Влияние денервации на мышечной оболочки кишечника внеклеточного матрикса волокон и распределение тучных клеток в нормальном желудке и желудка lesions

воздействии на денервации мышечной оболочки кишечника внеклеточного матрикса волокон и распределение тучных клеток в нормальной желудка и желудочных поражений
Аннотация
фона
В этом исследовании эффект мышечной оболочки кишечника денервации, индуцированного хлорид бензалкония (BAC) на распределение фибриллярных компонентов внеклеточного матрикса (ЕСМ) и воспалительных клеток исследовали в желудочном канцерогенезе, индуцированной N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (MNNG). Крысы были разделены на четыре экспериментальные группы: не-денервированная (I) и денервированная желудка (II) без лечения MNNG; не-денервированная (III) и денервированные желудки (IV) обрабатывают MNNG. Для гистологической, гистохимические и стереологического анализа, участки желудка фрагментов окрашивали гематоксилином-эозином, Picrosirius-гематоксилином, Гомори ретикулин, Вайгерт в резорцин-фуксином, толуидинового синего и Альциановый-синий /Safranin (AB-SAF).
Результаты
BAC денервация вызывает увеличение частоты ретикулярных и эластических волокон в денервированная (группа II) по сравнению с не-денервированными желудков (I группа). Лечение животных с MNNG индуцирует развитие аденокарциномы в не денервированными и денервированными желудков (группы III и IV, соответственно) с заметным увеличением относительного объема стромы, частота ретикулярных волокон и воспалительный инфильтрат, который был более интенсивным в группе IV. Увеличение частоты упругих волокон наблюдалась в аденокарциномы денервированная (группа IV) по сравнению с не-денервированными желудков (группа III), показавшие деградации этих волокон. Развитии поражений (группы III и IV) также было связано с увеличением популяции тучных клеток, особенно AB и AB-SAF позитивов, последний в основном в денервированного группы IV.
Выводы
Результаты показывают сильная ассоциация в морфологическом изменении компонентов фибриллярных ECM, увеличенной плотности тучных клеток и развитие опухолей, индуцированных MNNG в не денервированного желудка крысы или денервированными по BAC. Это говорит о том, что исследование внеклеточных и внутриклеточных компонентов опухоли микросреды способствует пониманию биологии опухоли под действием мышечной оболочки кишечника денервации.
Фон
Взаимодействие между опухолевыми клетками и окружающей стромы является одним из ключевых аспектов в механизме пролиферации клеток опухоли и инвазии [1]. Опухолевые клетки делают перестраивать внеклеточный матрикс (ECM), сложную смесь волокон (коллагена, ретикулярных и эластических) и основного вещества, что обеспечивает поддержку клеток [2], чтобы облегчить общение и уйти от контроля со стороны микросреды [3]. Система коллагена фибриллярный выступает в качестве поддерживающей структуры тканей, где ретикулярных волокон соединяют коллагеновые волокна с базальной пластинками эпителиальных, мышечных и жировых клеток; система микрофибрилла-эластина играет определенную роль в равномерно распределять нагрузку для поддержания устойчивости к требованиям местных тканей [4].
структурную и функциональную целостность коллагена фибриллярных и микрофибрилла-эластических системы имеют важное значение для желудка, чтобы упаковать еду, секретировать ферменты и кислоты, чтобы сломать сырые питательные вещества и вводить смесь в тонкую кишку. Три задачи зависит от примесной (симпатической и парасимпатической отделов вегетативной нервной системы) и внутренней иннервации (энтеральной нервной системы - ENS). Основными компонентами ENS являются две сети или сплетения нейронов и нервных волокон, то и мышечной оболочки кишечника подслизистого сплетений [5]. ЭНС значение для регуляции функций желудочно-кишечного тракта наблюдается после местного применения катионного поверхностно-активного, хлорид бензалкония (БАК), на серозную слое, что приводит к частичному и селективного разрушения нейронов мышечной оболочки кишечника сплетений [6]. Корреляция между канцерогенеза и ENS было продемонстрировано в экспериментальных моделях с использованием мышечной оболочки кишечника денервации путем BAC и индукцию опухолей N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (MNNG) [7] и 1,2-диметилгидразина ( ДМГ) [8] с уменьшением частоты и размера желудочно-кишечных опухолей.
Иммунные клетки являются мощными источниками паракриновых сигналов на ENS. Особенно кишечно тучные клетки стратегически расположены и имеют мощные фармакологические посредники, которые действуют в условиях иммунологических стимулов, которые могут повлиять на целостность желудочно-кишечного тракта [9]. Связывания антител с тучными клетками, делает их способными распознавать специфические антигены и сигнал их присутствие на ENS. ЭНС, в свою очередь, интерпретирует химические сигналы тучных клеток как угрозу и пытается устранить его, обеспечивая тем самым защитный ответ [9]. Наличие тучных клеток была описана в нескольких неоплазий, с про или противоопухолевых роли, которую играют их биоактивные медиаторы, высвобождаемые под влиянием микроокружения опухоли [10-12]. Действие про-опухолевыми медиаторов, таких как гистамин, триптазы и химазы может способствовать миграции и пролиферации клеток, индуцирующих экспрессию молекул адгезии на эндотелиальных клетках и, таким образом, активируя процесс ангиогенеза опухолей, метастазирование и пролиферации [13-15]. С другой стороны, некоторые цитокины, такие как интерлейкин (IL) -2 и -21, фактор некроза опухоли (TNF) и гепарин, выпущенные тучными клетками, могут выступать в качестве противораковых средств, путем ингибирования их роста [16, 17].
Несколько исследований показали, что во время канцерогенеза происходит увеличение числа тучных клеток, наблюдается в нейрофибромами, липомы, гемангиомы, опухоли надпочечников и кожи [18], плоскоклеточный клеток карциномы [19], гортань плоскоклеточный клетки [20] и желудочных карцином [21]. В желудка аденокарциномы, небольшой выброс содержимого, хранящихся в цитоплазматических гранул тучных клеток было связано с изменениями в микрососудистой базальных пластинках, в том числе неправильной толщины, несколько слоев и слабой ассоциации с эндотелиальных клеток и перицитов, которые способствуют ремоделирования кровеносных сосудов [22]. После хирургического удаления рака желудка, исследования выживаемости показали, что у пациентов с увеличенным количеством тучных клеток показал худший прогноз по сравнению с пациентами с низким числом них.
Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы определить влияние химического абляции мышечной оболочки кишечника нейроны о распределении внеклеточного матрикса волокон и тучных клеток в слизистой оболочке желудка не-денервированными и денервированными желудках, и в модели желудочного канцерогенеза, индуцированной введением MNNG у крыс.
Материал и методы
Экспериментальный дизайн
были оценены четыре экспериментальные группы. Группы I (п = 5) и II (п = 5), не денервированная и денервированными соответственно, без присутствия желудка новообразованиях; группы III (п = 10) и IV (п = 10), не денервированная и денервированная, соответственно, с наличием желудка новообразованиях. Фрагменты пилорической (антрального) желудка, используемого в этом исследовании, были получены из исследований, проведенных POLLI-ЛОПЕШ и соавт. [7]. Экспериментальные процедуры были выполнены в соответствии с правилами Комитета по уходу и использованию лабораторных животных Национального научно-исследовательского совета N.I.H. (США) и Комитет по этике для экспериментирования животных (КДЭОС) из FAMERP (Протокол N ° 6193/2008), Сан-Жозе-ду-Риу-Прету,
SP. Животных
самцах линии Вистар
крыс весом 100 г на 150, получены из вивария школы медицины Ribeirão Прету, Бразилия, были размещены (4 животных в клетке), при температуре от 23 до 25 ° с, и получали пищу и воду в неограниченном
.
Желудочный денервации
животных анестезировали им кетамина гидрохлорид и тиазиновом хлорид (0,15 мл /0,05 мл /100 г веса) [23]. Желудок каждого животного выводили через срединный верхней лапаротомии живота и изолированы из брюшной полости через небольшое фенестрацией в пластиковом листе для темы применения 0,6% BAC (об /об) (Aldrich Chemical Co. разведенного в физиологическом растворе (0,9% NaCl) [7, 24]. выделенные желудки были обернуты марлей, смоченной в БАК или физиологический раствор и находиться во влажном состоянии в течение 30 мин [6, 7, 24]. серозную поверхность желудки тщательно промывали солевым раствором, были возвращены органы их анатомических месте и брюшную стенку зашивали. животных содержали в пластиковых клетках (4 животных /клетку) при контролируемой температуре, и получали пищу и воду в неограниченном количестве
.
Индукция новообразованиях желудка антрального отдела слизистой оболочки
Шестнадцать недель после операции, животные группы III (не денервированная) и IV (денервированная) попадает раствор N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (МННГ) (Aldrich Chemical Co., Inc., Милуоки, штат Висконсин), растворенный в дистиллированной и деионизированной воде при концентрации 100 мг /л в течение 28 недель. Животных забивали через 2 месяца после последнего приема MNNG и желудки были собраны для морфологического анализа.
Морфологический и количественный анализ
межклеточного матрикса волокон
фиксировались Фрагменты пилорического отдела желудка (антрального) в 4% забуференный формалин в течение 12 часов, промывают в водопроводной воде, обезвоживают в серии этанола и заливали в парафин. Для изучения внеклеточного матрикса, секции 4 мкм толщиной окрашивали гематоксилин-эозином [25], Picrosirius-гематоксилином [26] и Гомори ретикулин [27] для гистопатологического анализа, а также для коллагена и ретикулярных волокон оценки соответственно. Были изучены волокна упругой системы с использованием Вайгерт в резорцин-фуксином, который избирательно окрашивает как упругую и elaunin волокна (далее oxytalan волокна остаются запятнано, потому что они ранее не окисляется в данном исследовании) [28]. Образцы были проанализированы с помощью светового микроскопа Olympus BX60 (Olympus, Hamburg, Germany) и микроскопические поля были оцифрованы с использованием Image-Pro Plus версии 4.5 программного обеспечения для ОС Windows (Media Cybernetics, Silver Springs, MD). Пять случайных областей слизистой оболочки желудка были проанализированы с использованием × 20 цели, а калибровка была сделана используя Olympus сортовой микроскопический слайд. Количественный анализ был определен в соответствии с процедурой, описанной Weibel [29], тест-подвесная система с 168 точек и 84 строк текста, чтобы сравнить относительный объем (в процентах) слизистую оболочку желудка отсеков (эпителий, строму и другие отсеки, кроме эпителий и строма) для гематоксилин-эозином и относительной частоты ретикулярных и распределения эластичное волокно (в процентах) для Гомори ретикулин и resorcin- фуксин окрашивания Вайгерт в соответственно. Значения представлены в виде среднего значения ± SEM относительного объема (в процентах) слизистой оболочки желудка отсеков и среднее значение ± SEM относительной частоты ретикулярных и упругого распределения волокон (в процентах).
Тучные клетки
Анализ тучных клеток в желудочном Антрум проводили в срезах, окрашенных толуидиновым синим 0,5% для количественного определения интактных и дегранулированных клеток и, с Альциановый-Blue-Safranin (AB-SAF) для количественной оценки слизистых оболочек и тканей тучными клетками соединительной [30, 31]. Для этой цели были проанализированы шестьдесят случайным образом участки слизистой оболочки желудка, на животное, с оптическим микроскопом Olympus (Olympus, Hamburg, Германия) с использованием × 12,5 /16 миллиметровый глазного и цель поддержания × 40 мощности (Zeiss, Германия) , Значения представлены в виде среднего значения ± SEM от числа клеток на мм 2.
Статистический анализ
Данные были проанализированы с использованием программного обеспечения Statistica 6.0 (StarSoft, Inc., Tulsa, OK). Данные представлены в виде среднего значения ± SEM и были представлены испытания т
Стьюдента и односторонним анализом отклонений (ANOVA), а затем тест множественных сравнений Тьюки-Крамера или Бонферрони. Различия со значениями P &
ЛТ; 0,05 считались статистически значимыми.

Результаты Гистопатологическая и гистохимических анализ желудках крыс
Первоначально были изучены пилорические фрагменты, не денервированными и денервированными желудках по бензалконийхлорид (BAC) (группы I и II, соответственно) , Анализ фрагментов группы II показал, что денервация мышечной оболочки кишечника не изменило количество и распределение плетение волокон коллагена, которые окружают пилорического железы по сравнению с группой I (рис. 1А и 1В). Этот результат был подтвержден Picrosirius-гематоксилин пятно (рис. 1E и 1F) и количественного анализа относительного объема эпителия и стромы слизистой оболочки желудка с обеих группах (рис. 1i и 1j). Рисунок 1 гистологический анализ желудках крыс. А, В, Е и F),
пилорического желудочных желез (г), окруженные стромой с коллагеновыми волокнами (ы), наблюдаемых в слизистом слое из групп I и II. Эпителий (ер). Желудочных впадинах (F). Слизистая мышечная (м). C, D, G и H)
пилорического желудочных желез (г), составленных опухолевые клетки занимают самую большую площадь слизистой оболочки желудка групп III и IV. Накопление ПМН (стрелки) наблюдалось в железах. Гематоксилин-эозином (A-D); Picrosirius-гематоксилином (Е-Н). Бары: 20 мкм. I-L
) Тканевые отсеков (эпителий, строма, другие) объемы желудка пилорического слизистой оболочки. Значения выражены в виде среднего значения ± SEM процента от относительного объема. Группы без поражений (I и II) представил высокий относительный объем эпителий (р &ЛТ; 0,05) по сравнению с группами с поражением (III и IV). Присутствие аденокарциномы в группах III и IV привело к существенному увеличению (р ≪ 0,05). Стромы по сравнению с группами I и II
Номера денервированные и денервированные желудки, обработанные MNNG (группы III и IV, соответственно) представлены изменения в архитектуре ткани и расположение волокон внеклеточного матрикса и увеличение диаметра пилорического желез, а также в относительном объеме стромы (рис. 1C, D, G и 1H). Лечение с MNNG индуцирует развитие доброкачественных и злокачественных опухолей, особенно аденоматозных полипов и аденокарциномы (рис. 1C и 1G) в не денервированными желудков (группа III). Животные с денервированными желудков и обрабатывали MNNG (IV группа) разработала предраковых поражений и злокачественных опухолей, характеризующихся дисплазией, атрофический гастрит и аденокарциномы (рис. 1D и 1H). В обеих группах, строму аденокарциномы обогащается наличием воспалительных клеток, как тучные клетки, нейтрофилы, плазматические клетки и лимфоциты, показывая иммунологический ответ на неоплазий (рис. 2). Тем не менее, опухолевые поражения группы IV были более мелких и менее агрессивных профилей по сравнению с группой III, и воспалительный инфильтрат локализованный в строме опухоли было более интенсивным, особенно у животных, разработанных аденокарциномы (рис. 2D). Рисунок 2 Гистологический анализ аденокарциномы, индуцированной обработкой MNNG. А и Б)
Морфологические вид аденокарциномы (AD) в не денервированная (группа III) и денервированного желудка (группа IV). Мышечный слой (М). Интенсивные воспалительный инфильтрат (В). C и D)
Деталь воспалительной инфильтрацией стромы опухоли, состоящей из тучных клеток (черные стрелки), нейтрофилы (наконечники стрел), лимфоциты (зеленые стрелки) и плазматические клетки (красные стрелки). Толуидиновым синим. Бары:. 100 мкм (. Рис А и В), 10 мкм (. Рис C и D)

гистохимических анализ пилорических участков проводили с Гомори ретикулин и резорцин-фуксина окрашивание Вайгерт для изучения распределения ( частота) ретикулярных и эластических волокон в строме соответственно. Разделы, представленные к обоим методам показали аналогичное распределение плетение волокон, которые окружают пилорического железы желудках из групп I и II (рис. 3А, В, Е и 3F). Номера денервированные или денервированные желудки, обработанные MNNG (группы III и IV, соответственно), по-видимому, представлены повышенное количество ретикулярных волокон (фиг. 3С и 3D) и толстые и короткие эластичные волокна сильно неорганизованный (рис. 3G и 3H) в аденокарциномы по сравнению с их соответствующими контрольными группами (группы I и II, соответственно). Рисунок 3 Гистохимическая анализ ретикулярных (A-D) и эластичных волокон (Е-Н) в желудках крыс. А и Б)
групп I и II представлены ретикулярных волокон прямолинейных и выровненные (стрелки), окружающих эпителий (ЕП) и стромы (ы). C и D)
ретикулярных волокон (стрелка) извилистые и, видимо, плотными у основания (наконечники стрел) желез (г). наблюдались Коллагеновые волокна накопления между железами (*). Е и F),
Железы сопровождаются тонким паутиной эластичных волокон (стрелки) и более интенсивно, отмеченных в E. G и H)
увеличении толщины этих слоев, разрушение и фрагментации фибриллярных переменных сгруппированных массы эластина (стрелки) можно наблюдать вокруг желез (г) по сравнению с их соответствующими контрольными группами (I и II). серебряный (A-D) Гомори в; Вайгерт в резорцин-фуксина (Е-Н). Бары: 10 мкм.

Количественный анализ ретикулярных волокон подтвердило увеличение этого внеклеточного компонента в аденокарциномы, наблюдаемых в группах III и IV, а также показал неожиданное значительное увеличение слизистой оболочки желудка денервированного (группа II ) по сравнению с группой I (таблица 1). Несмотря на очевидное увеличение эластичных волокон в строме, не денервированными и денервированными животных, обработанных MNNG (групп III и IV, соответственно), статистической разницы не наблюдалось в их распределении по сравнению с контрольными группами (I и II) (таблица 1) , С другой стороны, мышечной оболочки кишечника денервации индуцируется значительное увеличение эластичных волокон желудочной стромы из групп II и IV по сравнению с не денервированными желудках из групп I и III (таблица 1). Никаких существенных различий не было отмечено в коллагеновых и эластических волокон распределения между не-злокачественными и злокачественных поражений стромы из групп III и IV.Table 1 Стереологический оценки последствий денервации в мышечной оболочки кишечника антрального желудка.
<й>
Относительное распределение частот волокон (%) 1

Группы

Коллаген система

упругая система

Я
16,87 ± 0,5
13,27 ± 0,5
II
24,06 ± 1,5 * 19,4 ±
0,6 *
III - НТ
21,8 ± 0,9 11,2 ±
0,6 <бр> III - MT
25,71 ± 0,5 * 11,1 ±
0,4 ​​
IV - НТ
21,2 ± 1,6
20,2 ± 1,7 &Amp;
IV - MT
26,87 ± 1,5 *
19 ± 0,7 &Amp;
Гистологический препарат проводили, как описано в разделе Материалы и методы
. Значения выражены в виде среднего значения ± SEM процента от относительной частоты волокон. Non-злокачественная опухоль (NT); злокачественная опухоль (МТ). 1 Статистический анализ, основанный на ANOVA с последующим исправлением Тьюки-Крамера. * P &л; 0,05 по сравнению с группой I; &Amp; P &л; 0,05 по сравнению с группой III.
Количественное тучных клеток в фрагментов пилорического отдела желудка
тучных клеток анализировали и количественно оценивали в слизистый, подслизистый и мышечный слои во всех экспериментальных группах. Анализ общего количества клеток в желудочном фрагмента не показали значительной разницы между стоимостью денервированными (I) и денервированными (II) группы (рис. 4, а). Тем не менее, в не денервированными или денервированными группах, обработанных MNNG (III и IV, соответственно), развитие доброкачественных или злокачественных поражений было связано со значительным увеличением числа тучных клеток в антральном отделе желудка по сравнению с не-денервированного группы (Я). В слизистой оболочке и подслизистой слоев, значительное увеличение тучных клеток в не денервированными или денервированными группы обрабатывали MNNG, (III и IV) было связано с увеличением интактных и дегранулированных клеток (рис. 4б). В мышечный слой, это увеличение было в основном связано с большим числом неповрежденных тучных клеток (рис. 4в). Рисунок 4 Количественный анализ тучных клеток в желудке. Данные представляют собой среднее значение ± S.E.M шестидесяти полей анализируемых на животное, как описано в материалах и методах. Non-денервированная (I) и денервированная желудка (II) без поражений. Non-денервированная (III) и денервированная желудка (IV) с поражением. Non-злокачественная опухоль (NT). Злокачественные опухоли (МТ). A)
Общее количество тучных клеток в фрагменте желудка. * P &л; 0,05 по сравнению с группой I. # P < 0,01 по сравнению с другой экспериментальной группы. В и С)
неповрежденными и дегранулированных тучных клеток в слизистый, подслизистый и мышечный слои. * P &л; 0,05 по сравнению с группой I; #P &Л; 0,05 по сравнению с другой экспериментальной группы; δ P &л; 0,05 по сравнению с группой III - NT (неповрежденными тучные клетки); &Amp; P &л; 0,05 по сравнению с группой III - NT (дегранулированных тучные клетки). C)
неповрежденными и дегранулированных тучных клеток в мышечном слое. * P &л; 0,05 по сравнению с группой I; # P &л; 0,05 по сравнению с группой II.
Фенотипических анализ тучных клеток
Для фенотипической характеристики тучных клеток он использовался метод Альциановый Blue-Safranin (AB-SAF). У животных не-денервированными (I) и денервированными (II) группы, была Преобладание тучных клеток АВ положительный (АВ +) в слоях слизистой и подслизистой оболочки антрального отдела желудка, характеризующие эти клетки как через слизистую оболочку тучных клеток (ММС) (рис. 5А и 5В). В экспериментальных группах, получавших MNNG (III и IV), высокая доля АВ + и AB-SAF + тучные клетки подтипа наблюдались, последний в основном в денервированного группе (IV) (рис. 5C и 5D). Фрагменты желудка антрального содержащий брыжейки, были использованы для подтверждения присутствия SAF + клеток, характеризующее соединительной ткани тучных клеток (СТМС) этим методом окрашивания (рис. 5E и 5F). Рисунок 5 фенотипических анализ тучных клеток желудочного фрагмента. А и Б)
подслизистого слоя не-денервированная (группа I) и денервированная (группа II), желудок, показывая тучные клетки с цитоплазматическими гранулами положительными к Альциановый-синего (стрелки), характеризуя слизистую оболочку тучных клеток фенотипа - в деталях панели A . C и D)
Две мачты клеточной популяции отмечены в желудочных поражений не-денервированная (группа III) и денервированными (IV группа) желудков: альциан-синих положительных тучных клеток (черные стрелки) и альциан-синий /сафранином позитивные клетки мачты (красные стрелки). E и F)
Тучные клетки с Safranin положительных гранул (стрелки) наблюдаются в брыжейки, характеризующие тучные клетки соединительной ткани. Альциановый-синий /метод Safranin. Барс: 10 мкм (рис A-F.); 5 мкм (подробно рис. A)
.
Общее количественное определение трех подтипов тучных клеток (AB +, AB-SAF + и SAF +) подтвердили морфологические наблюдения, показывая преобладание АВ + клеток в пиларическим фрагменте во всех экспериментальных группах (таблица 2). В не денервированными и денервированными группах, получавших MNNG (III и IV, соответственно), эта ячейка подтип значительно увеличилась по сравнению с не-денервированного группы (I). В денервированными желудках обработанных MNNG (группа IV), субклеточном AB-SAF + также была значительно увеличена при злокачественных поражений по сравнению с поражениями, не денервированного группе, получавшей MNNG (III) .table 2 Плотность тучных клеток с различными фенотипами в антральном желудка.
<й>
пилорического Фрагмент

Группы

AB +
<бр> SAF +

AB + SAF +

I
8 ± 2
1 ± 1
4 ± 1
II
14 ± 4 ± 3
1
13 ± 10
III - НТ
49 ± 16 * 5 ±
2
11 ± 4
III - MT
23 ± 4 ***
4 ± 2
13 ± 5
IV - NT
28 ± 5 ***
2 ± 1
23 ± 8
IV - MT
36 ± 8 **
± 10
47 ± 12 &Amp;
Гистологический препарат проводили, как описано в разделе Материалы и методы
. Значения (количество клеток на мм2) выражены как среднее ± SEM из 60 полей анализируемых на животное с целью высокой мощности (40 ×). Альциановый-синий
(АВ +), Safranin (SAF +) и alcin-синий
/Safranin положительных клеток (AB + SAF +). * P &л; 0,05 по сравнению с группой I; # P &л; 0,01 по сравнению с III - NT и - МТ; &Amp; P &л; 0,05 по сравнению с II.
Анализ различных подтипов тучных клеток в слоях слизистой и подслизистой оболочки привратника фрагментов показали значительное увеличение тучных клеток АВ + только у животных с доброкачественной опухолью (таблица 3). В денервированными желудках обработанных MNNG (группа IV), популяция тучных клеток АВ-SAF + увеличилась по сравнению с другими экспериментальными группами, значима для злокачественных новообразований. Мышечный слой показал другой профиль фрагмента в целом, и денервированными желудках без и с неоплазии (группы II и IV) показали преобладание тучных клеток AB-SAF +. Ни в одной группе учился, число клеток SAF +, которые характеризуют СТМС, обгоняла другую ячейку subtypes.Table 3 Распределение тучных клеток с различными фенотипами в слоях желудочного антрума.
<й>
гистологического слоев

<й>
слизистой оболочке и подслизистой

Мышечная

Группы

AB +

SAF +

AB + SAF +

AB +

SAF +

AB + SAF +

I (Control)
7 ± 2
0 ± 0 ± 3
0
1 ± 0
1 ± 1 ± 2
1
II
12 ± 4
0 ± 0 ± 2

1 2 ± 1
2 ± 1
11 ± 9
III - NT
40 ± 14 *
1 ± 1
4 ± 1
8 ± 3 *
3 ± 2
7 ± 3
III - MT
12 ± 2
0 ± 0 ± 3
1
11 ± 3 *
4 ± 1
10 ± 4
IV - NT
19 ± 3 **
1 ± 0,6
12 ± 8 <бр> 9 ± 3 *
1 ± 0
18 ± 7
IV - MT
27 ± 10
9 ± 8
25 ± 8 # &ампер;
9 ± 2 ** π
3 ± 2
22 ± 9
Гистологический препарат проводили, как описано в материалы и методы
. Значения (количество клеток на мм2) выражены как среднее ± SEM из 60 полей анализируемых на животное с целью высокой мощности (40 ×). Альциановый-синий
(АВ +), Safranin (SAF +) и alcin-синий
/Safranin положительных клеток (AB + SAF +). * P &л; 0,05 по сравнению с группой I; # &Л; 0,05 по сравнению с I и III-МТ; &Amp; P &л; 0,01 по сравнению с II; π P &л; 0,05 по сравнению с II.
Обсуждение
В этом исследовании было исследовано гистопатологические изменения и распределение внеклеточного матрикса (ECM) фибриллярных компонентов и тучные клетки в пилорической желудков крыс, не денервированными или денервированная хлоридом бензалкония (БАК) и, необработанный или обрабатывали канцерогена N-метил-N 'нитро-N-нитрозогуанидином (MNNG).
Информация Первоначально гистопатологическая и стереологическая анализ показал никаких изменений в относительном объеме эпителиального и стромальных отсеков в пилорических фрагменты из не-денервированная (I группа) и денервированные желудки (группа II). Тем не менее, исследование фибриллярных компонентов ECM в этих образцах показало, что BAC денервация вызывает увеличение частоты ретикулярных и упругой системы волокон в денервированного слизистой оболочки желудка (группа II) по сравнению с не денервированная (группа I), о чем свидетельствует гистохимических и стереологическая анализ с использованием Гомори ретикулин и резорцин-фуксином окрашивание Вайгерт в соответственно. Вероятно, отсутствие сократительной стимуляции, вызванное мышечной оболочки кишечника денервации в этих фрагментов (группа II), способствуют увеличению синтеза ретикулярных и эластических волокон клетками гладких мышц и /или новой ассоциации волокон в строме в качестве механизма для адекватного перистальтический координация волны, а также для предотвращения застоя в органах денервированными [32-34].
лечения доброкачественных денервированная (группа III) и денервированного (группа IV) животные с MNNG индуцированное развитие злокачественных опухолей (аденокарциномы), доброкачественная опухоли (аденоматозные полипы) и предраковых поражений (дисплазии и атрофический гастрит). Развитие аденокарциномы, основанных на неприменении денервированными и денервированными желудках смог способствовать значительное увеличение относительного объема стромы отсека. Во время развития опухоли в простате или слизистую оболочку желудка, взаимодействие строма /эпителий нарушается и ввел новое условие, связанное с морфологическими изменениями компонентов внеклеточного матрикса и роста опухоли [35]. Пролиферация эпителиальных клеток в обоих злокачественных и доброкачественных поражений вызывает изменения, расположенные в железе, с последующим фокальной ремоделировании фибриллярных компонентов внеклеточного матрикса [27].
В этом аспекте гистохимических анализ показал значительное увеличение на ретикулярные волокна аденокарциномы (III группа) по сравнению с не-денервированными желудках без поражений (группа I). Увеличение стромальных коллагеновых волокон представляет собой механизм, с помощью которого опухолевые клетки могли избежать "атаки" Т-лимфоцитов (CD8 +) и индуцируют апоптоз, который будет выступать в качестве барьера для проникновения CD8 + [ ,,,0],36]. Несмотря на не значительное изменение на упругой системе, наблюдалось нарушение этих волокон в аденокарциномы не-денервированными желудка (группа III), с наличием тел упругих элементов фракционированных, что указывает на деградацию или ремоделирование стромы в ответ травмы под действием опухолевых клеток. Эти изменения в системе упругих волокон были одновременно с перепланировкой коллагеновых волокон, также наблюдается в простатическими поражений [37] и в простатической стромы во время этой регрессии железы следующие кастрации [38, 39]. Согласно этим результатам, агрессивная опухоль может быть оценена с помощью волокнистых компонентов матрицы.

• Как трассеры следует вводить для обнаружения для индикаторных узлов при раке желудка - подслизистый изнутри …
• Клинико-патологические характеристики и исходы лечения аденокарциномы напоминающий печеночную ткань желуд…