Un selettivo del recettore arilico modulatore 3,3-Diindolylmethane inibisce cellule cancro gastrico growth

Un arile selettivo del recettore degli idrocarburi modulatore 3,3'-Diindolylmethane inibisce la crescita delle cellule tumorali gastriche
Abstract
sfondo
recettore idrocarburi Aryl (AhR) è un fattore di trascrizione ligando-attivato associata a carcinogenesi gastrica. 3,3'-Diindolylmethane (DIM) è un modulatore selettivo AhR relativamente non tossico. Questo studio è stato quello di rilevare gli effetti del DIM sulla crescita delle cellule del cancro gastrico.
Metodi
gastrico SGC7901 cellule del cancro è stato trattato con DIM a diverse concentrazioni (0,10,20,30,40,50 mmol /L) con o senza un antagonista AhR, resveratrolo. L'espressione di AhR e citocromo P4501A1 (CYP1A1), un gene bersaglio classico della AhR percorso, sono stati rilevati mediante RT-PCR e Western Blot; vitalità cellulare è stata misurata mediante saggio MTT, e le variazioni di ciclo cellulare e apoptosi sono state analizzate mediante citometria di flusso.
Risultati
RT-PCR e western blot hanno mostrato che con l'aumento della concentrazione di DIM, proteine ​​AhR gradualmente è diminuita e l'espressione CYP1A1 aumentato, suggerendo che DIM attivato il percorso AhR e ha causato la traslocazione di AhR dal citoplasma al nucleo. saggio MTT ha indicato che la vitalità delle cellule SGC7901 era significativamente diminuito in modo dalla concentrazione e tempo-dipendente dopo il trattamento DIM e questo potrebbe essere parzialmente invertita dal resveratrolo. Citometria a flusso analisi ha mostrato che DIM arrestato ciclo cellulare in fase G1 e apoptosi cellulare indotta.
Conclusione
selettivo del recettore arilico modulatore 3,3'-Diindolylmethane inibisce la proliferazione delle cellule SGC7901 inducendo apoptosi e ritardare la progressione del ciclo cellulare. AhR può essere un potenziale target terapeutico per il trattamento del cancro gastrico.
Parole
Aryl recettore idrocarburi 3,3'-Diindolylmethane cancro gastrico citocromo P4501A1 Sfondo
cancro gastrico è una delle neoplasie più comuni. Nei paesi economicamente sviluppando, il cancro gastrico è la seconda tumori più frequntly diagnosticati e la terza causa di morte per cancro negli uomini [1], il tasso complessivo di sopravvivenza a 5 anni è bassa (15% al ​​35%) a causa della elevata recidiva tariffe, metastasi linfonodali e la risposta di breve durata alla chemioterapia [2]. Nel presente, sempre più studi si concentrano sulla diagnosi molecolare e la terapia del cancro gastrico [3].
Recettore idrocarburi Aryl (AhR) è un fattore di trascrizione ligando-attivato. Dopo leganti come gli idrocarburi policiclici aromatici (IPA) e idrocarburi alogenati (ah) si legano con AhR nel citoplasma, il complesso ligando-AhR viene traslocato al nucleo e heterodimerizes con il traslocatore nucleare AhR (ARNT). Il complesso si lega alla sequenza enhancer cognate e successivamente si attiva l'espressione genica a valle [4].
Studi tradizionali di funzione AhR concentrato sul suo ruolo nel regolare l'espressione di enzimi del metabolismo xenobiotici (XMEs) e mediando il metabolismo xenobiotici. Recenti studi hanno dimostrato che AhR può comportare in molti importanti processi fisiologici e patologici compresa sviluppo individuale, differenziazione cellulare, e carcinogenesi [5]. espressione AhR è upregulated nel polmone [6], ghiandola mammaria [7], del pancreas [8] e tumori gastrici [9]. Ulteriori studi hanno trovato che AhR svolto un ruolo improtant nella regolazione della proliferazione cellulare, apoptosi, ciclo cellulare, la migrazione e l'invasione [10]. Come una proteina correlata al cancro, Ahr forse un bersaglio promettente per la terapia del cancro. Il nostro lavoro precedente ha scoperto che un agonista AhR, 2,3,7,8 -tetrachlorodibenzo -para-diossina (TCDD), ha inibito la crescita delle cellule del cancro gastrico [9]. Ma TCDD è di per sé cancerogene modulatori AhR [11], così da trovare non tossico o basso tossici possono essere una nuova direzione per la terapia molecolare mirata nel carcinoma gastrico.
Selettivo del recettore AhR modulatore 3,3'-Diindolylmethane (DIM ) è una classe di derivati ​​indolici relativamente non tossici. DIM è un prodotto consendation acido catalyed di indolo-3-carbinolo, un consititudent di verdure crocifere, e si forma nello stomaco [12]. DIM è un agente anti-cancro, sopprime la proliferazione delle cellule tumorali in mammaria [13], del colon [14] e del pancreas [15] tumori.
C'era stato poco rapporti circa gli effetti del DIM sulla gastrica crescita cellule tumorali, la Questo studio è stato progettato per osservare gli effetti di DIM sul cancro gastrico la crescita delle cellule e esplorare i possibili meccanismi.
Metodi
linea cellulare
linea di cellule di cancro gastrico umano SGC7901 è stato ottenuto presso l'Istituto Tumori di Accademia cinese di medicina Scienza. SGC7901 Le cellule sono state mantenute nel terreno RPMI-1640 (GIBCO, Carlsbad, California, Stati Uniti d'America) supplementato con siero 10% fetale bovino (Hyclone, Stati Uniti d'America), 1 × 10 5 U /L di penicillina, e 0,1 g /L di gentamicina. L'ambiente cellulare è stata mantenuta a 50 mL /L di CO2 e 37 ° C.
Il trattamento delle cellule
DIM è stato acquistato dalla società Enzo Life Science (Bulter Pike Plymouth Meeting, PA, USA), il resveratrolo e dimetilsolfossido (DMSO ) sono stati acquistati da Sigma Chemical Company (Bellefonte, PA, USA). DIM e resveratrolo sono stati sciolti in DMSO. Dopo incubazione per 24 ore, un gruppo di cellule è stato trattato con DIM a differenti concentrazioni (0, 10, 20, 30, 40, 50 mmol /L) per 24 ore. Un secondo gruppo è stato trattato con DIM (30 mmol /L) più resveratrolo (0, 1, 5, 10, 20 mmol /L) per 6 ore. Un altro gruppo è stato trattato con DIM (30 mmol /L) per differenti intervalli di tempo (0, 1, 6, 24, 48, 72 h), rispettivamente. cellule di controllo hanno ricevuto 1 mL /L DMSO soltanto.
inversa reazione a catena della trascrizione-polimerasi (RT-PCR)
Dopo la raccolta della cella, l'RNA totale è stato estratto utilizzando il kit Qiagen RNeasy Mini (Qiagen, Germania) secondo il le istruzioni del produttore. cDNA è stato sintetizzato con 1 mg di RNA totale mediante trascrittasi inversa, ReverTraAceTM (Toyobo Co., Osaka, Giappone) nelle seguenti condizioni: 30 ° C per 10 min, 42 ° C per 20 min, 99 ° C per 5 min, e 4 ° C per 5 min. reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata eseguita utilizzando 2 ml di DNA complementare e polimerasi 0,6 U Ex Taq DNA (Takara, Dalian, Cina) nel sistema di reazione di 20 ml e 30 ciclo con 94 ° C denaturazione per 30 s, 55 ° C di ricottura . per 30 s e 72 ° C di allungamento per 45 s
Le sequenze di primer sono stati i seguenti: inversa reazione a catena della polimerasi di trascrizione-(RT-PCR): AhR, 5'-ACT CCA CTT CAG CCA CCA TC -3 '( in avanti) e 5'-ATG GGA CTC GGC ACA ATA AA -3 '(indietro), la dimensione proposta di prodotto di PCR era 204 bp. CYP1A1, 5'-CCA TGT CGG CCA CGG AGT T -3 '(in avanti) e 5'-ACA GTG CCA GGT GCG GGT T -3' (indietro), il proposedsize di prodotto di PCR era 174 bp. Gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH), 5'-GGG AAA CTG TGG CGT GAT -3 '(in avanti) e 5'-AAA GGT GGA GGA GTG GGT -3' (indietro), la dimensione prospettata di prodotto di PCR era 309 bp. I prodotti di PCR sono stati successivamente sottoposti ad elettroforesi su un gel di agarosio 1,5% e visualizzati sotto un transilluminatore UV.
Analisi Western blot
cellule sono state lisate in tampone contenente 20 mmol /L HEPES, 1 mmol /L EGTA, 50 mmol /L β-glicerofosfato, 2 mmol /L di sodio orthovanadate, 100 mL /L di glicerolo, 10 mL /L Triton X-100, 1 mmol /L DTT, e 1 × inibitore della proteasi Cocktail (Roche, Mannheim, Germania). Il lisato è stato centrifugato a 13 000 g di 4 ° C per 10 min. Il supernatante è stato lisato cellulare totale. La concentrazione di proteine ​​è stata misurata usando il BCA kit di analisi delle proteine ​​(Pierce Chemical Co., Rockford, IL, USA). Trenta microgrammi di proteine ​​è stato caricato per corsia, separate da 100 g /L SDS-PAGE e trasferite su membrana di difluoruro di polivinilidene equilibrato per elettroblotting. Le membrane sono state bloccate con latte scremato 5% in tampone 1% TBS-T per 2 ore a temperatura ambiente. AhR, CYP1A1, e GAPDH sono stati rilevati per 2 ore con anticorpi contro AhR (SC-5579, Santa Cruz Biotechnology, Stati Uniti d'America, diluizione di lavoro 1: 150), CYP1A1 (AB1258, Chemicon internazionale, Stati Uniti d'America, la diluizione 1 di lavoro: 500), e GAPDH (2118, Cell Signaling Tecnologia, Stati Uniti d'America, diluizione di lavoro 1: 1000). Dopo l'incubazione anticorpo secondario (7074, Cell Signaling Tecnologia, Stati Uniti d'America, lavorando diluizione 1: 2000) per 2 ore, bande proteiche sono stati rilevati utilizzando ECL sistema (Pierce Biotechnology, Inc., USA): La vitalità cellulare saggio
Il. effetto DIM sulla proliferazione delle cellule di cancro gastrico è stato determinato mediante saggio MTT. In breve, un totale di 1 × 10 4 celle tripsina-disperso in 0,1 ml di terreno di coltura sono state seminate in ciascun pozzetto di una piastra a 96 pozzetti e coltivate per 24 ore. Successivamente, le cellule sono state trattate con DIM come descritto sopra. Poi, 20 ml di MTT (5 g /L) è stato aggiunto a ciascun pozzetto e l'incubazione è stata continuata per 4 ore a 37 ° C. Infine, il mezzo di coltura è stato rimosso e 150 ml di DMSO è stato aggiunto a ciascun pozzetto. L'assorbanza è stata determinata con un lettore ELISA a 490 nm. La percentuale di vitalità cellulare è stato calcolato come:. Tasso di vitalità (%) = (valore di assorbimento del gruppo dell'esperimento) /(valore di assorbimento del gruppo di controllo) × 100%
analisi di citometria di flusso
SGC7901 cellule sono state placcato in 60 mm piastre di coltura diametro e trattati con DIM a differenti concentrazioni (10, 20, 30, 40, 50 mmol /L) per 48 h. Il controllo conteneva solo 1 mL /L DMSO. Prima della raccolta, le cellule sono state lavate due volte con
0,01 mol /L PBS, tripsinizzati, e pellettato. Le cellule sono state poi fissate con il 70% di etanolo ghiacciato a 4 ° C durante la notte. Infine, le cellule sono state lavate due volte con PBS e tinti con PI. Il contenuto di DNA è stato analizzato con un citofluorimetro (Beckman Coulter-, Brea, Stati Uniti d'America). Il ciclo cellulare delle cellule SGC7901 sono stati analizzati utilizzando MULTYCYCLE e software winMDI2.9 (Phoenix, AZ, USA). Per l'analisi apoptosi delle cellule, dopo incubazione per 48 ore, le cellule sono state colorate con annessina V-FITC e PI. Le cellule con annessina V (-) e PI (-) sono stati ritenuti cellule vitali. Le cellule con annessina V (+) e PI (-) sono stati ritenuti cellule precoce di apoptosi. Le cellule con entrambi annessina V (+) e PI (+) sono stati ritenuti cellule fine apoptosi Analisi statistica
Tutti i dati quantitativi
. Sono stati espressi come media ± SD e analizzati utilizzando un analisi della varianza ad una via (ANOVA). Tutte le analisi statistiche sono state effettuate utilizzando il pacchetto di software statistico SPSS (versione 11.0, SPSS Inc. Chicago, USA). P < 0.05 è stato
considerato statisticamente significativo. Risultati
attivazione di AhR percorso da DIM
Per verificare se il percorso del segnale AhR potrebbe essere attivato da DIM, abbiamo trattato la SGC7901 linea di cellule cancro gastrico con DIM. RT-PCR ed analisi Western blot ha mostrato che dopo il trattamento DIM, Ahr proteine ​​nei lisati cellulari totali gradualmente diminuita (Figura 1). CYP1A1, un gene bersaglio classico della AhR, è stata utilizzata come indicatore di AhR attivazione della via di segnale. Il livello basale di espressione CYP1A1 non è stata osservata in cellule SGC7901, ma entrambi CYP1A1 mRNA e l'espressione della proteina sono stati aumentati in maniera dose dipendente dal tempo e dopo il trattamento DIM (Figura 1). Per confermare ulteriormente l'espressione CYP1A1 DIM-indotta era Ahr-dipendente, abbiamo trattato SGC7901 cellule con uno specifico antagonista AhR, resveratrolo [16, 17]. le cellule sono state trattate con DIM (30 mmol /L) solo o DIM (30 mmol /L) più differenti concentrazioni di resveratrolo (0, 1, 5, 10, 20 mmol /L), rispettivamente, per 6 h (Figura 2). In accordo con i risultati precedenti, il trattamento delle cellule con SGC7901 30 micromol /L DIM ha causato un notevole aumento dell'espressione CYP1A1. Tuttavia, questa espressione CYP1A1 DIM indotta è stato parzialmente invertito resveratrolo in modo dose-dipendente (Figura 2A e B). Figura 1 AhR ed espressione CYP1A1 in SGC7901 cellule dopo il trattamento DIM. A e B: RT-PCR; C e D: Western blotting. Trattamento di SGC7901 cellule con AhR modulatore DIM determinato un tempo - (A e C) e -dipendente concentrazione (B e D) induzione dell'espressione CYP1A1. I risultati riportati sono rappresentativi di tre esperimenti indipendenti.
Figura 2 Inibizione di DIM indotta CYP1A1 mRNA e l'espressione della proteina dal resveratrolo. A: CYP1A1 mRNA è stato rilevato mediante RT-PCR; B: proteina CYP1A1 è stato rilevato mediante Western blotting. RSV: resveratrolo. I risultati riportati sono rappresentativi di tre esperimenti indipendenti. Il trattamento delle cellule con SGC7901 30 micromol /L DIM ha causato un notevole aumento dell'espressione CYP1A1. Questa espressione CYP1A1 DIM-indotta è stato parzialmente invertito resveratrolo in modo concentrazione-dipendente.
Effetto del DIM sulla proliferazione cellur
proliferazione delle cellule SGC7901 è stata determinata mediante saggio MTT dopo 6-72 ore di trattamento con concentrazioni crescenti di DIM (0-50 mmol /L). I risultati hanno mostrato che DIM inibito SGC7901 proliferazione cellulare in modo dalla concentrazione e tempo-dipendente, il resveratrolo (10 mmol /L) potrebbe in parte invertire gli effetti di inibizione di DIM (30 mmol /L) sulla proliferazione cellur al momento del dato: 6 h e 12 h (Figura 3), ma non abbiamo trovato gli effetti di inversione in altri momenti (24 h, 48 he 72 h, i dati non sono stati mostrati). Figura 3 vitalità delle cellule SGC7901 dopo il trattamento DIM è stata valutata mediante test MTT. La vitalità delle cellule SGC7901 era significativamente diminuito in modo dalla concentrazione e tempo-dipendente dopo il trattamento DIM. Resveratrolo (10 mmol /L) potrebbe in parte invertire gli effetti di inibizione di DIM (30 mmol /L) cellur proliferazione
. Effetto di DIM sul ciclo cellulare
analisi citofluorimetrica ha rivelato che il trattamento DIM cambiamenti nella distribuzione del ciclo cellulare indotta , con maggiore accumulo di SGC7901 cellule nella fase G1 e compensazione per questo cambiamento da una diminuzione di cellule nella fase S (Figura 4 e Tabella 1). Figura 4 L'effetto della DIM sul ciclo cellulare delle cellule SGC7901. SGC7901 cellule sono state trattate con diverse concentrazioni di DIM e sottoposti ad analisi citofluorimetrica. La percentuale di ciascuna fase è indicata in ogni pannello. I risultati riportati sono rappresentativi di tre esperimenti indipendenti.
Tabella 1 L'effetto di DIM sul ciclo cellulare delle cellule SGC7901
DIM concentrazione (mmol /L)
Percentuale del ciclo cellulare (%)

G1
G2
S
0
55.90 ± 1.48
10.5 ± 0.95
33.63 ± 0.55
10
57.20 ± 0.36 *
9.10 ± 0.3
33.70 ± 0.53
20
61.03 ± 1.53 *
8.17 ± 0.68
30.77 ± 0.97 *
30
61.97 ± 0,32 *
9,83 ± 0,32
28.23 ± 0.60 *
40
62.77 ± 1,46 *
9.13 ± 0.91
28,10 ± 0,56 *
50 | 73.03 ± 4.05 *
9.17 ± 1.51
18.07 ± 0,57 *
* p < 0,05, vs il controllo
. Effetto di DIM sulle cellule apoptosi
48 ore dopo il trattamento DIM, i cambiamenti di apoptosi delle cellule sono stati osservati con l'analisi di citometria di flusso. Rispetto al gruppo di controllo, apoptosi è stata indotta a concentrazioni da 20 a 50 mmol /L, e il tasso di apoptosi aumentata in modo dose-dipendente. Questi risultati hanno dimostrato che DIM potrebbe indurre apoptosi cellulare in SGC7901 cellule (Figura 5 e Tabella 2). Figura 5 L'effetto di DIM sull'apoptosi di SGC7901 cellule. SGC7901 cellule sono state trattate con diverse concentrazioni di DIM e sottoposti ad analisi citofluorimetrica. I risultati riportati sono rappresentativi di tre esperimenti indipendenti.
Tabella 2 L'effetto di DIM in apoptosi delle cellule SGC7901
DIM concentrazione (mmol /L)
tasso di apoptosi (%)

0
4.18 ± 0.23 10
4.81 ± 0.42
20
6,07 ± 0,33 *
30
7,23 ± 0,78 #
40
7.39 ± 1.08 #
50
9,14 ± 0,32 #
* p < 0.05, #p < 0.01vs il controllo.
Discussione
Il nostro lavoro precedente ha scoperto che l'espressione di AhR era significativamente up-regolati nel cancro gastrico, e possono essere coinvolti nella fase iniziale della carcinogenesi gastrica, regolazione della via AhR può avere una ruolo potenziale nel trattamento del cancro gastrico. Abbiamo ipotizzato che ligandi AhR possono essere utilizzati per la terapia del cancro gastrico. Poi i nostri studi hanno dimostrato che futher TCDD, un potente agonista del AhR, potrebbe supresse la crescita del cancro gastrico delle cellule AGS in maniera dose e tempo-depengent tramite induzione di arresto della crescita in fase G1-S [9]. Ma TCDD in sé è cancerogeno, induce un ampio spettro di risposte biologiche, tra cui l'induzione del CYP1A1, interruzione delle normali vie di segnalazione ormonale, riproduttivo e difetti di sviluppo, immunotossicità, danni al fegato, sindrome da deperimento, e il cancro [18], in modo da non tossico o modulatori basse tossici AhR selettivi forse servivano come possibili agenti per cancro gastrico
Dagli studi di cancro al seno, di sicurezza ha trovato due classi di modulatori selettivi AhR:. Alternate-sostituiti (1,3,6,8- e 2, 4,6,8-) alchil policlorurati dibenzofurani (PCDF) e diindolylmethanes sostituiti (DIMS), rispetto a TCDD, questi composti sono relativamente non tossici e inibire la crescita tumorale mammaria ER-positivi e ER-negativo, ma non inducono AhR- risposte tossiche mediate indotte da TCDD [19]
. DIM rappresenta una nuova classe di modulatori AhR antitumorigenic relativamente non tossici, che sono di origine fitochimici. Rispetto alla TCDD, DIM è un agonista debole AhR per l'induzione dell'espressione del gene CYP1A1 [20] e le attività [21], e si vede capacità di competere per il legame di TCDD al Ahr [22].
Per provare il castrato pathway di segnale AhR potrebbe essere activited da DIM in cellule di cancro gastrico, abbiamo trattato gastrica linea SGC7901 cellule di cancro con DIM. I risultati hanno mostrato che AhR proteine ​​nei lisati cellulari totali gradualmente diminuita (Figura 4C e D), fenomeni simili sono stati segnalati dai nostri laboratori e diversi altri gruppi [9, 23], la down-regulation di AhR seguente ligando è considerato come un passo imprtant del pathway di segnale AhR [23]. CYP1A1, un gene bersaglio classico della AhR, è stato scelto come indicatore di AhR attivazione della via di segnale. livelli basali di espressione CYP1A1, non sono stati osservati in SGC7901 cellule nel presente studio. Tuttavia, l'espressione di CYP1A1 è risultata significativamente aumentata in modo dalla concentrazione e tempo-dipendente dopo il trattamento DIM, che indica l'attivazione di AhR. Per confermare l'attivazione della via di segnale AhR da DIM, abbiamo trattato SGC7901 cellule con un AhR antagonista specifico, il resveratrolo. I nostri risultati hanno dimostrato che DIM indotta espressione CYP1A1 è stato parzialmente invertito resveratrolo in maniera concentrazione-dipendente. L'inversione incompleta di espressione CYP1A1 da resveratrolo può essere dovuto al fatto che AhR non è l'unico regolatore del CYP1A1 trascrizione [24]. Presi insieme, questi risultati suggeriscono che DIM potrebbe attivare il percorso del segnale AhR in cellule di cancro gastrico.
Saggio MTT ha dimostrato che la vitalità delle cellule SGC7901 era significativamente diminuito in modo dalla concentrazione e tempo-dipendente dopo il trattamento DIM. Per chiarire ulteriormente wether questi effetti era AhR- dipendente, abbiamo trattato le cellule con SGC7901 DIM e resveratrolo, abbiamo scoperto che gli effetti di inibizione di DIM sulla crescita SGC7901 cellule è stata in parte ma non completamente riservata da reservatrol, suggerendo che DIM inibisce la crescita delle cellule del cancro gastrico in parte via AhR via. Questo risultato è in accordo con studi precedenti: Hong, C ha scoperto che DIM ha inibito la crescita di entrambe le cellule del cancro al seno Ah-reattiva e Ah-non-responsive. alcune delle attività anti-cancerogeni del DIM sono AhR -indipendente [25]. È interessante notare che l'effetto reversal sulla proliferazione cellulare è stata osservata dopo che le cellule sono state trattate con DIM più reservatrol per 6 h o 12 h, ma non in punti temporali più lunghi (24 h, 48 he 72 h), questo forse relativa al tempo efficacia di reservatrol.
ci sono stati alcuni studi sulle machanisms anti-cancro di DIM. Choi HJ ha mostrato che DIM indotto G1 e G2 /M arresto del ciclo cellulare fase HT-29 cellule tumorali di colon umano [26]. Vivar OI e Hong C hanno trovato DIM ha indotto una G (1) arresto nelle cellule umane di cancro alla prostata [27] e le cellule di cancro al seno umano [28]. D'altra parte, alcuni articoli hanno riferito che DIM può promuovere l'apoptosi nelle cellule tumorali da survivina, uPA e uPAR o di NF-kB sinaling [29-33].
Per esplorare ulteriormente i meccanismi specifici di cancro gastrico inibizione della crescita delle cellule da DIM , abbiamo trattato SGC7901 cellule con DIM, poi testato le modifiche del ciclo cellulare e l'apoptosi delle cellule mediante analisi di citometria di flusso. I risultati hanno mostrato che con l'aumento della concentrazione DIM, cellule in fase G1 gradualmente aumentata, le cellule in fase S diminuito, ma le cellule in fase G2 sono rimasti invariati, indicando che DIM potrebbe arresto del ciclo cellulare in fase G1. Diverso da TCDD, DIM anche indotta l'apoptosi delle cellule, il che suggerisce che DIM potrebbe sopprimere gastrica proliferazione delle cellule tumorali attraverso inducendo l'apoptosi e arrestando ciclo cellulare, tuttavia, i meccanismi responsabili degli effetti della DIM sul ciclo cellulare cancro gastrico e l'apoptosi sono ancora necessari per essere ulteriormente studiato
. Conclusioni
in surmary, questo rapporto ha mostrato che non tossico selettivo AhR modulatore DIM ha inibito la proliferazione di gastrico linea di cellule di cancro umano SGC7901 in vitro inducendo l'apoptosi delle cellule e l'arresto del ciclo cellulare in fase G1. I nostri risultati hanno suggerito che AhR potrebbe essere un bersaglio promettente per il trattamento del cancro gastrico
Note
Xiao-Fei Yin, Jie Chen contribuito in maniera uguale a questo lavoro
Abbreviazioni
AhR:..
arile recettore idrocarburi
GAPDH:
gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi
RT-PCR:
trascrizione inversa -Polymerase Chain Reaction
MTT:
metile tiazolil tetrazolio
DMSO:
Dimetilsolfossido
FBS:
siero fetale bovino
TCDD:
2,3,7,8-tetraclorodibenzo-para-diossina
TBST:
salina contenente 0,05% di Tween 20. Tris-buffered
dichiarazioni
Ringraziamenti
Questo studio è stato sostenuto da sovvenzioni da National Science Foundation naturale della Cina (n 30871145 e n ​​81072048), il Progetto coltivazione Junior insegnante di Sun Yat-sen University (n 09ykpy22), borse di studio per i grandi progetti e studi interdisciplinari emergenti di Sun Yat-sen University (No.10ykjc23) sostenuti dai Fondi per la ricerca fondamentale le Università centrale.
autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai degli autori fascicoli presentati originali per immagini. 'file originale per la figura 1 13046_2012_571_MOESM2_ESM.tiff Autori 13046_2012_571_MOESM1_ESM.tiff autori file originale di' file originale per la figura 3 13046_2012_571_MOESM4_ESM.tiff Autori figura 2 13046_2012_571_MOESM3_ESM.tiff Autori file originale per la figura 4 file originale 13046_2012_571_MOESM5_ESM.tiff degli autori per la figura 5 Conflitto di interessi
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco contributi
autori
Yin XF e Chen J contribuito ugualmente a questo lavoro.; Yin XF e Chen J svolto attività di ricerca e ha scritto il giornale; Mao W organizzato figure e analizzato i dati; Wang YH assistito con colture cellulari. Chen MH progettato ricerca e supervisionato il processo di scrittura e l'organizzazione. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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