Atrankinis arilo angliavandenilių receptorių moduliatorius 3,3-Diindolylmethane slopina skrandžio vėžio ląstelių augimą

Atrankinis arilo angliavandenilių receptorių moduliatorius 3,3'-Diindolylmethane slopina skrandžio vėžio ląstelių augimą
tezės
Background pervežimas arilas angliavandenilių receptorių (AHR) yra ligando aktyvuota transkripcijos faktorius, susijęs su skrandžio kancerogenezėje. 3,3'-Diindolylmethane (artimosios) yra gana netoksiškas selektyvus AHR moduliatorius. Šis tyrimas buvo aptikti DIM poveikį skrandžio vėžio ląstelių augimą.
Metodai
Skrandžio vėžio ląstelių SGC7901 buvo gydomi DIM esant skirtingoms koncentracijoms (0,10,20,30,40,50 mkmol /l) arba be AHR antagonistas, resveratrolis. Iš AHR ir citochromo P4501A1 (CYP1A1), klasikinis tikslinę geno AHR keliu, išraiška buvo aptikta RT-PGR ir Vakarų dėmė; ląstelių gyvybingumas buvo matuojamas MTT, o ląstelės ciklo ir apoptozės pokyčiai buvo analizuojami tėkmės citometrijos.
rezultatai
AT-PGR ir Vakarų dėmė parodė, kad su Dim koncentracijos padidėjimas, AHR baltymų palaipsniui sumažėjo ir CYP1A1 ekspresija padidėjo, rodo, kad "DIM aktyvuota AHR kelią ir sukėlė AHR perkėlimas iš citoplazmos į branduolį. MTT nurodė, kad SGC7901 ląstelių gyvybingumas buvo gerokai sumažėjo į koncentracijos ir ir laiko priklausomu būdu po DIM gydymo ir tai gali būti iš dalies atsisakyta resveratrolio. Tėkmės citometrijos analizė parodė, kad "DIM suimtas ląstelių ciklą G1 fazės ir sukeliama ląstelių apoptozę.
Išvada
Atrankinis arilo angliavandenilių receptorių moduliatorius 3,3'-Diindolylmethane slopina SGC7901 ląstelių proliferaciją, sukeldami apoptozę ir vėlesnis ląstelinį ciklą. AHR gali būti potencialus terapinis taikinys skrandžio vėžio gydymo.
Raktiniai žodžiai
arilas angliavandenilių receptorių 3,3'-Diindolylmethane Skrandžio vėžys citochromo P4501A1 faktai
Skrandžio vėžys yra viena iš labiausiai paplitusių piktybinių navikų. Be ekonomiškai plėtoja šalių, skrandžio vėžys yra antra labiausiai frequntly diagnozuota vėžio ir trečia pagrindinė priežastis, dėl vėžio mirties vyrų [1], bendras 5 metų išgyvenamumas yra žemas (nuo 15% iki 35%) dėl didelio pasikartojimo normos, mazgų metastazės ir trumpalaikis atsakas į chemoterapiją [2]. Dabartyje, vis daugiau ir daugiau tyrimų sutelkti dėmesį į molekulinės diagnostikos ir terapijos skrandžio vėžio [3].
Arilo angliavandenilių receptorių (AHR) yra ligando aktyvuota transkripcijos faktorius. Po ligandų, pavyzdžiui, policiklinių aromatinių angliavandenilių (PAA) ir halogenintų angliavandenilių (hah) įpareigoti su AHR į citoplazmą, ligando-AHR kompleksas pernešamas į branduolį ir heterodimerizes su AHR branduolinės translocator (Arnt). Kompleksas jungiasi su specifiniu stipriklis seka, o vėliau aktyvuoja pasroviui genų ekspresiją [4].
Tradiciniai tyrimai AHR funkcija orientuota į jos vaidmenį reguliuojant ksenobiotinių metabolizmą fermentų (XMEs) išraišką ir tarpininkavimo KSENOBIOTIKŲ apykaitą. Naujausi tyrimai parodė, kad AHR gali būti daugelyje svarbių fiziologinių ir patologinių procesų, įskaitant asmeninio tobulėjimo, ląstelių diferenciacijos ir kancerogeninio poveikio [5]. Ahr išraiška yra aktyvinama plaučiuose [6], pieno liaukos [7], kasos [8] ir skrandžio vėžio [9]. Tolesni tyrimai parodė, kad AHR grojo improtant vaidmenis reguliuojant ląstelių proliferaciją, apoptozę, ląstelinio ciklo, migracija ir invazija [10]. Kaip baltymo, susijusio su vėžiu, AHR gal perspektyvus tikslo vėžio gydymo. Mūsų Darbo nustatė, kad AHR agonistas, 2,3,7,8 -tetrachlorodibenzo -para dioksinų (TCDD), slopinamas skrandžio vėžio ląstelių augimą [9]. Bet pati TCDD yra kancerogeninės [11], Taigi rasti netoksiškas ar mažai toksiški AHR moduliatoriai, gali būti naujas kryptis molekulinės orientuojasi gydymo skrandžio vėžio.
Atrankinis AHR receptorių moduliatorius 3,3'-Diindolylmethane (DIM ) yra santykinai netoksiškų indolo darinių klasės. DIM yra rūgšties-catalyed consendation produktas indolo-3-karbinolis, nuo kopūstų consititudent, ir yra suformuotas iš skrandžio [12]. DIM yra priešvėžinis agentas, tai slopina vėžio ląstelių proliferaciją in pieno [13], dvitaškis [14] ir kasos [15] vėžio.
Būta mažai ataskaitas apie DIM poveikį skrandžio vėžio ląstelių augimą, Šio tyrimo tikslas buvo stebėti Dim poveikį skrandžio vėžio ląstelių augimą ir ištirti galimus mechanizmus.
metodai
ląstelių linija
žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijos SGC7901 buvo gautas iš vėžio instituto Kinijos mokslų akademijos medicinos Mokslas. SGC7901 Ląstelės buvo išlaikyta RPMI-1640 terpėje (GIBCO, Carlsbad, Kalifornija, JAV), papildytoje su 10% vaisiaus galvijų serumo (Hyclone, JAV), 1 × 10 5 V /L penicilino, ir 0,1 g /l gentamicino. Korinis aplinka buvo palaikoma 50 ml /L CO2 ir 37 ° C.
Gydymas ląstelės
DIM buvo įsigytas iš Enzo gyvenimas Mokslo bendrovės (Bulter Pike Plymouth Meeting, Pensilvanija, JAV), resveratrolis ir dimetil (DMSO ) buvo nupirkta iš Sigma Chemical Company (Bellefonte, PA, USA). DIM ir resveratrolio buvo ištirpinta DMSO. Po to, kai inkubavimą 24 h, viena grupė ląstelių buvo gydomi DIM esant skirtingoms koncentracijoms (0, 10, 20, 30, 40, 50 mkmol /l) 24 valandas. Antroji grupė buvo gydomi DIM (30 mkmol /L), taip pat resveratrolio (0, 1, 5, 10, 20 mkmol /l) 6 h. Kita grupė buvo gydomi DIM (30 mkmol /l) skirtingais laiko intervalais (0, 1, 6, 24, 48, 72 h), atitinkamai. Kontrolės ląstelės gavo 1 ml /l DMSO tik.
Atvirkštinės transkripcijos-polimerazės grandininę reakciją (AT-PGR)
Po derliaus nuėmimo langelį, bendra RNR išskirta naudojant Qiagen RNeasy Mini rinkinį (QIAGEN, Vokietija) pagal gamintojo instrukcijas. kDNR buvo susintetintas su 1 mikrogramų visos RNR naudojant atvirkštinę transkriptazės, ReverTraAceTM (Toyobo Co, Osaka, Japonija) laikantis šių sąlygų: 30 ° C temperatūroje 10 min, 42 ° C 20 min, 99 ° C temperatūroje 5 min, 4 ° C 5 min. Polimerazės grandininė reakcija (PGR) buvo atliktas naudojant 2 įxL papildomą DNR ir 0,6 V ex Taq DNR polimerazės (Takara, Dalian, Kinija) 20 iL reakcijos sistemą ir 30 ciklo 94 ° C denatūravimo 30 S, 55 ° C, atkaitinimo . 30 s ir 72 ° C pailgėjimas 45 s
pradmenų sekas buvo taip: atvirkštinės transkripcijos-polimerazės grandininė reakcija (PGR): AHR, 5'-ACT CCA CTT PVG CCA CCA TC -3 "( į priekį) ir 5'-ATG GGA BTK GGC PPK ATA A. -3 "(atbulinės eigos), siūlomas dydis PGR produkto buvo 204 bp. CYP1A1 5'-CCA TGT CGG CCA CGG AGT, T -3 "(pirmyn) ir 5'-PPK GTG CCA GGT GCG GGT" T -3 "(atbulinės eigos), kad PGR produkto proposedsize buvo 174 bp. Gliceraldehid-3-fosfato dehidrogenazės (GAPDH), 5'-ggg AAA KTG TGG CGT GAT -3 "(pirmyn) ir 5'-AAA GGT GGA GGA GTG GGT -3" (atbulinės eigos), The ištiriama dydis PGR produkto buvo 309 BP. PGR produktų gaminiai gali vėliau buvo atliekama elektroforezė ant 1,5% agarozės gelyje, ir vizualizuojami pagal UV transiliuminatorių.
Western Blot analizę
Ląstelės buvo lizuojamos buferiniame tirpale, kurių sudėtyje yra 20 mmol /l HEPES, 1 mmol /l EGTA, 50 mmol /l β-glicerofosfatas, 2 mmol /l natrio orthovanadate, 100 ml /L glicerolis, 10 ml /L Triton X-100, 1 mmol /l DTT, ir 1 × proteazės inhibitorius kokteilis (Roche, Mannheim, Vokietija). Lizatas buvo centrifuguojamas 13 000 g ir 4 ° C temperatūroje 10 min. Supernatantas buvo bendras ląstelių lizatas. Baltymų koncentracija buvo matuojama naudojant BCA baltymų Bandymo komplektas (Pierce Chemical Co, Rockford, IL, JAV). Trisdešimt mikrogramų baltymo buvo pakrautas už juostos, atskirtos 100 g /l SDS-PAGE ir perkeliamas ant balansuojama polivinilideno difluoridą membranos electroblotting. Membranos buvo užblokuotas su 5% ne-riebumo pieno 1% TBS-T buferyje 2 valandas kambario temperatūroje. AHR, CYP1A1 ir GAPDH buvo aptikta 2 val naudojant antikūnus prieš AHR (SC-5579, Santa Cruz biotechnologijos, JAV, dirba praskiedimo 1: 150), CYP1A1 (AB1258, Chemicon International, JAV, dirba skiesti 1: 500) ir GAPDH (2118, Mobilusis Signalizacijos technologijos, JAV, dirba praskiedimo 1: 1000). Po vidurinės antikūnų inkubacijos (7074, Mobilaus ryšio Signalizacijos technologijos, JAV, darbinį tirpalą 1: 2000) 2 h, baltymų juostos buvo aptiktas naudojant ECL sistemą (Pierce Biotechnologijos, Inc, JAV)
Mobilusis gyvybingumo tyrimą
. poveikis DIM dėl skrandžio vėžio ląstelių proliferaciją buvo nustatomas pagal MTT. Trumpai tariant, iš viso 1 × 10 4 tripsino disperguoti ląstelės 0,1 ml mitybinės terpės buvo pasėjamos į kiekvieną 96 šulinėlių plokštelės šulinėlį ir kultivuojamos 24 valandas. Be to, ląstelės buvo gydomi DIM, kaip aprašyta aukščiau. Tada, 20 pL MTT (5 g /l) buvo įtraukta į kiekvieną šulinėlį ir inkubacinis buvo tęsiamas 4 valandas 37 ° C temperatūroje. Pagaliau, kultūrinė terpė buvo pašalintas ir 150 pL DMSO buvo įtraukta į kiekvieną šulinėlį. Absorbcija buvo nustatyta su ELISA skaitytuvu esant 490 nm bangos ilgiui. Ląstelių gyvybingumas procentas buvo apskaičiuojamas taip:. Gyvybingų sėklų procentas (%) = (absorbcijos vertės eksperimentinėje grupėje) /(absorbcijos vertės kontrolinės grupės) × 100%
srauto citometrijos analizė
SGC7901 ląstelių buvo padengtas į 60-mm diametras kultūra plokštės ir apdorojimo su DIM esant skirtingiems koncentracijos (10, 20, 30, 40, 50 mkmol /l) 48 h. Valdymo pateikta tik 1 ml /L DMSO. Iki derliaus nuėmimo, ląstelės buvo plaunama du kartus
0,01 mol /l PBS, tripsinizuojamos, ir granuliuotus. Po to ląstelės buvo nustatyti su 70% ledinio etanolio, esant 4 ° C temperatūroje per naktį. Pagaliau, ląstelės buvo plaunama du kartus PBS ir dažyti su PI. DNR turinys buvo analizuojamas su srauto citometro (Beckmano-Coulter, Brea, JAV). Ląstelių ciklas SGC7901 ląstelių buvo analizuojami naudojant MULTYCYCLE ir winMDI2.9 programinę įrangą ( "Phoenix, AZ, JAV). Mobilusis apoptozė analizę, po inkubacijos 48 h, ląstelės buvo tamsintas su aneksinu-FITC ir PI. Ląstelės su aneksino V (-) ir PI (-) buvo laikoma gyvybingų ląstelių. Ląstelės su aneksino V (+) ir PI (-) buvo laikomi anksti apoptozinių ląstelių. Ląstelės su tiek aneksino V (+) ir PI (+) buvo laikoma vėlai apoptozinių ląsteles.
Statistinė analizė
visi kiekybiniai duomenys buvo pateikti kaip vidurkis ± SD ir analizuojami naudojant vieną pusę dispersinės analizės (ANOVA). Visi statistinės analizės buvo atlikta naudojant SPSS statistiniu programinės įrangos paketą (versija 11.0 SPSS Inc Čikaga, JAV). P < 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas.
Rezultatai
aktyvavimo AHR keliu iki DIM
Norėdami patikrinti, ar AHR signalo kelias gali būti aktyvuojamas DIM, mes traktuojami skrandžio vėžio ląstelių linija SGC7901 su DIM. AT-PGR ir Vakarų dėmė analizė parodė, kad po DIM gydymo AHR baltymų visų ląstelių fragmentai palaipsniui mažėjo (1 paveikslas). CYP1A1 klasikinis tikslas genas AHR, buvo naudojamas kaip AHR signalas rūšyse aktyvavimo rodiklis. Bazinis lygis CYP1A1 išraiškos nebuvo pastebėta SGC7901 ląsteles, bet ir CYP1A1 iRNR ir baltymų ekspresija buvo padidintas nuo dozės ir laiko priklausomu būdu po DIM gydymo (1 paveikslas). Siekiant dar labiau patvirtina DIM sukeltos CYP1A1 išraiška buvo AHR priklausoma, mes traktuojami SGC7901 ląsteles su konkrečiu AHR antagonistas, resveratrolis [16, 17]. ląstelės buvo gydomi DIM (30 mkmol /L) tik arba DIM (30 mkmol /l), taip pat skirtingų koncentracijų resveratrolio (0, 1, 5, 10, 20 mkmol /L), atitinkamai 6 h (2 pav.) Nuoseklūs su ankstesniais rezultatais, gydymas SGC7901 ląstelių su 30 mikromoliai /L DIM sukėlė nepaprastą padidėjimą CYP1A1 išraiška. Tačiau tai DIM sukeltos CYP1A1 ekspresija buvo iš dalies pakeista pagal resveratrolio dozės priklausomu būdu (2A ir B pav.) 1 pav AHR ir CYP1A1 ekspresija SGC7901 ląstelių po DIM gydymą. A ir B: RT-PGR; C ir D: imunoblotingu. Gydymas SGC7901 ląstelių su AHR moduliatoriaus DIM lėmė metu - (A ir C) ir koncentracija -dependent (B ir D) indukcija CYP1A1 išraiška. Skelbiami rezultatai atstovas iš trijų nepriklausomų eksperimentų.
2 pav slopinimas DIM indukuotų CYP1A1 mRNR ir baltymų ekspresiją resveratrolio. A: CYP1A1 mRNR buvo aptikta RT-PGR; B: CYP1A1 baltymas buvo aptikta Vakarų blotingo metodu. RSV: resveratrolis. Skelbiami rezultatai atstovas iš trijų nepriklausomų eksperimentų. Gydymas SGC7901 ląstelių su 30 mikromoliai /L DIM sukėlė nepaprastą padidėjimą CYP1A1 išraiška. Tai DIM sukeltos CYP1A1 ekspresija buvo iš dalies pakeista pagal resveratrolio į koncentracijos priklausomu būdu.
Poveikis DIM ant cellur platinimu
Daugėja SGC7901 ląstelių nulėmė MTT po 6-72 h gydymo Didinamos koncentracijos DIM (0-50 mkmol /l). Rezultatai parodė, kad "DIM slopinamas SGC7901 ląstelių proliferaciją A koncentracijos ir ir laikas priklausomu būdu, Resveratrol (10 mkmol /l), gali iš dalies pakeisti šią slopinimo poveikį DIM (30 mkmol /l) apie cellur platinimu tuo metu kiekis: 6 h ir 12 val (3 paveikslas), tačiau neradome atstatymas poveikį kitu laiku kiekis (24 h, 48 h ir 72 h, duomenys nebuvo parodyta). 3 pav gyvybingumas SGC7901 ląstelių po DIM gydymo buvo įvertintas MTT. Gyvybingumas SGC7901 ląstelių buvo gerokai sumažėjo į koncentracijos ir ir laiko priklausomu būdu po DIM gydymą. Resveratrolis (10 mkmol /l), gali iš dalies pakeisti, kad slopinimo poveikį DIM (30 mkmol /l) apie cellur platinimu.
Poveikis DIM nuo ląstelės ciklo
tėkmės citometrijos analizė parodė, kad "DIM gydymo sukeltas pokyčius ląstelių ciklo paskirstymo , su padidėjusia kaupimo SGC7901 ląstelių G1 fazės ir kompensacijos už šį pasikeitimą, iš ląstelių S etapas (4 paveiksle ir 1 lentelė) sumažėjimas. 4 pav Dim poveikis ląstelių ciklo SGC7901 ląsteles. SGC7901 ląstelės buvo gydomi įvairių koncentracijų DIM ir veikiamas tėkmės citometrijos analizę. Kiekvieno etapo procentinė dalis yra nurodyta kiekvieno skydelio. Skelbiami rezultatai atstovas iš trijų nepriklausomų eksperimentų.
1 lentelė DIM poveikis ląstelių ciklo SGC7901 ląstelių
Dim koncentracija (mkmol /l)
procentas ląstelių ciklo (%)

G1
G2
S
0
55,90 ± 1,48
10,5 ± 0,95
33,63 ± 0,55
10
57.20 ± 0,36 *
9,10 0,3
± 33,70 ± 0,53
20
61,03 ± 1,53 *
8,17 ± 0,68
30,77 ± 0,97 *
30
61,97 ± 0,32 *
9,83 ± 0,32
28,23 ± 0,60 *
40
62,77 ± 1,46 *
9,13 ± 0,91
28,10 ± 0,56 *
50
73,03 ± 4,05 *
9,17 ± 1,51
18,07 ± 0,57 *
* p < 0,05, lyginant su kontrole.
Poveikis DIM mobiliųjų apoptozę
48 h po DIM gydymo ląstelių apoptozės pokyčiai buvo stebimi iki tekmės citometrijos analizė. Palyginti su kontroline grupe, ląstelių apoptozę buvo sukeltas, kurių koncentracija nuo 20 iki 50 mkmol /l ir apoptozės greičiui didėjo priklausomai nuo dozės priklausomu būdu. Šie rezultatai parodė, kad "DIM gali sukelti ląstelių apoptozę SGC7901 ląstelių (5 pav ir 2 lentelė). 5 pav Dim poveikis apoptozės SGC7901 ląsteles. SGC7901 ląstelės buvo gydomi įvairių koncentracijų DIM ir veikiamas tėkmės citometrijos analizę. Skelbiami rezultatai atstovas iš trijų nepriklausomų eksperimentų.
2 lentelė DIM poveikis apoptozės SGC7901 ląstelių
Dim koncentracija (mkmol /l)
Apoptozę tarifas (%)

0
4,18 ± 0,23
10
4,81 ± 0,42
20
6,07 ± 0,33 *
30
7,23 ± 0,78 #
40
7,39 ± 1,08 #
50
9,14 ± 0,32 #
* p < 0,05, #p < 0.01vs rado kontrolę.
Diskusijos
Mūsų ankstesniame darbe, kad AHR išraiška buvo gerokai iki reguliuojama skrandžio vėžio ir gali būti įtraukti į anksti skrandžio Kancerogeninis ir reguliavimas AHR keliu gali turėti potencialas vaidmuo skrandžio vėžio gydymui. Mes iškėlė hipotezę, kad AHR ligandų gali būti naudojama skrandžio vėžio gydymo. Tada mūsų išsamesnės tyrimai parodė, kad TCDD, stiprus AHR agonistas, gali supresse skrandžio vėžio ląstelių AGS augimą nuo dozės ir laiko depengent būdu per indukcijos augimo sulaikymo metu G1-S [9] fazėje. Bet pati TCDD yra kancerogeninės, ji skatina platų spektrą biologinių reakcijų, įskaitant indukcijos CYP1A1 trikdžių normalios hormonų signaliniu keliu, reprodukcijai ir vystymuisi defektų, imunotoksiškumui, kepenų pažeidimas, išsekimo sindromas ir vėžys [18], todėl netoksiški arba mažai toksiškas selektyvūs AHR moduliatoriai gal tarnavo kaip galimų agentų skrandžio vėžio
iš krūties vėžio tyrimus, Seifas rasti dviejų klasių selektyviuosius AHR moduliatoriai. Pakaitinis pakeistą (1,3,6,8- ir 2 4,6,8-) alkilo polichlorintų dibenzofuranų (PCDF) ir pakeistas diindolylmethanes (pritemsta), palyginti su TCDD, šie junginiai yra gana netoksiškas ir slopina ER-teigiamas ir ER-neigiamas krūties naviko augimas, bet neskatinti AhR- tarpininkaujant toksinis atsakas, sukelti TCDD [19].
DIM pristato naują klasę gana netoksiškų antitumorigenic AHR moduliatoriai kurios yra phytochemical kilmės. Palyginti su TCDD, artimosios yra silpnas agonistas AHR indukcijai CYP1A1 geno išraiškos [20] ir veiklos [21], ir tai rodo gebėjimą konkuruoti jungiantis ir TCDD į AHR [22].
Norėdami išbandyti avinas AHR signalo kelias gali būti Activited pagal DIM skrandžio vėžio ląsteles, mes traktuojami skrandžio vėžio ląstelių linija SGC7901 su DIM. Rezultatai parodė, kad AHR baltymų visų ląstelių fragmentai palaipsniui mažėjo (4c pav ir D), Panašūs reiškiniai buvo pranešta mūsų laboratorijose ir keleto kitų grupių [9, 23], žemyn-reguliavimas AHR po ligando jungimosi laikomas kaip imprtant žingsnis AHR signalo keliu [23]. CYP1A1 klasikinis tikslas genas AHR, buvo pasirinktas kaip AHR signalas rūšyse aktyvavimo rodiklis. Pradiniai lygiai CYP1A1 išraiškos nebuvo pastebėtas SGC7901 ląstelių šiame tyrime. Tačiau CYP1A1 ekspresija buvo žymiai didėjo koncentracijos ir ir laiko priklausomu būdu po DIM gydymo, nurodant AHR aktyvacijos. Norėdami patvirtinti, kad AHR signalo kelio iki DIM aktyvavimo, mes traktuojami SGC7901 ląsteles su konkrečia AHR antagonistai, resveratrolis. Mūsų rezultatai parodė, kad "DIM indukuotų CYP1A1 ekspresija buvo iš dalies pakeista pagal resveratrolio į koncentracijos priklausomu būdu. Nepilnas atstatymas CYP1A1 išraiškos resveratrolis gali būti dėl to, kad AHR nėra vienintelis reguliatorius CYP1A1 transkripcijos [24]. Kartu paėmus, šie rezultatai rodo, kad "DIM gali aktyvuoti AHR signalo kelią skrandžio vėžio ląsteles.
MTT parodė, kad SGC7901 ląstelių gyvybingumas buvo gerokai sumažėjo į koncentracijos ir ir laiko priklausomu būdu po DIM gydymą. Norėdami išsamiau paaiškinti avinas tai poveikis buvo AhR- priklauso, mes traktuojami SGC7901 ląsteles su DIM ir resveratrolio, mes nustatėme, kad slopinimo poveikis DIM apie SGC7901 ląstelių augimas buvo iš dalies, bet ne visiškai saugomos reservatrol, tai rodo, kad "DIM slopina skrandžio vėžio ląstelių augimą iš dalies per AHR keliu. Šis rezultatas yra pagal ankstesnių tyrimų: Hong, C nustatė, kad DIM slopinamas augimą abiejų Ak-atvirų ir AH-neinteraktyviose krūties vėžio ląstelių. kai anti-kancerogeninių veiklos DIM yra AHR -independent [25]. Įdomu tai, kad atstatymas poveikis ląstelių proliferacijos buvo pastebėtas po to, kai ląstelės buvo gydomi DIM plius reservatrol už 6 H arba 12 h, bet ne ilgiau laiko momentais (24 h greičiu, 48 h ir 72 h), tai gal susijęs su laiko-veiksmingumo iš reservatrol.
Būta kai kurie tyrimai apie priešvėžinių machanisms Dim. Choi HJ parodė, kad "DIM sukeltas G1 ir G2 /M fazės ląstelių ciklo suimti HT-29 žmogaus storosios žarnos vėžinių ląstelių [26]. Vivar O. ir Honkongas, C rado DIM sukeltas G (1) arešto žmogaus prostatos vėžinių ląstelių [27] ir žmogaus krūties vėžio ląstelių [28]. Kita vertus, kai kurie straipsniai pranešė, kad "DIM gali skatinti apoptozę vėžio ląstelių survivin, UPA ir uPAR ar NF-kappaB sinaling [29-33].
Toliau tirti konkrečius mechanizmus skrandžio vėžio ląstelių augimo slopinimo DIM mes traktuojami SGC7901 ląsteles su DIM, tada išbandyti ląstelių ciklo ir ląstelių apoptozės pakeitimus tėkmės citometrijos analizė. Rezultatai parodė, kad su DIM koncentracijos padidėjimas, ląstelių G1 fazėje palaipsniui didinama, ląstelės S fazėje sumažėjo, tačiau ląstelės G2 fazės nepakito, rodo, kad "DIM gali suimti ląstelių ciklą G1 fazėje. Skirtingai nuo TCDD, DIM taip pat sukeltą ląstelių apoptozę, o tai rodo, kad "DIM gali slopinti skrandžio vėžio ląstelių proliferaciją per skatinančius apoptozę ir suimti ląstelių ciklą, tačiau, mechanizmai, atsakingi už DIM poveikį skrandžio vėžio ląstelės ciklo ir apoptozės vis dar reikia būti ir toliau studijavo.
išvadas
Be surmary, ši ataskaita parodė, kad netoksiškas selektyvus AHR moduliatorius DIM slopino žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linijos SGC7901 proliferaciją in vitro stimuliuoja ląstelių apoptozę ir suimti ląstelių ciklą G1 fazėje. Mūsų išvados rodo, kad AHR gali būti perspektyvus tikslas skrandžio vėžio gydymo
Pastabos
Xiao-fei Yin, Jie Chen prisidėjo vienodai prie šio darbo
Santrumpos
AHR:..
arilo angliavandenilių receptorių
GAPDH: Rīga, gliceraldehid 3-fosfato dehidrogenazės
AT-PGR: Rīga, atvirkštinės transkripcijos -Polymerase grandininė reakcija
MTT: Rīga, metilo tiazolilas tetrazolio
DMSO: Rīga, dimetilsulfoksidas
FBS:
Vaisiaus jaučio serumo
TCDD: Rīga, 2,3,7,8-tetrachlordibenzo-para-dioksinų
TBST: Rīga, tri-buferinis tirpalas, kuriame yra 0,05% Tween 20.
deklaracijos
Padėka
Šis tyrimas parėmė dotacijas iš nacionalinio Gamtos mokslo fondo Kinijos (Nr 30871145 ir Nr 81072048), Junior mokytojų įdirbimo projektas Sun Yat-sen Universiteto (Nr 09ykpy22), dotacijų didelės apimties projektų ir naujų tarpdisciplininių studijų Sun Yat-sen Universiteto (No.10ykjc23) remiamų pagrindinių mokslinių tyrimų fondų Centrinės universitetuose.
autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų. 13046_2012_571_MOESM1_ESM.tiff Autorių originalus failas 1 pav 13046_2012_571_MOESM2_ESM.tiff Autorių originalaus failo 2 pav 13046_2012_571_MOESM3_ESM.tiff Autorių originalios 3 pav 13046_2012_571_MOESM4_ESM.tiff Autorių originalaus failo 4 pav 13046_2012_571_MOESM5_ESM.tiff Autorių originalaus failo 5 paveiksle konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai deklaruoja, kad jie neturi jokių konkuruojančių interesų
autorių indėlį
Yin XF Chen J prisidėjo vienodai prie šio darbo.; Yin XF Chen J atlikti mokslinius tyrimus ir parašė knygą; Mao W organizavo skaičiai ir išanalizavo duomenis; Wang YH padeda su ląstelių kultūroje. Chen MH skirta mokslinių tyrimų ir prižiūri rašymo ir organizavimo procesą. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Naujų oncolytic virusinė terapija ir vaizdo technika skrandžio vėžio naudojant genų inžinerijos raupų virusas, vežančių žmogaus natrio jodido symporter
• FOLFIRI kaip antros eilės gydymo pacientams, sergantiems docetakselio išvalytos skrandžio vėžiu: istorinės cohort