Poveikis myenteric denervacijos apie tarpląsteliniame pluošto ir putliųjų ląstelių pasiskirstymą normalų skrandžio ir skrandžio pažeidimų

Poveikis myenteric denervacijos apie tarpląsteliniame pluošto ir putliųjų ląstelių pasiskirstymą normaliomis skrandžio ir skrandžio pažeidimų
Anotacija
faktai
Šiame tyrime iš myenteric denervacijos sukeltos benzalconium chlorido (BAC) distribucijos Włókienkowy komponentų poveikis ekstraląstelinis matrica (ECM) ir uždegiminių ląstelių buvo tiriamas skrandžio kancerogenezėje sukeltos N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinu (MNNG). Žiurkės buvo suskirstytas į keturias eksperimentinių grupių: ne-denervuojamo (I) ir denervuojamo skrandžio (II) be MNNG gydymo; ne-denervuojamo (III) ir denervuojamo skrandžiai (IV) turi būti apdoroti su MNNG. Histopatologiniams ir histocheminės ir stereological analizės skyriai skrandžio fragmentų buvo tamsintas hematoksilinu-eozinas, Picrosirius-hematoksilinu, Gomori retikulino skaidulas, Weigert anketa Resorcin-fuksinas, toluidinas Blue ir Alcian mėlyna /Safraninas (AB-SAF).
Rezultatai
AKK denervacijos sukelia į Tinklinės ir elastinių skaidulų denervuojamo (II grupė), palyginti su ne denervuojamo skrandžiai (I grupė) dažnio padidėjimą. Žvėrių su MNNG gydymo sukeltas į adenokarcinomos plėtrą ne denervuojamo ir denervuojamo skrandžiai (III ir IV grupėse) su žymiu padidėjimu santykinio tūrio stromos, iš tinklinės skaidulos dažnio ir uždegiminės įsiskverbti, kad buvo intensyvesnė IV grupės. Į elastinių skaidulų dažnio padidėjimas buvo pastebėtas adenokarcinomos denervuojamo (IV grupė) palyginus su ne denervuojamo skrandžiai (III grupė), kurie parodė degradaciją šių pluoštų. Nuo pažeidimo daugiausia denervuojamo IV grupės (III ir ketvirtos grupės miškuose), taip pat buvo susijęs su į putliųjų ląstelių populiacijos padidėjimą, ypač AB ir AB-SAF pozityvūs, pastaroji plėtra.
Išvados Viesbutis The rezultatai rodo, stiprus asociacija morfologinės kitimo ECM Włókienkowy komponentų, padidėjusio tankio putliųjų ląstelių ir sukeliamų MNNG į ne denervuojamo žiurkių skrandžio ar denervuojamo iki BAC auglių vystymąsi. Tai rodo, kad tarpląstelinio ir ląstelėje komponentų naviko mikroaplinkos tyrimas prisideda prie suvokimo naviko biologijos veiksmai ir myenteric denervacijos.
Fone
Sąveika tarp vėžinių ląstelių ir supančio stromos yra vienas iš svarbiausių aspektų su mechanizmu naviko ląstelių proliferacija ir invazija [1]. Vėžinių ląstelių padaryti Atstatymui tarpląsteliniame užpilde (ECM), mišinys, sudarytas iš pluoštų (kolageno, Tinklinės ir elastinga) ir susmulkintos medžiagos, kuri suteikia ląstelių parama [2], siekiant palengvinti bendravimą ir pabėgti iš kontrolės ir mikroaplinkos [3]. Kolageno Włókienkowy sistema veikia kaip karkasas audiniuose, kur tinklinės skaidulos jungia kolageno skaidulų su pamatinė lamina epitelio, raumenų ir riebalinių ląstelių; microfibrila-elastino sistema vaidina svarbų vaidmenį tolygiai paskirstyti stresą išlaikyti atsparumą vietos audinių reikalavimus [4].
struktūrinis ir funkcinis vientisumas kolageno Włókienkowy ir microfibrila-elastino sistemos svarbus skrandžio pakuoti maistą, išskirti fermentų ir rūgščių nutraukti neapdorotus maistinių medžiagų ir į mišinį perkelti į plonąją žarną. Trys užduotys priklausys nuo išorinių (simpatinė ir parasimpatinė skyriai vegetacinė nervų sistema) ir vidinės inervacijos (žarnų nervų sistemos - ENS). Pagrindiniai komponentai Ens du tinklus arba rezginiai neuronų ir nervinių skaidulų, The myenteric ir Po gleivine rezginys [5]. Ens svarba už virškinimo trakto funkcijų reguliavimo yra stebimas po vietiniam vartojimui, dėl katijoninės paviršinio aktyvumo medžiagos, benzalkonio chloridas (BAC), dėl seruminio sluoksnis, kuris susidaro iš dalies ir atrankiniu sunaikinimo myenteric rezginio neuronų [6]. Tarp kancerogenezėje ir ENS koreliacija buvo įrodytas eksperimentinių modelių naudojant myenteric denervacijos pagal BAC ir auglių sukeliamo N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinu (MNNG) [7] ir 1,2-dimetilhidrazinu ( DMH) [8] su į dažnumo ir dydžio virškinimo trakto navikų mažinimo.
Imuninės ląstelės yra stiprūs šaltiniai paracrine signalus į ENS. Ypač žarnyno putliųjų ląstelių yra strategiškai patogioje vietoje ir turi galingą farmakologines tarpininkų, kurie veikia imunologinių dirgiklių veidą, kad gali turėti įtakos virškinimo trakto [9] vientisumą. Antikūnų privalomas putliųjų ląstelių daro juos atpažinti specifinius antigenus ir signalo savo buvimą ENS. ENS, savo ruožtu, interpretuoja cheminius signalus putliųjų ląstelių dauginimasis pat pavojus ir siekia jį pašalinti, taip suteikiant apsauginį imuninį atsaką [9]. Iš putliųjų ląstelių buvimas buvo aprašyta kelių neoplasias, PRO ar anti-vėžinių vaidmenis savo bioaktyvių tarpininkų išleistas į naviko mikroaplinkos [10-12] įtakoje. Iš pro-naviko tarpininkų, pvz histamino, triptazė ir chimazės veiksmai gali skatinti migracijos ir ląstelių proliferaciją priverčiant adhezijos molekulių ekspresiją ant endotelio ląstelių ir tokiu būdu aktyvuojant naviko angiogenezę, metastazių ir proliferacijos [13-15] procesą. Kita vertus, kai kurie citokinų kaip interleukino (IL) -2 ir -21, naviko nekrozės faktoriaus (TNF) ir heparino, išsiskiriančios iš putliųjų ląstelių, gali veikti kaip vaistais nuo vėžio pagal jų augimo slopinimo [16, 17].
keletas tyrimų parodė, kad kancerogeninio poveikio metu yra per putliųjų ląstelių skaičiaus padidėjimas, pastebimas neurofibroma, lipoma, hemangiomos, navikų antinksčių ir odą [18], suragėjusių ląstelių karcinomos [19], gerklų suragėjusių ląstelių [20] ir skrandžio karcinomos [21]. Skrandžio adenokarcinomos, mažas išleisti turinį saugomų citoplazminių granulių putliosios ląstelės buvo susijęs su pokyčių kraujagyslių bazinis lakštas, įskaitant netaisyklingos storio, daugelio sluoksnių ir silpna kartu su endotelio ląstelių ir pericytes, kurios prisideda prie kraujagyslių remodeliavimo [22]. Po chirurginio pašalinimo skrandžio vėžio, išgyvenimo tyrimai parodė, kad pacientai, kuriems yra padidėjusi skaičius putliųjų ląstelių parodė blogiau prognozę, palyginti su pacientais, kurių mažas kiekis iš jų.
Šio tyrimo tikslas buvo nustatyti cheminių abliacijos myenteric poveikį neuronai dėl tarpląsteliniame užpilde pluošto ir putliųjų ląstelių skrandžio gleivinės ne denervuojamo ir denervuojamo skrandžius platinimo, ir į skrandžio kancerogenezėje sukeltos MNNG administravimo žiurkių modelį.
Medžiaga ir metodai
eksperimentinis dizainas
buvo vertinami keturi eksperimentiniai grupes. Grupės I (n = 5) ir II (n = 5) ne-denervuojamo ir denervuojamo atitinkamai, be skrandžio navikų buvimą; grupės III (n = 10) ir IV (n = 10) ne-denervuojamo ir denervuojamo, atitinkamai, su skrandžio navikų buvimą. Fragmentai prievarčio regione (Ertmė) skrandžio naudojamas šiame tyrime buvo gauti iš atliktų POLLI-LOPES et al tyrimus. [7]. Eksperimentiniai procedūros buvo atliekamos laikantis komiteto darbo tvarkos taisyklių, priežiūrai ir naudoja laboratorinių gyvūnų Nacionalinės mokslinių tyrimų tarybos N.I.H. (JAV) ir etikos komitetas gyvūnų eksperimentuoti (CEEA) iš FAMERP (Protokolas Nr 6193/2008), São José do Rio Preto, SP.
Gyvūnai
Wistar
žiurkės svoris 100 150 g, gauti iš gyvūnų galimybe medicinos Ribeirão Preto, Brazilija mokykloje, buvo laikomi (4 gyvūnai per narvo), kurios temperatūra yra nuo 23 iki 25 ° C, ir gavo maisto ir vandens iki soties
.
Skrandžio denervacijos Bendrovės gyvūnai buvo anestezuoti jiems su ketamino hidrochlorido ir tiazino chlorido (0,15 ml /0,05 ml /100 g svorio) [23]. Kiekvieno gyvūno skrandžio buvo exteriorized per vidurinq viršutinės pilvo laparotomija ir izoliuoti nuo pilvaplėvės ertmę per mažą Fenestration į plastikinį lapo išoriniam vartojimui 0,6% BAC (v /v) (Aldrich Chemical Co, praskiestas fiziologiniu tirpalu (0,9% NaCl) [7, 24]. izoliuoti skrandžiai buvo suvynioti su tinkleliu, įmirkyta BAC arba fiziologiniu tirpalu ir nuolat drėgnas 30 min [6, 7, 24]. serosal paviršius skrandžių buvo kruopščiai nuplauti fiziologiniu tirpalu, organai buvo grąžinta jų anatominę vietą ir pilvo sienos buvo susiūtas. gyvūnai buvo laikomi plastikiniuose narvuose (4 gyvūnai /narvas) pagal kontroliuojama temperatūra, ir gavo maisto ir vandens iki soties
.
indukcijos neoplasias skrandžio Ertmė gleivinės
Šešiolika savaites po operacijos, kad III (ne-denervuojamo) ir IV (denervuojamo) grupių gyvūnai suvartoti iš N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinu tirpalo (MNNG) (Aldrich Chemical Co, Inc., milwaukee, WI), ištirpinto distiliuotame ir dejonizuoto vandens, 100 mg /L koncentracijos 28 savaičių. Gyvūnai buvo paaukota per 2 mėnesius po paskutinio suvartojamų MNNG ir skrandžiai buvo renkami morfologinės analizės.
Morfologinis ir kiekybinė analizė
tarpląsteliniame pluoštų
fragmentai prievarčio regione skrandį (Ertmė) buvo nustatytos 4% buferiniame formalino 12 valandų, išplauti vandeniu iš čiaupo, dehidratuoto etanolio serijos ir įdėta į parafiną. Dėl tarpląsteliniame tyrimo skyriai 4 mkm storio buvo tamsintas hematoksilinu-eozinas [25], Picrosirius-hematoksilinu [26] ir Gomori retikulino skaidulas [27] Dėl histopatologiniams analizės, o kolageno ir tinklinės skaidulos vertinimo atitinkamai. Lanksčių sistemos pluoštai buvo tiriami naudojant Weigert anketa Resorcin-fuksinas kuris selektyviai dėmes tiek elastingas ir elaunin pluoštų (toliau oxytalan pluoštas lieka nedažytų, nes jie anksčiau nebuvo oksiduoti šiame tyrime [28]). Egzemplioriai buvo analizuojami su "Olympus BX60 šviesos mikroskopu (" Olympus ", Hamburgas, Vokietija), ir mikroskopiniai laukų skaitmeninį naudojant Image-Pro Plus versija 4.5 Windows programinės įrangos (Media Kibernetika, Silver Springs, MD). Penki atsitiktinai sritys skrandžio gleivinės buvo analizuojami naudojant × 20 tikslas ir kalibravimas buvo atliktas naudojant Olympus rūšiuojami mikroskopo objektinio stiklelio. Kiekybinė analizė buvo nustatyta pagal WEIBEL [29], tinklelis bandymo sistemos su 168 taškų ir 84 bandymo linijų, palyginti santykinį tūrį (procentais) skrandžio gleivinę skyrių (epitelio, stromos ir kt skyrių, išskyrus Tvarkos epitelio ir stromos) už hematoksilinu-eozinas dažymo ir santykinio dažnumo Tinklinės ir elastinga pluošto paskirstymo (procentais) už Gomori retikulino skaidulas ir Weigert anketa resorcin- fuksinas dažymo, atitinkamai. Vertybės yra pateikiami kaip vidurkis ± SEM santykinio tūrio (procentais), skrandžio gleivinės skyrių ir vidurkis ± SEM santykinio dažnumo Tinklinės ir elastinga pluošto paskirstymo (procentais).
Putliųjų ląstelių
analizė putliųjų ląstelių, skrandžio Ertmė buvo atliktas tamsintas su toluidinas Blue 0,5% kiekybinio sveikoms ir degranulated ląstelių skyriuose ir su Alcian-mėlyna Safraninas (AB-SAF) kiekybinio gleivinės ir jungiamojo audinio putliųjų ląstelių [30, 31]. Šiam tikslui buvo analizuojami šešiasdešimt atsitiktinai sritys skrandžio gleivinę, vienam gyvūnui, su Olympus šviesos mikroskopu (Olympus, Hamburgas, Vokietija), naudojant × 12,5 /16 milimetro akims ir × 40 maitinimo tikslą (Zeiss, Vokietija) , Vertybės yra pateikiami kaip vidurkis ± SEM į ląsteles per mm skaičių 2.
Statistinė analizė
Duomenys buvo analizuojami naudojant Statistica 6.0 programinę įrangą (StarSoft, Inc, Talsa, OK). Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SEM ir buvo pateiktas su Stjudento t pervežimas bandymo ir vienpusio analizės dispersijų (ANOVA), o po to Tukey-Kramer daugeliui lyginimų bandymo arba Bonferroni. Skirtumai su P verčių
< 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas.
Rezultatai
Histopatologinis ir histocheminiam analizė žiurkių skrandžiuose
pradžių prievarčio fragmentai ne denervuojamo ir denervuojamo skrandžius pagal benzalkonio chlorido (BAC) (I ir II grupės, atitinkamai) buvo tiriamas , Analizė fragmentai II grupės parodė, kad myenteric denervacijos nepakeitė kiekį ir pasiskirstymą Tinklinės kolageno skaidulų, kurios supa prievarčio liaukas, palyginti su (1A pav. Ir 1B) I grupės. Šis rezultatas buvo patvirtinta Picrosirius-hematoksilinu dėmių (pav. 1E ir 1F) ir kiekybinės analizės santykinio tūrio epitelio ir stromos skrandžio gleivinės iš abiejų grupių (pav. 1I ir 1J). 1 pav histologinis analizę žiurkių skrandžiuose. A, B, E ir F)
prievarčio skrandžio liaukos (g) apsuptas stromos su kolageno skaidulų (-ų), kuri nustatyta I gleivinės sluoksnis grupių ir II. Epitelio (EP). Skrandžio duobes (F). Muscularis gleivinė (M). C, D, G ir H)
prievarčio skrandžio liaukos (g), kurias sudaro Auglio ląstelių užima didžiausią plotą skrandžio gleivinę, pagal III ir IV grupių. Kurio PMN (rodyklėmis) kaupimas buvo stebėtos liaukų. Hematoksilinu-eozinu (A-D); Picrosirius-hematoksilinu (E-H). Barai: 20 mkm. Aš-L
) Audinių skyriai (epitelį stromos, kiti) apimtys skrandžio prievarčio gleivinės. Vertybės yra pateikti kaip vidurkis ± SEM procentais santykinio tūrio. Grupės, neturinčios pažeidimų (I ir II), esančio kurių didelė santykinė tūris epitelio (p < 0,05), palyginti su grupes, su kuriomis pažeidimų (III ir IV). Iš adenokarcinoma buvimas III ir IV grupės lėmė gerokai padidinti (p < 0,05). Iš stromos, palyginti su I ir II grupės
Ne denervuojamo ir denervuojamo skrandžiai, gydomiems MNNG (III ir IV grupėse) pateikti pokyčius audinių architektūros ir išdėstymo neląstelinio matricos ir kurioje pateikiamas prievarčio liaukų skersmuo padidėjimo pluoštų, taip pat santykinių tūrio stromos (pav. 1C, d, G ir 1H). Gydymas MNNG paskatino gerybinių ir Malign navikų, ypač adenomatoziniuose polipai ir adenokarcinomos (pav. 1c ir 1g) nepriklausančiose denervuojamo skrandžiai (III grupė) plėtrą. Gyvūnai su denervuojamo skrandžius ir gydomiems MNNG (IV grupė) sukūrė ikivėžinius pakitimus ir Malign navikų būdinga displazija, atrofinį gastritas ir adenokarcinoma (. 1D ir 1H pav). Abiejose grupėse, iš adenokarcinomų stromos buvo praturtintas uždegiminių ląstelių buvimą, kaip putliosios, neutrofilų, plazmos ląstelių ir limfocitų, rodo imuninį atsaką į neoplasias (Fig. 2). Tačiau navikinių IV grupės buvo mažesnių ir mažiau agresyvių profilius, lyginant su III grupės, ir uždegiminis Infiltrate lokalizuotas naviko stromos buvo daugiau intensyvus, ypač gyvūnų, kad sukurtų adenokarcinomų (pav. 2d). 2 pav histologinis tyrimas adenokarcinoma sukeltos MNNG gydymą. A ir B)
Morfologinis vaizdas adenokarcinoma (AD) non-denervuojamo (III grupė) ir denervuojamo skrandžio (IV grupė). Raumenų sluoksnis (M). Intensyvus uždegimo Infiltrate (IN). C ir D)
detalė uždegiminės įsiskverbti naviko stromos sudaryto putliųjų ląstelių (Black rodyklės), neutrofilai (rodykles), limfocitų (žalios rodyklės) ir plazminių ląstelių (raudonos rodyklės). Toluidinas Mėlyna. Barai:. 100 mkm (. A ir B pav), 10 mkm (. C ir D pav)
histocheminės analizę prievarčio skyriuose buvo atliktas su Gomori retikulino skaidulas ir Weigert anketa Resorcin-fuksinas dažymo studijuoti paskirstymą ( dažnis) iš tinklinės ir elastinių skaidulų stromos, atitinkamai. pateikti abiejų metodų skyriai atskleidė panašų pasiskirstymą Tinklinės pluošto, kurie supa prievarčio liaukų skrandžius iš I ir II grupės (pav. 3A, B, E ir 3f). Ne denervuojamo arba denervuojamo skrandžiai, gydomiems MNNG (III ir IV, atitinkamai grupės), matyt, pateikti didesnį kiekį tinklinės skaidulos (pav. 3c ir 3d) ir storų ir trumpų elastinių skaidulų labai neorganizuotas (pav. 3G ir 3H) į adenokarcinomos palyginti su jų atitinkamų kontrolinių grupių (I ir II grupės, atitinkamai). 3 pav histocheminės analizė Tinklinės (A-D), ir elastinių skaidulų (E-H) su žiurkėmis skrandžius. A ir B)
I ir II grupių pateikti tinklinės skaidulos tiesmetriniai ir suderintos (rodyklės) aplinkinių epitelis (EP) ir stromos (-us). C ir D)
tinklinės skaidulos (rodyklė) vyniojimo ir, matyt, tankiausias prie pagrindo (antgaliai strėlės) liaukos (g). buvo pastebėtas kolageno skaidulų kaupimąsi tarp liaukų (*). E ir F)
liaukos lydi subtilus Web elastinių skaidulų (rodyklė) ir intensyviau pažymėtų E. G ir H)
vykdančio šių pluoštų, kitokių trukdymų ir fragmentacijos Włókienkowy kintamųjų storio padidėjimą sugrupuoti mases elastino (strėlės) galima pastebėti aplink liaukas (g), palyginti su jų atitinkamų kontrolinių grupių (I ir II). Gomori sidabrinė (A-D); Weigert anketa Resorcin-fuksinas (E-O). Barai: 10. Mkm
kiekybinė analizė iš tinklinės skaidulos patvirtino šio tarpląstelinio komponento padidėjimą iš adenokarcinomos pastebėtas į III ir IV grupių, o taip pat parodė netikėtą didelę padidėjimą denervuojamo skrandžio gleivinės (II grupė ), lyginant su I grupės (1 lentelė). Nepaisant akivaizdaus padidėjimo elastinių skaidulų ne denervuojamo ir denervuojamo gyvūnų, gydytų MNNG (III ir IV, atitinkamai grupių) stromos, ne statistinis skirtumas buvo pastebėtas jų pasiskirstymas, palyginti su kontrolinių grupių (I ir II) (1 lentelė) , Kita vertus, myenteric denervacijos sukeltas Žymiai padidėjęs elastinių skaidulų skrandžio stromos iš II ir IV grupių, palyginti su ne-denervuojamo skrandžių iš grupių I ir III (1 lentelė). Reikšmingo skirtumo pažymėta kolageno ir elastinga pluošto paskirstymo tarp ne Malign ir Malign pakitimų stromas iš III ir IV.Table 1 grupes Stereological vertinimas myenteric denervacijos poveikio skrandžio antralinėje dalyje.

Santykinis dažnių pasiskirstymas pluošto (%) 1
Grupės
Kolagenas sistema
Elastiniai sistema
Aš
16,87 ± 0,5
13,27 ± 0,5
II
24,06 ± 1,5 *
19,4 ± 0,6 *
III - NT
21,8 ± 0,9
11,2 ± 0,6
III - LT
25,71 ± 0,5 *
11,1 ± 0,4
IV - NT
21,2 ± 1,6
20,2 ± 1,7 &
IV - LT
26,87 ± 1,5 *
19 ± 0,7 &
histologinis preparatas buvo vykdomi, kaip aprašyta medžiagų ir
metodus. Vertybės yra pateikti kaip vidurkis ± SEM procentais santykinio dažnumo pluošto. Ne piktybinis navikas (NT); Ļaundabīgs navikas (MT). 1 Statistinė analizė remiantis ANOVA po to Tukey-Kramer korekcija. * P < 0,05 vs I grupės; &Amp; P < 0,05 vs III grupę.
Kiekybinis putliųjų ląstelių iš prievarčio regione skrandžio pervežimas putliųjų ląstelių fragmentai buvo analizuojami ir įvertinama gleivinės, gleivine ir raumenų sluoksnius visų eksperimentinių grupių. Yra nurodyta bendra celių skaičiumi vienam skrandžio fragmento analizė neparodė didelį skirtumą tarp ne-denervuojamo (I) formulėje ir denervuojamo (II) grupes (4A pav.). Tačiau ne denervuojamo arba denervuojamo grupių, gydytų MNNG (III ir IV, atitinkamai), gerybinių arba piktybinių pakitimų vystymąsi buvo susijęs su reikšmingu padidėjimo putliųjų ląstelių skaičiaus skrandžio antralinėje dalyje, palyginti su ne denervuojamo grupės (I) formulės. Per gleivinės ir pogleivio sluoksnio, žymus padidėjimas putliųjų ląstelių ne denervuojamo arba denervuojamo grupių gydomi MNNG (III ir IV) buvo susijęs su nepažeistų ir degranulated ląstelių padidėjimas (4B pav.). Į raumenų sluoksnio, šis padidėjimas buvo daugiausia susijęs su daug nepakitusio putliosios ląstelės (4C pav.). 4 pav kiekybinės analizės putliųjų ląstelių, skrandžio. Duomenų atstovauti vidurkis ± S.E.M tirtų vienam gyvūnui, kaip aprašyta medžiaga ir metodai šešiasdešimt srityse. Ne-denervuojamo (I) formulėje ir denervuojamo skrandžio (II) be pažeidimų. Ne denervuojamo (III) ir denervuojamo skrandis (IV) pažeidimų. Ne-piktybinis navikas (NT). Piktybinis navikas (MT). A)
Bendra skaičių putliųjų ląstelių skrandžio fragmento. * P < 0,05 vs I grupės # P < 0.01 vs dar eksperimentinės grupės. B ir C)
nesugadintos ir degranulated putliųjų ląstelių gleivinės, gleivine ir raumenų sluoksnius. * P < 0,05 vs I grupės; #P ≪ 0.05 vs dar eksperimentinės grupės; δ P < 0,05 vs grupė III - NT (nepažeistos putliųjų ląstelių); &Amp; P < 0,05 vs III grupės - NT (degranulated putliųjų ląstelių). C),
nesugadintos ir degranulated putliųjų ląstelių raumenų sluoksnis. * P < 0,05 vs I grupės; # P < 0,05 vs II grupės.
FENOTIPINIS analizę stiebo ląstelės
Dėl fenotipo apibūdinimo putliųjų ląstelių buvo naudojamas iš Alcian Blue-Safraninas (AB-SAF) metodą. Be gyvūnų, nepriklausančių denervuojamo (I) ir denervuojamo (II) grupes, ten buvo putliųjų ląstelių AB "teigiamas (AB" +) į gleivinės ir pogleivio sluoksnių skrandžio antralinėje dalyje dominuojantis, apibūdinančių šias ląsteles, kaip gleivinės putliųjų ląstelių (MMC) (. 5A ir 5B pav). Eksperimentiniuose grupių, gydytų MNNG (III ir IV), didelė dalis AB + ir AB-SAF + putliųjų ląstelių potipių buvo pastebėta, pastaroji daugiausia denervuojamo grupės (IV) (Pav. 5C ir 5D). Fragmentai skrandžio Ertmė, kurių sudėtyje yra žarnų pasaitai buvo naudojami patvirtinti SAF + ląstelių buvimą, apibūdindamas jungiamojo audinio putliųjų ląstelių (CTMC) Šiuo dažymo (pav 5E ir 5F.) Metodu. 5 paveikslas FENOTIPINĖ analizę putliųjų ląstelių skrandžio fragmento. A ir B)
gleivine sluoksniu ne-denervuojamo (I grupė) ir denervuojamo (II grupė) skrandis rodo putliųjų ląstelių su citoplazmos granulėse teigiamas alcian-mėlyna (rodyklės), apibūdinančių gleivinės putliųjų ląstelių fenotipo - išsamiai apie skydelyje ., C ir D)
Du putliųjų ląstelių populiacija yra pažymėta skrandžio pakitimų ne denervuojamo (III grupė) ir denervuojamo (IV grupė) skrandžiai: alcian mėlynos teigiamų putliųjų ląstelių (black rodyklės) ir alcian mėlyna /Safraninas teigiami putliųjų ląstelių (raudonos rodyklės). E ir F)
putliųjų ląstelių su Safraninas teigiamų granulės (rodyklės) yra stebimas žarnų pasaitai, apibūdinantys jungiamojo audinio putliųjų ląstelių. Alcian mėlyna /Safraninas metodas. Barai: 10 mkm (pav A f.); 5 mkm (detalė pav. A),
.
Bendrą kiekybiškai tris potipius putliųjų ląstelių (AB " +, AB" SAF + ir "SAF +) patvirtino morfologinių pastabas, rodo iš AB + ląstelių dominavimu prievarčio fragmentas visų eksperimentinių grupių (2 lentelė). Ne-denervuojamo ir denervuojamo grupių, gydytų MNNG (III ir IV, atitinkamai), šis ląstelių potipis padidėjo, palyginti su ne-denervuojamo grupės (I). Be denervuojamo skrandžius gydomiems MNNG (IV grupė), sub-ląstelių AB-SAF + taip pat buvo žymiai išaugo piktybiniai pakitimai, palyginti su pakitimus ne denervuojamo grupės gydomi MNNG (III): .table 2 Tankis putliųjų ląstelių su skirtingų fenotipų skrandžio antralinėje dalyje.

prievarčio fragmentas
Grupės
AB "+"

SAF +
AB "+" SAF +
Aš
8 2
± 1 ± 1
4 ± 1
II
14 ± 4
3 ± 1
± 10
13 III - NT
49 *
5 ± 2 4
11 ± III ± 16 - LT
23 ± 4 *** 4 ± 2
13 ± 5
IV - NT
28 ± 5 ***
2 1
± 23 8
± IV - LT
36 ± 8 ** #
13 ± 10
47 ± 12 &
histologinis preparatas buvo vykdomi, kaip aprašyta medžiagų ir
metodus. Vertybės (celių skaičiumi vienam mm2) yra išreikštas vidurkis ± SEM 60 analizuotų vienam gyvūnui su didelės galios tikslo (40 ×) srityse. Alcian mėlyna
(AB "+"), Safraninas (SAF +) ir alcin mėlyna
/Safraninas teigiamų ląstelių (AB "+" SAF +). * P < 0,05 vs I grupės; # P < 0,01 vs III - NT ir - LT; &Amp; P < 0,05 vs II.
Skirtingų potipių putliųjų ląstelių gleivinės ir pogleivio sluoksnio prievarčio fragmentų analizė parodė reikšmingą padidėjimą putliųjų ląstelių AB " + tik gyvūnams, gerybinis auglys (3 lentelė). Be denervuojamo skrandžius gydomiems MNNG (IV grupė), iš putliųjų ląstelių populiacija AB-SAF + padidėjo, palyginti su kitomis eksperimentines grupes, yra reikšmingas piktybiniai navikai. Raumenų sluoksnis parodė skirtingą profilį fragmento, kaip visumos, ir denervuojamo skrandžius be ir su neoplazija (II grupių ir IV) parodė, kad putliųjų ląstelių AB-SAF + dominavimą. Nė grupės studijavo, ląstelių skaičius SAF + apibūdinančius CTMC pralenkė kitą mobilųjį subtypes.Table 3 pasiskirstymas putliųjų ląstelių su įvairių fenotipų į skrandžio antralinėje dalyje sluoksnių.

histologinis sluoksnių

gleivinės ir Submucosa
Raumenų

Grupės
AB "+"
SAF +
AB "+" SAF +
AB "+"
SAF +
AB "+" SAF +

aš (kontrolės)
7 ± 2
0 ± 0
3 ± 0
II
1 ± 0
1 ± 1
2 ± 1 12 ± 4
0 ± 0
2 1
± 2 1
± 2 1
± 9
± 11 III - NT
40 ± 14 *
1 ± 1
4 ± 1
8 ± 3 *
3 ± 2 3
III
7 ± - LT
12 ± 2
0 ± 0
3 ± 1
11 ± 3 *
4 ± 1
10 ± 4
IV - NT
19 ± 3 **
1 ± 0,6
12 ± 8
9 ± 3 *
1 ± 7
0
18 ± IV - MT
27 ± 10
9 ± 8
25 ± 8 # "&
9 ± 2 ** π
3 2
± 9
± 22 histologinis preparatas buvo vykdomi, kaip aprašyta medžiagos ir metodai
. Vertybės (celių skaičiumi vienam mm2) yra išreikštas vidurkis ± SEM 60 analizuotų vienam gyvūnui su didelės galios tikslo (40 ×) srityse. Alcian mėlyna
(AB "+"), Safraninas (SAF +) ir alcin mėlyna
/Safraninas teigiamų ląstelių (AB "+" SAF +). * P < 0,05 vs I grupės; # ≪ 0,05 vs I ir III-MT; &Amp; P < 0,01 vs II; π P < 0,05 vs II.
Diskusijos
Šiame tyrime buvo ištirti histopatologinių pokyčius ir platinimas tarpląsteliniame (ECM) Włókienkowy komponentų ir putliųjų ląstelių į prievarčio regione žiurkių skrandžiuose ne denervuojamo arba denervuojamo iki benzalkonio chlorido (BAC) ir, neapdorotų, ar apdorotas kancerogenas N-metil-N '-nitro-N-nitrozoguanidinu (MNNG).
iš pradžių, histopatologinė ir stereological analizė neparodė jokių Reliatyvioje tūrio epiteliniame pakeitimus ir stromos kupė prievarčio fragmentų iš ne denervuojamo (I grupė) ir denervuojamo skrandžiai (II grupė). Tačiau Włókienkowy komponentų ECM šių pavyzdžių tyrimas atskleidė, kad AKK denervacijos sukelia į Tinklinės ir elastinga sistemos pluoštų dažnio padidėjimą denervuojamo skrandžio gleivinės (II grupė), palyginti su ne-denervuojamo (I grupė), kaip parodė histocheminiam ir stereological analizė naudojant Gomori retikulino skaidulų ir Weigert anketa Resorcin-fuksinas dažymo, atitinkamai. Tikriausiai kontrakcijos stimuliacijos nebuvimas sukelia myenteric denervacijos šių fragmentų (II grupė) prisidėti prie to, kad iš Tinklinės ir elastinių skaidulų sintezę padidėjo lygiųjų raumenų ląstelių ir /ar naujos asociacijos skaidulų stromos kaip mechanizmas tinkamas peristaltiniu banga koordinavimas, ir užkirsti kelią stasis į denervuojamo organų [32-34].
gydymas ne-denervuojamo (III grupė) ir denervuojamo (IV grupė) gyvūnai su MNNG sukeltas piktybinių navikų (adenokarcinomų) plėtrą, gerybinė navikai (adenomatozinio polipai) ir ikivėžinių pakitimų (displazija ir atrofija gastritas). Iš adenokarcinomos abiejose ne denervuojamo ir denervuojamo skrandžius plėtra galėjo skatinti gerokai padidinti santykinį tūrį stromos skyriuje. Per naviko vystymosi prostatos ar skrandžio gleivinę, sąveika stromos /epitelio sutrinka ir nustatė naują sąlygą, susijusią su morfologiškai pakito tarpląstelinio matrikso komponentų ir naviko augimą [35]. Epitelio ląstelių proliferacija tiek piktybinių ir gerybinių pakitimų sukelia pokyčius esančius liaukos, po židinio neįvertino Włókienkowy komponentų tarpląsteliniame [27].
Šiuo aspektu histocheminiam analizė parodė reikšmingą padidėjimą ant tinklinės skaidulos iš adenokarcinoma (III grupė) palyginus su ne denervuojamo skrandžius be pažeidimų (I grupė). Iš stromos kolageno skaidulų padidinimas sudaro sistemą, pagal kurią naviko ląstelės gali pabėgti "ataka" T limfocitų (CD8 +) ir sukelti apoptozę, kad būtų veikti kaip barjeras su CD8 + [infiltracija ,,,0],36]. Nepaisant nėra reikšminga pakeitimo dėl elastinga sistema, šių pluoštų sutrikimas buvo pastebėtas adenokarcinomos ne-denervuojamo skrandžio (III grupė), su organų elastinių elementų frakcionuoto buvimą, o tai rodo skilimo ar neįvertino stromos reaguojant žalos pagal neoplastinių ląstelių įtakos. Šie elastinių sistemos pluoštų pokyčiai buvo vienu metu su kolageno skaidulų, taip pat pastebėtas prostatos pakitimų [37] ir prostatos stromos per šį liaukos regresiją rekonstruoti po kastracijos [38, 39]. Pagal šiuos rezultatus, agresyvi navikas gali būti įvertinti pagal pluoštinių sudedamųjų dalių matricos.

• Kaip turėtų atsekamųjų būti švirkščiamas aptikti už kontrolinių mazgų skrandžio vėžiu - submucosally iš vidaus ar subserosally ne iš skrandžio
• Clinicopathologic charakteristikos ir hepatoid adenokarcinoma skrandžio, reta, bet unikalios potipio skrandžio cancer