II, v tem zaporedju) . Analiza fragmentov skupine II so pokazale, da myenteric denervacije ni spremenila količino in distribucijo mrežaste kolagenskih vlaken, ki obkrožajo pilorusa žleze v primerjavi s skupino I (sl. 1A in 1B). Ta rezultat je potrdil Picrosirius-Hematoxylin madež (sl. 1E in 1F) in kvantitativno analizo relativnega volumna epitelija in strome iz želodčne sluznice od obeh skupin (sl. 1i in 1j). Slika 1 histološko analizo podganjih želodcev. A, B, E in F)
pilorusa želodca žleze (g) obdane z strome s kolagenskih vlaken (s) opazili pri sluznice plasti skupin I in II. Epitela (ep). Želodčne jame (f). Muscularis sluznice (m). C, D, G in H)
pilorusa želodca žleze (g), ki ga tumorskih celic so predstavljali zasedli največjo površino želodčne sluznice skupin III in IV. Kopičenje PMN (puščice), so opazili v žlez. Hematoksilin-Eozin (A-D); Picrosirius-Hematoxylin (E-H). Bari: 20 um. I-L
) tkiva predelkov (epitela strome drugi) količine želodčne pilorično sluznice. Vrednosti so izražene kot povprečje ± SEM za odstotek relativnega obsega. Skupine brez poškodb (I in II) je predstavil visoko relativno količino epitelij (p < 0,05) v primerjavi s skupinami z lezij (III in IV). Prisotnost adenokarcinoma v skupinah III in IV je povzročilo znatno povečanje (p < 0,05). Od strome primerjavi skupinah I in II
Non-denervirati in denervirati želodci, zdravljenih z MNNG (skupine III in IV, v tem zaporedju) predstavljeni spremembe tkiva arhitekturi in razporeditev vlaken iz zunajceličnem matriksu in povečanje premera pilorusa žlez kot tudi v relativni volumen strome (sl. 1C, D, G in 1H). Zdravljenje z MNNG povzroča razvoj benignih in malignih tumorjev, zlasti adenomatoznih polipov in adenokarcinome (sl. 1C in 1G) v non-denerviranih želodcev (skupina III). Živali z denerviranih želodcev in zdravljenih z MNNG (skupina IV) razvila predrakavih sprememb in malignih tumorjev je značilna displazije, atrofični gastritis in adenokarcinom (sl. 1D in 1H). V obeh skupinah so strome iz adenokarcinomov obogaten s prisotnostjo vnetnih celic, kot mastocitov, nevtrofilcev, plazemskih celic in limfocite, ki prikazuje imunološki odziv neoplazij (sl. 2). Vendar pa so neoplastične lezije skupine IV manjših in manj agresivne profilov v primerjavi s skupino III, in vnetna infiltrat lokalizirana v strome tumorja je bil bolj intenzivno, zlasti pri živalih, ki so razvili adenokarcinomov (sl. 2D). Slika 2 histološke analize adenokarcinoma z obdelavo MNNG inducirane. A in B)
Morfološka pogled adenokarcinomom (AD) v ne-denervirati (skupina III) in denerviranega trebuhu (skupina IV). Mišična plast (M). Intense vnetni infiltrat (V). C in D)
Detajl vnetni infiltrat tumorske strome s mastociti (črni puščici), nevtrofilci (puščice), limfocitov (zelene puščice) in plazemskih celic (rdeče puščice) ustanovljene. Toluidinska Blue. Bari:. 100 mikrometrov (. Slika A in B), 10 mikrometrov (. Slika C in D)
histokemičnih analizo pilorično oddelkov je bila izvedena z Gomori retikulinu in Weigert je resorcin-fuksina obarvanje preučiti porazdelitev ( frekvenca) za reticular in elastičnih vlaken v strome oz. Oddelki, predloženi obeh metod je pokazala podobno porazdelitev mrežaste vlaken, ki obkrožajo pilorično žleze v želodcih iz skupin I in II (sl. 3A, B, E in 3F). Non-denervirati ali denervirati želodci, zdravljenih z MNNG (skupine III in IV, v tem zaporedju), očitno je predstavil večjo količino reticular vlaken (sl. 3C in 3D) ter debele in kratkih elastičnih vlaken zelo neorganizirano (sl. 3G in 3H) v adenokarcinomov v primerjavi z njihovimi skupine za nadzor (skupin I in II, v tem zaporedju). Slika 3 histokemičnih analiza reticular (A-D) in elastična vlakna (E-H) v podgan želodcev. A in B)
skupin I in II predstavil reticular vlakna premočrtna in usklajena (puščice), ki obdaja epitelij (EP) in strome (e). C in D)
reticular vlaken (puščica) za navijanje in očitno najgostejše na dnu (puščice) žlez (g). Opazili so kolagenska vlakna akumulacija med žlez (*). E in F)
so žleze spremlja občutljivo mrežo elastičnih vlaken (puščica) in bolj intenzivno označenih E. G in H)
An povečanje debeline teh vlaken, motnje in razdrobljenost fibrilarnega spremenljivk mogoče opaziti združene mase elastina (puščice) okoli žlez (g) v primerjavi z njihovimi skupine nadzora (I in II). Gomori srebro (A-D); Weigert je resorcin-fuksina (E-H). Bari:. 10 mikrometrov
kvantitativno analizo reticular vlaken potrdili povečanje tega zunajcelične komponente v adenokarcinoma opazovanih v skupinah III in IV, in je tudi pokazala nepričakovano znatno povečanje sluznici denerviranega želodca (skupina II ) v primerjavi s skupino I (tabela 1). Kljub navidezni povečanje elastičnih vlaken v strome ne-denerviranih in denerviranih živalih, zdravljenih z MNNG (skupine III in IV, v tem zaporedju), ni bilo statistično značilne razlike opazili njihovo distribucijo v primerjavi s kontrolnimi skupinami (I in II) (tabela 1) . Po drugi strani pa myenteric denervacijo povzroča znatno povečanje elastičnih vlaken želodca strome iz skupine II in IV v primerjavi z ne-denerviranih želodcev iz skupin I in III (tabela 1). Ni pomembna razlika je bila ugotovljena v kolagena in elastičnih porazdelitve vlaken med non-malignih in malignih lezij stromas iz skupine III in IV.Table 1 stereoloških vrednotenje učinkov myenteric denervacijo v želodcu antruma.

Relativna porazdelitev pogostnosti vlaken (%) 1
Skupine
Kolagen sistem
Elastic sistem
I
16,87 ± 0,5
13,27 ± 0,5
II
24,06 ± 1,5 *
19,4 ± 0,6 *
III - NT
21,8 ± 0,9
11,2 ± 0,6
III - MT
25,71 ± 0,5 *
11,1 ± 0,4
IV - NT
21,2 ± 1,6
20,2 ± 1,7 &
IV - MT
26,87 ± 1,5 *
19 ± 0,7 &
histološki priprava je bila izvedena, kot je opisano v Materiali in metode
. Vrednosti so izraženi kot povprečje ± SEM od odstotku relativne pogostosti vlaken. Non-maligno tumor (NT); maligno tumorja (MT). 1 Statistična analiza, ki temelji na ANOVA sledi popravek Tukey-Kramer. * P < 0.05 vs. skupini I; &Amp; P < 0,05 vs skupine III.
Količinska mastocitov v fragmentov pilorusa območju želodca
mastocitov so bili analizirani in izmerjenih v sluznico, Submukozno in mišične plasti v vseh poskusnih skupinah. Analiza celotnega števila celic na želodcu fragmenta ni pokazala pomembne razlike med ne-denervirati (I) in denervirati (II) skupine (sl. 4A). Vendar pa je v ne-denerviranih ali denerviranih skupin, ki so se zdravili z MNNG (III in IV, v tem zaporedju), razvoj benignih ali malignih lezij je bila povezana z znatnim povečanjem števila mastocitov v želodcu antruma v primerjavi z ne-denerviranega skupine (JAZ). V sluznice in Submukozno plasti, znatno povečanje mastocitov v non-denerviranih ali denerviranih skupinah, zdravljenih z MNNG, (III in IV) je bilo povezano s povečanjem nepoškodovanih in degranulated celic (sl. 4B). V mišične plasti, je to povečanje v glavnem povezan z velikim številom nepoškodovanih mastocitov (sl. 4C). Slika 4 kvantitativno analizo mastocitov v želodcu. Podatki predstavljajo povprečje ± S.E.M šestdesetih področjih analiziranih na žival, kot je opisano v Materiali in metode. Non-denervirati (I) in denervirati želodcu (II) brez poškodb. Non-denervirati (III) in denervirati želodcu (IV) s poškodbami. Non-maligni tumor (NT). Maligni tumor (MT). A)
Skupno število mastocitov v želodcu fragmenta. * P < 0.05 vs. skupini I. # P < 0.01 vs. še eksperimentalne skupine. B in C)
nedotaknjena in degranulated mastocitov v sluznico, Submukozno in mišične plasti. * P < 0.05 vs. skupini I; #P ≪ 0,05 vs. še eksperimentalne skupine; δ P < 0.05 vs. skupina III - NT (nepoškodovane mastociti); &Amp; P < 0.05 vs. skupine III - NT (degranulated mastociti). C)
nedotaknjena in degranulated mastocitov v mišičnem sloju. * P < 0.05 vs. skupini I; # P < 0.05 vs. skupini II.
Fenotipske analize jambora celic
Za fenotipske karakterizacije mastocitov je bila uporabljena metoda Alcian Blue-safraninom (AB-SV). Pri živalih, ki niso denervirati (I) in denerviranih (II) skupine, je bil prevladujejo mastocitov AB pozitivna (AB +) v sluznice in Submukozno plasti želodčnega antruma, ki označuje te celice so sluznice mastocitov (MMC) (sl. 5A in 5B). V eksperimentalnih skupinah, zdravljenih s MNNG (III in IV), velik delež AB + in AB-SAF + mastocitov podtipi so opazili, slednje predvsem v denerviranega skupini (IV) (sl. 5C in 5D). Fragmenti želodčnega antruma vsebuje mezenterij smo uporabili za potrditev prisotnosti SV + celic, ki označuje vezno tkivo celico mast (CTMC) po tej metodi barvanjem (sl. 5E in 5F). Slika 5 fenotipskih analizo tkivnih celic želodca fragmenta. A in B)
Submukozno plasti ne-denervirati (skupina I) in denervirati (skupina II) v želodcu, ki prikazuje mastocite z citoplazme zrnca pozitivnih na alcian-modro (puščice), ki označujejo sluznice mastocitov fenotip - podrobno plošče A v . C in D)
Dva mast celična populacija so navedena v želodcu lezij ne-denervirati (skupina III) in denerviranih (skupina IV) želodcev: alcian-modrih pozitivnih mastocitov (črni puščici) in alcian-modro /safraninom pozitivne mastociti (rdeče puščice). so opazili E in F)
mastocitov z safraninom pozitivnimi zrnc (puščici) v mezenterij, značilne vezivno tkivne celice jambora. Alcian-modra /safraninom metoda. Bari: 10 mikrometrov (slika A-F.); 5 mikrometrov (detajl sl. A)
.
Skupno količinsko treh podtipov mastocitov (AB +, AB-SAF + in SAF +) je potrdila, morfološke pripombe, kaže prevlado AB + celic v pilorusa fragmenta v vseh poskusnih skupinah (tabela 2). V ne-denerviranih in denerviranih skupin, ki so se zdravili z MNNG (III in IV, v tem zaporedju), so se v ta celica podtip bistveno v primerjavi z ne-denerviranega skupini (I). V denerviranih želodcev, zdravljenih s MNNG (skupina IV), sub-celični AB-SV + prav tako je bila v malignih lezij bistveno povečal v primerjavi s lezij v ne-denerviranega skupini z zdravilom MNNG (III) .table 2 Gostota mastocitov z različnimi fenotipi v želodcu antruma.

pilorično fragment
Skupine
AB +

SAF +
AB + SAF +
sem
8 ± 2
1 ± 1
4 ± 1
II
14 ± 4
3 ± 1
13 ± 10
III - NT
49 ± 16 *
5 ± 2
11 ± 4
III - MT
23 ± 4 ***
4 ± 2
13 ± 5
IV - NT
28 ± 5 ***
2 ± 1
23 ± 8
IV - MT
36 ± 8 ** #
13 ± 10
47 ± 12 &
histološki priprava je bila izvedena, kot je opisano v Materiali in metode
. Vrednosti (število celic na mm2) so izražene kot povprečje ± SEM 60 polj analiziranih na žival s ciljem visoke moči (40 ×). Alcian-blue
(AB +), safranina (SV +) in alcin-blue
/safranina pozitivnih celic (AB + SV +). * P < 0.05 vs. skupini I; # P < 0,01 vs. III - NT in - MT; &Amp; P < 0,05 vs. II.
Analizo različnih podtipov mastocitov v sluznice in Submukozno plasti pilorično fragmentov je pokazala znatno povečanje mastocitov AB + le pri živalih z benignega tumorja (tabela 3). V denerviranih želodcev, zdravljenih s MNNG (skupina IV), prebivalstvo mastocitov AB-SAF +, v primerjavi z drugimi eksperimentalnih skupinah, pri čemer je pomembna za maligne neoplazme. Plast mišic pokazala drugačen profil fragmenta kot celote, in denerviranih želodcev brez in z neoplazije (skupin II in IV), je pokazala prevlado mastocitov AB-SAF +. V nobenem skupini študiral, število celic SAF +, ki so značilne za CTMC prehitela drugo celico subtypes.Table 3 Porazdelitev mastocitov z različnimi fenotipi v plasteh želodčnega antruma.

histološko plasti

sluznico in Submucosa
mišična

Skupine
AB +
SAF +
AB + SAF +
AB +
SAF +
AB + SAF +

I (Control)
7 ± 2
0 ± 0
3 ± 0
1 ± 0
1 ± 1
2 ± 1
II
12 ± 4
0 ± 0
2 ± 1
2 ± 1
2 ± 1
11 ± 9
III - NT
40 ± 14 *
1 ± 1
4 ± 1
8 ± 3 *
3 ± 2
7 ± 3
III - MT
12 ± 2
0 ± 0
3 ± 1
11 ± 3 *
4 ± 1
10 ± 4
IV - NT
19 ± 3 **
1 ± 0,6
12 ± 8
9 ± 3 *
1 ± 0
18 ± 7
IV - MT
27 ± 10
9 ± 8
25 ± 8 # &
9 ± 2 ** π
3 ± 2
22 ± 9
histološki priprava je bila izvedena, kot je opisano v materiali in metode
. Vrednosti (število celic na mm2) so izražene kot povprečje ± SEM 60 polj analiziranih na žival s ciljem visoke moči (40 ×). Alcian-blue
(AB +), safranina (SV +) in alcin-blue
/safranina pozitivnih celic (AB + SV +). * P < 0.05 vs. skupini I; # ≪ 0,05 vs. I in III-MT; &Amp; P < 0,01 vs. II; π P < 0.05 vs. II.
Razprava
V tej študiji smo raziskovali histopatološke spremembe in porazdelitev ekstracelularnega matriksa (ECM) fibrilarnega komponent in mastocite v pilorusa regiji podgan želodcev ne denerviranih ali denervirati s benzalkonijev klorid (BAC) in neobdelanih ali obdelan z rakotvorne N-metil-N 'nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG).
Sprva histopatološke in stereoloških analiza ni pokazala spremembe v relativni volumen epitelnih in strome predelki v pilorično fragmentov iz ne-denervirati (skupina I) in denervirati želodci (skupina II). Vendar pa je študija fibrilarnega komponent ECM v teh vzorcih je pokazala, da BAC denervacijo povzroča povečanje pogostosti reticular in elastično sistema vlaken v denerviranega želodčne sluznice (skupina II) v primerjavi z ne-denervirati (skupina I), kot je razvidno iz histokemična in stereoloških analiza z uporabo Gomori retikulinu in Weigert je resorcin-fuksina obarvanje, v tem zaporedju. Verjetno je odsotnost stimulacije krčenja, ki jih myenteric denervacije v teh fragmentov (skupina II) povzročil prispeva k povečanju sintezi reticular in elastičnih vlaken, ki ga gladkih mišičnih celic in /ali na novo združenje vlaken v strome kot mehanizem za ustrezen usklajevanje peristaltična val, in da se prepreči zastoj v denerviranih organov [32-34].
zdravljenje ne-denervirati (skupina III) in denerviranega (skupina IV) živali z MNNG povzroča razvoj malignih tumorjev (adenokarcinomov), benigna tumorji (adenomatozni polipi) in predrakave lezije (displazija in atrofični gastritis). Razvoj adenokarcinomov v obeh non-denerviranih in denerviranih želodcem je lahko spodbujajo znatno povečanje relativnega volumna stromalni prostor. Med razvojem tumorjev na prostati ali želodčne sluznice, je interakcija STROMA /epitelij moten in uvedel nov pogoj, povezan z morfoloških sprememb izvencelicnega matričnih in tumorske rasti [35]. Širjenje epitelijskih celic pri obeh malignih in benignih poškodb povzroča spremembe, ki se nahajajo v žleze, ki mu sledi osrednja preoblikovanje komponent fibrilarnega v zunajceličnem matriksu [27].
V tem pogledu je histokemične analiza je pokazala znatno povečanje o reticular vlakna adenokarcinom (skupina III), v primerjavi z ne-denerviranih želodcev brez lezij (skupina I). Povečanje stromalni kolagenskih vlaken predstavlja mehanizem, s katerim bi lahko tumorske celice pobeg "napad" limfocitov T (CD8 +) in povzroči apoptozo, ki bi deloval kot ovira za infiltracijo CD8 + [ ,,,0],36]. Kljub ne znatno spremembo na elastičnim sistemom, so opazili motnje teh vlaken v adenokarcinomov na ne-denervirati želodcu (skupina III), v prisotnosti teles elastičnih elementov frakcioniranih, kar kaže na poslabšanje ali preoblikuje strome v odgovor za škodo, ki pod vplivom neoplastične celice. Te spremembe v elastičnih sistemov vlaken je bilo sočasno z preoblikovanja kolagenskih vlaken, opaženih tudi pri poškodbah prostate [37] ter v stromi prostate v tem regresije žleze po kastraciji [38, 39]. V skladu s temi rezultati bi agresiven tumor ocenjujejo vlaknenih komponent matrice.

• Kako bi bilo treba markerji vbrizga zaznati pri kontrolnih vozlišč v raka želodca - submucosally od znotraj ali subserosally od zunaj želodca?
• Clinicopathologic značilnosti in rezultati obdelave hepatoid adenokarcinomom želodca, redek, a edinstven podtip raka želodca