Receptor selektívny modulátor aryl uhľovodík 3,3-diindolylmetan inhibuje žalúdočné rakovinové bunky growth

modulátor uhľovodík receptora selektívne aryl 3,3'-diindolylmetan inhibuje žalúdočné rast rakovinových buniek
abstraktné
pozadia
uhľovodíkových receptor aryl (AHR) je transkripčný faktor aktivovaný ligand spojená s žalúdočnej karcinogenéze. 3,3'-diindolylmetan (DIM) je relatívne netoxický selektívny modulátor AhR. Táto štúdia bolo zistiť účinky na žalúdočné DIM rast rakovinových buniek. Metódy
žalúdočné karcinóm SGC7901 sa spracuje s DIM v rôznych koncentráciách (0,10,20,30,40,50 umol /l) s alebo bez antagonistu Ahrovi resveratrol. Expresie AhR a cytochrómu P4501A1 (CYP1A1), klasický cieľový gén AHR dráhy, bolo zistené pomocou RT-PCR a Western blot; Životaschopnosť buniek bola meraná testom MTT, a zmeny v bunkovom cykle a apoptózy boli analyzované pomocou prietokovej cytometrie.
Výsledky
RT-PCR a western-blot ukázala, že so zvýšením koncentrácie DIM AHR proteín postupne znížil a CYP1A1 sa znížila expresia, čo naznačuje, že DIM aktivuje Ahr dráhu a spôsobil presun AhR z cytoplazmy do jadra. MTT test je uvedené, že životaschopnosť buniek bola SGC7901 v na koncentrácii a v závislosti na čase tak výrazne poklesol po liečbe DIM a to by mohlo byť čiastočne zvrátiť resveratrol. Analýza prietokovou cytometriou ukazuje, že DIM zadržaný bunkový cyklus vo fáze G1 a indukovanú apoptózu buniek.
Záver
modulátor receptora selektívne aryl uhľovodíkov 3,3'-diindolylmetan inhibuje proliferáciu SGC7901 buniek indukciou apoptózy a oddialiť progresiu bunkového cyklu. AhR môže byť potenciálnym terapeutickým cieľom pre liečbu rakoviny žalúdka.
Kľúčové
Aryl uhľovodíkový receptor 3,3'-diindolylmetan Karcinóm žalúdka cytochrómu P4501A1 pozadí
karcinómu žalúdka je jedným z najčastejších malignity. V ekonomicky sa rozvíjajúce krajiny, rakovina žalúdka je druhou najviac frequntly diagnostikovaná rakovina a treťou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu u mužov [1], celkovo 5-ročné prežitie je nízka (15% až 35%), a to z dôvodu vysokej recidívy ceny, metastáz v lymfatických uzlinách a krátkodobá odozva na chemoterapiu [2]. V súčasnej dobe sa stále viac a viac štúdie sa zameriavajú na molekulárnej diagnostiku a liečbu karcinómu žalúdka [3].
Aryl uhľovodíkový receptor (AHR) je transkripčný faktor ligandom aktivovanej. Po ligandy, ako sú polycyklické aromatické uhľovodíky (PAU) a halogénované uhľovodíky (Ha) sa viažu s AhR v cytoplazme, komplex ligand-AhR je translokovaný do jadra a heterodimerizes s AHR jadrovej translokátoru (Arnt). Komplex sa viaže na príbuzné sekvencie zosilňovača a následne sa aktivuje po smere expresie génu [4].
Tradičné štúdie funkcie AhR zameral na jeho úlohu pri regulácii expresie cudzorodých metabolizujúcich enzýmov (XMEs) a sprostredkovanie metabolizmu xenobiotík. Nedávne štúdie preukázali, že AhR môže zahŕňať v mnohých dôležitých fyziologických a patologických procesoch, vrátane individuálneho vývoja, diferenciácie buniek, a karcinogenéze [5]. AhR expresie je up-regulovaná v pľúcach [6], mliečne žľazy [7], pankreasu [8] a rakoviny žalúdka [9]. Ďalšie štúdia zistila, že hrá AhR improtant úlohu v regulácii bunkovej proliferácie, apoptózy, bunkový cyklus, migrácia a invázia [10]. Ako proteín súvisiaci s rakovinou AHR možná sľubný cieľ pre terapiu rakoviny. Naše predchádzajúce práce zistili, že AhR agonista, 2,3,7,8 -tetrachlorodibenzo -pár-dioxín (TCDD), inhibuje žalúdočné rast rakovinových buniek [9]. Ale TCDD samo o sebe je karcinogénna [11], teda nájsť netoxický alebo low-toxické AhR modulátory môže byť nový smer pre molekulárno-cielenej liečby rakoviny žalúdka.
Modulátor receptora selektívne AhR 3,3-diindolylmetan (DIM ) je trieda relatívne netoxických derivátov indolu. DIM je consendation produkt kyseliny catalyed indol-3-karbinol, je consititudent z kapustovité zeleniny, a je vytvorený v žalúdku [12]. DIM je protirakovinové činidlo, potláča množenie rakovinových buniek prsnej [13], hrubého čreva [14] a pankreasu [15] rakoviny.
Tam bolo málo správ o účinkoch DIM na žalúdočné rast rakovinových buniek, Táto štúdia bola navrhnutá tak, aby pozorovať účinky DIM na žalúdočné rakoviny rast buniek a skúmať možné mechanizmy.
metódy
Bunková línia
rakovina žalúdka u ľudí bunkové línie SGC7901 bol získaný z Cancer Institute of Chinese Academy of Medical Science. SGC7901 Bunky boli udržiavané v RPMI-1640 médiu (GIBCO, Carlsbad, CA, USA), doplnenom 10% fetálnym hovädzím sérom (Hyclone, USA), 1 x 10 5 U /l penicilínu a 0,1 g /l gentamycín. Bunková prostredia bola udržiavaná na 50 ml /l CO 2 a 37 ° C.
Ošetrenie buniek
DIM bol zakúpený od firmy Enzo Life Science (Bulter Pike Plymouth Meeting, PA, USA), resveratrol a dimetylsulfoxidu (DMSO ) boli získané od firmy Sigma Chemical Company (Bellefonte, PA, USA). DIM a resveratrol sa rozpustí v DMSO. Po inkubácii po dobu 24 hodín, jedna skupina buniek sa spracuje s DIM v rôznych koncentráciách (0, 10, 20, 30, 40, 50 umol /l) počas 24 hodín. Druhá skupina sa nechá reagovať s DIM (30 pmol /l) plus resveratrol (0, 1, 5, 10, 20 umol /l) po dobu 6 hodín. Ďalšia skupina sa nechá reagovať s DIM (30 pmol /l) na rôznych časových intervaloch (0, 1, 6, 24, 48, 72 h), v danom poradí. Kontrolné bunky obdržal 1 ml /l DMSO iba.
Reverzný transkripcie-polymerázovej reťazovej reakcie (RT-PCR)
Po zbere sa bunky, celková RNA bola extrahovaná Qiagen RNeasy Mini Kit (Qiagen, Nemecko) v súlade s pokynov výrobcu. cDNA bola syntetizovaná s 1 ug celkovej RNA za použitia reverznej transkriptázy, ReverTraAceTM (Toyobo Co., Osaka, Japonsko) za nasledujúcich podmienok: 30 ° C počas 10 minút, 42 ° C počas 20 minút, 99 ° C po dobu 5 minút a 4, ° C po dobu 5 minút. Polymerázová reťazová reakcia (PCR) bola vykonaná za použitia 2 ul komplementárne DNA a 0,6 U Ex Taq DNA polymerázy (Takara, Dalian, Čína) v 20 ul reakčného systému a 30 cyklu 94 ° C denaturácia počas 30 s, 55 ° C žíhanie . po dobu 30 sekúnd a 72 ° C počas 45 sekúnd elongácia
sekvencie primérov boli nasledovné: reverznej transkripcie-polymerázovej reťazovej reakcie (RT-PCR): AhR, 5'-ACT CCA CTT CAG CCA CCA TC-3 '( vpred) a 5 'ATG GGA GGC CTC ACA ATA AA -3' (reverzný), navrhovaná veľkosť PCR produktu bola 204 bp. CYP1A1, 5'-CCA TGT CGG CCA CGG AGT T -3 '(dopredu) a 5' ACA GTG CCA GGT GCG GGT T -3 '(reverzný) sa proposedsize PCR produktu bola 174 bp. Glyceraldehyd-3-fosfát dehydrogenázy (GAPDH), 5 'GGG AAA CTG TGG CGT GAT-3' (dopredu) a 5 'GGT GGA AAA GGA GTG GGT-3' (reverzný) sa vyhľadané veľkosť PCR produktu bola 309 bp. PCR produkty boli následne podrobené elektroforéze na 1,5% agarosovém gélu a vizualizované pod UV svetlom.
Pomocou analýzy Westernového prenosu
Bunky boli lyžovanie v pufri obsahujúcom 20 mmol /l HEPES, 1 mmol /l EGTA, 50 mmol /L β-glycerofosfát, 2 mmol /L orthovanadátu sodného, ​​100 ml /l glycerolu, 10 ml /l Triton X-100, 1 mmol /l DTT, a 1 x Protease Inhibitor Cocktail (Roche, Mannheim, Nemecko). Lyzát bol centrifugován pri 13 000 g a 4 ° C počas 10 minút. Supernatant bol celkový bunkový lyzát. Koncentrácia proteínu bola meraná s použitím BCA proteín kitu (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, USA). Tridsať mikrogramov proteínu bolo nanesené na dráhu, ktoré sú oddelené 100 g /l SDS-PAGE a prenesené na ekvilibrovanou polyvinylidendifluoridovou membránu elektropřenosového. Membrány boli blokované 5% netučného mlieka v 1% TBS-T pufru po dobu 2 hodín pri teplote miestnosti. AhR, CYP1A1, a GAPDH boli detekované za 2 h použitím protilátok proti AhR (SC-5579, Santa Cruz Biotechnology, USA, pracovné riedenie 1: 150), CYP1A1 (AB1258, Chemicon International, USA, pracovné riedenie 1: 500), a GAPDH (2118, Cell Signaling Technology, USA, pracovné riedenie 1: 1000). Po inkubácii so sekundárnou protilátkou (7074, Cell Signaling Technology, USA, pracovné riedenie 1: 2000) počas 2 hodín, proteínové pásy boli detekované použitím ECL systému (Pierce Biotechnology, Inc., USA)
životaschopnosť buniek testu
. účinok DIM na proliferáciu buniek karcinómu žalúdka bola stanovená testom MTT. Stručne povedané, celkom 1 x 10 4 trypsín disperznej buniek v 0,1 ml kultivačného média boli schovať do každej jamky 96-jamkové doštičky a kultivované po dobu 24 hodín. Ďalej boli bunky ošetrené DIM, ako je popísané vyššie. Potom sa 20 ul MTT (5 g /l) bol pridaný do každej jamky a inkubácii sa pokračuje počas 4 hodín pri teplote 37 ° C. Napokon, bolo kultivačné médium odstránené a 150 ul dimetylsulfoxidu sa pridá do každej jamky. Absorbancia bola určená čítačkou pri vlnovej dĺžke 490 nm ELISA. Percento životaschopnosti buniek bolo vypočítané ako :. Životaschopnosť v percentách (%) = (hodnota absorpcie experimentu skupiny) /(hodnota absorpcie z kontrolnej skupiny) x 100%
prietokovej cytometrie
SGC7901 buniek boli nanesené na 60-mm priemer kultivačné doštičky a ošetrené DIM pri rôznej koncentrácii (10, 20, 30, 40, 50 umol /l) počas 48 hodín. Riadiace obsahovala iba 1 ml /l DMSO. Pred zberom, boli bunky dvakrát premyté
0,01 mol /L PBS, trypsinizovány a granulované. Bunky potom boli fixované 70% ľadového etanolu pri teplote 4 ° C cez noc. Nakoniec boli bunky dvakrát premyté PBS a farbené s PI. Obsah DNA bol analyzovaný pomocou prietokového cytometra (Beckman-Coulter, Brea, USA). Bunkový cyklus SGC7901 buniek boli analyzované za použitia MULTYCYCLE a winMDI2.9 softvér (Phoenix, AZ, USA). Pre analýzu bunkovej apoptózy, po kultivácii počas 48 hodín boli bunky zafarbené annexin V-FITC a PI. Bunky s annexinu V (-) a PI (-) boli považované za životaschopné bunky. Bunky s annexinu V (+) a PI (-) boli považované za zavčas apoptotických buniek. Bunky sa ako annexinu V (+) a PI (+) bola považovaná za neskoré apoptotických buniek.
Štatistická analýza
všetky kvantitatívne údaje boli vyjadrené ako priemer ± SD a analyzujú za použitia jednocestnej analýzy variance (ANOVA). Všetky štatistické analýzy boli vykonané s použitím štatistického softvérového balíka SPSS (verzia 11.0, SPSS Inc. Chicago, USA). P < 0,05 bola považovaná za štatisticky významné.
Výsledky
Aktivácia AhR dráhy od DIM
Ak chcete otestovať, či signál dráha AhR mohol byť aktivovaný DIM, sme liečili žalúdočné čiary SGC7901 nádorových buniek s DIM. RT-PCR a analýzy Western blot ukazuje, že po liečbe DIM, AhR proteínu na celkových bunkových lyzátov postupne znižuje (obrázok 1). CYP1A1, klasický cieľového génu AhR, bol použitý ako indikátor aktivácia signálnej dráhy AhR. Základná úroveň CYP1A1 expresie nebola pozorovaná v SGC7901 bunkách, ale obaja CYP1A1 mRNA a expresie proteínu sa v dávke a v závislosti na čase tak zvýšila po DIM liečbe (obrázok 1). Pre ďalšie potvrdenie expresie CYP1A1 DIM vyvolané bol AhR závislé, sme liečili SGC7901 bunky so špecifickým antagonistom AhR, resveratrol [16, 17]. Bunky boli ošetrené DIM (30 pmol /l) len alebo DIM (30 pmol /l) a rôzne koncentrácie resveratrolu (0, 1, 5, 10, 20 umol /l), v danom poradí počas 6 hodín (obrázok 2). V zhode s predchádzajúcimi výsledkami, liečba SGC7901 buniek s 30 pmol /l DIM spôsobil významný nárast expresie CYP1A1. Avšak, toto DIM indukovaná expresia CYP1A1 bol čiastočne obrátená resveratrolu v spôsobom závislým od dávky (obrázok 2A a B). Obrázok 1 AhR a CYP1A1 expresie v SGC7901 bunkách po liečbe DIM. A a B: RT-PCR; C a D: Western blotting. Liečba SGC7901 buniek AhR modulátora DIM malo za následok dobu - (A a C) a koncentrácia -dependentní (B a D), indukcia CYP1A1 expresie. Uvedené výsledky sú reprezentatívne pre tri nezávislé pokusy.
Obrázok 2 Inhibícia DIM indukovanej CYP1A1 mRNA a expresiu proteínu podľa resveratrol. A: CYP1A1 mRNA bola detekovaná pomocou RT-PCR; B: CYP1A1 proteín bol detekovaný Western Blot. RSV: resveratrol. Uvedené výsledky sú reprezentatívne pre tri nezávislé pokusy. Liečba SGC7901 buniek s 30 pmol /l DIM spôsobil významný nárast expresie CYP1A1. Tento DIM indukovaná expresia CYP1A1 bol čiastočne obrátený resveratrolu v závislosti od koncentrácie.
Vplyv DIM na cellur proliferáciu
Proliferácia SGC7901 buniek bola stanovená testom MTT po 6-72 hodinách liečby sa zvyšujúcou sa koncentráciou DIM (0-50 pmol /l). Výsledky ukázali, že DIM inhibuje bunkovú proliferáciu v SGC7901 na koncentrácii a časovo závislým spôsobom, resveratrol (10 pmol /l) by mohol čiastočne zvrátiť inhibičné účinky DIM (30 pmol /l) na cellur proliferáciu v časových bodoch: 6 hodín a 12 h (obrázok 3), ale nenašli sme obrátenie účinky pri iných časových bodoch (24 h, 48 h a 72 h, neboli zobrazené údaje). Obrázok 3 Životaschopnosť SGC7901 buniek po ošetrení DIM bola hodnotená testom MTT. Životaschopnosť buniek bola SGC7901 významne znížená na koncentráciu a závislosti na čase po liečbe DIM. Resveratrol (10 pmol /l) by mohol čiastočne zvrátiť inhibičné účinky DIM (30 umol /l) na cellur zbraní hromadného ničenia.
Vplyv DIM na bunkový cyklus
prietokovej cytometrie ukázala, že liečba DIM indukované zmeny v distribúcii bunkového cyklu , so zvýšenou akumuláciou SGC7901 buniek v G1 fáze a náhrady za túto zmenu poklesu buniek v s fáze (obrázok 4 a tabuľka 1). Obrázok 4 Účinok DIM na bunkovom cykle SGC7901 buniek. SGC7901 bunky boli ošetrené rôznymi koncentráciami DIM a podrobia toku cytometrická analýza. Percento každej fázy je uvedená v každom paneli. Uvedené výsledky sú reprezentatívne pre tri nezávislé pokusy.
Tabuľka 1 Vplyv DIM na bunkovom cykle SGC7901 buniek
Dim koncentráciou (umol /l)
Percento bunkového cyklu (%)

G1
G2
S
0
55,90 ± 1,48
10,5 ± 0,95
33,63 ± 0,55
10
57,20 ± 0,36 *
9,10 ± 0,3
33,70 ± 0,53
20
61,03 ± 1,53 *
8,17 ± 0,68
30,77 ± 0,97 *
30
61,97 ± 0,32 *
9,83 ± 0,32
28,23 ± 0,60 *
40
62,77 ± 1,46 *
9,13 ± 0,91
28,10 ± 0,56 *
50
73,03 ± 4,05 *
9,17 ± 1,51
18,07 ± 0,57 *
* p < 0,05, vs kontrola.
Vplyv DIM na apoptózu buniek
48 hodín po ošetrení DIM, zmeny bunkovej apoptózy boli pozorované analýzou prietokovej cytometrie. V porovnaní s kontrolnou skupinou, bunková apoptóza bola indukovaná v koncentráciách 20 až 50 umol /L, a miera apoptózy rástla v závislosti na dávke závislý. Tieto výsledky ukázali, že DIM by mohlo vyvolať apoptózu buniek v SGC7901 bunkách (Obrázok 5 a Tabuľka 2). Obrázok 5 Vplyv na DIM apoptózy SGC7901 buniek. SGC7901 bunky boli ošetrené rôznymi koncentráciami DIM a podrobia toku cytometrická analýza. Uvedené výsledky sú reprezentatívne pre tri nezávislé pokusy.
Tabuľka 2 Vplyv DIM na apoptózy SGC7901 buniek
DIM koncentráciou (umol /l)
apoptóza sadzba (%)

0
4,18 ± 0,23
10
4,81 ± 0,42
20
6,07 ± 0,33 *
30
7,23 ± 0,78 #
40
7,39 ± 1,08 #
50
9,14 ± 0,32 #
* p < 0,05, #p < 0.01vs ovládacieho prvku.
Diskusia
našej predchádzajúcej práci zistené, že expresia AhR bola významne up-regulovaný u karcinómu žalúdka, a môžu byť zapojené do ranej fáze žalúdočnej karcinogenéze, regulácia AHR dráhy môžu mať potenciálnej role v liečbe rakoviny žalúdka. Predpokladali sme, že AhR ligandy môžu byť použité na liečbu rakoviny žalúdka. Potom naše info štúdie ukázali, že TCDD, silný AhR agonista, by supresse rast buniek karcinómu žalúdka AGS v dávke a času depengent spôsobom prostredníctvom indukcie zastavenie rastu v G1-S fáze [9]. Ale TCDD sám o sebe je karcinogénna, vyvoláva široké spektrum biologických reakcií, vrátane indukcie CYP1A1, narušenie normálnej hormonálnej signálnych dráh, reprodukčné a vývojových chýb, porúch imunitného systému, poškodenie pečene, plytvanie syndrómu a rakoviny [18], a preto netoxické or AhR modulators nízko toxické selektívny možno slúžil ako možné prostriedky pre rakoviny žalúdka
Zo štúdií u karcinómu prsníka, Safe našiel dve triedy selektívnych AhR modulators :. Alternate-substituovaný (1,3,6,8- a 2, 4,6,8-) alkyl polychlórovaných dibenzofuránov (PCDF) a substituované diindolylmethanes (stlmí), v porovnaní s TCDD, tieto zlúčeniny sú relatívne netoxické a inhibujú ER-pozitívnych a ER-negatívne prsné nádorový rast, avšak nevyvolávajú AhR- sprostredkované toxické reakcie indukované TCDD [19].
DIM predstavuje novú triedu relatívne netoxických antitumorigenic AhR modulátory, ktoré sú fytochemických pôvodu. V porovnaní s TCDD, DIM je slabý agonista AhR pre indukciu CYP1A1 génovej expresie [20] a činností [21], a to ukazuje schopnosť súťažiť o väzbu TCDD do AhR [22].
Ak chcete otestovať wether signálny dráhu AhR mohla byť activited od DIM v rakovinových bunkách žalúdka, sme liečili žalúdočné čiary SGC7901 nádorových buniek s DIM. Výsledky ukázali, že AhR proteínu v celkových bunkových lyzátov postupne znižoval (obrázok 4C a D), Podobné javy boli hlásené od našich laboratóriách a niekoľkých ďalších skupín [9, 23], je down-regulácia AhR nasledujúce väzby ligandu je považované za imprtant krok signálne dráhy AhR [23]. CYP1A1, klasický cieľového génu AhR, bol vybraný ako indikátor aktivácia signálnej dráhy AhR. Predvolené hladiny expresie CYP1A1 neboli pozorované v SGC7901 buniek v tejto štúdii. Avšak, expresia CYP1A1 bola významne zvýšená v na koncentrácii a závislosti na čase po liečbe DIM, čo naznačuje aktiváciu AhR. Ak chcete potvrdiť aktiváciu signálnej dráhy AhR u DIM, sme liečili SGC7901 buniek s určitým AhR antagonistu, resveratrol. Naše výsledky ukazujú, že DIM indukované expresie CYP1A1 bol čiastočne obrátený resveratrolu v závislosti od koncentrácie. Neúplné obrátenie CYP1A1 expresie resveratrol, môže byť vzhľadom k tomu, že AhR nie je jediným regulátorom transkripcie CYP1A1 [24]. Dohromady tieto výsledky naznačujú, že by mohli DIM aktivovať signálny dráhu AhR vo buniek karcinómu žalúdka.
MTT skúška preukázala, že životaschopnosť buniek bola SGC7901 v na koncentrácii a je závislý na čase významne znížila po ošetrení DIM. S cieľom objasniť wether tento účinok bol závislý AhR-, sme liečili SGC7901 bunky s tlmeným a resveratrol, sme zistili, že inhibičné účinky na rast DIM SGC7901 buniek bola čiastočne, ale nie úplne vyhradené reservatrol, čo naznačuje, že DIM inhibuje rast rakovinových buniek žalúdočnej čiastočne prostredníctvom AhR dráhy. Tento výsledok je v súlade s predchádzajúcimi štúdiami: Hong, C zistené, že DIM inhibuje rast oboch Ah-pružným a Ah-non-responzívne buniek rakoviny prsníka. niektoré z anti-karcinogénne aktivity DIM sú AhR -independent [25]. Je zaujímavé, že bol pozorovaný obrátenie účinok na proliferáciu buniek po bunky boli ošetrené s DIM naviac reservatrol po dobu 6 hodín alebo 12 hodín, avšak nie v dlhších časových intervaloch (24 hodín, 48 hodín a 72 hodín), je potrebné v súvislosti s časovým efektívnosť z reservatrol.
Tam boli niektoré štúdie o tom protinádorových machanisms DIM. Choi HJ ukázala, že DIM indukované G1 a G2 /M fáze zástavu bunkového cyklu v HT-29 ľudskej rakoviny hrubého čreva [26]. Vivar OI a Hong C našiel DIM navodila g (1) zatknutie v ľudských bunkách rakoviny prostaty [27] a ľudských buniek rakoviny prsníka [28]. Na druhej strane, niektoré články uvádzajú, že DIM môže podporovať apoptózu v rakovinových bunkách survivinu, UPA a Upar alebo NF-kappa B sinaling [29-33].
K ďalšiemu skúmaniu konkrétnych mechanizmov inhibícia rastu buniek karcinómu žalúdka podľa DIM , sme liečili SGC7901 buniek DIM, potom testovala zmeny bunkového cyklu a apoptózu buniek pomocou prietokovej cytometrie. Výsledky ukázali, že so zvýšením koncentrácie DIM, bunky v G1 fáze sa postupne zvyšuje, bunky v S fáze sa znížil, ale bunky v G2 fáze zostal bezo zmeny, čo naznačuje, že by mohli DIM zastavenie bunkového cyklu vo fáze G1. Odlišné od TCDD, DIM tiež indukovanú apoptózu buniek, čo naznačuje, že DIM by mohli potlačiť žalúdočné proliferáciu nádorových buniek prostredníctvom indukcie apoptózy a aretáciu bunkového cyklu, sú však stále potrebné mechanizmy zodpovedné za účinky DIM na žalúdočné rakovina bunkového cyklu a apoptózy, aby sa ďalej študovaný.
závery
v surmary, táto správa ukázala, že netoxické selektívny modulátor AhR DIM inhiboval proliferáciu rakovina žalúdka u bunkové línie SGC7901 in vitro vyvolaním apoptózy buniek a aretáciu bunkového cyklu v G1 fáze. Naše zistenia naznačujú, že AhR by mohla byť sľubným cieľom pre liečbu rakoviny žalúdka
Poznámky
Xiao-Fei Yin, Jie Chen prispeli rovnakou mierou k tejto práci
Skratky
AhR: ..
aryl uhľovodíkový receptor
GAPDH:
glyceraldehyd 3-fosfát dehydrogenáza
RT-PCR:
reverznej transkripcie -Polymerase Chain Reaction
MTT:
metyl-tiazolylová tetrazoliové
DMSO:
dimetylsulfoxid
FBS:
Fetálne hovädzie sérum
TCDD:
2,3,7,8-tetrachlórdibenzo-para-dioxínov
TBST:
Tris-pufrovaný soľný roztok obsahujúci 0,05% Tween 20.
vyhlásenie
Poďakovanie
Táto štúdia bola podporená dotácií z Národnej prírodnej Science Foundation Číny (No. 30871145 a č 81072048), pestovanie Projekt Junior učiteľ Sun Yat-sen University (č 09ykpy22), granty na veľkých projektoch a rozvíjajúcich sa interdisciplinárnych štúdií Sun Yat-sen University (No.10ykjc23) podporovaná základného výskumu fondov pre stredoeurópskej univerzity.
autorov pôvodné predloženej súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodných predložených súbory pre obrazy. "Pôvodný súbor na obrázku 1 13046_2012_571_MOESM2_ESM.tiff autorského 13046_2012_571_MOESM1_ESM.tiff autorov pôvodného súboru pre" pôvodného súboru pre Obrázok 3 13046_2012_571_MOESM4_ESM.tiff autorského Obrázok 2 13046_2012_571_MOESM3_ESM.tiff autorského pôvodného súboru na Obrázok 4 pôvodného súboru 13046_2012_571_MOESM5_ESM.tiff autorského na obrázku 5 konkurenčné záujmy
autori vyhlasujú, že nemajú žiadne protichodné záujmy príspevky
autorov
Yin XF a Chen J podieľali rovnakou mierou k tejto práci .; Yin XF a Chen J robil výskum a napísal na papier; Mao W organizovaný postavy a analyzovaných dát; Wang YH pomáhal s bunkovou kultúrou. Chen MH navrhnutý výskum a dohliadala na proces písania a organizácie. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Novú protinádorovej vírusovej terapie a zobrazovacia technika pre rakovinu žalúdka za použitia genetického inžinierstva vírus kiahní nesúca ľudský jodid sodný symporter
• FOLFIRI ako druhá línia terapie u pacientov s karcinómom žalúdka docetaxelom vopred: historické kohorte