Vaikutukset myenteeri- denervation on soluväliaineen kuitujen ja syöttösolujen jakelu normaalissa vatsassa ja mahavaurioita

Vaikutukset myenteeri- denervation on soluväliaineen kuitujen ja syöttösolujen jakelu normaalissa vatsassa ja mahavaurioita
tiivistelmä
tausta
Tässä tutkimuksessa vaikutusta myenteeri- denervation aiheuttama bentsalkoniumkloridin (BAC) jakamisesta säikeisen komponenttien soluväliaineen (ECM) ja tulehdussolujen tutkittiin mahasyövän indusoitu N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiini (MNNG). Rotat jaettiin neljään koeryhmään: non-denervated (I) ja denervated mahan (II) ilman MNNG hoitoa; ei-denervated (III) ja denervated vatsat (IV), joita hoidettiin MNNG. Histopatologista, histokemiallisen ja stereologiamenetelmää analyysi, osa mahalaukun fragmenttien värjättiin hematoksyliinillä-Eosiini, Picrosirius-hemato-, Gomori retikuliinin, Weigert n resorsinoli-Fuchsin, Toluidine Blue ja Alcian-Blue /Safranin (AB-SAF).
Tulokset
BAC denervation aiheuttaa lisää taajuus reticular ja elastisia kuituja denervated (ryhmä II) verrattuna ei-denervated vatsat (ryhmä I). Hoito eläinten kanssa MNNG aiheuttama kehittämistä adenokarsinooman kuin denervated ja denervated vatsat (III ja IV), niin että huomattava kasvu suhteellinen määrä strooman, taajuus reticular kuitujen ja tulehdussuodoksen joka oli voimakkaampi ryhmässä IV. Nostamalla taajuus joustavien kuitujen havaittiin adenokarsinoomat denervated (ryhmä IV) verrattuna ei-denervated vatsat (ryhmä III), joka osoitti hajoaminen näiden kuitujen. Kehittäminen vaurioiden (III ja IV) liittyi myös kasvuun mastsolun väestön ja erityisesti AB ja AB-SAF positiivisia, jälkimmäinen lähinnä denervated ryhmässä IV.
Johtopäätökset
Tulokset osoittavat vahva yhdistys morfologinen muutos ECM säikeisen komponentteja, lisääntynyt tiheys syöttösolut ja kasvainten kehittymisen aiheuttama MNNG ei-denervated rotan mahan tai denervated BAC. Tämä viittaa siihen, että tutkimus solunulkoisten ja solunsisäisten komponenttien kasvaimen mikroympäristön edistää ymmärrystä tuumoribiologiassa toimilla on myenteeri- denervaatio.
Taustaa
vuorovaikutus kasvainsolujen ja ympäröivän strooman on yksi tärkeimmistä näkökohdista mekanismi kasvainsoluproliferaation ja invaasiota [1]. Kasvain solut eivät uudistaa soluväliaineen (ECM), monimutkainen seos kuitujen (kollageeni, reticular ja joustava) ja kentällä aine, joka tarjoaa solu tukea [2], helpottaa viestintää ja karkaamisen valvonnan microenvironment [3]. Kollageeni fibrillar järjestelmä toimii tukeva kehys kudosten, jossa reticular kuidut yhteyden kollageenisäikeiden pohjapinta lamellit epiteelin, lihas- ja rasvasolujen; mikrofibrilliaggregaattien-elastiini järjestelmä on rooli yhtenäisessä jakautumisessa stressi säilyttää sietokykyä paikalliseen kudokseen vaatimuksiin [4].
rakenne- ja funktionaalinen eheys kollageenin säikeisen ja mikrofibrilliaggregaattien-elastiinin järjestelmät ovat tärkeitä vatsan pakata elintarvikkeita, erittää entsyymejä ja happoja rikkoa raaka ravinteita ja siirtää seoksen ohutsuolessa. Kolme tehtävät riippuvat ulkoista (sympaattinen ja parasympaattisen jakolinjat autonomisen hermoston) ja luontainen hermotuksen (enteerinen hermosto - ENS). Pääkomponentit ENS ovat kahden verkon tai punokset neuronien ja hermoston Kuitujen myenteeri- ja limakalvon alaista plexus [5]. ENS merkitys sääntelyn ruoansulatuskanavan toiminnot havaitaan jälkeen paikallisesti kationisen pinta-aktiivisen aineen, bentsalkoniumkloridia (BAC), jonka serous kerros, joka johtaa osittaiseen ja valikoiva tuhoutuminen myenteeri- plexus neuronien [6]. Korrelaatio karsinogeneesiin ja ENS on osoitettu kokeellisissa malleissa käyttäen myenteeri- denervation BAC ja induktio kasvainten N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiini (MNNG) [7] ja 1,2-dimetyylihydratsiinia ( DMH) [8] kanssa esiintyminen väheni ja koko maha-suolikanavan kasvaimia.
Immuunijärjestelmän solut ovat tehokkaita lähteitä paracrine signaalien ENS. Erityisen enteerisen syöttösolut sijaitsevat strategisesti ja ovat voimakkaita farmakologisia välittäjäaineita, jotka toimivat edessä immunologisia ärsykkeitä, jotka voivat vaikuttaa eheys ruoansulatuskanavassa [9]. Vasta-aineen sitoutuminen syöttösolut tekee niistä pystyy tunnistamaan spesifisiä antigeenejä ja signaalin niiden läsnäolo ENS. ENS puolestaan ​​tulkitsee kemiallisia signaaleja syöttösolujen uhkana ja pyritään poistamaan se, mikä tarjoaa suojaava vaste [9]. Läsnäolo syöttösolujen on kuvattu useissa neoplasioihin, pro tai anti-kasvain rooleja niiden bioaktiivisia välittäjäaineita vapautuu vaikutuksen kasvaimen microenvironment [10-12]. Toiminnan pro-kasvain välittäjäaineiden, kuten histamiini, tryptaasi- ja kymaasi voivat edistää muuttoliikettä ja soluproliferaatiota indusoimaan adheesiomolekyylien endoteelisoluissa ja näin aktivoivan prosessin tuumoriangiogeneesin, etäpesäke ja leviämisen [13-15]. Toisaalta, joissakin sytokiinit, kuten interleukiini (IL) -2, -21, tuumorinekroositekijä (TNF) ja hepariinia vapautuu syöttösoluista, voi toimia syövän vastaisina aineina estämällä niiden kasvua [16, 17].
useat tutkimukset ovat osoittaneet, että aikana syövän synty on lisääntynyt määrä syöttösolujen, havaittiin neurofibromas, lipomas, hemangiomas, kasvaimia lisämunuaisen ja iho [18], levyepiteelikarsinoomien [19], kurkunpään levyepiteelisyöpä [20] ja mahakarsinoomat [21]. Mahalaukun adenokarsinoomat, pienten sisällön vapautumista tallennettu sytoplasman rakeet syöttösolujen liittyi muutoksia microvascular tyvikalvo, mukaan lukien epäsäännölliset paksuus, useita kerroksia ja heikko yhdessä endoteelisolujen ja perisyyteissä, jotka edistävät remodeling verisuonten [22]. Kirurgisen poiston jälkeen mahalaukun syövän, selviytymisen tutkimukset osoittivat, että potilailla, joilla on lisääntynyt syöttösolujen lukumäärä oli huonompi ennuste kuin potilailla, joilla on alhainen määrä niitä.
Tarkoituksena Esillä olevan tutkimuksen tarkoituksena oli määrittää vaikutus kemiallisten ablaatio myenteeri- neuronien jakamisesta soluväliaineen kuidut ja syöttösoluissa mahan limakalvon ei-denervated ja denervated vatsat, ja malli mahasyövän aiheuttama MNNG rotilla.
Materiaali ja menetelmät
Koejärjestely
neljä koeryhmään arvioitiin. Ryhmät I (n = 5) ja II (n = 5) ei-denervated ja denervated vastaavasti ole läsnä mahalaukun kasvaimet; ryhmien III (n = 10) ja IV (n = 10) ei-denervated ja denervated vastaavasti läsnäolo mahalaukun kasvaimet. Fragments of mahanportin alueella (antrum) vatsaan Tässä tutkimuksessa käytetyt saatiin suorittamien tutkimusten POLLI-LOPES et al. [7]. Kokeelliset menettelyt suoritettiin mukaisesti sääntöjen komitean hoito ja Käyttää Laboratory Animals of National Research Council on N.I.H. (USA) ja eettinen komitea eläinten koe (CEEA) of FAMERP (pöytäkirjan nro 6193/2008), São José do Rio Preto, SP.
Eläimet
Wistar
rotat painottamalla 100 150 g, saatu eläin laitoksen School of Medicine Ribeirão Preto, Brasilia, asutettiin (4 eläintä per häkki), kun lämpötila on 23 25 ° C, ja sai ruokaa ja vettä mielin määrin
.
Mahalaukun denervation
eläimet nukutettiin im ketamiinihydrokloridilla ja tiatsiini kloridia (0,15 ml /0,05 ml /100 g painoa) [23]. Vatsassa Kunkin eläimen exteriorized keskilinjan ylävatsan laparotomian ja eristetty vatsaontelon kautta pieni fenestration muovisessa arkin aiheen soveltamista 0,6% BAC (v /v) (Aldrich Chemical Co. laimennettiin suolaliuokseen (0,9% NaCl) [7, 24]. eristetty mahat kiedottiin sideharsolla kasteltu BAC tai suolaliuoksella ja pidettävä kosteana 30 min [6, 7, 24]. herakalvon pinta vatsat pestiin huolellisesti suolaliuoksella, elimet palautettiin niiden anatominen paikalleen ja vatsan ommeltiin. eläimiä pidettiin muovisissa häkeissä (4 eläintä /häkki) kontrolloidussa lämpötilassa, ja sai ruokaa ja vettä mielin määrin
.
induktio neoplasioihin mahalaukun antrumlimakalvolla
kuusitoista viikkoa leikkauksen jälkeen eläimet ryhmien III (ei-denervated) ja IV (denervated) nautitaan liuos, jossa oli N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiini (MNNG) (Aldrich Chemical Co., Inc., Milwaukee, WI) liuotettuna tislattuun ja deionisoituun veteen pitoisuutena 100 mg /L 28 viikkoa. Eläimet tapettiin kaksi kuukautta sen jälkeen, kun viimeinen saanti MNNG ja vatsat kerättiin morfologinen analyysi.
Morfologinen ja kvantitatiivisen analyysin
Soluväliai- kuituja
Fragments of mahanportin alueella vatsan (antrumiin) kiinteään 4% puskuroituun formaliiniin 12 tuntia, pestään vesijohtovedessä, dehydratoidaan etanolin sarjaan ja upotettiin parafiiniin. Sillä soluväliaineen tutkimuksessa, osat 4 pm paksu värjättiin hematoksyliinillä-eosiinilla [25], Picrosirius-hemato- [26] ja Gomori retikuliinin [27] histopatologista analyysiä, ja kollageenin ja verkkomainen kuituja arvioinnin osalta. Kuidut elastisen järjestelmän tutkittiin käyttämällä Weigert n resorsinoli-Fuchsin joka selektiivisesti värjää sekä elastinen ja elaunin kuidut (jäljempänä oxytalan kuidut pysyvät värjäämätön, koska niitä ei ole aiemmin hapetetaan tässä tutkimuksessa) [28]. Näytteet analysoitiin Olympus BX60 valomikroskoopilla (Olympus, Hampuri, Saksa) ja mikroskooppikentäs- oli digitalisoitu käyttäen Image-Pro Plus versio 4.5 for Windows-ohjelmiston (Media Cybernetics, Silver Springs, MD). Viisi sattumanvaraisesti alueita mahalaukun limakalvon analysoitiin käyttämällä x 20 tavoite, ja kalibrointi tehtiin käyttäen Olympus arvostellaan mikroskooppisesti. Kvantitatiivinen analyysi määritettiin menettelyn mukaisesti on Weibel [29], verkolla testijärjestelmä 168 pistettä ja 84 testi linjat, verrata suhteellista äänenvoimakkuutta (prosentteina) mahalaukun limakalvon osastot (epiteelin, strooman ja toiset osastot, lukuunottamatta epiteelin ja strooman) varten hematoksyliini-eosiini värjäystä ja suhteellinen tiheys reticular ja elastiinisäie jakelu (prosentteina) varten Gomori retikuliini- ja Weigert n resorcin- Fuchsin värjäystä, vastaavasti. Arvot ilmoitetaan keskiarvona ± SEM suhteellinen määrä (prosentteina) mahalaukun limakalvon osastojen ja keskiarvo ± SEM suhteellinen tiheys reticular ja elastiinisäie jakelu (prosentteina).
Syöttösoluille
Analyysi syöttösolut mahan antrum suoritettiin osissa värjättiin Toluidine Blue 0,5% kvantifiointiin ehjät ja degranulated soluja ja, Alcian-Blue-Safranin (AB-SAF) kvantifiointiin limakalvon ja sidekudoksen syöttösolut [30, 31]. Tätä tarkoitusta varten, kuusikymmentä satunnaisesti alueita mahalaukun limakalvon analysoitiin, eläintä kohti, ja Olympus valomikroskoopilla (Olympus, Hampuri, Saksa) käyttäen x 12,5 /16 millimetrin silmä- ja × 40 teho tavoite (ZEISS, Saksa) . Arvot ilmoitetaan keskiarvona ± SEM solujen määrä per mm 2.
Tilastollinen analyysi
Tiedot analysoitiin käyttäen Statistica 6.0 -ohjelmisto (StarSoft, Inc., Tulsa, OK). Tiedot esitetään keskiarvona ± SEM ja toimitettiin Studentin t
testiä ja yksisuuntaista Varianssien (ANOVA), ja sen jälkeen Tukey-Kramer monivertailuja testi tai Bonferroni. Erot arvojen P
< 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
Histopatologisten ja histokemiallinen analyysi rotan mahat
Aluksi mahanportin fragmentteja kuin denervated ja denervated vatsat mukaan bentsalkoniumkloridia (BAC) (ryhmät I ja II, vastaavasti) tutkittiin . Analyysi fragmentteja ryhmän II osoittivat, että myenteeri- denervation ei muuttanut määrä ja jakauma meshwork kollageenin kuidut, jotka ympäröivät mahanportin rauhaset verrattuna ryhmään I (Fig. 1A ja 1B). Tämä tulos vahvistettiin Picrosirius-hematosykliiniväriä (Fig. 1 E ja 1 F) sekä kvantitatiivisen analyysin suhteellisesta tilavuudesta epiteelin ja strooman mahalaukun limakalvon molemmista ryhmistä (Fig. 1 I ja 1J). Kuvio 1 histologinen analyysi rotan mahat. A, B, E ja F) B Mahaportin maharauhanen (g), jota ympäröi strooman kollageeni kuidut (s) havaittiin limakalvon kerros ryhmien I ja II. Epiteelin (ep). Mahalaukun kuoppia (f). Muscularis mucosa (m). C, D, G ja H) B-Mahaportin maharauhanen (g) muodostuu kasvainsolujen käytössä suurin alue mahalaukun limakalvon ryhmien III ja IV. Kertymistä PMN (nuolet) havaittiin sisällä rauhaset. Hematoksyliini-eosiini (A-D); Picrosirius-Hematoksiliini (E-H). Bars: 20 pm. I-L
) Tissue osastoja (epiteelin, strooman muut) määriä mahan mahanportin limakalvon. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM prosenttiosuus suhteellinen määrä. Ryhmät ilman vaurioita (I ja II) esitteli korkea suhteellinen määrä epiteelin (p < 0,05) verrattuna ryhmiin, joiden leesiot (III ja IV). Läsnäolo adenokarsinooma ryhmissä III ja IV johti merkittävään kasvuun (p < 0,05) stroomamääriin verrattuna ryhmiin I ja II.
Kuin denervated ja denervated vatsat käsiteltiin MNNG (III ja IV, vastaavasti) esitetään muutokset kudosrakenne ja järjestely kuitujen soluväliaineen ja kasvua halkaisija mahaportin rauhasia sekä suhteellinen määrä strooman (Fig. 1 C, D, G ja 1 H). Hoito MNNG aiheuttama kehittämistä hyvänlaatuisia ja pahanlaatuisten kasvainten, erityisesti adenomatous polyypit ja adenokarsinoomia (Fig. 1 C ja 1G) ei-denervated vatsat (ryhmä III). Eläimet, joissa denervated vatsat ja käsiteltiin MNNG (ryhmä IV) kehitti syövän esiasteita ja malign kasvaimia ominaista dysplasia, atrofinen gastriitti ja adenokarsinooman (Fig. 1 D ja 1 H). Molemmissa ryhmissä, stroomaan adenokarsinoomien rikastettiin läsnäolo tulehdussolujen, kuten syöttösolut, neutrofiilit, plasma ja lymfosyyteissä, joka osoittaa immunologisen vasteen neoplasiat (Fig. 2). Kuitenkin uudisvaurioiden ryhmässä IV olivat pienempiä ja vähemmän aggressiivisia profiilit verrattuna III, ja tulehdussuodoksen lokalisoitu kasvain strooman oli voimakkaampi, varsinkin eläimillä että kehitetty adenokarsinoomia (Fig. 2D). Kuva 2 histologinen analyysi adenokarsinooma aiheuttama MNNG hoitoa. A ja B) B Morfologiset näkymä adenokarsinooma (AD) ei-denervated (ryhmä III) ja denervated mahaan (ryhmä IV). Lihaksikas kerros (M). Intense tulehduskeräytymää (In). C ja D) B Yksityiskohta tulehdussuodoksen kasvaimen strooman koostuu syöttösolujen (mustat nuolet), neutrofiilien (nuolenpäät), lymfosyytit (vihreät nuolet) ja plasman soluja (punaiset nuolet). Toluidiini Blue. Bars: 100 um (Fig. A ja B), 10 um (Fig. C ja D)
.
Histochemical analyysi mahaportin osien suoritettiin Gomori retikuliini- ja Weigert n resorsinoli-Fuchsin värjäys tutkia jakelun ( taajuutta) reticular ja joustava kuituja strooman, vastaavasti. Osiot toimitti molempia menetelmiä paljastui samanlainen jakauma meshwork kuidut, jotka ympäröivät mahanportin rauhasten mahat ryhmistä I ja II (Fig. 3A, B, E ja 3F). Non-denervated tai denervated vatsat käsitelty MNNG (III ja IV, vastaavasti), ilmeisesti esitteli lisääntynyt määrä reticular kuituja (Fig. 3C ja 3D) ja paksu ja lyhyt joustavien kuitujen erittäin sekavaa (Fig. 3G ja 3H) kun adenokarsinoomat verrattuna niiden kontrolliryhmiin (ryhmät I ja II, vastaavasti). Kuva 3 Histokemiallinen analyysi retikulaarisen (A-D) ja elastisia kuituja (E-H) rotan vatsat. A ja B) B Ryhmät I ja II esitetään reticular kuituja suoralinjainen ja linjassa (nuolet) ympäröivän epiteelin (ep) ja strooman (s). C ja D) B Reticular kuidut (nuoli) purkamisesta ja ilmeisesti densest juuressa (nuolenpäät) rauhasten (g). Kollageeni kuidut kertymistä välillä rauhaset (*) havaittiin. E ja F)
rauhaset mukana on herkkä web elastisia kuituja (nuoli) ja intensiivisemmin merkitty E. G ja H) B lisääntyminen paksuuden näiden kuitujen, häiriöiden ja pirstoutumisen fibrillar muuttujien ryhmitelty massat elastiinin (nuolet) voidaan havaita noin rauhaset (g) verrattuna niiden kontrolliryhmiin (I ja II). Gomori n hopea (A-D); Weigert n resorsinoli-Fuchsin (E-H). Bars: 10 um
.
Kvantitatiivinen analyysi verkkomainen kuitujen vahvisti lisäys tämän ekstrasellulaarisen komponentin adenokarsinoomat havaittu ryhmien III ja IV, ja osoitti myös odottamaton merkittävä kasvu limakalvojen denervated mahaan (ryhmä II ) verrattuna ryhmään I (taulukko 1). Huolimatta ilmeinen kasvu elastisia kuituja stroomaan ei-denervated ja denervated eläimiä käsiteltiin MNNG (ryhmät III ja IV, vastaavasti), ei ole tilastollista eroa ei havaittu niiden jakelua verrattuna kontrolliryhmiin (I ja II) (taulukko 1) . Sitä vastoin myenteeri- denervation indusoi merkittävää kasvua joustavien kuitujen mahalaukun stroomaa ryhmien II ja IV verrattuna ei-denervated mahat ryhmistä I ja III (taulukko 1). Mitään merkittävää eroa havaittiin kollageenin ja elastiinisäie jakautuminen ei-vahingollinen ja pahansuopa vauriot stromas ryhmien III ja IV.Table 1 stereologiamenetelmää arviointi vaikutuksista myenteeri- denervaatio vuonna mahalaukkua.

suhteellinen frekvenssijakauma kuitujen (%) 1
Ryhmät
Kollageeni System
joustolaitteineen
I
16.87 ± 0,5
13,27 ± 0,5
II
24,06 ± 1,5 *
19,4 ± 0,6 *
III - NT
21,8 ± 0,9
11,2 ± 0,6
III - MT
25,71 ± 0,5 *
11,1 ± 0,4
IV - NT
21,2 ± 1,6
20,2 ± 1,7 &
IV - MT
26,87 ± 1,5 *
19 ± 0,7 &
Histologinen valmistamiseksi suoritettiin, kuten on kuvattu Materiaalit ja menetelmät
. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM prosentteina suhteessa taajuuden kuituja. Non-parjata kasvain (NT); parjata kasvain (MT). 1 Tilastollinen analyysi perustuu ANOVA, jonka jälkeen korjaus Tukey-Kramer. * P < 0,05 vs. ryhmä I; &Amp; P < 0,05 vs. ryhmä III.
Kvantifiointi maston solujen sirpaleet mahanportin alueella mahassa
Syöttösoluille analysoitiin ja mitattujen limakalvon, limakalvon alaista ja lihaksikas kerroksia kaikissa koeryhmissä. Analyysi kokonaismäärästä solua per mahalaukun fragmentti ei osoittanut mitään merkittävää eroa ei-denervated (I) ja denervated (II) ryhmät (Fig. 4A). Kuitenkin ei-denervated tai denervated ryhmiä käsiteltiin MNNG (III ja IV, vastaavasti), kehittäminen hyvänlaatuisia tai pahanlaatuisia leesiot liittyy merkittävä kasvu syöttösolujen lukumäärä mahan antrum verrattuna ei-denervated ryhmä (I). Vuonna limakalvon ja limakalvon alaista kerrosta, merkittävää lisäystä syöttösolut ei-denervated tai denervated ryhmiä hoidettiin MNNG, (III ja IV), nähtiin kasvoi ehjä ja degranulated soluja (Fig. 4B). Lihaksen kerros, tämä lisäys oli lähinnä liittyy suuri määrä ehjiä syöttösolujen (Fig. 4C). Kuvio 4 kvantitatiivinen analyysi syöttösolut vatsassa. Tiedot edustavat keskiarvoa ± SEM kuusikymmentä kentät analysoitu eläintä kohti kuten on esitetty materiaalit ja menetelmät. Non-denervated (I) ja denervated vatsan (II) ilman vaurioita. Non-denervated (III) ja denervated mahan (IV) kanssa vaurioita. Non-pahanlaatuinen kasvain (NT). Pahanlaatuinen kasvain (MT). A)
kokonaismäärä syöttösolut mahalaukun fragmentti. * P < 0,05 vs. ryhmä I # P < 0,01 vs. toinen koeryhmään. B ja C) B Ehjä ja degranulated maston solujen limakalvon, limakalvon alaista ja lihaksikas kerroksia. * P < 0,05 vs. ryhmä I; #P ≪ 0,05 vs. toinen koeryhmään; δ P < 0,05 vs. ryhmä III - NT (ehjät syöttösoluista); &Amp; P < 0,05 vs. ryhmä III - NT (degranulated syöttösoluja). C) B Ehjä ja degranulated masto solut lihaksiston kerrokseen. * P < 0,05 vs. ryhmä I; # P < 0,05 vs. ryhmä II.
Fenotyyppinen analyysi syöttösolut
Sillä fenotyyppinen karakterisointi syöttösolujen sitä käytettiin menetelmää Alcian Blue-Safranin (AB-SAF). Eläimillä ei-denervated (I) ja denervated (II) ryhmät, oli vallitsevana syöttösolujen AB positiivinen (AB +) limakalvon ja limakalvon alaista kerrosta mahalaukkua, jotka kuvaavat näiden solujen limakalvon syöttösoluista (MMC) (Fig. 5A ja 5B). Kokeellisessa ryhmissä käsiteltiin MNNG (III ja IV), suuri osuus AB + ja AB-SAF + syöttösoluista alatyyppejä havaittiin, jälkimmäinen lähinnä denervated ryhmässä (IV) (Fig. 5C ja 5D). Fragments of mahalaukkua sisältävän suoliliepeen käytettiin vahvistaa läsnäoloa SAF + soluja, jotka kuvaavat sidekudoksen syöttösolu (CTMC) tällä menetelmällä värjäytymisen (kuvio. 5E ja 5F). Kuva 5 fenotyypin analyysi syöttösoluista mahalaukun fragmentti. A ja B) B Submukosaalinen kerros kuin denervated (ryhmä I) ja denervated (ryhmä II) vatsan osoittaa syöttösoluista kanssa soluliman rakeita positiivinen alcian sininen (nuolet), kuvaavat limakalvon syöttösolukasvainten fenotyyppi - yksityiskohtaisesti paneeli A . C ja D)
Kaksi syöttösolujen populaatio mainitaan raportin mahavaurioita kuin denervated (ryhmä III) ja denervated (ryhmä IV) mahat: Alcian-blue positiivisia syöttösolujen (mustat nuolet) ja Alcian-blue /safraniinin positiiviset syöttösoluista (punaiset nuolet). E ja F) B Syöttösoluille safraniini positiivisia jyväsiä (nuolet) havaitaan suoliliepeen, luonnehtia sidekudoksen syöttösolut. Alcian-sini /Safraniini menetelmällä. Bars: 10 um (Fig. A-F); 5 um (yksityiskohta Fig. A)
.
Yhteensä määrällisesti kolme alatyyppiä syöttösolujen (AB +, AB-SAF + ja SAF +) vahvisti morfologiset havainnot, osoittavat vallitsevana AB + solujen mahaportin fragmentti kaikissa koeryhmään (taulukko 2). Ei-denervated ja denervated ryhmiä käsiteltiin MNNG (III ja IV, vastaavasti), tämä solu alatyypin kasvoivat merkittävästi verrattuna ei-denervated ryhmä (I). Vuonna denervated vatsat käsiteltiin MNNG (ryhmä IV), subsellulaarinen AB-SAF + oli myös merkitsevästi lisääntynyt pahanlaatuisten vaurioiden verrattuna vaurioita ei-denervated ryhmä hoidettiin MNNG (III) .table 2 tiheys syöttösoluista eri fenotyyppien mahalaukkua.

Mahaportin katkelma
Ryhmät
AB +

SAF +
AB + SAF +
I
8 ± 2
1 ± 1
4 ± 1
II
14 ± 4
3 ± 1
13 ± 10
III - NT
49 ± 16 *
5 ± 2
11 ± 4
III - MT
23 ± 4 ***
4 ± 2
13 ± 5
IV - NT
28 ± 5 ***
2 ± 1
23 ± 8
IV - MT
36 ± 8 ** #
13 ± 10
47 ± 12 &
Histologinen valmistamiseksi suoritettiin, kuten on kuvattu Materiaalit ja menetelmät
. Arvot (solujen lukumäärä per mm2) esitetään keskiarvo ± SEM 60 kenttää analysoitu eläintä kohti on suuritehoinen tavoite (40 x). Alcian-blue
(AB +), safraniinin (SAF +) ja alcin-sininen Twitter /safraniinin positiivisia soluja (AB + SAF +). * P < 0,05 vs. ryhmä I; # P < 0,01 vs. III - NT ja - MT; &Amp; P < 0,05 vs. II.
Analyysi eri alatyyppejä maston solujen limakalvon ja limakalvon alaista kerrosta mahaportin fragmenttien osoitti merkittävää lisäystä syöttösolujen AB + vain eläimillä, joilla on hyvänlaatuinen kasvain (taulukko 3). Vuonna denervated vatsat käsiteltiin MNNG (ryhmä IV), populaatio syöttösoluista AB-SAF + lisääntynyt verrattuna muihin koeryhmään, kannalta tärkeinä pahanlaatuinen kasvain. Lihas kerros osoitti erilaista profiilia fragmentti kokonaisuutena, ja denervated vatsat ilman ja neoplasia (II ja IV) osoitti vallitsevana syöttösolujen AB-SAF +. Kummassakaan ryhmässä tutkittiin, solujen lukumäärä SAF +, jotka luonnehtivat CTMC, ohitti muut solun subtypes.Table 3 jakautuminen syöttösolujen eri fenotyypit kerrosten mahalaukkua.

Histologinen Tasot

limakalvon ja submukoosan
Lihaksikas

Ryhmät
AB +
SAF +
AB + SAF +
AB +
SAF +
AB + SAF +

I (ohjaus) B 7 ± 2
0 ± 0
3 ± 0
1 ± 0
1 ± 1
2 ± 1
II
12 ± 4
0 ± 0
2 ± 1
2 ± 1
2 ± 1
11 ± 9
III - NT
40 ± 14 *
1 ± 1
4 ± 1
8 ± 3 *
3 ± 2
7 ± 3
III - MT
12 ± 2
0 ± 0
3 ± 1
11 ± 3 *
4 ± 1
10 ± 4
IV - NT
19 ± 3 **
1 ± 0,6
12 ± 8
9 ± 3 *
1 ± 0
18 ± 7
IV - MT
27 ± 10
9 ± 8
25 ± 8 # &
9 ± 2 ** π
3 ± 2
22 ± 9
Histologinen valmistelu suoritettiin kuten on kuvattu Materiaalit ja menetelmät
. Arvot (solujen lukumäärä per mm2) esitetään keskiarvo ± SEM 60 kenttää analysoitu eläintä kohti on suuritehoinen tavoite (40 x). Alcian-blue
(AB +), safraniinin (SAF +) ja alcin-sininen Twitter /safraniinin positiivisia soluja (AB + SAF +). * P < 0,05 vs. ryhmä I; # ≪ 0,05 vs. I ja III-MT; &Amp; P < 0,01 vs. II; π P < 0,05 vs. II.
Keskustelu
Tässä tutkimuksessa tutkittiin histopatologisen muutokset ja jakelu soluväliaineen (ECM) säikeisen komponentteja, ja syöttösolut mahanportin alueella rotan vatsat kuin denervated tai denervated by bentsalkoniumkloridia (BAC) ja ei-käsitelty tai käsitelty karsinogeeni N-metyyli-N 'nitro-N-nitrosoguanidiini (MNNG).
Aluksi histopatologisen ja stereologiamenetelmää analyysi ei osoittanut muutoksia suhteellisessa määrässä epiteelin ja strooman osastoja mahanportin fragmenttien ei-denervated (ryhmä I) ja denervated vatsat (ryhmä II). Kuitenkin tutkimus säikeisen osien ECM näissä yksilöitä paljasti, että BAC denervation aiheuttaa lisää taajuus reticular ja joustava järjestelmä kuitujen denervated mahalaukun limakalvon (ryhmä II) verrattuna ei-denervated (ryhmä I), kuten on osoitettu histokemiallisen ja stereologiamenetelmää analyysin avulla Gomori retikuliini- ja Weigert n resorsinoli-Fuchsin värjäystä, vastaavasti. Luultavasti puuttuminen supistuvien stimulaation aiheuttamien myenteeri- denervation näissä fragmentteja (ryhmä II) osaltaan lisätä synteesissä reticular ja joustavien kuitujen mukaan sileitä lihassoluja ja /tai uuden yhdistyksen kuitujen strooman mekanismina riittävään peristalttisen aallon koordinointia ja estää staasilla denervated elimissä [32-34].
hoito ei-denervated (ryhmä III) ja denervated (ryhmä IV) eläimille MNNG aiheuttama kehitystä pahanlaatuisia kasvaimia (adenokarsinoomat), hyvänlaatuinen kasvaimet (adenomatoottisen polyypit) ja syövän esiasteita (dysplasia ja atrofinen gastriitti). Kehittäminen adenokarsinooman sekä ei-denervated ja denervated vatsat pystyi edistämään merkittävään kasvuun suhteellinen tilavuuden strooman osaston. Aikana kehittyvä kasvain eturauhasessa tai mahalaukun limakalvon, vuorovaikutus strooman /epiteelin häiriintyy ja määräsi uuden ehdon liittyy morfologisia muutoksia soluväliaineen komponenttien ja kasvaimen kasvua [35]. Epiteelisolujen proliferaatiota sekä pahanlaatuisia ja hyvänlaatuisia vaurioita aiheuttaa muutoksia sijaitsee rauhanen, jonka jälkeen keskeinen remodeling säikeisen komponenttien soluväliaineen [27].
Tässä aspektissa histokemiallista analyysi osoitti merkittävää kasvua on reticular kuidut adenokarsinooma (ryhmä III) verrattuna ei-denervated vatsat ilman vaurioita (ryhmä I). Kasvu strooman kollageenisäikeiden edustaa mekanismi, jonka tuumorisolut voisi paeta "hyökkäys" T-lymfosyyttien (CD8 +) ja apoptoosin, jotka toimivat esteenä soluttautuminen CD8 + [ ,,,0],36]. Huolimatta ei merkittävää muutosta on joustava järjestelmä, häiriöitä näiden kuitujen havaittiin adenokarsinoomat ei-denervated mahaan (ryhmä III), jossa läsnäolo elinten elastisia elementtejä fraktioitua, mikä viittaa hajoaminen tai remontin strooman vastauksena vahingon vaikutuksen alaisena neoplastisten solujen. Nämä muutokset joustolaitteineen kuidut olivat samanaikaisia ​​kanssa remontin kollageenin kuituja, myös havaittiin eturauhasvaurioiden [37] ja eturauhasen strooman tänä rauhanen regressio kastraation jälkeen [38, 39]. Näiden tulosten mukaan, aggressiivinen kasvain voidaan arvioida kuitumainen matriksin komponenteille.

• Miten merkkiaineet injektoida havaitsemiseksi varten vartijaimusolmukkeista mahasyövän - submukoosisti sisältä tai subserosally ulkopuolelta mahan?
• Ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia ja hoitotuloksia sekä hepatoid adenokarsinooma mahalaukussa, harvinainen mutta ainutlaatuinen alatyyppi mahalaukun cancer